JP7803570B2

JP7803570B2 - マルチアゴニストおよびその使用

Info

Publication number: JP7803570B2
Application number: JP2023571479A
Authority: JP
Inventors: ホアン，リアン; カオ，チュンライ; デン，フイシァン; シウ，チュイ; ヘ，シィウユイ; リウ，シャオシャオ; シェ，シィン
Original assignee: United Bio Technology Hengqin co ltd
Current assignee: United Bio Technology Hengqin co ltd
Priority date: 2021-05-26
Filing date: 2022-05-18
Publication date: 2026-01-21
Anticipated expiration: 2042-05-18
Also published as: CN117062618A; CN117062618B; EP4353249A1; US20250129135A1; WO2022247701A1; AU2022280225A1; AU2025279664A1; ZA202310867B; JP2025143457A; AU2022280225B2; CA3219647A1; JP2024523949A; KR20240013798A; EP4353249A4; CN121574227A

Description

本発明は、薬学的分野におけるポリペプチド化合物およびその使用に関する。より具体的には、本発明は、グルカゴン様ペプチド－１受容体（ＧＬＰ－１Ｒ）、グルコース依存性インスリン分泌促進ポリペプチド受容体（ＧＩＰＲ）、およびグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）に対するトリプルアゴニスト活性を有するポリペプチド化合物、ならびにメタボリックシンドロームの治療におけるその使用に関する。

ＩＩ型糖尿病および肥満は、ヒトの健康に影響を及ぼす世界的疾患にますますなりつつある。肥満は、糖尿病、高血圧症、心臓疾患、脂質異常症、脂肪肝疾患、アテローム性動脈硬化症、関節炎、脳卒中、神経変性疾患等の多くの慢性疾患の主因であり、糖尿病は、心血管および脳血管疾患ならびに他の合併症にもつながり得る。現在、市場に出回っている血糖降下薬のほとんどは、血糖を制御する効果を有するのみであり、肥満患者の体重を改善し得ない。一部の薬物は、体重を増加させる副作用さえ有する。それゆえ、血糖を低下もさせかつ体重を改善もさせることができ、ほとんどの肥満のおよびＩＩ型糖尿病の人々の必要に応える複数の有益な効果を含有する薬物を開発する緊急の必要性が依然としてある。

インクレチンは、通常の生理学的食刺激の後に腸から分泌されるポリペプチドホルモンの１種である。初期の調査は、それが、食事の後にグルコースレベルが上昇するにつれて、膵島β－細胞を刺激してインスリンを分泌し得、グルコース恒常性を調節し、膵島β－細胞を保護し、食欲を阻害しかつ胃内容排出を遅延させることによって体重を低下させ得ることを見出している。ＧＬＰ－１およびＧＩＰは、現在、膵臓刺激ホルモンの２種のタイプとして発見されている。

ＧＬＰ－１は、３１個のアミノ酸を有するポリペプチドであり、腸粘膜Ｌ細胞においてグルカゴン遺伝子によって発現され、ＧＬＰ－１受容体（ＧＬＰ－１Ｒ）に主に作用し、インスリン分泌を刺激し、グルカゴン分泌を阻害し、膵島β－細胞を保護し、血中グルコース恒常性を調節する生理学的機能を有し、一方で中枢神経系シグナル伝達経路を通じて食物摂取および胃内容排出を阻害し、満腹感を増加させ、ゆえに体重を低下させる。エクセンディン－４は、アフリカ毒トカゲの唾液腺から抽出されたＧＬＰ－１類似体であり、それは、より強いＧＬＰ－１受容体活性化および同様のＧＬＰ－１効果を呈する。天然ＧＬＰ－１と比較して、エクセンディン－４は、ＤＰＰ－４に対するより強い抵抗性、およびその体内におけるより長い血漿中半減期を有する。

ＧＩＰは、小腸粘膜Ｋ細胞から産生される、４２個のアミノ酸を有する単鎖ポリペプチドであり、膵島細胞および脂肪細胞におけるＧＩＰ受容体（ＧＩＰＲ）に主に作用する。ＧＩＰグルコース依存性インスリン分泌は、膵島β－細胞品質を増強し、インスリン分泌を刺激し、胃酸分泌を阻害し、胃蠕動を減速させる。加えて、それは、脂肪組織細胞による脂肪酸の取り込みおよび利用も刺激する。ＧＩＰは、骨芽細胞分化を促進する生理学的効果も有し、骨芽細胞アポトーシスを阻害し、骨吸収を阻害し、骨ミネラル密度を増加させ、骨を保護する。

ＧＣＧは、２９個のアミノ酸を含有するポリペプチドであり、膵島α－細胞においてグルカゴン始原遺伝子によって発現されかつ分泌され、それは、肝臓および腎臓に分布したグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）に主に作用し、肝臓グリコーゲン破壊を刺激し、血糖を上昇させ、リパーゼを活性化し、脂肪分解を促進し、一方で肝臓脂肪合成を阻害し、脂肪酸酸化を強化する。研究結果は、ＧＣＧが、食物摂取を低下させる、脂肪組織のエネルギー消費を増加させる、および体脂肪を低下させることに対してある特定の効果を有することを示す。血糖を上昇させるＧＣＧの適当な効果は、インスリンの調節に関するフィードバックを提供し得、血糖降下事象の発生を低下させ得る。

インクレチンの効果を目指して、エキセナチド、リセナチド（Ｌｉｓｅｎａｔｉｄｅ）、リラグルチド、デュラグルチド、およびセマグルチド等のＧＬＰ－１受容体アゴニストが、ＩＩ型糖尿病の治療のための開発に成功している。加えて、リラグルチドが、体重喪失のための開発に成功しており、セマグルチドも、肥満兆候に関する臨床研究を受けているところである。ＧＬＰ－１類似体の利点は、それらが、血中グルコースを低下させ、心血管有益性および体重管理効果も有し得ることである。しかしながら、現時点で、単一のＧＬＰ－１受容体アゴニストの体重喪失は、依然として１０％未満であり、明白な用量関連胃腸副作用（主に、吐き気、嘔吐、下痢）がある。肥満性ＩＩ型糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患／非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＦＬＤ／ＮＡＳＨ）、糖尿病、および心血管系リスクを有する肥満等、複合病状を有する代謝疾患に罹患した集団に対する体重喪失のより有効な治療薬に対する緊急の必要性が依然としてある。

ＧＬＰ－１、ＧＩＰ、およびＧＣＧの生理学的効果に従って、現在、多くの調査が、それらの受容体の両方または３種を同時に活性化することが、ＧＬＰ－１Ｒのみを活性化するよりも、糖尿病および肥満に対してより良好な治療効果を達成し得ることを確認している。高血糖症、肥満、およびインスリン抵抗性は、ＧＩＰＲおよびそのシグナル伝達経路の効果を妨げることが報告されている。しかしながら、血糖が減少しかつインスリン抵抗性が改善するにつれて、インスリン分泌を促進することおよび膵島機能を改善することにおけるＧＩＰの役割は改善され得る。グリコーゲン破壊を促進することおよび血糖を上昇させることに加えて、ＧＣＧは、また、脂肪破壊を促進し得、肝臓脂肪合成を阻害し得、血中脂質および体重を低減する効果を発揮し得る。しかしながら、ＧＬＰ－１の相乗的阻害が、その血糖上昇効果を抑制するために要される。それゆえ、ＧＬＰ－１の「先導的」効果を通じて、血糖を低下させることおよびインスリン抵抗性を改善することは、ＧＩＰのインスリン分泌促進機能およびインスリン感作相乗効果をさらに増強し得、膵島機能を改善し得、ＧＣＧの脂質分解効果をさらに増強し得、脂質代謝を改善し得、体重喪失効果を増強し得る。

ＧＬＰ－１／ＧＩＰおよびＧＬＰ－１／ＧＣＧ二重アゴニストに関する臨床データの開示とともに、薬物の臨床的治療効力に対する異なる受容体の間のＧＬＰ－１／ＧＩＰまたはＧＬＰ－１／ＧＣＧ二重アゴニスト活性の分布の影響が次第に明らかになりつつある。

例えば、Ｌｉｌｌｙ製のチルゼパチド（ＬＹ３２９８１７６）の第ＩＩ相臨床調査結果は、１ｍｇ用量のチルゼパチドが体重喪失効果をほとんど有せず、その血糖降下効果は、デュラグルチド１．５ｍｇのものよりも有意に低いことを示した。チルゼパチドの用量を５ｍｇに増加させた場合のみ、それは、１．５ｍｇのデュラグルチドよりも良好な血糖降下および体重喪失効果をもたらし得る。これは、より強いＧＩＰ受容体アゴニスト活性へのチルゼパチドの傾向におそらく起因し、一方でＧＬＰ－１受容体活性ＥＣ_５０は、野生型ＧＬＰ－１活性ＥＣ_５０のほんの約１５％である。最大効力を追求するために、チルゼパチドの投薬量は大幅に増加されており（最高で１５ｍｇの最大用量まで）、それは薬物の安全性リスクを増加させ得る。

他方で、ＧＣＧの強い血糖上昇効果に起因して、ＧＣＧの血糖上昇効果のバランスを取りかつ抑制するために、ＧＬＰ－１／ＧＣＧ受容体ダブルアゴニストにおいて十分なＧＬＰ－１活性が要され、それによって血糖降下効果を保証する。ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ製のＧＬＰ－１／ＧＣＧ受容体ダブルアゴニストＭＥＤＩ０３８２（コタデュチド）におけるＧＬＰ－１およびＧＣＧ受容体の相対活性ＥＣ_５０は、それぞれ２９％および１２．８％であった。２６週間の臨床試験の結果は、リラグルチドと比較して、１００～３００μｇのコタデュチドによる、体重、血中脂質、ならびにＡＬＴおよびＡＳＴのレベルの用量依存的低下、ならびに３００μｇ用量群の効果は、１．８ｍｇリラグルチドのものよりも有意に良好であることを示した。しかしながら、各用量群において、リラグルチドと比較してＨｂＡ１ｃの低下の有意な利点はなかった。さらに、コタデュチドの投薬量が増加するにつれて、３００μｇ群における糖化ヘモグロビンの低減効果は、２００μｇ群におけるものよりも実際に悪かった。これは、用量が増加するにつれての、コタデュチド分子の低いＧＬＰ－１受容体活性におそらく起因し、それは、ＧＣＧの効果を抑制するのに不十分である。

週１回、週２回、または週３回生じる、理想的な長時間作用型ＧＬＰ－１／ＧＩＰ／ＧＣＧトリプル受容体アゴニスト分子は、最も高い考え得るＧＬＰ－１Ｒ／ＧＩＰＲ活性および比較的制御可能なＧＣＧＲ活性を有して、最大の体重喪失および血糖降下効果を保証するはずである。ＣＮ１０４９０２９１９ＡおよびＣＮ１１１０４００２２Ａは、毒トカゲエクソペプチド－４（エクセンディン－４）の構造改変に基づく一連のＧＬＰ－１／ＧＩＰ／ＧＣＧＲトリプルアゴニスト分子を開示し；ＣＮ１０９０７１６２４Ａは、長時間作用型コンジュゲートと組み合わされて分子を形成する一連の環状ペプチド分子を開示する。加えて、ＷＯ２０１５０６７７１６Ａ１、ＷＯ２０１９１２５９２９Ａ１、およびＷＯ２０１９１２５９３８Ａ１は、１７位におけるアミノ酸の側鎖に脂肪酸を連結するあるポリペプチドも開示している。これらのポリペプチドはすべて、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ／ＧＣＧＲのトリプル活性化効果を実証し、週１回の長時間作用潜在性を有する。上記特許文献に開示される分子は、ＧＬＰ－１Ｒ／ＧＩＰＲ／ＧＣＧＲに対する十分に高い活性を同時には呈し得ない。

３種のアゴニスト分子のさらなる開発の余地が依然としてある。

上記の技術的条件を考慮して、本発明は、ＩＩ型糖尿病、肥満、脂質異常症、非アルコール性脂肪肝疾患／非アルコール性脂肪性肝炎、および他の関連代謝疾患の治療において使用され得る、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ／ＧＣＧＲトリプル活性化活性を有する新規のポリペプチド分子を提供する。

本発明は、一般式（Ｉ）：
Ｙ－Ａｉｂ－Ｘ３－ＧＴ－Ｘ６－ＴＳＤＹＳＩ－Ｘ１３－ＬＤＫ－Ｘ１７－ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥ－Ｘ２５－ＬＬＥ－Ｘ２９－Ｘ３０－ＰＳＳ－Ｘ３４－Ｘ３５－ＰＰ－Ｘ３８－Ｓ－Ｒ^１（Ｉ）

（式中、
Ｘ３は、ＱまたはＨであり；
Ｘ６は、Ｆ、αＭｅＦ、またはαＭｅＦ（２Ｆ）であり；
Ｘ１３は、αＭｅＬ、Ｆ、αＭｅＦ、またはＬであり；
Ｘ１７はΨであり；
Ｘ２５は、ＹまたはＦであり；
Ｘ２９は、Ｔ、Ｓ、Ｇ、またはＡｉｂであり；
Ｘ３０は、Ｇ、Ｈ、Ｒ、またはＡｉｂであり；
Ｘ３４は、ＧまたはＡｉｂであり；
Ｘ３５は、Ａ、Ｑ、Ａｉｂ、またはＨであり；
Ｘ３８は、Ａｃ３ｃまたはＰであり；
Ｒ^１は、ＮＨ_２もしくはＯＨ、または薬学的に許容されるその塩および／もしくはエステルであり；
Ψは、以下の一般式（ＩＩ）：
Ｙ－Ｚ（ＩＩ）
によって修飾された側鎖を有するＬｙｓであり、
Ｙは、（ＡＥＥＡｃまたはＧｌｕ）ａ－（ＡＥＥＡｃまたはＧｌｕ）ｂ－（ＡＥＥＡｃまたはＧｌｕ）ｃであり、ａ、ｂ、およびｃは、独立して０または１であり、ａ、ｂ、およびｃは同時にゼロではなく（例示的な実例として、ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ）、Ｙのカルボキシル末端は、Ｌｙｓの側鎖上のε－アミノに接続されており；
Ｚは－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｍ－Ｒ^２であり、ｍは６～２４の整数であり、Ｒ^２は－ＣＯＯＨから選択される）
を有する、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ／ＧＣＧＲトリプルアゴニストポリペプチド化合物、その塩又はその溶媒和物を提供する。

本発明において、実施形態の１つとして、一般式（Ｉ）の化合物は、以下の部位における少なくとも２個の特定のアミノ酸を含む：
Ｘ１３は、ＦまたはαＭｅＦであり；
Ｘ２５はＦであり；
Ｘ２９は、ＴまたはＳであり；
Ｘ３０は、Ｈ、Ｒ、またはＡｉｂであり；
Ｘ３５は、Ｑ、Ａｉｂ、またはＨであり；
Ｘ３８はＡｃ３ｃである。

本発明において、実施形態の１つとして、一般式（ＩＩ）は、ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨである。

本発明において、実施形態の１つとして、化合物は、

から選択される。

本発明において、実施形態の１つとして、化合物は、

からさらに選択される。

本発明において、実施形態の１つとして、天然ＧＬＰ－１と比較した、ＧＬＰ－１受容体安定トランスフェクト細胞の活性化能力の観点において、化合物は、ＧＬＰ－１受容体の活性化能力の観点において少なくとも３０％、好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも８０％、さらに好ましくは少なくとも１００％の相対活性を有する。

本発明において、実施形態の１つとして、天然ＧＩＰと比較した、ＧＬＰ－１受容体安定トランスフェクト細胞の活性化能力の観点において、化合物は、ＧＩＰ受容体の活性化能力の観点において少なくとも１００％、より好ましくは少なくとも１５０％の相対活性を有する。

本発明において、実施形態の１つとして、天然ＧＣＧと比較した、ＧＣＧ受容体安定トランスフェクト細胞の活性化能力の観点において、化合物は、ＧＣＧ受容体の活性化能力の観点において少なくとも１０％、より好ましくは少なくとも３０％の相対活性を有する。

本発明において、実施形態の１つとして、天然ＧＬＰ－１（７－３７）と比較した、膵島組織の代表的な細胞ＲＩＮ－ｍ５Ｆに対する活性化の観点において、化合物は、ＲＩＮ－ｍ５Ｆ細胞に対する活性化の観点において少なくとも６０％、好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも１００％の相対活性を有する。

本発明において、実施形態の１つとして、天然ＧＩＰと比較した、脂肪組織の代表的な細胞３Ｔ３－Ｌ１に対する活性化の観点において、化合物は、３Ｔ３－Ｌ１細胞に対する活性化の観点において少なくとも６０％、好ましくは少なくとも１００％の相対活性を有する。

本発明において、実施形態の１つとして、天然ＧＣＧと比較した、肝臓組織を代表するヒト初代肝臓細胞に対する活性化の観点において、化合物は、肝臓細胞に対する活性化の観点において少なくとも６０％、好ましくは少なくとも１００％の相対活性を有する。

本発明は、有効量の、上記態様のいずれかに従った化合物またはその塩もしくは溶媒和物のいずれか、および薬学的に許容される賦形剤、希釈剤、担体、または賦形剤を含む医薬組成物をさらに提供する。

一態様において、医薬組成物は、注射剤、凍結乾燥粉末剤、錠剤、丸剤、トローチ剤、軟カプセル剤、硬カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤、懸濁剤、またはシロップ剤であり；代替的に、薬物組成物は、マイクロカプセル剤、マイクロスフェア剤、ナノ粒子剤、またはリポソーム剤の形態にある。

一態様において、医薬組成物は、経口投与、吸入投与、または非経口投与に使用され、非経口投与は、腹腔内、筋肉内、動脈内、静脈内、皮下、または皮内注射投与から選択される。

一態様において、医薬組成物は、少なくとも１日１回、週１回、２週間に１回、または月１回の頻度で投与される。

一態様において、医薬組成物は、抗糖尿病活性化剤（インスリンおよびその類似体、ビグアニド、スルホニル尿素、チアゾリジンジオン、α－グルコシダーゼ阻害剤、ＤＰＰ－４阻害剤、ＳＧＬＴ２阻害剤、二重ＳＧＬＴ１／ＳＧＬＴ２阻害剤、ＧＬＰ－１受容体アゴニスト、アミリンおよびその類似体等）、ＧＩＰ受容体アゴニスト、ＧＣＧ受容体アゴニストまたはアンタゴニスト、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体アゴニスト、ＧＬＰ－１／ＧＣＧ受容体アゴニスト、ＧＩＰ／ＧＣＧ受容体アゴニスト、ＦＧＦ－２１およびその類似体、コレシストキニンＢ（ＣＣＫＢ）およびその類似体、ＰＹＹ（３－３６）およびその類似体、レプチンおよびその類似体、カルシトニンおよびその類似体、脂質調節活性薬、ＰＰＡＲ－α、β、δアゴニストまたは調節剤、抗血小板凝集活性化剤、ＰＣＳＫ９阻害剤、リパーゼ阻害剤、抗肝臓線維化または抗肝硬変活性化剤、抗炎症活性化剤を含めた、治療のための以下の活性物質の少なくとも１種との組み合わせでも使用され得る。実施形態の１つとして、抗糖尿病活性化剤は、インスリンおよびその類似体、ビグアニド、スルホニル尿素、チアゾリジンジオン、α－グルコシダーゼ阻害剤、ＤＰＰ－４阻害剤、ＳＧＬＴ２阻害剤、二重ＳＧＬＴ１／ＳＧＬＴ２阻害剤、ＧＬＰ－１受容体アゴニスト、またはアミリンおよびその類似体を含む。

インスリン分泌を促進するおよび血糖を低減するための薬物の調製における、本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物のいずれか１種、あるいは医薬組成物のいずれか１種の適用。

摂食を阻害する、胃内容排出を遅延させる、エネルギー消費を増加させる、および体重を低下させるための薬物の調製における、本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物のいずれか１種、あるいは医薬組成物のいずれか１種の適用。

膵島β－細胞アポトーシスを低下させる、膵島β－細胞数を増加させる、および膵島細胞の機能を改善するための薬物の調製における、本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物のいずれか１種、あるいは医薬組成物のいずれか１種の適用。

血中脂質を改善する、肝臓脂肪蓄積を低下させる、肝臓炎症の発症を阻害する、ならびに非アルコール性脂肪肝疾患を阻止するおよび治療するための薬物の調製における、本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物のいずれか１種、あるいは医薬組成物のいずれか１種の使用。

脳神経の成長を促進する、神経毒性物質を排除する、炎症発症を阻害する、および神経保護効果を発揮するための薬物の調製における、本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物のいずれか１種、あるいは医薬組成物のいずれか１種の使用。

代謝障害および関連合併症の阻止および／または治療のための、好ましくは糖尿病、肥満、または非アルコール性脂肪肝疾患の治療のための薬物の調製における、本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物のいずれか１種、あるいは医薬組成物のいずれか１種の使用。

脂質異常症および関連疾患、ならびにパーキンソン病およびアルツハイマー病を含めた神経変性疾患を治療するための薬物の調製における、本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物のいずれか１種、あるいは医薬組成物のいずれか１種の使用。

内分泌障害に関連した骨疾患、代謝障害、腎臓疾患等を治療するための薬物の調製における、本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物のいずれか１種、あるいは医薬組成物のいずれか１種の使用、骨疾患は、骨粗鬆症および変形性関節症を含む。

本発明の化合物のいずれか１種は、固相合成によって合成され得る。

一態様において、本発明は、以下の配列を有する化合物またはそれらの塩もしくは溶媒複合体を提供する：
化合物１（配列番号１）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＹＬＬＥＴＧＰＳＳＧＡＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物２（配列番号２）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＹＬＬＥＴＨＰＳＳＧＡＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物３（配列番号３）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＹＬＬＥＳＨＰＳＳＧＡＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物４（配列番号４）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩＦＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＹＬＬＥＧＧＰＳＳＧＡＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物５（配列番号５）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩＦＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＧＧＰＳＳＧＡＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物６（配列番号６）
Ｙ－Ａｉｂ－ＨＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＹＬＬＥ－Ａｉｂ－ＨＰＳＳＧＱＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物７（配列番号７）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＹＬＬＥＴＧＰＳＳＧ－Ａｉｂ－ＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物８（配列番号８）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＹＬＬＥＴＧＰＳＳＧＱＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物９（配列番号９）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩＦＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＴＧＰＳＳＧＡＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物１０（配列番号１０）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩＦＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＳＨＰＳＳＧＡＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物１１（配列番号１１）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩＦＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＴＧＰＳＳＧＡＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物１２（配列番号１２）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩＦＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＴＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物１３（配列番号１３）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩＦＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＹＬＬＥＴＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物１４（配列番号１４）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＴＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物１５（配列番号１５）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩＦＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＳＨＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物１６（配列番号１６）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩＦＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥ－Ａｉｂ－ＨＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物１７（配列番号１７）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩＦＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＹＬＬＥＴＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物１８（配列番号１８）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩＦＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＹＬＬＥ－Ａｉｂ－ＨＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物１９（配列番号１９）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＴＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物２０（配列番号２０）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥ－Ａｉｂ－ＨＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物２１（配列番号２１）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩＦＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＧＧＰＳＳＧＱＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物２２（配列番号２２）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＧＧＰＳＳＧＱＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物２３（配列番号２３）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＹＬＬＥＴＧＰＳＳＧＱＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物２４（配列番号２４）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＴＧＰＳＳ－Ａｉｂ－ＨＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物２５（配列番号２５）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＧＲＰＳＳ－Ａｉｂ－ＨＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物２６（配列番号２６）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＳＨＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物２７（配列番号２７）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＦ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＹＬＬＥＳＨＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物２８（配列番号２８）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＳ－Ａｉｂ－ＰＳＳＧＡＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物２９（配列番号２９）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩＦＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＹＬＬＥＳ－Ａｉｂ－ＰＳＳＧＡＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物３０（配列番号３０）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＴ－Ａｉｂ－ＰＳＳＧＡＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物３１（配列番号３１）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥ－Ａｉｂ－ＨＰＳＳＧＡＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物３２（配列番号３２）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩＦＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＹＬＬＥ－Ａｉｂ－ＨＰＳＳＧＡＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物３３（配列番号３３）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＳＨＰＳＳ－Ａｉｂ－ＨＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物３４（配列番号３４）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＹＬＬＥＴＧＰＳＳＧＱＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物３５（配列番号３５）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＹＬＬＥＴＧＰＳＳＧＱＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物３６（配列番号３６）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＧＧＰＳＳ－Ａｉｂ－ＨＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物３７（配列番号３７）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＧＲＰＳＳ－Ａｉｂ－ＨＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物３８（配列番号３８）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＴＧＰＳＳ－Ａｉｂ－ＨＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物３９（配列番号３９）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＴＲＰＳＳ－Ａｉｂ－ＨＰＰＰＳ－ＮＨ_２
化合物４０（配列番号４０）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＳＨＰＳＳ－Ａｉｂ－ＨＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物４１（配列番号４１）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩＬＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＳＨＰＳＳ－Ａｉｂ－ＨＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物４２（配列番号４２）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ－ＴＳＤＹＳＩＬＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＦＬＬＥＳＨＰＳＳ－Ａｉｂ－ＨＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２
化合物４３（配列番号４３）
Ｙ－Ａｉｂ－ＱＧＴ－αＭｅＦ（２Ｆ）－ＴＳＤＹＳＩ－αＭｅＬ－ＬＤＫＫ（ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ）ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥＹＬＬＥＳＨＰＳＳ－Ａｉｂ－ＨＰＰ－Ａｃ３ｃ－Ｓ－ＮＨ_２。

ＧＬＰ－１Ｒ、ＧＩＰＲ、およびＧＣＧＲは、ヒト身体における複数の代謝関連組織、臓器、および細胞において分布しかつ発現されることが見出されている。例えば、ＧＬＰ－１Ｒ、ＧＩＰＲ、およびＧＣＧＲは、膵島組織細胞において同時に発現され、ＧＬＰ－１Ｒは最も豊富な受容体である。例えば、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＩＰＲは、最も高いＧＩＰＲ存在量を有して、脂肪細胞において発現されることが見出されている。ＧＣＧＲの最も高い存在量を有して、肝臓細胞におけるＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲの発現についての報告もある。同時に、本発明者らは、一部の化合物が、単一受容体安定トランスフェクト細胞において、野生型ポリペプチドよりも良好なＥＣ_５０を有し得るものの、前述の組織細胞において、野生型ポリペプチドと比較して、組織細胞を十分に刺激するのにさらにより高い用量が要されることを見出して驚いた。これは、複数の受容体にわたるマルチアゴニスト化合物の分布傾向におそらく関係する。それゆえ、最大治療効果を達成するために、３種のアゴニスト分子は、組織細胞において複数の受容体を十分に活性化し得、少なくとも、組織細胞において高い存在量の受容体を有効に活性化し得るべきであることが要される。それゆえ、様々な組織細胞上の３種のアゴニスト分子のＥＣ_５０は、相当する野生型ポリペプチドＧＬＰ－１／ＧＩＰ／ＧＣＧよりも少なくとも良好であるべきである。

本発明の化合物は、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ／ＧＣＧＲにおける３種の構成要素に対する強い相対活性ＥＣ_５０を有し、相当する標的臓器組織細胞を十分に刺激し得る。

好ましくは、本発明の化合物は、インスリン分泌を促進し得、血糖を低減させ得る。好ましくは、それは、また、採食を阻害し得、胃内容排出を遅延させ得、エネルギー消費を増加させ得、最終的に体重喪失効果を観察し得る。

好ましくは、本発明の化合物は、膵島β－細胞アポトーシスを低下させ得、膵島β－細胞の数を増加させ得、膵島細胞の機能を改善し得る。

好ましくは、本発明の化合物は、また、血中脂質を改善し得、肝臓脂肪蓄積を低下させ得、肝臓炎症の発症を阻害し得、非アルコール性脂肪肝疾患を阻止し得かつ治療し得る。

好ましくは、本発明の化合物は、脳神経の成長を促進し、神経毒性物質を排除し、炎症の発症を阻害し、神経保護的役割を果たすと予想される。

好ましくは、本発明の化合物または組成物は、代謝障害および関連合併症を阻止しかつ／または治療するために使用され得る。それは、好ましくは、糖尿病、肥満、および非アルコール性脂肪肝疾患を治療するために使用される。

好ましくは、本発明の化合物または組成物は、脂質異常症および関連疾患、ならびにパーキンソン病およびアルツハイマー病等の神経変性疾患を治療するために使用され得る。

好ましくは、本発明の化合物または組成物は、内分泌障害に関連した骨疾患、代謝障害、腎臓疾患、ならびに骨粗鬆症および変形性関節症等の他の原因を治療するために使用され得る。

本発明の化合物は、ＧＬＰ－１、ＧＩＰ、およびＧＣＧ受容体に対する有意な刺激効果を有する。

本発明のポリペプチド化合物は、公知の技術的方法により、当業者によって合成され得かつ修飾され得る。例えば、本発明のポリペプチド化合物のポリペプチド配列骨格は、合成等の方法によって調製され得る。

本発明の化合物のペプチド骨格は、少なくとも１つの部位で脂肪酸側鎖基によって化学的に修飾される。好ましくは、化合物は、安定なペプチドα－ヘリックス構造を有し得、アルブミン結合力を増強し得、ペプチド化合物の安定性の改善およびペプチド作用時間の延長を達成する。

本発明の化合物は、ＧＬＰ－１受容体、ＧＩＰ受容体、およびＧＣＧ受容体に対するアゴニスト活性を有する。言及される「アゴニスト活性」とは、特異的受容体細胞を刺激してｃＡＭＰを産生する化合物の能力を指し、それは、宿主細胞、膵臓組織細胞、脂肪細胞、肝臓細胞等においてＧＬＰ－１受容体、ＧＩＰ受容体、またはＧＣＧ受容体を過剰発現するように当業者によって構築され得る。受容体活性化活性は、受容体細胞を刺激する化合物によって産生されるｃＡＭＰのＥＣ_５０値によって測定され得る。ＥＣ_５０値とは、特定の測定システムにおいて、化合物の最大活性の２分の１（５０％活性）に達するために要される薬物濃度値を指す。

具体的な実施形態において、化合物のアゴニスト活性は、特異的天然化合物の相対活性を評価することによって評価され得る。相対活性とは、特異的天然化合物のＥＣ_５０値対試験化合物のＥＣ_５０値の比率のパーセンテージである。

既存の化合物と比較して、本発明によって提供されるＧＬＰ－１／ＧＩＰ／ＧＣＧＲトリプルアゴニストポリペプチド分子は、良好なＧＬＰ－１Ｒ、ＧＩＰＲ、ＧＣＧＲ、および組織細胞相対活性ＥＣ_５０を有する。

定義
「相対活性ＥＣ_５０」とは、相当する野生型陽性ペプチドヒトＧＬＰ－１（７－３７）、ヒトＧＩＰ、およびヒトＧＣＧのＥＣ_５０値対本発明の化合物のＥＣ_５０値の比率を指す。

本発明の化合物配列におけるアミノ酸は、天然アミノ酸または関連アミノ酸変種および／もしくは誘導体を起源とする。言及される天然アミノ酸の略語および記号は、当業者によく知られている一般的法則に基づく。Ａｉｂ、α－ＭｅＦ、α－ＭｅＦ（２Ｆ）、α－ＭｅＬ、およびＡｃ３ｃの化学構造式は、以下のとおりである：

別様に定義されない限り、本明細書において使用されるすべての技術的および科学的用語は、当業者によって共通して理解されるものと同じ意味を有する。矛盾する場合、定義を含む本文書が優先するものとする。好ましい方法および材料が下で記載されるが、本明細書に記載されるものと同様または等価の方法および材料を使用して、本発明を実行し得るまたは試験し得る。本明細書に開示される材料、方法、および例は、単なる例示であり、制限的であることを意図されるわけではない。

本発明において使用される略語の具体的な意味は、以下のとおりである：

Ａｉｂ：α－アミノイソ酪酸
α－ＭｅＦ：α－メチルフェニルアラニン
α－ＭｅＦ（２Ｆ）：α－メチル－２－フルオロフェニルアラニン
α－ＭｅＬ：α－メチルロイシン
Ａｃ３ｃ：１－アミノシクロプロパンカルボン酸
ＡＥＥＡｃ：［２－（２－アミノエトキシ）－エトキシ］－アセチル
ｃＡＭＰ：アデノシンシクロホスフェート
Ｆｍｏｃ：フルオレンメトキシカルボニル
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔブトキシカルボニル
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド
ＨＢＴＵ：ベンゾトリアゾール－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチル尿素ヘキサフルオロホスフェート
Ｔｒｔ：トリフェニルメチル
ｉｖｄｄｅ：１－（４，４－ジメチル－２，６－ジオキソシクロヘキシル）－３－メチル－ブチル
ｔＢｕ：ｔｅｒｔブチル
ＯｔＢｕ：酸素ｔｅｒｔブチル
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
Ｔｉｓ：トリイソプロピルシラン
ＨＰＬＣ／ＭＳ：高速液体クロマトグラフィー／質量分析
ＨＰＬＣ－ＵＶ：高速液体クロマトグラフィーＵＶ
ＩＰＴＧ：イソプロピル－β－Ｄ－チオガラクトシド
Ｔｒｉｓ：トリスヒドロキシメチルアミノメタン（Ｔｒｉｈｙｄｒｏｘｙｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｍｅｔｈａｎｅ）
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン
ＮＭＰ：Ｎ－メチルピロリドン
ＨＥＫ－２９３：ヒト胎児腎臓細胞
ＣＨＯ：チャイニーズハムスター卵巣細胞
ＧＬＰ－１：グルカゴン様ペプチド－１
ＧＩＰ：グルコース依存性インスリン分泌促進ポリペプチド
ＧＣＧ：グルカゴン
ＧＬＰ－１Ｒ：グルカゴン様ペプチド－１受容体
ＧＩＰＲ：グルコース依存性インスリン分泌促進ポリペプチド受容体
ＧＣＧＲ：グルカゴン受容体
ＮＡＦＬＤ：非アルコール性脂肪肝疾患
ＮＡＳＨ：非アルコール性脂肪性肝炎
ＤＭＥＭ：Ｄｕ改善イーグル培地
ＦＢＳ：ウシ胎仔血
ＦＣＳ：仔ウシ血清
Ｐ／Ｓ：ペニシリン／ストレプトマイシン
ＰＢＳ：リン酸緩衝溶液
ＨＢＳＳ：ハンクス緩衝塩溶液
ＥＣ_５０：半効果濃度
ＩＢＭＸ：３－イソブチル－１－メチルキサンチン。

以下の実施形態および実験例は、本発明をさらに例示するために提供されるが、決して本発明の有効な範囲を限定するわけではない。
（実施例１）

ペプチド化合物の合成
本発明の中間体および化合物は、当技術分野において公知の様々な方法により合成され得かつ調製され得る。以下の具体的な実施形態は、本発明の化合物を調製するための化学的合成法の使用を例示する。記載される具体的な各合成ステップを、異なる材料および方法を使用して組み合わせて、本発明の様々な相当する化合物または塩を合成し得る。使用される試薬および原材料は、当業者にとって容易に入手可能である。具体的には、以下の実施形態は、本発明を例示することのみを意図され、決して本発明の範囲を限定するべきではない。

材料：
本発明において使用される材料および試薬はすべて、商品から購入され、合成過程全体において使用される保護的アミノ酸は、以下のとおりである：Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｃ３ｃ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｐｒｏ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｙ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｌｅｕ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｉｌｅ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｌｙｓ（ｉｖｄｄｅ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－α－ＭｅＬｅｕ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－α－ＭｅＰｈｅ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－α－ＭｅＰｈｅ（２Ｆ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｉｂ－ＯＨ、Ｂｏｃ－Ｔｙｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ。

本発明の化合物の合成および調製方法は、化合物１０を例に取って下で例示される（他の化合物の調製は、アミノ酸原材料の合成順序を変化させることのみを要する）。

（１）リンクアミドＭＢＨＡ樹脂前処理：１ｇの乾燥リンクアミドＭＢＨＡ樹脂（置換度Ｓ＝０．２８ｍｍｏｌ／ｇ）を計量し、反応カラムに添加し、１０ｍｌのＤＭＦを添加し、窒素ガスを３０分間吹き付けた。溶媒を除去し、もう１０ｍｌのＤＭＦを添加して、各回に対して１分間を有して３回洗浄し、溶媒を除去した。

（２）保護基Ｆｍｏｃの除去：２０％ピペリジン／ＤＭＦ溶液（１０ｍｌ）を、処理されたリンクアミノ樹脂に添加し、窒素雰囲気下で２０分間放置して反応させ、その間、反応の程度をニンヒドリン比色法を使用してモニターし、樹脂色が青色を示した場合、それはＦｍｏｃの除去の成功を示し、濾過を実施して反応後の溶媒を除去し、ＤＭＦを反応系に添加して樹脂を１分間洗浄し、それを６回繰り返した。

（３）カップリング反応（ペプチド結合形成）：相当するＦｍｏｃ保護アミノ酸溶液（３．０当量）を反応器に添加し、次いでＤＩＥＡ（６．０当量）を添加し、５ｍｌのＤＭＦを反応カラムに添加し、窒素ガスを吹き付け、アミノ酸溶解後にＨＢＴＵ（２．８５当量）に供した。窒素ガスを、樹脂を均一に泡立てるように調整して２５℃で３０分間反応させ、その間、反応の程度をニンヒドリン比色法を使用することによってモニターし、樹脂が無色かつ透明である場合、それはカップリングの成功を示した。反応が完了した後、濾過を実施して溶媒を除去した。ＤＭＦを反応系に添加し、樹脂を撹拌し、１分間洗浄し、それを６回繰り返した。上記ステップを繰り返し、ペプチド鎖合成が完了するまで、相当するアミノ酸溶液を順番に添加した。最後のアミノ酸にＢｏｃ－Ｔｙｒ（ｔＢｕ）－ＯＨをカップリングし、無色かつ透明の樹脂をテトラクロロベンゾキノンで検出することによって、カップリングが完了したことを判断した。側鎖修飾部位のＬｙｓをＦｍｏｃ－Ｌｙｓ（ｉｖｄｄｅ）－ＯＨで置き換えた。化合物１０主ペプチド配列の合成における添加アミノ酸カップリングの配列は、Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｃ３ｃ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｐｒｏ－ＯＨ（２×）、Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｙ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ（２×）、Ｆｍｏｃ－Ｐｒｏ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｙ－ＯＨ（２×）、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｌｅｕ－ＯＨ（２×）、Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｉｌｅ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｉｂ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｌｙｓ（ｉｖｄｄｅ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｌｅｕ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｉｌｅ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｔｙｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－α－ＭｅＦ（２Ｆ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｙ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｉｂ－ＯＨ、Ｂｏｃ－Ｔｙｒ（ｔＢｕ）－ＯＨであった。

（４）Ｌｙｓからの側鎖保護基ｉｖｄｄｅの除去：３％ヒドラジン水和物／ＤＭＦ溶液（１０ｍｌ）を反応カラムに添加し、窒素ガス下で２０分間放置して反応させて、修飾部位Ｌｙｓから側鎖保護基ｉｖｄｄｅを除去した。ニンヒドリン検出樹脂の青色は、完了した除去を示した。除去の成功の後、溶媒を除去し、ＤＭＦを系に添加して１分間洗浄し、溶媒を除去し、そこでは洗浄を６回実施した。

（５）Ｌｙｓ側鎖修飾：ＡＥＥＡｃ（２．０当量）を上記樹脂に添加した。ＤＩＥＡ（４．００当量）を添加し、５ｍｌのＤＭＦを反応カラムに添加した。それに窒素ガスを吹き付け、アミノ酸が溶解した後にＨＢＴＵ（１．９当量）を添加した。窒素ガスを、樹脂を均一に泡立てるように調整して２５℃で１時間反応させた。ニンヒドリン検出樹脂は無色かつ透明であり、完了した反応を示した。反応溶液を除去し、各回に対して１分間を有してＤＭＦ（１０ｍｌ）で６回洗浄した。２０％ピペリジン／ＤＭＦ（１０ｍｌ）を反応カラムに添加し、窒素ガスを２０分間吹き付けてＦｍｏｃ基を除去した。ＤＭＦ（１０ｍｌ）を添加して、各回に対して１分間を有して６回洗浄し、溶媒を除去した。上記ステップに従って、ＡＥＥＡｃ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ、およびＣ_２０モノｔｅｒｔブチルエステルを連続して添加して、カップリング反応を行って、側鎖修飾を完了させた。最後に、樹脂を毎回３分間ＭｅＯＨ（１０ｍｌ）で収縮させ、溶媒を排出し、樹脂を注ぎ出しかつ乾燥させ、使用に備えた。

（６）ペプチド樹脂の後処理：上記の乾燥ペプチド樹脂に、調製された切断試薬（９５％ＴＦＡ：２．５％Ｔｉ：２．５％Ｈ_２Ｏ）を添加し、振とう台において２．５時間振とうして樹脂を切断した。濾過を実施して濾過液を獲得し、それを１０倍容積の氷冷イソプロピルエーテルに添加し、遠心分離し、イソプロピルエーテルで５回洗浄した。２時間の真空乾燥によって、粗ペプチドを獲得した。

（７）粗ペプチド化合物の精製：
獲得されたペプチド粉末を、５０％アセトニトリル／Ｈ_２Ｏ溶液に溶解し、逆相Ｃ１８分取カラム（島津製作所、ＩｎｅｒｔｓｉｌＯＤＳ２０×２５０ｍｍ５ｕｍ）を使用して精製した。初回溶離液として９５％緩衝液Ａ（０．１％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ）および５％緩衝液Ｂ（０．０７５％ＴＦＡ／アセトニトリル）を使用し、緩衝液Ｂの割合を７５％まで次第に増加させて、溶出のために精製を連続的に３０分間ランし、標的ペプチド構成要素を回収した。精製されたペプチド化合物を分析し、分析的ＨＰＬＣ／ＭＳ法によって確認した。獲得されたペプチド化合物の純度は、少なくとも９５％であった。

（実施例２）
ヒトＧＬＰ－１／ＧＩＰ／ＧＣＧ受容体の安定トランスジェニック細胞に対するペプチド化合物の活性試験
まず、ヒトＧＬＰ－１またはＧＣＧ受容体を安定に過剰発現するＨＥＫ－２９３細胞、およびＧＩＰ受容体を安定に過剰発現するＣＨＯ細胞を別個に構築した。前述の細胞のｃＡＭＰシグナル応答レベルを測定することによって、相当する受容体に対する個々の化合物のアゴニスト活性を判定した。細胞内ｃＡＭＰ含有量を、ＨＴＲＦ（ホモジニアス時間分解蛍光）技術に基づき、ＣｉｓｂｉｏＣｏｒｐ．から入手可能な試薬キットを使用して測定した。

ヒトＧＬＰ－１、ＧＩＰ、またはＧＣＧ受容体を安定に過剰発現する凍結された細胞を、急速融解および回復のために、３７℃の定温水槽に入れた。細胞液を、再懸濁のために１０ｍｌのＨＢＳＳに移し、室温で５分間１０００ｒｐｍで遠心分離した。上清を捨て、細胞を１×ＨＢＳＳ（０．１％カゼイン、２５０μＭＩＢＭＸを含有する）に再懸濁し、細胞密度を１．０×１０^５個／ｍＬに調整した。

１０μＬの細胞懸濁液を、３８４ウェルプレートにおける各ウェルに添加した。試験される対象となる化合物を１×ＰＢＳ緩衝液に溶解してストック溶液を調製し、それを３倍で段階的に希釈して、合計１２濃度点の化合物溶液を調製した。ＥＣＨＯ液体移行システムを使用して、１００ｎＬの調製された化合物溶液を、３８４ウェルプレートにおける相当する細胞懸濁液に添加し、１０００ｒｐｍで１分間回転させかつ振とうして均一に混合し、次いで室温で６０分間インキュベートした。薬物インキュベーションが完了した後、１０μＬの検出試薬を各ウェルに添加し、インキュベーションを室温で６０分間キットにおいて実施した。プレートを、ＥｎＶｉｓｉｏｎ多機能酵素リーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）に置き、読み取りを６６５／６１５ｎｍで取得した。ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍ５プロッティングソフトウェアを使用して、化合物濃度応答曲線を作成し、ＥＣ_５０（ｎＭ）値を算出した。

試験化合物の受容体活性化効果に対する陽性対照として天然野生型ヒトＧＬＰ－１（７－３７）、ＧＩＰ、およびＧＣＧを使用して、ＧＬＰ－１受容体細胞に関しては、ヒトＧＬＰ－１（７－３７）のＥＣ_５０値対試験化合物のＥＣ_５０値の比率を算出することによって、試験化合物の相対活性（％）を評価した。
ＧＩＰ受容体細胞に関しては、ヒトＧＩＰのＥＣ_５０値対試験化合物のＥＣ_５０値の比率のパーセンテージを算出することによって、試験化合物の相対活性（％）を評価した。
ＧＣＧ受容体細胞に関しては、ヒトＧＣＧのＥＣ_５０値対試験化合物のＥＣ_５０値のパーセンテージを算出することによって、試験化合物の相対活性（％）を評価した。

表におけるデータは、すべての化合物が、ヒトＧＬＰ－１／ＧＩＰ／ＧＣＧ受容体安定細胞において高い相対活性を呈し得ることを示している。

（実施例３）
ラット膵島腫瘍ＲＩＮ－ｍ５Ｆ細胞に対するペプチド化合物の機能的活性試験
ラット膵島組織に由来するＲＩＮ－ｍ５Ｆ細胞株は、内因性ＧＬＰ－１／ＧＩＰ／ＧＣＧ受容体を主に発現し、ＧＬＰ－１受容体は最も豊富である。本実験は、ＲＩＮ－ｍ５Ｆ細胞に対する、化合物によって産生されたｃＡＭＰレベルを測定した。
凍結されたＲＩＮ－ｍ５Ｆ細胞を、急速融解および回復のために、３７℃の定温水槽に入れた。細胞溶液を、再懸濁のために１０ｍｌのＨＢＳＳに移し、室温で５分間１０００ｒｐｍで遠心分離した。上清を捨て、細胞を１×ＨＢＳＳ（０．１％カゼイン、２５０μＭＩＢＭＸを含有する）に再懸濁し、細胞密度を１．０×１０^５個／ｍＬに調整した。
１０μＬの細胞懸濁液を、３８４ウェルプレートにおける各ウェルに添加した。試験される対象となる化合物を１×ＰＢＳ緩衝液に溶解してストック溶液を調製し、それを３倍で段階的に希釈して、合計１２濃度点の化合物溶液を調製した。ＥＣＨＯ液体移行システムを使用して、１００ｎＬの調製された化合物溶液を、３８４ウェルプレートにおける相当する細胞懸濁液に添加し、１０００ｒｐｍで１分間回転させかつ振とうして均一に混合し、次いで室温で６０分間インキュベートした。薬物インキュベーションが完了した後、１０μＬの検出試薬を各ウェルに添加し、インキュベーションを６０分間実施した。プレートを、ＥｎＶｉｓｉｏｎ多機能酵素リーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）に置き、読み取りを６６５／６１５ｎｍで取得した。ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍ５プロッティングソフトウェアを使用して、化合物濃度－効果曲線を作成し、算出を実施した。

表における本発明の化合物は、膵島腫瘍細胞ＲＩＮ－ｍ５Ｆにおいて高い相対活性を呈し得る。

（実施例４）
３Ｔ３－Ｌ１脂肪細胞に対するペプチド化合物の機能的活性試験
マウス３Ｔ３－Ｌ１前駆体脂肪細胞は、成熟脂肪細胞に分化するように誘導され得る。３Ｔ３－Ｌ１細胞を、４×１０^４個／ｍｌの細胞密度によって９６ウェルプレートに直接接種し、１０％ＦＣＳおよび１％Ｐ／Ｓを含有するＤＭＥＭ培地中で培養し、５％ＣＯ２インキュベーターにおいて３７℃でインキュベートした。細胞が満杯になり互いと接触した後、２０％ＦＢＳ、０．５ｍＭＩＢＭＸ、０．４ｕｇ／ｍＬデキサメタゾン、および５ｕｇ／ｍＬインスリンを含有するＤＭＥＭ分化培地を使用して、３Ｔ３－Ｌ１脂肪細胞の分化を誘導した。５日間の誘導および培養の後、２０％ＦＢＳ、４ｕｇ／ｍｌインスリン、および１０ｕＭロシグリタゾンを含有するＤＭＥＭ培地を使用して、誘導および培養を３日間続けた。次いで、１０％ＦＢＳを含有するＤＭＥＭ培地を使用して、２～３日間培養を続けて、成熟３Ｔ３－Ｌ１脂肪細胞を誘導した。
３Ｔ３－Ｌ１脂肪細胞の誘導された分化および成熟は、脂肪組織細胞と同様に、豊富なＧＩＰ受容体を発現し得る。３Ｔ３－Ｌ１脂肪細胞に対する、化合物によって産生されたｃＡＭＰレベルを、本実験において判定した。試験化合物溶液を、３倍の濃度勾配に従って段階的に希釈して、合計１０連の濃度溶液を獲得した。溶液を添加して、成熟３Ｔ３－Ｌ１脂肪細胞を誘導し、室温で６０分間インキュベートした。薬物インキュベーションの後、キットにおける１０μＬ検出試薬を各ウェルに添加し、室温でもう６０分間インキュベートした。プレートを、ＥｎＶｉｓｉｏｎ多機能酵素リーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）に置いて、６６５／６１５ｎｍにおける読み取りを測定した。ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍ５プロッティングソフトウェアを使用して、化合物濃度－効果曲線を作成し、算出を実施した。

本発明の化合物は、脂肪細胞３Ｔ３－Ｌ１に対して高い相対活性を呈し得る。

（実施例５）
ヒト初代肝臓細胞に対するペプチド化合物の機能的活性試験
ヒト初代肝臓細胞に対する、化合物によって産生されたｃＡＭＰレベルを、本実験において判定した。ヒト初代肝臓細胞をＬｏｎｚａ（細胞製品番号ＨＵＣＰＧ）から購入した。
凍結されたヒト初代肝臓細胞を、急速融解および回復のために、３７℃の定温水槽に入れた。細胞溶液を、再懸濁のために１０ｍｌのＨＢＳＳに移し、室温で５分間１０００ｒｐｍで遠心分離した。上清を捨て、細胞を１×ＨＢＳＳ（０．１％カゼイン、２５０μＭＩＢＭＸを含有する）に再懸濁し、細胞密度を１．０×１０^５個／ｍＬに調整した。
１０μＬの細胞懸濁液を、３８４ウェルプレートにおける各ウェルに添加した。試験される対象となる化合物を１×ＰＢＳ緩衝液に溶解してストック溶液を調製し、それを３倍で段階的に希釈して、合計１２濃度点の化合物溶液を調製した。ＥＣＨＯ液体移行システムを使用して、１００ｎＬの調製された化合物溶液を、３８４ウェルプレートにおける相当する細胞懸濁液に添加し、１０００ｒｐｍで１分間回転させかつ振とうして均一に混合し、次いで室温で６０分間インキュベートした。薬物インキュベーションが完了した後、１０μＬの検出試薬を各ウェルに添加し、インキュベーションを６０分間実施した。プレートを、ＥｎＶｉｓｉｏｎ多機能酵素リーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）に置き、読み取りを６６５／６１５ｎｍで取得した。ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍ５プロッティングソフトウェアを使用して、化合物濃度－効果曲線を作成し、算出を実施した。

表における本発明の化合物は、肝臓細胞に対して高い相対活性を呈し得る。

（実施例６）
インビボ薬力学
高脂肪食誘導性肥満（ＤＩＯ）マウスは、そのすべてが、ヒト身体に類似した非常に重大なメタボリックシンドロームである、肥満、高まった血糖、インスリン抵抗性、および脂質異常等の特徴を有する。Ｃ５７ＢＬ／６ＪＤＩＯマウスにおける体重、食物摂取、血糖、および脂質に対する本発明の化合物の効果を調査した。
５週齢の雄Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（ＳｈａｎｇｈａｉＳｌａｋｅＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＡｎｉｍａｌＣｏｍｐａｎｙから購入した）を、１２時間の明／１２時間の暗循環を有する、病原体フリーでかつ清潔な環境において（２０～２４℃の温度および３０～７０％の相対湿度で）飼育した。それらに、ケージあたり４匹の動物および２週間の適応期間を有して、通常の餌を給餌した。高脂肪食（脂肪由来の６０ｋｃａｌ％のカロリー）を給餌することによって、マウスにおいて肥満を誘導した。１６週間の高脂肪食の給餌の後、ＤＩＯマウスの体重は４１～５５ｇに達し、血中グルコース域は８～１２ｍｍｏｌ／Ｌに達した。各群の動物が同様の平均体重および血中グルコースを有するように、ＤＩＯマウスをそれらの体重および空腹時血中グルコースに従って群（ｎ＝６／群）に無作為に分けた。グループ分けの後、１匹の動物を各ケージにおいて１週間飼育し、その間、動物のそれぞれに、溶媒（１×ＰＢＳ、５ｍｌ／ｋｇ）を皮下（Ｓ．Ｃ．）注射して、実験作業過程にあらかじめ適応させた。
動物の準備後、ビヒクル対照または化合物を動物の群に皮下注射によって投与し、化合物は１×ＰＢＳに溶解され、投薬量は５ｍｌ／ｋｇであり、投与作業は９：００ａｍに開始し、１５日間３日ごとに１回（Ｑ３Ｄ）行われた。実験調査全体を通じて、投与前に動物体重および食物摂取を毎日測定し、投与前の同じ動物の初回体重および食物摂取と比較して、動物体重の変化パーセンテージ（％）および累積食物摂取を算出して、体重および食物摂取の変化に対する化合物の影響を評価した。
実験の終点（１５日目）に、マウスの体重を測定し、次いで、麻酔なしで損傷した尾部の尾端から血液を採取することによって、空腹時血中グルコースを測定した。血液回収の後、動物をＣＯ_２で麻酔し、安楽死させた。次いで、心臓から血液を採取し、血漿を遠心分離によって分離した。血漿を使用して、総コレステロール（ＴＣ）、低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ－Ｃ）、トリグリセリド（ＴＧ）、および血中インスリン含有量を測定した。肝臓をホモジナイゼーションのために分離し、次いで遠心分離して、肝臓におけるトリグリセリド含有量を判定するために上清を獲得した。

すべての結果を平均±ＳＥＭで表現し、結果を、ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍ５ソフトウェアを使用して一元配置ＡＮＯＶＡによって分析し、その後に、ビヒクル対照群と比較したダネットの事後検定が続いた。ｐ＜０．０５レベルでの差を、統計的に有意と見なした。

表６－１および６－２における結果から、本発明の化合物は、体重低下に対して有意な効果を有することが分かる。

表７－１および７－２における結果から、本発明の化合物は、血中脂質を低下させることに対して有意な治療効果を有することが分かる。

表８－１および８－２における結果から、本発明の化合物は、血糖および血中インスリンを低下させることに対して有意な治療効果を有することが分かる。

表９－１および９－２における結果から、本発明の化合物は、肝臓トリグリセリドを低下させることに対して有意な治療効果を有することが分かる。

（実施例７）
化合物のラット薬物動態（ＰＫ）調査
７～９週齢の雄ＳＤラット（２２０～２５０ｇ、３匹のラット／群）を、３０ｎｍｏｌ／ｋｇ化合物の皮下注射に供した。投与の後、０．２５、２、４、８、１２、１６、２４、４８、９６、１２０、および１４４時間の時点で、頸静脈を通じて血液を回収した。血液を処理して血漿サンプルを獲得し、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳを使用して分析した。血中濃度時間曲線を、ＰｈｏｅｎｉｘＷｉｎＮｏｎｌｉｎバージョン６．３ソフトウェア（ノンコンパートメントモデル）を使用して分析し、ＰＫパラメーターおよび半減期を算出した。

上記の方法を使用して算出されたＰＫパラメーターは、表１０に示されている。

表１０は、個々の化合物が、延長した薬物動態分布を呈することを示している。

Claims

一般式（Ｉ）：
Ｙ－Ａｉｂ－Ｘ３－ＧＴ－Ｘ６－ＴＳＤＹＳＩ－Ｘ１３－ＬＤＫ－Ｘ１７－ＡＱ－Ａｉｂ－ＡＦＩＥ－Ｘ２５－ＬＬＥ－Ｘ２９－Ｘ３０－ＰＳＳ－Ｘ３４－Ｘ３５－ＰＰ－Ｘ３８－Ｓ－Ｒ^１（Ｉ）
（式中、
Ｘ３は、ＱまたはＨであり；
Ｘ６は、Ｆ、αＭｅＦ、またはαＭｅＦ（２Ｆ）であり；
Ｘ１３は、αＭｅＬ、Ｆ、αＭｅＦ、またはＬであり；
Ｘ１７はΨであり；
Ｘ２５は、ＹまたはＦであり；
Ｘ２９は、Ｔ、Ｓ、Ｇ、またはＡｉｂであり；
Ｘ３０は、Ｇ、Ｈ、Ｒ、またはＡｉｂであり；
Ｘ３４は、ＧまたはＡｉｂであり；
Ｘ３５は、Ａ、Ｑ、Ａｉｂ、またはＨであり；
Ｘ３８は、Ａｃ３ｃまたはＰであり；
Ｒ^１は、ＮＨ_２もしくはＯＨ、または薬学的に許容されるその塩および／もしくはエステルであり；
Ψは、以下の一般式（ＩＩ）：
Ｙ－Ｚ（ＩＩ）
によって修飾された側鎖を有するＬｙｓであり、
Ｙは、（ＡＥＥＡｃまたはＧｌｕ）_ａ－（ＡＥＥＡｃまたはＧｌｕ）ｂ－（ＡＥＥＡｃまたはＧｌｕ）_ｃであり、ａ、ｂ、およびｃは、独立して別個に０または１であり、ａ、ｂ、およびｃは同時にゼロではなく、Ｙのカルボキシル末端は、Ｌｙｓの側鎖のε－アミノに接続されており；
Ｚは－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｍ－Ｒ^２であり、ｍは６～２４の整数であり、Ｒ^２は－ＣＯＯＨから選択され；
以下の部位における少なくとも２個の特定のアミノ酸を含む：
Ｘ１３は、ＦまたはαＭｅＦであり；
Ｘ２５はＦであり；
Ｘ２９は、ＴまたはＳであり；
Ｘ３０は、Ｈ、Ｒ、またはＡｉｂであり；
Ｘ３５は、Ｑ、Ａｉｂ、またはＨであり；
Ｘ３８はＡｃ３ｃであり、一般式（ＩＩ）は、ＡＥＥＡｃ－ＡＥＥＡｃ－γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨであり、さらに化合物は、
から選択される。）
を有する、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ／ＧＣＧＲトリプルアゴニストポリペプチド化合物またはその塩もしくは溶媒和物。
化合物は、式：Y-Aib-QGT-αMeF-TSDYSI-αMeL-LDKK(AEEAc-AEEAc-γGlu-CO(CH ₂ ) ₁₈ COOH)AQ-Aib-AFIEYLLESHPSSGAPP-Ac3c-S-NH ₂ （化合物３）を有する、請求項１に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ／ＧＣＧＲトリプルアゴニストポリペプチド化合物またはその塩もしくは溶媒和物。
請求項１に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和物のいずれかの有効量、および薬学的に許容される希釈剤、担体、または賦形剤を含む、医薬組成物。
有効量のY-Aib-QGT-αMeF-TSDYSI-αMeL-LDKK(AEEAc-AEEAc-γGlu-CO(CH ₂ ) ₁₈ COOH)AQ-Aib-AFIEYLLESHPSSGAPP-Ac3c-S-NH ₂ （化合物３）またはその塩もしくは溶媒和物を含む、請求項３に記載の医薬組成物。
医薬組成物は、注射剤、凍結乾燥粉末剤、錠剤、丸剤、トローチ剤、軟カプセル剤、硬カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤、懸濁剤、またはシロップ剤であり；代替的に、薬物組成物は、マイクロカプセル剤、マイクロスフェア剤、ナノ粒子剤、またはリポソーム剤の形態にあることを特徴とする、請求項３または４に記載の医薬組成物。
医薬組成物は、経口投与、吸入投与、または非経口投与に使用され、非経口投与は、腹腔内、筋肉内、動脈内、静脈内、皮下、または皮内注射投与から選択されることを特徴とする、請求項３または４に記載の医薬組成物。
少なくとも１日１回、週１回、２週間に１回、または月１回の頻度で投与されることを特徴とする、請求項３または４に記載の医薬組成物。
医薬組成物は、少なくとも１種の治療活性物質との組み合わせで使用され、治療活性物質は、抗糖尿病活性化剤、ＧＩＰ受容体アゴニスト、ＧＣＧ受容体アゴニストもしくはアンタゴニスト、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体アゴニスト、ＧＬＰ－１／ＧＣＧ受容体アゴニスト、ＧＩＰ／ＧＣＧ受容体アゴニスト、ＦＧＦ－２１およびその類似体、コレシストキニンＢ（ＣＣＫＢ）およびその類似体、ＰＹＹ（３－３６）およびその類似体、レプチンおよびその類似体、カルシトニンおよびその類似体、脂質調節活性薬、ＰＰＡＲ－α、β、δアゴニストもしくは調節剤、抗血小板凝集活性化剤、ＰＣＳＫ９阻害剤、リパーゼ阻害剤、抗線維化もしくは抗肝硬変活性化剤、または抗炎症活性化剤を含むことを特徴とする、請求項３または４に記載の医薬組成物。
抗糖尿病活性化剤は、インスリンおよびその類似体、ビグアニド、スルホニル尿素、チアゾリジンジオン、α－グルコシダーゼ阻害剤、ＤＰＰ－４阻害剤、ＳＧＬＴ２阻害剤、二重ＳＧＬＴ１／ＳＧＬＴ２阻害剤、ＧＬＰ－１受容体アゴニスト、またはアミリンおよびその類似体を含むことを特徴とする、請求項８に記載の医薬組成物。
インスリン分泌を促進するおよび血糖を低減するための薬物の調製における、請求項１または２に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和物、あるいは請求項３から９のいずれか一項に記載の医薬組成物の使用。
摂食を阻害する、胃内容排出を遅延させる、エネルギー消費を増加させる、および体重を低下させるための薬物の調製における、請求項１または２に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和物、あるいは請求項３から９のいずれか一項に記載の医薬組成物の使用。
膵島β－細胞アポトーシスを低下させる、膵島β－細胞数を増加させる、および膵島細胞の機能を改善するための薬物の調製における、請求項１または２に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和物、あるいは請求項３から９のいずれか一項に記載の医薬組成物の使用。
血中脂質を改善する、肝臓脂肪蓄積を低下させる、肝臓炎症の発症を阻害する、ならびに非アルコール性脂肪肝疾患を阻止するおよび治療するための薬物の調製における、請求項１または２に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和物、あるいは請求項３から９のいずれか一項に記載の医薬組成物の使用。
脳神経の成長を促進する、神経毒性物質を排除する、炎症発症を阻害する、および神経保護効果を発揮するための薬物の調製における、請求項１または２に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和物、あるいは請求項３から９のいずれか一項に記載の医薬組成物の使用。
代謝障害および関連合併症の阻止および／または治療のための薬物の調製における、請求項１または２に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和物、あるいは請求項３から９のいずれか一項に記載の医薬組成物の使用。
糖尿病、肥満、または非アルコール性脂肪肝疾患の治療のための薬物の調製における、請求項１または２に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和物、あるいは請求項３から９のいずれか一項に記載の医薬組成物の使用。
脂質異常症および関連疾患、ならびにパーキンソン病およびアルツハイマー病を含む神経変性疾患を治療するための薬物の調製における、請求項１または２に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和物、あるいは請求項３から９のいずれか一項に記載の医薬組成物の使用。
内分泌障害に関連した骨疾患、代謝障害、腎臓疾患、骨粗鬆症および変形性関節症を含む骨疾患を治療するための薬物の調製における、請求項１または２に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和物、あるいは請求項３から９のいずれか一項に記載の医薬組成物の使用。