JPS599559B2 - 蛋白質単離物の製造方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は蛋白源からの蛋白質の単離に関する。

本発明の発明者等によるカナダ特許１０２８５５２（お
よび、その対応米国特許４１６９０９０）には、蛋白単
離物の製造方法が記述されている。

この製造方法は蛋白源材料を食品級塩水溶液でイオン強
度約０．２以上の塩濃度、約１５ないし約３５℃の温度
および約５．５ないし約６．３のＰＨを持つ溶液に入れ
、得られた蛋白質溶液約０．１以下のイオン濃度に稀釈
して水相に蛋白ミセルを形成せしめ、この蛋白ミセルを
蛋白単離物の無定形塊として集めることから成る。この
公知の方法は広範な種類の蛋白源材料から、塩溶法を用
い、普通に得られるよりも相当に高い収率で蛋白質を単
離するのに応用できる。従来技術によつて製造された蛋
白質単離物は実質上未変性であり、かつ原材料またはそ
の等電点沈澱物が示さない官能価を持つている。原材料
からの蛋白質抽出は、蛋白質の溶解を行うために０．２
以上のイオン強度を持つ塩溶液の使用を必要とし、一般
に０．８以下のイオン強度を用いる。

高いイオン強度値での蛋白質の単離については高い稀釈
度を要する。普通、抽出のための塩としては塩化ナトリ
ウムを使用するが、他のどのような好都合な食用級塩を
使用することもできる。従来技術の方法では５．５ない
し６．３のＰＨ範囲で選択されている。何故ならばミセ
ル形の単離物は６．３以上のＰＨ値ではどのような有意
の量でも得られず、かつ高ＰＨでは蛋白質収率が著しく
低下する。一方、ミセル形の単離物は５．５以下、約５
．０以上のＰＨ値においても得られるが、５．５以下の
ＰＨでは許容できない程度にまでリン汚染が生じる。本
発明によれば、従来法によつても得られる蛋白質単離物
の収率が、抽出段階において得られる蛋白質溶液の蛋白
質濃度を、その溶液の塩濃度を稀釈工程前と同じに保ち
ながら、上昇させることにより、増大させる。

この濃度工程により、この蛋白質単離方法はパラメータ
ーのいくつかの広い範囲にわたつて実施できる。したが
つて、本発明は蛋白原料から蛋白質単離物を調製する方
法を与える。

この方法は（ａ）約０．２以上のイオン強度、約５ない
し６．８のＰＨを持つ約１５ないし約３０℃の温度の食
用級塩水溶液により蛋白質原料を抽出してこの原料中の
蛋白物質を溶解して蛋白溶液を作り、（ｂ）イオン強度
を実質上一定に保ちながら前記蛋白質溶液の蛋白濃度を
増加させ、（ｃ）濃縮された蛋白質溶液を約０．２以下
のイオン強度に稀釈して水相中に蛋白質ミセルを形成さ
せ、かつ（ｄ）無定形、粘着性、ゲル化、グルテン状、
蛋白質ミセル状塊として蛋白質ミセルを沈澱させること
から成る。このように形成された蛋白質単離物を、残存
水相からの分離後、粉末形に乾燥することもできる。本
発明の方法の最初の工程は、原料中の蛋白質の可溶化を
含む。

蛋白質原材料は広く変えることができ、植物性蛋白質、
例えば澱粉性穀類、例えば小麦、とうもろこし、オート
麦、ライ麦、大麦、トリチケール（Ｔｒｉｔｉｃａｌｅ
）；澱粉性レブミン例えば、フイールドピ一、チツクピ
一、フアバビーンズ、ネイビービーンズ、およびピント
ビーンズ：採油用種子、例えばひまわり種子、落花生、
菜種および大豆；動物性蛋白質例えば乳蛋白；および微
生物蛋白質が含まれている。蛋白質原料は普通、蛋白質
抽出前にどのような慣用方法によつても・粉砕する。

粉砕した材料の平均粒径は広く変えることができるが、
普通約１０ないし約８００メツシユ、好ましくは約２０
０メツシユ以下である。この粉砕は、慣用技術によりあ
る種の非蛋白質材料の物理的除去を伴うこともできる。
蛋白質溶解には食品級塩溶液を用いることができる。

この食品級塩は普通塩化ナトリウムであるが、塩化カリ
ウムまたは塩化カルシウムのような他の塩を用いること
もできる。処理される蛋白質の有意量を溶解するために
、食品級塩は約２．０以上のイオン強度を持つ。塩溶液
のイオン強度を増すにしたがつて、原料中の蛋白質の溶
解度は最高値に達する迄、最初は増加する。その後にお
けるイオン強度の増大は蛋白質の溶解を増加しない。最
高蛋白質溶解を起す食品級塩のイオン強度は具体的な塩
および選択される蛋白原料に依存して変わる。高いイオ
ン強度に対して要求される大きい稀釈度の観点から、一
般に約０．８以下、より好しくは約０．３ないし約０．
６のイオン強度値を用いることが好ましい。

しかしながら、５．０以下のイオン強度が用いられてき
た。蛋白質の塩溶は約１５ないし３０℃で、好しくは攪
拌によつて溶解時間を普通約１０ないし約６０分間に短
縮して行われる。

蛋白質原料から最大量の蛋白質を実質上抽出するように
溶解を実施することが好ましい。約１５℃の下限温度は
、この温度以下では蛋白質溶解が実質的でない程遅いと
いう理由で選択された。

一般約３５℃の上限温度は、この温度以上では微生物の
生育が許容できない程速かである、という理由で選ばれ
ている。食品級塩水溶液が約５ないし約６．８のＰＨを
持ち、以下に詳細に述べるミセル経路によつて蛋白質単
離物の生成を可能にする。

蛋白質単離物の最高収率のための至適ＰＨは選択される
蛋白質原料に依つて変わる。ＰＨ範囲の上限および下限
またはその付近においては、蛋白質単離物の生成はミセ
ル経路では極く一部しか生成せず、かつこのＰＨ範囲の
他のどこよりも収率が低い。

この理由により、約５．３ないし６．２のＰＨ値が好し
い。食品級塩溶液のＰＨは、必要に応じて、好都合な食
品級酸、通常塩酸、または食品級アルカリ、通常水酸化
ナトリウムを使用して抽出工程に用いられる約５ないし
約６．８のどのような所望値にも調節できる。

溶解工程中の食品級塩溶液中の蛋白原料濃度は広く変え
ることができる。

典型的な濃度は約５ないし約１５％（Ｗ／Ｖ）である。
蛋白質抽出操作が行われたならば、蛋白質溶液を固相抽
出済蛋白質から分離する。

次いで一般に約１０ないし約１００７／Ｆ．、好しくは
約３０ないし約７０７／ｌの蛋白濃度を持つ蛋白溶液を
、イオ７強度を実質上一定に維持しながら濃縮して蛋白
濃度を増加させる。濃縮工程は、限外沢過のようなどの
ような好都合な選択性膜技術によつても実施できる。

この濃縮工程は、この方法によつて得ることのできる蛋
白単離物の収率の増加に有利な効果を持ち、これにより
蛋白質単離工程全体の効率を増加させる。蛋白質溶液の
濃縮程度は「濃縮要素」または、更に適当には「容積減
少要素」と呼ぶことができる。濃縮前の溶液の容量と濃
縮された溶液の容積の比として表わされる容量減少要素
（したがつて蛋白濃度）を１．０から増加していくにし
たがつて、得られる収率は最高値に達する迄増加する。

得られる最高収率に達したならば、濃縮溶液の容積の減
少は、蛋白質単離工程中での後続の稀釈に要する液量た
関してのみ有益である。最高の収率に達した時点での容
積減少要素は蛋白原料の種類および蛋白溶液のＰＨに依
存する。

３．０ないし４，０の容積減少要素を用いることが好し
い。

最高の収率がこれらの値を用いることによつてしばしば
得られるからである。普通１．１以上の容積減少要素が
用いられる。容積減少要素が普通約５．０ないし６．０
のように非常に高くなるにつれて、蛋白質溶液の粘度は
極めて高くなる。このことは後続の処理を困難にするこ
とがあり、したがつて高い値を用いることぱ禁止される
。濃縮は好都合などのような温度、典型的には約２０な
いし５０℃で、かつ望ましい程度の濃縮を行うための時
間で実施できる。

用いられる温度および他の条件は濃縮を行うのに使用さ
れる膜装置にある程度依存する。この工程における蛋白
質溶液の濃縮は全工程にわたる収率を増加させるばかり
でなく、乾燥後の蛋白質単離物の塩濃度を減じる。

この単離物の塩濃度を制御する能力は塩濃度の変動が特
性に影響を及ぼす場合における単離物の応用に重要であ
る。単離物の結合容量は塩濃度の増加にしたがつて減少
する。上に述べた理由により高い値は好しくないが、濃
縮工程の存在で、抽出工程のＰＨの上限を約６．８ない
し約６．３に増加させることができる。

良く知られているように、限外沢過および他の類似の選
択性膜技術によれば低分子量の物質が通過し、これに対
して高分子量物質は通過を防げられる。低分子量物質は
食品級塩のイオン種を含むばかりでなく、原料から抽出
された低分子量物質、例えば炭水化物を包含する。膜の
分子量遮断は普通溶液中での実質上全ての蛋白質の保持
を確実にするように選択される。濃縮工程中での抽出溶
液からの低分子量物質の除去により、蛋白質濃度は沈澱
することなく、抽出工程中に得られる最高濃度を越えて
増加される。

前述のように、５．０ないし５．５のＰＨ値を用いる従
来技術における困難性の１つは主としてフィチッ酸の形
態での蛋白質単離物のリン含量にある。単離物中のフィ
チッ酸の量が増加するにしたがつて、単離物の消化性へ
の悪影響が増大する。したがつて、単離物のリン含量を
最大可能範囲で減じることが好しい。蛋白溶液の濃度は
最終的に得られる蛋白質単離物のリン含量にはどのよう
な範囲にも影響を与えるものではないが、濃縮工程を少
くとも１つの洗浄工程と組合せた場合、約５ないし５．
５のＰＨ範囲で得られる単離物のリン含量は著しく減少
し、前記の先行特許に規定されるよりも広いＰＨ範囲に
わたつてこの方法を用いることができる。

本発明のこの態様によつて行われる［洗浄」工程は、先
ず蛋白溶液を濃縮し、蛋白質を分散状態に保つたまま濃
縮蛋白溶液を食品級塩溶液で稀釈し、次いでイオン強度
を実質上一定に保ちながら稀釈蛋白溶液を再濃縮して蛋
白濃度を増加することによつて行うことができる。稀釈
および再濃縮操作は、もし最初の洗浄工程においてリン
濃度を最低にすることができない場合には、それが達成
される迄で繰返すことができる。蛋白質を分散状態に保
ちながら行う濃縮蛋白溶液の稀釈は普通濃縮工程前と実
質上同一の蛋白濃度を与えるように行われる。

これは普通濃縮工程で除去されるのと同量の塩溶液でか
つ濃縮溶液と同じイオン強度を持つ溶液を使用すること
によつて行われ、このためにイオン強度を実質上変える
ことなく稀釈が行われる。稀釈蛋白溶液の再濃縮は、イ
オン強度を実質上一定に保ちながら、普通最初の濃縮工
程と同じ容積減少要素で行われる。

しかしながら、必要に応じて異なる容積減少要素を用い
ることもできる。「洗浄」操作は、食品級塩溶液を抽出
工程で得られる蛋白溶液に連続的に供給し、しかもその
間同一速度で塩溶液を膜技術によつて除去することによ
る濃縮を行うという別法によつても実施できる。この操
作において、蛋白質溶液の容積およびそのイオン強度は
、洗浄によつて所望程度にまでリンが除去される迄、食
品級塩溶液の添加中同一に保たれる。

次いで、新鮮な食品級塩溶液の添加を停止し、洗浄した
蛋白溶液を更に処理するために所望程度に濃縮した。洗
浄および濃縮工程の組合せにより単離物中のリン濃度を
５．０ないし５．５のＰＨ範囲にわたつて有意に減少さ
せ、蛋白質抽出のためにこれらのＰＨ値の使用を現実化
する。

全体の蛋白質単離方法により初期の蛋白原材料のリン含
量を減少させる。

これは増加が起り得る等電点蛋白沈澱法の場合には見ら
れない。リン濃度は「洗浄」工程無しに５．０ないし５
．５のＰＨ範囲において原料中に含まれるものの約２０
ないし３０重量％に減少する。

しかしながら、５．５以上のＰＨでは約４０ないし５０
％の減少しか得られない。少くとも１回以上の洗浄工程
により、普通約０．８重量％以下、好しくは約０．５重
量％以下の値までリン含量を減じることができる。濃縮
工程または濃縮一洗浄工程（いずれの採用された工程）
によつて得られ、最初の蛋白質濃度および使用された容
積減少要素に依存するが約４０ないし約２００ｔ／ｌの
蛋白濃度を持つ濃縮蛋白溶液は、１般にイオン強度の減
少を達成するのに要する量の水にこの濃縮蛋白溶液を入
れることにより約０．２以下のイオン強度に稀釈される
。濃縮蛋白溶液が供給される水は約２５℃以下、好しく
は約５ないし約１５℃の温度である。この水準の温度に
おいて、蛋白単離物が高い収率で得られるからである。
イオン強度の減少によりミセル形の独立蛋白質小滴から
成るくもり状塊が形成される。

蛋白質ミセルは沈澱して合体した高濃度無定形、粘稠グ
ルテン状蛋白単離物塊を生成する。沈澱は、例えば遠心
によつて誘導できる。このような誘導沈澱によれば蛋白
単離物塊の液体含量が低下し、これによつて水分含量を
一般に約７０ないし９５重量％から約５０ないし約８０
重量％に減少させる。この方法により単離物の水分含量
を減じることは、単離物中に収容されている塩含量、ひ
いては乾燥単離物の塩含量を減じることになる。前述の
ように、単離物の塩濃度は、ある種の用途、特に食品成
分バインダーとしての用途において影響を与える。

蛋白溶液の濃縮と組合せに遠心により単離物中の塩濃度
は最低になり、かつ単離物の結合能力は最大になる。濃
縮蛋白溶液を稀釈して約０．２以下にするイオン強度は
ミセル化の効率および得られる単離物の収率に影響を及
ぼす。

この理由により、イオン強度は一般に約０．１５以下、
好しくは約０．１以下に減じる。約０．１ないし約０．
２のイオン強度範囲において良好な蛋白質単離物収率を
与える本発明の能力は、妥当な収率を得るためにイオン
強度を０．１以下に減少しなければならない前記の従来
技術と著しく対称する。

稀釈は約０．０６ないし約０．１２の範囲のイオン強度
にすることが好しい。

最適収率がこの範囲で得られ、かつ約０．０６以下のイ
オン強度についてはそれ以上の過剰な容積は追加の利点
が認められず不必要だからである。稀釈蛋白溶液に対す
るイオン強度の下限は方法実施可能性の配慮よりも現実
的な経済上の配慮によつて指示される。「蛋白ミセル塊
（ＰＭＭ）」と称される無定形、粘稠性、ゲル化、グル
テン様蛋白塊の形態である沈澱単離物は水相から分離さ
れる。

ＰＭＭは湿潤状態で使用でき、または噴霧乾燥、凍結乾
燥または真空ドラム乾燥のようなどのような慣用技術に
よつても乾燥形態に乾燥できる。乾燥ＰＭＭは高い蛋白
含量、通常約９５％以上（ケールダール法によりＮＸ６
．２５で計算した）の蛋白含量を持ち、示差走査熱量計
で測定により実質上未変性である。本発明の方法は従来
法における緩和な処理という利点を持ち、高官能価の未
変性蛋白単離物を得ることができるばかりでなく、蛋白
単離物の収率を増加し、かつリン水率を十分に制御され
るようにして使用可能なＰＨ範囲を拡大できるという利
点がある。収率は、前述の本発明方法の各工程について
の説明に基き適当な条件を選択することにより、どのよ
うな原料についても最適にできる。ＰＭＭは加工食品の
蛋白質強化、油の乳化、ベーキング品の体積形成剤、気
体を取込む製品の起泡剤のような蛋白質単離物のどのよ
うな慣用の用途にも使用できる。しかしながら、ＰＭＭ
は原料蛋白質およびその等電点沈澱物には見られない官
能価を持つている。

ＰＭＭは人造肉に有用な蛋白繊維に形成し、卵白代用品
またはバインダーとして卵白を使用している食品におけ
る増量剤、または小麦グルテン代用品または小麦グルテ
ン製品における増量剤として使用できる。実施例 １ この実施例は本発明の方法および塩濃度に関する容量減
少要素の変化による効果を説明するものである。

フイールドピ一の蛋白濃縮物（約５０重量％蛋白質）を
、０．４モルの塩化ナトリウム（１０％Ｗ／ＶＱ水溶液
、２５℃）と混合した。

混合物を約６．０のＰＨで約２５分間攪拌した。水性蛋
白抽出物を未溶解固体物質から分離したところ、約４０
ｍｇ／ｍｌの蛋白濃度を持つていた。次いで抽出物を２
個のＲＯＭＩＣＯＮタイプＸＭ５Ｏカートリツジを用い
る限外沢過により、約４５℃で約４０分間の処理時間に
わたつて濃縮を行つた。

ＲＯＭＩＣＮ限外沢過カートリツジはロームアンドハー
ス社によつて製造されており、「５０」は分子量５００
００の遮断を意味する。３．０ないし５．０の範囲での
種々の容積減少要素（すなわち、初期容積対濃縮容積）
の濃縮液を得、これらの濃縮液は約６．０ないし６．３
のＰＨを持つていた。

濃縮液を約８℃の冷水にて１：５（すなわち、１部の濃
縮液に対して５部の水）の比率で稀釈し、それによつて
イオン強度を約０．０７にした。

稀釈直後、蛋白単離物の白濁は稀釈系に形成された蛋白
ミセルの形として観察された。蛋白ミセルは容器底部に
極めて粘稠な無定形ゲル状沈澱として沈澱した。上澄液
から回収された湿潤ＰＭＭは噴霧乾燥されて乾燥粉末と
し、これを塩、水分および蛋白質について分析した。

約３５ないし４０％の全蛋白収率を得た。

この収率は試験した容積減少要素範囲全体にわたるもの
であり、濃縮工程を省略した以外は同じ方法についての
約２０％の収率と対比される。下記の表１には、濃縮工
程を省略した等しい方法によつて形成した乾燥ＰＭＭと
比較することにより、乾燥ＰＭＭについての蛋白質およ
び塩分析結果を明記した。

上記表１の結果は、約３．５ないし５の容積減少要素を
用いた場合、ＰＭＭの純度（蛋白含量について見られる
）は増加し、かつ塩化ナトリウム含量が減少することを
示している実施例 ２ 本実施例は蛋白単離物中の塩濃度に関する遠心の効果を
説明するものゼある。

実施例１の方法によつて生成され、かつ体積減少要素５
で濃縮した蛋白溶液から稀釈系において白濁蛋白ミセル
を生成せしめた後、稀釈系を５０００Ｘｇで１０分間遠
心して容器の底に高度に粘稠な無定形ゲル化沈澱物を生
成させた。

上澄液および湿潤ＰＭＭを分離し、湿潤ＰＭＭを噴霧乾
燥し、塩および蛋白質を分析した。下記の表２は、遠心
工程を省略した以外は等しい方法によつて形成した乾燥
ＰＭＭサンプルについて比較した乾燥ＰＭＭについての
分析結果を示す。

上記表２の結果は、遠心工程を用いることにより塩濃度
の有意な減少が見られた。

実施例 ３ 本実施例は全工程収率に及ぼす抽出ＰＨの効果を説明す
るものである。

一連の実験は一般的に実施例１の方法に従つて実施され
、蛋白質単離物の収率は各事例において測定された。

実験の１つのグループでは、フアパビーン濃縮液を０．
３５Ｍ塩化ナトリウム水溶液でＰＨを４．６ないし７．
０に変え、３５℃、４５分間抽出した。

蛋白溶液を限外沢過に付して３．５の体積減少要素を与
えた後、濃縮蛋白溶液を１ないし２．５（イオン強度０
．１）に稀釈して濁り状蛋白粒子を生成した。この濁り
状物中の蛋白質単離物の形態は顕微鏡で観察した。蛋白
質単離物を遠心によつて沈澱し、上澄液から分離し、粉
末に噴霧乾燥した。実験の別グループでは、限外沢過を
省略する以外は第一のグループと同じ方法を繰返した。
得られた結果を下記表３に示す。上記表３の結果は広い
ＰＨ範囲にわたつて限外沢過を用いることにより改善さ
れた収率が得られ、かつ限定されたＰＨ範囲について蛋
白質ミセル塊が得られる、ことを示している。

実施例 ４ フアバビーンに代えてフイールドビーンを用いることに
より実施例３の方法を繰返した。

収率の測定４．５ないし７．０ｆ）ＰＨ範囲においての
み単発的に行つた。結果を下記表４に示す。実施例 ５ この実施例は、単離物のリン含量に及ぼす濃縮効果およ
び濃縮洗浄効果を説明するものである。

抽出工程において異なるＰＨ値を用いる以外は実施例３
の方法を繰返した。１つの実験グループでは、濃縮蛋白
溶液を０．３５Ｍ塩化ナトリウム溶液で稀釈し、再度限
外沢過して体積減少要素３．５で稀釈溶液を濃縮した。

第２のグループの実験では、これらの工程は省略された
。各場合において、乾燥単離物中のリン濃度を測定し、
０．８２の出発リンを含有する出発蛋白濃縮液と比較し
た。結果を下記の表５に示す。表５の結果は、限外沢過
だけではリン含量にほとんど影響を与えないが、限外沢
過と洗浄との組合せではＰＨ５．４以下において有意に
改善されたリン含量の減少が生じることを示す。

実施例 ６ この実施例は収率に及ぼす体積減少要素の影響を説明す
る。

フイールドピ一について、ＰＨ５．Ｏおよび５．７、種
々の体積減少要素で実施例３の方法を繰返した。

稀釈工程の収率を各ケースについて測定した。下記表６
に結果を示す。上記表６の結果は、体積減少要素の増加
は最高収率迄、稀釈工程での収率の増加をもたらし、そ
の後の体積減少要素の増加は有意な収率の増加をもたら
すことがないことを示している。

実施例 ７ この実施例は稀釈度の変化による稀釈工程の収率の影響
を説明する。

種々のＰＨに代えて６．０のＰＨを用＼・ることを除き
、ここに概説した２つの同じ実験グループを用いること
により実施例３の方法を繰返した。

蛋白溶液は種々の最終イオン強度値に稀釈した。蛋白質
単離物の稀釈収率は各ケース毎に測定した。結果を下記
の表７に示す。

上記表７の結果から解るように、限外▲過を用いる場合
、稀釈工程からの収率は０．２のイオン強度において非
常に高く（４０％のオーダー）、かつ稀釈程度の増加に
伴い増加する。

限外▲過を行わない場合、０．１およびそれ以上のイオ
ン強度において稀釈収率は低かつた。実施例 ８ この実施例は工程収率に対する塩溶液のイオン強度の影
響を説明するものである。

蛋白質抽出工程において使用される塩溶液について６．
０ｆ）ＰＨおよび種々のイオン強度を用いることにより
実施例３の方法を繰返した。

方法を簡単にするために、限外沢過は行わなかつた。収
率を測定し、下記の表８に示す。ノ 上記表８の結果は、抽出溶液のイオン強度の増加に伴い
、溶解蛋白量は最初増大し、０．３ないし０．４の範囲
で最高に達し、試験範囲全体にわたつて実質上一定に保
たれること、を示している。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ （ａ）約０．２以上のイオン強度および約５ないし
   ６．８のｐＨ値を持ち、約１５ないし約３５℃の温度の
   食品級塩水溶液により蛋白原料を抽出して、この蛋白原
   料中の蛋白質を溶解して蛋白質溶液を作り；（ｂ）前記
   蛋白質溶液のイオン強度を実質上一定に保ちながら蛋白
   質溶液の蛋白濃度を上昇させ；（ｃ）濃縮蛋白質溶液を
   約０．２以下のイオン強度に迄稀釈して、水相中に少く
   とも部分的に蛋白質ミセルの形態にて独立した蛋白質粒
   子を形成し；（ｄ）前記蛋白質粒子を、少くとも部分的
   には無定形、粘稠性、ゲル化、グルテン様蛋白質ミセル
   塊の形態で沈澱させて、蛋白質単離物塊を形成する；各
   工程から成る蛋白質単離物の製造方法。 ２ 前記食品級塩水溶液が約０．２ないし約０．８のイ
   オン強度を持つことを特徴とする特許請求の範囲第１項
   記載の方法。 ３ 前記イオン強度が約０．３ないし０．６であること
   を特徴とする特許請求の範囲第２項記載の方法。 ４ 前記ｐＨ範囲が約５．８ないし約６．２であり、前
   記独立の蛋白質粒子が実質上完全に前記蛋白質ミセルの
   形態であり、かつ前記蛋白質単離物が前記蛋白質ミセル
   塊から本質上構成されていることを等徴とする特許請求
   の範囲第１項記載の方法。 ５ 前記抽出は、約５ないし約１５％（Ｗ／Ｖ）の蛋白
   原料濃度で約１０ないし約６０分間粒状蛋白原料につい
   て攪拌し、前記原料から実質上最大量の蛋白質を溶解し
   かつ約１０ないし１００ｇ／ｌの蛋白質を含有する蛋白
   質溶液を生成することを特徴とする特許請求の範囲第１
   または３項記載の方法。 ６ 前記蛋白濃度は、前記蛋白質溶液の容量と濃縮蛋白
   質溶液との比として規定される体積減少要素１．１以上
   に増加されることを特徴とする特許請求の範囲第１項記
   載の方法。 ７ 前記体積減少要素が約２．０ないし約６．０である
   ことを特徴とする特許請求の範囲第６項記載の方法。 ８ 前記濃縮蛋白質溶液を約０．０６ないし約０．１２
   のイオン強度に稀釈することを特徴とする特許請求の範
   囲第１、３または６項記載の方法。 ９ 前記稀釈工程は、前記濃縮蛋白質溶液を、イオン強
   度を０．２以下にするに十分な量の水に添加することに
   よつて行われることを特徴とする特許請求の範囲第１項
   記載の方法。 １０ 前記の水が約２５℃以下の温度を持つことを特徴
   とする特許請求の範囲第９項記載の方法。 １１ 前記の水が約５ないし約１５℃の温度であること
   を特徴とする特許請求の範囲第１０項記載の方法。 １２ 前記沈澱中に蛋白質粒子を遠心して沈澱工程を促
   進する特許請求の範囲第１、２、６または９項記載の方
   法。 １３ （ａ）約０．２ないし約０．８のイオン強度、約
   ５．３ないし約６．２のｐＨを持ち、１５ないし３５℃
   の塩化ナトリウム水溶液と共に、穀類、豆類および採油
   種子から成る群から選択される粒状蛋白原料を約１０な
   いし約６０分間攪拌することにより粒状蛋白原料を抽出
   して前記蛋白原料中の蛋白質を溶解して約１０ないし約
   １００ｇ／ｌの蛋白質を含有する蛋白質溶液を生成し；
   （ｂ）未溶解固体相から蛋白質溶液を分離し；（ｃ）分
   離した蛋白質溶液を膜技術により濃縮して、イオン強度
   を実質上一定に保ちながら蛋白濃度を高め；該濃縮は、
   蛋白質溶液と濃縮蛋白質溶液との比率によつて決定して
   約１．１ないし約６．０の体積減少要素で行われ；（ｄ
   ）濃縮蛋白質溶液を、約２５℃以下の温度、約０．０６
   ないし約０．１２の濃縮蛋白質溶液のイオン強度を減じ
   るに十分な量の水に加えて、水相中に独立した蛋白質ミ
   セルのくもり状物を形成させ；（ｅ）蛋白質ミセルを無
   定形粘稠ゲル状グルテン様蛋白質ミセル塊を沈澱させ；
   （ｆ）水相から蛋白質ミセル塊を分離する、各工程から
   成る特許請求の範囲第１項記載の方法。 １４ 前記抽出工程が、前記蛋白原料から最大可能量の
   蛋白質を溶解することによつて実施される特許請求の範
   囲第１３項記載の方法。 １５ 前記塩化ナトリウム水溶液が約０．３ないし約０
   ．４のイオン強度を持ち、前記抽出が約５ないし約１５
   ％（Ｗ／Ｖ）の固体濃度で行われることを特徴とする特
   許請求の範囲第１３項記載の方法。 １６ 前記体積減少要素が約２．０ないし約５．０であ
   ることを特徴とする特許請求の範囲第１３項記載の方法
   。 １７ 前記稀釈のための水は約５ないし１５℃の温度を
   持つことを特徴とする特許請求の範囲第１３項記載の方
   法。 １８ 前記塩化ナトリウム水溶液が約０．３ないし約０
   ．４のイオン強度を持ち、前記抽出は約５ないし約１５
   ％（Ｗ／Ｖ）の固体濃度であり、体積減少要素が約２．
   ０ないし約５．０であり、かつ前記の稀釈水は約５ない
   し約１５℃の温度であることを特徴とする特許請求の範
   囲第１３項記載の方法。 １９ 前記沈澱工程中に前記稀釈水を遠心して沈澱速度
   を高め、かつ前記蛋白質ミセル塊中に包含された水の濃
   度を減じる工程を含む特許請求の範囲第１３、１４、１
   ５、１６、１７または１８項記載の方法。 ２０ 更に、 （ｇ）前記分離蛋白質ミセル塊を乾燥して粉末蛋白質単
   離物を生成することを特徴とする特許請求の範囲第１９
   項記載の方法。 ２１ （ａ）約０．２以上のイオン強度、約５ないし約
   ５．５のｐＨを持ちかつ約１５ないし約３５℃の温度で
   ある食品級塩水溶液により蛋白原料を抽出して蛋白原料
   中の蛋白質を溶解して蛋白質溶液を生成し；（ｂ）蛋白
   質溶液中のリン濃度を減少させ；（ｃ）前記蛋白質溶液
   中の蛋白濃度を、そのイオン強度を実質上一定に保ちな
   がら増大させ；（ｄ）濃縮された蛋白質溶液を約２．０
   以下のイオン強度になるように稀釈して、水相中に少く
   とも部分的に蛋白質ミセルの形態である独立した蛋白質
   粒子を形成させ；かつ（ｅ）蛋白質ミセルを沈澱させて
   少くとも部分的に無定形、粘稠性、ゲル状、グルテン様
   蛋白質ミセル塊である蛋白質単離物を生成させる；各工
   程から成る蛋白質単離物の製造方法。 ２２ 前記リン濃度を減少させ前記蛋白質溶液の蛋白濃
   度を増加させる前記の工程は、（ｆ）イオン強度を実質
   上一定に保ちながら、前記蛋白質溶液中の蛋白濃度を上
   昇させ；（ｇ）イオン強度を実質上一定に保ちならが、
   濃縮蛋白質溶液を元の蛋白質溶液の蛋白濃度にまで稀釈
   し；かつ（ｈ）イオン強度を実質上一定に保ちながら前
   記稀釈された溶液の蛋白濃度を増加する；各工程によつ
   て行われることを特徴とする特許請求の範囲第２１項記
   載の方法。 ２３ 前記リン濃度を減少させかつ蛋白質溶液の蛋白濃
   度を増加させる工程は、（ｉ）連続的に等量の液を除去
   しかつ前記溶解された蛋白質中のリン含量を減じるのに
   少くとも十分な時間蛋白質溶液中の蛋白濃度およびイオ
   ン強度を実質上一定に保ちながら、前記蛋白質溶液に食
   品級塩水溶液を連結的に添加し、その後（ｊ）そのよう
   に処理した蛋白質溶液を、イオン強度を実質上一定に保
   ちながら濃縮してその蛋白濃度を増加させることを特徴
   とする特許請求の範囲第２１項記載の方法。 ２４ （ｋ）前記沈澱蛋白質ミセルを上澄液と分離し；
   かつ（ｌ）分離した蛋白質ミセル塊を粉末に乾燥する；
   工程を更に含む、特許請求の範囲第２１、２２または２
   ３項記載の方法。