JPS59116544A - 菊酸エステル類の鏡像異性体混合物の液体クロマトグラフイ−分析法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は一般式〔■〕 （式中、ｋは低級アルキル基またはハロゲン原子を表わ
し、Ａは置換されていてもよいアリール基、置換されて
いてもよいアラルキル基、置換されていてもよいシクロ
アルキル基または複素環を含むアルキル基を表わす。

米は不斉炭素を表わす。） で示される菊酸エステル類の鏡像体混合物を光学活性な
Ｎ−アシル化アミノ酸をグラフトした固定相を用いる液
体クロマトグラフィーにょシ分析することを特徴とする
分析法に関するものである。

菊酸エステル類はピレスロイド系殺虫剤として優れた効
果を示し、アレスリンを始め、７タルスリン、レスメト
リンなど多数の殺虫剤が開発されている。菊酸には（刊
−シス、←）−シス、（＋）−トランスおよびＨ−トラ
ンス型の４つの異性体が存在し、その種々のエステルの
生理活性はこれら異性体にょシ大きく異なり、一般に、
その殺虫効力は（ト）−トランス体のエステルが最大で
ある。それ故、これらのエステルの光学分割による高活
性化が種々試みられておシ、既に酸部分として光学活性
な菊酸を有する効力の優れたピレスロイド系殺虫剤が市
販されている。

したがって、菊酸エステル類の光学異性体の分析は品質
管理上、また効力評価上も必須であシ、正確な分析法の
開発が必要とされて来ている。

しかしながら、これまで、これらの化合物の光学異性体
をクロマトグラフィーにより直接分離した報告はわずか
に光学活性なメタクリル酸エステルのポリマーを固定相
として用いる液体クロマトグラフィーによシフエツトリ
ンの光学異性体を分離した例があるだけである。しかし
、この方法は固定相の分離能が小さく、しかも特定の化
合物しか適用できない上、使用上程々の制限があシ実用
的でない。それ故、現在のところ、菊酸エステル類の光
学異性体の分析はまず該エステル類をアルカリで加水分
解し、菊酸またはその誘導体を得、これに光学活性なア
ルコールやアミンを脱水縮合させ、ジアステレオマーと
して分析するか、あるいはこれらの酸にアミンを作用さ
せ酸アミドとして、光学活性な固定相を用いるガスクロ
マトグラフィーや液体クロマトグラフィーによシ分離、
分析する方法により行っており、光学純度の高い光学活
性な試薬を必要としたシ、操作が頻雑で長時間を要し、
しかも加水分解〜エステル化またはアミド化反応の際の
異性化など問題が多い方法である。

したがって、菊酸エステル類の光学異性体をそのまま直
接分離、分析することができればそのメリットは極めて
大なものがある。

このような状況の下に本発明者らは鋭意検討を重ねた結
果、光学活性なＮ−アシル化アミノ酸をグラフトした充
填剤を液体クロマトグラフィーの固定相として用いたと
き、菊酸エステル類の鏡像異性体混合物が直接、良好に
分離し、異性体の混合比の分析、即ち、光学純度の分析
を簡単かつ正確に行なうことができることを見出し、本
発明を完成するに至ったものである。

本発明の方法において用いる光学活性なＮ−アシル化ア
ミノ酸をグラフトした充填剤としては、たとえば一般式
［１） ロキシル基またはハロゲン原子を表わし、少なくとも１
つはアルコキシル基またはハロゲン原子である。Ｒ４は
低級アルキル基またはフェニル基を表わし、ｎは２から
４までの整数である。Ｘは−ＮＨＣＯ−基または−ＮＨ
，０ＣＯ−基を表わし、来は不斉炭素を表わす。）セ で示される光学活性なオルガノシランヘヒドロキシル基
をその表面に持つ無機担体にグラフトしたクロマトグラ
フ充填剤をあげることができ、その具体例としてＮ−（
３，５−ジニトロベンゾイル）−Ｄ−７エニルグリシン
あるいはＮ−（３，５−ジニトロベンゾイル）−Ｌ−バ
リンがω−アミノプロピルシラ゛ンを介してグラフトさ
れたシリカゲルなどをあげることができる。

該充填剤の調製に際しては　Ｐｉｒｋｌｅらの方法（Ｊ
　６Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ　、　、　１９２　、１４３
（１９８０）　、　Ｊ　、Ｏｒｇ。

Ｃｈｅｍ、　、　４８　、２９３５（１９８１）　、　
Ｊ　、Ａｍ、ＣｈｅｍＪｏｃ　、　。

」旦、　３９６４　、　（１９８１）　）　　を応用す
ることができ、たとえば光学活性なＮ−アシル化アミノ
酸とω−アミノアルキルシランとの反応によって得られ
るオルガノシランをシリカゲル等の無機担体にグラフト
する方法、ω−アミノアルキルシランをあらかじめシリ
カニゲル等の無機担体にグラフトし、これに光学活性な
Ｎ−アシル化アミノ酸を脱水縮合によ）結合させるか、
またはイオン結合させる方法等により調製することがで
きる。

本発明の方法において用いられる光学活性なＮ−アシル
化アミノ酸をグラフトした充填剤は常法に従ってクロマ
トグラフ用のカラムに充填され、液体クロマトグラフィ
ーの固定相として使用される。なお、該固定相はあらか
じめω−アミノアルキルシランをグラフトした充填剤を
常法に従ってクロマトグラフ用のカラムに充填したのち
、光学活性なＮ−アシル化アミノ酸の溶液を該カラムを
通して流すことによシ、イオン結合で光学活性なＮ−ア
シル化アミノ酸を固定化する方法によっても調製するこ
とができる。

本発明の固定相を用いる液体クロマトグラフィーにおい
て、適当な溶離条件、特に通常よ（用いられる順相分配
の条件を選ぶことにより、る。

以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、本
発明はこれらの実施例に限定されるものではない。

実施例Ｉ Ｄフェニルグリシン２０ｙおよび３，５−ジニトロ塩化
ベンゾイル３０　Ｆに脱水テトラヒドロ７ラン８５０　
ｒｎｌ、を加え、室温で１０日間攪拌した。不溶物をろ
別したのち、溶媒を減圧留去した。残留物に５多重炭酸
す１１ウム水溶液２００−を加え、ときどき振）まぜた
のち、−晩装置した。不溶物をろ別したのち、ろ液をエ
ーテル５０−で２回洗い、次いで１０多塩酸を滴加し、
ＰＨを５．０に調節した。

析出した結晶を酢酸エチル２００　ｒｎｌに溶かし、酢
酸エチル層右水５０−で３回洗ったのち、無水硫酸す）
ＩＪウムで脱水し、溶媒を減圧で留去した。残留物をテ
トラヒドロフラン−〇−へキサン混合溶媒（５：Ｉ）か
ら再結晶し、ｈ＋　−（３、５−ジニトロベンゾイル）
−り一フェニルグリシン１０グを得た。

融点＝２１５〜２１７℃ 〔α）Ｄ　　：　−８９，６°（ｃ＝Ｑ、９３％、テト
ラヒドロ７ラン） 元素分析　　　Ｃ（チ）　　　Ｈｆ刑　　Ｎ（係）実測
値−５１゜９７　３．１２　　１２゜２９計算値　５２
゜１８３゜２１　　１２．１７（Ｃ１δＨ１ＩＮ３０７
として） 次に、ω−アミノプロピルシリル化した高速液体クロマ
トグラフ用シリカゲル（粒径５μへ、孔径６０Ｘ）３Ｆ
に脱水テトラヒドロ７ラン５０−を加え、減圧で脱気し
たのち、Ｎ−（３，５−ジニトロベンゾイル）Ｄ−フェ
ニルグリシン３１およびＮ−エトキシカルボニル−２−
エトキシ−１，２−ジヒドロキノリン２１を加え、室温
で２時間攪拌した。

反応液をガラスフィルターでろ過し、得られたシリカゲ
ル担体をフィルター上でテトラヒドロフラン、メタノー
ル、アセトンそしてエーテルの順で洗い、減圧乾燥して
Ｎ　（３ｔ５−ジニトロベンゾイル）　　Ｄ　　７．ニ
ルグリシンがω−アミノプロピルシリル基を介してグラ
フトされた目的の充填剤を得た。

このものの元素分析値はＮ：２．４３％、Ｃ：９．０２
％であった。

このようにして得られた充填剤を内径４　ｙｎｍ。

長さ３００１のステンレス製カラムにスラリー充填し、
この充填したカラム２本を直列につなぎ、次の条件で（
５−ベンジル−２−フリル）メチル　（至）−シス／ト
ランス−クリサンプメート（レスメトリン）を分析し、
図−１のクロマトグラムを得た。

図−１中、ピーク番号（１）は（５−ベンジル−３−フ
リル）メチル　（ト）−シスークリサンテメート（ｆ＋
１−シス体と略す。以下、他の異性体についても同様に
略す。）、（２）は（−）−シス体、（３）は任）−ト
ランス体、そして（４）は←）−トランス体の各ピーク
である。（１）のピークが溶出するまでに要する時間は
約２６分、（１）と（２）のシス体のピークの分離係数
は１゜０５、ピークの面積比は４７　　：　５３　、　
＋３１と（４）のトランス体のピークの分離係数は１．
０４　、ピークの面積比は５０　　：　５０であった。

実施例２ ω−アミノプロピル化した高速液体クロマトグラフ用シ
リカゲル（粒径５μ筋、孔径６０Ｋ）３Ｆに脱水テトラ
ヒドロフラン５０−を加え、減圧下で脱気したのち実施
例１において得られたＮ−（３，５−ジニトロベンゾイ
ル）Ｄ−フェニルグリシン３ノを加え、室温で２時間攪
拌した。反応液をガラスフィルターでろ過し、得られた
シリカゲル担体をフィルター上でテトラヒドロフラン、
メタ／−ル、アセトンそしてエーテルの順で洗い、減圧
乾燥してＮ−（３，５−ジニトロベンゾイル）−Ｄ−フ
ェニルグリシンがω−アミノプロピルシリル基を介して
イオン結合でグラフトされた目的の充填剤を得た。

このものの元素分析値はＮ　：　２．２１％、Ｃ：８．
１６％であった。

このようにして得られた充填剤を内径４　ｍｍ。

長さ３０　ｃｔｎのステンレス製カラムにスラリー充填
し、次の条件で（ト）−３−アリル−２−メチル−４−
，１１ンー２−シクロペンテニル（ト）−トランスーク
リサジテメート（アレスリン）を分析し、図−２のクロ
マトグラムを得た。

図−（２）中、ピーク番号（１）は（＋−）−３−アリ
ル−２−メチル−４−オキソ−２−シクロペンテニル（
−１−１−トランスークリサンテメート（（−１−）−
（ト）体と略す。以下、他の異性体についても同様に略
す。）、（２）は（ハ）−臼体、（３）は（ハ）＝ｈ＋
体、そして、（４）は（−））−←）体の各ピークであ
る。

（１）のピークが溶出するまでに要する時間は約２９分
、（１，）と（２）の両ピークの分離係数は１゜０５、
面積比は５２　：　４８　、（３１と（４）の両ピーク
の分離係数は１゜０２、面積比は５０　：　５０であっ
た。

゛実施例３ 実施例１で得られたＮ−（３，５−ジニトロベンゾイル
）　−Ｄ−フェニルグリシンがω−アミノプロピルシリ
ル基を介してグラフトされた充填剤をスラリー充填した
内径←驕、長さ３０ｎのステンレス製カラム１本を用い
、次の条件でσ−ブロモーβ−ナフチル　（至）−シス
／トランス−クリサンプメートを分析し、り 図−３の暫ロマトグラムを得た。

図−３中、ピーク番号（１）はα−プロモーβ−ナフチ
ル　（＋１−シスークリサンテメート（（−１−１−シ
ス体と略す。以下、他の異性体についても同様に略す。

）、ｆ２）は←）−シス体、（３）は（ト）−トランス
体、そして、（４）はＨ−１ランス体の各ピークである
。

（１）のピークが溶出するまでに要する時間は約１４分
、（１）と（２）のシス体のピークの分離係数は１．１
８、面積比は５０　：　５０　、　＋３１と（４）のト
ランス体のピークの分離係数は１゜２２、面積比は５１
　　：、４９であった。

実施例４ 実施例１で得られたＮ−（３，５−ジニトロベンゾイル
）−Ｄ−フェニルグリシンがω−アミノプロピルシリル
基を介してグラフトされた充填剤をスラリー充填した内
径４　ｍｍ、長さ３０１のステンレス製カラム１本を用
い、次の条件で以下の化合物分析し、分離係数を求めた
。

結果を次表に示す。

【図面の簡単な説明】

図−１、図−２および図−３はそれぞれ実施例１．２お
よび３において得られたクロマトグラムであり、縦軸は
強度を横軸は保持時間を表わす。 図　−１ （３） ２０　　　　　　　　　３０　　　　　（ｍｉｎ）図−
２ （１） 図−３ （３）

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）　　一般式 （式中、ｋは低級アルキル基またはハロゲン原子を表わ
   し、Ａは置換されていてもよいアリール基、置換されて
   いてもよいアラルキル基、置換されていてもよいシクロ
   アルキル基または複素環を含むアルキル基を表わす。壷
   は不斉炭素を表わす。） で示される菊酸エステル類の鏡像体混合物を光学活性な
   Ｎ−アシル化アミノ酸をグラフトした固定相を用いる液
   体クロマトグラフィーによシ分析することを特徴とする
   分析法。
2. （２）光学活性なＮ−アシル化アミノ酸をグラフトした
   固定相が、一般式 （式中、ｋ工、Ｒ２およびＲ３は同一また番ま相異なシ
   、アルキル基、アルコキシル ヒドロキシル基または）１０ゲン原子を表わし、少なく
   とも１つはアルコキシル基またはハロゲン原子である。 Ｒ４　　は低級アルキル基またはフェニル基を表わし、
   ｎは２から４までの整数である。Ｘは一ＮＨＣＯ−基ま
   たは一Ｎ）Ｉ，−ＯＣＯ−基を表わし、頚は不ロキシル
   基をその表面に持つ無機担体にグラフトしたクロマトグ
   ラフ充填剤である特許請求の範囲第１項に記載の分析法
   。