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JP7790876B2 - Emulsifying composition - Google Patents
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JP7790876B2 - Emulsifying composition - Google Patents

Emulsifying composition

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JP7790876B2 JP2021088358A JP2021088358A JP7790876B2 JP 7790876 B2 JP7790876 B2 JP 7790876B2 JP 2021088358 A JP2021088358 A JP 2021088358A JP 2021088358 A JP2021088358 A JP 2021088358A JP 7790876 B2 JP7790876 B2 JP 7790876B2
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Description

NPMD NPMD NITE P-02114NITE P-02114 NPMD NPMD NITE P-02115NITE P-02115

本発明は、乳化用組成物に関する。 The present invention relates to an emulsification composition.

界面活性剤は、医薬、化粧品、食品など、多くの産業分野において利用されている。界面活性剤は、油脂の加水分解で生産される脂肪酸を原料にして化学反応で工業生産されるものが多い。一方で、生物が生産する界面活性剤も存在する。このような界面活性剤の中でも、微生物が菌体外に生産するものは、バイオサーファクタントと呼ばれている。一般的に、バイオサーファクタントは、皮膚への低刺激性、易分解性、低い臨界ミセル濃度による高い界面活性能を有することが知られている。 Surfactants are used in many industrial fields, including pharmaceuticals, cosmetics, and food. Many surfactants are produced industrially through chemical reactions using fatty acids produced by the hydrolysis of fats and oils as raw materials. However, there are also surfactants produced by living organisms. Among these surfactants, those produced extracellularly by microorganisms are called biosurfactants. Biosurfactants are generally known to be low in irritation to the skin, easily degradable, and have high surface activity due to their low critical micelle concentration.

例えば、特許文献1では、テトラクロロエチレンからバイオサーファクタントを活性汚泥中の微生物を利用して生成する方法が報告されている。 For example, Patent Document 1 reports a method for producing a biosurfactant from tetrachloroethylene using microorganisms in activated sludge.

特開2016-174537号公報Japanese Patent Application Laid-Open No. 2016-174537

本発明は、微生物に由来する新規な乳化用組成物を提供することを目的とする。 The present invention aims to provide a novel emulsifying composition derived from microorganisms.

本発明者は鋭意研究を行った結果、下記の手段により、上記課題が解決されうることを見出し、本発明を完成させるに至った。 As a result of extensive research, the inventors discovered that the above problems could be solved by the following means, leading to the completion of the present invention.

本発明の第一の態様は、カプリアビダス(Cupriavidus)属の微生物の培養物またはその培養物からの抽出物を含む、乳化用組成物であって、
前記微生物は、カプリアビダス・エスピー(Cupriavidus sp.)NNM23株(受託番号NITE P-02114)(本明細書中、単に「NNM23株」とも称する)および/またはカプリアビダス・エスピー(Cupriavidus sp.)NNM27株(受託番号NITE P-02115)(本明細書中、単に「NNM27株」とも称する)であり、
前記培養物は、前記微生物を下記式(I)および/または式(II)で表される化合物を含む培地で培養することで得られたものである、乳化用組成物である:
A first aspect of the present invention is a composition for emulsification, comprising a culture of a microorganism of the genus Cupriavidus or an extract from the culture,
the microorganism is Cupriavidus sp. strain NNM23 (accession number NITE P-02114) (also simply referred to as "strain NNM23" herein) and/or Cupriavidus sp. strain NNM27 (accession number NITE P-02115) (also simply referred to as "strain NNM27" herein),
The culture is a composition for emulsification obtained by culturing the microorganism in a medium containing a compound represented by the following formula (I) and/or formula (II):

式中、Rは、炭素数10~20の飽和または不飽和の炭化水素基であり、Rは、炭素数9~19の飽和または不飽和の炭化水素基であり、AおよびAは、それぞれ独立して、エチレン基、プロピレン基またはブチレン基であり、mおよびnは、それぞれ独立して、0~50の整数である。 In the formula, R 1 is a saturated or unsaturated hydrocarbon group having 10 to 20 carbon atoms, R 2 is a saturated or unsaturated hydrocarbon group having 9 to 19 carbon atoms, A 1 and A 2 are each independently an ethylene group, a propylene group, or a butylene group, and m and n are each independently an integer of 0 to 50.

本発明の第二の態様は、カプリアビダス(Cupriavidus)属の微生物を、下記式(I)および/または式(II)で表される化合物を含む培地で培養することを含み、
前記微生物は、カプリアビダス・エスピー(Cupriavidus sp.)NNM23株(受託番号NITE P-02114)および/またはカプリアビダス・エスピー(Cupriavidus sp.)NNM27株(受託番号NITE P-02115)である、乳化用組成物の製造方法である:
A second aspect of the present invention comprises culturing a microorganism of the genus Cupriavidus in a medium containing a compound represented by the following formula (I) and/or formula (II):
The method for producing an emulsifying composition is characterized in that the microorganism is Cupriavidus sp. NNM23 strain (accession number NITE P-02114) and/or Cupriavidus sp. NNM27 strain (accession number NITE P-02115):

式中、Rは、炭素数10~20の飽和または不飽和の炭化水素基であり、Rは、炭素数9~19の飽和または不飽和の炭化水素基であり、AおよびAは、それぞれ独立して、エチレン基、プロピレン基またはブチレン基であり、mおよびnは、それぞれ独立して、0~50の整数である。 In the formula, R 1 is a saturated or unsaturated hydrocarbon group having 10 to 20 carbon atoms, R 2 is a saturated or unsaturated hydrocarbon group having 9 to 19 carbon atoms, A 1 and A 2 are each independently an ethylene group, a propylene group, or a butylene group, and m and n are each independently an integer of 0 to 50.

本発明によれば、微生物に由来する新規な乳化用組成物が提供される。 The present invention provides a novel emulsifying composition derived from microorganisms.

実施例および比較例における培養液の状態を示す写真である。1 shows photographs showing the state of culture solutions in Examples and Comparative Examples.

以下、本発明の一形態に係る実施の形態を説明する。本発明は、以下の実施の形態のみには限定されない。 The following describes one embodiment of the present invention. The present invention is not limited to the following embodiment.

本明細書において、範囲を示す「X~Y」は「X以上Y以下」を意味する。また、特記しない限り、操作および物性等の測定は室温(20~25℃)/相対湿度40~50%RHの条件で測定する。 In this specification, the range "X to Y" means "X or more and Y or less." Unless otherwise specified, operations and measurements of physical properties are performed at room temperature (20-25°C) and a relative humidity of 40-50% RH.

<乳化用組成物>
本発明の第一の態様は、カプリアビダス(Cupriavidus)属の微生物の培養物またはその培養物からの抽出物を含む、乳化用組成物であって、
前記微生物は、カプリアビダス・エスピー(Cupriavidus sp.)NNM23株(受託番号NITE P-02114)および/またはカプリアビダス・エスピー(Cupriavidus sp.)NNM27株(受託番号NITE P-02115)であり、
前記培養物は、前記微生物を下記式(I)および/または式(II)で表される化合物を含む培地で培養することで得られたものである、乳化用組成物である:
<Emulsifying composition>
A first aspect of the present invention is a composition for emulsification, comprising a culture of a microorganism of the genus Cupriavidus or an extract from the culture,
the microorganism is Cupriavidus sp. NNM23 strain (accession number NITE P-02114) and/or Cupriavidus sp. NNM27 strain (accession number NITE P-02115);
The culture is a composition for emulsification obtained by culturing the microorganism in a medium containing a compound represented by the following formula (I) and/or formula (II):

式中、Rは、炭素数10~20の飽和または不飽和の炭化水素基であり、Rは、炭素数9~19の飽和または不飽和の炭化水素基であり、AおよびAは、それぞれ独立して、エチレン基、プロピレン基またはブチレン基であり、mおよびnは、それぞれ独立して、0~50の整数である。 In the formula, R 1 is a saturated or unsaturated hydrocarbon group having 10 to 20 carbon atoms, R 2 is a saturated or unsaturated hydrocarbon group having 9 to 19 carbon atoms, A 1 and A 2 are each independently an ethylene group, a propylene group, or a butylene group, and m and n are each independently an integer of 0 to 50.

本発明において、カプリアビダス属の微生物は、カプリアビダス・エスピー(Cupriavidus sp.)NNM23株(受託番号NITE P-02114)および/またはカプリアビダス・エスピー(Cupriavidus sp.)NNM27株(受託番号NITE P-02115)である。 In the present invention, the microorganism of the genus Cupriavidus is Cupriavidus sp. strain NNM23 (accession number NITE P-02114) and/or Cupriavidus sp. strain NNM27 (accession number NITE P-02115).

本発明に係る微生物としては、少なくともNNM27株を用いることが好ましい。 It is preferable to use at least the NNM27 strain as the microorganism used in the present invention.

カプリアビダス・エスピー(Cupriavidus sp.)NNM23株は、平成27年9月4日付けで、独立行政法人製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター(千葉県木更津市かずさ鎌足2-5-8)に寄託されており、その受託番号は、NITE P-02114である。 The Cupriavidus sp. NNM23 strain was deposited on September 4, 2015, at the Patent Microorganisms Depositary of the National Institute of Technology and Evaluation (2-5-8 Kazusa Kamatari, Kisarazu City, Chiba Prefecture), and its accession number is NITE P-02114.

カプリアビダス・エスピー(Cupriavidus sp.)NNM27株は、平成27年9月4日付けで、独立行政法人製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター(千葉県木更津市かずさ鎌足2-5-8)に寄託されており、その受託番号は、NITE P-02115である。 Cupriavidus sp. NNM27 strain was deposited at the Patent Microorganisms Depositary Center, National Institute of Technology and Evaluation (2-5-8 Kazusa Kamatari, Kisarazu City, Chiba Prefecture) on September 4, 2015, and its accession number is NITE P-02115.

本発明において、カプリアビダス属の微生物の培養物は、カプリアビダス属の微生物を培養した培養液および前記培養液を遠心分離して得られる上清を意味する。 In the present invention, a culture of a microorganism of the genus Capriavidus refers to a culture medium in which a microorganism of the genus Capriavidus is cultured and a supernatant obtained by centrifuging the culture medium.

本発明に係る培養物は、NNM23株および/またはNNM27株を下記式(I)および/または式(II)で表される化合物を含む培地で培養することで得られたものである。 The culture of the present invention is obtained by culturing the NNM23 strain and/or the NNM27 strain in a medium containing a compound represented by the following formula (I) and/or formula (II):

式中、Rは、炭素数10~20の飽和または不飽和の炭化水素基であり、Rは、炭素数9~19の飽和または不飽和の炭化水素基であり、AおよびAは、それぞれ独立して、エチレン基、プロピレン基またはブチレン基であり、mおよびnは、それぞれ独立して、0~50の整数である。 In the formula, R 1 is a saturated or unsaturated hydrocarbon group having 10 to 20 carbon atoms, R 2 is a saturated or unsaturated hydrocarbon group having 9 to 19 carbon atoms, A 1 and A 2 are each independently an ethylene group, a propylene group, or a butylene group, and m and n are each independently an integer of 0 to 50.

上記式(I)において、飽和または不飽和の炭化水素基の炭素数は、好ましくは10~16であり、より好ましくは10~14である。 In the above formula (I), the saturated or unsaturated hydrocarbon group preferably has 10 to 16 carbon atoms, and more preferably 10 to 14 carbon atoms.

上記式(II)において、飽和または不飽和の炭化水素基の炭素数は、好ましくは13~19であり、より好ましくは15~19である。 In the above formula (II), the saturated or unsaturated hydrocarbon group preferably has 13 to 19 carbon atoms, and more preferably 15 to 19 carbon atoms.

上記式(I)および(II)において、飽和または不飽和の炭化水素基は、直鎖状であっても分岐状であってもよい。 In the above formulas (I) and (II), the saturated or unsaturated hydrocarbon group may be linear or branched.

飽和の炭化水素基の例としては、n-ノニル基、n-デシル基、n-ウンデシル基、n-ドデシル基、n-トリデシル基、n-テトラデシル基、n-ペンタデシル基、n-ヘキサデシル基、n-ヘプタデシル基、n-オクタデシル基、n-ノナデシル基、n-エイコシル基などが挙げられる。 Examples of saturated hydrocarbon groups include n-nonyl, n-decyl, n-undecyl, n-dodecyl, n-tridecyl, n-tetradecyl, n-pentadecyl, n-hexadecyl, n-heptadecyl, n-octadecyl, n-nonadecyl, and n-eicosyl groups.

不飽和の炭化水素基の例としては、ノネニル基、デセニル基、ウンデセニル基、ドデセニル基、トリデセニル基、テトラデセニル基、ペンタデセニル基、ヘキサデセニル基、ヘプタデセニル基、オクタデセニル基、ノナデセニル基、エイコセニル基などが挙げられる。 Examples of unsaturated hydrocarbon groups include nonenyl, decenyl, undecenyl, dodecenyl, tridecenyl, tetradecenyl, pentadecenyl, hexadecenyl, heptadecenyl, octadecenyl, nonadecenyl, and eicosenyl groups.

が飽和の炭化水素基である場合、R-CO-で表される基の例としては、デカノイル基、ウンデカノイル基、ドデカノイル基(ラウロイル基)、トリデカノイル基、テトラデカノイル基(ミリストイル基)、ペンタデカノイル基、ヘキサデカノイル基(パルミトイル基)、ヘプタデカノイル基、オクタデカノイル基(ステアロイル基)、ノナデカノイル基、エイコサノイル基などが挙げられる。 When R2 is a saturated hydrocarbon group, examples of the group represented by R2 -CO- include a decanoyl group, an undecanoyl group, a dodecanoyl group (lauroyl group), a tridecanoyl group, a tetradecanoyl group (myristoyl group), a pentadecanoyl group, a hexadecanoyl group (palmitoyl group), a heptadecanoyl group, an octadecanoyl group (stearoyl group), a nonadecanoyl group, and an eicosanoyl group.

が不飽和の炭化水素基である場合、R-CO-で表される基の例としては、オレオイル基、リノレオイル基、α-リノレノイル基、γ-リノレノイル基、パルミトレノイル基などが挙げられる。 When R 2 is an unsaturated hydrocarbon group, examples of the group represented by R 2 —CO— include an oleoyl group, a linoleoyl group, an α-linolenoyl group, a γ-linolenoyl group, and a palmitrenoyl group.

上記式(I)および(II)において、AおよびAは、好ましくはエチレン基である。 In the above formulas (I) and (II), A 1 and A 2 are preferably ethylene groups.

上記式(I)において、mが2以上の整数である場合、Aは、独立して、エチレン基、プロピレン基またはブチレン基であり得る。 In the above formula (I), when m is an integer of 2 or more, A 1 can independently be an ethylene group, a propylene group, or a butylene group.

上記式(II)において、nが2以上の整数である場合、Aは、独立して、エチレン基、プロピレン基またはブチレン基であり得る。 In the above formula (II), when n is an integer of 2 or more, A2 can independently be an ethylene group, a propylene group, or a butylene group.

上記式(I)において、mは、好ましくは1~50の整数であり、より好ましくは1~30の整数であり、さらに好ましくは1~8の整数であり、特に好ましくは1~3の整数である。 In the above formula (I), m is preferably an integer from 1 to 50, more preferably an integer from 1 to 30, even more preferably an integer from 1 to 8, and particularly preferably an integer from 1 to 3.

上記式(II)において、nは、好ましくは0である。 In the above formula (II), n is preferably 0.

上記式(I)で表される化合物の例としては、エチレングリコールモノデシルエーテル、ジエチレングリコールモノデシルエーテル、トリエチレングリコールモノデシルエーテル、プロピレングリコールモノデシルエーテル、ブチレングリコールモノデシルエーテル、エチレングリコールモノウンデシルエーテル、ジエチレングリコールモノウンデシルエーテル、トリエチレングリコールモノウンデシルエーテル、プロピレングリコールモノウンデシルエーテル、ブチレングリコールモノウンデシルエーテル、エチレングリコールモノドデシルエーテル、ジエチレングリコールモノドデシルエーテル、トリエチレングリコールモノドデシルエーテル、プロピレングリコールモノドデシルエーテル、ブチレングリコールモノドデシルエーテル、エチレングリコールモノトリデシルエーテル、ジエチレングリコールモノトリデシルエーテル、トリエチレングリコールモノトリデシルエーテル、プロピレングリコールモノトリデシルエーテル、ブチレングリコールモノトリデシルエーテル、エチレングリコールモノテトラデシルエーテル、ジエチレングリコールモノテトラデシルエーテル、トリエチレングリコールモノテトラデシルエーテル、プロピレングリコールモノテトラデシルエーテル、ブチレングリコールモノテトラデシルエーテル、エチレングリコールモノペンタデシルエーテル、ジエチレングリコールモノペンタデシルエーテル、トリエチレングリコールモノペンタデシルエーテル、プロピレングリコールモノペンタデシルエーテル、ブチレングリコールモノペンタデシルエーテル、エチレングリコールモノヘキサデシルエーテル、ジエチレングリコールモノヘキサデシルエーテル、トリエチレングリコールモノヘキサデシルエーテル、プロピレングリコールモノヘキサデシルエーテル、ブチレングリコールモノヘキサデシルエーテル、エチレングリコールモノヘプタデシルエーテル、ジエチレングリコールモノヘプタデシルエーテル、トリエチレングリコールモノヘプタデシルエーテル、プロピレングリコールモノヘプタデシルエーテル、ブチレングリコールモノヘプタデシルエーテル、エチレングリコールモノオクタデシルエーテル、ジエチレングリコールモノオクタデシルエーテル、トリエチレングリコールモノオクタデシルエーテル、プロピレングリコールモノオクタデシルエーテル、ブチレングリコールモノオクタデシルエーテル、エチレングリコールモノノナデシルエーテル、ジエチレングリコールモノノナデシルエーテル、トリエチレングリコールモノノナデシルエーテル、プロピレングリコールモノノナデシルエーテル、ブチレングリコールモノノナデシルエーテル、エチレングリコールモノエイコシルエーテル、ジエチレングリコールモノエイコシルエーテル、トリエチレングリコールモノエイコシルエーテル、プロピレングリコールモノエイコシルエーテル、ブチレングリコールモノエイコシルエーテルなどが挙げられる。 Examples of compounds represented by the above formula (I) include ethylene glycol monodecyl ether, diethylene glycol monodecyl ether, triethylene glycol monodecyl ether, propylene glycol monodecyl ether, butylene glycol monodecyl ether, ethylene glycol monoundecyl ether, diethylene glycol monoundecyl ether, triethylene glycol monoundecyl ether, propylene glycol monoundecyl ether, butylene glycol monoundecyl ether, ethylene glycol monododecyl ether, diethylene glycol monododecyl ether, triethylene glycol monododecyl ether, and propylene glycol monododecyl ether. ether, butylene glycol monododecyl ether, ethylene glycol monotridecyl ether, diethylene glycol monotridecyl ether, triethylene glycol monotridecyl ether, propylene glycol monotridecyl ether, butylene glycol monotridecyl ether, ethylene glycol monotetradecyl ether, diethylene glycol monotetradecyl ether, triethylene glycol monotetradecyl ether, propylene glycol monotetradecyl ether, butylene glycol monotetradecyl ether, ethylene glycol monopentadecyl ether, diethylene glycol monopentadecyl ether, triethylene glycol monopentadecyl ether, propylene glycol monopentadecyl ether, butylene glycol monopentadecyl ether, ethylene glycol monohexadecyl ether, diethylene glycol monohexadecyl ether, triethylene glycol monohexadecyl ether, propylene glycol monohexadecyl ether, butylene glycol monohexadecyl ether, ethylene glycol monoheptadecyl ether, diethylene glycol monoheptadecyl ether, triethylene glycol monoheptadecyl ether, propylene glycol monoheptadecyl ether, butylene glycol monoheptadecyl ether, ethylene glycol monooctadecyl ether, diethylene glycol Examples of such ethers include ethylene glycol monooctadecyl ether, triethylene glycol monooctadecyl ether, propylene glycol monooctadecyl ether, butylene glycol monooctadecyl ether, ethylene glycol monononadecyl ether, diethylene glycol monononadecyl ether, triethylene glycol monononadecyl ether, propylene glycol monononadecyl ether, butylene glycol monononadecyl ether, ethylene glycol monoeicosyl ether, diethylene glycol monoeicosyl ether, triethylene glycol monoeicosyl ether, propylene glycol monoeicosyl ether, and butylene glycol monoeicosyl ether.

上記式(II)で表される化合物の例としては、デカン酸(カプリン酸)、ウンデカン酸、ドデカン酸(ラウリン酸)、トリデカン酸、テトラデカン酸(ミリスチン酸)、ペンタデカン酸(ペンタデシル酸)、ヘキサデカン酸(パルミチン酸)、ヘプタデカン酸(マルガリン酸)、オクタデカン酸(ステアリン酸)、ノナデカン酸、イコサン酸(アラキジン酸)などの飽和脂肪酸;ミリストレイン酸、パルミトレイン酸、サピエン酸、オレイン酸、エライジン酸、バクセン酸などのモノ不飽和脂肪酸;リノール酸などのジ不飽和脂肪酸;α-リノレン酸、γ-リノレン酸、ピノレン酸、α-エレオステアリン酸、β-エレオステアリン酸などのトリ不飽和脂肪酸が挙げられる。 Examples of compounds represented by formula (II) above include saturated fatty acids such as decanoic acid (capric acid), undecanoic acid, dodecanoic acid (lauric acid), tridecanoic acid, tetradecanoic acid (myristic acid), pentadecanoic acid (pentadecylic acid), hexadecanoic acid (palmitic acid), heptadecanoic acid (margaric acid), octadecanoic acid (stearic acid), nonadecanoic acid, and eicosanoic acid (arachidic acid); monounsaturated fatty acids such as myristoleic acid, palmitoleic acid, sapienic acid, oleic acid, elaidic acid, and vaccenic acid; diunsaturated fatty acids such as linoleic acid; and triunsaturated fatty acids such as α-linolenic acid, γ-linolenic acid, pinoleic acid, α-eleostearic acid, and β-eleostearic acid.

本発明に係る微生物の培養に使用される培地は、上述の式(I)および/または式(II)で表される化合物を必須に含み、当該微生物が生育・増殖できるものであれば、特に制限されない。微生物の培養に使用する培地は、液体培地であっても固体培地であってもよい。培地は、乳化作用を有する成分を容易に回収できるとの観点から、好ましくは液体培地である。 The medium used to culture the microorganism of the present invention is not particularly limited, as long as it essentially contains the compound represented by formula (I) and/or formula (II) above and allows the microorganism to grow and proliferate. The medium used to culture the microorganism may be a liquid medium or a solid medium. Liquid medium is preferred because it allows the components with emulsifying properties to be easily recovered.

培地に含まれる成分としては、上述の式(I)および/または式(II)で表される化合物、窒素源、無機塩およびその他の成分が挙げられる。 Components contained in the medium include the compounds represented by formula (I) and/or formula (II) above, a nitrogen source, inorganic salts, and other components.

式(I)および/または式(II)で表される化合物の具体例は、上述のとおりである。 Specific examples of compounds represented by formula (I) and/or formula (II) are as described above.

上述の式(I)および/または式(II)で表される化合物は、単独で添加してもまたは2種以上の混合物の形態で添加してもよい。 The compounds represented by formula (I) and/or formula (II) above may be added alone or in the form of a mixture of two or more types.

例えば、式(II)で表される化合物を2種以上含む材料として、ベニバナ油(サフラワー油)、オリーブ油、キャノーラ油(菜種油)、エゴマ油、ココナッツ油、ごま油、こめ油、米ぬか油、大豆油、コーン油、パーム油、パーム核油(ヤシ油)、ひまわり油、綿実油、落花生油などの油脂を使用することができる。 For example, materials containing two or more compounds represented by formula (II) include oils and fats such as safflower oil, olive oil, canola oil (rapeseed oil), perilla oil, coconut oil, sesame oil, rice bran oil, rice bran oil, soybean oil, corn oil, palm oil, palm kernel oil (coconut oil), sunflower oil, cottonseed oil, and peanut oil.

本発明に係る微生物の培養において、式(I)および/または式(II)で表される化合物は、炭素源に該当する。微生物の培養に使用する培地は、式(I)および/または式(II)で表される化合物以外の炭素源を含んでもよいが、式(I)および/または式(II)で表される化合物のみを炭素源(単一炭素源)とすることが好ましい。 In the cultivation of microorganisms according to the present invention, the compounds represented by formula (I) and/or formula (II) correspond to carbon sources. The medium used to cultivate microorganisms may contain carbon sources other than the compounds represented by formula (I) and/or formula (II), but it is preferable that the compounds represented by formula (I) and/or formula (II) are used as the only carbon source (single carbon source).

式(I)および/または式(II)で表される化合物の配合量は、培地全量に対して、例えば0.02~20.0w/v%であり、好ましくは0.1~10.0w/v%であり、より好ましくは0.1~5.0w/v%であり、さらに好ましくは0.5~3.0w/v%である。当該配合量は、式(I)および/または式(II)で表される化合物を2種以上用いる場合はその合計量であり、上記油脂の場合はその質量である。 The amount of the compound represented by formula (I) and/or formula (II) is, for example, 0.02 to 20.0 w/v%, preferably 0.1 to 10.0 w/v%, more preferably 0.1 to 5.0 w/v%, and even more preferably 0.5 to 3.0 w/v%, relative to the total volume of the medium. When two or more compounds represented by formula (I) and/or formula (II) are used, this amount refers to the total amount, and in the case of the above-mentioned oils and fats, this amount refers to the mass.

窒素源としては、肉エキス、魚肉エキス、ペプトン、ポリペプトン、トリプトン、酵母エキス、麦芽エキス、大豆加水分解物、大豆粉末、カゼイン、ミルクカゼイン、カザミノ酸、グリシン、グルタミン酸、アスパラギン酸等の各種アミノ酸、コーンスティープリカー、その他の動物、植物、微生物の加水分解物等の有機窒素源;アンモニア、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウムなどのアンモニウム塩、硝酸ナトリウムなどの硝酸塩、亜硝酸ナトリウムなどの亜硝酸塩、尿素等の無機窒素源などが挙げられる。上記窒素源を1種または2種以上選択して使用することができる。 Nitrogen sources include organic nitrogen sources such as meat extract, fish extract, peptone, polypeptone, tryptone, yeast extract, malt extract, soybean hydrolysate, soybean powder, casein, milk casein, casamino acids, various amino acids such as glycine, glutamic acid, and aspartic acid, corn steep liquor, and hydrolysates of other animals, plants, and microorganisms; and inorganic nitrogen sources such as ammonia, ammonium salts such as ammonium nitrate, ammonium sulfate, and ammonium chloride, nitrates such as sodium nitrate, nitrites such as sodium nitrite, and urea. One or more of the above nitrogen sources can be selected and used.

窒素源の配合量(2種以上用いる場合はその合計量)は、本発明に係る微生物が生育・増殖できるものであれば、特に制限されない。 The amount of nitrogen source (or the total amount if two or more types are used) is not particularly limited, as long as it allows the microorganisms of the present invention to grow and proliferate.

無機物としては、マグネシウム、マンガン、カルシウム、ナトリウム、カリウム、ホウ素、コバルト、ニッケル、モリブデン、銅、鉄、亜鉛などが挙げられる。これらの無機物が培地中に含有される形態については、特に制限されない。例えば、マグネシウム、マンガン、カルシウム、ナトリウム、カリウム、コバルト、ニッケル、銅、鉄及び亜鉛については、これらの、リン酸塩、塩酸塩、硫酸塩、酢酸塩、炭酸塩、塩化物等のハロゲン化物などが挙げられる。具体的には、リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、硫酸鉄、硫酸マグネシウム、硫酸銅、硫酸マンガン、塩化コバルト、硫酸ニッケル、硫酸亜鉛などが挙げられる。ホウ素については、ホウ酸などが挙げられる。モリブデンについては、酸化モリブデンなどが挙げられる。上記無機物を1種または2種以上選択して使用することができる。 Inorganic substances include magnesium, manganese, calcium, sodium, potassium, boron, cobalt, nickel, molybdenum, copper, iron, zinc, etc. There are no particular limitations on the form in which these minerals are contained in the medium. For example, for magnesium, manganese, calcium, sodium, potassium, cobalt, nickel, copper, iron, and zinc, examples include halides such as phosphate, hydrochloride, sulfate, acetate, carbonate, and chloride. Specific examples include potassium dihydrogen phosphate, dipotassium hydrogen phosphate, sodium chloride, calcium chloride, iron sulfate, magnesium sulfate, copper sulfate, manganese sulfate, cobalt chloride, nickel sulfate, zinc sulfate, etc. For boron, examples include boric acid, etc. For molybdenum, examples include molybdenum oxide, etc. One or more of the above inorganic substances can be selected and used.

無機物の配合量(2種以上用いる場合はその合計量)は、本発明に係る微生物が生育・増殖できるものであれば、特に制限されない。 There are no particular restrictions on the amount of inorganic substances used (or the total amount if two or more types are used), as long as they allow the microorganisms of the present invention to grow and proliferate.

その他の成分としては、溶媒、pH調整剤などが挙げられる。 Other ingredients include solvents, pH adjusters, etc.

溶媒としては、通常、水が用いられる。水としては、特に制限されず、純水、蒸留水、脱イオン水、RO水、などが挙げられる。 Water is typically used as the solvent. There are no particular limitations on the water, but examples include pure water, distilled water, deionized water, and RO water.

pH調整剤としては、硫酸、塩酸、硝酸、酢酸、クエン酸等の酸;または水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、等の塩基などが挙げられる。 Examples of pH adjusters include acids such as sulfuric acid, hydrochloric acid, nitric acid, acetic acid, and citric acid; and bases such as sodium hydroxide, potassium hydroxide, sodium carbonate, and potassium carbonate.

本発明に係る微生物の培養において使用できる培地の具体例としては、後述の実施例で使用した無機塩選択培地に上述の式(I)および/または式(II)で表される化合物を添加した培地が挙げられる。 Specific examples of media that can be used in culturing the microorganisms of the present invention include media prepared by adding the compounds represented by formula (I) and/or formula (II) described above to the inorganic salt selective media used in the examples described below.

培地の調製方法は、特に制限されず、従来公知の方法を用いることができる。例えば、式(I)および/または式(II)で表される化合物、窒素源および無機物を溶媒(例えば、水)に溶解することで調製することができる。 The method for preparing the medium is not particularly limited, and any conventionally known method can be used. For example, the medium can be prepared by dissolving the compound represented by formula (I) and/or formula (II), a nitrogen source, and an inorganic substance in a solvent (e.g., water).

本発明に係る微生物の培養は、当該微生物が生育・増殖できるものであれば特に制限されず、公知の方法によって行うことができる。例えば、培養は、好気的条件下、振盪あるいは通気攪拌などによって行われる。また、微生物を連続的にまたはバッチで培養してもよい。培養条件は、培地の組成や培養法によって適宜選択され、本発明に係る微生物が生育・増殖できる条件であれば特に制限されず、適宜選択されうる。通常、培養温度は、25~37℃である。また、培養に適当な培地のpHは、特に制限されないが、好ましくは5~11であり、より好ましくは6~10である。培養時間は、特に制限されず、培養液の乳化が確認できるまで培養すればよい。通常、培養時間は、約16~72時間であり、好ましくは約20~60時間である。 Culturing of the microorganisms of the present invention is not particularly limited as long as they allow the growth and proliferation of the microorganisms, and can be carried out by known methods. For example, culturing is carried out under aerobic conditions by shaking or aeration and agitation. The microorganisms may also be cultured continuously or batchwise. Culture conditions are appropriately selected depending on the composition of the medium and the culture method, and are not particularly limited as long as they allow the growth and proliferation of the microorganisms of the present invention. The culture temperature is typically 25 to 37°C. The pH of the medium suitable for culture is not particularly limited, but is preferably 5 to 11, and more preferably 6 to 10. The culture time is not particularly limited, and can be continued until emulsification of the culture solution can be confirmed. The culture time is typically about 16 to 72 hours, and preferably about 20 to 60 hours.

本発明に係る微生物の培養に先立ち、当該微生物をあらかじめ前培養してもよい。前培養は、本発明に係る微生物が生育・増殖できるものであれば特に制限されず、公知の方法によって行うことができる。例えば、実施例に記載の方法を用いることができる。 Prior to culturing the microorganisms of the present invention, the microorganisms may be pre-cultured. The pre-culture method is not particularly limited as long as it allows the microorganisms of the present invention to grow and proliferate, and can be carried out by known methods. For example, the method described in the Examples can be used.

前培養に使用される培地は、上述の培地を使用することができる。なお、培地に含まれる炭素源としては、上述の式(I)および式(II)で表される化合物以外のものを使用することができる。このような炭素源の例としては、グルコン酸、カプリン酸、アジピン酸、リンゴ酸、クエン酸、酢酸フェニル、酢酸、乳酸、コハク酸、グルクロン酸、ピルピン酸等の有機酸類およびその塩、ヘキサデカン等の炭化水素、麦、米等の天然物、グリセロール、メタノール、エタノール等のアルコール類、糖類、トリプトン、トリエチレングリコールモノブチルエーテルが挙げられる。 The medium used for pre-culture can be any of the above-mentioned media. Carbon sources contained in the medium can be compounds other than those represented by formula (I) and formula (II). Examples of such carbon sources include organic acids and their salts such as gluconic acid, capric acid, adipic acid, malic acid, citric acid, phenyl acetate, acetic acid, lactic acid, succinic acid, glucuronic acid, and pyruvic acid; hydrocarbons such as hexadecane; natural products such as wheat and rice; alcohols such as glycerol, methanol, and ethanol; sugars; tryptone; and triethylene glycol monobutyl ether.

前培養の条件は、上記培養条件を適宜参照されうる。 The above culture conditions can be referenced as appropriate for the pre-culture conditions.

このようにして、本発明に係る培養物としての培養液を得ることができる。 In this way, a culture medium serving as the culture of the present invention can be obtained.

得られた培養液を遠心分離することにより菌体を沈殿させて、上清を回収することができる。回収した上清には、本発明に係る微生物が生成した乳化作用を有する成分が含まれるため、本発明に係る培養物として使用することができる。遠心分離の条件は、特に制限されず、例えば3000~5000rpmで3~10分遠心分離を行えばよい。 The resulting culture medium can be centrifuged to precipitate the bacterial cells and recover the supernatant. The recovered supernatant contains the emulsifying components produced by the microorganism of the present invention and can be used as the culture of the present invention. There are no particular limitations on the conditions for centrifugation; for example, centrifugation at 3,000 to 5,000 rpm for 3 to 10 minutes may be used.

本発明において、カプリアビダス属の微生物の培養物からの抽出物とは、培養物を溶媒抽出することにより得られる抽出液、その希釈液および濃縮液、ならびにそれらの乾燥物を意味する。 In the present invention, the extract from a culture of a microorganism of the genus Capriavidus refers to the extract obtained by solvent extraction of the culture, its diluted solution and concentrated solution, and their dried products.

培養物から抽出物を抽出する方法は、特に制限されず、従来公知の方法を採用することができる。例えば、以下の方法により、抽出物を得ることができる:
(工程1)培養物と溶媒(例えば、酢酸エチル)とを混合して、混合物を得る;
(工程2)混合物を遠心分離(例えば、600rpm、10分間)する;
(工程3)溶媒層を回収し、ロータリーエバポレーターなどを用いて溶媒層から溶媒を除去して、抽出液(抽出物)を得る。
The method for extracting the extract from the culture is not particularly limited, and any conventionally known method can be used. For example, the extract can be obtained by the following method:
(Step 1) Mixing the culture with a solvent (e.g., ethyl acetate) to obtain a mixture;
(Step 2) Centrifuge the mixture (e.g., 600 rpm, 10 minutes);
(Step 3) The solvent layer is recovered, and the solvent is removed from the solvent layer using a rotary evaporator or the like to obtain an extract.

抽出に用いられる溶媒としては、特に制限されず、従来公知の溶媒を使用することができる。溶媒の例としては、水;メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等のアルコール類;プロピレングリコール、ブチレングリコール等の多価アルコール類;アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類;酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル類;テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等の鎖状および環状エーテル類;ポリエチレングリコール等のポリエーテル類;ヘキサン、シクロヘキサン、石油エーテル等の炭化水素類;ベンゼン、トルエン等の芳香族炭化水素類;ピリジン類等が挙げられる。溶媒は、好ましくは酢酸エチル等のエステル類、エタノール等のアルコール類である。 The solvent used for extraction is not particularly limited, and conventionally known solvents can be used. Examples of solvents include water; alcohols such as methanol, ethanol, propanol, and butanol; polyhydric alcohols such as propylene glycol and butylene glycol; ketones such as acetone and methyl ethyl ketone; esters such as methyl acetate and ethyl acetate; linear and cyclic ethers such as tetrahydrofuran and diethyl ether; polyethers such as polyethylene glycol; hydrocarbons such as hexane, cyclohexane, and petroleum ether; aromatic hydrocarbons such as benzene and toluene; and pyridines. The solvent is preferably an ester such as ethyl acetate, or an alcohol such as ethanol.

溶媒の添加量は、使用する溶媒によっても異なるが、例えば培養液1体積部に対して、0.5~10体積部である。混合する際の温度は、特に制限されず、例えば25~37℃である。 The amount of solvent added varies depending on the solvent used, but is typically 0.5 to 10 parts by volume per 1 part by volume of culture medium. There are no particular restrictions on the temperature during mixing, and it is typically 25 to 37°C.

工程3で得られた抽出液は、そのまま抽出物として使用することができる。また、従来公知の手法により、抽出液を希釈、濃縮または凍結乾燥したものを抽出物として使用することもできる。 The extract obtained in step 3 can be used as is. Alternatively, the extract can be diluted, concentrated, or freeze-dried using conventional methods and then used as an extract.

<乳化用組成物の製造方法>
本発明の第二の態様は、カプリアビダス(Cupriavidus)属の微生物を、下記式(I)および/または式(II)で表される化合物を含む培地で培養することを含み、
前記微生物は、カプリアビダス・エスピー(Cupriavidus sp.)NNM23株(受託番号NITE P-02114)および/またはカプリアビダス・エスピー(Cupriavidus sp.)NNM27株(受託番号NITE P-02115)である、乳化用組成物の製造方法である:
<Method of manufacturing emulsification composition>
A second aspect of the present invention comprises culturing a microorganism of the genus Cupriavidus in a medium containing a compound represented by the following formula (I) and/or formula (II):
The method for producing an emulsifying composition is characterized in that the microorganism is Cupriavidus sp. NNM23 strain (accession number NITE P-02114) and/or Cupriavidus sp. NNM27 strain (accession number NITE P-02115):

式中、Rは、炭素数10~20の飽和または不飽和の炭化水素基であり、Rは、炭素数9~19の飽和または不飽和の炭化水素基であり、AおよびAは、それぞれ独立して、エチレン基、プロピレン基またはブチレン基であり、mおよびnは、それぞれ独立して、0~50の整数である。 In the formula, R 1 is a saturated or unsaturated hydrocarbon group having 10 to 20 carbon atoms, R 2 is a saturated or unsaturated hydrocarbon group having 9 to 19 carbon atoms, A 1 and A 2 are each independently an ethylene group, a propylene group, or a butylene group, and m and n are each independently an integer of 0 to 50.

本発明に係る乳化用組成物の製造方法において、微生物(NNM23株およびNNM27株)、式(I)および式(II)で表される化合物、培養で使用される培地、微生物の培養方法ならびに培養により得られる培養物およびその抽出物は、上記説明と同様であるため、説明を省略する。 In the method for producing an emulsification composition according to the present invention, the microorganisms (strains NNM23 and NNM27), the compounds represented by formula (I) and formula (II), the medium used in the culture, the method for culturing the microorganisms, and the culture and extract thereof obtained by the culture are the same as those described above, and therefore further description will be omitted.

好ましい実施形態において、上述の抽出物を得るために、本発明に係る乳化用組成物の製造方法は、培養で得られた培養物から微生物を除去することを含む。 In a preferred embodiment, the method for producing an emulsification composition according to the present invention includes removing microorganisms from the culture obtained by culturing in order to obtain the above-mentioned extract.

微生物を除去する方法は、特に制限されず、従来公知の方法が挙げられる。例えば、培養液を遠心分離することにより菌体を沈殿させて、上清を回収する方法が挙げられる。遠心分離の条件は、上述のとおりである。 The method for removing microorganisms is not particularly limited, and includes conventionally known methods. For example, the culture medium is centrifuged to precipitate the bacterial cells, and the supernatant is recovered. The centrifugation conditions are as described above.

また、培養物から抽出物を抽出することにより、微生物を除去することができる。抽出物の抽出方法は、上述のとおりである。 Microorganisms can also be removed by extracting an extract from the culture. The method for extracting the extract is as described above.

<用途>
本発明に係る乳化用組成物は、微生物に由来する乳化成分を含むため、化粧品(例えば、化粧水、乳液、クリームなど)、洗剤などの分野で用いることができる。したがって、本発明の一実施形態は、本発明に係る乳化用組成物を含む、化粧品である。また、本発明の一実施形態は、本発明に係る乳化用組成物を含む、洗剤である。
<Application>
The emulsifying composition according to the present invention contains an emulsifying component derived from a microorganism, and therefore can be used in the fields of cosmetics (for example, lotions, emulsions, creams, etc.), detergents, etc. Therefore, one embodiment of the present invention is a cosmetic comprising the emulsifying composition according to the present invention. Another embodiment of the present invention is a detergent comprising the emulsifying composition according to the present invention.

本発明を、以下の実施例および比較例を用いてさらに詳細に説明する。ただし、本発明の技術的範囲が以下の実施例のみに制限されるわけではない。なお、特記しない限り、「%」および「部」は、それぞれ、「質量%」および「質量部」を意味する。また、下記実施例において、特記しない限り、操作は室温(20~25℃)/相対湿度40~50%RHの条件下で行われた。 The present invention will be described in more detail using the following examples and comparative examples. However, the technical scope of the present invention is not limited to the following examples. Unless otherwise specified, "%" and "parts" mean "% by mass" and "parts by mass," respectively. In the following examples, unless otherwise specified, operations were performed under conditions of room temperature (20-25°C) and relative humidity of 40-50% RH.

[前培養液の調製]
カプリアビダス・エスピー(Cupriavidus sp.)NNM27株を冷凍保存したグリセロールストック溶液から白金耳を用いて固体培地(富栄養寒天培地)上に接種して、30℃で培養した。
[Preparation of preculture solution]
Cupriavidus sp. NNM27 strain was inoculated onto a solid medium (rich agar medium) from a frozen glycerol stock solution using a platinum loop, and cultured at 30°C.

固体培地は、以下の表1の組成となるように、寒天以外の各成分を純水に溶解し、寒天の終濃度が0.8w/v%となるように添加し、高温高圧滅菌した後、適宜分注して固化させて調製した。 The solid medium was prepared by dissolving all ingredients except agar in purified water to achieve the composition shown in Table 1 below, adding agar to a final concentration of 0.8 w/v%, sterilizing at high temperature and high pressure, and then dispensing the mixture as needed and allowing it to solidify.

固体培地上での生育を確認した後、固体培地上のコロニーを液体培地(0.5w/v%の単一炭素源(トリエチレングリコールブチルエーテル(BTG))を含む無機塩選択培養液)に接種して、好気的条件下、30℃で12~20時間(振とう速度:40rpm)培養して、前培養液を調製した。 After confirming growth on the solid medium, the colonies on the solid medium were inoculated into liquid medium (inorganic salt selective culture solution containing 0.5 w/v% of a single carbon source (triethylene glycol butyl ether (BTG))) and cultured under aerobic conditions at 30°C for 12 to 20 hours (shaking speed: 40 rpm) to prepare a preculture solution.

液体培地は、以下の表2の組成となるように、各成分を純水に溶解して、無機塩選択培養液を調製した後、無機塩選択培養液にBTGを終濃度が0.5w/v%となるように添加し、高温高圧滅菌して調製した。 The liquid medium was prepared by dissolving each component in pure water to obtain the composition shown in Table 2 below to prepare an inorganic salt selective culture medium. BTG was then added to the inorganic salt selective culture medium to a final concentration of 0.5 w/v%, and the mixture was sterilized at high temperature and high pressure.

[実施例1]
前培養液2mLを遠心分離(3000rpm、5分間)して、菌体を回収した。得られた菌体に対して、1Lの液体培地(0.5w/v%の単一炭素源(ジエチレングリコールモノドデシルエーテル(DDG))を含む無機塩選択培養液)を添加して、好気的条件下、30℃で振とう培養(振とう速度:40rpm)した。
[Example 1]
Two mL of the preculture solution was centrifuged (3,000 rpm, 5 minutes) to collect the bacterial cells. One liter of liquid medium (an inorganic salt selective culture solution containing 0.5 w/v% of a single carbon source (diethylene glycol monododecyl ether (DDG))) was added to the collected bacterial cells, and the mixture was cultured under aerobic conditions at 30°C with shaking (shaking speed: 40 rpm).

約20~60時間培養して、培養液の状態を確認したところ、培養液の乳化を確認した(図1:約30時間培養後の培養液)。培養前には乳化が確認されておらず、培養に使用した液体培地には乳化作用を有する成分が含まれないため、培養液の乳化は、NNM27株が生成したバイオサーファクタントによるものと考えられる。 After culturing for approximately 20 to 60 hours, the state of the culture medium was checked and emulsification of the culture medium was confirmed (Figure 1: Culture medium after approximately 30 hours of culturing). Emulsification was not observed before culturing, and the liquid medium used for culturing does not contain any components with emulsifying properties, so it is thought that the emulsification of the culture medium is due to the biosurfactants produced by the NNM27 strain.

[実施例2]
単一炭素源(DDG)の濃度を0.1w/v%としたこと以外は、実施例1と同様にして培養を行った。
[Example 2]
Cultivation was carried out in the same manner as in Example 1, except that the concentration of the single carbon source (DDG) was 0.1 w/v %.

約20~60時間培養して、培養液の状態を確認したところ、培養液の上部において部分的な乳化を確認した(図1:約30時間培養後の培養液)。培養前には乳化が確認されておらず、培養に使用した液体培地には乳化作用を有する成分が含まれないため、培養液の乳化は、NNM27株が生成したバイオサーファクタントによるものと考えられる。 After culturing for approximately 20 to 60 hours, the state of the culture medium was checked, and partial emulsification was confirmed in the upper part of the culture medium (Figure 1: Culture medium after approximately 30 hours of culturing). Since no emulsification was observed before culturing, and the liquid medium used for culturing does not contain any components with emulsifying properties, it is believed that the emulsification of the culture medium is due to a biosurfactant produced by the NNM27 strain.

[実施例3]
単一炭素源として、DDGの代わりにベニバナ油を使用したこと以外は、実施例1と同様にして培養を行った。
[Example 3]
Cultivation was carried out in the same manner as in Example 1, except that safflower oil was used instead of DDG as the sole carbon source.

約20~60時間培養して、培養液の状態を確認したところ、培養液の乳化を確認した(図1:約30時間培養後の培養液)。培養前には乳化が確認されておらず、培養に使用した液体培地には乳化作用を有する成分が含まれないため、培養液の乳化は、NNM27株が生成したバイオサーファクタントによるものと考えられる。 After culturing for approximately 20 to 60 hours, the state of the culture medium was checked and emulsification of the culture medium was confirmed (Figure 1: Culture medium after approximately 30 hours of culturing). Emulsification was not observed before culturing, and the liquid medium used for culturing does not contain any components with emulsifying properties, so it is thought that the emulsification of the culture medium is due to the biosurfactants produced by the NNM27 strain.

[実施例4]
単一炭素源として、DDGの代わりにオリーブ油を使用したこと以外は、実施例1と同様にして培養を行った。
[Example 4]
Cultivation was carried out in the same manner as in Example 1, except that olive oil was used instead of DDG as the sole carbon source.

約20~60時間培養して、培養液の状態を確認したところ、培養液の乳化を確認した(図1:約30時間培養後の培養液)。培養前には乳化が確認されておらず、培養に使用した液体培地には乳化作用を有する成分が含まれないため、培養液の乳化は、NNM27株が生成したバイオサーファクタントによるものと考えられる。 After culturing for approximately 20 to 60 hours, the state of the culture medium was checked and emulsification of the culture medium was confirmed (Figure 1: Culture medium after approximately 30 hours of culturing). Emulsification was not observed before culturing, and the liquid medium used for culturing does not contain any components with emulsifying properties, so it is thought that the emulsification of the culture medium is due to the biosurfactants produced by the NNM27 strain.

[実施例5]
単一炭素源として、DDGの代わりにキャノーラ油を使用したこと以外は、実施例1と同様にして培養を行った。
[Example 5]
Cultivation was carried out in the same manner as in Example 1, except that canola oil was used instead of DDG as the sole carbon source.

約20~60時間培養して、培養液の状態を確認したところ、培養液の乳化を確認した(図1:約30時間培養後の培養液)。培養前には乳化が確認されておらず、培養に使用した液体培地には乳化作用を有する成分が含まれないため、培養液の乳化は、NNM27株が生成したバイオサーファクタントによるものと考えられる。 After culturing for approximately 20 to 60 hours, the state of the culture medium was checked and emulsification of the culture medium was confirmed (Figure 1: Culture medium after approximately 30 hours of culturing). Emulsification was not observed before culturing, and the liquid medium used for culturing does not contain any components with emulsifying properties, so it is thought that the emulsification of the culture medium is due to the biosurfactants produced by the NNM27 strain.

[比較例1]
単一炭素源として、DDGの代わりにBTGを使用したこと以外は、実施例1と同様にして培養を行った。
[Comparative Example 1]
Cultivation was carried out in the same manner as in Example 1, except that BTG was used instead of DDG as the sole carbon source.

約20~60時間培養して、培養液の状態を確認したところ、NNM27株の増殖は確認されたが、培養液の乳化は確認できなかった(図1)。なお、培養前にも乳化は確認されなかった。 After culturing for approximately 20 to 60 hours, the state of the culture medium was checked, and growth of the NNM27 strain was confirmed, but emulsification of the culture medium was not confirmed (Figure 1). Furthermore, emulsification was not confirmed before culturing either.

[比較例2]
上記表2の組成となるように、各成分を純水に溶解した後、高温高圧滅菌して、無機塩選択培養液を調製した。
[Comparative Example 2]
Each component was dissolved in pure water to obtain the composition shown in Table 2 above, and then sterilized at high temperature and high pressure to prepare an inorganic salt selective culture medium.

前培養液2mLを遠心分離(3000rpm、5分間)して、菌体を回収した。得られた菌体に対して、1Lの無機塩選択培養液を添加して、好気的条件下、30℃で振とう培養(振とう速度:40rpm)した。 2 mL of the preculture medium was centrifuged (3,000 rpm, 5 minutes) to collect the bacterial cells. 1 L of inorganic salt selective culture medium was added to the obtained bacterial cells, and the cells were cultured under aerobic conditions at 30°C with shaking (shaking speed: 40 rpm).

約20~60時間培養して、培養液の状態を確認したところ、NNM27株の増殖および培養液の乳化は確認できなかった(図1:約30時間培養後の培養液)。なお、培養前にも乳化は確認されなかった。 After culturing for approximately 20 to 60 hours, the state of the culture medium was checked, but no growth of the NNM27 strain or emulsification of the culture medium was confirmed (Figure 1: Culture medium after approximately 30 hours of culturing). Furthermore, emulsification was not confirmed before culturing either.

Claims (5)

カプリアビダス(Cupriavidus)属の微生物の培養物またはその培養物からの抽出物を含む、乳化用組成物であって、
前記微生物は、カプリアビダス・エスピー(Cupriavidus sp.)NNM23株(受託番号NITE P-02114)および/またはカプリアビダス・エスピー(Cupriavidus sp.)NNM27株(受託番号NITE P-02115)であり、
前記培養物は、前記微生物をジエチレングリコールモノドデシルエーテルを含む培地で培養することで得られたものである、乳化用組成物。
1. An emulsifying composition comprising a culture of a microorganism of the genus Cupriavidus or an extract from the culture,
the microorganism is Cupriavidus sp. NNM23 strain (accession number NITE P-02114) and/or Cupriavidus sp. NNM27 strain (accession number NITE P-02115);
The culture is obtained by culturing the microorganism in a medium containing diethylene glycol monododecyl ether .
請求項1に記載の乳化用組成物を含む、化粧品。 A cosmetic comprising the emulsifying composition according to claim 1 . 請求項1に記載の乳化用組成物を含む、洗剤。 A detergent comprising the emulsifying composition according to claim 1 . カプリアビダス(Cupriavidus)属の微生物を、ジエチレングリコールモノドデシルエーテルを含む培地で培養することを含み、
前記微生物は、カプリアビダス・エスピー(Cupriavidus sp.)NNM23株(受託番号NITE P-02114)および/またはカプリアビダス・エスピー(Cupriavidus sp.)NNM27株(受託番号NITE P-02115)である、乳化用組成物の製造方法。
The method comprises culturing a microorganism of the genus Cupriavidus in a medium containing diethylene glycol monododecyl ether ,
The method for producing an emulsification composition, wherein the microorganism is Cupriavidus sp. strain NNM23 (accession number NITE P-02114) and/or Cupriavidus sp. strain NNM27 (accession number NITE P-02115) .
前記培養で得られた培養物から前記微生物を除去することを含む、請求項に記載の製造方法。 The method according to claim 4 , further comprising removing the microorganism from the culture obtained by the culturing.
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