JP7811540B2 - Ｍｈｃクラスｉｉ分子及びその使用方法 - Google Patents

Description

関連出願の相互参照
本ＰＣＴ出願は、２０１９年７月３０日に出願の米国特許仮出願番号第６２／８８０，５０１号及び２０２０年５月２２日に出願の米国特許仮出願番号第６３／０２９，１１４号の利益を請求し、それぞれの内容の全体が参照により本明細書に組み込まれる。

ＥＦＳ－ＷＥＢを介して電子的に提出された配列表への言及
電子的に提出された配列表の内容（名称：４２８５－０１１ＰＣ０２＿ＳＬ＿ＳＴ２５．ｔｘｔ， サイズ： ３４，４０３バイト；及び作成日：２０２０年７月２８日）は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

本開示は、ＣＤ４に対する親和性が強化された主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）クラスＩＩ分子、及びその使用法を提供する。

免疫療法は、がんを含む様々な疾患との戦いにおいて重要なツールとして出現した。Ｔ細胞療法は、免疫療法の開発の最前線にあり、抗腫瘍Ｔ細胞の養子移入により、がん患者における臨床応答が誘発されることが明らかにされてきた。

腫瘍細胞で発現している標的エピトープに特異的なＴ細胞発現Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を使用する指向型Ｔ細胞療法は、Ｔ細胞療法の将来性のある形態である。抗原提示細胞は、その表面上の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）に関連するペプチドフラグメントを提示して、免疫応答を誘導する。クラスＩＩによる内因性ペプチドの改善された提示は、がん患者の生存の延長と相関することがこれまでに実証されている。しかし、ＭＨＣクラスＩＩが提示しているペプチドを特異的に標的とすることができる新規のＴＣＲの改善は、Ｔ細胞で発現しているＣＤ４に対するＭＨＣクラスＩＩタンパク質の低い親和性によって制約される。

本開示は、ＣＤ４に対する親和性が強化されたＭＨＣクラスＩＩタンパク質、及び新規のＭＨＣクラスＩＩ特異的ＴＣＲの識別及び改善のためにそれを使用する方法を提供する。

本開示のある特定の態様は、ＤＱベータ鎖を含むＨＬＡクラスＩＩ分子に関し、ここで、該ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にロイシン以外のアミノ酸を含む。

本開示のある特定の態様は、ＤＱベータ鎖を含むＨＬＡクラスＩＩ分子に関し、ここで、該ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基に置換変異を含み、該置換変異は、ロイシン以外のアミノ酸によるものである。

いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にバリン以外のアミノ酸をさらに含む。

本開示のある特定の態様は、ＤＱベータ鎖を含むＨＬＡクラスＩＩ分子に関し、ここで、該ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にバリン以外のアミノ酸を含む。

本開示のある特定の態様は、ＤＱベータ鎖を含むＨＬＡクラスＩＩ分子に関し、ここで、該ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基に置換変異を含み、該置換変異は、バリン以外のアミノ酸によるものである。

いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にロイシン以外のアミノ酸をさらに含む。いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にアスパラギン以外のアミノ酸をさらに含む。いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にイソロイシン以外のアミノ酸をさらに含む。いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にセリン以外のアミノ酸をさらに含む。いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にプロリン以外のアミノ酸をさらに含む。

いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、（ｉ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にアスパラギン以外のアミノ酸、（ｉｉ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にイソロイシン以外のアミノ酸、（ｉｉｉ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にセリン以外のアミノ酸、及び（ｉｖ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にプロリン以外のアミノ酸、のうち少なくとも３つをさらに含む。

いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、（ｉ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にアスパラギン以外のアミノ酸、（ｉｉ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にイソロイシン以外のアミノ酸、（ｉｉｉ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にセリン以外のアミノ酸、及び（ｉｖ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にプロリン以外のアミノ酸、をさらに含む。

いくつかの態様において、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、疎水性側鎖を含む。いくつかの態様において、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、アラニン、バリン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンからなる群から選択される。いくつかの態様において、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、トリプトファンである。

いくつかの態様において、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、疎水性側鎖を含む。いくつかの態様において、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、アラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンから選択される。いくつかの態様において、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、メチオニンである。

いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子のベータ鎖は、配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にアスパラギン以外のアミノ酸を含む。いくつかの態様において、配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基のアスパラギン以外のアミノ酸は、セリン、スレオニン、及びグルタミンから選択される。いくつかの態様において、配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基のアスパラギン以外のアミノ酸は、グルタミンである。

いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子のベータ鎖は、配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にイソロイシン以外のアミノ酸を含む。いくつかの態様において、配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基のイソロイシン以外のアミノ酸は、アラニン、バリン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンから選択される。いくつかの態様において、配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基のイソロイシン以外のアミノ酸は、バリンである。

いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子のベータ鎖は、配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にセリン以外のアミノ酸を含む。いくつかの態様において、配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基のセリン以外のアミノ酸は、アルギニン、ヒスチジン、及びリシンから選択される。いくつかの態様において、配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基のセリン以外のアミノ酸は、ヒスチジンである。

いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子のベータ鎖は、配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にプロリン以外のアミノ酸を含む。いくつかの態様において、配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基のプロリン以外のアミノ酸は、セリン、スレオニン、アスパラギン及びグルタミンから選択される。いくつかの態様において、配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基のプロリン以外のアミノ酸は、グルタミンである。

いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、配列番号１、３、４及び５から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。

いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にトリプトファン、及び配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にメチオニンを含む。

いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子のベータ鎖は、（ａ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にトリプトファン、（ｂ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にメチオニン、ならびに（ｃ）（ｉ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にグルタミン、（ｉｉ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にバリン、（ｉｉｉ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にヒスチジン、及び（ｉｖ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にグルタミンのうち少なくとも１つを含む。

いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子のベータ鎖は、（ａ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にトリプトファン、（ｂ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にメチオニン、ならびに（ｃ）（ｉ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にグルタミン、（ｉｉ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にバリン、（ｉｉｉ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にヒスチジン、及び（ｉｖ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にグルタミンのうち少なくとも２つを含む。

いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子のベータ鎖は、（ａ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にトリプトファン、（ｂ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にメチオニン、ならびに（ｃ）（ｉ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にグルタミン、（ｉｉ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にバリン、（ｉｉｉ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にヒスチジン、及び（ｉｖ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にグルタミンのうち少なくとも３つを含む。

いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子のベータ鎖は、（ａ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にトリプトファン、（ｂ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にメチオニン、（ｃ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にグルタミン、（ｄ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にバリン、（ｅ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にヒスチジン、及び（ｆ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にグルタミン、を含む。

いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、配列番号３に記載されているアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、配列番号４に記載されているアミノ酸配列を含む。

いくつかの態様において、ＨＬＡクラスＩＩ分子のベータ鎖は、ＤＱ２、ＤＱ３、ＤＱ４、ＤＱ５またはＤＱ６対立遺伝子を含む。いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子のベータ鎖は、ＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０２、ＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０３、ＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０４、ＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０５またはＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０６対立遺伝子を含む。

いくつかの態様において、ＨＬＡクラスＩＩ分子は、ＤＱアルファ鎖をさらに含む。いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子のアルファ鎖は、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０１、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０２、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０３、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０４、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０５またはＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０６対立遺伝子を含む。

いくつかの態様において、ＤＱアルファ鎖は、配列番号６または８に対して少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、ＤＱアルファ鎖は、配列番号６または８に記載されているアミノ酸配列を含む。

いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、参照ＨＬＡクラスＩＩ分子と比較してＣＤ４タンパク質に対する親和性が高く、ここで、参照ＨＬＡクラスＩＩ分子は、（ｉ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にロイシン、及び／または（ｉｉ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にバリンを含むＤＱベータ鎖を含む。

いくつかの態様において、その親和性は、少なくとも約１．５倍、少なくとも約２倍、少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、少なくとも約５倍、少なくとも約６倍、少なくとも約７倍、少なくとも約８倍、少なくとも約９倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約１５倍、少なくとも約２０倍、少なくとも約２５倍、少なくとも約３０倍、少なくとも約３５倍、少なくとも約４０倍、少なくとも約４５倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約７５倍、少なくとも約１００倍、少なくとも約２００倍、少なくとも約３００倍、少なくとも約４００倍、少なくとも約５００倍、または少なくとも約１０００倍高い。

いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、細胞の膜に結合している。いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、細胞の膜に結合していない。いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、完全長ＤＱアルファ鎖の細胞外ドメインを含む。いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、完全長ＤＱベータ鎖の膜貫通ドメインを含まない。

いくつかの態様において、ＤＱアルファ鎖は、細胞の膜に結合している。いくつかの態様において、ＤＱアルファ鎖は、細胞の膜に結合していない。いくつかの態様において、ＤＱアルファ鎖は、完全長ＤＱアルファ鎖の細胞外ドメインを含む。いくつかの態様において、ＤＱアルファ鎖は、完全長ＤＱアルファ鎖の膜貫通ドメインを含まない。

いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、不活性粒子に連結または結合している。いくつかの態様において、不活性粒子は、ビーズである。いくつかの態様において、不活性粒子は、ナノ粒子である。いくつかの態様において、ナノ粒子は、ペグ化酸化鉄、キトサン、デキストラン、ゼラチン、アルギナート、リポソーム、澱粉、分枝ポリマー、炭素ベース担体、ポリ乳酸、ポリ（シアノ）アクリレート、ポリエチルエイネミン（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｉｎｅｍｉｎｅ）、ブロックコポリマー、ポリカプロラクトン、ＳＰＩＯＮＳ、ＵＳＰＩＯＮＳ、Ｃｄ／Ｚｎ－セレン化物、またはシリカナノ粒子から選択される。いくつかの態様において、ナノ粒子は、ペグ化酸化鉄ナノ粒子である。

いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖はシグナルペプチドを含む。いくつかの態様において、ＤＱアルファ鎖はシグナルペプチドを含む。いくつかの態様において、シグナルペプチドは、配列番号９に記載されているアミノ酸配列を含む。

本開示のある特定の態様は、本明細書にて開示されるＤＱベータ鎖をコードする核酸分子に関する。いくつかの態様において、核酸分子は、本明細書にて開示されるＤＱアルファ鎖をさらにコードする。

いくつかの態様において、核酸分子は、配列番号２に対して少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有するヌクレオチド配列を含む。

本開示のある特定の態様は、本明細書にて開示される核酸分子を含むベクターに関する。

本開示のある特定の態様は、本明細書にて開示されるＨＬＡクラスＩＩ分子、本明細書にて開示される核酸分子、または本明細書にて開示されるベクターを含む細胞に関する。いくつかの態様において、細胞は、哺乳動物細胞または昆虫細胞である。いくつかの態様において、細胞は、Ｋ５６２細胞、Ｔ２、ＨＥＫ２９３、ＨＥＫ２９３Ｔ、Ａ３７５、ＳＫ－ＭＥＬ－２８、Ｍｅ２７５、ＣＯＳ、線維芽細胞、腫瘍細胞、またはこれらの任意の組み合わせから選択される。いくつかの態様において、細胞は、内因性ＭＨＣクラスＩＩ ＤＱベータ鎖発現を欠いている。いくつかの態様において、細胞は、内因性ＭＨＣクラスＩＩ ＤＱアルファ鎖発現を欠いている。

本開示のある特定の態様は、ＭＨＣクラスＩＩ複合体のエピトープと結合することができるＴ細胞受容体を識別する方法に関し、該方法は、本明細書にて開示される細胞にエピトープを含む１つ以上のペプチドをパルスすることと、１つ以上のＣＤ４^＋Ｔ細胞をＡＰＣで刺激することと、を含む。

本開示のある特定の態様は、疾患または病態を治療することを、それを必要とする対象において行う方法に関し、該方法は、本明細書にて開示されるＭＨＣクラスＩＩ分子を対象に投与することを含む。いくつかの態様において、疾患または病態は、がんまたは感染である。

いくつかの態様において、がんは、黒色腫、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頸部癌、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、胃癌、子宮癌、肺癌、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、食道癌、小腸癌、尿道癌、慢性または急性白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）（非Ｔ細胞ＡＬＬを含む）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、膀胱癌、腎臓または尿管癌、腎盤癌、神経膠腫、扁平上皮癌、及び上記がんの組み合わせ、からなる群から選択される。

いくつかの態様において、がんは、再発性または難治性である。いくつかの態様において、がんは、局所的に進行性である。いくつかの態様において、がんは、進行性である。いくつかの態様において、がんは、転移性である。

いくつかの態様において、ＨＬＡクラスＩＩ分子は、約１００μＭ未満のＫ_ＤでＣＤ４と結合する。いくつかの態様において、ＨＬＡクラスＩＩ分子は、約１０μＭ未満のＫ_ＤでＣＤ４と結合する。いくつかの態様において、ＨＬＡクラスＩＩ分子は、約８．９μＭ以下のＫ_ＤでＣＤ４と結合する。

本開示のある特定の態様は、本明細書にて開示されるＨＬＡクラスＩＩ分子、及びペプチドを含む複合体に関し、ここで、該ペプチドは、ＤＤＸ３Ｙ_{１７１－１９０}、ＨＡ_{２５５－２７０}、ＧＰＣ３_{１３８－１５７}、またはそれらの任意の組み合わせを含む。

Ａ～Ｆは改変されたＤＱ分子の強化されたＣＤ４結合能力を表したデータを示す。Ａは、ＤＰＢ１＊０４：０１、ＤＱＢ１＊０５：０１、及びＤＱＢ１＊０５：０１^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}のアミノ酸配列を比較した表であり、変異のあるアミノ酸には下線が引かれている。Ｂ及びＣは、野生型ＤＱ５（ＤＱＡ１＊０１：０１／ＤＱＢ１＊０５：０１）、ＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ}、ＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}、野生型ＤＰ４またはＤＰ４^{Ｌ１１２Ｗ／Ｖ１４１Ｍ}を安定して発現するクラスＩＩ欠損Ｋ５６２細胞を、図１Ａに示したようなｓＣＤ４で染色したデータのグラフ表示である。 Ｄは、ｓＣＤ４で同じように染色した、４つの位置のうち１つで単一のアミノ酸反転があるＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}変異体を個別に発現する一連のＫ５６２誘導体のＣＤ４結合能力を示す。 Ｅは、ＤＰＢ１＊０４：０１、ＤＱＢ１＊０２：０１、ＤＱＢ１＊０４：０２、及びＤＱＢ１＊０６：０１のアミノ酸配列を一覧にした表であり、置換のあるアミノ酸には下線が引かれている。ＤＱＢ１＊０５：０１とは異なり、１１４の位置にＶａｌをコードするＤＰＢ１＊０４：０１と同じように、ＤＱＢ１＊０２：０１、ＤＱＢ１＊０４：０２、及びＤＱＢ１＊０６：０１は、１１６の位置にＶａｌをコードする。Ｆは、β鎖におけるＬ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋３ｒｅｐｓ置換が、ＣＤ４へのＤＱ２、ＤＱ４、及びＤＱ６の結合を強化したことを示すデータのグラフ表示を表している。少なくとも２回の独立した実験を行った。^＊：スチューデントのｔ検定による０．０５未満のＰ値。バー及びエラーバーは、３連の実験の結果の平均±ＳＤを表している。 同上。 同上。 Ａ～Ｂは、親和性成熟ＤＱ二量体が、ヒト初代ＣＤ４＋Ｔ細胞に発現している同族ＴＣＲを認識したことを示すグラフ表示である。ＤＱ５（ＤＱＡ１＊０１：０１－ＤＱＢ１＊０５：０１）制限ＤＤＸ３Ｙ特異的ＴＣＲ（Ｅ６）（Ａ）及びＤＱ６（ＤＱＡ１＊０１：０２－ＤＱＢ１＊０６：０２）制限インフルエンザウイルスＨＡ特異的ＴＣＲ（ＤＭ２）（Ｂ）を、ヒト初代ＣＤ４＋Ｔ細胞で再構成し、それぞれ、ＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}及びＤＱ６^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋３ｒｅｐｓ}二量体によって染色した。少なくとも２回の独立した実験を行った。 Ａ～Ｑは、各ＨＬＡクラスＩＩ遺伝子の発現レベルの比較を示すヒストグラムのグラフ表示である。ＨＬＡ－ＤＱ及びそれらの誘導体を、Ｋ５６２細胞で再構成し、抗ＨＬＡクラスＩＩモノクローナル抗体で染色した。ＤＱ２、ＤＱ５、及びＤＱ６対立遺伝子のそれぞれの表面発現を、抗ＨＬＡクラスＩＩモノクローナル抗体クローン９～４９（Ｉ３）（ＤＱ５及びＤＱ６）または抗クラスＩＩモノクローナル抗体クローンＴｕ３９（ＤＱ２及びＤＱ４）を用いて検出した。オープンヒストグラムは、副基準対照染色を表している。 Ａ～Ｌは、ＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}二量体が、Ｅ６形質導入済みＣＤ４^＋Ｔ細胞を強力に染色したことを示すグラフ表示である。Ｅ６を、ＣＤ４^＋Ｔ細胞で再構成し、次に、そのＴ細胞を、野生型ＤＱ５（Ｄ及びＪ）、ＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ}（Ｅ及びＫ）、及びＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}（Ｆ及びＬ）、ＣＬＩＰ対照二量体（Ｄ～Ｆ）、及びＤＤＸ３Ｙ_{１７１－１９０}に特異的な二量体（Ｊ～Ｌ）で染色した。ＴＣＲを形質導入していない対照細胞については、図Ａ～Ｃ及びＧ～Ｉに示す。 Ａ～Ｇは、親和性成熟二量体を用いたＤＱ５制限ＴＣＲのクローニングを示すグラフ表示である。初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を、ＤＱ５．１^＋黒色腫患者から精製し、照射しＧＰＣ３_{１３８－１５７}をパルスしたＤＱ５．１を発現するａＡＰＣによって刺激した。２週間後、刺激したＣＤ４^＋Ｔ細胞を、同族ＧＰＣ３_{１３８－１５７}－ＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}二量体で染色した（Ａ～Ｂ）。ＧＰＣ３特異的ＴＣＲを、ＴＣＲ欠損Ｊｕｒｋａｔ７６／ＣＤ４細胞で再構成し、対応するＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}二量体（Ｃ（Ｅ６／対照）；Ｄ（Ｅ６／ＧＰＣ３_{１３８－１５７}）；Ｅ（ＤＱ５－０６－ＧＰＣ３_{１３８－１５７}／対照）；及びＦ（ＤＱ５－０６－ＧＰＣ３_{１３８－１５７}／ＧＰＣ３_{１３８－１５７}））によって染色した。 ＩＬ－２ ＥＬＩＳＰＯＴアッセイにて、ＧＰＣ３特異的ＴＣＲを発現するＪｕｒｋａｔ７６／ＣＤ４細胞を、対応するペプチドをパルスしたＤＱ５－Ｋ５６２細胞によって刺激した結果を示す（Ｇ）。 同上。 同上。

本開示は、ＣＤ４に対する親和性が強化されたＭＨＣクラスＩＩ分子に関する。いくつかの態様において、本開示は、ＨＬＡ－ＤＱ（ＤＱ）ベータ鎖を含むＭＨＣクラスＩＩ分子に関し、ここで、ＤＱベータ鎖は、ＣＤ４に対する親和性が高い。

本開示は、ＤＱベータ鎖を含むＭＨＣクラスＩＩ分子にさらに関し、ここで、該ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にロイシン以外のアミノ酸を含む。いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にバリン以外のアミノ酸をさらに含む。

本開示は、ＤＱベータ鎖を含むＭＨＣクラスＩＩ分子にさらに関し、ここで、該ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にバリン以外のアミノ酸を含む。いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にロイシン以外のアミノ酸をさらに含む。

いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、（ｉ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にアスパラギン以外のアミノ酸、（ｉｉ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にイソロイシン以外のアミノ酸、（ｉｉｉ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にセリン以外のアミノ酸、及び（ｉｖ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にプロリン以外のアミノ酸、のうち少なくとも３つをさらに含む。

Ｉ． 用語
本開示をより容易に理解し得るようにするために、特定の用語を最初に定義する。本出願で使用するとき、本明細書に別段に明記されない限り、次の用語の各々は、下記に示す意味を有するものとする。追加の定義は、本出願全体を通して記載される。

用語「ａ」または「ａｎ」の実体は、その実体の１つ以上を指し、例えば、「ヌクレオチド配列（ａ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ）」は、１つ以上のヌクレオチド配列を表すと理解されることに留意されたい。したがって、「ａ」（または「ａｎ」）、「１つ以上」、及び「少なくとも１つ」という用語は、本明細書において互換的に使用され得る。

さらに、「及び／または」は、本明細書で使用する場合、２つの特定の特徴または構成要素の各々の具体的な開示として解釈され、他方の有無を問わないものとする。したがって、本明細書で「Ａ及び／またはＢ」などの語句で使用される「及び／または」という用語は、「Ａ及びＢ」、「ＡまたはＢ」、「Ａ」（単独）、及び「Ｂ」（単独）を含むことが意図される。同様に、「Ａ、Ｂ、及び／またはＣ」などの語句で使用される「及び／または」という用語は、次の態様：Ａ、Ｂ、及びＣ；Ａ、Ｂ、またはＣ；ＡまたはＣ；ＡまたはＢ；ＢまたはＣ；Ａ及びＣ；Ａ及びＢ；Ｂ及びＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；ならびにＣ（単独）の各々を包含することが意図される。

「約」という用語は、本明細書では、およそ、大体、おおよそ、またはその範囲内の意味で使用される。「約」という用語を数値範囲と併せて使用する場合、その用語は、示されている数値の前後まで、その境界を広げることによって、その範囲を修飾する。概して、「約」という用語は、本明細書では、示されている値のプラスマイナス（上下）１０パーセントの幅で、数値を修飾する目的で使用する。

本明細書において「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という言葉で態様が説明されている場合は常に、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」及び／または「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」という用語で説明されている他の類似の態様も提供されることを理解されたい。

別段に定義しない限り、本明細書において使用する全ての技術用語及び科学用語は、本開示が関連する技術分野における当業者により一般に理解されるものと同一の意味を有する。例えば、ｔｈｅ Ｃｏｎｃｉｓｅ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｕｏ，Ｐｅｉ－Ｓｈｏｗ，２ｎｄ ｅｄ．，２００２，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｈｅ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，３ｒｄ ｅｄ．，１９９９，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、及びｔｈｅ Ｏｘｆｏｒｄ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ Ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ， Ｒｅｖｉｓｅｄ，２０００，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓは、本開示で使用される用語の多くの一般的な辞書を当業者に提供する。

単位、接頭辞、及び記号は、それらの国際単位系（ＳＩ）で承認された形式で示される。数値範囲はその範囲を定義する数を含む。別段に示さない限り、ヌクレオチド配列は５’から３’の方向で左から右に書かれている。アミノ酸配列は、アミノからカルボキシの方向で左から右に書かれている。本明細書において提供する見出しは、本明細書全体を参照することにより得ることができる本開示の様々な態様を限定するものではない。したがって、直下で定義する用語は、本明細書全体を参照することによって、より十分に定義される。

「投与すること」とは、当業者に周知の様々な方法及び送達系のいずれかを用いて、薬剤を対象に物理的に導入することを指す。本明細書にて開示される製剤の投与経路の例としては、例えば注射または注入による静脈内投与経路、筋肉内投与経路、皮下投与経路、腹腔内投与経路、脊髄投与経路またはその他の非経口投与経路が挙げられる。「非経口投与」という語句は、本明細書で使用する場合、経腸投与及び局所投与以外の、通常は注射による投与方法を意味し、これには、限定するものではないが、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、リンパ管内、病巣内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、髄腔内、硬膜外及び胸骨内の注射及び注入、ならびにインビボの電気穿孔法が挙げられる。いくつかの態様において、この製剤は、非経口ではない経路、例えば、経口的に投与される。他の非経口ではない経路としては、局所、上皮、または粘膜投与経路、例えば、鼻腔内に、膣内に、直腸に、舌下で、または局所的に、が挙げられる。また、投与は、例えば１回、複数回、及び／または１以上の長い期間にわたって行うことができる。

本明細書で使用される「ＨＬＡ」という用語は、ヒト白血球抗原を指す。ＨＬＡ遺伝子は、ヒトの主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）タンパク質をコードする。ＭＨＣタンパク質は、細胞の表面に発現し、免疫応答の活性化に関与している。ＨＬＡクラスＩＩ遺伝子は、プロフェッショナル抗原提示細胞（ＡＰＣ）の表面に発現するＭＨＣクラスＩＩタンパク質をコードする。プロフェッショナルＡＰＣの非限定的例としては、単核細胞、マクロファージ、樹状細胞（ＤＣ）及びＢリンパ球が挙げられる。一部の内皮細胞及び上皮細胞は、炎症シグナルが活性化された後にＭＨＣクラスＩＩ分子を発現することもある。機能的なＭＨＣクラスＩＩ分子を欠くヒトは、一連の感染症に非常にかかりやすく、通常幼齢で死亡する。

本発明で使用される場合、「ＨＬＡクラスＩＩ分子」または「ＭＨＣクラスＩＩ分子」とは、ＭＨＣクラスＩＩ分子をコードする野生型またはバリアントのＨＬＡクラスＩＩ遺伝子のタンパク質生成物を指す。したがって、「ＨＬＡクラスＩＩ分子」及び「ＭＨＣクラスＩＩ分子」は、本明細書では同じ意味で用いられる。典型的なＭＨＣクラスＩＩ分子は、アルファ鎖及びベータ鎖の２つのタンパク質鎖を含む。概して、天然に存在するアルファ鎖及びベータ鎖のそれぞれは、アルファ鎖／ベータ鎖を細胞表面に固定する膜貫通ドメイン、及び抗原を運び、かつＴ細胞に発現しているＴＣＲ及び／またはＣＤ４と相互作用する細胞外ドメインを含む。

ＭＨＣクラスＩＩのアルファ鎖及びベータ鎖の両方は、ＨＬＡ遺伝子複合体によってコードされる。ＨＬＡ複合体は、ヒト第６染色体の短腕の６ｐ２１．３領域内にあり、２２０を超える多様な機能の遺伝子を含んでいる。ＨＬＡ遺伝子複合体には、当技術分野で公知の、数千のＭＨＣクラスＩＩタンパク質をコードしている、２５０を超えるＭＨＣクラスＩＩアルファ鎖対立遺伝子及び５，０００を超えるＭＨＣクラスＩＩベータ鎖対立遺伝子を含む２０，０００を超えるＨＬＡ対立遺伝子及び関連対立遺伝子を有する多くのバリアントがある（本明細書中に、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、例えばｈｌａ．ａｌｌｅｌｅｓ．ｏｒｇ，（最終訪問日：２０１９年５月２０日）を参照されたい）。例えば、そのようなＨＬＡ－ＤＰ対立遺伝子の１つであるＤＰ４は、多くの民族群で最も頻繁に見られる対立遺伝子である。各アルファ鎖及びベータ鎖は、通常プロタンパク質として発現し、これは、切断されるシグナルペプチドをさらに含む。任意の数の天然に存在するシグナルペプチドが、本明細書にて開示されるアルファ鎖及びベータ鎖の発現及び局在化を促進するために使用されてよい。そのような例の１つは、配列番号９である。

ＨＬＡ複合体の３つの遺伝子座は、ＨＬＡ－ＤＰ、ＨＬＡ－ＤＱ及びＨＬＡ－ＤＲのＭＨＣクラスＩＩタンパク質をコードする。ＨＬＡ－ＤＯ及びＨＬＡ－ＤＭは、ＭＨＣクラスＩＩ分子と関連し、その構成及び機能をサポートするタンパク質をコードする。代表的なＨＬＡ－ＤＱ配列を表１に示す。

ＭＨＣクラスＩＩ分子が抗原ペプチドと複合体を形成する場合、１０～３０アミノ酸長の抗原ペプチドは、ペプチド結合溝に結合し、細胞外でＣＤ４＋細胞に提示される。アルファ鎖及びベータ鎖の両方は、アルファポリペプチドの場合はアルファ１及びアルファ２、ベータポリペプチドの場合はベータ１及びベータ２の２つの別々のドメインに折り畳まれる。ＣＤ４によって認識及び結合されるＬ１１４、Ｖ１１６、Ｖ１４３、Ｌ１５８、及びＭ１６０の一定の残基は、ベータポリペプチドのベータ２ドメインに位置している。提示される抗原を保持している開放型のペプチド結合溝は、アルファ１ドメインとベータ１ドメインとの間にある。ＣＤ４＋Ｔ細胞と相互作用すると、ＭＨＣクラスＩＩ複合体は、Ｔ細胞の表面に発現しているＴ細胞受容体（ＴＣＲ）と相互作用する。加えて、ＭＨＣクラスＩＩ分子のベータ鎖は、Ｔ細胞の表面に発現しているＣＤ４とわずかに相互作用する（Ｋ_Ｄ＞２ｍＭ）。標準的なＣＤ４アミノ酸配列（配列番号１０）を、表２に示す（ＵｎｉＰｒｏｔ － Ｐ０１７３０）。

本明細書で使用される「Ｔ細胞受容体」（ＴＣＲ）という用語は、標的抗原と特異的に相互作用し得るヘテロマー細胞表面受容体を指す。本明細書で使用される場合、「ＴＣＲ」という用語は、限定されないが、天然に存在するＴＣＲ及び天然に存在しないＴＣＲ、完全長ＴＣＲ及びその抗原結合部分、キメラＴＣＲ、ＴＣＲ融合構築物、ならびに合成ＴＣＲを含む。ヒトでは、ＴＣＲはＴ細胞の表面に発現し、Ｔ細胞の認識及び抗原提示細胞の標的化を担っている。抗原提示細胞（ＡＰＣ）は、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣクラスＩまたはＭＨＣクラスＩＩ、本明細書においては、ＨＬＡ分子、例えばＨＬＡクラスＩＩ分子と複合体を形成するものも指す）と複合体を形成する外来タンパク質（抗原）のフラグメントを提示する。ＴＣＲは、ペプチド：ＨＬＡ複合体を認識して結合し、Ｔ細胞で発現しているＣＤ８（ＭＨＣクラスＩ分子の場合）またはＣＤ４（ＭＨＣクラスＩＩ分子の場合）を動員し、これによりＴＣＲが活性化される。活性化されたＴＣＲは、ＡＰＣの破壊を含む下流のシグナル伝達及び免疫応答を開始する。

一般に、ＴＣＲは、ジスルフィド結合によって相互接続する２つの鎖、アルファ鎖及びベータ鎖（または一般的ではないが、ガンマ鎖及びデルタ鎖）を含む場合がある。各鎖は、可変ドメイン（アルファ鎖可変ドメイン及びベータ鎖可変ドメイン）及び定常領域（アルファ鎖定常領域及びベータ鎖定常領域）を含む。可変ドメインは、細胞膜の遠位に位置し、可変ドメインは抗原と相互作用する。定常領域は細胞膜の近位に位置している。ＴＣＲは、膜貫通領域及び短い細胞質尾部をさらに含み得る。本明細書で使用される場合、「定常領域」という用語は、存在する場合、膜貫通領域及び細胞質尾部、ならびに従来の「定常領域」を包含する。

可変ドメインは、フレームワーク領域（ＦＲ）と称される、より保存されている領域が挟み込まれる、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称される超可変性の領域に、さらに細分化され得る。各アルファ鎖可変ドメイン及びベータ鎖可変ドメインは、３つのＣＤＲ及び４つのＦＲ（ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４）を含む。各可変ドメインには、抗原と相互作用する結合ドメインが含まれている。各鎖の３つのＣＤＲの全ては、抗原結合に関与しているが、ＣＤＲ３は、主要な抗原結合領域であると考えられており、ＣＤＲ１及びＣＤＲ２は、主にＨＬＡ分子を認識すると考えられている。

明示的に述べられていない場合、及び文脈が別段の指示をしない限り、「ＴＣＲ」という用語はまた、本明細書にて開示される任意のＴＣＲの抗原結合フラグメントまたは抗原結合部分を含み、一価及び二価のフラグメントまたは部分、及び一本鎖ＴＣＲを含む。「ＴＣＲ」という用語は、Ｔ細胞の表面に結合した天然に存在するＴＣＲに限定されない。本明細書で使用される場合、「ＴＣＲ」という用語はさらに、Ｔ細胞以外の細胞（例えば、本明細書に記載のように、ＣＤ４を自然に発現するかまたは発現するように改変される細胞）の表面に発現される本明細書に記載のＴＣＲ、または細胞膜から遊離した本明細書に記載のＴＣＲ（例えば、単離されたＴＣＲまたは可溶性ＴＣＲ）を指す。

「抗原結合分子」、「ＴＣＲの一部」、または「ＴＣＲフラグメント」とは、ＴＣＲ全体よりも小さいＴＣＲの任意の部分を指す。抗原結合分子は、抗原のＣＤＲを含む場合がある。

「抗原」とは、免疫応答を誘発するか、またはＴＣＲによって結合され得る任意の分子、例えば、ペプチドを指す。本明細書で使用される「エピトープ」とは、免疫応答を誘発するか、またはＴＣＲによって結合され得るポリペプチドの一部を指す。免疫応答には、抗体産生、もしくは特定の免疫学的コンピテント細胞の活性化、またはその両方が含まれ得る。当業者は、事実上全てのタンパク質またはペプチドを含む任意の高分子が抗原として機能し得ることを容易に理解するであろう。抗原及び／またはエピトープは、内因的に発現され得る、すなわち、ゲノムＤＮＡによって発現されるか、または組換え発現され得る。抗原及び／またはエピトープは、罹患細胞、例えばがん細胞などの特定の組織に特異的であるか、または広範に発現している場合がある。さらに、より大きな分子のフラグメントが抗原として機能する場合がある。一態様において、抗原は、腫瘍抗原である。エピトープは、より長いポリペプチド中（例えばタンパク質中）に存在することがあるか、または、エピトープは、より長いポリペプチドのフラグメントとして存在する場合がある。いくつかの態様において、エピトープは、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ、本明細書においては、ＨＬＡ分子、例えばＨＬＡクラスＩ分子と複合体を形成するものも指す）と複合体を形成する。

「自己由来」という用語は、それが後に再導入される同じ個体に由来する任意の材料を指す。例えば、自己Ｔ細胞療法は、同じ対象から単離されたＴ細胞を対象に投与することを含む。「同種異系」という用語は、ある固体に由来し、さらに同じ種の別の固体に導入される任意の材料を指す。例えば、同種異系Ｔ細胞移植は、対象以外のドナーから得られたＴ細胞を対象に投与することを含む。

「がん」とは、体内の異常細胞の成長が抑制されないことを特徴とする様々な疾患の広範な群を指す。細胞の分裂及び成長が制御されないことにより、悪性腫瘍が形成され、この悪性腫瘍は、隣接組織に湿潤し、かつリンパ系または血流を通して身体の遠方部に転移する場合もある。「がん」または「がん組織」とは腫瘍を含み得る。本発明の方法によって治療され得るがんの例としては、限定するものではないが、リンパ腫、白血病、及び他の白血球悪性腫瘍を含む免疫系のがんが挙げられる。いくつかの態様において、本発明の方法は、例えば、黒色腫、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頸部癌、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、胃癌、子宮癌、肺癌、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、食道癌、小腸癌、尿道癌、慢性または急性白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）（非Ｔ細胞ＡＬＬを含む）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、膀胱癌、腎臓または尿管癌、腎盤癌、神経膠腫、扁平上皮癌、及び上記がんの組み合わせ、に由来する腫瘍の腫瘍サイズを縮小するために使用することができる。特定のがんは、化学療法もしくは放射線療法に応答する場合があるか、またはそのがんは難治性である場合がある。難治性のがんとは、外科的介入で修正できないがんを指し、このがんは最初から化学療法もしくは放射線療法に応答しないか、または時間の経過とともに応答しなくなる。

本発明で使用される場合、ＰＦＳと略記される場合がある「無増悪生存期間」という用語は、悪性リンパ腫に関して改訂されたＩＷＧ応答基準に従った、治療日から疾患進行日または何らかの原因による死亡までの時間を指す。

ＯＳと略記される場合がある「全生存期間」という用語は、治療日から死亡日までの時間と定義される。

本発明で使用される場合、「感染」という用語は、身体の１つ以上の組織への外来物質によるある種の侵入を指す。「感染」という用語は、限定はされないが、ウイルス（ウイロイド及びプリオンを含む）、細菌、真菌、寄生生物、及びこれらの任意の組み合わせによる感染を含む。

本発明で使用される「リンパ球」という用語は、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、Ｔ細胞、またはＢ細胞を含む。ＮＫ細胞は、細胞傷害性（細胞毒性）リンパ球の一種であり、固有の免疫系の主要な構成要素である。ＮＫ細胞は、腫瘍及びウイルスに感染した細胞を排除する。それはアポトーシスまたはプログラム細胞死のプロセスを通して機能する。それらは細胞を殺すために活性化を必要としないので「ナチュラルキラー」と呼ばれた。Ｔ細胞は細胞媒介性免疫（抗体の関与はない）において主要な役割を果たす。Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）は、Ｔ細胞を他のリンパ球タイプから区別する。免疫系の特殊な器官である胸腺は、主にＴ細胞の成熟を担う。Ｔ細胞には６つのタイプ、すなわち、ヘルパーＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋細胞）、細胞傷害性Ｔ細胞（ＴＣ、細胞傷害性Ｔリンパ球、ＣＴＬ、Ｔキラー細胞、細胞溶解性Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞またはキラーＴ細胞としても知られている）、メモリーＴ細胞（（ｉ）ナイーブ細胞のような幹メモリーＴ_ＳＣＭ細胞は、ＣＤ４５ＲＯ－、ＣＣＲ７＋、ＣＤ４５ＲＡ＋、ＣＤ６２Ｌ＋（Ｌ－セレクチン）、ＣＤ２７＋、ＣＤ２８＋及びＩＬ－７Ｒα＋であるが、それらは大量のＣＤ９５、ＩＬ－２Ｒβ、ＣＸＣＲ３、及びＬＦＡ－１を発現し、かつメモリー細胞に特有の非常に多くの機能的属性を示す、（ｉｉ）セントラルメモリーＴ_ＣＭ細胞は、Ｌ－セレクチン及びＣＣＲ７を発現し、それらはＩＬ－２を分泌するが、ＩＦＮγまたはＩＬ－４は分泌しない、ならびに（ｉｉｉ）エフェクターメモリーＴ_ＥＭ細胞は、Ｌ－セレクチンまたはＣＣＲ７を発現しないが、ＩＦＮγ及びＩＬ－４のようなエフェクターサイトカインを産生する）、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ、サプレッサーＴ細胞、またはＣＤ４＋ＣＤ２５＋制御性Ｔ細胞）、ナチュラルキラーＴ細胞（ＮＫＴ）、ならびにガンマ・デルタＴ細胞、がある。一方、Ｂ細胞は体液性免疫において主要な役割を果たす（抗体の関与を伴う）。Ｂ細胞は抗体及び抗原を作り、抗原提示細胞（ＡＰＣ）の役割を果たし、抗原相互作用による活性化後にメモリーＢ細胞に変わる。哺乳動物では、未成熟Ｂ細胞は骨髄で形成され、その名前の由来となっている。

ヌクレオチドまたはアミノ酸配列に関して本明細書で使用される場合、「改変された」及び「変異した」という用語は、野生型配列または特定の参照配列と比較した配列の変化を指す。「改変された」及び「変異した」という用語は、特に指定がない限り、改変または変異した配列（例えば、改変されたベータ鎖配列）を作成するためのプロセスのステップを必要としない。むしろ、これらの用語は、参照配列、例えば野生型配列と比較して改変または変異した配列に変異があることを示す。例えば、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基に置換変異を含むＤＱベータ鎖は、列挙されるＤＱベータ鎖に到達するために野生型ＤＱベータ鎖が物理的に変化されることを必要としないが、むしろ、適切に配列される場合、列挙されるＤＱベータ鎖は、列挙される位置（１１４位の残基）に、野生型ＤＱベータ鎖または参照ＤＱベータ鎖の対応する位置にあるアミノ酸残基とは異なるアミノ酸残基を含む。

本発明で使用される「任意のアミノ酸」という用語は、任意の既知のアミノ酸を意味する。アミノ酸は、（ｉ）アミン（－ＮＨ_２）官能基、（ｉｉ）カルボキシル（－ＣＯＯＨ）官能基、及び（ｉｉｉ）側鎖（Ｒ基）を含む有機化合物であり、ここで側鎖は各アミノ酸に固有のものである。これには、いずれかの天然に存在するアミノ酸、及び任意の改変及びそのバリアントが含まれるが、これらに限定されない。天然に存在するアミノ酸は約５００種類あり、そのうち２０種は、遺伝コードによってコードされている。正に帯電する側鎖を有するアミノ酸としては、アルギニン（Ａｒｇ；Ｒ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ、Ｈ）、及びリシン（Ｌｙｓ；Ｋ）が挙げられる。負に帯電する側鎖を有するアミノ酸としては、アスパラギン酸（Ａｓｐ；Ｄ）及びグルタミン酸（Ｇｌｕ；Ｅ）が挙げられる。極性無電荷側鎖を有するアミノ酸としては、セリン（Ｓｅｒ；Ｓ）、スレオニン（Ｔｈｒ；Ｔ）、グルタミン（Ｇｌｎ；Ｑ）及びアスパラギン（Ａｓｎ；Ｎ）が挙げられる。疎水性側鎖を有するアミノ酸としては、アラニン（Ａｌａ；Ａ）、イソロイシン（Ｉｌｅ；Ｉ）、ロイシン（Ｌｅｕ；Ｌ）、メチオニン（Ｍｅｔ；Ｍ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ；Ｆ）、バリン（Ｖａｌ；Ｖ）、トリプトファン（Ｔｒｐ；Ｗ）、チロシン（Ｔｙｒ；Ｙ）が挙げられる。トリプトファン（Ｔｒｐ；Ｗ）、チロシン（Ｔｙｒ；Ｙ）及びメチオニン（Ｍｅｔ；Ｍ）はまた、これらのアミノ酸がタンパク質または脂質膜の表面で見られることが多いという点で、極性及び／または両親媒性として分類される場合がある。さらなるアミノ酸としては、システイン（Ｃｙｓ；Ｃ）、セレノシステイン（Ｓｅｃ；Ｕ）、グリシン（Ｇｌｙ；Ｇ）、及びプロリン（Ｐｒｏ；Ｐ）が挙げられる。

本発明で使用される場合、「位に相当する」は、特定のアミノ酸残基、例えばポリヌクレオチド中の特定のアミノ酸位置、または特定の核酸、例えばポリペプチド中の特定の核酸位置を特定する手段として使用される。位置は、関心の配列を参照配列と適切に整列させることによって判断することができる。当業者であれば、相対位置を判断するために配列を整列する方法を容易に理解されるであろう。例えば、種々の整列ツールがオンラインで入手可能であり、限定はされないが、ｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋで入手可能な「Ｃｌｕｓｔａｌ Ｏｍｅｇａ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ」がある（最終訪問日：２０１９年５月２５日）。

「遺伝子組換えされた」または「操作された」という用語は、細胞のゲノムを改変する方法を指し、該方法は、限定はされないが、コード領域もしくは非コード領域またはその一部を削除すること、あるいはコード領域またはその一部を挿入することを含む。いくつかの態様において、改変された細胞は、リンパ球、例えばＴ細胞、またはＣＤ４を発現している改変された細胞であり、これは、患者またはドナーから得ることができる。細胞は、例えば、細胞のゲノムに組み込まれる、本明細書にて開示されるＴ細胞受容体（ＴＣＲ）などの外因性構築物を発現するように改変され得る。いくつかの態様において、細胞は、ＣＤ４を発現するように改変される。

「免疫応答」とは、免疫系の細胞（例えば、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、マクロファージ、好酸球、肥満細胞、樹状細胞及び好中球）の作用、ならびに任意のこれらの細胞または肝臓によって産生される可溶性高分子（抗体（Ａｂ）、サイトカイン、及び補体を含む）であって、脊椎動物の体内からの侵入する病原体の排除、及び／または病原体に感染した細胞または組織、がん細胞または他の異常な細胞、あるいは自己免疫または病理学的炎症の場合、正常なヒトの細胞または組織に対して、選択的標的化、結合、損傷、破壊を生じるものを指す。

「免疫療法」という用語は、免疫応答を誘導、増強、抑制、または他の方法で改変することを含む方法による、疾患に罹患しているか、または疾患に罹患もしくは再発するリスクがある対象の治療を指す。免疫療法の例としては、限定するものではないが、Ｔ細胞療法が挙げられる。Ｔ細胞療法には、養子Ｔ細胞療法、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）免疫療法、自己細胞療法、操作された自己細胞療法（ｅＡＣＴ）、及び同種異系Ｔ細胞移植が挙げられる。

本明細書に記載の免疫療法で使用される細胞は、当技術分野で公知の供給源に由来し得る。例えば、Ｔ細胞は、造血幹細胞集団からインビトロで分化されてもよく、またはＴ細胞は、対象から得てもよい。Ｔ細胞は、例えば、末梢血単核細胞、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位由来の組織、腹水、胸水、脾臓組織、及び腫瘍から得られ得る。さらに、Ｔ細胞は、当技術分野で入手可能な１つ以上のＴ細胞株から得ることができる。Ｔ細胞はまた、ＦＩＣＯＬＬ（商標）分離及び／またはアフェレーシスなど、当業者に公知の任意の数の技法を使用して対象から採取された血液のユニットから得ることができる。Ｔ細胞療法のためにＴ細胞を単離する追加の方法は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる米国特許公開第２０１３／０２８７７４８号にて開示されている。免疫療法はまた、改変された細胞を対象に投与することを含み得、ここで、この改変された細胞は、本明細書にて開示されるＣＤ４及びＴＣＲを発現する。いくつかの態様において、改変された細胞は、Ｔ細胞ではない。

本明細書で使用される「患者」としては、がん（例えば、リンパ腫または白血病）に罹患している任意のヒトが挙げられる。「対象」及び「患者」という用語は、本明細書では交換可能に使用される。

「ペプチド」、「ポリペプチド」、及び「タンパク質」という用語は同じ意味で用いられ、ペプチド結合によって共有結合されたアミノ酸残基から構成される化合物を指す。タンパク質またはペプチドには少なくとも２つのアミノ酸が含まれている必要があり、タンパク質またはペプチドの配列を含み得るアミノ酸の最大数に制限はない。ポリペプチドとしては、ペプチド結合によって互いに結合された２つ以上のアミノ酸を含む任意のペプチドまたはタンパク質が挙げられる。本明細書で使用される場合、この用語は、例えば、当技術分野で一般にペプチド、オリゴペプチド及びオリゴマーとも呼ばれる短鎖、ならびに多くの種類がある、当技術分野で一般にタンパク質と呼ばれるより長い鎖の両方を指す。「ポリペプチド」としては、例えば、とりわけ、生物学的に活性なフラグメント、実質的に相同なポリペプチド、オリゴペプチド、ホモ二量体、ヘテロ二量体、ポリペプチドのバリアント、改変ポリペプチド、誘導体、類似体、融合タンパク質が挙げられる。このポリペプチドとしては、天然ペプチド、組換えペプチド、合成ペプチド、またはそれらの組み合わせが挙げられる。

本明細書で使用される「刺激」とは、シグナル伝達事象を媒介する、刺激分子とその同族リガンドとの結合によって誘導される一次応答を指す。「刺激分子」は、Ｔ細胞上の分子、例えば、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）／ＣＤ４複合体であり、抗原提示細胞上に存在する同族の刺激リガンドと特異的に結合する。「刺激リガンド」とは、抗原提示細胞（例えば、ａＡＰＣ、樹状細胞、Ｂ細胞など）上に存在する場合、Ｔ細胞上の刺激分子と特異的に結合し、それによって、活性化、免疫応答の開始、増殖などを含むがこれらに限定されない、Ｔ細胞による一次応答を媒介するリガンドである。刺激リガンドとしては、ペプチド、抗ＣＤ４抗体、抗ＣＤ２８抗体、抗ＣＤ２抗体、及び抗ＣＤ３抗体が乗っているＭＨＣクラスＩＩ分子が挙げられるが、これらに限定されない。

対象の「治療」または「治療すること」とは、症状、合併症もしくは病態、または疾患に関連する生化学的兆候の発症、進行、発達、症状の重症度もしくは再発を逆転、緩和、改善、阻害、減速、または予防する目的で、対象に対して行われる任意の種類の介入もしくはプロセス、または対象に対する活性剤の投与を指す。一態様において、「治療」または「治療すること」とは、部分的な寛解を含む。別の態様では、「治療」または「治療すること」とは、完全寛解を含む。

選択肢（例えば、「または」）の使用は、選択肢の一方、両方またはその任意の組み合わせのいずれかを意味することを理解されたい。本発明で使用される場合、不定冠詞「ａ」または「ａｎ」は、列挙または示した構成要素のうち「１つ以上」を指すと理解されるべきである。

「約」または「本質的に含む」という用語は、当業者によって決定される特定の値または組成物の許容誤差範囲内にある値または組成物を指し、これは、部分的には、値または組成がどのように測定または決定されるか、すなわち、測定システムの限界に依存する。例えば、「約」または「本質的に含む」とは、当技術分野における実践ごとに１標準偏差以内または１標準偏差を超えることを意味し得る。あるいは、「約」または「本質的に含む」とは、最大１０％（すなわち、±１０％）の範囲を意味し得る。例えば、約３ｍｇは、２．７ｍｇから３．３ｍｇ（１０％の場合）の間の任意の数を含み得る。さらに、特に生物学的システムまたはプロセスに関して、この用語は、最大１桁または最大５倍の値を意味し得る。特定の値または組成物が本出願及び特許請求の範囲で提供される場合、特に明記しない限り、「約」または「本質的に含む」の意味は、その特定の値または組成物の許容誤差範囲内にあると想定されるべきである。

本明細書に記載のとおり、任意の濃度範囲、パーセンテージ範囲、比率範囲または整数範囲は、特に指定しない限り、列挙される範囲内の任意の整数の値を含み、必要に応じて、その分数（整数の１／１０及び１／１００など）を含むものと理解されるべきである。

本発明の種々の態様については、以下のサブセクションにてさらに詳細に説明する。

ＩＩ． 本開示の組成物
本開示は、ＣＤ４結合が強化されたＨＬＡクラスＩＩ分子に関する。本開示のある特定の態様は、ベータ鎖を含むＨＬＡクラスＩＩ分子に関し、ここで、ベータ鎖は１つ以上の変異を含む。ある特定の態様において、ベータ鎖の１つ以上の変異は、ＣＤ４に対するベータ鎖の親和性を強化する。ある特定の態様において、ベータ鎖は、ＨＬＡ－ＤＱ（「ＤＱ」）ベータ鎖である。

ＩＩ．Ａ． ＭＨＣクラスＩＩ分子
ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）系（ヒトの主要組織適合遺伝子複合体［ＭＨＣ］）は、免疫系の重要な部分であり、第６染色体上の遺伝子によって制御される。これは、抗原ペプチドをＴ細胞上のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）に提示することに特化した細胞表面分子をコードしている。（Ｉｍｍｕｎｅ Ｓｙｓｔｅｍの概要を参照されたい）。抗原（Ａｇ）を提示するＭＨＣ分子は、クラスＩＭＨＣ分子及びクラスＩＩＭＨＣ分子の２つの主要なクラスに分類される。

クラスＩＩＭＨＣ分子は、プロフェッショナル抗原提示細胞（ＡＰＣ）の表面上で膜貫通糖タンパク質として存在する。無傷クラスＩＩ分子は、アルファ鎖及びベータ鎖で構成されている。ＨＬＡ複合体の３つの遺伝子座は、ＨＬＡ－ＤＰ、ＨＬＡ－ＤＱ及びＨＬＡ－ＤＲのＭＨＣクラスＩＩタンパク質をコードする。ＣＤ４分子を発現するＴ細胞は、クラスＩＩＭＨＣ分子と反応する。これらのリンパ球は、多くの場合、エフェクター機能及びヘルパー機能を有し、応答を活性化して、細胞内の病原体に感染した自己細胞を排除するか、細胞外寄生生物を破壊し、かつＣＤ８Ｔ細胞などの他のＴ細胞を助ける。プロフェッショナルＡＰＣのみがクラスＩＩＭＨＣ分子を発現するので、これらの細胞のみが、ＣＤ４ Ｔ細胞に対して抗原を提示する（ＣＤ４は、ＭＨＣクラスＩＩ分子のアルファ鎖及びベータ鎖の、それぞれアルファ２ドメイン及びベータ２ドメインの非多形性部分に結合する）。

いくつかの態様において、ＨＬＡクラスＩＩのアルファ鎖及びベータ鎖は、ＨＬＡ－ＤＰ、ＨＬＡ－ＤＱ、及びＨＬＡ－ＤＲ対立遺伝子から選択される。ある特定の態様において、ＨＬＡクラスＩＩベータ鎖は、ＨＬＡ－ＤＱ対立遺伝子である。ある特定の態様において、ＨＬＡクラスＩＩアルファ鎖は、ＨＬＡ－ＤＱ対立遺伝子である。

多くのＨＬＡ－ＤＱ対立遺伝子が当技術分野において既知であり、任意の既知の対立遺伝子を本開示で使用することができる。ＨＬＡ－ＤＱアルファ鎖及びベータ鎖対立遺伝子の例を、表１に示す。ＨＬＡ対立遺伝子の更新されたリストは、ｈｌａ．ａｌｌｅｌｅｓ．ｏｒｇ／で入手可能である（最終訪問日：２０１９年７月１０日）。

ＩＩ．Ａ．１． ＭＨＣクラスＩＩベータ鎖
ある特定の態様において、ＨＬＡクラスＩＩ分子は、ＤＱベータ鎖を含み、ここで、該ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にロイシン以外のアミノ酸を含む。ロイシン以外の任意のアミノ酸が、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基に存在してもよい。いくつかの態様において、ロイシン以外のアミノ酸は、疎水性側鎖を含むアミノ酸である。ある特定の態様において、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、アラニン、バリン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンから選択されるアミノ酸である。ある特定の態様において、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、アラニンである。ある特定の態様において、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、バリンである。ある特定の態様において、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、イソロイシンである。ある特定の態様において、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、メチオニンである。ある特定の態様において、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、フェニルアラニンである。ある特定の態様において、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、チロシンである。ある特定の態様において、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、トリプトファンである。

いくつかの実施形態では、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、２つ以上のアミノ酸、例えば、２つのアミノ酸、３つのアミノ酸、４つのアミノ酸、５つのアミノ酸またそれ以上で構成される。いくつかの態様において、２つ以上のアミノ酸のうち少なくとも１つは、疎水性側鎖を含む。ある特定の態様において、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、例えば少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、または少なくとも５つなど、一連のアミノ酸で構成され、ここで、一連のアミノ酸のそれぞれは、疎水性側鎖を含む。

ある特定の態様において、ＨＬＡクラスＩＩ分子は、ＤＱベータ鎖を含み、ここで、該ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にバリン以外のアミノ酸を含む。バリン以外の任意のアミノ酸が、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基に存在してもよい。いくつかの態様において、バリン以外のアミノ酸は、疎水性側鎖を含むアミノ酸である。ある特定の態様において、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、アラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンから選択されるアミノ酸である。ある特定の態様において、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、アラニンである。ある特定の態様において、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、イソロイシンである。ある特定の態様において、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、ロイシンである。ある特定の態様において、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、メチオニンである。ある特定の態様において、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、フェニルアラニンである。ある特定の態様において、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、チロシンである。ある特定の態様において、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、トリプトファンである。

いくつかの態様において、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、２つ以上のアミノ酸、例えば、２つのアミノ酸、３つのアミノ酸、４つのアミノ酸、５つのアミノ酸またそれ以上で構成される。いくつかの態様において、２つ以上のアミノ酸のうち少なくとも１つは、疎水性側鎖を含む。ある特定の態様において、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、例えば少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、または少なくとも５つなど、一連のアミノ酸で構成され、ここで、一連のアミノ酸のそれぞれは、疎水性側鎖を含む。

ある特定の態様において、ＨＬＡクラスＩＩ分子は、ＤＱベータ鎖を含み、ここで、該ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にアスパラギン以外のアミノ酸を含む。アスパラギン以外の任意のアミノ酸が、配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基に存在してもよい。いくつかの態様において、アスパラギン以外のアミノ酸は、極性無電荷側鎖を含むアミノ酸である。ある特定の態様において、配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基のアスパラギン以外のアミノ酸は、セリン、スレオニン、及びグルタミンから選択されるアミノ酸である。ある特定の態様において、配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基のアスパラギン以外のアミノ酸は、セリンである。ある特定の態様において、配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基のアスパラギン以外のアミノ酸は、スレオニンである。ある特定の態様において、配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基のアスパラギン以外のアミノ酸は、グルタミンである。

いくつかの態様において、配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基のアスパラギン以外のアミノ酸は、２つ以上のアミノ酸、例えば、２つのアミノ酸、３つのアミノ酸、４つのアミノ酸、５つのアミノ酸またそれ以上で構成される。いくつかの態様において、２つ以上のアミノ酸のうち少なくとも１つは、極性無電荷側鎖を含む。ある特定の態様において、配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基のアスパラギン以外のアミノ酸は、例えば少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、または少なくとも５つなど、一連のアミノ酸で構成され、ここで、一連のアミノ酸のそれぞれは、極性無電荷側鎖を含む。

ある特定の態様において、ＨＬＡクラスＩＩ分子は、ＤＱベータ鎖を含み、ここで、該ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にイソロイシン以外のアミノ酸を含む。イソロイシン以外の任意のアミノ酸が、配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基に存在してもよい。いくつかの態様において、イソロイシン以外のアミノ酸は、疎水性側鎖を含むアミノ酸である。ある特定の態様において、配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基のイソロイシン以外のアミノ酸は、アラニン、バリン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンから選択されるアミノ酸である。ある特定の態様において、配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基のイソロイシン以外のアミノ酸は、アラニンである。ある特定の態様において、配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基のイソロイシン以外のアミノ酸は、バリンである。ある特定の態様において、配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基のイソロイシン以外のアミノ酸は、ロイシンである。ある特定の態様において、配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基のイソロイシン以外のアミノ酸は、メチオニンである。ある特定の態様において、配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基のイソロイシン以外のアミノ酸は、フェニルアラニンである。ある特定の態様において、配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基のイソロイシン以外のアミノ酸は、チロシンである。ある特定の態様において、配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基のイソロイシン以外のアミノ酸は、トリプトファンである。

いくつかの態様において、配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基のイソロイシン以外のアミノ酸は、２つ以上のアミノ酸、例えば、２つのアミノ酸、３つのアミノ酸、４つのアミノ酸、５つのアミノ酸またそれ以上で構成される。いくつかの態様において、２つ以上のアミノ酸のうち少なくとも１つは、疎水性側鎖を含む。ある特定の態様において、配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基のイソロイシン以外のアミノ酸は、例えば少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、または少なくとも５つなど、一連のアミノ酸で構成され、ここで、一連のアミノ酸のそれぞれは、疎水性側鎖を含む。

ある特定の態様において、ＨＬＡクラスＩＩ分子は、ＤＱベータ鎖を含み、ここで、該ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にセリン以外のアミノ酸を含む。セリン以外の任意のアミノ酸が、配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基に存在してもよい。いくつかの態様において、セリン以外のアミノ酸は、帯電した側鎖を含むアミノ酸である。ある特定の態様において、配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基のセリン以外のアミノ酸は、アルギニン、ヒスチジン、及びリシンから選択されるアミノ酸である。ある特定の態様において、配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基のセリン以外のアミノ酸は、アルギニンである。ある特定の態様において、配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基のセリン以外のアミノ酸は、ヒスチジンである。ある特定の態様において、配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基のセリン以外のアミノ酸は、リシンである。

いくつかの態様において、配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基のセリン以外のアミノ酸は、２つ以上のアミノ酸、例えば、２つのアミノ酸、３つのアミノ酸、４つのアミノ酸、５つのアミノ酸またそれ以上で構成される。いくつかの態様において、２つ以上のアミノ酸のうち少なくとも１つは、帯電した側鎖を含む。ある特定の態様において、配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基のセリン以外のアミノ酸は、例えば少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、または少なくとも５つなど、一連のアミノ酸で構成され、ここで、一連のアミノ酸のそれぞれは、帯電した側鎖を含む。

ある特定の態様において、ＨＬＡクラスＩＩ分子は、ＤＱベータ鎖を含み、ここで、該ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にプロリン以外のアミノ酸を含む。プロリン以外の任意のアミノ酸が、配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基に存在してもよい。いくつかの態様において、プロリン以外のアミノ酸は、極性無電荷側鎖を含むアミノ酸である。ある特定の態様において、配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基のプロリン以外のアミノ酸は、セリン、スレオニン、アスパラギン、及びグルタミンから選択されるアミノ酸である。ある特定の態様において、配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基のプロリン以外のアミノ酸は、セリンである。ある特定の態様において、配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基のプロリン以外のアミノ酸は、スレオニンである。ある特定の態様において、配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基のプロリン以外のアミノ酸は、アスパラギンである。ある特定の態様において、配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基のプロリン以外のアミノ酸は、グルタミンである。

いくつかの態様において、配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基のプロリン以外のアミノ酸は、２つ以上のアミノ酸、例えば、２つのアミノ酸、３つのアミノ酸、４つのアミノ酸、５つのアミノ酸またそれ以上で構成される。いくつかの態様において、２つ以上のアミノ酸のうち少なくとも１つは、極性無電荷側鎖を含む。ある特定の態様において、配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基のプロリン以外のアミノ酸は、例えば少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、または少なくとも５つなど、一連のアミノ酸で構成され、ここで、一連のアミノ酸のそれぞれは、極性無電荷側鎖を含む。

本開示のある特定の態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、野生型ＤＱベータ鎖と比較して２つ以上の置換変異を含むＤＱベータ鎖を含む。ある特定の態様において、ＤＱベータ鎖は、野生型ＤＱベータ鎖と比較して、少なくとも２つの変異、少なくとも３つの変異、少なくとも４つの変異、少なくとも５つの変異、少なくとも６つの変異、少なくとも７つの変異、少なくとも８つの変異、少なくとも９つの変異、または少なくとも１０個の変異を含む。

ある特定の態様において、ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にロイシン以外のアミノ酸、及び配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にバリン以外のアミノ酸を含む。ある特定の態様において、ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にロイシン以外のアミノ酸、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にバリン以外のアミノ酸、ならびに、（ｉ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にアスパラギン以外のアミノ酸、（ｉｉ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にイソロイシン以外のアミノ酸、（ｉｉｉ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にセリン以外のアミノ酸、及び（ｉｖ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にプロリン以外のアミノ酸のうち少なくとも３つを含む。

いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖は、（ｉ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にロイシン以外のアミノ酸、（ｉｉ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にバリン以外のアミノ酸、（ｉｉｉ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にアスパラギン以外のアミノ酸、（ｉｖ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にイソロイシン以外のアミノ酸、（ｖ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にセリン以外のアミノ酸、及び（ｖｉ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にプロリン以外のアミノ酸を含む。

いくつかの態様において、（ｉ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸、（ｉｉ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸、または配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸及び配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸のそれぞれは、疎水性側鎖を含むアミノ酸である。

いくつかの態様において、（ｉ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、アラニン、バリン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンから選択され、（ｉｉ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、アラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンから選択され、（ｉｉｉ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基のアスパラギン以外のアミノ酸は、セリン、スレオニン、及びグルタミンから選択され、（ｉｖ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基のイソロイシン以外のアミノ酸は、アラニン、バリン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンから選択され、（ｖ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基のセリン以外のアミノ酸は、アルギニン、ヒスチジン、及びリシンから選択され、（ｖｉ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基のプロリン以外のアミノ酸は、セリン、スレオニン、アスパラギン及びグルタミンから選択される。

いくつかの態様において、（ｉ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、トリプトファンであり、（ｉｉ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、アラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンから選択される。いくつかの態様において、（ｉ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、アラニン、バリン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンから選択され、かつ（ｉｉ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、メチオニンである。いくつかの態様において、（ｉ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、トリプトファンであり、かつ（ｉｉ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、メチオニンである。いくつかの態様において、（ｉ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、トリプトファンであり、（ｉｉ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、メチオニンであり、（ｉｉｉ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基のアスパラギン以外のアミノ酸は、グルタミンであり、（ｉｖ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基のイソロイシン以外のアミノ酸は、バリンであり、（ｖ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基のセリン以外のアミノ酸は、ヒスチジンであり、かつ（ｖｉ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基のプロリン以外のアミノ酸は、グルタミンである。

ある特定の態様において、本明細書に記載のＤＱベータ鎖は、参照ＨＬＡクラスＩＩ分子と比較してＣＤ４タンパク質に対する親和性が高い。いくつかの態様において、参照ＨＬＡクラスＩＩ分子は、野生型ＤＱベータ鎖を有するＨＬＡクラスＩＩ分子である。いくつかの態様において、参照ＨＬＡクラスＩＩ分子は、（ｉ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にロイシン、及び／または（ｉｉ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にバリンを含むＤＱベータ鎖を有するＨＬＡクラスＩＩ分子である。いくつかの態様において、参照ＨＬＡクラスＩＩ分子は、（ｉ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にロイシン、（ｉｉ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にバリン、（ｉｉｉ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にアスパラギン、（ｉｖ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にイソロイシン、（ｖ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にセリン、（ｖｉ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にプロリンを含むＤＱベータ鎖を有するＨＬＡクラスＩＩ分子である。

いくつかの態様において、ＣＤ４に対して強化された親和性は、参照ＨＬＡクラスＩＩ分子のＣＤ４に対する親和性よりも、少なくとも約１．５倍、少なくとも約２倍、少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、少なくとも約５倍、少なくとも約６倍、少なくとも約７倍、少なくとも約８倍、少なくとも約９倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約１５倍、少なくとも約２０倍、少なくとも約２５倍、少なくとも約３０倍、少なくとも約３５倍、少なくとも約４０倍、少なくとも約４５倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約７５倍、少なくとも約１００倍、少なくとも約２００倍、少なくとも約３００倍、少なくとも約４００倍、少なくとも約５００倍、少なくとも約１０００倍、少なくとも約１５００倍、少なくとも約２０００倍、少なくとも約２５００倍、少なくとも約３０００倍、少なくとも約３５００倍、少なくとも約４０００倍、少なくとも約４５００倍、または少なくとも約４０００倍超高い。

いくつかの態様において、ＣＤ４に対して強化された親和性は、参照ＨＬＡクラスＩＩ分子のＣＤ４に対する親和性よりも、少なくとも約１．５倍～少なくとも約５０００倍、１．５倍～少なくとも約４０００倍、１．５倍～少なくとも約３０００倍、１．５倍～少なくとも約２０００倍、１．５倍～少なくとも約１０００倍、１０倍～少なくとも約５０００倍、１０倍～少なくとも約４０００倍、１０倍～少なくとも約３０００倍、１０倍～少なくとも約２０００倍、１０倍～少なくとも約１０００倍、１０倍～少なくとも約９００倍、１０倍～少なくとも約８００倍、１０倍～少なくとも約７００倍、１０倍～少なくとも約６００倍、１０倍～少なくとも約５００倍、１０倍～少なくとも約４００倍、１０倍～少なくとも約３００倍、１０倍～少なくとも約２００倍、１０倍～少なくとも約１００倍、１００倍～少なくとも約５０００倍、１００倍～少なくとも約４０００倍、１００倍～少なくとも約３０００倍、１００倍～少なくとも約２０００倍、１００倍～少なくとも約１０００倍、１００倍～少なくとも約９００倍、１００倍～少なくとも約８００倍、１００倍～少なくとも約７００倍、１００倍～少なくとも約６００倍、１００倍～少なくとも約５００倍、１００倍～少なくとも約４００倍、１００倍～少なくとも約３００倍、または１００倍～少なくとも約２００倍超高い。

ある特定の態様において、ＤＱベータ鎖は、ＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０２、ＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０３、ＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０４、ＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０５、及びＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０６対立遺伝子から選択される対立遺伝子を含む。ある特定の態様において、ＤＱベータ鎖は、ＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０５対立遺伝子を含む。特定の態様において、ＤＱベータ鎖は、ＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０５：０１対立遺伝子を含む。

ある特定の態様において、ＤＱベータ鎖は、ＤＱＢ１＊０２：０１：０１、ＤＱＢ１＊０２：０１：０２、ＤＱＢ１＊０２：０１：０３、ＤＱＢ１＊０２：０１：０４、ＤＱＢ１＊０２：０１：０５、ＤＱＢ１＊０２：０１：０６、ＤＱＢ１＊０２：０１：０７、ＤＱＢ１＊０２：０１：０８、ＤＱＢ１＊０２：０１：０９、ＤＱＢ１＊０２：０１：１０、ＤＱＢ１＊０２：０１：１１、ＤＱＢ１＊０２：０１：１２、ＤＱＢ１＊０２：０１：１３、ＤＱＢ１＊０２：０１：１４、ＤＱＢ１＊０２：０１：１５、ＤＱＢ１＊０２：０１：１６、ＤＱＢ１＊０２：０１：１７、ＤＱＢ１＊０２：０１：１８、ＤＱＢ１＊０２：０１：１９、ＤＱＢ１＊０２：０１：２０、ＤＱＢ１＊０２：０１：２１、ＤＱＢ１＊０２：０１：２２、ＤＱＢ１＊０２：０１：２３、ＤＱＢ１＊０２：０１：２４、ＤＱＢ１＊０２：０１：２５、ＤＱＢ１＊０２：０１：２６、ＤＱＢ１＊０２：０１：２７、ＤＱＢ１＊０２：０１：２８、ＤＱＢ１＊０２：０１：２９、ＤＱＢ１＊０２：０１：３０、ＤＱＢ１＊０２：０１：３１、ＤＱＢ１＊０２：０２：０１：０１、ＤＱＢ１＊０２：０２：０１：０２、ＤＱＢ１＊０２：０２：０１：０３、ＤＱＢ１＊０２：０２：０１：０４、ＤＱＢ１＊０２：０２：０２、ＤＱＢ１＊０２：０２：０３、ＤＱＢ１＊０２：０２：０４、ＤＱＢ１＊０２：０２：０５、ＤＱＢ１＊０２：０２：０６、ＤＱＢ１＊０２：０２：０７、ＤＱＢ１＊０２：０２：０８、ＤＱＢ１＊０２：０２：０９、ＤＱＢ１＊０２：０３：０１、ＤＱＢ１＊０２：０３：０２、ＤＱＢ１＊０２：０４、ＤＱＢ１＊０２：０５、ＤＱＢ１＊０２：０６、ＤＱＢ１＊０２：０７：０１、ＤＱＢ１＊０２：０７：０２、ＤＱＢ１＊０２：０８、ＤＱＢ１＊０２：０９、ＤＱＢ１＊０２：１０、ＤＱＢ１＊０２：１００、ＤＱＢ１＊０２：１０１、ＤＱＢ１＊０２：１０２、ＤＱＢ１＊０２：１０３、ＤＱＢ１＊０２：１０４、ＤＱＢ１＊０２：１０５、ＤＱＢ１＊０２：１０６、ＤＱＢ１＊０２：１０７、ＤＱＢ１＊０２：１０８、ＤＱＢ１＊０２：１０９、ＤＱＢ１＊０２：１１、ＤＱＢ１＊０２：１１０、ＤＱＢ１＊０２：１１１、ＤＱＢ１＊０２：１１２、ＤＱＢ１＊０２：１１３、ＤＱＢ１＊０２：１１４、ＤＱＢ１＊０２：１１５、ＤＱＢ１＊０２：１１６、ＤＱＢ１＊０２：１１７、ＤＱＢ１＊０２：１１８、ＤＱＢ１＊０２：１１９、ＤＱＢ１＊０２：１２、ＤＱＢ１＊０２：１２０、ＤＱＢ１＊０２：１２１、ＤＱＢ１＊０２：１２２、ＤＱＢ１＊０２：１２３、ＤＱＢ１＊０２：１２４、ＤＱＢ１＊０２：１２５、ＤＱＢ１＊０２：１２６、ＤＱＢ１＊０２：１２７、ＤＱＢ１＊０２：１２８、ＤＱＢ１＊０２：１２９Ｎ、ＤＱＢ１＊０２：１３、ＤＱＢ１＊０２：１３０、ＤＱＢ１＊０２：１３１、ＤＱＢ１＊０２：１３２Ｎ、ＤＱＢ１＊０２：１３３、ＤＱＢ１＊０２：１３４Ｎ、ＤＱＢ１＊０２：１３５、ＤＱＢ１＊０２：１３６、ＤＱＢ１＊０２：１３７、ＤＱＢ１＊０２：１３８、ＤＱＢ１＊０２：１３９、ＤＱＢ１＊０２：１４０、ＤＱＢ１＊０２：１４１、ＤＱＢ１＊０２：１４２、ＤＱＢ１＊０２：１４：０１、ＤＱＢ１＊０２：１４：０２、ＤＱＢ１＊０２：１５、ＤＱＢ１＊０２：１６、ＤＱＢ１＊０２：１７、ＤＱＢ１＊０２：１８Ｎ、ＤＱＢ１＊０２：１９、ＤＱＢ１＊０２：２０Ｎ、ＤＱＢ１＊０２：２１、ＤＱＢ１＊０２：２２、ＤＱＢ１＊０２：２３、ＤＱＢ１＊０２：２４、ＤＱＢ１＊０２：２５、ＤＱＢ１＊０２：２６、ＤＱＢ１＊０２：２７、ＤＱＢ１＊０２：２８、ＤＱＢ１＊０２：２９、ＤＱＢ１＊０２：３０、ＤＱＢ１＊０２：３１、ＤＱＢ１＊０２：３２、ＤＱＢ１＊０２：３３、ＤＱＢ１＊０２：３４、ＤＱＢ１＊０２：３５、ＤＱＢ１＊０２：３６、ＤＱＢ１＊０２：３７、ＤＱＢ１＊０２：３８、ＤＱＢ１＊０２：３９、ＤＱＢ１＊０２：４０、ＤＱＢ１＊０２：４１、ＤＱＢ１＊０２：４２、ＤＱＢ１＊０２：４３、ＤＱＢ１＊０２：４４、ＤＱＢ１＊０２：４５、ＤＱＢ１＊０２：４６、ＤＱＢ１＊０２：４７、ＤＱＢ１＊０２：４８、ＤＱＢ１＊０２：４９、ＤＱＢ１＊０２：５０、ＤＱＢ１＊０２：５１、ＤＱＢ１＊０２：５２、ＤＱＢ１＊０２：５３Ｑ、ＤＱＢ１＊０２：５４、ＤＱＢ１＊０２：５５、ＤＱＢ１＊０２：５６、ＤＱＢ１＊０２：５７、ＤＱＢ１＊０２：５８Ｎ、ＤＱＢ１＊０２：５９、ＤＱＢ１＊０２：６０、ＤＱＢ１＊０２：６１、ＤＱＢ１＊０２：６２、ＤＱＢ１＊０２：６３、ＤＱＢ１＊０２：６４、ＤＱＢ１＊０２：６５、ＤＱＢ１＊０２：６６、ＤＱＢ１＊０２：６７ＮＸ、ＤＱＢ１＊０２：６８、ＤＱＢ１＊０２：６９、ＤＱＢ１＊０２：７０、ＤＱＢ１＊０２：７１、ＤＱＢ１＊０２：７２、ＤＱＢ１＊０２：７３、ＤＱＢ１＊０２：７４、ＤＱＢ１＊０２：７５、ＤＱＢ１＊０２：７６、ＤＱＢ１＊０２：７７、ＤＱＢ１＊０２：７８、ＤＱＢ１＊０２：７９、ＤＱＢ１＊０２：８０、ＤＱＢ１＊０２：８１、ＤＱＢ１＊０２：８２、ＤＱＢ１＊０２：８３、ＤＱＢ１＊０２：８４、ＤＱＢ１＊０２：８５、ＤＱＢ１＊０２：８６、ＤＱＢ１＊０２：８７、ＤＱＢ１＊０２：８８、ＤＱＢ１＊０２：８９：０１、ＤＱＢ１＊０２：８９：０２、ＤＱＢ１＊０２：９０、ＤＱＢ１＊０２：９１、ＤＱＢ１＊０２：９２、ＤＱＢ１＊０２：９３、ＤＱＢ１＊０２：９４、ＤＱＢ１＊０２：９５、ＤＱＢ１＊０２：９６Ｎ、ＤＱＢ１＊０２：９７、ＤＱＢ１＊０２：９８、ＤＱＢ１＊０２：９９、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：０１、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：０２、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：０３、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：０４、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：０５、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：０６、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：０７、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：０８、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：０９、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：１０、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：１１、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：１２、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：１４、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：１５、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：１６、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：１７、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：１８、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：１９、ＤＱＢ１＊０３：０１：０１：２０、ＤＱＢ１＊０３：０１：０２、ＤＱＢ１＊０３：０１：０３、ＤＱＢ１＊０３：０１：０４、ＤＱＢ１＊０３：０１：０５、ＤＱＢ１＊０３：０１：０６、ＤＱＢ１＊０３：０１：０７、ＤＱＢ１＊０３：０１：０８、ＤＱＢ１＊０３：０１：０９、ＤＱＢ１＊０３：０１：１０、ＤＱＢ１＊０３：０１：１１、ＤＱＢ１＊０３：０１：１２、ＤＱＢ１＊０３：０１：１３、ＤＱＢ１＊０３：０１：１４、ＤＱＢ１＊０３：０１：１５、ＤＱＢ１＊０３：０１：１６、ＤＱＢ１＊０３：０１：１７、ＤＱＢ１＊０３：０１：１８、ＤＱＢ１＊０３：０１：１９、ＤＱＢ１＊０３：０１：２０、ＤＱＢ１＊０３：０１：２１、ＤＱＢ１＊０３：０１：２２、ＤＱＢ１＊０３：０１：２３、ＤＱＢ１＊０３：０１：２４、ＤＱＢ１＊０３：０１：２５、ＤＱＢ１＊０３：０１：２６、ＤＱＢ１＊０３：０１：２７、ＤＱＢ１＊０３：０１：２８、ＤＱＢ１＊０３：０１：２９、ＤＱＢ１＊０３：０１：３０、ＤＱＢ１＊０３：０１：３１、ＤＱＢ１＊０３：０１：３２、ＤＱＢ１＊０３：０１：３３、ＤＱＢ１＊０３：０１：３４、ＤＱＢ１＊０３：０１：３５、ＤＱＢ１＊０３：０１：３６、ＤＱＢ１＊０３：０１：３７、ＤＱＢ１＊０３：０１：３８、ＤＱＢ１＊０３：０１：３９、ＤＱＢ１＊０３：０１：４０、ＤＱＢ１＊０３：０１：４１、ＤＱＢ１＊０３：０１：４２、ＤＱＢ１＊０３：０１：４３、ＤＱＢ１＊０３：０１：４４、ＤＱＢ１＊０３：０１：４５、ＤＱＢ１＊０３：０１：４６、ＤＱＢ１＊０３：０２：０１：０１、ＤＱＢ１＊０３：０２：０１：０２、ＤＱＢ１＊０３：０２：０１：０３、ＤＱＢ１＊０３：０２：０１：０４、ＤＱＢ１＊０３：０２：０１：０５、ＤＱＢ１＊０３：０２：０１：０６、ＤＱＢ１＊０３：０２：０１：０７、ＤＱＢ１＊０３：０２：０１：０８、ＤＱＢ１＊０３：０２：０２、ＤＱＢ１＊０３：０２：０３、ＤＱＢ１＊０３：０２：０４、ＤＱＢ１＊０３：０２：０５、ＤＱＢ１＊０３：０２：０６、ＤＱＢ１＊０３：０２：０７、ＤＱＢ１＊０３：０２：０８、ＤＱＢ１＊０３：０２：０９、ＤＱＢ１＊０３：０２：１０、ＤＱＢ１＊０３：０２：１１、ＤＱＢ１＊０３：０２：１２、ＤＱＢ１＊０３：０２：１３、ＤＱＢ１＊０３：０２：１４、ＤＱＢ１＊０３：０２：１５、ＤＱＢ１＊０３：０２：１６、ＤＱＢ１＊０３：０２：１７、ＤＱＢ１＊０３：０２：１８、ＤＱＢ１＊０３：０２：１９、ＤＱＢ１＊０３：０２：２０、ＤＱＢ１＊０３：０２：２１、ＤＱＢ１＊０３：０２：２２、ＤＱＢ１＊０３：０２：２３、ＤＱＢ１＊０３：０２：２４、ＤＱＢ１＊０３：０２：２５、ＤＱＢ１＊０３：０２：２６、ＤＱＢ１＊０３：０２：２７、ＤＱＢ１＊０３：０２：２８、ＤＱＢ１＊０３：０２：２９、ＤＱＢ１＊０３：０２：３０、ＤＱＢ１＊０３：０３：０２：０１、ＤＱＢ１＊０３：０３：０２：０２、ＤＱＢ１＊０３：０３：０２：０３、ＤＱＢ１＊０３：０３：０２：０４、ＤＱＢ１＊０３：０３：０２：０５、ＤＱＢ１＊０３：０３：０３、ＤＱＢ１＊０３：０３：０４、ＤＱＢ１＊０３：０３：０５、ＤＱＢ１＊０３：０３：０６、ＤＱＢ１＊０３：０３：０７、ＤＱＢ１＊０３：０３：０８、ＤＱＢ１＊０３：０３：０９、ＤＱＢ１＊０３：０３：１０、ＤＱＢ１＊０３：０３：１１、ＤＱＢ１＊０３：０３：１２、ＤＱＢ１＊０３：０３：１３、ＤＱＢ１＊０３：０３：１４、ＤＱＢ１＊０３：０３：１５、ＤＱＢ１＊０３：０３：１６、ＤＱＢ１＊０３：０３：１７、ＤＱＢ１＊０３：０３：１８、ＤＱＢ１＊０３：０３：１９、ＤＱＢ１＊０３：０３：２０、ＤＱＢ１＊０３：０３：２１、ＤＱＢ１＊０３：０４：０１、ＤＱＢ１＊０３：０４：０２、ＤＱＢ１＊０３：０４：０３、ＤＱＢ１＊０３：０４：０４、ＤＱＢ１＊０３：０５：０１、ＤＱＢ１＊０３：０５：０２、ＤＱＢ１＊０３：０５：０３、ＤＱＢ１＊０３：０５：０４、ＤＱＢ１＊０３：０６、ＤＱＢ１＊０３：０７、ＤＱＢ１＊０３：０８、ＤＱＢ１＊０３：０９、ＤＱＢ１＊０３：１００、ＤＱＢ１＊０３：１０１、ＤＱＢ１＊０３：１０２、ＤＱＢ１＊０３：１０３、ＤＱＢ１＊０３：１０４、ＤＱＢ１＊０３：１０５、ＤＱＢ１＊０３：１０６、ＤＱＢ１＊０３：１０７、ＤＱＢ１＊０３：１０８、ＤＱＢ１＊０３：１０９、ＤＱＢ１＊０３：１０：０１、ＤＱＢ１＊０３：１０：０２：０１、ＤＱＢ１＊０３：１０：０２：０２、ＤＱＢ１＊０３：１１、ＤＱＢ１＊０３：１１０、ＤＱＢ１＊０３：１１１、ＤＱＢ１＊０３：１１２、ＤＱＢ１＊０３：１１３、ＤＱＢ１＊０３：１１４、ＤＱＢ１＊０３：１１５、ＤＱＢ１＊０３：１１６、ＤＱＢ１＊０３：１１７、ＤＱＢ１＊０３：１１８Ｎ、ＤＱＢ１＊０３：１１９、ＤＱＢ１＊０３：１２、ＤＱＢ１＊０３：１２０、ＤＱＢ１＊０３：１２１、ＤＱＢ１＊０３：１２２、ＤＱＢ１＊０３：１２３、ＤＱＢ１＊０３：１２４、ＤＱＢ１＊０３：１２５、ＤＱＢ１＊０３：１２６、ＤＱＢ１＊０３：１２７、ＤＱＢ１＊０３：１２８、ＤＱＢ１＊０３：１２９、ＤＱＢ１＊０３：１３、ＤＱＢ１＊０３：１３０、ＤＱＢ１＊０３：１３１、ＤＱＢ１＊０３：１３２、ＤＱＢ１＊０３：１３３、ＤＱＢ１＊０３：１３４、ＤＱＢ１＊０３：１３５、ＤＱＢ１＊０３：１３６、ＤＱＢ１＊０３：１３７、ＤＱＢ１＊０３：１３８、ＤＱＢ１＊０３：１３９、ＤＱＢ１＊０３：１４０、ＤＱＢ１＊０３：１４１、ＤＱＢ１＊０３：１４２、ＤＱＢ１＊０３：１４３、ＤＱＢ１＊０３：１４４、ＤＱＢ１＊０３：１４５、ＤＱＢ１＊０３：１４６、ＤＱＢ１＊０３：１４７、ＤＱＢ１＊０３：１４８、ＤＱＢ１＊０３：１４９、ＤＱＢ１＊０３：１４：０１、ＤＱＢ１＊０３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：０９：０２、ＤＱＢ１＊０６：０９：０３、ＤＱＢ１＊０６：０９：０４、ＤＱＢ１＊０６：０９：０５、ＤＱＢ１＊０６：０９：０６、ＤＱＢ１＊０６：０９：０７、ＤＱＢ１＊０６：０９：０８、ＤＱＢ１＊０６：０９：０９、ＤＱＢ１＊０６：０９：１０、ＤＱＢ１＊０６：１０、ＤＱＢ１＊０６：１００、ＤＱＢ１＊０６：１０１、ＤＱＢ１＊０６：１０２Ｎ、ＤＱＢ１＊０６：１０３、ＤＱＢ１＊０６：１０４、ＤＱＢ１＊０６：１０５、ＤＱＢ１＊０６：１０６、ＤＱＢ１＊０６：１０７、ＤＱＢ１＊０６：１０８、ＤＱＢ１＊０６：１０９、ＤＱＢ１＊０６：１１０、ＤＱＢ１＊０６：１１１、ＤＱＢ１＊０６：１１２Ｎ、ＤＱＢ１＊０６：１１３、ＤＱＢ１＊０６：１１４、ＤＱＢ１＊０６：１１５、ＤＱＢ１＊０６：１１６、ＤＱＢ１＊０６：１１７、ＤＱＢ１＊０６：１１８：０１、ＤＱＢ１＊０６：１１８：０２、ＤＱＢ１＊０６：１１８：０３、ＤＱＢ１＊０６：１１９、ＤＱＢ１＊０６：１１：０１、ＤＱＢ１＊０６：１１：０２、ＤＱＢ１＊０６：１１：０３、ＤＱＢ１＊０６：１１：０４、ＤＱＢ１＊０６：１２、ＤＱＢ１＊０６：１２０、ＤＱＢ１＊０６：１２１、ＤＱＢ１＊０６：１２２、ＤＱＢ１＊０６：１２３、ＤＱＢ１＊０６：１２４、ＤＱＢ１＊０６：１２５、ＤＱＢ１＊０６：１２６、ＤＱＢ１＊０６：１２７、ＤＱＢ１＊０６：１２８、ＤＱＢ１＊０６：１２９、ＤＱＢ１＊０６：１３０、ＤＱＢ１＊０６：１３１、ＤＱＢ１＊０６：１３２、ＤＱＢ１＊０６：１３３、ＤＱＢ１＊０６：１３４、ＤＱＢ１＊０６：１３５、ＤＱＢ１＊０６：１３６、ＤＱＢ１＊０６：１３７、ＤＱＢ１＊０６：１３８、ＤＱＢ１＊０６：１３９、ＤＱＢ１＊０６：１３：０１、ＤＱＢ１＊０６：１３：０２、ＤＱＢ１＊０６：１３：０３、ＤＱＢ１＊０６：１４０、ＤＱＢ１＊０６：１４１、ＤＱＢ１＊０６：１４２、ＤＱＢ１＊０６：１４３、ＤＱＢ１＊０６：１４４Ｎ、ＤＱＢ１＊０６：１４５、ＤＱＢ１＊０６：１４６：０１、ＤＱＢ１＊０６：１４６：０２、ＤＱＢ１＊０６：１４７、ＤＱＢ１＊０６：１４８、ＤＱＢ１＊０６：１４９、ＤＱＢ１＊０６：１４：０１、ＤＱＢ１＊０６：１４：０２、ＤＱＢ１＊０６：１４：０３、ＤＱＢ１＊０６：１５０、ＤＱＢ１＊０６：１５１、ＤＱＢ１＊０６：１５２、ＤＱＢ１＊０６：１５３：０１、ＤＱＢ１＊０６：１５３：０２、ＤＱＢ１＊０６：１５４、ＤＱＢ１＊０６：１５５、ＤＱＢ１＊０６：１５６、ＤＱＢ１＊０６：１５７、ＤＱＢ１＊０６：１５８Ｎ、ＤＱＢ１＊０６：１５９、ＤＱＢ１＊０６：１５：０１、ＤＱＢ１＊０６：１５：０２、ＤＱＢ１＊０６：１６、ＤＱＢ１＊０６：１６０、ＤＱＢ１＊０６：１６１、ＤＱＢ１＊０６：１６２、ＤＱＢ１＊０６：１６３、ＤＱＢ１＊０６：１６４、ＤＱＢ１＊０６：１６５、ＤＱＢ１＊０６：１６６、ＤＱＢ１＊０６：１６７、ＤＱＢ１＊０６：１６８、ＤＱＢ１＊０６：１６９、ＤＱＢ１＊０６：１７、ＤＱＢ１＊０６：１７０、ＤＱＢ１＊０６：１７１、ＤＱＢ１＊０６：１７２、ＤＱＢ１＊０６：１７３、ＤＱＢ１＊０６：１７４、ＤＱＢ１＊０６：１７５、ＤＱＢ１＊０６：１７６、ＤＱＢ１＊０６：１７７、ＤＱＢ１＊０６：１７８、ＤＱＢ１＊０６：１７９Ｎ、ＤＱＢ１＊０６：１８０、ＤＱＢ１＊０６：１８１、ＤＱＢ１＊０６：１８２、ＤＱＢ１＊０６：１８３、ＤＱＢ１＊０６：１８４、ＤＱＢ１＊０６：１８５、ＤＱＢ１＊０６：１８６、ＤＱＢ１＊０６：１８７、ＤＱＢ１＊０６：１８８、ＤＱＢ１＊０６：１８９、ＤＱＢ１＊０６：１８：０１、ＤＱＢ１＊０６：１８：０２、ＤＱＢ１＊０６：１９０：０１、ＤＱＢ１＊０６：１９０：０２、ＤＱＢ１＊０６：１９１、ＤＱＢ１＊０６：１９２、ＤＱＢ１＊０６：１９３Ｎ、ＤＱＢ１＊０６：１９４、ＤＱＢ１＊０６：１９５、ＤＱＢ１＊０６：１９６、ＤＱＢ１＊０６：１９７、ＤＱＢ１＊０６：１９８、ＤＱＢ１＊０６：１９９、ＤＱＢ１＊０６：１９：０１、ＤＱＢ１＊０６：１９：０２、ＤＱＢ１＊０６：２０、ＤＱＢ１＊０６：２００、ＤＱＢ１＊０６：２０１、ＤＱＢ１＊０６：２０２、ＤＱＢ１＊０６：２０３、ＤＱＢ１＊０６：２０４、ＤＱＢ１＊０６：２０５、ＤＱＢ１＊０６：２０６：０１、ＤＱＢ１＊０６：２０６：０２、ＤＱＢ１＊０６：２０７、ＤＱＢ１＊０６：２０８、ＤＱＢ１＊０６：２０９、ＤＱＢ１＊０６：２１、ＤＱＢ１＊０６：２１０、ＤＱＢ１＊０６：２１１、ＤＱＢ１＊０６：２１２、ＤＱＢ１＊０６：２１３、ＤＱＢ１＊０６：２１４、ＤＱＢ１＊０６：２１５、ＤＱＢ１＊０６：２１６Ｎ、ＤＱＢ１＊０６：２１７、ＤＱＢ１＊０６：２１８、ＤＱＢ１＊０６：２１９、ＤＱＢ１＊０６：２２１、ＤＱＢ１＊０６：２２２、ＤＱＢ１＊０６：２２３、ＤＱＢ１＊０６：２２４、ＤＱＢ１＊０６：２２５、ＤＱＢ１＊０６：２２６、ＤＱＢ１＊０６：２２７、ＤＱＢ１＊０６：２２８、ＤＱＢ１＊０６：２２９、ＤＱＢ１＊０６：２２：０１、ＤＱＢ１＊０６：２２：０２、ＤＱＢ１＊０６：２２：０３、ＤＱＢ１＊０６：２３、ＤＱＢ１＊０６：２３０、ＤＱＢ１＊０６：２３１、ＤＱＢ１＊０６：２３２、ＤＱＢ１＊０６：２３３、ＤＱＢ１＊０６：２３４、ＤＱＢ１＊０６：２３５、ＤＱＢ１＊０６：２３６、ＤＱＢ１＊０６：２３７、ＤＱＢ１＊０６：２３８、ＤＱＢ１＊０６：２３９、ＤＱＢ１＊０６：２４、ＤＱＢ１＊０６：２４０、ＤＱＢ１＊０６：２４１、ＤＱＢ１＊０６：２４２、ＤＱＢ１＊０６：２４３、ＤＱＢ１＊０６：２４４、ＤＱＢ１＊０６：２４５、ＤＱＢ１＊０６：２４６、ＤＱＢ１＊０６：２４７、ＤＱＢ１＊０６：２４８、ＤＱＢ１＊０６：２４９、ＤＱＢ１＊０６：２５、ＤＱＢ１＊０６：２５０、ＤＱＢ１＊０６：２５１、ＤＱＢ１＊０６：２５２Ｎ、ＤＱＢ１＊０６：２５３、ＤＱＢ１＊０６：２５４、ＤＱＢ１＊０６：２５５、ＤＱＢ１＊０６：２５６、ＤＱＢ１＊０６：２５７、ＤＱＢ１＊０６：２５８、ＤＱＢ１＊０６：２５９、ＤＱＢ１＊０６：２６０、ＤＱＢ１＊０６：２６１、ＤＱＢ１＊０６：２６２、ＤＱＢ１＊０６：２６３、ＤＱＢ１＊０６：２６４、ＤＱＢ１＊０６：２６５、ＤＱＢ１＊０６：２６６、ＤＱＢ１＊０６：２６７、ＤＱＢ１＊０６：２６８、ＤＱＢ１＊０６：２６９、ＤＱＢ１＊０６：２６Ｎ、ＤＱＢ１＊０６：２７０：０１、ＤＱＢ１＊０６：２７０：０２、ＤＱＢ１＊０６：２７１、ＤＱＢ１＊０６：２７２、ＤＱＢ１＊０６：２７３、ＤＱＢ１＊０６：２７４、ＤＱＢ１＊０６：２７５、ＤＱＢ１＊０６：２７６、ＤＱＢ１＊０６：２７７、ＤＱＢ１＊０６：２７８、ＤＱＢ１＊０６：２７９、ＤＱＢ１＊０６：２７：０１、ＤＱＢ１＊０６：２７：０２、ＤＱＢ１＊０６：２８、ＤＱＢ１＊０６：２８０、ＤＱＢ１＊０６：２８１、ＤＱＢ１＊０６：２８２、ＤＱＢ１＊０６：２８３、ＤＱＢ１＊０６：２８４、ＤＱＢ１＊０６：２８５、ＤＱＢ１＊０６：２８６、ＤＱＢ１＊０６：２８７、ＤＱＢ１＊０６：２８８、ＤＱＢ１＊０６：２８９、ＤＱＢ１＊０６：２９、ＤＱＢ１＊０６：２９０、ＤＱＢ１＊０６：２９１、ＤＱＢ１＊０６：２９２、ＤＱＢ１＊０６：２９３、ＤＱＢ１＊０６：２９４、ＤＱＢ１＊０６：２９５、ＤＱＢ１＊０６：２９６、ＤＱＢ１＊０６：２９７、ＤＱＢ１＊０６：２９８、ＤＱＢ１＊０６：２９９、ＤＱＢ１＊０６：３０、ＤＱＢ１＊０６：３００、ＤＱＢ１＊０６：３０１、ＤＱＢ１＊０６：３０２、ＤＱＢ１＊０６：３０３Ｎ、ＤＱＢ１＊０６：３０４Ｎ、ＤＱＢ１＊０６：３０５、ＤＱＢ１＊０６：３０６Ｎ、ＤＱＢ１＊０６：３０７、ＤＱＢ１＊０６：３０８Ｎ、ＤＱＢ１＊０６：３０９、ＤＱＢ１＊０６：３１、ＤＱＢ１＊０６：３１０、ＤＱＢ１＊０６：３１１、ＤＱＢ１＊０６：３１２、ＤＱＢ１＊０６：３１３、ＤＱＢ１＊０６：３１４、ＤＱＢ１＊０６：３１５、ＤＱＢ１＊０６：３１６、ＤＱＢ１＊０６：３１７Ｎ、ＤＱＢ１＊０６：３１８、ＤＱＢ１＊０６：３１９、ＤＱＢ１＊０６：３２０、ＤＱＢ１＊０６：３２１、ＤＱＢ１＊０６：３２２、ＤＱＢ１＊０６：３２３、ＤＱＢ１＊０６：３２４、ＤＱＢ１＊０６：３２５、ＤＱＢ１＊０６：３２６、ＤＱＢ１＊０６：３２：０１、ＤＱＢ１＊０６：３２：０２、ＤＱＢ１＊０６：３３、ＤＱＢ１＊０６：３４、ＤＱＢ１＊０６：３５、ＤＱＢ１＊０６：３６、ＤＱＢ１＊０６：３７、ＤＱＢ１＊０６：３８、ＤＱＢ１＊０６：３９、ＤＱＢ１＊０６：４０、ＤＱＢ１＊０６：４１、ＤＱＢ１＊０６：４２、ＤＱＢ１＊０６：４３、ＤＱＢ１＊０６：４４、ＤＱＢ１＊０６：４５、ＤＱＢ１＊０６：４６、ＤＱＢ１＊０６：４７、ＤＱＢ１＊０６：４８：０１、ＤＱＢ１＊０６：４８：０２、ＤＱＢ１＊０６：４９、ＤＱＢ１＊０６：５０、ＤＱＢ１＊０６：５１：０１、ＤＱＢ１＊０６：５１：０２、ＤＱＢ１＊０６：５２、ＤＱＢ１＊０６：５３：０１、ＤＱＢ１＊０６：５３：０２、ＤＱＢ１＊０６：５４Ｎ、ＤＱＢ１＊０６：５５、ＤＱＢ１＊０６：５６、ＤＱＢ１＊０６：５７、ＤＱＢ１＊０６：５８、ＤＱＢ１＊０６：５９、ＤＱＢ１＊０６：６０、ＤＱＢ１＊０６：６１、ＤＱＢ１＊０６：６２、ＤＱＢ１＊０６：６３、ＤＱＢ１＊０６：６４、ＤＱＢ１＊０６：６５、ＤＱＢ１＊０６：６６、ＤＱＢ１＊０６：６７、ＤＱＢ１＊０６：６８、ＤＱＢ１＊０６：６９：０１、ＤＱＢ１＊０６：６９：０２、ＤＱＢ１＊０６：７０、ＤＱＢ１＊０６：７１、ＤＱＢ１＊０６：７２、ＤＱＢ１＊０６：７３、ＤＱＢ１＊０６：７４、ＤＱＢ１＊０６：７５ＮＸ、ＤＱＢ１＊０６：７６、ＤＱＢ１＊０６：７７Ｎ、ＤＱＢ１＊０６：７８、ＤＱＢ１＊０６：７９：０１、ＤＱＢ１＊０６：７９：０２、ＤＱＢ１＊０６：８０、ＤＱＢ１＊０６：８１、ＤＱＢ１＊０６：８２、ＤＱＢ１＊０６：８３、ＤＱＢ１＊０６：８４、ＤＱＢ１＊０６：８５、ＤＱＢ１＊０６：８６、ＤＱＢ１＊０６：８７、ＤＱＢ１＊０６：８８、ＤＱＢ１＊０６：８９、ＤＱＢ１＊０６：９０、ＤＱＢ１＊０６：９１、ＤＱＢ１＊０６：９２：０１、ＤＱＢ１＊０６：９２：０２、ＤＱＢ１＊０６：９３、ＤＱＢ１＊０６：９４、ＤＱＢ１＊０６：９５、ＤＱＢ１＊０６：９６：０１、ＤＱＢ１＊０６：９６：０２、ＤＱＢ１＊０６：９７、ＤＱＢ１＊０６：９８、ＤＱＢ１＊０６：９９：０１、ＤＱＢ１＊０６：９９：０２、及びこれらの任意の組み合わせから選択される対立遺伝子を含む。

ある特定の態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、配列番号３に対して少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＤＱベータ鎖を含み、ここで、ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にトリプトファンを含み、かつＤＱベータ鎖は、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にメチオニンを含む。ある特定の態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、配列番号３に対して少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＤＱベータ鎖を含み、ここで、ＤＱベータ鎖は、（ｉ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にトリプトファン、（ｉｉ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にメチオニン、（ｉｉｉ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にグルタミン、（ｉｖ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にバリン、（ｖ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にヒスチジン、及び（ｖｉ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にグルタミンを含む。ある特定の態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、配列番号３に記載されているアミノ酸配列を含むＤＱベータ鎖を含む。

ＩＩ．Ａ．２． ＭＨＣクラスＩＩアルファ鎖
本開示のいくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、アルファ鎖をさらに含む。いくつかの態様において、アルファ鎖は、野生型アルファ鎖である。いくつかの態様において、アルファ鎖は、ＤＱアルファ鎖である。任意のＤＱアルファ鎖が、本開示の組成物及び方法で使用されてよい。いくつかの態様において、ＤＱアルファ鎖は、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０１、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０２、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０３、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０４、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０５またはＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０６対立遺伝子を含む。ある特定の態様において、ＤＱアルファ鎖は、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０１対立遺伝子を含む。ある特定の態様において、ＤＱアルファ鎖は、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０２対立遺伝子を含む。ある特定の態様において、ＤＱアルファ鎖は、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０３対立遺伝子を含む。ある特定の態様において、ＤＱアルファ鎖は、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０４対立遺伝子を含む。ある特定の態様において、ＤＱアルファ鎖は、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０５対立遺伝子を含む。ある特定の態様において、ＤＱアルファ鎖は、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０６対立遺伝子を含む。

ある特定の態様において、ＤＱアルファ鎖は、ＤＱＡ１＊０１：０１：０１：０１、ＤＱＡ１＊０１：０１：０１：０２、ＤＱＡ１＊０１：０１：０１：０３、ＤＱＡ１＊０１：０１：０１：０５、ＤＱＡ１＊０１：０１：０１：０６、ＤＱＡ１＊０１：０１：０２、ＤＱＡ１＊０１：０１：０３、ＤＱＡ１＊０１：０１：０４、ＤＱＡ１＊０１：０１：０５、ＤＱＡ１＊０１：０２：０１：０１、ＤＱＡ１＊０１：０２：０１：０２、ＤＱＡ１＊０１：０２：０１：０３、ＤＱＡ１＊０１：０２：０１：０４、ＤＱＡ１＊０１：０２：０１：０５、ＤＱＡ１＊０１：０２：０１：０６、ＤＱＡ１＊０１：０２：０１：０７、ＤＱＡ１＊０１：０２：０１：０８、ＤＱＡ１＊０１：０２：０１：０９、ＤＱＡ１＊０１：０２：０１：１０、ＤＱＡ１＊０１：０２：０１：１１、ＤＱＡ１＊０１：０２：０１：１２、ＤＱＡ１＊０１：０２：０２：０１、ＤＱＡ１＊０１：０２：０２：０２、ＤＱＡ１＊０１：０２：０２：０３、ＤＱＡ１＊０１：０２：０２：０４、ＤＱＡ１＊０１：０２：０３、ＤＱＡ１＊０１：０２：０４、ＤＱＡ１＊０１：０３：０１：０１、ＤＱＡ１＊０１：０３：０１：０２、ＤＱＡ１＊０１：０３：０１：０３、ＤＱＡ１＊０１：０３：０１：０４、ＤＱＡ１＊０１：０３：０１：０５、ＤＱＡ１＊０１：０３：０１：０６、ＤＱＡ１＊０１：０３：０１：０７、ＤＱＡ１＊０１：０３：０１：０８、ＤＱＡ１＊０１：０３：０１：０９、ＤＱＡ１＊０１：０４：０１：０１、ＤＱＡ１＊０１：０４：０１：０２、ＤＱＡ１＊０１：０４：０１：０３、ＤＱＡ１＊０１：０４：０１：０４、ＤＱＡ１＊０１：０４：０２、ＤＱＡ１＊０１：０５：０１、ＤＱＡ１＊０１：０５：０２、ＤＱＡ１＊０１：０６、ＤＱＡ１＊０１：０７Ｑ、ＤＱＡ１＊０１：０８、ＤＱＡ１＊０１：０９、ＤＱＡ１＊０１：１０、ＤＱＡ１＊０１：１１、ＤＱＡ１＊０１：１２、ＤＱＡ１＊０１：１３、ＤＱＡ１＊０１：１４、ＤＱＡ１＊０１：１５Ｎ、ＤＱＡ１＊０１：１６Ｎ、ＤＱＡ１＊０１：１７、ＤＱＡ１＊０１：１８、ＤＱＡ１＊０１：１９、ＤＱＡ１＊０１：２０、ＤＱＡ１＊０１：２１、ＤＱＡ１＊０１：２２、ＤＱＡ１＊０１：２３、ＤＱＡ１＊０１：２４、ＤＱＡ１＊０１：２５、ＤＱＡ１＊０１：２６、ＤＱＡ１＊０２：０１：０１：０１、ＤＱＡ１＊０２：０１：０１：０２、ＤＱＡ１＊０２：０１：０２、ＤＱＡ１＊０２：０２Ｎ、ＤＱＡ１＊０２：０３、ＤＱＡ１＊０３：０１：０１、ＤＱＡ１＊０３：０１：０３、ＤＱＡ１＊０３：０２：０１：０１、ＤＱＡ１＊０３：０２：０１：０２、ＤＱＡ１＊０３：０３：０１：０１、ＤＱＡ１＊０３：０３：０１：０２、ＤＱＡ１＊０３：０３：０１：０３、ＤＱＡ１＊０３：０３：０１：０４、ＤＱＡ１＊０３：０３：０１：０５、ＤＱＡ１＊０３：０３：０１：０６、ＤＱＡ１＊０３：０３：０１：０７、ＤＱＡ１＊０３：０３：０２、ＤＱＡ１＊０３：０４、ＤＱＡ１＊０３：０５、ＤＱＡ１＊０３：０６、ＤＱＡ１＊０３：０７、ＤＱＡ１＊０４：０１：０１：０１、ＤＱＡ１＊０４：０１：０１：０２、ＤＱＡ１＊０４：０１：０１：０３、ＤＱＡ１＊０４：０１：０１：０４、ＤＱＡ１＊０４：０１：０１：０５、ＤＱＡ１＊０４：０１：０１：０６、ＤＱＡ１＊０４：０１：０１：０７、ＤＱＡ１＊０４：０１：０１：０８、ＤＱＡ１＊０４：０１：０２：０１、ＤＱＡ１＊０４：０１：０２：０２、ＤＱＡ１＊０４：０１：０３、ＤＱＡ１＊０４：０２、ＤＱＡ１＊０４：０３Ｎ、ＤＱＡ１＊０４：０４、ＤＱＡ１＊０４：０５、ＤＱＡ１＊０５：０１：０１：０１、ＤＱＡ１＊０５：０１：０１：０２、ＤＱＡ１＊０５：０１：０１：０３、ＤＱＡ１＊０５：０１：０１：０４、ＤＱＡ１＊０５：０１：０２、ＤＱＡ１＊０５：０１：０４、ＤＱＡ１＊０５：０１：０５、ＤＱＡ１＊０５：０１：０６、ＤＱＡ１＊０５：０２、ＤＱＡ１＊０５：０３：０１：０１、ＤＱＡ１＊０５：０３：０１：０２、ＤＱＡ１＊０５：０４、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：０１、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：０２、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：０３、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：０４、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：０５、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：０６、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：０７、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：０８、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：０９、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：１０、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：１１、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：１２、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：１３、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：１４、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：１５、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：１６、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：１７、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：１８、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：１９、ＤＱＡ１＊０５：０５：０１：２０、ＤＱＡ１＊０５：０６：０１：０１、ＤＱＡ１＊０５：０６：０１：０２、ＤＱＡ１＊０５：０７、ＤＱＡ１＊０５：０８、ＤＱＡ１＊０５：０９、ＤＱＡ１＊０５：１０、ＤＱＡ１＊０５：１１、ＤＱＡ１＊０５：１２、ＤＱＡ１＊０５：１３、ＤＱＡ１＊０５：１４、ＤＱＡ１＊０５：１５Ｎ、ＤＱＡ１＊０６：０１：０１：０１、ＤＱＡ１＊０６：０１：０１：０２、ＤＱＡ１＊０６：０１：０１：０３、ＤＱＡ１＊０６：０１：０１：０４、ＤＱＡ１＊０６：０１：０２、ＤＱＡ１＊０６：０２、及びこれらの任意の組み合わせから選択される。

ＩＩ．Ａ．３． シグナルペプチド
いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖及び／またはＤＱアルファ鎖は、シグナルペプチドをさらに含む。当技術分野で既知の任意のシグナルペプチドが、本明細書にて開示される組成物及び方法で使用されてよい。いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖シグナルペプチドは、ＤＱアルファシグナルペプチドと同じである。いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖シグナルペプチドは、ＤＱアルファシグナルペプチドとは異なる。

いくつかの態様において、シグナルペプチドは、ネイティブシグナルペプチドに由来する。いくつかの態様において、シグナルペプチドは、天然に存在するＤＱベータ鎖シグナルペプチドに由来する。いくつかの態様において、シグナルペプチドは、天然に存在するＤＱベータ鎖シグナルペプチドを含む。いくつかの態様において、シグナルペプチドは、天然に存在するＤＱアルファ鎖シグナルペプチドに由来する。いくつかの態様において、シグナルペプチドは、天然に存在するＤＱアルファ鎖シグナルペプチドを含む。いくつかの態様において、シグナルペプチドは、フィブロイン軽鎖（ＦｉｂＬ）シグナルペプチドに由来する。いくつかの態様において、シグナルペプチドは、配列番号９を含む。いくつかの態様において、シグナルペプチドは、合成物である。

ＩＩ．Ａ．４． 膜貫通ドメイン
いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖及び／またはＤＱアルファ鎖は、膜貫通ドメインをさらに含む。膜貫通ドメインは、任意の長さ及び任意の起源であってよい。いくつかの態様において、膜貫通ドメインは、少なくとも約１～少なくとも約５０個のアミノ酸の長さである。いくつかの態様において、膜貫通ドメインは、天然に存在する膜貫通ドメインに由来する。いくつかの態様において、膜貫通ドメインは、天然に存在する膜貫通ドメインを含む。いくつかの態様において、膜貫通ドメインは、天然に存在するＨＬＡ膜貫通ドメインに由来する。いくつかの態様において、膜貫通ドメインは、天然に存在するＨＬＡ膜貫通ドメインを含む。いくつかの態様において、膜貫通ドメインは、天然に存在するＤＱベータ鎖膜貫通ドメインに由来する。いくつかの態様において、膜貫通ドメインは、天然に存在するＤＱベータ鎖膜貫通ドメインを含む。いくつかの態様において、膜貫通ドメインは、天然に存在するＤＱアルファ鎖膜貫通ドメインに由来する。いくつかの態様において、膜貫通ドメインは、天然に存在するＤＱアルファ鎖膜貫通ドメインを含む。

ＩＩ．Ａ．５． ロイシンジッパー
いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖及び／またはＤＱアルファ鎖は、１つ以上のロイシンジッパー（ＬＺｉｐ）配列をさらに含む。当技術分野で既知の任意のＬＺｉｐ配列が、本明細書にて開示される組成物及び方法で使用されてよい。いくつかの態様において、ＤＱベータ鎖及び／またはＤＱアルファ鎖は、酸性ＬＺｉｐ（αＬＺｉｐ）、塩基性ＬＺｉｐ（βＬＺｉｐ）、またはその両方を含む。いくつかの態様において、１つ以上のＬＺｉｐ配列は、天然に存在するＬＺｉｐ配列に由来する。いくつかの態様において、１つ以上のＬＺｉｐ配列は、天然に存在するＬＺｉｐ配列を含む。いくつかの態様において、１つ以上のＬＺｉｐ配列は、合成物である。ある特定の態様において、１つ以上のＬＺｉｐ配列は、配列番号４に記載されているＬＺｉｐ配列を含む（表１）。

ＩＩ．Ａ．６． リンカー
いくつかの態様において、本開示に有用なＤＱベータ鎖及び／またはＤＱアルファ鎖は、リンカーをさらに含む。当技術分野で既知の任意のリンカーが、本明細書にて開示される組成物及び方法で使用されてよい。ある特定の態様において、リンカーは、Ｇｌｙ／Ｓｅｒリンカーを含む。いくつかの態様において、リンカーは、ＧｌｙＳｅｒ、Ｇｌｙ_２Ｓｅｒ、Ｇｌｙ_３Ｓｅｒ、及びＧｌｙ_４Ｓｅｒから選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、リンカーは、ＤＱアルファ鎖またはＤＱベータ鎖の細胞外ドメインのＮ末端に位置する。いくつかの態様において、リンカーは、ＤＱアルファ鎖またはＤＱベータ鎖の細胞外ドメインのＣ末端に位置する。いくつかの態様において、リンカーは、ＤＱアルファ鎖またはＤＱベータ鎖の細胞外ドメインと膜貫通ドメインとの間に位置する。いくつかの態様において、リンカーは、ＤＱアルファ鎖またはＤＱベータ鎖の細胞外ドメインと１つ以上のＬＺｉｐ配列との間に位置する。いくつかの態様において、リンカーは、ＤＱアルファ鎖またはＤＱベータ鎖の細胞外ドメインとシグナルペプチドとの間に位置する。

任意の長さのリンカーが、本明細書にて開示される組成物及び方法で使用されてよい。いくつかの態様において、リンカーは、少なくとも１個のアミノ酸の長さである。いくつかの態様において、リンカーは、少なくとも約１～少なくとも約１００、少なくとも約１～少なくとも約９０、少なくとも約１～少なくとも約８０、少なくとも約１～少なくとも約７０、少なくとも約１～少なくとも約６０、少なくとも約１～少なくとも約５０、少なくとも約１～少なくとも約４０、少なくとも約１～少なくとも約３０、少なくとも約１～少なくとも約２０、少なくとも約１～少なくとも約１５、少なくとも約１～少なくとも約１４、少なくとも約１～少なくとも約１３、少なくとも約１～少なくとも約１２、少なくとも約１～少なくとも約１１、少なくとも約１～少なくとも約１０、少なくとも約１～少なくとも約９、少なくとも約１～少なくとも約８、少なくとも約１～少なくとも約７、少なくとも約１～少なくとも約６、少なくとも約１～少なくとも約５、少なくとも約１～少なくとも約４、少なくとも約１～少なくとも約３個のアミノ酸の長さである。

いくつかの態様において、リンカーは、少なくとも約１、少なくとも約２、少なくとも約３、少なくとも約４、少なくとも約５、少なくとも約６、少なくとも約７、少なくとも約８、少なくとも約９、少なくとも約１０、少なくとも約１１、少なくとも約１２、少なくとも約１３、少なくとも約１４、少なくとも約１５、少なくとも約２０、少なくとも約３０、少なくとも約４０、少なくとも約５０、少なくとも約６０、少なくとも約７０、少なくとも約８０、少なくとも約９０、少なくとも約１００個のアミノ酸の長さである。ある特定の態様において、リンカーは、約３個のアミノ酸の長さである。ある特定の態様において、リンカーは、約４個のアミノ酸の長さである。ある特定の態様において、リンカーは、約５個のアミノ酸の長さである。

ＩＩ．Ｂ． 細胞
本開示のある特定の態様において、本開示のＭＨＣクラスＩＩ分子は、細胞の膜に連結または結合している。ある特定の態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子のベータ鎖は、細胞の膜に連結または結合している。ある特定の態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子のアルファ鎖は、細胞の膜に連結または結合している。ある特定の態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子のアルファ鎖及びベータ鎖は、細胞の膜に連結または結合している。

本開示のある特定の態様は、本明細書にて開示されるＭＨＣクラスＩＩ分子を含む細胞に関する。任意の細胞が、本明細書に記載される組成物で使用されてよい。ある特定の態様において、細胞は、哺乳動物細胞である。いくつかの態様において、細胞は、昆虫細胞である。いくつかの態様において、細胞は、健康な細胞、例えば健康な線維芽細胞に由来する。いくつかの態様において、細胞は、腫瘍細胞に由来する。本開示において有用な細胞の非限定的例としては、Ｋ５６２細胞、Ｔ２細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞、Ａ３７５細胞、ＳＫ－ＭＥＬ－２８細胞、Ｍｅ２７５細胞、ＣＯＳ細胞、線維芽細胞、腫瘍細胞、またはこれらの任意の組み合わせが挙げられる。ある特定の態様において、細胞は、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＨａｓａｎ ｅｔ ａｌ．， Ａｄｖ．Ｇｅｎｅｔ． Ｅｎｇ． ４（３）：１３０ （２０１５）にて開示されている任意の細胞である。

ある特定の態様において、細胞は、プロフェッショナルＡＰＣである。ある特定の態様において、細胞は、マクロファージ、Ｂ細胞、樹状細胞、またはこれらの任意の組み合わせである。

ある特定の態様において、細胞は、１つ以上のＭＨＣクラスＩＩ対立遺伝子の内因性発現を欠いている。いくつかの態様において、細胞は、ＨＬＡ－ＤＱ対立遺伝子の内因性発現を欠いている。いくつかの態様において、細胞は、ＨＬＡ－ＤＱアルファ鎖対立遺伝子の内因性発現を欠いている。いくつかの態様において、細胞は、ＨＬＡ－ＤＱベータ鎖対立遺伝子の内因性発現を欠いている。

ＩＩ．Ｃ． 可溶性ＭＨＣクラスＩＩ分子
ある特定の態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、細胞の膜に結合しておらず、例えば、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、可溶性形態である。本発明で使用される場合、可溶性ＭＨＣクラスＩＩ分子は、本明細書に記載の任意のＭＨＣクラスＩＩ分子またはその一部を含み、細胞膜に結合していない。ある特定の態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子またその一部は、どの膜にも結合していない。いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子またはその一部は、不活性粒子に結合している。いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子またはその一部は、細胞外小胞の膜に結合している。いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、人工膜または人工表面、例えばアレイプレートの表面に結合している。

当技術分野で既知の任意の不活性粒子が、本開示の組成物及び方法で使用されてよい。いくつかの態様において、不活性粒子は、ビーズである。いくつかの態様において、ビーズは、ガラスビーズ、ラテックスビーズ、金属ビーズ、またはこれらの任意の組み合わせである。いくつかの態様において、不活性粒子は、ナノ粒子（ＮＰ）である。当技術分野で既知の任意のＮＰが、本開示の組成物及び方法で使用されてよい。ある特定の態様において、ナノ粒子は、ペグ化酸化鉄、キトサン、デキストラン、ゼラチン、アルギナート、リポソーム、澱粉、分枝ポリマー、炭素ベース担体、ポリ乳酸、ポリ（シアノ）アクリレート、ポリエチルエイネミン（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｉｎｅｍｉｎｅ）、ブロックコポリマー、ポリカプロラクトン、ＳＰＩＯＮＳ、ＵＳＰＩＯＮＳ、Ｃｄ／Ｚｎ－セレン化物、またはシリカナノ粒子から選択される。特定の態様において、ナノ粒子は、ペグ化酸化鉄ナノ粒子である。本明細書にて開示される組成物及び方法で有用なナノ粒子の非限定的例としては、Ｄｅ Ｊｏｎｇ ａｎｄ Ｂｏｒｍ， Ｉｎｔ． Ｊ． Ｎａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ ３（２）：１３３－４９ （２００８） 、及びＵｍｅｓｈａｐｐａ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔ． Ｃｏｍｍｕｎ． １０（１）：２１５０ （Ｍａｙ １４， ２０１９）に記述されているようなものが挙げられ、これらのそれぞれは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、完全長ＭＨＣクラスＩＩ分子のフラグメントを含み、ここで、アルファ鎖の膜貫通ドメイン及び／またはベータ鎖の膜貫通ドメインの１つ以上のアミノ酸は、削除される。いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、（例えば、配列番号６に記載されているような）アルファ鎖の細胞外ドメイン、及び／または（例えば、配列番号１または３に記載されているような）ベータ鎖の細胞外ドメインを含む。ある特定の態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、配列番号６に対して少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＤＱアルファ鎖を含む。いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、配列番号６に記載されているアミノ酸配列を含むＤＱアルファ鎖を含む。

ある特定の態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、配列番号１に対して少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＤＱベータ鎖を含む。いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含むＤＱベータ鎖を含む。ある特定の態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、配列番号３に対して少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＤＱベータ鎖を含む。いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、配列番号３に記載されているアミノ酸配列を含むＤＱベータ鎖を含む。ある特定の態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、配列番号４に対して少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＤＱベータ鎖を含む。いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、配列番号４に記載されているアミノ酸配列を含むＤＱベータ鎖を含む。ある特定の態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、配列番号５に対して少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＤＱベータ鎖を含む。いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩ分子は、配列番号５に記載されているアミノ酸配列を含むＤＱベータ鎖を含む。

ＩＩ．Ｄ． 核酸分子及びベクター
本開示のある特定の態様は、本明細書にて開示されるＭＨＣクラスＩＩ分子をコードする核酸分子に関する。いくつかの態様において、核酸分子は、本明細書にて開示されるＭＨＣクラスＩＩベータ鎖をコードする。ある特定の態様において、ＭＨＣクラスＩＩベータ鎖をコードする核酸分子は、配列番号２に記載されている配列と、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有するヌクレオチド配列を含む。

いくつかの態様において、核酸分子は、本明細書にて開示されるＭＨＣクラスＩＩアルファ鎖をコードする。ある特定の態様において、ＭＨＣクラスＩＩアルファ鎖をコードする核酸分子は、配列番号７に記載されている配列と、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有するヌクレオチド配列を含む。

いくつかの態様において、核酸分子は、本明細書にて開示されるＭＨＣクラスＩＩアルファ鎖及び本明細書にて開示されるＭＨＣクラスＩＩベータ鎖の両方をコードする。いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩアルファ鎖をコードする配列は、ＭＨＣクラスＩＩベータ鎖をコードする配列と同じプロモーターの制御下にある。いくつかの態様において、ＭＨＣクラスＩＩアルファ鎖をコードする配列は、第１プロモーターの制御下にあり、ＭＨＣクラスＩＩベータ鎖をコードする配列は、第２プロモーターの制御下にある。

いくつかの態様において、本開示は、本明細書にて開示されるＭＨＣクラスＩＩベータ鎖をコードする第１核酸分子、及び本明細書にて開示されるＭＨＣクラスＩＩアルファ鎖をコードする第２核酸分子に関する。

本開示のある特定の態様は、本明細書にて開示される核酸分子を含むベクターまたはベクターのセットに関する。いくつかの態様において、ベクターは、ウイルスベクターである。いくつかの態様において、ベクターは、ウイルス粒子またはウイルスである。いくつかの態様において、ベクターは、哺乳動物ベクターである。いくつかの態様において、ベクターは、細菌ベクターである。

ある特定の態様において、ベクターは、レトロウイルスベクターである。いくつかの態様において、ベクターは、アデノウイルスベクター、ｌｅｎｔｉｖｉｒｕｓ、Ｓｅｎｄａｉウイルス、バキュロウイルスベクター、Ｅｐｓｔｅｉｎ Ｂａｒｒウイルスベクター、パポーバウイルスベクター、牛痘ウイルスベクター、単純ヘルペスウイルスベクター、またはアデノ関連ウイルス（ＡＡＶ）ベクターである。特定の態様において、ベクターは、ＡＡＶベクターである。いくつかの態様において、ベクターは、ｌｅｎｔｉｖｉｒｕｓである。特定の態様において、ベクターは、アデノウイルスベクターである。いくつかの態様において、ベクターは、Ｓｅｎｄａｉウイルスである。いくつかの態様において、ベクターは、ハイブリッドベクターである。本開示で使用することができるハイブリッドベクターの例については、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＨｕａｎｇ ａｎｄ Ｋａｍｉｈｉｒａ，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ａｄｖ． ３１（２）：２０８－２３ （２１０３）にて参照することができる。

ＩＩＩ． 本開示の方法
本開示のある特定の態様は、対象の疾患または病態を治療する方法に関する。いくつかの態様において、本開示は、それを必要とする対象の免疫応答を増強する方法に関する。

ＩＩＩ．Ａ． 腫瘍の治療方法
本開示のある特定の態様は、がんを治療することを、それを必要とする対象において方法に関し、該方法は、本明細書にて開示されるＨＬＡクラスＩＩ分子、本明細書にて開示される核酸分子、本明細書にて開示されるベクター、または本明細書にて開示される細胞を、対象に投与することを含む。

いくつかの態様において、がんは、黒色腫、骨癌、腎臓癌、前立腺癌、乳癌、大腸癌、肺癌、皮膚または眼内悪性黒色腫、膵癌、皮膚癌、頭頸部癌、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、肛門部癌、胃癌、精巣癌、子宮癌、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、膣癌、外陰癌、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、形質転換型濾胞性リンパ腫、脾臓辺縁帯リンパ腫（ＳＭＺＬ）、食道癌、小腸癌、内分泌系癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟組織の肉腫、尿道癌、陰茎癌、慢性または急性白血病、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）（非Ｔ細胞ＡＬＬを含む）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、小児期の固形腫瘍、リンパ球性リンパ腫、膀胱癌、腎臓または尿管癌、腎盤癌、中枢神経系（ＣＮＳ）の新生物、原発性ＣＮＳリンパ腫、腫瘍血管新生、脊髄軸腫瘍、脳幹部神経膠腫、下垂体腺腫、カポジ肉腫、類表皮癌、扁平上皮癌、Ｔ細胞リンパ腫、アスベストによるものを含む環境的に誘発されたがん、他のＢ細胞悪性腫瘍、及びがんの組み合わせ、から選択される。いくつかの態様において、がんは、黒色腫である。

いくつかの態様において、がんは、再発性である。いくつかの態様において、がんは、難治性である。いくつかの態様において、がんは、進行性である。いくつかの態様において、がんは、転移性である。

いくつかの態様において、本明細書にて開示される方法は、対象のがんを治療する。いくつかの態様において、本明細書にて開示される方法は、がんの１つ以上の症状の重症度を軽減する。いくつかの態様において、本明細書にて開示される方法は、がんに由来する腫瘍のサイズまたは数を減少させる。いくつかの態様において、本明細書にて開示される方法は、本明細書にて開示される方法を提供されない対象と比較して、対象の全生存期間を延長する。いくつかの態様において、本明細書にて開示される方法は、本明細書にて開示される方法を提供されない対象と比較して、対象の無増悪生存期間を延長する。いくつかの態様において、本明細書にて開示される方法は、対象の部分寛解をもたらす。いくつかの態様において、本明細書にて開示される方法は、対象の完全寛解をもたらす。

本開示のある特定の態様は、それを必要とする対象の感染を治療する方法に関し、該方法は、本明細書にて開示されるＨＬＡクラスＩＩ分子、本明細書にて開示される核酸分子、本明細書にて開示されるベクター、または本明細書にて開示される細胞を、対象に投与することを含む。本明細書にて開示される組成物及び方法を使用して治療することができる感染の非限定的例としては、ウイルス（ウイロイド及びプリオンを含む）、細菌、真菌、寄生生物、またはこれらの任意の組み合わせによる感染が挙げられる。いくつかの態様において、ウイルスは、ヘルペスウイルス、ＨＩＶ、パポーバウイルス、麻疹ウイルス、風疹ウイルス、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、ヒトＴ－リンパ球向性ウイルス１、Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、インフルエンザウイルス、ノロウイルス、及びこれらの任意の組み合わせである。いくつかの態様において、細菌は、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、及びＥ．Ｃｏｌｉから選択される。いくつかの態様において、細菌感染は、ブルセラ症、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ感染、ネコひっかき病、コレラ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ、淋病、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｓｅｒｒａｔｉａ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ感染、髄膜炎菌感染症、百日咳、ペスト、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ感染、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ感染、細菌性赤痢、腸チフス熱、野兎病、脾脱疽、ジフテリア、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃａｌ感染、Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈｒｉｃｏｓｉｓ、リステリア症、ノカルジア症、Ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃａｌ感染、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃａｌ感染、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃａｌ感染、及びこれらの任意の組み合わせから選択される。いくつかの実施形態において、寄生生物感染は、ギョウチュウ、トリコモナス症、トキソプラズマ症、ジアルジア症、クリプトスポリジウム症、マラリア、鉤虫症、白癬、サナダムシ、吸虫、及びこれらの任意の組み合わせから選択される。いくつかの態様において、真菌感染は、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｆｕｒｆｕｒ、皮膚糸状菌（例えば、Ｅｐｉｄｅｒｍｏｐｈｙｔｏｎ、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ及びＴｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ）またはこれらの任意の組み合わせから選択される。

いくつかの態様において、本明細書にて開示される方法は、それを必要とする対象のがんまたは感染を治療することを含み、該方法は、本明細書に記載の細胞を対象に投与することを含み、ここで、該細胞は、本明細書にて開示されるＭＨＣクラスＩＩ分子、本明細書にて開示される核酸分子、本明細書にて開示されるベクター、またはこれらの任意の組み合わせを含む。

いくつかの態様において、細胞は、対象から得られる。いくつかの態様において、細胞は、対象以外のドナーから得られる。

ＩＩＩ．Ｂ． Ｔ細胞の標的集団を濃縮する方法
本開示のある特定の態様は、ヒト対象から得たＴ細胞の標的集団を濃縮する方法に関する。いくつかの態様において、方法は、Ｔ細胞を本明細書にて開示されるＨＬＡクラスＩＩ分子と接触させることを含む。いくつかの態様において、方法は、Ｔ細胞を本明細書にて開示される細胞、例えばＡＰＣと接触させることを含む。いくつかの態様において、接触後、Ｔ細胞の濃縮された集団は、接触前にＨＬＡクラスＩＩ分子に結合することができるＴ細胞の数と比較して、ＨＬＡクラスＩＩ分子に結合することができるＴ細胞をより多数含む。

本開示のいくつかの態様は、罹患細胞、例えば腫瘍細胞を標的とすることができるＴ細胞を選択する方法に関する。いくつかの態様において、方法は、インビトロで単離したＴ細胞の集団を、本明細書にて開示されるＭＨＣクラスＩＩ分子、及びポリペプチドのフラグメント、例えば罹患細胞で発現している抗原、例えば腫瘍発現ポリペプチド、例えばエピトープを含む複合体に接触させることを含む。いくつかの態様において、Ｔ細胞は、ヒト対象から得られる。

ヒト対象から得られるＴ細胞は、本明細書にて開示される任意のＴ細胞であり得る。いくつかの態様において、ヒト対象から得られるＴ細胞は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）である。

いくつかの態様において、方法は、濃縮されたＴ細胞をヒト対象に投与することをさらに含む。いくつかの態様において、対象は、本明細書にて記載するようなＴ細胞の投与を受ける前に、前準備される。

本明細書に記載されている様々な態様、態様及び選択肢はいずれも、あらゆる変形形態で組み合わせることができる。

この本明細書に記述される全ての刊行物、特許及び特許出願は、各個別の刊行物、特許、または特許出願が、明確かつ個別に参照により組み込まれることが指示されているのと同程度に、参照により本明細書に組み込まれる。

本開示を一般的に説明したので、本明細書で提供される実施例を参照することにより、さらなる理解を得ることができる。これらの実施例は説明のみを目的としており、限定することを意図したものではない。

実施例１－方法
細胞
末梢単核細胞は、密度勾配遠心法（Ｆｉｃｏｌｌ－Ｐａｑｕｅ ＰＬＵＳ， ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｍａｒｌｂｏｒｏｕｇｈ， ＭＡ）によって得た。Ｋ５６２細胞株は、ＨＬＡクラスＩ／ＩＩ発現に欠陥のある赤血白血病細胞株である。Ａ３７５は、黒色腫細胞株である。ＨＥＫ２９３Ｔ細胞及びＡ３７５細胞を、１０％ＦＢＳ及び５０μｇ／ｍｌゲンタマイシンを補充したＤＭＥＭ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ， Ｗａｌｔｈａｍ， ＭＡ）で増殖させた。Ｋ５６２及びＪｕｒｋａｔ７６細胞株を、１０％ＦＢＳ及び５０μｇ／ｍｌゲンタマイシンを補充したＲＰＭＩ１６４０で培養した。

ペプチド
合成ペプチドを、Ｇｅｎｓｃｒｉｐｔ （Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ， ＮＪ）から購入し、ＤＭＳＯに５０μｇ／ｍｌで溶解した。

抗体
フローサイトメトリー解析には、ＰＥ複合抗クラスＩＩ（９－４９（Ｉ３）、Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ， Ｂｒｅａ， ＣＡ；Ｔｕ３９）、ＡＰＣ－Ｃｙ７－複合抗ＣＤ４（ＲＰＡ－Ｔ４， Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ， Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ， ＣＡ）及びＰＥ複合抗Ｈｉｓタグ（ＡＤ１．１．１０， Ａｂｃａｍ， Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ， ＭＡ）、の抗体を使用した。死細胞を、ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ Ｆｉｘａｂｌｅ Ｎｅａｒ－ＩＲ Ｄｅａｄ Ｃｅｌｌ Ｓｔａｉｎ Ｋｉｔ ４６５（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ， Ｗａｌｔｈａｍ， ＭＡ）を用いて分類した。染色された細胞を、Ｃａｎｔｏ ＩＩまたはＬＳＲＦｏｒｔｅｓｓａ Ｘ－２０（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｆｒａｎｋｌｉｎ Ｌａｋｅｓ， ＮＪ）を用いて解析した。細胞選別を、ＦＡＣＳ Ａｒｉａ ＩＩ （ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｆｒａｎｋｌｉｎ Ｌａｋｅｓ， ＮＪ）を用いて行った。データ解析を、ＦｌｏｗＪｏソフトウエア（Ｔｒｅｅ Ｓｔａｒ， Ａｓｈｌａｎｄ， ＯＲ）を用いて実施した。

初代Ｔ細胞へのＴＣＲ形質導入
ＣＤ３^＋Ｔ細胞及びＣＤ４^＋Ｔ細胞を、Ｐａｎ Ｔ Ｃｅｌｌ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ Ｋｉｔ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ， Ｂｅｒｇｉｓｃｈ Ｇｌａｄｂａｃｈ， Ｇｅｒｍａｎｙ）及びＣＤ４^＋Ｔ Ｃｅｌｌ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ Ｋｉｔ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ， Ｂｅｒｇｉｓｃｈ Ｇｌａｄｂａｃｈ， Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いてそれぞれ精製した。精製したＴ細胞を、Ｅ：Ｔ比２０：１、２００Ｇｙで照射したａＡＰＣ／ｍＯＫＴ３によって刺激した。翌日から開始して、連続３日間、１，０００×ｇ、３２℃で１時間の遠心分離によって、またはＲｅｔｒｏｎｅｃｔｉｎコーティングプレート（Ｔａｋａｒａ Ｂｉｏ， Ｓｈｉｇａ， Ｊａｐａｎ）を用いて、クローニングしたＴＣＲ遺伝子を活性化したＴ細胞にレトロウイルスを介して形質導入した。翌日、１００ＩＵ／ｍｌのＩＬ－２及び１０ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５を、ＴＣＲ形質導入済みＴ細胞に加えた。培養液を２～３日ごとに補充した。

可溶性ＣＤ４による染色
可溶性ＣＤ４（ｓＣＤ４）遺伝子を、ＧＳリンカーによってヒトＣＤ４細胞外ドメインを６ｘＨｉｓタグと融合させることによって生成した。ｓＣＤ４遺伝子をＨＥＫ２９３Ｔ細胞にレトロウイルスを介して形質導入し、ｓＣＤ４単量体を含有する培養物上澄液を回収した。ｓＣＤ４を、ＰＥ標識抗６ｘＨｉｓタグｍＡｂ（ＡＤ１．１．１０， Ａｂｃａｍ， Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ， ＭＡ）で二量体化し、それを使用した。ヤギ血清の存在下で、室温で３０分、ＨＬＡクラスＩＩ発現Ｋ５６２細胞を二量体化されたｓＣＤ４で染色した。種々のクラスＩＩ遺伝子を個別に発現するＫ５６２由来細胞での表面ＨＬＡクラスＩＩ発現を、図３Ａ～３Ｑに示す。

ＨＬＡクラスＩＩ単量体及び二量体の生成
野生型クラスＩＩα遺伝子の細胞外ドメインを、ＧＧＧＳリンカーによって酸性ロイシンジッパーと、続いてＧＳリンカーによって６ｘＨｉｓタグと融合させた（配列番号８を参照）。変異のあるクラスＩＩβ遺伝子の外部ドメイン（配列番号３を参照）を、ＧＧＧＳリンカーによって塩基性ロイシンジッパーと連結させた（配列番号４を参照）。ＨＥＫ２９３Ｔ細胞及びＡ３７５細胞に、２９３ＧＰＧ細胞ベースのレトロウイルスシステムを使用して、α及びβ遺伝子をトランスフェクトし、１０％ＦＢＳ及び５０μｇ／ｍｌゲンタマイシンを補充したＤＭＥＭで培養した。ＤＱ５二量体染色では、可溶性ＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}（つまり、Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍに加えてＮ１１０Ｑ／Ｉ１１６Ｖ／Ｓ１１８Ｈ／Ｐ１４６Ｎ置換（４ｒｅｐｓ）を有する）タンパク質を安定して分泌するＨＥＫ２９３Ｔ細胞及びＡ３７５細胞を、コンフルエントになるまで増殖させ、４８時間後、培地を回収した。次に、可溶性ＨＬＡクラスＩＩを含有する上澄液を、３７℃で２０～２４時間、１００μｇ／ｍｌの目的のペプチドと混合して、インビトロでペプチド交換を行った。ペプチド交換を行わなかった単量体を対照として使用した。単量体の濃度を、ニッケルコーティングプレート（ＸＰｒｅｓｓＢｉｏ， Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ， ＭＤ）及び抗Ｈｉｓタグビオチン化ｍＡｂ（ＡＤ１．１．１０， Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ， Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ， ＭＮ）を用いて、特異的ＥＬＩＳＡによって測定した。可溶性ＨＬＡクラスＩＩ単量体を、染色のために、ＰＥ複合抗Ｈｉｓ ｍＡｂ（ＡＤ１．１．１０， Ａｂｃａｍ， Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ， ＭＡ）を用いて２：１のモル比で、４℃で１．５時間かけて二量体化した。

ＨＬＡクラスＩＩ二量体染色
外因性ＴＣＲ遺伝子を形質導入した初代Ｔ細胞を、５０ｎＭダサチニブ（ＬＣ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ， Ｗｏｂｕｒｎ， ＭＡ）を用いて、３７℃で３０分間、前処理して、室温で４～５時間、５～１５μｇ／ｍｌのクラスＩＩ二量体で染色した。洗浄後、細胞表面分子を、ＡＰＣ－Ｃｙ７－複合抗ＣＤ４ｍＡｂで対比染色した。

統計的解析
統計的解析を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ６．０ソフトウエア（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ， Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ， ＣＡ）を用いて実施した。２つの標本比較には、対応がない両側スチューデントのｔ検定を使用した。標本サイズの事前決定には、統計的方法は使用しなかった。研究者は、実験中または結果の評価中の割り当てを理解していた。実験は無作為なものではかった。

実施例２－ＣＤ４結合能力が強化されたＤＱ分子
親和性が強化されたＤＱ分子を、Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ変異を導入することによって生成し、これらの置換が、ＣＤ４へのＤＱ５（ＤＱＡ１＊０１：０１－ＤＱＢ１＊０５：０１）などのＨＬＡ－ＤＱ分子の結合を改善できるかどうかを測定した。ＤＱＢ１＊０５：０１は、１１４及び１４３に加えて１１０、１１６、１１８及び１４６の位置に４つの異なるアミノ酸をコードしている。したがって、本発明者らは、Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍに加えてＮ１１０Ｑ／Ｉ１１６Ｖ／Ｓ１１８Ｈ／Ｐ１４６Ｎ置換（４ｒｅｐｓ）を有するＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}を発現するＫ５６２細胞を生成し（図１Ａ）、ｓＣＤ４で細胞を染色した。ＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}を発現するＫ５６２細胞は、ＣＤ４結合を強化するが、ＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ}、ＤＱ５^{４ｒｅｐｓ}、または野生型ＤＱ５は、ＣＤ４結合を強化しないことが実証された（図１Ｂ～１Ｃ）。重要なことに、４つの位置のうち１つで単一のアミノ酸反転がある種々のＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}変異体を個別に発現する一連のＫ５６２細胞は、強化されたＣＤ４結合能力を欠いていた（図１Ｄ）。これらの結果は、観察したＤＱ５：ＣＤ４結合の強化の中でＮ１１０Ｑ、Ｉ１１６Ｖ、Ｓ１１８Ｈ、及びＰ１４６Ｎの４つの追加の置換が、Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ変異の有効性にとって重要であることを示唆している。

ＤＱＢ１＊０２：０１、０４：０２、及び０６：０１などのＤＱβ鎖は、１１６の位置を除いて、１１０、１１８、及び１４６の位置で異なるアミノ酸をコードする（図１Ｅ）。ＤＱＢ１＊０５：０１とは異なり、１１４の位置にＶａｌをコードするＤＰＢ１＊０４：０１と同じように、ＤＱＢ１＊０２：０１、０４：０２、及び０６：０１は、１１６の位置にＶａｌをコードする。ＤＱ２^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋３ｒｅｐｓ}、ＤＱ４^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋３ｒｅｐｓ}、及びＤＱ６^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋３ｒｅｐｓ}変異体の全ては、そのβ鎖にＬ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍと共にＮ１１０Ｑ、Ｓ１１８Ｈ及びＰ１４６Ｎ置換（３ｒｅｐｓ）を有し、強化されたＣＤ４結合活性を示した（図１Ｆ）。

実施例３－同族ＴＣＲを特異的かつ強固に染色する親和性成熟ＤＱ二量体
実施例２に記載の変異を有する親和性成熟ＤＱ二量体の能力を、抗原特異的ＣＤ４^＋Ｔ細胞を識別する能力に関して評価した。ＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}及びＤＱ６^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋３ｒｅｐｓ}二量体は、それぞれＤＱ５制限ＤＤＸ３Ｙ特異的ＴＣＲ（Ｅ６）、及びＤＱ６制限インフルエンザウイルス特異的ＴＣＲ（ＤＭ２）を正常に染色した（図２Ａ～２Ｂ）。

親和性成熟クラスＩＩ分子の識別に対して、本実施例では、β鎖における複数の変異について詳述するが、β鎖がα鎖よりもＣＤ４とよりダイレクトに相互作用するので、α鎖については説明しない。α鎖及び／またはβ鎖の別の変異が、クラスＩＩとＣＤ４との結合をさらに強化する可能性もある。しかし、過剰なＣＤ４結合能力を有するような可溶性クラスＩＩ分子の使用は、ＣＤ４^＋Ｔ細胞の非特異的染色を起こし、それにより有害な影響をもたらす可能性がある。

結論として、ＣＤ４^＋Ｔ細胞は、自己免疫疾患の発症、ならびに病原性感染及びがんの防御において重要な役割を担う。本明細書に記載の新規のＨＬＡクラスＩＩ多量体技術は、ＨＬＡ－ＤＱ対立遺伝子全体にわたるＨＬＡクラスＩＩ制限ＣＤ４^＋Ｔ細胞応答の研究をより良好に促進できる。

実施例４
野生型ＤＱ５及びＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ}二量体（表３）、ならびにＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}二量体を生成し、ＴＣＲ形質導入済みＣＤ４^＋Ｔ細胞へのそれらの染色を比較した。野生型ＤＱ５二量体では、Ｅ６形質導入済みＣＤ４^＋Ｔ細胞は検出されなかった。ＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ}二量体は、ＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}二量体と比較してＥ６形質導入済みＣＤ４^＋Ｔ細胞の弱い染色しか示さなかったが、ＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}は強固な染色を示した（図４Ａ～４Ｌ）。ＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}二量体染色を検証するために、本発明者らは、ＧＰＣ３_{１３８－１５７}に特異的なＤＱ５制限ＴＣＲ遺伝子を、インビトロでペプチド特異的に増殖させた二量体^＋ＣＤ４^＋Ｔ細胞からクローニングした。ヒトＣＤ４^＋ＴＣＲ欠損Ｔ細胞でクローン型に再構成された場合、ＴＣＲは、同族ＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}二量体によって正常に染色され、ＤＱ５制限的及び抗原特異的に機能した（図５Ａ～５Ｇ）。

方法
細胞
末梢単核細胞は、密度勾配遠心法によって得た。ＣＤ８０及びＣＤ８３に関連する単一のＨＬＡ対立遺伝子として、種々のＨＬＡクラスＩＩ遺伝子を個別に発現するＫ５６２ベースの人工抗原提示細胞（ａＡＰＣ）が、これまでに報告されている（Ｂｕｔｌｅｒ， Ｍ．Ｏ． ｅｔ ａｌ．， ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ７， ｅ３０２２９ （２０１２））。Ｊｕｒｋａｔ７６細胞株は、内因性ＴＣＲ、ＣＤ４、及びＣＤ８発現を欠くＴ細胞白血病細胞株である（Ｈｅｅｍｓｋｅｒｋ， Ｍ．Ｈ． ｅｔ ａｌ．， Ｂｌｏｏｄ １０２， ３５３０－３５４０ （２００３）を参照されたい）。Ｊｕｒｋａｔ７６／ＣＤ４細胞を、ヒトＣＤ４遺伝子をレトロウイルスを介して形質導入することによって生成した。Ａ３７５細胞は、黒色腫細胞株である。ＨＥＫ２９３Ｔ細胞及びＡ３７５細胞を、１０％ＦＢＳ及び５０μｇ／ｍｌゲンタマイシンを補充したＤＭＥＭで増殖させた。Ｊｕｒｋａｔ７６細胞株を、１０％ＦＢＳ及び５０μｇ／ｍｌゲンタマイシンを補充したＲＰＭＩ１６４０で培養した。

ペプチド

合成ペプチドをＤＭＳＯに５０μｇ／ｍｌで溶解した。

遺伝子
新規のＴＣＲ遺伝子を、５’ｃＤＮＡ末端高速増幅（ＲＡＣＥ）ＰＣＲによってクローニングして、上述したように配列決定した（例えば、Ｎａｋａｔｓｕｇａｗａ， Ｍ． ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉ Ｒｅｐ ６， ２３８２１ （２０１６）、Ｎａｋａｔｓｕｇａｗａ， Ｍ． ｅｔ ａｌ．， Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９４， ３４８７－３５００ （２０１５）、及びＯｃｈｉ， Ｔ． ｅｔ ａｌ．， Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｓ ３， １０７０－１０８１ （２０１５）を参照されたい。これらのそれぞれは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。全ての遺伝子をｐＭＸレトロウイルスベクターにクローニングし、２９３ＧＰＧ及びＰＧ１３細胞ベースのレトロウイルスシステムを用いて細胞株に形質導入した（例えば、Ｈｉｒａｎｏ， Ｎ． ｅｔ ａｌ．， Ｂｌｏｏｄ １０７， １５２８－１５３６ （２００６）、Ｂｕｔｌｅｒ， Ｍ．Ｏ． ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ １３， １８５７－１８６７ （２００７）、Ｈｉｒａｎｏ， Ｎ． ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ １２， ２９６７－２９７５ （２００６）を参照されたい。これらのそれぞれは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。

抗体
フローサイトメトリー解析には、ＡＰＣ－Ｃｙ７－複合抗ＣＤ４（ＲＰＡ－Ｔ４， Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ， Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ， ＣＡ；Ｗｏｏｌｄｒｉｄｇｅ， Ｌ． ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ３６， １８４７－１８５５ （２００６）を参照）及びＰＥ複合抗Ｈｉｓタグ（ＡＤ１．１．１０， ＡＢＣＡＭ， Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ， ＭＡ）、の抗体を使用した。死細胞を、ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ Ｆｉｘａｂｌｅ Ａｑｕａ Ｄｅａｄ Ｃｅｌｌ Ｓｔａｉｎ Ｋｉｔを用いて分類した。染色された細胞を、ＦＡＣＳＣａｎｔｏ ＩＩまたはＬＳＲＦｏｒｔｅｓｓａ Ｘ－２０を用いて解析した。細胞選別を、ＦＡＣＳＡｒｉａ ＩＩを用いて行った。データ解析を、ＦｌｏｗＪｏソフトウエア（バージョン９．９．６）を用いて実施した。

ＨＬＡクラスＩＩ単量体及び二量体の生成
Ａ３７５細胞に、２９３ＧＰＧ細胞ベースのレトロウイルスシステムを使用して、α及びβ遺伝子をトランスフェクトし（例えば、Ｈｉｒａｎｏ， Ｎ． ｅｔ ａｌ．， Ｂｌｏｏｄ １０７， １５２８－１５３６ （２００６）、Ｂｕｔｌｅｒ， Ｍ．Ｏ． ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ １３， １８５７－１８６７ （２００７）、及びＨｉｒａｎｏ， Ｎ． ｅｔ ａｌ．， Ｂｌｏｏｄ １０８， ２６６２－２６６８ （２００６）を参照されたい。これらのそれぞれは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）、１０％ＦＢＳ及び５０μｇ／ｍｌゲンタマイシンを補充したＤＭＥＭで培養した。４８時間後、馴化培地を回収し、濾過（分画分子量（ＭＷＣＯ）１０ｋＤａ）によって濃縮した。次に、可溶性ＨＬＡクラスＩＩを含有する上澄液を、３７℃で２０～２４時間、１００μｇ／ｍｌの目的のペプチドと混合して、インビトロでペプチド交換を行った。単量体の濃度を、ニッケルコーティングプレート及び抗Ｈｉｓタグビオチン化ｍＡｂを用いて、特異的ＥＬＩＳＡによって測定した。可溶性ＨＬＡクラスＩＩ単量体を、染色向けに、ＰＥ複合抗ＨｉｓｍＡｂを用いて２：１のモル比で、４℃で１．５時間かけて二量体化した。

ＤＱ５制限抗原特異的ＣＤ４^＋Ｔ細胞の刺激
ＣＤ４^＋Ｔ細胞を精製して、次いで、１０μｇ／ｍｌのＧＰＣ３_{１３８－１５７}をパルスし、かつＥ：Ｔ比２０：１、２００Ｇｙで照射したＤＱ５発現ａＡＰＣによって刺激した。４８時間後、１０ＩＵ／ｍｌのＩＬ－２及び１０ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５を、ＣＤ４^＋Ｔ細胞に加えた。ＩＬ－２（１０ＩＵ／ｍｌ）及びＩＬ－１５（１０ｎｇ／ｍｌ）を補充した培養液を、２～３日ごとに補充した。２週間後、Ｔ細胞を、ＤＱ５^{Ｌ１１４Ｗ／Ｖ１４３Ｍ＋４ｒｅｐｓ}二量体染色に供した。

ＨＬＡクラスＩＩ二量体染色
抗原特異的ＴＣＲ遺伝子を形質導入した初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞及びＪｕｒｋａｔ７６／ＣＤ４Ｔ細胞を、５０ｎＭダサチニブを用いて、３７℃で３０分間、前処理して、室温で４～５時間、５～１５μｇ／ｍｌのクラスＩＩ二量体で染色した。洗浄後、細胞表面分子を、ＡＰＣ－Ｃｙ７－複合抗ＣＤ４ｍＡｂで対比染色した。

ＥＬＩＳＰＯＴアッセイ
サイトカインＥＬＩＳＰＯＴアッセイを、以前に報告されたように実施した（例えば、Ｙａｍａｓｈｉｔａ， Ｙ． ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔ Ｃｏｍｍｕｎ ８， １５２４４ （２０１７）、及びＡｎｃｚｕｒｏｗｓｋｉ， Ｍ． ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉ Ｒｅｐ ８， ４８０４ （２０１８））を参照されたい。そのそれぞれは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
ＤＱベータ鎖を含むＨＬＡクラスＩＩ分子であって、前記ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にロイシン以外のアミノ酸を含む、前記ＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目２)
ＤＱベータ鎖を含むＨＬＡクラスＩＩ分子であって、前記ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基に置換変異を含み、前記置換変異は、ロイシン以外のアミノ酸によるものである、前記ＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目３)
前記ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にバリン以外のアミノ酸をさらに含む、項目１または２に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目４)
ＤＱベータ鎖を含むＨＬＡクラスＩＩ分子であって、前記ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にバリン以外のアミノ酸を含む、前記ＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目５)
ＤＱベータ鎖を含むＨＬＡクラスＩＩ分子であって、前記ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基に置換変異を含み、前記置換変異は、バリン以外のアミノ酸によるものである、前記ＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目６)
前記ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にロイシン以外のアミノ酸をさらに含む、項目４または５に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目７)
前記ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にアスパラギン以外のアミノ酸をさらに含む、項目１～６のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目８)
前記ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にイソロイシン以外のアミノ酸をさらに含む、項目１～７のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目９)
前記ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にセリン以外のアミノ酸をさらに含む、項目１～８のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目１０)
前記ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にプロリン以外のアミノ酸をさらに含む、項目１～９のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目１１)
前記ＤＱベータ鎖は、
（ｉ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にアスパラギン以外のアミノ酸、
（ｉｉ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にイソロイシン以外のアミノ酸、（ｉｉｉ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にセリン以外のアミノ酸、及び、
（ｉｖ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にプロリン以外のアミノ酸、のうち少なくとも３つをさらに含む、項目１～１０のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目１２)
前記ＤＱベータ鎖は、
（ｉ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にアスパラギン以外のアミノ酸、
（ｉｉ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にイソロイシン以外のアミノ酸、
（ｉｉｉ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にセリン以外のアミノ酸、及び、
（ｉｖ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にプロリン以外のアミノ酸、をさらに含む、項目１～１１のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目１３)
前記配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、疎水性側鎖を含む、項目１～３、及び６～１２のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目１４)
前記配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、アラニン、バリン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンからなる群から選択される、項目１～３、及び６～１３のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目１５)
前記配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基のロイシン以外のアミノ酸は、トリプトファンである、項目１～３、及び６～１４のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目１６)
前記配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、疎水性側鎖を含む、項目４～１５のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目１７)
前記配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、アラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンから選択される、項目４～１６のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目１８)
前記配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基のバリン以外のアミノ酸は、メチオニンである、項目４～１７のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目１９)
前記ＭＨＣクラスＩＩ分子の前記ベータ鎖は、配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にアスパラギン以外のアミノ酸を含む、項目７～１８のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目２０)
前記配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基のアスパラギン以外のアミノ酸は、セリン、スレオニン、及びグルタミンから選択される、項目７～１９のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目２１)
前記配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基のアスパラギン以外のアミノ酸は、グルタミンである、項目７～２０のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目２２)
前記ＭＨＣクラスＩＩ分子の前記ベータ鎖は、配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にイソロイシン以外のアミノ酸を含む、項目８～２１のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目２３)
前記配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基のイソロイシン以外のアミノ酸は、アラニン、バリン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンから選択される、項目８～２２のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目２４)
前記配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基のイソロイシン以外のアミノ酸は、バリンである、項目８～２３のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目２５)
前記ＭＨＣクラスＩＩ分子の前記ベータ鎖は、配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にセリン以外のアミノ酸を含む、項目９～２４のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目２６)
前記配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基のセリン以外のアミノ酸は、アルギニン、ヒスチジン、及びリシンから選択される、項目９～２５のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目２７)
前記配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基のセリン以外のアミノ酸は、ヒスチジンである、項目９～２６のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目２８)
前記ＭＨＣクラスＩＩ分子の前記ベータ鎖は、配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にプロリン以外のアミノ酸を含む、項目１０～２７のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目２９)
前記配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基のプロリン以外のアミノ酸は、セリン、スレオニン、アスパラギン及びグルタミンから選択される、項目１０～２８のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目３０)
前記配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基のプロリン以外のアミノ酸は、グルタミンである、項目１０～２９のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目３１)
前記ＤＱベータ鎖は、配列番号１、３、４及び５から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、項目１～３０のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目３２)
前記ＤＱベータ鎖は、配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にトリプトファン、及び配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にメチオニンを含む、項目１～１３のいずれか１項に記載のＨＬＡ。
(項目３３)
前記ＭＨＣクラスＩＩ分子の前記ベータ鎖は、
（ａ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にトリプトファン、
（ｂ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にメチオニン、ならびに
（ｃ）
（ｉ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にグルタミン、
（ｉｉ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にバリン、
（ｉｉｉ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にヒスチジン、及び
（ｉｖ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にグルタミン、のうち少なくとも１つを含む、項目１～３２のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目３４)
前記ＭＨＣクラスＩＩ分子の前記ベータ鎖は、
（ａ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にトリプトファン、
（ｂ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にメチオニン、ならびに
（ｃ）
（ｉ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にグルタミン、
（ｉｉ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にバリン、
（ｉｉｉ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にヒスチジン、及び
（ｉｖ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にグルタミン、のうち少なくとも２つを含む、項目１～３３のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目３５)
前記ＭＨＣクラスＩＩ分子の前記ベータ鎖は、
（ａ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にトリプトファン、
（ｂ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にメチオニン、ならびに
（ｃ）
（ｉ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にグルタミン、
（ｉｉ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にバリン、
（ｉｉｉ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にヒスチジン、及び
（ｉｖ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にグルタミン、のうち少なくとも３つを含む、項目１～３４のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目３６)
前記ＭＨＣクラスＩＩ分子の前記ベータ鎖は、
（ａ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にトリプトファン、
（ｂ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にメチオニン、
（ｃ）配列番号１の１１０位に相当するアミノ酸残基にグルタミン、
（ｄ）配列番号１の１１６位に相当するアミノ酸残基にバリン、
（ｅ）配列番号１の１１８位に相当するアミノ酸残基にヒスチジン、及び
（ｆ）配列番号１の１４６位に相当するアミノ酸残基にグルタミン、を含む、項目１～３５のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目３７)
前記ＤＱベータ鎖は、配列番号３に記載されているアミノ酸配列を含む、項目１～３６のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目３８)
前記ＤＱベータ鎖は、配列番号４に記載されているアミノ酸配列を含む、項目１～３７のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目３９)
前記ＨＬＡクラスＩＩ分子の前記ベータ鎖は、ＤＱ２、ＤＱ３、ＤＱ４、ＤＱ５、またはＤＱ６対立遺伝子を含む、項目１～３８のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目４０)
前記ＭＨＣクラスＩＩ分子の前記ベータ鎖は、ＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０２、ＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０３、ＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０４、ＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０５、またはＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０６対立遺伝子を含む、項目１～３８のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目４１)
ＤＱアルファ鎖をさらに含む、項目１～４０のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目４２)
前記ＭＨＣクラスＩＩ分子の前記アルファ鎖は、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０１、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０２、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０３、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０４、ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０５またはＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０６対立遺伝子を含む、項目４１に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目４３)
前記ＤＱアルファ鎖は、配列番号６または８に対して少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、項目４１または４２に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目４４)
前記ＤＱアルファ鎖は、配列番号６または８に記載されているアミノ酸配列を含む、項目４３に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目４５)
前記ＤＱベータ鎖は、参照ＨＬＡクラスＩＩ分子と比較してＣＤ４タンパク質に対する親和性が高く、前記参照ＨＬＡクラスＩＩ分子は、（ｉ）配列番号１の１１４位に相当するアミノ酸残基にロイシン、及び／または（ｉｉ）配列番号１の１４３位に相当するアミノ酸残基にバリンを含むＤＱベータ鎖を含む、項目１～４４のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目４６)
前記親和性は、少なくとも約１．５倍、少なくとも約２倍、少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、少なくとも約５倍、少なくとも約６倍、少なくとも約７倍、少なくとも約８倍、少なくとも約９倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約１５倍、少なくとも約２０倍、少なくとも約２５倍、少なくとも約３０倍、少なくとも約３５倍、少なくとも約４０倍、少なくとも約４５倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約７５倍、少なくとも約１００倍、少なくとも約２００倍、少なくとも約３００倍、少なくとも約４００倍、少なくとも約５００倍、または少なくとも約１０００倍高い、項目４５に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目４７)
前記ＤＱベータ鎖は、細胞の膜に結合している、項目１～４６のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目４８)
前記ＤＱベータ鎖は、細胞の膜に結合していない、項目１～４６のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目４９)
前記ＤＱベータ鎖は、完全長ＤＱアルファ鎖の細胞外ドメインを含む、項目１～４６のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目５０)
前記ＤＱベータ鎖は、完全長ＤＱベータ鎖の膜貫通ドメインを含まない、項目４９に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目５１)
前記ＤＱアルファ鎖は、細胞の膜に結合している、項目４１～５０のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目５２)
前記ＤＱアルファ鎖は、細胞の膜に結合していない、項目４１～５０のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目５３)
前記ＤＱアルファ鎖は、完全長ＤＱアルファ鎖の細胞外ドメインを含む、項目４１～５０のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目５４)
前記ＤＱアルファ鎖は、完全長ＤＱアルファ鎖の膜貫通ドメインを含まない、項目５３に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目５５)
前記ＤＱベータ鎖は、不活性粒子に連結または結合している、項目４８～５４のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目５６)
前記不活性粒子は、ビーズである、項目５５に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目５７)
前記不活性粒子は、ナノ粒子である、項目５５に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目５８)
前記ナノ粒子は、ペグ化酸化鉄、キトサン、デキストラン、ゼラチン、アルギナート、リポソーム、澱粉、分枝ポリマー、炭素ベース担体、ポリ乳酸、ポリ（シアノ）アクリレート、ポリエチルエイネミン（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｉｎｅｍｉｎｅ）、ブロックコポリマー、ポリカプロラクトン、ＳＰＩＯＮＳ、ＵＳＰＩＯＮＳ、Ｃｄ／Ｚｎ－セレン化物、またはシリカナノ粒子から選択される、項目５７に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目５９)
前記ナノ粒子は、ペグ化酸化鉄ナノ粒子である、項目５７または５８に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目６０)
前記ＤＱベータ鎖は、シグナルペプチドを含む、項目１～５９のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目６１)
前記ＤＱアルファ鎖は、シグナルペプチドを含む、項目４１～６０のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目６２)
前記シグナルペプチドは、配列番号９に記載されているアミノ酸配列を含む、項目６０または６１に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目６３)
項目１～６２のいずれか１項に記載のＤＱベータ鎖をコードする、核酸分子。
(項目６４)
項目４１～６３のいずれか１項に記載のＤＱアルファ鎖をさらにコードする、項目６３に記載の核酸分子。
(項目６５)
配列番号２に対して少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有するヌクレオチド配列を含む、項目６３または６４に記載の核酸分子。
(項目６６)
項目６３～６５のいずれか１項に記載の核酸分子を含む、ベクター。
(項目６７)
項目１～６２のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子、項目６３～６５のいずれか１項に記載の核酸分子、または項目６６に記載のベクターを含む、細胞。
(項目６８)
哺乳動物細胞または昆虫細胞である、項目６７に記載の細胞。
(項目６９)
Ｋ５６２細胞、Ｔ２、ＨＥＫ２９３、ＨＥＫ２９３Ｔ、Ａ３７５、ＳＫ－ＭＥＬ－２８、Ｍｅ２７５、ＣＯＳ、線維芽細胞、腫瘍細胞、またはこれらの任意の組み合わせから選択される、項目６７または６８に記載の細胞。
(項目７０)
内因性ＭＨＣクラスＩＩＤＱベータ鎖発現を欠いている、項目６７～６９のいずれか１項に記載の細胞。
(項目７１)
内因性ＭＨＣクラスＩＩＤＱアルファ鎖発現を欠いている、項目６７～７０のいずれか１項に記載の細胞。
(項目７２)
ＭＨＣクラスＩＩ複合体のエピトープと結合することができるＴ細胞受容体を識別する方法であって、項目６７～７１のいずれか１項に記載の細胞に前記エピトープを含む１つ以上のペプチドをパルスすることと、１つ以上のＣＤ４ ^＋ Ｔ細胞を前記ＡＰＣで刺激することと、を含む、前記方法。
(項目７３)
疾患または病態を治療することを、それを必要とする対象において行う方法であって、項目１～６２のいずれか１項に記載のＭＨＣクラスＩＩ分子を前記対象に投与することを含む、前記方法。
(項目７４)
前記疾患または病態は、がんまたは感染である、項目７３に記載の方法。
(項目７５)
前記がんは、黒色腫、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頸部癌、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、胃癌、子宮癌、肺癌、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、食道癌、小腸癌、尿道癌、慢性または急性白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）（非Ｔ細胞ＡＬＬを含む）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、膀胱癌、腎臓または尿管癌、腎盤癌、神経膠腫、扁平上皮癌、及び上記がんの組み合わせ、からなる群から選択される、項目７４に記載の方法。
(項目７６)
前記がんは、再発性または難治性である、項目７４または７５に記載の方法。
(項目７７)
前記がんは、局所的に進行性である、項目７４～７６のいずれか１項に記載の方法。
(項目７８)
前記がんは、進行性である、項目７４～７７のいずれか１項に記載の方法。
(項目７９)
前記がんは、転移性である、項目７４～７８のいずれか１項に記載の方法。
(項目８０)
約１００μＭ未満のＫ _Ｄ でＣＤ４と結合する、項目１～６２のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目８１)
約１０μＭ未満のＫ _Ｄ でＣＤ４と結合する、項目１～６２のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目８２)
約８．９μＭ以下のＫ _Ｄ でＣＤ４と結合する、項目１～６２のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
(項目８３)
項目１～６２及び８０～８２のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子、ならびにペプチドを含む複合体であって、前記ペプチドは、ＤＤＸ３Ｙ _{１７１－１９０} 、ＨＡ _{２５５－２７０} 、ＧＰＣ３ _{１３８－１５７} 、またはこれらの任意の組み合わせを含む、前記複合体。

Claims (7)

1. 配列番号３に記載されているアミノ酸配列を含むＤＱベータ鎖の細胞外ドメインを含む、ＨＬＡクラスＩＩ分子。
2. 前記ＤＱベータ鎖の前記細胞外ドメインは、配列番号４に記載されているアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
3. ＤＱアルファ鎖をさらに含む、請求項１または２に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
4. 前記ＤＱアルファ鎖は、配列番号６に記載されているアミノ酸配列を含む、請求項３に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
5. 前記ＤＱアルファ鎖は、配列番号８に記載されているアミノ酸配列を含む、請求項３に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
6. （ａ）前記ＤＱベータ鎖は、細胞の膜に結合している、
   （ｂ）前記ＤＱベータ鎖は、完全長ＤＱアルファ鎖の細胞外ドメインを含む、
   （ｃ）前記ＤＱベータ鎖は、不活性粒子に連結または結合している、
   （ｄ）前記ＤＱベータ鎖は、シグナルペプチドを含む、
   （ｅ）前記ＨＬＡクラスＩＩ分子が、細胞の膜に結合しているＤＱアルファ鎖をさらに含む、
   または
   （ｆ）（ａ）～（ｅ）の任意の組み合わせである、
   請求項１～５のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子。
7. 請求項１～６のいずれか１項に記載のＨＬＡクラスＩＩ分子、ならびにペプチドを含む複合体であって、前記ペプチドは、ＤＤＸ３Ｙ_{１７１－１９０}、ＨＡ_{２５５－２７０}、ＧＰＣ３_{１３８－１５７}、またはこれらの任意の組み合わせを含む、前記複合体。