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JP7791572B2 - Method for preserving eggs of nematodes parasitic on rice planthoppers, method for controlling rice planthoppers, method for producing pesticides, and biological pesticides - Google Patents
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JP7791572B2 - Method for preserving eggs of nematodes parasitic on rice planthoppers, method for controlling rice planthoppers, method for producing pesticides, and biological pesticides - Google Patents

Method for preserving eggs of nematodes parasitic on rice planthoppers, method for controlling rice planthoppers, method for producing pesticides, and biological pesticides

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JP7791572B2 JP2021200392A JP2021200392A JP7791572B2 JP 7791572 B2 JP7791572 B2 JP 7791572B2 JP 2021200392 A JP2021200392 A JP 2021200392A JP 2021200392 A JP2021200392 A JP 2021200392A JP 7791572 B2 JP7791572 B2 JP 7791572B2
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Description

本発明は、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を保存する方法、イネウンカ類の防除方法、農薬の製造方法、及び生物農薬に関する。 The present invention relates to a method for preserving eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers, a method for controlling rice planthoppers, a method for producing pesticides, and biological pesticides.

殺虫剤抵抗性を獲得したトビイロウンカが中国から日本に飛来し、各地で大きな被害を引き起こしている。従来の育苗箱施用殺虫剤のみならず、本田散布殺虫剤の一部についても効果が低下している。新規殺虫剤を含め卓効を示す殺虫剤はあるが、飛来源となる海外でもこれらの殺虫剤が使用されているため、感受性の低下が懸念される。このため、可能な限り殺虫剤に依存しない安定性の高いトビイロウンカの管理技術が求められている。 Rice planthoppers that have acquired insecticide resistance have flown from China to Japan, causing significant damage in various areas. The effectiveness of not only conventional insecticides applied to seedling trays, but also some insecticides sprayed on rice fields has decreased. While there are some insecticides that are highly effective, including new insecticides, these insecticides are also used overseas, which is the source of the insects' arrival, raising concerns about a decline in sensitivity. Therefore, there is a need for stable rice planthopper management techniques that do not rely on insecticides as much as possible.

薬剤抵抗性の害虫対策として、野菜栽培では天敵を利用した防除技術の開発が進められている。とりわけ施設栽培では、導入天敵の放飼技術や土着天敵の働きを増強させる技術が開発されている。しかし、水稲栽培においては天敵の放飼利用技術は進んでいない。その理由として、水稲栽培では、有望な土着天敵を増殖する技術が無いことや、水田が開放系であるため天敵を放飼しても定着性が悪いこと等の問題点が挙げられる。そのため、移動分散能力が低い土着天敵を人為的に増殖及び導入する技術の開発が求められている。 In order to combat chemical-resistant pests, development is underway in vegetable cultivation to utilize natural enemies for pest control. In particular, in greenhouse cultivation, techniques for releasing introduced natural enemies and techniques for enhancing the effectiveness of native natural enemies have been developed. However, techniques for releasing natural enemies have not progressed in rice cultivation. This is due to the lack of technology for breeding promising native natural enemies, and the fact that rice paddies are open systems, which means that even if natural enemies are released, they do not settle well. Therefore, there is a need to develop techniques for artificially breeding and introducing native natural enemies that have low mobility and dispersal capabilities.

昆虫寄生性の線虫であるウンカシヘンチュウは、ウンカ類の土着天敵として戦前からその存在が知られていた。ウンカシヘンチュウが高密度で生息する水田では、その寄生によってウンカ類の増殖が抑制され、その被害が抑止される。また、ウンカシヘンチュウは、移動分散能力が低く、定着能力が高い。 The insect-parasitic nematode, the aphid, has been known to exist since before the war as a native natural enemy of planthoppers. In rice paddies where the aphids live in high densities, their parasitism suppresses the proliferation of planthoppers and reduces the damage they cause. Furthermore, aphids have low mobility and dispersal abilities, but a high ability to settle.

しかしながら、ウンカ類、特にトビイロウンカの発生が少ない場合、水田土壌中のウンカシヘンチュウの密度は極端に低下してしまう。ウンカシヘンチュウは、6月から9月にかけて毎日数卵から百数十卵、合計数千卵程度産卵するが、ウンカ類の発生時期は6、7月から10月で、その防除のために想定される防除時期は8月から9月頃である。そのため、ウンカ類を効果的に防除するためには、ウンカ類の防除適期までウンカシヘンチュウの卵を保管する技術が必要である。 However, when there is little infestation of planthoppers, especially brown planthoppers, the density of planthopper worms in paddy field soil drops drastically. Planthopper worms lay anywhere from a few eggs to over a hundred eggs every day from June to September, totaling several thousand eggs, but planthopper emergence occurs from June or July to October, and the expected control period for planthopper emergence is around August to September. Therefore, in order to effectively control planthoppers, a technique is needed to store planthopper worm eggs until the optimum time for planthopper control.

非特許文献1には、ウンカシヘンチュウの卵を採卵直後に5℃で保存したところ、保存開始から30日、90日及び180日後の孵化率がそれぞれ80%、66%及び17%であったことが記載されている。 Non-patent document 1 describes that when egg samples of the Japanese hen bug were stored at 5°C immediately after collection, the hatching rates after 30, 90, and 180 days of storage were 80%, 66%, and 17%, respectively.

非特許文献2には、線虫種Filipjevimermis leipsandraの卵を室温で多細胞期まで発生させてから5℃に保つことが記載されている。 Non-patent document 2 describes how eggs of the nematode species Filipjevimermis leipsandra are developed to the multicellular stage at room temperature and then maintained at 5°C.

Choo et al., Biocontrol Science and Technology, 5:209-223, 1995Choo et al., Biocontrol Science and Technology, 5:209-223, 1995 Creighton & Fassuliotis, Journal of Economic Entomology,vol. 75, no. 4, p.701-703,1982Creighton & Fassuliotis, Journal of Economic Entomology, vol. 75, no. 4, p.701-703, 1982

ウンカ類の効果的な防除を実現するために、孵化率を低下させることなくウンカシヘンチュウの卵を長期間保存することができれば有利である。非特許文献1に記載された技術では、保存開始から3ヶ月を過ぎると大幅に孵化率が低下しており、採卵時期によってはウンカ類の防除に利用できる時期が限られてしまう。非特許文献2に記載された技術では、保存した卵の保存期間及び保存後の孵化率が不明である。 In order to effectively control planthoppers, it would be advantageous to be able to store planthopper eggs for long periods of time without reducing the hatching rate. With the technology described in Non-Patent Document 1, the hatching rate drops significantly after three months of storage, and depending on when the eggs are collected, the period during which they can be used to control planthoppers is limited. With the technology described in Non-Patent Document 2, the storage period for stored eggs and the hatching rate after storage are unknown.

本発明の一態様は、上述した問題点を解決するためになされたものであり、その目的は、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を、孵化率の低下を抑えて長期間保存することを目的とする。 One aspect of the present invention has been made to solve the above-mentioned problems, and its purpose is to preserve eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers for long periods of time while suppressing a decrease in hatchability.

上記の課題を解決するために、本発明の一態様に係るイネウンカ類に寄生する線虫の卵を保存する方法は、胚発生した前記卵を、胚発生状態を維持して保存する貯蔵工程を包含する。 In order to solve the above problems, one embodiment of the present invention provides a method for preserving eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers, which includes a storage step for preserving the eggs after embryogenesis while maintaining the embryonic state.

本発明の一態様に係るイネウンカ類の防除方法は、本発明の一態様に係るイネウンカ類に寄生する線虫の卵を保存する方法により保存した卵を用いる工程を包含する。 A method for controlling rice planthoppers according to one embodiment of the present invention includes a step of using eggs preserved by a method for preserving eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers according to one embodiment of the present invention.

本発明の一態様に係る農薬の製造方法は、本発明の一態様に係るイネウンカ類に寄生する線虫の卵を保存する方法により保存した卵を用いる工程を包含する。 A method for producing a pesticide according to one embodiment of the present invention includes a step of using eggs preserved by a method for preserving eggs of nematodes parasitic on rice planthoppers according to one embodiment of the present invention.

本発明の一態様に係る生物農薬は、胚発生したイネウンカ類に寄生する線虫の卵を複数個パッケージしてなる。 One aspect of the present invention is a biological pesticide that contains multiple packaged eggs of nematodes that parasitize embryonic rice planthoppers.

本発明の一態様によれば、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を、孵化率の低下を抑えて長期間保存することができる。 According to one aspect of the present invention, eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers can be stored for long periods of time while suppressing a decrease in hatchability.

ウンカシヘンチュウの雌成虫及び卵を示す図である。This is a diagram showing female adults and eggs of the planthopper. 採卵後15日のウンカシヘンチュウの卵を示す図である。This is a photograph showing the eggs of the planthopper 15 days after collection. 採卵日(産下1日以内)のウンカシヘンチュウの卵を示す図である。This is a photograph of the eggs of the planthopper on the day of egg collection (within one day of laying). 採卵後6日(産下6日から7日)のウンカシヘンチュウの卵を示す図である。This is a photograph of the eggs of the planthopper 6 days after collection (6th to 7th day after laying). 採卵後9日(産下9日から10日)のウンカシヘンチュウの卵を示す図である。This is a photograph of the eggs of the planthopper worm 9 days after egg collection (9th to 10th day after laying).

〔イネウンカ類に寄生する線虫の卵を保存する方法〕
本発明の一態様に係るイネウンカ類に寄生する線虫の卵を保存する方法(以下、保存方法と称する場合もある)は、胚発生した前記卵を、胚発生状態を維持して保存する貯蔵工程を包含する。保存方法は、すでに胚発生した卵を入手して、貯蔵工程において保存してもよいし、イネウンカ類に寄生する線虫から採卵して胚発生させて、貯蔵工程において保存してもよい。すなわち、保存方法は、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を胚発生させる胚発生工程をさらに包含してもよい。
[Method for preserving eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers]
A method for preserving eggs of a nematode that parasitizes rice planthoppers according to one embodiment of the present invention (hereinafter sometimes referred to as the preservation method) includes a storage step of preserving the eggs that have already developed while maintaining their embryonic state. The preservation method may involve obtaining eggs that have already developed and preserving them in the storage step, or collecting eggs from a nematode that parasitizes rice planthoppers, allowing them to develop into embryos, and preserving them in the storage step. That is, the preservation method may further include an embryogenesis step of allowing eggs of a nematode that parasitizes rice planthoppers to develop into embryos.

保存方法は、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を保存するための方法である。イネウンカ類に寄生する線虫は、トビイロウンカ、セジロウンカ、ヒメトビウンカのようなイネウンカ類の天敵であり、イネウンカ類に寄生してその増殖を抑制かつ殺傷する線虫である。イネウンカ類に寄生する線虫は、シヘンチュウ科(Mermithidae)の線虫であり、一例として、Agamermis属の線虫、Amphimermis属の線虫、Hexamermis属の線虫、Mermis属の線虫等が挙げられる。Agamermis属の線虫の例として、ウンカシヘンチュウ(Agamerimis unka)、Agamermis changshaensis等が挙げられる。 The preservation method is a method for preserving eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers. Nematodes that parasitize rice planthoppers are natural enemies of rice planthoppers such as the brown planthopper, the white-backed planthopper, and the striate brown planthopper, and are nematodes that parasitize rice planthoppers, inhibiting their proliferation and killing them. Nematodes that parasitize rice planthoppers are nematodes of the family Mermithidae, and examples include nematodes of the genus Agamermis, nematodes of the genus Amphimermis, nematodes of the genus Hexamermis, and nematodes of the genus Mermis. Examples of nematodes of the genus Agamermis include the rice planthopper (Agamermis unka) and Agamermis changshaensis.

(胚発生工程)
胚発生工程は、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を胚発生させる工程である。胚発生工程は、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を、細胞分裂から形態形成するまでの胚発生過程のいずれかの状態とする工程である。胚発生工程においては、一例として、イネウンカ類に寄生する線虫の卵の胚発生を完了させる。ここで、胚発生の完了とは、卵内に幼虫が形成されて孵化する前の状態とすることを意図している。
(Embryonic Development Process)
The embryonic development process is a process of causing embryonic development in eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers. The embryonic development process is a process of bringing eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers into any stage of the embryonic development process from cell division to morphogenesis. In one example of the embryonic development process, the embryonic development of eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers is completed. Here, completion of embryonic development refers to a state before larvae are formed in the eggs and hatch.

胚発生工程において胚発生させる卵は、イネウンカ類に寄生する線虫から採卵した卵である。本発明の一態様は、イネウンカ類に寄生する線虫から卵を採卵する工程をさらに包含してもよい。一例として、ウンカシヘンチュウは、数か月間継続して毎日数卵から百数十卵、合計数千卵程度産卵するので、産卵期間に亘って毎日採卵する。 The eggs used to develop embryos in the embryo development process are eggs collected from nematodes that parasitize rice planthoppers. One aspect of the present invention may further include a step of collecting eggs from nematodes that parasitize rice planthoppers. As an example, rice planthopper worms lay anywhere from a few eggs to several hundred eggs every day for several months, totaling several thousand eggs, so eggs are collected every day throughout the egg-laying period.

図1に、ウンカシヘンチュウの雌成虫及び卵を示す。図1においては、産下された卵に矢印を付している。図1の下方に示した白線は、10mmのスケールを表している。採卵のために光を当てると、図1に示すように、ウンカシヘンチュウが絡まり塊状になる。 Figure 1 shows a female adult planthopper and eggs. Arrows are attached to the eggs that have been laid in Figure 1. The white line at the bottom of Figure 1 represents a 10 mm scale. When light is shone on them to collect the eggs, the planthopper worms become tangled and form a mass, as shown in Figure 1.

胚発生工程においては、イネウンカ類に寄生する線虫の卵の乾燥を防ぐことが好ましく、一例として、当該卵を水中において保持する。また、当該卵を高い湿度を維持して保持してもよい。 During the embryo development process, it is preferable to prevent the eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers from drying out. For example, the eggs are kept in water. Alternatively, the eggs may be kept in a high humidity environment.

胚発生工程においては、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を13℃以上、30℃以下に保持してもよい。これにより、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を胚発生させることができる。胚発生工程においては、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を28℃に保持することがより好ましい。 In the embryo development process, the eggs of the nematode that parasitizes rice planthoppers may be kept at a temperature of 13°C or higher and 30°C or lower. This allows the eggs of the nematode that parasitizes rice planthoppers to develop into embryos. In the embryo development process, it is more preferable to keep the eggs of the nematode that parasitizes rice planthoppers at 28°C.

胚発生工程においては、イネウンカ類に寄生する線虫の卵が胚発生するまで、当該卵を保持する。胚発生工程においては、一例として、1日間以上、20日間以下、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を保持する。胚発生工程においては、好ましくは15日間、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を保持する。 In the embryo development process, the eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers are held until they develop into embryos. In the embryo development process, for example, the eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers are held for at least 1 day and not more than 20 days. In the embryo development process, the eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers are preferably held for 15 days.

なお、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を、上記温度範囲内の低温で保持した場合には、長期間保持して胚発生を進行させることが好ましい。一方、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を、上記温度範囲内の高温で保持した場合には、胚発生の進行が早いため保持期間は短期間でもよい。胚発生の進行に応じて、保持温度と保持期間とを適宜設定すればよい。胚発生工程においては、一例として、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を28℃で15日間保持する。 When eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers are kept at low temperatures within the above temperature range, it is preferable to keep them for a long period of time to allow embryonic development to proceed. On the other hand, when eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers are kept at high temperatures within the above temperature range, embryonic development proceeds quickly, so the keeping period can be short. The keeping temperature and keeping period can be set appropriately depending on the progress of embryonic development. As an example of the embryonic development process, eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers are kept at 28°C for 15 days.

胚発生工程においては、イネウンカ類に寄生する線虫の卵が胚発生しているか否かを判定し、胚発生したと判定するまで当該卵を保持してもよい。すなわち、本発明の一態様は、イネウンカ類に寄生する線虫の卵が胚発生しているか否かを判定する判定工程をさらに包含してもよい。 In the embryonic development step, it may be determined whether or not the eggs of the nematode that parasitizes rice planthoppers have developed into embryos, and the eggs may be held until it is determined that embryos have developed. In other words, one aspect of the present invention may further include a determination step of determining whether or not the eggs of the nematode that parasitizes rice planthoppers have developed into embryos.

卵が胚発生しているか否かは、顕微鏡等で卵の状態を確認することにより判定することができる。ここで、図2を参照して、胚発生状態の卵と未発生の卵とを説明する。図2は、採卵後15日間、28℃で保持したウンカシヘンチュウの卵を示す図である。図2の下方に示した黒線は、1mmのスケールを表している。 Whether or not an egg has developed into an embryo can be determined by examining the state of the egg under a microscope, etc. Here, we will explain the difference between an embryonic egg and an undeveloped egg with reference to Figure 2. Figure 2 shows eggs of the planthopper that have been kept at 28°C for 15 days after collection. The black line at the bottom of Figure 2 represents a scale of 1 mm.

図2において、白矢印の卵が、胚発生が完了し、卵内にウンカシヘンチュウが形態形成された孵化前の卵である。そして、図2において、黒矢印の卵が未発生の卵である。図2に示すように、卵が胚発生しているか否かは、卵の状態を確認することにより判定することができる。 In Figure 2, the egg indicated by the white arrow is an egg that has completed embryonic development and has not yet hatched, with the planthopper morphologically formed within the egg. In Figure 2, the egg indicated by the black arrow is an undeveloped egg. As shown in Figure 2, whether an egg has undergone embryonic development can be determined by checking the condition of the egg.

さらに、図3から図5を参照して、胚発生過程について説明する。図3から図5は、ウンカシヘンチュウの胚発生の過程を説明する図である、図3は、採卵日(産下1日以内)のウンカシヘンチュウの卵を示している。図4は、採卵後6日(産下6日から7日)のウンカシヘンチュウの卵を示している。図5は、採卵後9日(産下9日から10日)のウンカシヘンチュウの卵を示している。図3から図5に示した白線は、0.1mmのスケールを表している。 Furthermore, the embryonic development process will be explained with reference to Figures 3 to 5. Figures 3 to 5 are diagrams explaining the embryonic development process of the planthopper hen fly. Figure 3 shows a planthopper hen fly egg on the day of egg collection (within one day of laying). Figure 4 shows a planthopper hen fly egg 6 days after egg collection (6 to 7 days after laying). Figure 5 shows a planthopper hen fly egg 9 days after egg collection (9 to 10 days after laying). The white lines in Figures 3 to 5 represent a scale of 0.1 mm.

図3に示すように、産下1日以内のウンカシヘンチュウの卵は、まだ細胞分裂が始まっていないか、細胞分裂が始まって間もない状態である。図4に示すように、産下6日から7日のウンカシヘンチュウの卵は、卵内に蠕虫状の幼虫が形成されているものも見られる。図5に示すように、産下9日から10日のウンカシヘンチュウの卵は、卵内により細長いウンカシヘンチュウの幼虫が形成されているものも見られる。一例として、ウンカシヘンチュウの卵の孵化は、産下17日~18日目頃から始まる。 As shown in Figure 3, within one day of laying, the eggs of the planthopper hen fly have not yet begun cell division, or have only just begun cell division. As shown in Figure 4, some of the eggs of the planthopper hen fly that are six to seven days old can be seen with worm-like larvae forming inside them. As shown in Figure 5, some of the eggs of the planthopper hen fly that are nine to ten days old can be seen with more slender planthopper larvae forming inside them. For example, hatching of planthopper eggs begins around the 17th to 18th day after laying.

また、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を、13℃以上、30℃以下で所定期間保持した場合に、卵が胚発生していると判定してもよい。一例として、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を28℃で15日間保持した場合に、卵が胚発生していると判定する。図2に示すように、採卵後15日間、28℃で保持した卵は、概ね胚発生が完了している。したがって、13℃以上、30℃以下で所定期間保持した卵は、卵の状態を確認することなく、胚発生していると判定し得る。 In addition, eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers may be determined to have developed when they are kept at a temperature between 13°C and 30°C for a specified period of time. As an example, eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers are determined to have developed when they are kept at 28°C for 15 days. As shown in Figure 2, eggs kept at 28°C for 15 days after collection have largely completed embryonic development. Therefore, eggs kept at a temperature between 13°C and 30°C for a specified period of time can be determined to have developed without checking the condition of the eggs.

(貯蔵工程)
貯蔵工程は、胚発生した卵を、胚発生状態を維持して保存する工程である。貯蔵工程は、上述した胚発生工程により胚発生させた卵を保存してもよいし、上述した胚発生工程に限らず、すでに胚発生した卵を入手して保存してもよい。貯蔵工程は、胚発生した卵を孵化させることなく、胚発生状態のまま保存する。貯蔵工程においては、一例として、卵内に幼虫が形成された卵を孵化する前の状態で保存する。
(Storage process)
The storage step is a step of storing embryonated eggs while maintaining the embryonic state. The storage step may store eggs that have been embryonated by the above-described embryonic development step, or may store eggs that have already been embryonated, without being limited to the above-described embryonic development step. The storage step stores embryonated eggs in the embryonic state without hatching them. In one example of the storage step, eggs in which larvae have formed are stored in the state before hatching.

貯蔵工程においては、胚発生した卵の乾燥を防ぐことが好ましく、一例として、当該卵を水中において保持する。 During the storage process, it is preferable to prevent the embryonated eggs from drying out; for example, the eggs are kept in water.

貯蔵工程においては、胚発生した卵を2℃以上、11℃以下において保存してもよい。これにより、胚発生した卵を、胚発生状態を維持して保存することができる。なお、180日間以上のように長期間保存するような場合には、11℃では数%以上の孵化が起こる場合がある。このため、貯蔵工程が長期間にわたる場合には、胚発生した卵を3℃以上、8℃以下において保存することが好ましく、より好ましくは、4℃以上、8℃以下である。 During the storage process, embryonated eggs may be stored at a temperature between 2°C and 11°C. This allows the embryonated eggs to be stored while maintaining their embryonic state. However, if the eggs are stored for a long period of time, such as 180 days or more, hatching may occur at a temperature of several percent or more at 11°C. For this reason, if the storage process is to be carried out over a long period of time, it is preferable to store the embryonated eggs at a temperature between 3°C and 8°C, and more preferably between 4°C and 8°C.

貯蔵工程においては、卵から孵化してイネウンカ類に寄生する線虫を利用するまで保存し、より確実に卵の孵化を抑えて長期間保存するためには、当該卵を4℃以上、8℃以下において保存する。貯蔵工程においては、胚発生した卵を30日以上保存する。貯蔵工程においては、胚発生した卵を、好ましくは、60日以上、90日以上、180日以上、又は、300日以上保存する。 In the storage process, the eggs are stored until they hatch and become nematodes that parasitize rice planthoppers, and are ready for use. To more reliably prevent egg hatching and preserve the eggs for a long period of time, the eggs are stored at a temperature of 4°C or higher and 8°C or lower. In the storage process, embryonated eggs are stored for 30 days or more. In the storage process, embryonated eggs are preferably stored for 60 days or more, 90 days or more, 180 days or more, or 300 days or more.

本発明の一態様に係る保存方法によれば、胚発生したイネウンカ類に寄生する線虫の卵を貯蔵することにより、孵化率の低下を抑えて長期間卵を保存することができる。本発明の一態様に係る保存方法によれば、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を30日以上貯蔵した場合であっても、高い孵化率が維持されている。本発明の一態様に係る保存方法によれば、さらに、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を300日以上貯蔵した場合であっても、孵化率の低下が抑えられている。したがって、イネウンカ類に寄生する線虫の卵が採卵されてからイネウンカ類の発生時期まで長期間ある場合であっても、高い孵化率を維持して卵を保存することができるので、イネウンカ類の防除に効果的に利用することができる。 According to one aspect of the present invention, by storing embryonic eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers, it is possible to store the eggs for long periods of time while suppressing a decrease in hatching rate. According to one aspect of the present invention, a high hatching rate is maintained even when eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers are stored for 30 days or more. According to one aspect of the present invention, a decrease in hatching rate is also suppressed even when eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers are stored for 300 days or more. Therefore, even when there is a long period of time between the collection of eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers and the emergence of rice planthoppers, the eggs can be stored while maintaining a high hatching rate, making the method effective for controlling rice planthoppers.

〔イネウンカ類の防除方法〕
本発明の一形態に係るイネウンカ類の防除方法は、本発明の一形態に係る保存方法により保存した卵を用いる工程を包含する。
[Method for controlling rice planthoppers]
A method for controlling rice planthoppers according to one embodiment of the present invention includes a step of using eggs preserved by the preservation method according to one embodiment of the present invention.

防除方法においては、一例として、上述した保存方法により保存した卵を、イネウンカ類が生息する水田に散布する。ウンカシヘンチュウの卵を用いることによるイネウンカ類の防除機序の概要について説明する。水田に散布された卵は、水田の田面水中または土壌表面で孵化する。そして、孵化したウンカシヘンチュウの幼虫がイネ株元または田面水上にいるイネウンカ類の幼虫の体内に侵入する。その結果、イネウンカ類の体内でウンカシヘンチュウが成長し、イネウンカ類が不妊化して産卵が抑制される。最終的には、ウンカシヘンチュウがイネウンカ類表皮を破ってその体内から脱出し、イネウンカ類が死傷する。このように、ウンカシヘンチュウの卵を用いることにより、イネウンカ類を防除することができる。 As an example of a control method, eggs preserved using the above-mentioned preservation method are scattered over rice paddies infested with rice planthoppers. The mechanism of rice planthopper control using rice planthopper eggs is outlined below. Eggs scattered over rice paddies hatch in the water or on the soil surface of the paddy field. The hatched rice planthopper larvae then invade the bodies of rice planthopper larvae at the base of rice plants or above the water. As a result, the rice planthopper larvae grow inside the rice planthoppers' bodies, rendering them sterile and suppressing egg laying. Ultimately, the rice planthopper larvae break through the rice planthopper's cuticle and escape from its body, killing or injuring the rice planthopper. In this way, rice planthoppers can be controlled by using rice planthopper eggs.

防除方法においては、上述した保存方法により保存した卵を孵化させて得られたイネウンカ類に寄生する線虫の幼虫を用いてもよい。すなわち、防除方法は、上述した保存方法により保存した卵を孵化させる工程と、孵化して得られた幼虫を、イネウンカ類が生息する水田に散布する工程とを包含してもよい。これにより、孵化した線虫がイネウンカ類体内に侵入し、イネウンカ類の産卵が抑制され、最終的に死傷することにより、イネウンカ類を防除することができる。 The control method may use nematode larvae that parasitize rice planthoppers and are obtained by hatching eggs preserved by the above-mentioned preservation method. That is, the control method may include the steps of hatching eggs preserved by the above-mentioned preservation method and spraying the hatched larvae over paddy fields inhabited by rice planthoppers. This allows the hatched nematodes to invade the bodies of rice planthoppers, inhibiting their egg-laying and ultimately killing them, thereby controlling rice planthoppers.

防除方法は、後述する本発明の一形態に係る農薬の製造方法により製造した農薬を用いてもよい。 The control method may use a pesticide produced by the pesticide production method according to one embodiment of the present invention described below.

本発明の一形態に係る防除方法においては、本発明の一形態に係る保存方法により保存した卵を用いるので、長期間保存した卵であっても孵化率が高く、イネウンカ類を効果的に防除することができる。 The control method according to one embodiment of the present invention uses eggs preserved by a preservation method according to one embodiment of the present invention, so even eggs preserved for a long period of time have a high hatch rate, enabling effective control of rice planthoppers.

〔農薬の製造方法〕
本発明の一形態に係る農薬の製造方法は、本発明の一形態に係る保存方法により保存した卵を用いる工程を包含する。農薬の製造方法により製造する農薬は、イネウンカ類を防除するための生物農薬である。
[Pesticide manufacturing method]
A method for producing a pesticide according to one embodiment of the present invention includes a step of using eggs preserved by the preservation method according to one embodiment of the present invention. The pesticide produced by the method for producing a pesticide is a biological pesticide for controlling rice planthoppers.

農薬の製造方法においては、上述した保存方法により保存したイネウンカ類に寄生する線虫の卵を主成分として含む農薬を製造する。また、農薬の製造方法においては、上述した保存方法により保存したイネウンカ類に寄生する線虫の卵を孵化させて、得られた線虫を農薬に含ませてもよい。さらに、農薬の製造方法においては、イネウンカ類に寄生する線虫の卵と共に、当該卵の乾燥を防ぐ水を、農薬に含ませてもよい。 In the method for producing a pesticide, a pesticide containing, as a main ingredient, eggs of a nematode that parasitizes rice planthoppers and that has been preserved by the preservation method described above is produced. In the method for producing a pesticide, the eggs of a nematode that parasitizes rice planthoppers and that has been preserved by the preservation method described above may also be hatched, and the resulting nematodes may be included in the pesticide. Furthermore, in the method for producing a pesticide, water may also be included in the pesticide, along with the eggs of a nematode that parasitizes rice planthoppers, to prevent the eggs from drying out.

本発明の一形態に係る農薬の製造方法においては、本発明の一形態に係る保存方法により保存した卵を用いるので、長期間保存した卵であっても孵化率が高く、イネウンカ類の防除効果が高い。 In the method for producing a pesticide according to one embodiment of the present invention, eggs preserved by the preservation method according to one embodiment of the present invention are used, resulting in a high hatchability rate even for eggs preserved for a long period of time, and a high effect in controlling rice planthoppers.

〔生物農薬〕
本発明の一形態に係る生物農薬は、胚発生したイネウンカ類に寄生する線虫の卵を複数個パッケージしてなる。生物農薬は、胚発生したイネウンカ類に寄生する線虫の卵を所定の個数集めて1つの容器内に収容(パッケージ)したものである。生物農薬は、上述した本発明の一形態に係る農薬の製造方法により製造されたものであり得る。
[Biopesticides]
A biological pesticide according to one embodiment of the present invention comprises a plurality of packaged eggs of a nematode that parasitizes rice planthoppers during embryonic development. The biological pesticide is obtained by collecting a predetermined number of eggs of a nematode that parasitizes rice planthoppers during embryonic development and storing (packaging) them in a single container. The biological pesticide may be produced by the method for producing a pesticide according to one embodiment of the present invention described above.

生物農薬は、例えば、50万個以上、100万個以上、500万個以上、1000万個以上、5000万個以上、1億個以上、又は、10億個以上の胚発生したイネウンカ類に寄生する線虫の卵をパッケージしてなることが好ましい。また、生物農薬は、イネウンカ類に寄生する線虫の卵と共に、当該卵の乾燥を防ぐ水がパッケージされていてもよい。 The biopesticide preferably comprises packaged eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers, for example, at least 500,000, at least 1 million, at least 5 million, at least 10 million, at least 50 million, at least 100 million, or at least 1 billion embryonic eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers. The biopesticide may also be packaged with water to prevent the eggs from drying out, along with the eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers.

本発明の一形態に係る生物農薬は、胚発生したイネウンカ類に寄生する線虫の卵を含むので、長期間保存した卵であっても孵化率が高く、イネウンカ類の防除効果が高い。また、本発明の一形態に係る生物農薬は、製造後の在庫の保存及び購入した農家における散布までの保存を考慮して、十分長い期間孵化率の低下を防いで卵を保存することができる。すなわち、本発明の一形態に係る生物農薬は有効期間が長い。 The biological pesticide according to one embodiment of the present invention contains eggs of nematodes that parasitize rice planthoppers in embryonic stages, and therefore has a high hatching rate even when stored for long periods of time, resulting in a high rice planthopper control effect. Furthermore, the biological pesticide according to one embodiment of the present invention can store eggs for a sufficiently long period of time without a decline in hatching rate, taking into account the storage of inventory after production and storage until spraying at farms where the eggs are purchased. In other words, the biological pesticide according to one embodiment of the present invention has a long shelf life.

本発明は上述した各実施形態に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。 The present invention is not limited to the above-described embodiments, and various modifications are possible within the scope of the claims. Embodiments obtained by appropriately combining the technical means disclosed in different embodiments are also included in the technical scope of the present invention.

(1)ウンカシヘンチュウの卵の保存方法の比較
ウンカシヘンチュウの卵の孵化率について、本発明の一形態に係る保存方法と従来の方法とで比較した。
(1) Comparison of methods for preserving eggs of the planthopper The hatching rate of eggs of the planthopper was compared between a preservation method according to one embodiment of the present invention and a conventional method.

5月に水田土壌から採集したウンカシヘンチュウを、採集した土壌中において、2カ月程度雌雄混合で保存(20℃)した。雌個体を取り出し、水道水3~4ml程度を入れた12ウェルプレートの各ウェルに、雌個体1頭ずつ入れた。12ウェルプレートを28℃に静置し、産卵及び産下された卵の発生を実体顕微鏡下で確認した。受精卵の場合、通常翌日には2分割以上の状態になった。 Plantworms collected from paddy field soil in May were stored (at 20°C) in the soil where they were collected, with males and females mixed, for approximately two months. Female individuals were removed and placed one per well of a 12-well plate containing approximately 3-4 ml of tap water. The 12-well plate was left standing at 28°C, and oviposition and development of the laid eggs were confirmed under a stereomicroscope. Fertilized eggs usually had divided into two or more by the next day.

数日間受精卵を産下することを確認した後、受精卵を産下した雌個体を内径60mm程度のプラスチック容器に移し、集団で採卵した。産卵確認開始から5日目に、雌個体17頭をプラスチック容器に移し、6日目に雌個体3頭追加、7日目に雌個体1頭追加、8日目に雌個体2頭追加し、6日目から11日目にかけて得られた卵を保存試験に供試した。 After confirming that they were laying fertilized eggs for several days, the females that had laid fertilized eggs were transferred to a plastic container with an inner diameter of approximately 60 mm, and eggs were collected in groups. Five days after egg laying was confirmed, 17 females were transferred to the plastic container, and three more females were added on the sixth day, one on the seventh day, and two on the eighth day. Eggs obtained between the sixth and eleventh days were used for storage tests.

プラスチック容器の裏面に放射状に16分割する線をあらかじめ引いておいて、産卵数を計数した。当該試験では1日の採卵数が最低で1,700卵必要なため、2,000卵以上得られ始めた日から以下の工程を実施した。 Lines were drawn radially on the back of the plastic container, dividing it into 16 sections, and the number of eggs laid was counted. Since this test required a minimum of 1,700 eggs to be collected per day, the following process was carried out from the day when more than 2,000 eggs were collected.

なお、同じ採集地由来の別個体で事前に調査した産卵数は、多くても80卵/日程度であった。そのため、より多数の卵を得るために、保存試験のための採卵を始めた後にも受精卵を産下した雌個体を追加した。 In addition, a previous survey of another individual from the same collection site showed that the maximum egg production was around 80 eggs per day. Therefore, in order to obtain a larger number of eggs, additional female individuals that laid fertilized eggs were added even after egg collection for the storage test had begun.

保存試験に供した卵数は以下の通りであった:
1日目(産卵確認開始6日目) 2,254卵;
2日目 2,616卵;
3日目 2,438卵;
4日目 3,558卵;
5日目 3,280卵;
6日目(産卵確認開始11日目) 3,488卵。
The number of eggs used in the storage test was as follows:
Day 1 (6th day since egg laying was confirmed): 2,254 eggs;
Day 2: 2,616 eggs;
Day 3: 2,438 eggs;
Day 4: 3,558 eggs;
Day 5: 3,280 eggs;
Day 6 (11th day since egg laying began): 3,488 eggs.

保存試験のための採卵を始めてから、1日毎に雌個体を別のプラスチック容器に移し、容器中の卵を計数し、約100~200卵を6ウェルプレートのウェル1に移した。ウェルプレートをナイロン袋に入れて密閉し、全暗条件の28℃恒温器に静置した。残卵の1/4を密閉できるプラスチック容器に入れて8℃、1/4を同様に4℃に静置した。さらに1/4ずつ同様のプラスチック容器2個に入れ、28℃の恒温器に静置した。翌日、約100~200卵を同じ6ウェルプレートのウェル2に移し、以下同様に行なった。さらに、3日目に、約100~200卵を同じ6ウェルプレートのウェル3に移し、以下同様におこなった。この操作を6日間繰り返し、計6反復(1ウェルプレート)とした。 After egg collection for the storage test began, females were transferred to a separate plastic container each day, the eggs in the container were counted, and approximately 100-200 eggs were transferred to well 1 of a six-well plate. The well plate was placed in a nylon bag, sealed, and placed in a 28°C incubator under completely dark conditions. One-quarter of the remaining eggs were placed in a sealable plastic container and placed at 8°C, and the other quarter was similarly placed at 4°C. Another quarter of each was placed in two similar plastic containers and placed in a 28°C incubator. The next day, approximately 100-200 eggs were transferred to well 2 of the same six-well plate, and the same procedure was repeated. On the third day, approximately 100-200 eggs were transferred to well 3 of the same six-well plate, and the same procedure was repeated. This procedure was repeated for six days, for a total of six replicates (one well plate).

卵を入れた6ウェルプレートは、毎日実体顕微鏡下で観察し、孵化した個体を計数した(比較例3:無処理区)。孵化幼虫は非常に活発に泳ぐので、昆虫標本用針(00号又は微針)を割りばし等の先端に付けた柄付針を作成し、柄付針で線虫を吊り上げ、別の容器に移すことによって孵化個体数を計数した。各ウェルについて、85日間孵化経過を観察した。卵をウェルに分注後、概数を計数し、少ない場合は適宜増量した。各反復の最終日に未孵化卵を計数し、孵化卵数と合わせて孵化率を計算した。6ウェルプレートの裏面には、計数のため、あらかじめ8×8の格子線を引いておいた。 The six-well plates containing the eggs were observed under a stereomicroscope every day, and the number of hatched individuals was counted (Comparative Example 3: Untreated group). Because hatched larvae are very active swimmers, an 8x8 grid was created by attaching an insect specimen needle (No. 00 or fine needle) to the tip of a disposable chopstick or similar item. The nematodes were lifted up with the needle and transferred to another container, and the number of hatched individuals was counted. The hatching process for each well was observed for 85 days. After dispensing the eggs into the wells, an approximate number was counted, and if the number was low, the amount was increased as appropriate. On the final day of each replication, the number of unhatched eggs was counted, and the hatching rate was calculated based on the number of hatched eggs. An 8x8 grid had been drawn on the back of the six-well plate in advance for counting purposes.

28℃に入れた2個の容器は、28℃保存15日目にそれぞれ4℃(実施例1)及び8℃(実施例2)の恒温器に移した。 The two containers stored at 28°C were transferred to incubators at 4°C (Example 1) and 8°C (Example 2), respectively, on the 15th day after storage at 28°C.

4℃(比較例2)及び8℃(比較例1)に保存した容器は、低温保存開始30日、90日、180日、300日後に、それぞれ100~200卵を6ウェルプレートに移し、28℃恒温器に静置した。この操作を保存期間ごとに6日間繰り返し、保存期間ごとに6反復(ウェルプレート1枚)とした。 For the containers stored at 4°C (Comparative Example 2) and 8°C (Comparative Example 1), 100-200 eggs were transferred to a 6-well plate 30, 90, 180, and 300 days after the start of low-temperature storage, and then placed in a 28°C incubator. This procedure was repeated for 6 days for each storage period, resulting in 6 replicates (one well plate) for each storage period.

採卵後冷蔵保存した卵は55日間、採卵後28℃15日静置後冷蔵保存した卵は40日間、孵化個体数を上述した手順で計数した。 The number of hatched individuals was counted using the procedure described above for 55 days for eggs stored in a refrigerator after collection, and for 40 days for eggs stored in a refrigerator after being left at 28°C for 15 days after collection.

なお、無処理区(比較例3)ウェルプレート1枚、4℃保存(比較例2)、8℃保存(比較例1)、28℃15日間+4℃保存(実施例1)、28℃15日間+8℃保存(実施例2)の各処理密閉容器6個、各処理後孵化試験用ウェルプレート4枚であった。 The samples included one well plate for the untreated group (Comparative Example 3), six sealed containers for each of the treatments: storage at 4°C (Comparative Example 2), storage at 8°C (Comparative Example 1), storage at 28°C for 15 days + 4°C (Example 1), and storage at 28°C for 15 days + 8°C (Example 2), and four well plates for the hatching test after each treatment.

ウェルプレートは、Corning IncorporatedのCostar細胞培養処理マルチウェルプレートを用いた。12ウェルプレートを個体別産卵確認に使用し、6ウェルプレートを孵化試験に使用した。サンプラテック社製の型式60丸-1(85ml、径60×34mm)(ポリスチレン製)を、採卵の際の容器として使用した。Deltalab社製の型式2840(20ml、径34×43ml)(ポリプロピレン製)のセキュリティークリーンコンテナを卵の保存の際の密閉容器として使用した。ウェルプレートやプラスチック容器に卵が付着することがあるので、卵を分注するときにはしっかりとピペッティングを行い、卵を懸濁した。 Corning Incorporated Costar cell culture-treated multiwell plates were used as well plates. 12-well plates were used to confirm individual egg laying, and 6-well plates were used for hatching tests. Sample Tech Model 60 Maru-1 (85 ml, diameter 60 x 34 mm) (made of polystyrene) was used as the container for egg collection. Deltalab Model 2840 (20 ml, diameter 34 x 43 ml) (made of polypropylene) security clean container was used as the airtight container for egg storage. Because eggs may adhere to well plates and plastic containers, the eggs were pipetted firmly when dispensed to suspend them.

結果を表1に示す。なお、表1における実施例1及び2、比較例1~3の結果は、n=6の平均値である。比較例4として、非特許文献1のデータ(n=6)を引用した。
The results are shown in Table 1. The results of Examples 1 and 2 and Comparative Examples 1 to 3 in Table 1 are average values of n=6. For Comparative Example 4, data (n=6) from Non-Patent Document 1 was cited.

表1に示すように、実施例1及び2においては、保存180日を過ぎても、80%以上の高い孵化率が維持されており、保存300日を過ぎても孵化率の低下が抑えられていた。一方で、比較例1及び2では、保存30日で孵化率が大きく低下していた。比較例4は、保存30日の孵化率は高いが、その後低下し、採卵後180日では大きく低下していた。比較例3では、実施例1及び2とほぼ同等の卵が発生したが、孵化しない卵が多数見られた。胚発生後に低温保存することにより、孵化率が向上する可能性が示唆された。 As shown in Table 1, in Examples 1 and 2, a high hatching rate of over 80% was maintained even after 180 days of storage, and the decline in hatching rate was suppressed even after 300 days of storage. On the other hand, in Comparative Examples 1 and 2, the hatching rate dropped significantly after 30 days of storage. In Comparative Example 4, the hatching rate was high after 30 days of storage, but then dropped, and was significantly lower by 180 days after egg collection. In Comparative Example 3, eggs hatched at a rate roughly equivalent to that of Examples 1 and 2, but many eggs did not hatch. This suggests that low-temperature storage after embryo development may improve the hatching rate.

胚発生したウンカシヘンチュウの卵を保存することにより、孵化率の低下を抑えて長期間保存できることが示された。 It has been shown that by storing embryonic planthopper eggs, it is possible to store them for long periods of time without reducing the decline in hatchability.

(2)13℃において保存中のウンカシヘンチュウの卵の発生及び孵化について
ウンカシヘンチュウの卵を確実に長期間保存するために、13℃において保存中の卵の発生及び孵化について、調査した。ウンカシヘンチュウの冬季から早春における産卵可能性及び25℃における孵化開始までの期間を調査するために行った採卵試験において得られた卵を用いた。なお、本試験には、12月に水田土壌から採集したウンカシヘンチュウを用いた。
(2) Development and hatching of Henkel eggs stored at 13°C In order to ensure the long-term storage of Henkel eggs, we investigated the development and hatching of eggs stored at 13°C. Eggs were used that were obtained in an egg collection test conducted to investigate the egg-laying potential of Henkel eggs from winter to early spring and the period until hatching begins at 25°C. For this test, Henkel eggs collected from paddy field soil in December were used.

採集後に18℃の土壌中において保存していた雌成虫10頭を、1月下旬に、12ウェルプレートの各ウェルに1頭ずつ3~4mlの水道水とともに入れ、25℃に静置した。毎日、実体顕微鏡下で産卵の有無を確認し、産卵した個体は新たなウェルに移し、1日ごとの採卵を3月中旬まで継続した。 Ten adult females, which had been stored in soil at 18°C after collection, were placed in each well of a 12-well plate in late January, along with 3-4 ml of tap water, and left to stand at 25°C. Every day, the presence or absence of eggs was checked under a stereomicroscope, and individuals that had laid eggs were transferred to new wells. Egg collection continued daily until mid-March.

産下された卵を含むウェルのうち、3月3日から18日の10ウェルを選び、採卵日翌日に発生が始まっている卵数を計数し、その後13℃において保存した。保存開始後8月18日まで、数日から10日ごとに孵化個体数を計数した。その後、9月12日に孵化個体数を計数した。結果を表2に示す。
Of the wells containing laid eggs, 10 wells from March 3rd to 18th were selected, and the number of eggs that had begun to develop was counted the day after egg collection, and then stored at 13°C. From the start of storage until August 18th, the number of hatched individuals was counted every few to 10 days. Thereafter, the number of hatched individuals was counted again on September 12th. The results are shown in Table 2.

各ウェルとも、6月20日(保存期間:93日から107日)までは孵化は観察されなかったが、次の調査日6月30日から孵化個体が観察されるようになった。また、調査日9月12日までの累積孵化率は30%から70%となった。このように、13℃でも卵の発生が進行する可能性があることが示された。また、卵を180日以上保存するような場合には、13℃における保存でも孵化が進んでしまう可能性があることが示された。 No hatching was observed in any of the wells until June 20th (storage period: 93 to 107 days), but hatched individuals began to be observed from the next inspection date, June 30th. Furthermore, the cumulative hatching rate up to the inspection date, September 12th, rose from 30% to 70%. This demonstrates that egg development can occur even at 13°C. Furthermore, it has been shown that when eggs are stored for 180 days or more, hatching can occur even at 13°C.

(3)11℃におけるウンカシヘンチュウの卵の保存について
ウンカシヘンチュウの卵をさらに確実に長期間保存するために、11℃において保存中のウンカシヘンチュウの卵の孵化について、調査した。ウンカシヘンチュウの冬季から早春における産卵可能性を調査するために行った採卵試験において得られた卵を用いた。なお、本試験には、2月に水田土壌から採集したウンカシヘンチュウを用いた。
(3) Storage of Henkel eggs at 11°C In order to store Henkel eggs for a longer period of time more reliably, we investigated the hatching of Henkel eggs stored at 11°C. We used eggs obtained in an egg collection test conducted to investigate the egg-laying potential of Henkel eggs from winter to early spring. For this test, we used Henkel eggs collected from paddy field soil in February.

採集した雌成虫10頭を、12ウェルプレートの各ウェルに1頭ずつ3~4mlの水道水とともに入れ、28℃に静置した。毎日、実体顕微鏡下で産卵の有無を確認し、産卵した個体は新たなウェルに移し、1日ごとの採卵を3月下旬まで継続した。 Ten collected adult females were placed in each well of a 12-well plate, one per well, along with 3-4 ml of tap water, and left to stand at 28°C. Every day, the presence or absence of egg laying was checked under a stereomicroscope, and individuals that had laid eggs were transferred to new wells. Egg collection continued daily until late March.

産下された卵を含むウェルのうち、3月10日から15日のウェルを選び、採卵後28℃において15日間経過後に線虫が形成された卵数を計数し、その後11℃において冷蔵保存した。保存開始後8月18日まで、数日から10日ごとに孵化個体数を計数した。その後、9月12日に孵化個体数を計数した。結果を表3に示す。
Wells containing laid eggs were selected from March 10th to 15th, and the number of eggs containing nematodes was counted 15 days after collection at 28°C. The wells were then refrigerated at 11°C. The number of hatched individuals was counted every few days to 10 days from the start of storage until August 18th. The number of hatched individuals was then counted again on September 12th. The results are shown in Table 3.

各ウェルとも、8月18日(保存期間:141日から146日)までは孵化率は6%以下であったが、9月12日の累積孵化率が30%を超えるケースも観察された。このように、卵を180日以上保存するような場合には、11℃における保存でも十分ではない可能性がある。より確実に長期間の保存卵数を保証するためには、8℃以下の保存が望ましいことが示された。なお、本試験と同様に得られた卵について13℃保存試験も実施したが、151日から158日の保存で、15~79%(平均53%)の孵化率が観察された。 In each well, the hatch rate was below 6% until August 18th (storage period: 141 to 146 days), but there were cases where the cumulative hatch rate exceeded 30% by September 12th. As such, it is possible that storage at 11°C may not be sufficient when storing eggs for 180 days or more. This indicates that storage at 8°C or below is preferable to more reliably guarantee the number of eggs stored over a long period of time. Eggs obtained in the same manner as in this test were also subjected to a 13°C storage test, and hatch rates of 15-79% (average 53%) were observed after 151 to 158 days of storage.

本発明は、農業分野、農薬分野等において利用することができる。 The present invention can be used in the fields of agriculture, pesticides, etc.

Claims (8)

イネウンカ類に寄生する線虫の卵を保存する方法であって、
卵内に幼虫が形成された状態に胚発生した前記卵を、2℃以上、11℃以下において、胚発生状態を維持して保存する貯蔵工程を包含する、方法。
A method for preserving eggs of nematodes parasitic on rice planthoppers, comprising the steps of:
The method includes a storage step of storing the eggs that have developed into embryos with larvae formed within the eggs at a temperature of 2°C or higher and 11°C or lower, while maintaining the embryonic development state.
前記貯蔵工程において、胚発生した前記卵を4℃以上、8℃以下において保存する、請求項1に記載の方法。 The method of claim 1, wherein the embryonated eggs are stored at a temperature of 4°C or higher and 8°C or lower during the storage step. 前記貯蔵工程において、胚発生した前記卵を30日以上保存する、請求項1又は2に記載の方法。 The method of claim 1 or 2, wherein the embryonated eggs are preserved for 30 days or more in the storage step. 前記卵を胚発生させる胚発生工程をさらに包含する、請求項1から3のいずれか1項に記載の方法。 The method of any one of claims 1 to 3, further comprising an embryogenesis step of causing the egg to develop into an embryo. 前記胚発生工程において、前記卵を13℃以上、30℃以下に保持する、請求項4に記載の方法。 The method of claim 4, wherein the eggs are maintained at a temperature of 13°C or higher and 30°C or lower during the embryo development step. 請求項1から5のいずれか1項に記載の方法により保存した卵を用いる工程を包含する、イネウンカ類の防除方法。 A method for controlling rice planthoppers, comprising a step of using eggs preserved by the method of any one of claims 1 to 5. 請求項1から5のいずれか1項に記載の方法により保存した卵を用いる工程を包含する、農薬の製造方法。 A method for producing a pesticide, comprising a step of using eggs preserved by the method of any one of claims 1 to 5. 2℃以上、11℃以下において保存されている、卵内に幼虫が形成された状態に胚発生した、イネウンカ類に寄生する線虫の卵を複数個パッケージしてなる、
生物農薬。
The product is a package of eggs of a nematode parasitic on rice planthoppers, which have been stored at a temperature of 2°C or higher and 11°C or lower and have developed into a state in which larvae have been formed within the eggs.
Biological pesticides.
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