JPS6035112B2 - 新抗生物質ｓｆ−１１３０−ｘ↓２物質、その製造方及び免疫賦活剤 - Google Patents

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【発明の詳細な説明】 本発明は、ストレプトミセス属のうちから選択された微
生物の培養物から単離された新抗生物質ＳＦ−１１３０
−×２物質、及びそれらの製造法及び免疫賦宿剤として
用いる用途に関するものである。

本発明者らは、ストレプトミセス属に属する微生物の培
養液中にグラム陰性菌に対して、発育阻止作用を示す抗
生物質が生産されることを見し、出し、その有効物質を
単離し、ＳＦ−１１３０一×２物質と命名した。さらに
、本物質は更に担ガン又は制ガン剤投与によって惹起さ
れる免疫の低下を抑制する作用を有することを発見して
、本発明を完成させた。

すなわち、第１の本発明においては、次の理化学的性状
を示す、すなわち、元素分析値：炭素４３．８４％、水
素６．４１％、窒素１．０８％、酸素４９．６７％（差
）：比旋光度＋１５５ｏ（水）であり、紫外部に吸収極
大を有さず、添附図面の第１図に示した赤外線吸収スペ
クトル、第２図に示した水素核磁気共鳴吸収スペクトル
を有し、水・ジメチルスルホキシ日こ易溶、アルコール
に難溶、アセトン、酢酸エチル、クロロホルム、ベンゼ
ンに不溶であり、硝酸銀、レッドテトラゾリウム、アン
スロン、ニンヒドリン、グレーク、リーパックの各試験
に陽性であり、ペーパークロマトグラフィーにて酢酸エ
チル・ピリジン・水（１０：４：３）の展開溶媒を用い
るＲラフィノースが０．５７、ｎーブタノール・ピリジ
ン・酢酸・水（６：４：１：３）の展開溶媒を用いると
Ｒラフィノースが０．３３を示す白色弱塩基性粉末状で
あることを特徴とするＳＦ−１１３０一＆物質を要旨と
するものである。第２の本発明においては、ストレプト
ミセス属に属するＳＦ−１１３０−を物質生産菌を、好
気的条件下に培養して、培養液中にＳＦ−１１３０−×
２物質を蓄積させ、これを採取することを特徴とする新
抗生物質ＳＦ−１１３０−均物質の製造法を要旨とする
。また、第３の本発明は有効成分としてＳＦ−１１３０
一均物質を含むことを特徴とする免疫賦活剤を要旨とす
る。

本発明の方法で使用されるストレプトミセス属に属する
ＳＦ−１１３０一＆物質生産菌として、例えば本発明者
らによって土壌より分離したＳＦ−１１３功珠がある。

この菌は、工業技術院微生物工業技術研究所に昭和４３
王９月４日以来、微生物受託番号徴工研菌寄第６７６号
として寄託されている。ＳＦ−１１３の珠の菌学的性状
は次の通りである。１形態 基生菌糸は、多くの培地でよく伸長するが、気菌糸の形
成は一般に不良である。

気菌糸着生のみられるスターチ寒天、澱粉酵母エキス（
または澱粉、酵母エキス）寒天等ではよく伸長した基生
菌糸から短く密集した気菌糸が形成される。分岐は単純
分岐で車軸分岐はみられない。気菌糸の先端は大部分コ
ンパクトな閉鎖型のらせん糸からなるが、不完全ならせ
ん糸及び開放型らせん糸も観察される。菌核形成は認め
られない。電子顕微鏡による胞子の表面構造は平滑型で
ある。胞子は楕円ないし円筒型で０．６〜０．７×０．
９〜１．０ミクロンの大きさを有する。２ 各種培地上
の性状 −− １ ３ 生理的性状 ゼラチンの液化：陽性 澱粉の加水分解：陽一性 チロシナーゼの生成：陽一性 硫化水素の生成：陽性 クロモゲニック作用：陽・性 繊維素の分解：陰性 硝酸塩の還元：陰性 脱脂乳のべプトン化：陰性 脱脂乳の凝固：陰性 レフラー凝固血清の液化：陰性 以上のような生理的性状のほかに、ＳＦ−１１３０株は
寒天培地及び液体培地で粘買物を産生する性質を有して
おり、これは本菌株の大きな特徴である。

澱粉酵母エキス（または澱粉・酵母エキス）寒天・スタ
ーチ寒天、グルコース・アスパラギン寒天等の寒天塔地
では粘買物が培養１０日目頃から菌体の上にもり上って
生成されるのが観察される。また適当な炭素源（グルコ
ース、澱粉等）と窒素源（酵母エキス、大豆粉、小麦豚
芽等）を含む液体培地でＳＦ−１１３功朱を振濠培養す
ると培養液が次第に粘碗となり、粘買物の生成が認めら
れる。

４ 炭素源の利用性 １ 利用する：キシロース、グルコース、ガラクトース
、マルトース、サツカロース、ラクトース、ラフィノー
ス、デキストリン、澱粉、グリセロール、ィノシトール
、酢酸ソ−ダ、クエン酸ソーダ、マンノース２ 利用が
凝わしい：アラビノース、フラクトース、サリシン３
利用しない：ラムノース、イヌリン、ダル「・・ェット
、マンニツト、ソルビツト、コハク酸ソーダ、セルロー
ス以上より、ＳＦ−１１３の朱の菌学的特徴を要約する
と、‘１｝ 気菌糸の先端は主にらせん状（閉鎖型）で
胞子表面は平滑型である。

｛２） 気菌糸は灰褐色ないし灰色を呈するが、着生能
はきわめて貧弱である。

（３｝ 合成塔地での発育は褐色ないし灰褐色である。

‘４） 有機塔地ではクロモゲニックの性状となる。（
５）寒天培地及び液体塔地で粘買物を産生する。

上記の菌学的性状からＳＦ−１１３０株の近緑菌種とし
てストレプトミセス・フェオクロモゲス、ストレプトミ
セス・プルプレオクロモゲネス、及びストレプトミセス
・ノボリトェンシスがあげられるが、次に示すようにＳ
Ｆ−１１３０株はいずれの菌種とも一致しない。

即ち、ストレフ。

トミセス・フエオクロモゲネスは気菌糸を豊富に着生し
、シュークロース・硝酸塩寒天及びリンゴ酸カルシウム
寒天で褐色の可溶性色素を生成するのに対し、ＳＦ−１
１３０株は気菌糸着生能が貧弱で、上記塔地で可溶性色
素を生成しない点で両者は明瞭に区別される。ストレプ
トミセス・プルプレオクロモゲスは馬鈴薯の発育が燈色
〜燈赤色で硫化水素を生成せず、脱脂乳を凝固するのに
対してＳＦ−１１３０株は馬鈴薯片での発育が褐色で、
硫化水素を生成し、脱脂乳の凝固がみられない等の明瞭
な相違点を有している。

またストレプトミセス・ノボリトエンシスはらせん糸を
形成せず、スターチ寒天で緑色の可溶性色素を生成する
（文献では緑色可溶性色素の生成は言己戦されていない
が、タイプ株では顕著に認められる）。

一方、ＳＦ−１１３の粥まらせん糸を形成し、スターチ
寒天では可溶性色素を生成しない。さらに両者はマンニ
ット、サッカロースの利用性においても相違しており、
ＳＦ−１１３の粉まストレプトミセス・ノボリトェンシ
スから区別される。

さらに、ＳＦ−１１３０株は粘着物を産生するという特
異的な性質を有するが、上記三繭種を含めてストレプト
ミセス属の菌種で粘質物を産生するという報告はなく、
この点でもＳＦ−１１３０株は既知菌種中に一致するも
のがない。

従って、本発明者らはＳＦ−１１３０株を分離した当時
、この菌株をストレプトミセス属の新菌種と考え、スト
レプトミセス・ミキソゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓｍ磯ｏｇｅｎｅｓＳＰ．ｎｏｖ．）と命名した。

ＳＦ−１１３の舵ま他のストレプトミセス属の繭種の場
合にみられるように、その性状が変化しやすく、例えば
紫外線、エックス線、高周波、放射線、薬品等の人工的
変異手段で変異しうるものであり、このような変異株を
含めて、ストレプトミセス属に属する菌株であってＳＦ
−１１３０一−物質を生産する生産能を有するものは、
すべて本発明の方法に使用することができる。

本発明の方法では前記菌株を通常の微生物が利用しうる
栄養物を含有する培地で培養する。

栄養源としては、従来ストレプトミセス属の培養に利用
される公知のものが使用できる。例えば炭素源として、
澱粉、水あめ、糖みつ等を使用しうる。また窒素源とし
て、大豆粉、小麦舵芽、乾燥酵母、ベプトン、肉エキス
、コーンステープリカー、硫酸アンモニウム、硝酸ソー
ダ等を使用しうる。その他必要に応じて炭酸カルシウム
、塩化ナ−トリウム、塩化カリ、燐酸塩等の無機塩類を
添加するほか、菌の発育を助けＳＦ−１１３０一梅物質
の生産を促進するごとき有機及び無機物を適当に添加す
ることができる。培養法としては、一般抗生物質生産の
方法と同じく、液体培養法、特に深部培養法が最も適し
ている。

培養は好気的条件下で行なわれ、培養に適当な温度は２
５００〜３８ｏｏであるが、多くの場合２８午○付近で
培養する。かくして、ＳＦ−１１３０−×２物質の生産
は、振濠培養、タンク培養共に２〜５日で最高に達する
。ＳＦ−１１３０−私物質の検定に当っては、次の方法
が用いられる。

検定用の培地としては、０．１２５％のマルトトリオー
スを含有したマィシン・アッセィ寒天塔地（ベプトン０
．５％、ミートエキス０．３％、寒天１．５％、ｐＨ６
）を用い、検定菌には、大腸菌、ェシェリヒア・コリ（
Ｅｅｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）Ｋ−１２Ｒを使用す
る。検定法は通常のペーパーディスク法が用いられる。
ＳＦ−１１３０−杉物質は後記するような理化学的性状
を示す弱塩基性のオリゴ糖であるため、その性質に従っ
て、培養液中から採取、精製することができる。

例えば、カーボン吸着、含水アルコール溶離法、又は水
−エタノール再沈澱法によって精製できる。即ち、ＳＦ
−１１３功珠の培養液をｐＨ３で酸性炉遇することによ
って菌体と炉別後、直ちにカーボンカラムに吸着させ、
５０％アセトン水で溶離し、溶離液を渡額乾固したのち
、水に溶解し、再度カーボンカラムに吸着させて、５〜
２５％のエタノール水で順次溶離し、ＳＦ−１１３０−
×２物質を含有する区分を濃縮後、エタノールで沈澱さ
せれば、容易に粗粉末を得ることができる。

このようにして得られた粗粉末には通常、中性のオリゴ
糖、特にマルトデキストリンが多量に混入しており、Ｓ
Ｆ−１１３０一杉物質の高純品を得るためには次の方法
が好ましい。即ち、酉醗酵液を、ダウェックス５０Ｗ×
２（Ｈ＋）の強酸性イオン交換樹脂に通しＳＦ−１１３
０−私物質を該樹脂に吸着させる。充分水洗したのち、
０．１Ｎアンモニア水で溶離する。溶離液を乾団後、水
に溶解し、ｐＨ３．５でカーボンカラムに吸着させ、水
洗後、３０〜３５％のエタノール水で溶出し、濃縮乾固
する。次いでこれを、再びダウェックス５０Ｗ×２（Ｎ
Ｈ４十）のレジンに吸着させ、水洗後、０．１Ｎアンモ
ニア水で溶離し、乾固する。さらにこれをダウェツクス
５０Ｗ×２（ピリジニウム塩型）のレジンに吸着させ、
０．１Ｍピリジン・ギ酸緩衝液（ｐＨ３．１）で展開し
、抗菌活性分画を濃縮乾固して、ＳＦ−１１３０−×２
物質と同時に生産されるＳＦ−１１３０一×．物質（特
磯昭５１一９９７５７号明細書参照）との混合物が白色
の粉末として得られる。本粉末はこのま）で生理活性試
験に充分提供できるが、この混合物をセルロースカラム
に吸着させ、展開溶媒（ｎ−プロパノール・酢酸エチル
・水＝６：１：３）で展開し、ペーパークロマトグラフ
ィー（酢酸エチル・ピリジン・水＝１０：４：３）にお
いて、Ｒラフイノース＝０．３９（ラフイノースのＲｆ
を１．００として）の単一スポットを示す分画を濃綾乾
固すれば、副成のＳＦ−１１３０一×，物質が無色の粉
末で得られる。同時に、Ｒラフィノースこ０．５７の分
画を濃縮乾団して、無色の粉末として本発明のＳＦ−１
１３０一×２物質が得られる。なお、本発明の方法にお
いてＳＦ−１１３の朱を培養した場合には、培養物中に
は、ＳＦ−１１３０−×，及び−を物質以外に、マルト
ベンタオース、マルトヘキサオース（本出願人の同日出
願に係る侍願昭５１−９９７５６号参照）も生産、蓄積
されている。

ＳＦ−１１３０−×，、−池物質は抗菌性及び弱塩基性
を示すオリゴ糖に属し水に易溶、メタノール、エタノー
ルに雛溶、アセトンに不溶な物質である。これに対して
、前記のマルトベンタオース、マルトヘキサオースは中
性で水に易溶、エタノール、アセトンに不溶なオリゴ糖
であるから、上記の如き性質の差を利用して相互に分離
できる。すなわち、例えばＳＦ−１１３０株の培養液を
酸性炉遇して得られた炉液を強酸性イオン交換樹脂を通
すと、ＳＦ−１１３０−×，、−＆物質は該樹脂に吸着
される力ミ、マルトベンタオース、マルトヘキサオース
は吸着されずに通過する。該樹脂を０．１Ｎアンモニア
水で処理するとＳＦ−１１３０−ｘ２、一×２物質は溶
出される。本発明のＳＦ−１１３０−×２物質の理化学
的性質は表−２に示す通りである。

なお、参考としてＳＦ−１１３０−×．物質の性質も表
−２に併記する。ＳＦ−１１３０−×，及び−×２物質
は、酸性レジンを吸着すること及びｐＨＩ．９の炉紙電
気泳動法において、陰極に移動することから、弱塩基性
物質であり、酸加水分解で多量のグルコースを与えるこ
とから、オリゴ糖であると考えられる。表−２ なお、ＳＦ−１１３０−×，及びＳＦ−１１３０−×２
物質は 次の一般式で表わされ、ＳＦ−１１３０−×
，物質については（ｍ＋ｎ）＝５でＳＦ−１１３０一×
２物質については（ｍ＋ｎ）＝４であることが判明した
。

ＳＦ−１１３０−私物質の各種微生物に対する抗菌スペ
クトルは、表−２に示す通りで、グラム腸性菌に対して
活性を有するが、グラム陰性菌及び抗酸菌には無効であ
る。

更に本発明者らは、ＳＦ−１１３０−＆物質の抗菌力は
、マルトース、マルトトリオース、マルトテトラオース
、マルトベンタオース、マルトヘキサオース等のマルト
デキストリンが共存すると、活性が著しく増加すること
を発見した。但し、この場合、クレブジーラ・ニュー＊
＊モニィーに対しては例外的に増加が認めら；しなかっ
た。その試験例を表−３に示す。表−３ ※ マルトトリォースは、平板上層培地（マィシンァッ
セィ寒天）中に、１．２５概／ｃｃの割合で添加した。

本条件ではマルトトリォース自体には、抗菌活性はない
。ＳＦ−１１３０一私物質の毒性は極めて弱く、夫々マ
ウスを用いた急性毒性試験では、皮下注射の場合、４０
０の９／ｋｇでも、全例生存した。ＳＦ−１１３０−×
２物質はＳａｒｃｏｍａ１８０の腹水腫湯を移植したマ
ウスにおける免疫賦活試験（遅延型皮膚反応法）におい
て、免疫低下の防止作用のあることが発見された。この
作用は、更に制ガン剤投与の際におこる免疫低下の防止
にも有効なことも判明した。この場合、抗菌活性の場合
と同様にマルトデキストリンの添加によって免疫賦活の
増強がみられた。その１試験例を表−４に示す。試験方
法は、ＩＣＲ系マウス（１群６匹）にＳａｒｃｏｍａ１
８０の腹水自重湯を移植し、２４時間後、各検体（薬物
）及び制ガン剤（Ｅｎｄｏｘａｎ）を夫々皮下及び腹腔
内投与し、移植２日目に剃毛腹部に６％塩化ピクリルェ
タノール溶液を塗布して感作し、その後検体を１日１回
４日間投与。４日目にはＥｎｄｏ滋ｎを再投与し、９日
目に、１％塩化ピクリルオリーブ油溶液を両耳の表裏に
塗布して、２次感作させる。

その２狐時間後の耳の厚さの増加度を測定して、その増
加率により、遅延型皮膚反応の程度を判定したものであ
る。表−４ 泰一５は、Ｓａｒｃｏｍａ１８０固型ガンを用いた免疫
賦活試験を示す。

試験方法はＳａｒｃｏｍａ１８０をＩＣＲ系マウス（１
群５匹）に皮下移植前、６日目と５日目‘こ、実施例２
で得られたＳＦ−１１３０−×２物質とマルトベンタオ
ースの混合物を腹腔内投与し、移植後１０日目‘こ自重
湯を摘出し、それらの大きさ及び重量を測定した。表−
５にみられる如く、本発明の化合物の事前投与によって
、固型腫湯の顕著な縮退がみられた。表−５一方、Ｓａ
ｒｃｏｍａ１８０をマウス腹腔内にあらかじめ移植し、
その後でＳＦ−１１３０一×２物質を用いて治療試験し
た結果では全く無効であった。

従ってＳＦ−１１３０−×２物質は宿主の免疫抵抗力を
賦活化することによって間接的に治癒効果を示すことは
明らかである。近年、原虫症或いはガン患者の免疫抵抗
力が正常状態に比べて著るしく低下していることが判明
し、この低下を防止して治療効果を高める所謂、免疫療
法が臨床的に用いられ始めている。

このための免疫賦宿剤としては、ＢＣＧ菌体或いは各種
多糖体がよく知られているが、いづれも高分子であり、
本発明に示したような分子量一方以下のオリゴ糖に免疫
賦活作用のあることは、これまで全く報告がなく、実に
予想外のことである。このような低分子オリゴ糖は、吸
収・排他、結核の感染性、アレルギー反応の頻度等の点
で多糖体よりは実用上優れていることは明らかである。
更に、ＳＦ−１１３０−＆物質は細菌感染症に対して感
染防御作用を示して免疫賦活剤として有効であることは
、次の試験例によっても明らかである。

即ち、ＪＣＬ：ＩＣＲ系雄マウスを１群８匹として用い
、ＳＦ−１１３０−ｘ２物質をｐＨ７．２の燐酸緩衝液
に溶解し、１日当たり５０の９／Ｋ９又は１０爪９′ｋ
９の用量で４斑時間間隔で３回腹腔内投与した。最終投
与終了７幼時間後に、スタフィロコツカス・アウレウス
・スミスＳ−４２４朱の培養液を生理食塩水で稀釈後、
５％ムチンを加えた細菌懸濁液を腹腔内に接種した。菌
接種容量は０．物上／マウスとした。接種後５日間、マ
ウスの生存数を観察して、下記の表−６に示す結果を得
た。ＳＦ−１１３０−ｘ２は無処置対照群（コントロー
ル）に比べて５０の９／ｋ９投与では細菌接種菌量のＬ
Ｄ５。

（感染防御効果の目安となる）について約１１．４倍、
１０の９′ｋ９投与では約８．１倍の増加がみられた。
なおＳＦ−１１３０−＆物質自体は表−４に示す如く、
スタフィロコッカス・アウレゥスには全く抗菌力を有し
ない。表−６ また、免疫賦活剤は関節炎（リュウマチ）の如き自己免
疫疾患の治療にも有効である場合が知られている。

今回、以下に示す試験例によって、本発明のＳＦ−１１
３０−×２物質はリュウマチと密接な関連があると言わ
れる実験的関節炎の発現を防止するのに有効であると認
められた。即ち、この試験では、生理食塩水にリブん濁
した細菌、ミコバクテリュウム・ブチリカムの繭体の５
．８雌／羽を含む細菌懸濁液をＳＤ系ラツト（雄、平均
体重１８０夕、１群１０匹）の右の足魔に皮下注射して
起炎ごせた。

この糧炎のための細菌注射の１日後にＳＦ−１１３０−
×物質（ＳＦ−１１３０−×，）とＳＦ−１１３０−×
２との１：２重量比の混合物）を燐酸緩衝液（ｐＨ７．
２）にとかした溶液を毎日１回、連続１０日間皮下注射
した。１回当りの投与量は１５０の９／ｋ９とした。

細菌の接種後１４日目に、ラットの脚、耳、鼻、目、尾
に生じた炎症の徴候（発症度）を調べ、０〜３の４段階
（スコア）で評価をし平均値を算出した。更に、左の足
疎の容積を測定してＳＦ−１１３０−×物質の消炎効力
を判定した。比較のため、ＳＦ−１１３０−×物質に代
えて、フェニルブタゾンを毎日１回、１１日間２０雌／
ｋ９／日の用量で経口投与した。また、ＳＦ−１１３０
−×及びフェニルブタゾンの投与を省略した以外は全く
同様にして対照（コントロール）試験も行った。この結
果を次の表−７に示す。±−７ この試験により、ＳＦ−１１３０一×２物質は実験的関
節炎の防止に有効であると認められた。

ＳＦ−１１３０−均物質を投与する場合は、点滴静注、
局部注射、筋注、胸腔又は腹腔注射が可能で、毎日又は
週２〜３回、５０〜４００ｍｏ′ｋ９、好ましくは１０
０の９／ｋ９前後を投与する。

次に本発明の実施例を示す。

実施例 １ ストレブトミセス・ミキソゲネスＳＦ−１１３０株（徴
工研菌寄第６７６号）を水あめ５．０％、大豆粉２．５
％、小麦豚芽１．０％、塩化ナトリウム０．２５％の液
体塔地２００夕（ｐＨ７．０）に接種し、ジャーファー
メンターにて、２８００で６４時間通気縄枠培養を行な
った。

培養終了後、培養液をｐＨ３で酸性炉過し、炉液１４０
〆を得た。

この炉液をダウェツクス５０Ｗ×２（日十）の強酸性イ
オン交換樹脂２０そをつめたカラムに吸着させ、充分水
洗したのち０．１Ｎアンモニア水、計８０〆で溶出し、
溶出液のうちＥｃｏｌｉＫ−１駅に対して、抗菌活性の
ある区分を濃縮乾団して、褐色の粉末２５０夕を得た。
素通り液１５０そを再び塩酸でｐＨ３．０に調整し、ダ
ウェツクス５０Ｗ×２２（Ｈ＋）のレジン２０そをつめ
たカラムに吸着させ、水洗後、０．１Ｎアンモニア水、
計８０そで溶出し、抗菌活性区分を膿縦乾固して更に褐
色の粉末５１夕を得た。

最初に得られた粉末４７夕を水２５０の‘に溶解し、ｐ
Ｈ３０に調整したのち、和光製活性炭６００の‘を充填
したカラム（５．５×２６ｃｍ）に吸着させ、水洗後、
３０％エタノール水、次いで３５％メタノール水で熔出
し、各分画のうち、大腸菌Ｋ−ｉ波に対して抗菌活性の
ある区分４夕を濃縮乾固して、黄褐色の粉末５．６夕を
得た。

この粉末を再び水１００の乙に溶解し、塩酸でｐＨ３に
調整したのち、ダウェックス５０Ｗ× ２（Ｎ比＋）の
レジン６００のＺを充填したカラムに吸着させ、充分水
洗したのち、０．１Ｎアンモニア水で藩出し、抗菌活性
区分を濃縮乾固して黄褐色の粉末１．５夕を得た。

次いでこのうち１夕を緩衝溶液（０．１Ｍピリジン・ギ
酸溶液、ｐＨ＝３．１）７０の‘に熔解し、ピリジニウ
ム型のダウェツクス５０Ｗ×２（２００〜４００メッシ
ュ）５００の‘を充填したカラム（３．５×６０ｃの）
に吸着させ、緩衝溶液で溶出した。

溶出液は１０の【づつ分取し、各分画について高圧炉紙
電気泳動法を用いて、硝酸銀試薬でＲアラニン０．５３
（アラニンのＲｆを１．００として）の単一スポットを
示す抗菌活性区分フラクションＮｏ．６３〜７９を濃縮
乾固して、ＳＦ−１１３０一×，物質とＳＦ−１１３０
−×２物質の混合物として白色粉末３８０他を得た。次
にこの粉末を少量の水で溶解し、それに混合溶媒（ｎー
プロパノール・酢酸エチル・水＝６：１：３）を加え、
セルロース２００の上を充填したカラム（３×３０ｃの
）に吸着させ、混合溶媒で展開した。

溶出液を７の上づっ分取し、各フラクションについて、
酢酸エチル・ピリジン・水（１０：４：３）の混合溶媒
でペーパー・クロマトグラフィーを行ない、硝酸銀試薬
によってＲラフィノース０．５７（ラフィノースを１．
００として）の単一スポットを示す抗菌活性区分、フラ
クションＮＯ．３５１〜４４５を濃縮乾固して、ＳＦ−
１１３０−×２物質の白色の粉末１５０脚を得た。同時
に、Ｒラフイノース０．３９の単一スポットを示す杭菌
活性区分フラクションＮＯ．５０３〜５５０を濃綾乾固
して、ＳＦ−１１３０−×，物質７０柵を得た。

更に、ＳＦ−１１３０−×２物質の粉末１５０の９を水
６のとに溶解し、活性炭１５の‘を充填したカラム（２
×５．５ｃｍ）に吸着させ、水洗後３０％及び３５％エ
タノールで溶出し、抗菌活性区分１３０花｛を濃縮乾固
して白色の粉末１２０の９を得た。融点１９５ｑ○（分
解）。ＳＦ−１１３０−×，物質の粉末７０の９も同様
に処理して、白色の粉末として５５の９を得た。融点２
０３００（分解）。２番目に得られたダウェツクス５０
Ｗ×２（Ｈ＋）レジンのアンモニア溶雛物５１夕を同様
に処理して、ＳＦ−１１３０−×，物質２１０の９、Ｓ
Ｆ−１１３０−×２物質５２０の９を回収した。

実施例 ２ ストレプトミセス・ミキソゲネスＳＦ−１１３０株（徴
工研菌寄第６７６号）を、実施例１と同じ組成の液体培
地２０夕に接種し、ジャーファーメンターにて２が０で
６斑時間通気燈梓培養を行なった。

培養終了後、培養液を酸性炉逸し、炉液１５そを得た。
この炉液を、和光製活性炭１夕をつめたカラム（６×３
６ｃの）に吸着させ、充分水洗したのちＰＨ８の５０％
アセトン５そで港出し、溶出液のうち大腸菌Ｋ−１２Ｒ
に対して杭菌活性のある区分を濃縮乾固して、黄褐色の
粉末６７．５夕を得た。このうち、４５夕を水２００叫
に溶解し、和光製活性炭１そを充填したカラム（５．６
×４２肌）に吸着させ、水洗後、５、１０、１５、２０
、２５％の各エタノール水で順次溶出し、溶出液を１５
叫づつ分取した。抗菌活性区分フラクションＮｏ．３６
６〜５１０を濃縮乾固して白色の粉末５．７夕を得た。
この白色粉末５夕を１５の（の水に溶解し、炉過後、炉
液にエタノール１８０叫を徐々に加えて、再沈澱させ、
ＳＦ−１１３０一ｘ２物質（１０％）及びマルトベンタ
オース（９９％）の混合物４．６夕を得た。

【図面の簡単な説明】

第１図と第２図は夫々に、本発明のＳＦ−１１３０一物
物質の赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ錠中）と１００Ｍ
Ｈｚ水素核磁気共鳴スペクトル（重水中）の曲線図を示
す。 第３図と第４図は夫々に、ＳＦ−１１３０−×，物質赤
外線吸収スペクトル（ＫＢｒ錠中）と水の１００Ｍ舷水
素核磁気共鳴吸収スペクトル（重水中）の曲線図を示す
。第「図 第２図 第３図 第４図

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 次の理化学的性状を示す、すなわち、元素分析値：
   炭素４３．８４％、水素６．４１％、窒素１．０８％、
   酸素４９．６７％（差）；比旋光度＋１５５°（水）で
   あり、紫外部に吸収極大を有さず、添附図面の第１図に
   示した赤外線吸収スペクトル、第２図に示した水素核磁
   気共鳴吸収スペクトルを有し、水・ジメチルスルホキシ
   ドに易溶、アルコールに難溶、アセトン、酢酸エチル、
   クロロホルム、ベンゼンに不溶であり、硝酸銀、レツド
   テトラゾリウム、アンスロン、ニンヒドリン、グレーク
   ・リーパツクの各試薬に陽性であり、ペーパークロマト
   グラフイーにて酢酸エチル、ピリジン・水（１０：４：
   ３）の展開溶媒を用いるとＲラフイノースが０．５７、
   ｎ−ブタノール・ピリジン・酢酸・水（６：４：１：３
   ）の展開溶媒を用いるとＲラフイノースが０．３３を示
   す白色弱塩基性粉末状であることを特徴とするＳＦ−１
   １３０−ｘ＿２物質。 ２ ストレプトミセス属に属するＳＦ−１１３０−ｘ＿
   ２物質生産菌を、好気的条件下に培養して、培養液中に
   ＳＦ−１１３０−ｘ＿２物質を蓄積させ、これを採取す
   ることを特徴とする新抗生物質ＳＦ−１１３０−ｘ＿２
   物質の製造法。 ３ 有効成分としてＳＦ−１１３０−ｘ＿２物質を含む
   ことを特徴とする免疫賦活剤。