JPS5819255B2 - 魚類受精卵の低温保存方法 - Google Patents
魚類受精卵の低温保存方法Info
- Publication number
- JPS5819255B2 JPS5819255B2 JP56090951A JP9095181A JPS5819255B2 JP S5819255 B2 JPS5819255 B2 JP S5819255B2 JP 56090951 A JP56090951 A JP 56090951A JP 9095181 A JP9095181 A JP 9095181A JP S5819255 B2 JPS5819255 B2 JP S5819255B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- eggs
- fertilized
- low
- cryoprotectant
- fish eggs
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
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Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
- Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish
Landscapes
- Farming Of Fish And Shellfish (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、魚類の受精卵を所定の温度まで冷却し所望の
期間保存する低温保存方法に関する。
期間保存する低温保存方法に関する。
水産養殖において魚の産卵期に関係なく種苗を入手でき
るならば、養殖池の有効利用、年間を通じての出荷、飼
料の節約等多くの利点が考えられる。
るならば、養殖池の有効利用、年間を通じての出荷、飼
料の節約等多くの利点が考えられる。
その手段として、魚類の精字や卵を凍結保存することが
考えられ、精子の凍結保存については多くの研究例が知
られているが、卵の凍結保存については研究例はわずか
である。
考えられ、精子の凍結保存については多くの研究例が知
られているが、卵の凍結保存については研究例はわずか
である。
ここで、卵の凍結保存については、凍結保存後のふ化操
作の容易性又は高ふ化率を得る等の点からして受精卵の
凍結保存が有効と思われる。
作の容易性又は高ふ化率を得る等の点からして受精卵の
凍結保存が有効と思われる。
そして、この受精卵の凍結保存についてｉ、へ水魚の受
精卵をその卵の凍結を防止する抗凍結剤の存在の下に一
１０℃程度に冷却して保存し、８０チ程度のふ化率を得
だとの研究例はあるが、１００％に近い高いふ化率は得
られておらず、また淡水魚についての例は皆無である。
精卵をその卵の凍結を防止する抗凍結剤の存在の下に一
１０℃程度に冷却して保存し、８０チ程度のふ化率を得
だとの研究例はあるが、１００％に近い高いふ化率は得
られておらず、また淡水魚についての例は皆無である。
本発明は、上記事情に対処してなされたもので、魚類の
受精卵を１００ｑ６に近い高いふ化率が得られるように
低温保存する方法を提供することを目的とする。
受精卵を１００ｑ６に近い高いふ化率が得られるように
低温保存する方法を提供することを目的とする。
以下、本発明による魚類受精卵の低温保存方法を詳細１
ｃ説明する。
ｃ説明する。
本発明による魚類受精卵の低温保存方法は、例えばニジ
マス等の受精卵を無機塩類水溶液と上記受精卵の卵内凍
結を防止する抗凍結剤とこの抗凍結剤の凍結防止作用を
高める補助剤とからなる媒液の入っだ容器中に浸漬し、
上記容器ごと受精卵を０℃以下の所定の温度まで冷却し
、その冷却状態を保持して所望の期間保存することによ
って、受精卵を低温保存する方法である。
マス等の受精卵を無機塩類水溶液と上記受精卵の卵内凍
結を防止する抗凍結剤とこの抗凍結剤の凍結防止作用を
高める補助剤とからなる媒液の入っだ容器中に浸漬し、
上記容器ごと受精卵を０℃以下の所定の温度まで冷却し
、その冷却状態を保持して所望の期間保存することによ
って、受精卵を低温保存する方法である。
上記無機塩類水溶液は、塩化カリウム（ＫＣＡ’）と、
塩化カルシウム（ＣａＣ１２２０２０）と、塩化ナトリ
ウム（ＮａＣｌ）を含む水溶液である。
塩化カルシウム（ＣａＣ１２２０２０）と、塩化ナトリ
ウム（ＮａＣｌ）を含む水溶液である。
上記抗凍結剤としては、呻乳動物の卵子や血液の凍結保
存に用いられるジメチルスルホキシド（（ＣＨ３）２Ｓ
Ｏ）（以下「ＤＭＳＯ」という）を用いる。
存に用いられるジメチルスルホキシド（（ＣＨ３）２Ｓ
Ｏ）（以下「ＤＭＳＯ」という）を用いる。
このＤＭＳＯは、媒液の浸透圧を高め、さらに上記受精
卵の卵膜の透過性を高めることにより卵内の自由水を脱
水させるものである。
卵の卵膜の透過性を高めることにより卵内の自由水を脱
水させるものである。
従って、上記ＤＭＳＯの存在下では、受精卵内の自由水
が除かれ、周囲の媒液が凍結しても卵内凍結は防止され
る。
が除かれ、周囲の媒液が凍結しても卵内凍結は防止され
る。
ここで、上記媒液中のＤＭＳＯの濃度の決定については
、第１図に示すような結果を得た。
、第１図に示すような結果を得た。
すなわち、無機塩類水溶液にＤＭＳＯをＯ〜４．２Ｍ（
モル）添加した媒液中に受精卵を浸漬して一７℃で冷却
処理したところ、ＤＭＳＯを無添加ではふ化するものは
全く見られず、ＤＭＳＯを１．４〜２．１Ｍ添加した場
合は４０〜４７襲のふ化率を示し、ＤＭＳＯを２．８〜
４，２Ｍ添加した場合は殆んどふ化は見られなかった。
モル）添加した媒液中に受精卵を浸漬して一７℃で冷却
処理したところ、ＤＭＳＯを無添加ではふ化するものは
全く見られず、ＤＭＳＯを１．４〜２．１Ｍ添加した場
合は４０〜４７襲のふ化率を示し、ＤＭＳＯを２．８〜
４，２Ｍ添加した場合は殆んどふ化は見られなかった。
なお、図中、実線で示した折線は、無機塩類水溶液中の
塩化ナトリウムの濃度が１５４ｍＭ（ミリモル）のもの
を示し、鎖線で示した折線は同じ＜１８８ｍＭのものを
示す。
塩化ナトリウムの濃度が１５４ｍＭ（ミリモル）のもの
を示し、鎖線で示した折線は同じ＜１８８ｍＭのものを
示す。
また、−１０℃以下の冷却処理ではふ化したものは見ら
れなかった。
れなかった。
この結果から、ＤＭＳＯの最適濃度は１．４〜２．１Ｍ
であることがわかる。
であることがわかる。
次に、上記媒液中にＤＭＳＯだけを添加したのでは、第
１図に示すように、妄化率は５０係程度にしかならない
ので、本発明においては、ＤＭＳＯの凍結防止作用を高
める補助剤を媒液中に添加している。
１図に示すように、妄化率は５０係程度にしかならない
ので、本発明においては、ＤＭＳＯの凍結防止作用を高
める補助剤を媒液中に添加している。
この補助剤と□しては、ブドウ糖分生血清あるいはカル
ボキニンメチルセルロース（ＣＭＣ）等がある。
ボキニンメチルセルロース（ＣＭＣ）等がある。
このような補助剤がＤＭＳＯの凍結防止作用を高める理
由は十分に明らかでないが、ＤＭＳＯには通常では生物
学的膜を透過しない物質の膜透過を助ける能力があり、
上記補助剤をＤＭＳＯと一緒に用いることによって１、
補助剤が卵内に浸透し卵に内部から、作用しているもの
と推察される。
由は十分に明らかでないが、ＤＭＳＯには通常では生物
学的膜を透過しない物質の膜透過を助ける能力があり、
上記補助剤をＤＭＳＯと一緒に用いることによって１、
補助剤が卵内に浸透し卵に内部から、作用しているもの
と推察される。
補助剤としてブドウ糖を添加した場合のふ化率は、第２
図に示すとおりである。
図に示すとおりである。
すなわち、ＤＭＳＯを２．１Ｍ含む無機塩類水溶液に更
にブドウ糖を添加した媒液中に受精卵を浸漬して一７°
Ｃで冷却処理したところ、ブドウ糖を５．６ ｍ Ｍ添
加したものでは４０〜５７チのふ化率を示し、１１．１
ｍＭ添加したものでは約９５係のふ化率を示した。
にブドウ糖を添加した媒液中に受精卵を浸漬して一７°
Ｃで冷却処理したところ、ブドウ糖を５．６ ｍ Ｍ添
加したものでは４０〜５７チのふ化率を示し、１１．１
ｍＭ添加したものでは約９５係のふ化率を示した。
なお、図中、実線で示した折線は、無機塩類水溶液中の
塩化ナトリウムの濃度が１５４ｍＭのものを示し、鎖線
で示しだ折線は同じく１７１ｍＭのものを示す。
塩化ナトリウムの濃度が１５４ｍＭのものを示し、鎖線
で示しだ折線は同じく１７１ｍＭのものを示す。
まだ、−１０℃以下の冷却処理ではふ化したものは見ら
れなかった。
れなかった。
次に、抗凍結剤の補助剤として分生血清を添加した場合
のふ化率は、第３図に示すとおりである３すなわち、Ｄ
ＭＳＯを２．１Ｍ含む無機塩類水溶液に更に分生血清を
添加した媒液中に受精卵を浸漬して一７℃で冷却処理し
たところ、分生血清な容積比で１０〜２０％添加したも
のでは約９５チのふ化率を示した。
のふ化率は、第３図に示すとおりである３すなわち、Ｄ
ＭＳＯを２．１Ｍ含む無機塩類水溶液に更に分生血清を
添加した媒液中に受精卵を浸漬して一７℃で冷却処理し
たところ、分生血清な容積比で１０〜２０％添加したも
のでは約９５チのふ化率を示した。
なお、図中、実線で示した折線は、無機塩類水溶液中の
塩化すｋ ｊＪウムの濃″度が１５４ｍＭのものを示し
、鎖線で示した折線は同じく１７１ｍＭのものを示す。
塩化すｋ ｊＪウムの濃″度が１５４ｍＭのものを示し
、鎖線で示した折線は同じく１７１ｍＭのものを示す。
また、このように分生血清を添加した場合は、第４図に
示すように、分生血清濃度ＩＯ％のとき一１０℃の冷却
処理で約１７チのふ化率が、−１２℃の冷却処理におい
ても約１４チのふ化率が見られた。
示すように、分生血清濃度ＩＯ％のとき一１０℃の冷却
処理で約１７チのふ化率が、−１２℃の冷却処理におい
ても約１４チのふ化率が見られた。
このことから、・分生血清は、受精卵の低温保存の抗凍
結剤の補助剤として上記ブドウ糖よりも優れていること
がわかる。
結剤の補助剤として上記ブドウ糖よりも優れていること
がわかる。
上記受精卵の冷却処、理は、該受精卵を浸漬した媒液な
試験管等に入れ、これを−２０℃程度の冷却槽に入れる
ことにより行う。
試験管等に入れ、これを−２０℃程度の冷却槽に入れる
ことにより行う。
−このようにして、−７℃〜−２０℃の所定の温度に冷
却されたらその冷却状態を保持して所望の期間だけ保存
する。
却されたらその冷却状態を保持して所望の期間だけ保存
する。
その後、卵をふ化きせたい時は、上記試験管を冷却槽か
ら取り出して常温にもどし、ふ化槽内に収容してふ化さ
せる 本発明は以上説明したように、魚類受精卵を浸漬する媒
液に抗凍結剤としてジメチルスルホキシドを添加し、更
にその凍結防止作用を高める補助剤としてブ）”Ｏ糖、
又は分生血清を添加したことにより、低温保存後の受精
卵のふ化率を１００係に近い高いものとすることができ
る。
ら取り出して常温にもどし、ふ化槽内に収容してふ化さ
せる 本発明は以上説明したように、魚類受精卵を浸漬する媒
液に抗凍結剤としてジメチルスルホキシドを添加し、更
にその凍結防止作用を高める補助剤としてブ）”Ｏ糖、
又は分生血清を添加したことにより、低温保存後の受精
卵のふ化率を１００係に近い高いものとすることができ
る。
従って、親魚から採卵した卵を無駄にすることなくふ化
させることができ、しかも輿望の時期においてふ化させ
ることができるので魚の産卵期に関係なく種苗を入手で
き、養殖池の有効利用、年間な通じての出、。
させることができ、しかも輿望の時期においてふ化させ
ることができるので魚の産卵期に関係なく種苗を入手で
き、養殖池の有効利用、年間な通じての出、。
荷、飼料の節約等、水産養殖において多くの利点を発揮
することができる。
することができる。
次に、実施例によって本発明を具体的に説明する。
実施例
実験に供した卵は、ニジマスの親魚から搾出して洗卵法
により人工受精し、実験に供するまで水温１２℃に保っ
たアドキンス式ふ化種に収容した。
により人工受精し、実験に供するまで水温１２℃に保っ
たアドキンス式ふ化種に収容した。
受精卵を浸漬する媒液は、３．２ ｍ Ｍの塩化カリウ
ムと、２．３ｍＭの塩化カルシウムと、１５４ｍ１ＶＩ
〜１８８ｍＭの塩化ナトリウムとを含む無機塩類水溶液
に、抗凍結剤として１．４〜２．１Ｍのジメチルスルホ
キシドを含み、更にその補助剤としてブドウ糖を５．６
ｍ Ｍ〜１１．１ｍＭ又は仔牛血清を容積比で１０％
〜２０％添加したものを用いた１上記ふ化槽において受
精後２４〜２８日経過した発眼卵３０個を、予め４．０
°Ｃ〜７．２℃に冷却しだ媒液２０ｍ１！が入った試験
管中に浸漬し、この試験管を一２０℃の冷却槽に入れた
。
ムと、２．３ｍＭの塩化カルシウムと、１５４ｍ１ＶＩ
〜１８８ｍＭの塩化ナトリウムとを含む無機塩類水溶液
に、抗凍結剤として１．４〜２．１Ｍのジメチルスルホ
キシドを含み、更にその補助剤としてブドウ糖を５．６
ｍ Ｍ〜１１．１ｍＭ又は仔牛血清を容積比で１０％
〜２０％添加したものを用いた１上記ふ化槽において受
精後２４〜２８日経過した発眼卵３０個を、予め４．０
°Ｃ〜７．２℃に冷却しだ媒液２０ｍ１！が入った試験
管中に浸漬し、この試験管を一２０℃の冷却槽に入れた
。
このときの冷却速度は、−５℃までは０．４〜０．９°
Ｃ／ｍ ｌ ｎであり、それ以下においては０．７〜８
．９°Ｃ／ｈであった。
Ｃ／ｍ ｌ ｎであり、それ以下においては０．７〜８
．９°Ｃ／ｈであった。
上記冷却速度で発眼卵を一７℃〜−２０℃の所定の温度
まで冷却した後、そのまま３時間恒温状態を保持した。
まで冷却した後、そのまま３時間恒温状態を保持した。
このような冷却処理の後、上記試験管を冷却槽から取り
出し、約１２℃の水に漬けて常温に戻し、発眼卵を媒液
ごとふ化盆に移し、水でよくすすいでＤＭＳＯを洗い流
してからふ化槽に収容した。
出し、約１２℃の水に漬けて常温に戻し、発眼卵を媒液
ごとふ化盆に移し、水でよくすすいでＤＭＳＯを洗い流
してからふ化槽に収容した。
冷却処理した後の卵の生存はふ化槽内でのふ化状況を観
察することにより調査した。
察することにより調査した。
その結果は、ＤＭＳＯの補助剤としてブドウ糖又は仔牛
血清を添加した場合は、第２，３図に示すように、−７
℃処理のとき最高で約９５％のふ化率を示した。
血清を添加した場合は、第２，３図に示すように、−７
℃処理のとき最高で約９５％のふ化率を示した。
第１図は一７℃処理における抗凍結剤としてのＤＭＳＯ
の最適濃度を示すグラフ、第２図は一７℃処理において
抗凍結剤の補助剤としてブドウ糖を添加したときのふ化
率を示すグラフ、第３図は一７℃処理において同じ５く
補助剤として仔牛血清を添加したときのふ化率を示すグ
ラフ、第４図は同じく仔牛血清を添加し冷却温度を一７
℃よりさらに下げたときのふ化率を示すグラフである。
の最適濃度を示すグラフ、第２図は一７℃処理において
抗凍結剤の補助剤としてブドウ糖を添加したときのふ化
率を示すグラフ、第３図は一７℃処理において同じ５く
補助剤として仔牛血清を添加したときのふ化率を示すグ
ラフ、第４図は同じく仔牛血清を添加し冷却温度を一７
℃よりさらに下げたときのふ化率を示すグラフである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 魚類受精卵を、無機塩類水溶液と受精卵の卵内凍結
を防止する抗凍結剤とこの抗凍結剤の凍結防止作用を高
める補助剤とからガる媒液の入った容器中に浸漬し、上
記容器ごと受精卵を０℃以下の所定の温度まで冷却し、
その冷却状態を保持して所望の期間保存することを特徴
とする魚類受精卵の低温保存方法。 ２ 上記媒液中の抗凍結剤は、ジメチノ１．スルホキシ
ドであることを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の
魚類受精卵の低温保存方法。 ３ 上記媒液中の補助剤は、ブドウ糖又は血清であるこ
とを特徴とする特許請求の範囲第２項記載の魚類受精卵
の低温保存方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56090951A JPS5819255B2 (ja) | 1981-06-15 | 1981-06-15 | 魚類受精卵の低温保存方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56090951A JPS5819255B2 (ja) | 1981-06-15 | 1981-06-15 | 魚類受精卵の低温保存方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS57206320A JPS57206320A (en) | 1982-12-17 |
| JPS5819255B2 true JPS5819255B2 (ja) | 1983-04-16 |
Family
ID=14012777
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP56090951A Expired JPS5819255B2 (ja) | 1981-06-15 | 1981-06-15 | 魚類受精卵の低温保存方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5819255B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002209469A (ja) * | 2001-01-22 | 2002-07-30 | Japan Sea-Farming Association | クルマエビの凍結保存法 |
| CN108165493A (zh) * | 2017-12-18 | 2018-06-15 | 梅庆波 | 一种防低温损伤型冻干保护剂的制备方法 |
-
1981
- 1981-06-15 JP JP56090951A patent/JPS5819255B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS57206320A (en) | 1982-12-17 |
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