JPS5819066B2 - トガウ イルス ｈｉ反応方法 - Google Patents
トガウ イルス ｈｉ反応方法Info
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- JPS5819066B2 JPS5819066B2 JP50138417A JP13841775A JPS5819066B2 JP S5819066 B2 JPS5819066 B2 JP S5819066B2 JP 50138417 A JP50138417 A JP 50138417A JP 13841775 A JP13841775 A JP 13841775A JP S5819066 B2 JPS5819066 B2 JP S5819066B2
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明はトガウィルスＨＩ反応方法に関する。
風疹ウィルスなどのトガウィルスのＨＩ（赤血球凝集抑
制）反応は中和試験や補体結合試験に比べて感度が高く
簡便であるため、血清学的診断に非常に有用な手段とな
っている。
制）反応は中和試験や補体結合試験に比べて感度が高く
簡便であるため、血清学的診断に非常に有用な手段とな
っている。
しかしながらこれらのＨＩ反応に付される人その他の血
清中にはトガウィルス凝集素（特異ＨＡ抗原）に対する
非特異凝集阻害物質が存在するため強い偽陽性反応がみ
られる。
清中にはトガウィルス凝集素（特異ＨＡ抗原）に対する
非特異凝集阻害物質が存在するため強い偽陽性反応がみ
られる。
この凝集阻害物質の除去法としてカオリンによる吸着法
およびアセトンによる抽出法などが広く用いられており
、風疹ＨＩ試験の場合にはより再現性の高い方法として
ヘパリン−ＭｎＣＩ２あるいはデキストラン硫酸−Ｃａ
ＣＩ□による沈澱法が用いられている３ しかしながら
、カオリンは非選択的な吸着剤で非特異凝集阻害物質と
共に抗体をも吸着し偽陰性反応を与える。
およびアセトンによる抽出法などが広く用いられており
、風疹ＨＩ試験の場合にはより再現性の高い方法として
ヘパリン−ＭｎＣＩ２あるいはデキストラン硫酸−Ｃａ
ＣＩ□による沈澱法が用いられている３ しかしながら
、カオリンは非選択的な吸着剤で非特異凝集阻害物質と
共に抗体をも吸着し偽陰性反応を与える。
またアセトンは抗体分子を変性失活させ、同様に偽陰性
反応を与える。
反応を与える。
ヘパリン−ＭｎＣＩ２法およびデキストラン硫酸−Ｃａ
ＣＩ□法では非特異凝集阻害物質を完全に除去するため
には高濃度の試薬を用いねばならないため、血球パター
ンが乱れＩ（Ｉ抗体価の読み取りを誤まらせることがあ
る。
ＣＩ□法では非特異凝集阻害物質を完全に除去するため
には高濃度の試薬を用いねばならないため、血球パター
ンが乱れＩ（Ｉ抗体価の読み取りを誤まらせることがあ
る。
更にこれらの非特異凝集阻害物質除去法はいずれも非特
異凝集阻害物質をＨＩ抗体から分離するための遠心分離
操作が必要であるため、大規模なＨＩ試験の実施にあた
って多くの時間、労力を要する結果となっていた。
異凝集阻害物質をＨＩ抗体から分離するための遠心分離
操作が必要であるため、大規模なＨＩ試験の実施にあた
って多くの時間、労力を要する結果となっていた。
本発明はかかる技術的背景のもとに、簡便な操作で実質
的に完全にトガウィルス凝集素に対する非特異凝集阻害
物質を不活化させたトガウィルスＥ（Ｉ反応血清ならび
に該血清を用いることにより正確かつ高感度で血清中の
ＨＩ抗体価を測定しうるトガウィルスＨＩ反応方法を提
供するものである。
的に完全にトガウィルス凝集素に対する非特異凝集阻害
物質を不活化させたトガウィルスＥ（Ｉ反応血清ならび
に該血清を用いることにより正確かつ高感度で血清中の
ＨＩ抗体価を測定しうるトガウィルスＨＩ反応方法を提
供するものである。
すなわち、本発明は、
（１）ホスホリパーゼＣを作用させて非特異凝集阻害物
質を不活化させた血清、トガウィルスＨＡ抗原および固
定赤血球を混合し、赤血球凝集の有無を測定することを
特徴とするトガウィルスＨＩ反応方法、ならびに （２）ホスホリパーゼＣを作用させて非特異凝集阻害物
質を不活化させたトガウィルスＨＩ反応用血清である。
質を不活化させた血清、トガウィルスＨＡ抗原および固
定赤血球を混合し、赤血球凝集の有無を測定することを
特徴とするトガウィルスＨＩ反応方法、ならびに （２）ホスホリパーゼＣを作用させて非特異凝集阻害物
質を不活化させたトガウィルスＨＩ反応用血清である。
本発明は、ＨＩ反応可能なトガウィルスのいずれに対し
ても適用することができ、かかるトガウィルスとしては
たとえば風疹ウィルス、アルボウィルス群（たとえば日
本脳炎ウィルス、黄熱ウィルスなど）などが挙げられる
。
ても適用することができ、かかるトガウィルスとしては
たとえば風疹ウィルス、アルボウィルス群（たとえば日
本脳炎ウィルス、黄熱ウィルスなど）などが挙げられる
。
血清としては上記したトガウィルスＨＩ反応において被
検血清として用いられうる血清であればどのような血清
を用いてもよく、たとえばヒト、ウシ、ラット、マウス
、モルモットなどの温血動物血清が挙げられ、とりわけ
ヒト血清中のトガウィルス特異ＨＩ抗体を測定する目的
でヒト血清が繁用される。
検血清として用いられうる血清であればどのような血清
を用いてもよく、たとえばヒト、ウシ、ラット、マウス
、モルモットなどの温血動物血清が挙げられ、とりわけ
ヒト血清中のトガウィルス特異ＨＩ抗体を測定する目的
でヒト血清が繁用される。
本発明においては、上記した血清にホスホリパーゼＣを
作用させることによりきわめて簡便な操作で実質的に完
全にトガウィルス凝集素に対する非特異凝集阻害物質を
不活化せしめたトガウィルスＨＩ反応用血清を得ること
ができる。
作用させることによりきわめて簡便な操作で実質的に完
全にトガウィルス凝集素に対する非特異凝集阻害物質を
不活化せしめたトガウィルスＨＩ反応用血清を得ること
ができる。
ホスホリパーゼＣはいかなる起源のものを使用してもよ
く、一般に約０．０４〜０．１２ ｕｎ ｉｔ／ｍ ］
好ましくは０．０６ ｕｎｉｔ／ｍｌ程度のホスホリパ
ーゼＣの水性溶媒（たとえば水、生理食塩水、各種緩衝
液など）溶液として用いるのがよい。
く、一般に約０．０４〜０．１２ ｕｎ ｉｔ／ｍ ］
好ましくは０．０６ ｕｎｉｔ／ｍｌ程度のホスホリパ
ーゼＣの水性溶媒（たとえば水、生理食塩水、各種緩衝
液など）溶液として用いるのがよい。
本酵素処理は、一般に血清もしくは通常の希釈液で希釈
した希釈血清に上記したホスホリパーゼＣの水性溶媒溶
液を添加し約１０〜５０℃好ましくは３７℃程度で約３
〜２０時間静置することにより行われる。
した希釈血清に上記したホスホリパーゼＣの水性溶媒溶
液を添加し約１０〜５０℃好ましくは３７℃程度で約３
〜２０時間静置することにより行われる。
このホスホリパーゼＣ処理により、血清中の非特異凝集
阻害物質が分解され不活化されるが、該血清中に存在す
るトガウィルス特異ＨＩ抗体の活性はなんら悪影響を受
けない。
阻害物質が分解され不活化されるが、該血清中に存在す
るトガウィルス特異ＨＩ抗体の活性はなんら悪影響を受
けない。
また、処理後の血清は、従来のカオリン、アセトン、ヘ
パリン−ＭｎＣＩ□あるいはデキストラン硫酸−ＣａＣ
１２で処理された血清とは異なり、非特異凝集阻害物質
をトガウィルス特異ＨＩ抗体から分離するための遠心分
離操作が全く不要であり、通常の血清非動化（たとえば
５６℃の加温）を行ない所望により希釈するのみでトガ
ウィルスＨＩ反応に供することができる。
パリン−ＭｎＣＩ□あるいはデキストラン硫酸−ＣａＣ
１２で処理された血清とは異なり、非特異凝集阻害物質
をトガウィルス特異ＨＩ抗体から分離するための遠心分
離操作が全く不要であり、通常の血清非動化（たとえば
５６℃の加温）を行ない所望により希釈するのみでトガ
ウィルスＨＩ反応に供することができる。
ちなみに、ホスホリパーゼＡ、ＢおよびＤのいずれを血
清に作用させてもトガウィルス凝集素に対する非特異凝
集阻害物質を不活化するという本発明の目的は全く達成
されえない。
清に作用させてもトガウィルス凝集素に対する非特異凝
集阻害物質を不活化するという本発明の目的は全く達成
されえない。
本発明においては、上記のようにして非特異凝集阻害物
質を不活化させた血清を用いてトガウィルスＨＩ反応を
行なうことにより、該血清中のトガウィルスＨＩ抗体価
を正確かつ高感度で測定することができる。
質を不活化させた血清を用いてトガウィルスＨＩ反応を
行なうことにより、該血清中のトガウィルスＨＩ抗体価
を正確かつ高感度で測定することができる。
この場合、新鮮赤血球は該血清中に残存するホスホリパ
ーゼＣにより溶血されるが、固定赤血球は意外にも残存
するホスホリパーゼＣにより全く溶血されず明確な凝集
像を与える。
ーゼＣにより溶血されるが、固定赤血球は意外にも残存
するホスホリパーゼＣにより全く溶血されず明確な凝集
像を与える。
すなわち、本発明は上記したトガウィルスＨＩ反応用血
清を固定赤血球と組み合せて使用するトガウィルスＨＩ
反応方法をも提供するものである。
清を固定赤血球と組み合せて使用するトガウィルスＨＩ
反応方法をも提供するものである。
赤血球としてはトガウィルス特異ＨＡ抗原により凝集さ
れうる赤血球のいずれを用いてもよく、たとえば咄乳類
（ヒツジ、サル、ヒトＯ型など）。
れうる赤血球のいずれを用いてもよく、たとえば咄乳類
（ヒツジ、サル、ヒトＯ型など）。
鳥類にワトリ〔ヒナおよび成鳥〕、ガチョウ、ハト、ウ
ズラなど）の赤血球が好都合に用いられる。
ズラなど）の赤血球が好都合に用いられる。
これら赤血球の固定処理は自体公知の手段のいずれで行
なったものでもよく。
なったものでもよく。
とりわけホルマリンで固定したものが好ましい。
かかる固定赤血球としては、本出願べにより開発された
凍結もしくは凍結乾燥せしめた凝集反応用赤血球（特開
昭４８−２６９１３号公報参照）を融解もしくは再浮遊
せしめたものを好都合に使用することができる。
凍結もしくは凍結乾燥せしめた凝集反応用赤血球（特開
昭４８−２６９１３号公報参照）を融解もしくは再浮遊
せしめたものを好都合に使用することができる。
本発明においては、ホスホリパーゼＣ処理により非特異
凝集阻害物質を不活化させた血清と、トガウィルス特異
ＨＡ抗原とを混合しさらに上記固定赤血球を混合して赤
血球凝集の有無を観察することにより血清中のＨＩ抗体
を正確かつ高感度に測定することができる。
凝集阻害物質を不活化させた血清と、トガウィルス特異
ＨＡ抗原とを混合しさらに上記固定赤血球を混合して赤
血球凝集の有無を観察することにより血清中のＨＩ抗体
を正確かつ高感度に測定することができる。
本ＨＩ反応においては、トガウィルスＨＩ反応に採用し
うる術式のいずれを用いてもよく、たとえば、マイクロ
タイター法などにより行なうことができる。
うる術式のいずれを用いてもよく、たとえば、マイクロ
タイター法などにより行なうことができる。
かかるトガウィルスＨＩ反応は、たとえば非特異凝集阻
害物質を。
害物質を。
不活化させた血清０．０２５ｍ１をマイクロプレート上
で２倍階段希釈し、更にＨＡ価４挙位の特異ＨＡ抗原０
．０２５ｍ１ を添加する。
で２倍階段希釈し、更にＨＡ価４挙位の特異ＨＡ抗原０
．０２５ｍ１ を添加する。
室温で３０分間放置したのち０．２５％の固定赤血球浮
遊液０．０２５ｍ１を混合し、室温で６０分間放置後、
赤血球凝集の有無を測定するものである。
遊液０．０２５ｍ１を混合し、室温で６０分間放置後、
赤血球凝集の有無を測定するものである。
なお。ＨＩ価はＨＡを完全に抑制した血清の最高希釈倍
数の逆数で以って表わされるものである。
数の逆数で以って表わされるものである。
以下に１本発明の実施例、実験例によりさらに具体的に
説明するが、これらが本発明の範囲を制限するものでな
いことはいうまでもない。
説明するが、これらが本発明の範囲を制限するものでな
いことはいうまでもない。
実施例 １
０．１ｍｌのヒト血清に０．２ｍｌのＨ８ＡＧ”）を加
え、得られる希釈血清にＱ、 Ｑ ６ ｕｎｉｔ／ｍｌ
のホスホリパーゼＣ＊２）溶液を０．１ ｍｌ加えて３
７℃で一夜インキュベートしたのち、５６℃で３０分加
温して血清の非動化を行ない、トガウィル１１１反応用
血清を得た。
え、得られる希釈血清にＱ、 Ｑ ６ ｕｎｉｔ／ｍｌ
のホスホリパーゼＣ＊２）溶液を０．１ ｍｌ加えて３
７℃で一夜インキュベートしたのち、５６℃で３０分加
温して血清の非動化を行ない、トガウィル１１１反応用
血清を得た。
＊１）Ｈ８ＡＧはＨＥＰＦＳ Ｓａｌｉｎｅ−Ａｌｂ
ｕｍｉｎ −Ｇｅｌａｔｉｎの略でその組成は下記のと
うりである。
ｕｍｉｎ −Ｇｅｌａｔｉｎの略でその組成は下記のと
うりである。
へペス（ドータイト試薬） ２．９７ｇＮａＣ］
４．０９ ｇＣａＣＩ２（
無水） ５５．５ ｍｇ牛血清アルブ
ミン １．０ｇゼラチン
１．２５ｍｇ適当量の蒸留水に溶解し、Ｎ−Ｎ
ａ０１（でｐＨを６．２に調整したのち蒸留水で全量５
００ ｍｌとする。
４．０９ ｇＣａＣＩ２（
無水） ５５．５ ｍｇ牛血清アルブ
ミン １．０ｇゼラチン
１．２５ｍｇ適当量の蒸留水に溶解し、Ｎ−Ｎ
ａ０１（でｐＨを６．２に調整したのち蒸留水で全量５
００ ｍｌとする。
＊２）使用ホスホリパーゼ゛ＣはＣＩ ｏｓｔｒ ｉｄ
ｉｕｍｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ 超厚の市販品で、
１単位の酵素はｐＨ３，７、３７℃で１分間に１μｍｏ
ｌｅの酸溶性リンを遊離する能力を有する。
ｉｕｍｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ 超厚の市販品で、
１単位の酵素はｐＨ３，７、３７℃で１分間に１μｍｏ
ｌｅの酸溶性リンを遊離する能力を有する。
実施例 ２
実施例１で使用したＨ８ＡＧＯ代りに■ＢＳ＊４〕ある
いはＰＢＳ”４）を用い全く同様に処理してトガウィル
スＨＩ反応用血清を得た。
いはＰＢＳ”４）を用い全く同様に処理してトガウィル
スＨＩ反応用血清を得た。
＊３） Ｖ Ｂ ＳはＶｅｒｏｎａｌ−Ｂｕｆｆｅｒｅ
ｄ ５ａｌｉｎｅの略でその組成は次の通りである。
ｄ ５ａｌｉｎｅの略でその組成は次の通りである。
５×ベロナール緩衝液 ２００ ｍ１
ＣａＣ１２（無水） ０．２ｇＭｇＣＩ
２・６Ｈ２００，２ｇ 牛血清アルブミン １．０ｇ ゼラチン １０ｍｇ 蒸留水で全量１００ｍ１とする。
２・６Ｈ２００，２ｇ 牛血清アルブミン １．０ｇ ゼラチン １０ｍｇ 蒸留水で全量１００ｍ１とする。
＊４）ＰＢＳはＰｈｏｓｐｈａｔｅ−Ｂｕｆｆｅｒｅｄ
５ａｌｉｎｅの略でその組成は次の通りである。
５ａｌｉｎｅの略でその組成は次の通りである。
ＮａＣｌ ’ ” ８．０ ｇＫＣ
Ｉ ０．２ｇＫＨ２ＰＯ，０，
２ｇ Ｎａ２ ＨＰＯ４・２Ｈ２０１，４４ｇ ＣａＣ１２（無水）０．１ｇ ＭｇＣｌ ２・６Ｆ（，２００，１ｇ 牛血清アルブミン ２．０ｇ ゼラチン １０ｍｇ 蒸留水で全量ＬＯＯＯｍｌとする。
Ｉ ０．２ｇＫＨ２ＰＯ，０，
２ｇ Ｎａ２ ＨＰＯ４・２Ｈ２０１，４４ｇ ＣａＣ１２（無水）０．１ｇ ＭｇＣｌ ２・６Ｆ（，２００，１ｇ 牛血清アルブミン ２．０ｇ ゼラチン １０ｍｇ 蒸留水で全量ＬＯＯＯｍｌとする。
実施例 ３
ウシ、ラット、マウス、モルモット血清をそれぞれ実施
例１と全く同様に処理してトガウィルスＨＩ反応用血清
を得た。
例１と全く同様に処理してトガウィルスＨＩ反応用血清
を得た。
実験例 ｌ
無処理血清、ホスホリパーゼＣ処理血清、カオリン処理
血清およびデキストラン硫酸−ＣａＣ１□処理血清の風
疹ＨＩ反応における比較 被検ヒト血清のそれぞれにつき下記（１）〜（勾の前処
理血清を調製した。
血清およびデキストラン硫酸−ＣａＣ１□処理血清の風
疹ＨＩ反応における比較 被検ヒト血清のそれぞれにつき下記（１）〜（勾の前処
理血清を調製した。
（力 無処理血清
（イ）ホスホリパーゼＣ処理血清
実施例１にしたがって得られるホスホリパーゼＣ処理血
清０．４ｍｌをＨＳ Ａ Ｇｏ、 ３ ｍｌで希釈した
もの （ウ カオリン処理血清 ０、１ ｍｌの被検血清に０．３ｍｌのＨ８ＡＧを加え
、得られた希釈血清に０．４ｍｌの２５係カオリン懸濁
液を加えて３０℃で３０分間インキュベートしたのち、
遠心分離）−て上清をとり５６℃で３０分加温して血清
の非働化を行った。
清０．４ｍｌをＨＳ Ａ Ｇｏ、 ３ ｍｌで希釈した
もの （ウ カオリン処理血清 ０、１ ｍｌの被検血清に０．３ｍｌのＨ８ＡＧを加え
、得られた希釈血清に０．４ｍｌの２５係カオリン懸濁
液を加えて３０℃で３０分間インキュベートしたのち、
遠心分離）−て上清をとり５６℃で３０分加温して血清
の非働化を行った。
匡）デキストラン硫酸−ＣａＣＩ□処理血清０、１ ｍ
ｌの被検血清に０．４ｍｌのＨ８ＡＧを加え、得られた
希釈血清に１係デキストラン硫酸および０．５’ Ｍ
Ｃａ ＣＩ ２をそれぞれ０．１ ｍｌずつ加えて４℃
で６０分放置後遠心分離して上清をとり５６℃で３０分
加温して血清の非働化を行った。
ｌの被検血清に０．４ｍｌのＨ８ＡＧを加え、得られた
希釈血清に１係デキストラン硫酸および０．５’ Ｍ
Ｃａ ＣＩ ２をそれぞれ０．１ ｍｌずつ加えて４℃
で６０分放置後遠心分離して上清をとり５６℃で３０分
加温して血清の非働化を行った。
上記血清（７１〜（罵はそれぞれ１０係固定赤血球（下
記参照）浮遊液０．１ｍｌを加えて自然凝集素の吸収を
行なったのち、ＨＩ反応に供した。
記参照）浮遊液０．１ｍｌを加えて自然凝集素の吸収を
行なったのち、ＨＩ反応に供した。
ホスホリパーゼＣ処理血清（イ）については１日令ニワ
トリヒナのホルマリン固定赤血球（特開昭４８−２６９
１３号公報の実施例１により得られる凍結乾燥赤血球を
蒸留水に再浮遊せしめたもの：以下同様）および新鮮赤
血球の両者を用い、その他の血清については上記ホルマ
リン固定赤血球のみを用いて、パーマネント■型プレー
ト上で５ｅ−ｖｅｒのマイクロタイター法（”Ｊｏｕｒ
ｎａｌ ｏｆＩ晶男ｕｎｏｌｏｇＭ”第８８巻（１９
６２年）第３２０〜３２９頁参照）により風疹ウィルス
ＨＩ価を測定した。
トリヒナのホルマリン固定赤血球（特開昭４８−２６９
１３号公報の実施例１により得られる凍結乾燥赤血球を
蒸留水に再浮遊せしめたもの：以下同様）および新鮮赤
血球の両者を用い、その他の血清については上記ホルマ
リン固定赤血球のみを用いて、パーマネント■型プレー
ト上で５ｅ−ｖｅｒのマイクロタイター法（”Ｊｏｕｒ
ｎａｌ ｏｆＩ晶男ｕｎｏｌｏｇＭ”第８８巻（１９
６２年）第３２０〜３２９頁参照）により風疹ウィルス
ＨＩ価を測定した。
なお、血清、ＨＡ抗原、固定赤血球の希釈にはすべてＨ
８ＡＧを用いた。
８ＡＧを用いた。
給米は第１表に示すとおりであった。
実験例 ２
無処理血清、ホスホリパーゼＣ処理血清およびアセトン
処理血清の日本脳炎ＨＩ反応における比較 被検ヒト血清のそれぞれにつき下記力〜（り）の前処理
血清を調製した。
処理血清の日本脳炎ＨＩ反応における比較 被検ヒト血清のそれぞれにつき下記力〜（り）の前処理
血清を調製した。
力）無処理血清
キ）ホスホリパーゼＣ処理血清
ＰＢＳを用い実施例２にしたがって得られるホスホリパ
ーゼＣ処理血清０．４ｍｌをｏ、ｏｔＭ−ホウ酸すｌ−
ＩＪウム水溶液０．３ｍｌで希釈したもの （り） アセトン処理血清 ０、１ ｍｌの被検血清に２ｍｌのアセトンを加え、Ｌ
５００ｒｐｍで５分間遠心して上清をすて、ふたたび２
ｍｌ のアセトンを加えて同様に遠心して上清をすてた
。
ーゼＣ処理血清０．４ｍｌをｏ、ｏｔＭ−ホウ酸すｌ−
ＩＪウム水溶液０．３ｍｌで希釈したもの （り） アセトン処理血清 ０、１ ｍｌの被検血清に２ｍｌのアセトンを加え、Ｌ
５００ｒｐｍで５分間遠心して上清をすて、ふたたび２
ｍｌ のアセトンを加えて同様に遠心して上清をすてた
。
沈渣を乾燥後、０．０１Ｍ−ホウ酸ナトリウム水溶液０
．７ ｍｌを加え一夜４℃で放置する。
．７ ｍｌを加え一夜４℃で放置する。
上記血清（至）〜（り）はそれぞれ１０係固定赤血球浮
遊液０．１ ｍｌを加えて自然凝集素の吸収を行なった
のち、）ＩＩ試験に供した。
遊液０．１ ｍｌを加えて自然凝集素の吸収を行なった
のち、）ＩＩ試験に供した。
各血清につきパーマネント■型プレートを用いてＣ１ａ
ｒｋｅらのマイクロタイター法（”Ａｍｅｒｉ−ｃａｎ
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｍｅｄｉ
ｃｉｎｅａｎｄ Ｈｙｇｉｅｎｅ ”第７巻（１９５８
年）第５６１〜５７３頁参照）により日本脳炎ウィルス
ＨＩ価を測定した。
ｒｋｅらのマイクロタイター法（”Ａｍｅｒｉ−ｃａｎ
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｍｅｄｉ
ｃｉｎｅａｎｄ Ｈｙｇｉｅｎｅ ”第７巻（１９５８
年）第５６１〜５７３頁参照）により日本脳炎ウィルス
ＨＩ価を測定した。
結果は第２表に示すとおりであった。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ ホスホリパーゼＣを作用させて非特異凝集阻害物質
を不活化させた血清、トガウィルス特異ＨＡ抗原および
固定赤血球を混合し、赤血球凝集の有無を測定するどと
を特徴とするトガウィルスＨＩ反応方法。 ２ ホスホリパーゼＣを作用させて非特異凝集阻害物質
を不活化させたトガウィルスＨＩ反応用血清。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP50138417A JPS5819066B2 (ja) | 1975-11-17 | 1975-11-17 | トガウ イルス ｈｉ反応方法 |
| GB46386/76A GB1564029A (en) | 1975-11-17 | 1976-11-08 | Hemagglutination-inhibition test for togaviruses |
| US05/739,514 US4140754A (en) | 1975-11-17 | 1976-11-08 | Hemagglutination-inhibition test for togaviruses |
| DE2652091A DE2652091C2 (de) | 1975-11-17 | 1976-11-16 | Hämagglutinations-Hemmungstest für Togaviren |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP50138417A JPS5819066B2 (ja) | 1975-11-17 | 1975-11-17 | トガウ イルス ｈｉ反応方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5264422A JPS5264422A (en) | 1977-05-27 |
| JPS5819066B2 true JPS5819066B2 (ja) | 1983-04-15 |
Family
ID=15221466
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP50138417A Expired JPS5819066B2 (ja) | 1975-11-17 | 1975-11-17 | トガウ イルス ｈｉ反応方法 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4140754A (ja) |
| JP (1) | JPS5819066B2 (ja) |
| DE (1) | DE2652091C2 (ja) |
| GB (1) | GB1564029A (ja) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4294817A (en) * | 1977-11-25 | 1981-10-13 | International Diagnostic Technology, Inc. | Method of fluoro immunoassay |
| GB2036309B (en) * | 1978-02-06 | 1982-10-06 | Takeda Chemical Industries Ltd | Viral hemoagglutination inhibition test |
| US4259207A (en) * | 1979-09-19 | 1981-03-31 | American Hospital Supply Corporation | Suspending medium for immunologic reactions |
| US4609630A (en) * | 1983-03-23 | 1986-09-02 | Yanovsky Jorge F | Method for improving the specificity of immunoassays |
| JPS6161055A (ja) * | 1984-08-31 | 1986-03-28 | Shionogi & Co Ltd | ウイルス赤血球凝集反応試験用鳥類固定赤血球の保存液 |
| US5004692A (en) * | 1987-12-15 | 1991-04-02 | Protein Design Labs, Inc. | Cloning and expression of phosopholipase C genes |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3541202A (en) * | 1967-06-26 | 1970-11-17 | Us Health Education & Welfare | Detection of rubella by hemagglutination-inhibition |
| GB1244344A (en) * | 1967-11-13 | 1971-08-25 | Abbott Lab | Hemagglutination testing procedure employing stabilized and potentiated erythrocytes and a method for their preparation |
| JPS5037724B2 (ja) * | 1971-08-10 | 1975-12-04 |
-
1975
- 1975-11-17 JP JP50138417A patent/JPS5819066B2/ja not_active Expired
-
1976
- 1976-11-08 GB GB46386/76A patent/GB1564029A/en not_active Expired
- 1976-11-08 US US05/739,514 patent/US4140754A/en not_active Expired - Lifetime
- 1976-11-16 DE DE2652091A patent/DE2652091C2/de not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5264422A (en) | 1977-05-27 |
| GB1564029A (en) | 1980-04-02 |
| DE2652091A1 (de) | 1977-05-18 |
| DE2652091C2 (de) | 1987-01-29 |
| US4140754A (en) | 1979-02-20 |
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