JPS605278B2 - 食品蛋白質含有物質製造に於ける核酸含有率低下方法 - Google Patents
食品蛋白質含有物質製造に於ける核酸含有率低下方法Info
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- JPS605278B2 JPS605278B2 JP49110367A JP11036774A JPS605278B2 JP S605278 B2 JPS605278 B2 JP S605278B2 JP 49110367 A JP49110367 A JP 49110367A JP 11036774 A JP11036774 A JP 11036774A JP S605278 B2 JPS605278 B2 JP S605278B2
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- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
- A23J3/20—Proteins from microorganisms or unicellular algae
-
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Description
【発明の詳細な説明】
本発用は食用蛋白質含有物質の製造又はそれに関する改
良に係る。
良に係る。
本発明は特に、菌類の核酸含有率を低下せしめる方法に
係る。
係る。
出願人の英国特許第1210356号に食用蛋白質含有
物質製造方法が開示されている。
物質製造方法が開示されている。
該方法は、不完全菌類(Fnu琴Impedecti)
の無毒性菌株である微生物を好気条件下、主要成長促進
栄養物質を含有しており且つ該栄養物質中の同化し得る
炭水化物の形で存在する炭素が増殖に於ける限定基質を
構成している培養基中で培養し増殖させることと、前記
同化し得る炭水化物を消費した培養基から食用蛋白質含
有物質である増殖有機体を分離することから成る。出願
人による英国特許出願第30584/7ぴ号及び第10
466/71号(特許第1346062号)の明細書及
び特許請求の範囲に、食用蛋白質含有物質の製造方法が
開示されている。
の無毒性菌株である微生物を好気条件下、主要成長促進
栄養物質を含有しており且つ該栄養物質中の同化し得る
炭水化物の形で存在する炭素が増殖に於ける限定基質を
構成している培養基中で培養し増殖させることと、前記
同化し得る炭水化物を消費した培養基から食用蛋白質含
有物質である増殖有機体を分離することから成る。出願
人による英国特許出願第30584/7ぴ号及び第10
466/71号(特許第1346062号)の明細書及
び特許請求の範囲に、食用蛋白質含有物質の製造方法が
開示されている。
該方法は、フサリウム(F順arimm)属の無毒性菌
株又はその変異株或いは突然変異株を、好気性条件下、
主要な成長促進栄養物質を含有しており且つ該栄養物質
中の同化し得る炭水化物として存在する炭素が増殖に於
ける限定物質である培養基中で培養及び増殖させ、食用
蛋白質含有物質を構成する増殖した有機体を分離するこ
とから成る。出願人による英国特許出願第23452/
7び号(特許第1346061号)の明細書及び特許請
求の範囲には、出願人による新規な特異的菌株、フサリ
ゥムグラミニアラムシユワーべ(F低arlmm皮am
lneammSchwaは)FERM一PNo.372
1(IMI145425)及びその変異株及び突然変異
株が記載されている。
株又はその変異株或いは突然変異株を、好気性条件下、
主要な成長促進栄養物質を含有しており且つ該栄養物質
中の同化し得る炭水化物として存在する炭素が増殖に於
ける限定物質である培養基中で培養及び増殖させ、食用
蛋白質含有物質を構成する増殖した有機体を分離するこ
とから成る。出願人による英国特許出願第23452/
7び号(特許第1346061号)の明細書及び特許請
求の範囲には、出願人による新規な特異的菌株、フサリ
ゥムグラミニアラムシユワーべ(F低arlmm皮am
lneammSchwaは)FERM一PNo.372
1(IMI145425)及びその変異株及び突然変異
株が記載されている。
出願人の英国特許出願第30584/70号及び第10
466/71号(特許第1346062号)に記載の発
酵方法により得られた食用蛋白質含有物質を構成する増
殖分離した生物は人間又は動物用の食料中に混入させ得
る。
466/71号(特許第1346062号)に記載の発
酵方法により得られた食用蛋白質含有物質を構成する増
殖分離した生物は人間又は動物用の食料中に混入させ得
る。
出願人による英国特許出願第30584/7び号及び第
10466/71号(特許第1346062号)に記載
の方法によれだ、菌類の菌糸体から成る食用蛋白質含有
物質の製造が可能であり、該菌糸体はネズミ分析(ra
tassay)に於いてQ−アミノ窒素に基〈少なくと
も70という高い蛋白質正味利用値を有している。
10466/71号(特許第1346062号)に記載
の方法によれだ、菌類の菌糸体から成る食用蛋白質含有
物質の製造が可能であり、該菌糸体はネズミ分析(ra
tassay)に於いてQ−アミノ窒素に基〈少なくと
も70という高い蛋白質正味利用値を有している。
人間の食料用の主要な蛋白質源として単細胞蛋白質を用
いる場合は、世界保健機構(WHO)食糧農業機構の蛋
白質顧問グループ〔ProteinAdvisoryG
roupoftheFoodandAgricultm
al○r鉾nisation(FAO)〕は、核酸含有
量を、最高摂取量が1日当り2夕の範囲のレベルにまで
低下すべきであると助言してある。
いる場合は、世界保健機構(WHO)食糧農業機構の蛋
白質顧問グループ〔ProteinAdvisoryG
roupoftheFoodandAgricultm
al○r鉾nisation(FAO)〕は、核酸含有
量を、最高摂取量が1日当り2夕の範囲のレベルにまで
低下すべきであると助言してある。
採用し得る加工方法であるためには、該方法は核酸のレ
ベルを必要な程度にまで低減させるのみならず、費用が
かかってはならず又得られる食料品を好ましくない化学
薬品で汚染してはならない。
ベルを必要な程度にまで低減させるのみならず、費用が
かかってはならず又得られる食料品を好ましくない化学
薬品で汚染してはならない。
本発明の目的は、増殖させた微生物を人間の食料として
より好ましいものにすべく蛋白質の損失を最低限にしな
がら該増殖させた微生物中の核酸、特にポリ核酸(RN
A)の含有率を低下させる方法を提供することである。
より好ましいものにすべく蛋白質の損失を最低限にしな
がら該増殖させた微生物中の核酸、特にポリ核酸(RN
A)の含有率を低下させる方法を提供することである。
本発明者等は蛋白質顧問グループの上述の要望に答え得
る不完全菌類の成育した無毒性菌体の細胞を処理する方
法を開発した。本発明は、RNAのレベルを4重量%よ
り少ないレベルにまで低下させた菌類の菌糸体を提供す
る。
る不完全菌類の成育した無毒性菌体の細胞を処理する方
法を開発した。本発明は、RNAのレベルを4重量%よ
り少ないレベルにまで低下させた菌類の菌糸体を提供す
る。
従って、本発明は4重量%より少なく、好ましくは2重
量%より少ないレベルにまでRNAのレベルを低下させ
たフサリウムグラミニアラムシュワ‐べ(Fusarl
umgramlnear肌Schwa皮)FERM−P
No.3721(IMI145425)を4含有する菌
類の菌糸体を提供する。
量%より少ないレベルにまでRNAのレベルを低下させ
たフサリウムグラミニアラムシュワ‐べ(Fusarl
umgramlnear肌Schwa皮)FERM−P
No.3721(IMI145425)を4含有する菌
類の菌糸体を提供する。
本発明は食用蛋白質含有物質の製造に於て核酸含有率を
低下させる方法を提供するものであり、該方法は、不完
全菌類の成育した無毒性菌株をpH4.7〜7.0、温
度55〜72℃で懸濁液中に少なくとも6現@・間維持
することから成る。
低下させる方法を提供するものであり、該方法は、不完
全菌類の成育した無毒性菌株をpH4.7〜7.0、温
度55〜72℃で懸濁液中に少なくとも6現@・間維持
することから成る。
この方法はフサリウム(F雌arimm)の成育した無
毒性菌株に適用し得る。
毒性菌株に適用し得る。
フサリウムF雌arimm)の菌株は、例えば、出願人
による英国特許出願第23452/70(特許第134
6061号)、第30584/70及び第10466/
71号(特許第1346062号)の明細書及び特許請
求の範囲に記載のフサリウムグラミニアラムシュワーべ
F船arlmmgramlneammSchwaは)の
菌株FERM一PNo.3721(IMI145425
)、フサリウムオキシスポラム(F雌anmmo沙sp
omm)又はフサリウムソラニ(F雌armmsola
nj)の菌株であってもよい。
による英国特許出願第23452/70(特許第134
6061号)、第30584/70及び第10466/
71号(特許第1346062号)の明細書及び特許請
求の範囲に記載のフサリウムグラミニアラムシュワーべ
F船arlmmgramlneammSchwaは)の
菌株FERM一PNo.3721(IMI145425
)、フサリウムオキシスポラム(F雌anmmo沙sp
omm)又はフサリウムソラニ(F雌armmsola
nj)の菌株であってもよい。
不完全菌類の成育した無毒性菌株はpH4.7〜7.0
、温度55〜6800で懸濁液中に少なくとも200秒
間維持すると有利である。
、温度55〜6800で懸濁液中に少なくとも200秒
間維持すると有利である。
本発明による細菌の核酸含有率を低下させるための後発
酵方法は、実質的に1段階方法である。
酵方法は、実質的に1段階方法である。
所望ならば、例えば出願人による英国特許出願第305
84/70号及び第10466/71号(特許第134
6062号)の明細書及び特許請求の範囲に藷軟の発酵
方法により得られる成育した微生物の蛋白質則ち細菌の
菌糸体を採取し、猿過して生育培地を除去し洗浄しても
よい、次に細胞をpHが4.7〜7.0の緩衝水溶液と
密着接触させてもよい。次に細胞をpH6.3温度63
qoの水道水(tapwater)中に20分間再懸濁
させて増殖させ得る。得られた処理済細胞は、次に例え
ば猿過と水洗とにより採取し、その後種々の方法で食料
品化するか又は乾燥する。
84/70号及び第10466/71号(特許第134
6062号)の明細書及び特許請求の範囲に藷軟の発酵
方法により得られる成育した微生物の蛋白質則ち細菌の
菌糸体を採取し、猿過して生育培地を除去し洗浄しても
よい、次に細胞をpHが4.7〜7.0の緩衝水溶液と
密着接触させてもよい。次に細胞をpH6.3温度63
qoの水道水(tapwater)中に20分間再懸濁
させて増殖させ得る。得られた処理済細胞は、次に例え
ば猿過と水洗とにより採取し、その後種々の方法で食料
品化するか又は乾燥する。
蛋白質の損失を最小限にとどめるために、細胞懸濁液の
温度を55〜720の範囲内の所定温度にまでできるだ
け急速に上昇させるのが望ましく、その後実質的にそれ
と等しい温度を5〜6び分間維持してもよい。
温度を55〜720の範囲内の所定温度にまでできるだ
け急速に上昇させるのが望ましく、その後実質的にそれ
と等しい温度を5〜6び分間維持してもよい。
蛋白質分解活性を阻害又は消失させるための任意の予備
段階は、不完全菌類の成育した無毒性菌体を、55〜7
〆0の選択された等温に、且つ蛋白質分解活性が生起し
ないPHに、リボヌクレアーゼを破壊しないでプロテア
ーゼのみを破壊するのに充分な時間にわさり維持するこ
とから成る。
段階は、不完全菌類の成育した無毒性菌体を、55〜7
〆0の選択された等温に、且つ蛋白質分解活性が生起し
ないPHに、リボヌクレアーゼを破壊しないでプロテア
ーゼのみを破壊するのに充分な時間にわさり維持するこ
とから成る。
このように、上述した本発明の等温過程の蛋白質の損失
を減少させるために、細胞をpH8.5選択された等温
、好ましくは65℃に該等温過程の開始前(即ちpHを
4.7〜7に調整する前)1/2〜5分間、好ましくは
1分間、維持してもよい。
を減少させるために、細胞をpH8.5選択された等温
、好ましくは65℃に該等温過程の開始前(即ちpHを
4.7〜7に調整する前)1/2〜5分間、好ましくは
1分間、維持してもよい。
得られた細菌の菌糸体は1〜4%のRNAを含んでいて
もよい。
もよい。
一方、禾処理の増殖した微生物は7〜12%のRNAを
含有している。ある例に於ては、RNA含有率は1%よ
りも低い。この細胞を分析して化学的に組成を決定し核
酸含有率低下処理の効果を評価することが可能である。
含有している。ある例に於ては、RNA含有率は1%よ
りも低い。この細胞を分析して化学的に組成を決定し核
酸含有率低下処理の効果を評価することが可能である。
次に化学的組成を決定する方法を記載する。
リボ核酸(RNA)含有率はシュナィダー(Schne
ider,W.C.A肌lysち1945,161,2
93)の方法の改良方法により決定される。
ider,W.C.A肌lysち1945,161,2
93)の方法の改良方法により決定される。
全窒素量(TN)は、自動ケルダルダィジヱスタ(Au
めmaticKjel船hldigesにr,Tech
nicon)、A.Fenari,Ann.N.Y.S
cj.,87,792によって分析する。
めmaticKjel船hldigesにr,Tech
nicon)、A.Fenari,Ann.N.Y.S
cj.,87,792によって分析する。
アミノ窒素(AN)は、TNBS(改良型)、M.A.
Pinnegar,Techn;conSMmposl
mm,1965,80によって分析する。
Pinnegar,Techn;conSMmposl
mm,1965,80によって分析する。
次に本発明の実施方法の例を記載する。
フサリウムグラミニアラム(F雌arlmm釘amln
earum)FERM一PNO.3721(IMI14
5425)を下記の方法で連続的に培養した。
earum)FERM一PNO.3721(IMI14
5425)を下記の方法で連続的に培養した。
水道水中の培地ヤガイモでんぷん(Q−アミラーゼとグ
ルカミラーゼとで処理)60夕/そMgV04・7日2
00.75夕/そZnS。
ルカミラーゼとで処理)60夕/そMgV04・7日2
00.75夕/そZnS。
4・7日2010.0の9/クCuS04・田202.
0雌/そNaM。
0雌/そNaM。
〇4・2日2〇2‐0の9/クCoC1・細202.0
の9/そMnS04・凪2010.0の9/クFeS〇
4・7日2〇20.0の9/そN比日2P043.0夕
/そK2S〇42‐4多/そNaCI○.125夕/そ
ホウ酸0.5地/そビオチン0.005の9/クPPG
20000.04の夕/ク発酵装置操作条件温度30午
○PH6.0圧力15.5psig擁梓機速度23仇.
P.m.空気流量800そ/分溶解酸素6.5(空気飽
和度が80である場合任意単位)殺菌温度135qoで
連続殺菌(9の砂維持)希釈率0.14hr‐1発酵装
置容量】300そ接種材料連続育成させる前に、成長培
養の20〆接種材料から発酵装置をバッチ式に操作する
。
の9/そMnS04・凪2010.0の9/クFeS〇
4・7日2〇20.0の9/そN比日2P043.0夕
/そK2S〇42‐4多/そNaCI○.125夕/そ
ホウ酸0.5地/そビオチン0.005の9/クPPG
20000.04の夕/ク発酵装置操作条件温度30午
○PH6.0圧力15.5psig擁梓機速度23仇.
P.m.空気流量800そ/分溶解酸素6.5(空気飽
和度が80である場合任意単位)殺菌温度135qoで
連続殺菌(9の砂維持)希釈率0.14hr‐1発酵装
置容量】300そ接種材料連続育成させる前に、成長培
養の20〆接種材料から発酵装置をバッチ式に操作する
。
バッチ式育成が完了すると、上記の条件下で発酵装置を
連続的に作動させる。注意 下記の実施例のいくつかのものに於て、RNA含有率(
%)はr重量の損失」に応じて訂正されていない。
連続的に作動させる。注意 下記の実施例のいくつかのものに於て、RNA含有率(
%)はr重量の損失」に応じて訂正されていない。
例えば
細胞100夕(例えばRNAIO夕を含む)RNA低減
処理・処理済細胞70夕+重量損失30夕 (例えばRNA2夕を含む) 重量損失に応じて訂正されていないRNAの含有率(%
)は2%(即ち元の細胞100タ中の2のである。
処理・処理済細胞70夕+重量損失30夕 (例えばRNA2夕を含む) 重量損失に応じて訂正されていないRNAの含有率(%
)は2%(即ち元の細胞100タ中の2のである。
一方重量の損失に応じて訂正されたRNA含有率(%)
は亮X10o=2‐86%側撮終生成物70タ中の2の
である。他のRNA減少処理と同様に等温処理の結果、
一般に約30%の重量が失われる。
は亮X10o=2‐86%側撮終生成物70タ中の2の
である。他のRNA減少処理と同様に等温処理の結果、
一般に約30%の重量が失われる。
しかしながら重量損失は一般に各試料毎には測定されな
いので生成物のRNA含有率を出発物質の関数として表
わすことが必要となる。結果 実施例A 種々の温度で調べた核酸低下処理 前記方法で培養したF.gramlnear皿mFER
M−PNo.3721(IMI145425)をブフナ
ー櫨過システムにより採取及び洗浄した。
いので生成物のRNA含有率を出発物質の関数として表
わすことが必要となる。結果 実施例A 種々の温度で調べた核酸低下処理 前記方法で培養したF.gramlnear皿mFER
M−PNo.3721(IMI145425)をブフナ
ー櫨過システムにより採取及び洗浄した。
次に細胞を約10多/そのスラリー濃度で、種々の温度
の水道水中に種々の期間懸濁させた。結果 岬騎馬が湊浮ぶぷ静 対比55(%)、ハ只一8.09100核酸低下555
8.09100〃56106.5881〃55203.
4042〃55401.1614〃55600.801
0対照58−7.56100核酸低下5856.268
3〃58103.5547〃58201.7924″5
8301.2116″58450.8812対照60−
10.84100核酸低下6058.1575〃601
04.9245〃60202.3922〃60301.
6815〃60451.2912対照62−9.851
00核酸低下62111.25〃6256.3765〃
62104.1943〃62202.3023〃623
01.8319対照64−11.34100核駿低下6
4111.96〃6456.1254〃64104.1
036〃64202.7024〃64302.3921
対照66−8.22100核酸低下6617.0386
〃6653.1333〃66102.2928〃662
01.9924〃66302.1827対照68−8.
47100核酸低下6816.7880〃6853.0
336〃68102.5630〃68202.4429
〃68302.2628対照70−7.51100核酸
低下7013.2944〃7052.6535〃701
02.4032〃70202.3331〃70302.
2230RNA含有率(%)残存する元処理鶴(℃寺島
(寿願夢に比証つ側A (努) 対照72−7.62100核酸低下7215.3570
;7252.743672102.4332;7220
2.333172302.3331対照75−9.16
100核酸低下7516.0266〃7555.105
7〃75105.0455〃75204.7352〃7
5304.4949対照80−8.72100綾酸低下
8015.6965〃8055.2660〃80105
.1159〃80204.5752〃80304.51
52結論上記の方法で培養した糸状菌を用いて、55〜
72℃の範囲内で核酸のレベルを許容し得るような低い
値にまで低下させることが可能である。
の水道水中に種々の期間懸濁させた。結果 岬騎馬が湊浮ぶぷ静 対比55(%)、ハ只一8.09100核酸低下555
8.09100〃56106.5881〃55203.
4042〃55401.1614〃55600.801
0対照58−7.56100核酸低下5856.268
3〃58103.5547〃58201.7924″5
8301.2116″58450.8812対照60−
10.84100核酸低下6058.1575〃601
04.9245〃60202.3922〃60301.
6815〃60451.2912対照62−9.851
00核酸低下62111.25〃6256.3765〃
62104.1943〃62202.3023〃623
01.8319対照64−11.34100核駿低下6
4111.96〃6456.1254〃64104.1
036〃64202.7024〃64302.3921
対照66−8.22100核酸低下6617.0386
〃6653.1333〃66102.2928〃662
01.9924〃66302.1827対照68−8.
47100核酸低下6816.7880〃6853.0
336〃68102.5630〃68202.4429
〃68302.2628対照70−7.51100核酸
低下7013.2944〃7052.6535〃701
02.4032〃70202.3331〃70302.
2230RNA含有率(%)残存する元処理鶴(℃寺島
(寿願夢に比証つ側A (努) 対照72−7.62100核酸低下7215.3570
;7252.743672102.4332;7220
2.333172302.3331対照75−9.16
100核酸低下7516.0266〃7555.105
7〃75105.0455〃75204.7352〃7
5304.4949対照80−8.72100綾酸低下
8015.6965〃8055.2660〃80105
.1159〃80204.5752〃80304.51
52結論上記の方法で培養した糸状菌を用いて、55〜
72℃の範囲内で核酸のレベルを許容し得るような低い
値にまで低下させることが可能である。
理想的な等温度は、所望のRNA除去程度と経済的観点
より許容し得る時間とに依存して決定される。
より許容し得る時間とに依存して決定される。
目的に好適の条件は舟6、62.5qoで18分間であ
る(同様に実施例Bを参照のこと)。
る(同様に実施例Bを参照のこと)。
実施例B
舟4〜9.562.500に於ける核酸低下処理の効墨
前記の如く培養したP.gramlnear皿mFER
M−PNo.3721(IMI145425)を採取し
ブフナー櫨過システムで洗浄した。
前記の如く培養したP.gramlnear皿mFER
M−PNo.3721(IMI145425)を採取し
ブフナー櫨過システムで洗浄した。
細胞を、62.守0で水道水中に懸濁させた。スラリー
濃度は約10夕/そであった。HCI又はNH40日を
自動的に加えることにより斑を所望の値に調節した。試
料を18分間培養した。結果 ・ 生.成物中に 処理培養液培養時生成物中ANTN重量損RNA残残存
していのPH間(分)のRNA協%%失%存量彩る元の
AN※7.68−100100対照8.2459625
℃9.5187.316.278.6o23.967.
581の等温〃9.0188.366.368.772
1.479.784.7〃8.5188.296.31
8.5220.879.784.7〃8.0188.2
36.198.4121.479.082.5〃7.0
182.066.347.7428.317.977.
0〃6.0181.016.467.8031.48.
475.1〃5.01−81.396.487.953
2.111.474.6〃4.0187.266.49
8.4927.763.779.4結論162.5℃で
実施される処理過程に最適のpHは、pH4.7〜7.
0の範囲であった。
濃度は約10夕/そであった。HCI又はNH40日を
自動的に加えることにより斑を所望の値に調節した。試
料を18分間培養した。結果 ・ 生.成物中に 処理培養液培養時生成物中ANTN重量損RNA残残存
していのPH間(分)のRNA協%%失%存量彩る元の
AN※7.68−100100対照8.2459625
℃9.5187.316.278.6o23.967.
581の等温〃9.0188.366.368.772
1.479.784.7〃8.5188.296.31
8.5220.879.784.7〃8.0188.2
36.198.4121.479.082.5〃7.0
182.066.347.7428.317.977.
0〃6.0181.016.467.8031.48.
475.1〃5.01−81.396.487.953
2.111.474.6〃4.0187.266.49
8.4927.763.779.4結論162.5℃で
実施される処理過程に最適のpHは、pH4.7〜7.
0の範囲であった。
pH6.0で核醗の減少が最高となった。2残念ながら
、蛋白質保持に最適のpHはpH6.0ではなく、pH
8.5〜9.0である。
、蛋白質保持に最適のpHはpH6.0ではなく、pH
8.5〜9.0である。
3色の観察:PH6及びそれ以上のpHに於ける乾燥固
形物、湿った濠過固形物及びスラリ一は濃灰色であった
。
形物、湿った濠過固形物及びスラリ一は濃灰色であった
。
pH5.0に於けるこれらは淡黄茶色であり、pH4.
0に於ては白色であった。従って、RNA低下処理が完
了した後、白色の製品00000000〇〇〇〇〇〇〇
〇〇〇0000*を得るためにpHを4.0に調整する
ことが望ましい。実施例C 種々のイオン強度の溶液中で実施した核酸減少処理の効
果前記の如く培養したF.gramlnearmmFE
RM−PNo.3721(IMI145425)を採取
し、ブフナー渡過システムで洗浄した。
0に於ては白色であった。従って、RNA低下処理が完
了した後、白色の製品00000000〇〇〇〇〇〇〇
〇〇〇0000*を得るためにpHを4.0に調整する
ことが望ましい。実施例C 種々のイオン強度の溶液中で実施した核酸減少処理の効
果前記の如く培養したF.gramlnearmmFE
RM−PNo.3721(IMI145425)を採取
し、ブフナー渡過システムで洗浄した。
細胞を、約10夕/そのスラリー濃度で種々のイオン強
度の溶液中に懸濁させた。pHを実動的にpH6に維持
し、62.500で20分間培養した。結果 処理培養溶液生成物中のァミノ窒素全窒素量(PH6K
維持)RNA多彩%対照−8.586.638.85核
酸低下蒸留水1.507.128.69核酸低下0.0
1MNa021.186.988.810.05MNa
021.056.999.040‐10MNa〇多1−
○‐47‐068‐960‐20MNa〇多0‐876
‐698‐640.50MNa020.916.778
.500.50MNa020.627.028.64結
論調べた範囲内では、NaCIとNH4CIは核駿低下
処理にほとんど影響を与えなかった。
度の溶液中に懸濁させた。pHを実動的にpH6に維持
し、62.500で20分間培養した。結果 処理培養溶液生成物中のァミノ窒素全窒素量(PH6K
維持)RNA多彩%対照−8.586.638.85核
酸低下蒸留水1.507.128.69核酸低下0.0
1MNa021.186.988.810.05MNa
021.056.999.040‐10MNa〇多1−
○‐47‐068‐960‐20MNa〇多0‐876
‐698‐640.50MNa020.916.778
.500.50MNa020.627.028.64結
論調べた範囲内では、NaCIとNH4CIは核駿低下
処理にほとんど影響を与えなかった。
実施例D
種々のスラリー濃度での核酸低下処理の効果前記の如く
培養したF.gramlnear山mFERM−PNo
.3721(IMI145425)を採取しブフナー猿
過システムにより洗浄した。
培養したF.gramlnear山mFERM−PNo
.3721(IMI145425)を採取しブフナー猿
過システムにより洗浄した。
次に細胞を種々のスラリ一濃度で6yoの水道水中に種
々の期間懸濁させた。結果RNA含有率多処理スリラー
濃度培養時間(重量損失による訂正せ(9/Z)(分・
秒)ず)無処理(対照)8.85核酸低下1g/21.
007.46〃19/Z7.203.27〃19/多1
5‐302‐37〃1g/230.301.85〃2g
/多I.006.87〃2〃7.202.34〃2〃1
6.301.41〃2〃31.001.31〃4〃1.
007.17〃4〃8.002.50〃4〃16.20
1.34〃4〃30.100.91〃10〃2.007
.35〃10〃9.402.02〃10〃18.001
.10〃10〃30.200.76〃20〃2.206
.05〃20〃6.403.13〃20〃16.201
.59〃20〃30.000.88〃40〃1.205
.31〃40〃5.105.25〃40〃15.001
.68〃40〃30.501.02結論この結果は、ス
ラリー濃度は、概して、熱伝導が影響すると同程度だけ
RNA低下に影響を与える(即ち、急速に温度を平衡さ
せるには、スラリー濃度が高い場合には蝿梓を必要とす
る)ことを示している。
々の期間懸濁させた。結果RNA含有率多処理スリラー
濃度培養時間(重量損失による訂正せ(9/Z)(分・
秒)ず)無処理(対照)8.85核酸低下1g/21.
007.46〃19/Z7.203.27〃19/多1
5‐302‐37〃1g/230.301.85〃2g
/多I.006.87〃2〃7.202.34〃2〃1
6.301.41〃2〃31.001.31〃4〃1.
007.17〃4〃8.002.50〃4〃16.20
1.34〃4〃30.100.91〃10〃2.007
.35〃10〃9.402.02〃10〃18.001
.10〃10〃30.200.76〃20〃2.206
.05〃20〃6.403.13〃20〃16.201
.59〃20〃30.000.88〃40〃1.205
.31〃40〃5.105.25〃40〃15.001
.68〃40〃30.501.02結論この結果は、ス
ラリー濃度は、概して、熱伝導が影響すると同程度だけ
RNA低下に影響を与える(即ち、急速に温度を平衡さ
せるには、スラリー濃度が高い場合には蝿梓を必要とす
る)ことを示している。
実施例E
種々の縄梓条件下での核酸低下処理効果
前記の方法で培養したF.匁amlneammFERM
−PNo.3721(IMI145425)を採取しブ
フナー渡過システムにより洗浄した。
−PNo.3721(IMI145425)を採取しブ
フナー渡過システムにより洗浄した。
次に細胞を約10夕/そのスラリー濃度で、種々の蝿梓
条件下に於て63℃の水道水中に懸濁させた。結果 処理多言芝あきさ雫鼻培養時間RNA含有率(%)(ヌ
ト。
条件下に於て63℃の水道水中に懸濁させた。結果 処理多言芝あきさ雫鼻培養時間RNA含有率(%)(ヌ
ト。
−ク/分)(分)(重量損失による訂正せず)無処理(
対照)8.30核酸低下017.31″″52.33″
″101.04″″200.67″″300.59無処
理(対照)5017.44核酸低下52.59″″10
1.23;;″200.84〃300.74″2501
6.26;;クー言‐≧:章ヲ;″201.13〃30
1.13結論 この結果は、等温処理過程中スラリーを凝拝する必要が
ないことを示している。
対照)8.30核酸低下017.31″″52.33″
″101.04″″200.67″″300.59無処
理(対照)5017.44核酸低下52.59″″10
1.23;;″200.84〃300.74″2501
6.26;;クー言‐≧:章ヲ;″201.13〃30
1.13結論 この結果は、等温処理過程中スラリーを凝拝する必要が
ないことを示している。
このスラリー濃度に於ける振とうの効果は無視できる。
このことは、工場の規模を拡大する場合、化学工業的観
点より多くの意義を有している。実施例F 典型的な核酸低下処理実験 前記の方法で培養したF.QamlneammFERM
−PNo.3721(IMI145425)を採取しブ
フナー櫨過システムにより洗浄した。
このことは、工場の規模を拡大する場合、化学工業的観
点より多くの意義を有している。実施例F 典型的な核酸低下処理実験 前記の方法で培養したF.QamlneammFERM
−PNo.3721(IMI145425)を採取しブ
フナー櫨過システムにより洗浄した。
次に細胞を約10夕/そのスラリー濃度で0.1MNa
CI溶液中に再懸濁させた。pHを自動的にpH6の維
持し、62.500で20分間にわたり培養した。結果 1009の繭体の含有量68.19生成物31.99重
量損失鰍詞型常畔 結論 生成物は44%の蛋白質と0.8%のリボ核酸を含有し
ている。
CI溶液中に再懸濁させた。pHを自動的にpH6の維
持し、62.500で20分間にわたり培養した。結果 1009の繭体の含有量68.19生成物31.99重
量損失鰍詞型常畔 結論 生成物は44%の蛋白質と0.8%のリボ核酸を含有し
ている。
即ち、核酸に対する蛋白質の割合は55:1である。出
発物質は37.3%の蛋白質と8.58%のリボ核酸と
を含有している。即ち、核酸に対する蛋白質の割合は4
.35:1である。実施例G リボヌクレァーゼ活性を実質的に破壊するそことなくプ
ロテアーゼ活性を破壊するための任意の予備処理前記の
方法で培養したF.亀amlneammFERM−PN
o.3721(IMI145425)を採取しブフナー
櫨過システムにより洗浄した。
発物質は37.3%の蛋白質と8.58%のリボ核酸と
を含有している。即ち、核酸に対する蛋白質の割合は4
.35:1である。実施例G リボヌクレァーゼ活性を実質的に破壊するそことなくプ
ロテアーゼ活性を破壊するための任意の予備処理前記の
方法で培養したF.亀amlneammFERM−PN
o.3721(IMI145425)を採取しブフナー
櫨過システムにより洗浄した。
次に細胞を65℃、スラリー濃度約1夕/そで蒸留水中
に懸濁させた。斑は種々の時間にわたり8.5の調節し
た。この予備処理後、細胞に、65o0、pH6で20
分間の等温処理を施した。結果 城物中織跡城跡露 処理のRNAのANのTN損失協■ (鯛燐 対照8376.268310三軍負号事亨多分・。
に懸濁させた。斑は種々の時間にわたり8.5の調節し
た。この予備処理後、細胞に、65o0、pH6で20
分間の等温処理を施した。結果 城物中織跡城跡露 処理のRNAのANのTN損失協■ (鯛燐 対照8376.268310三軍負号事亨多分・。
970391243411.317239.4935.
021.527.219.3835.45252724
9.38314結論RNAを最大量除去し同時に重量損
失とアミノ窒素の損失とを最4・にするのに最適の条件
は、65℃、pH8.5で1分間処理し、次いで65℃
、餌6でJ20分間等温処理を実施することである。
021.527.219.3835.45252724
9.38314結論RNAを最大量除去し同時に重量損
失とアミノ窒素の損失とを最4・にするのに最適の条件
は、65℃、pH8.5で1分間処理し、次いで65℃
、餌6でJ20分間等温処理を実施することである。
フサリウムグラミニアラムFERM一PNo.3721
(IMI145425)以外の種々の微生物に於ける核
酸含有率低下処理の成功例実施例日」フサリウムソラニ
(Fusarlumsolani)IMI154217
を下記の方法で培養した。
(IMI145425)以外の種々の微生物に於ける核
酸含有率低下処理の成功例実施例日」フサリウムソラニ
(Fusarlumsolani)IMI154217
を下記の方法で培養した。
蒸留水中の培養基・MgS〇4・7日2〇0.25夕/
そKH2P〇415.夕/夕(N比)2S042.83
夕/そビオチン0.05奴/夕(1雌/泌の原液)コリ
ン50の9/そ痕跡元素5凧【/〆(原液)NaOHI
夕/ZpH6.0グルコース10%溶液(殺菌後20叫
を加える)最4・限の塩良Pち痕跡元素原液ZnC12
1タノ夕MnC12・4日2〇1夕/そFeC13・母
L02タノ〆CuC12・汎200.2夕/クNaMn
04・汎200.2夕/そC。
そKH2P〇415.夕/夕(N比)2S042.83
夕/そビオチン0.05奴/夕(1雌/泌の原液)コリ
ン50の9/そ痕跡元素5凧【/〆(原液)NaOHI
夕/ZpH6.0グルコース10%溶液(殺菌後20叫
を加える)最4・限の塩良Pち痕跡元素原液ZnC12
1タノ夕MnC12・4日2〇1夕/そFeC13・母
L02タノ〆CuC12・汎200.2夕/クNaMn
04・汎200.2夕/そC。
CI2・母L〇0‐2夕/そCaC12・2比02夕/
そ殺菌グルコースを除く全成分を共に殺菌し、1その培
養基に必要な量のこれらの物質を溶解して850の‘に
し、5個の1タフラスコに分配して各フラスコに170
犯‘入れた。
そ殺菌グルコースを除く全成分を共に殺菌し、1その培
養基に必要な量のこれらの物質を溶解して850の‘に
し、5個の1タフラスコに分配して各フラスコに170
犯‘入れた。
グルコースの10%W/V溶液を調製し万能ボトルの2
0の‘部分に於て殺菌した。15p.s.iのオートク
レープに於て15分間殺菌処理を実施した。
0の‘部分に於て殺菌した。15p.s.iのオートク
レープに於て15分間殺菌処理を実施した。
育成条件
10のZの胞子懸濁液(spores岬pension
)を用し・て接種を行なう前に、殺菌グルコース溶液の
1ボトルの内容物を各フラスコに加えた。
)を用し・て接種を行なう前に、殺菌グルコース溶液の
1ボトルの内容物を各フラスコに加えた。
落差2インチ、回転速度16爪.p.m.、温度30q
oのオービタルシェーカ‐(びbitaIShaker
)上で培養を行った。4雛時間後に培養物を採取した。
oのオービタルシェーカ‐(びbitaIShaker
)上で培養を行った。4雛時間後に培養物を採取した。
核酸低下処理
細胞を収集してブフナー櫨過システムにより洗浄し、約
10夕/そのスラリー濃度で、温度64つ0、NaOH
及び日2S04を用いて府6に調整した水道水中に於て
懸濁させた。
10夕/そのスラリー濃度で、温度64つ0、NaOH
及び日2S04を用いて府6に調整した水道水中に於て
懸濁させた。
結果
微生物処理鷲藻曇礎圭ミ素
−一一一(織
F.solani
無処理−5.155.4
機磯底下102.955.92
200.676.11
300.556.00
結論
この処理により核酸含有率は効果的に低下した。
実施例1
フサリウムオキシスポラム(F雌arl肌lo刈spo
mm)IMI154214をF・solaniについて
上記したと同機な方法で培養した。
mm)IMI154214をF・solaniについて
上記したと同機な方法で培養した。
但し本実施例に於ては、育成培地は実施例日の表に記し
た化学薬品に加えて0.5夕/そのオキソイドイースト
(o刈idyeast)抽出物と0.5夕/そのマイコ
ロジカルベプトン(mycologcalpepton
e)とを含有していた。細胞を7幼時間後に採取した実
施例日と同様に核酸低下処理を施した。
た化学薬品に加えて0.5夕/そのオキソイドイースト
(o刈idyeast)抽出物と0.5夕/そのマイコ
ロジカルベプトン(mycologcalpepton
e)とを含有していた。細胞を7幼時間後に採取した実
施例日と同様に核酸低下処理を施した。
夕
結果
微生物処理韻曇殺ぎ幸
例協働
OPoxysporum無処理−6576.28機鱗氏
下101.007.4720065745 30054,753 結論 この処理により核酸含有率は効果的に低下した。
下101.007.4720065745 30054,753 結論 この処理により核酸含有率は効果的に低下した。
実施例J
パイロットプラントに於て実施するための核酸低下処理
前記の方法で培養したF.餌amlneammFERM
−PNo.3721(IMI145425)を下記の如
く成育培養基から分離せずに処理した。
前記の方法で培養したF.餌amlneammFERM
−PNo.3721(IMI145425)を下記の如
く成育培養基から分離せずに処理した。
1濃度20夕/その菌糸体スラリーを温度30oo、p
H6に於て発酵装置よりとり出し、モノポンプに入れる
。
H6に於て発酵装置よりとり出し、モノポンプに入れる
。
2この菌糸体スラリーをスチームィンジェクタにポンプ
で送り、この物質の温度を30つ0から64℃に、急速
に上昇させる。
で送り、この物質の温度を30つ0から64℃に、急速
に上昇させる。
温度上昇は瞬時(実際には5秒未満)であることが望ま
しい。36400、pH6のこの物質をパイプに通し、
45分間この温度を保つ。
しい。36400、pH6のこの物質をパイプに通し、
45分間この温度を保つ。
4この物質を熱交換器に通し、約20qCに冷却する(
後ほど細菌汚染が生ずる可能性を減少させるため)。
後ほど細菌汚染が生ずる可能性を減少させるため)。
5スラリーを回転真空フィル夕の樋内を通過させる6フ
ィル夕べルトを通して液体を流し、菌糸体をフィルタ上
に集める。
ィル夕べルトを通して液体を流し、菌糸体をフィルタ上
に集める。
フィルタドラムを菌糸体ケーキを有する液体面より上方
で回転させる。7フィルタケーキを2ベッド量(戊d volume)の水で洗浄する。
で回転させる。7フィルタケーキを2ベッド量(戊d volume)の水で洗浄する。
フィルタドラムを引続き回転させ、真空吸引力によりケ
ーキの含水率を約70%にする。8菌糸体ケーキをドラ
ムから掻取る。
ーキの含水率を約70%にする。8菌糸体ケーキをドラ
ムから掻取る。
9菌糸体ケーキを水中で再びスラリー化した後スプレー
乾燥する。
乾燥する。
結果
RNAァミノ鞍麓素
処理含有率含有率含有率
協係)燐
乾燥未処理物質8226458.74乾燥核駿含有率低
下物質0.436.86830結論この処理により核酸
含有率は効果的に低下した。
下物質0.436.86830結論この処理により核酸
含有率は効果的に低下した。
発酵処理条件に於て、0.2皿rs‐1に及ぶ更に高い
希釈率、例えば0.17h岱‐1の希釈率を用い得る。
希釈率、例えば0.17h岱‐1の希釈率を用い得る。
Claims (1)
- 1 フサリウム属の成育した無毒性菌株をpH4.7〜
7.0、温度55〜72℃で懸濁液中に少なくとも60
秒間維持することから成る食用蛋白質含有物質製造に於
ける核酸含有率低下方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB4470873A GB1440642A (en) | 1973-09-24 | 1973-09-24 | Production of edible protein containing substances |
| GB44708/73 | 1973-09-24 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5063197A JPS5063197A (ja) | 1975-05-29 |
| JPS605278B2 true JPS605278B2 (ja) | 1985-02-09 |
Family
ID=10434420
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
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