JPS6111592B2 - - Google Patents
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- JPS6111592B2 JPS6111592B2 JP57183421A JP18342182A JPS6111592B2 JP S6111592 B2 JPS6111592 B2 JP S6111592B2 JP 57183421 A JP57183421 A JP 57183421A JP 18342182 A JP18342182 A JP 18342182A JP S6111592 B2 JPS6111592 B2 JP S6111592B2
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- glucanase
- pape
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
- C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
- C12Y302/01039—Glucan endo-1,3-beta-D-glucosidase (3.2.1.39)
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/06—Lysis of microorganisms
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2405—Glucanases
- C12N9/2434—Glucanases acting on beta-1,4-glucosidic bonds
- C12N9/244—Endo-1,3(4)-beta-glucanase (3.2.1.6)
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/96—Stabilising an enzyme by forming an adduct or a composition; Forming enzyme conjugates
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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- C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
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Description
本発明は真菌溶解酵素であるβ−１・３−Ｄ−
グルカナーゼの真菌溶解活性（以下溶菌活性とい
う）の活性化法に関する。 β−１・３−Ｄ−グルカナーゼは、真菌の細胞
壁を溶解したり、低浸透圧下では真菌自体を溶解
（溶菌）する微生物由来の酵素であつて、広い分
野で多種多様の用途に使用されている。例えば、
ビール工業や酒造業においては培養タンクや材
の洗浄に、食品工業や医薬品工業では、酵母など
の真菌類から物理化学的に不安定な栄養物、ビタ
ミン、酵素などを抽出する際に障害となる細胞壁
を最も緩和に除去する手段として、そして微生物
工学の分野では細胞融合や核外遺伝子を導入する
際に必要なプロトプラストの調製に、様々な微生
物由来の、そして様々な精製段階のβ−１・３−
Ｄ−グルカナーゼが使用されている。さらに、こ
の真菌溶解酵素を義歯洗浄剤あるいは真菌感染症
の治療剤として使用しようとする試みもある。 上記した如く、β−１・３−Ｄ−グルカナーゼ
は種々の微生物から単離されているが（後記文献
１〜６参照）、市販されているものとしては、
Zymolyase5000およびZymolyase60000（製
造、麒麟麦酒；販売、生化学工業、Arthrobacter
luteus由来）、Kitalase（製造、クミアイ化学
工業、Rhizoctonia solani由来）、YL−５（製
造、天野製薬、Achromobacter iunatus由来）、
Celeflo（製造、Novo Industria、Bacillus、
subtilis由来）、Novozym234（製造、Novo
Imdustria、Trichoderma horzianum由来）、
Finizym（製造、Novo Industria、
Aspergillus、niger由来）などが挙げられる。こ
れらの市販のβ−１・３−Ｄ−グルカナーゼは、
いずれも上記の種々の用途に使用し得るものであ
るが、一般的にいつて工業用のものは力価が低
く、試薬用のものは力価は高いが非常に高価であ
る。従つて従来から、β−１・３−Ｄ−グルカナ
ーゼの溶菌活性を活性化する方法が多くの研究者
によつて検討されて来た。例えば、T.Kanekoら
は、２−メルカプトエタノール、チオグリコール
酸ナトリウム、システインおよび亜硫酸ナトリウ
ムなどの還元剤によつてCandida lipolyticaの生
菌の溶菌活性が10〜20％上昇すること、およびあ
る種の界面活性剤の前処理によつて酵母の溶菌感
受性が上昇することを報告している（文献７）。
また、K.Kitamuraらによれば、亜硫酸ナトリウ
ムと塩化カリウムを併用するとパン酵母の溶菌活
性が約50％上昇するという（文献８）。 上記の方法は、β−１・３−Ｄ−グルカナーゼ
の溶菌活性を活性化するという点ではいずれも有
用なものであるが、それぞれ欠点を有し、理想的
な方法とは言い難い。即ち、還元剤は一般に高価
であり、かつあらゆる目的に使用し得るものでは
なく、また、上記文献７に記載された界面活性
剤、即ち、ナトリウムドデシルサルフエート、ナ
トリウムドデシルベンゼンスルホネート、セチル
トリメチルアンモニウムクロリド、セチルピリジ
ニウムブロミド、ツウイーン20および80はさほど
顕著な活性化作用を有するものではない。 本発明者らは、β−１・３−Ｄ−グルカナーゼ
が種々の異なつた目的に使用されることから、使
用目的に応じて適当な活性化物質を選択し得るこ
とが必要であると感じ、広範囲の物質群について
検討した結果、ラウロイルサルコシン酸ナトリ
ウムに代表されるＮ−アシルサルコシン系陰イオ
ン界面活性剤、ポリオキシエチレンアルキルフ
エニルエーテル（以下PAPEと略す）、ポリオキ
シエチレンアルキルエーテル、（以下PAEと略
す）およびポリオキシエチレンポリオキシプロピ
レンアルキルエーテルからなる群から選ばれる非
イオン界面活性剤、塩化ベンザルコニウム、ア
ンモニウムクロリドおよびグルクロン酸クロルヘ
キシジンからなる群から選ばれる陽イオン殺菌
剤、メチルパラベンおよびプロピルパラベンか
らなる群から選ばれるパラオキシ安息香酸エステ
ル系防腐剤、および動物起源の蛋白質分解酵素
（例えばトリプシン）および微生物起源の蛋白質
分解酵素（例えばプロナーゼＥ（科研化学社
製）およびアルカラーゼ（Novo Industria（デ
ンマーク）社製）など）からなる群から選ばれる
蛋白質分解酵素の少なくとも１種またはそれらの
混合物がβ−１・３−Ｄ−グルカナーゼの溶菌活
性の活性化作用を有することを見出し、本発明を
完成するに至つた。 以下に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明
する。尚、以下の実施例において、溶菌活性の基
質として、対数増殖期のCandida albicans（酵
母）IFO1385、Candida tropicalis IFO1400、
Candida guilliermondii IFO0566、Torulopsis
inconspicua IFO0621、Torulopsis glabrata
IFO0622およびSaccharomyces cerevisiae
A224Aを用いた。これらの菌株は広島大学歯学
部口腔細菌学教室から入手した。 実施例 １ β−１・３−Ｄ−グルカナーゼ活性化物質 サブローブドウ糖培地（Difco）での前培養を
経て培養した対数増殖期のCandida albicans
IFO1385株を遠心分離し、蒸留水で洗浄した後、
660nｍにおける濁度が約１になる様に蒸留水に
懸濁させる。この酵母の生菌懸濁液３mlに、それ
ぞれ50ｍＭ燐酸緩衝液に溶解したβ−１・３−Ｄ
−グルカナーゼ（Zymolyase5000）溶液１mlお
よび下記の表１に示す被験物質溶液１mlを加え、
37℃で振盪し、10分、30分、および60分後の
660nｍにおける濁度を測定し、次式により被験
物質の溶菌活性を計算した。 溶菌活性＝OD減少率（％）＝ＯＤｉ−ＯＤｔ／ＯＤｉ×
100 ここでODiは反応開始時の、ODtはｔ分後の
660nｍにおける濁度を表わす。 結果を以下の表１に示す。
グルカナーゼの真菌溶解活性（以下溶菌活性とい
う）の活性化法に関する。 β−１・３−Ｄ−グルカナーゼは、真菌の細胞
壁を溶解したり、低浸透圧下では真菌自体を溶解
（溶菌）する微生物由来の酵素であつて、広い分
野で多種多様の用途に使用されている。例えば、
ビール工業や酒造業においては培養タンクや材
の洗浄に、食品工業や医薬品工業では、酵母など
の真菌類から物理化学的に不安定な栄養物、ビタ
ミン、酵素などを抽出する際に障害となる細胞壁
を最も緩和に除去する手段として、そして微生物
工学の分野では細胞融合や核外遺伝子を導入する
際に必要なプロトプラストの調製に、様々な微生
物由来の、そして様々な精製段階のβ−１・３−
Ｄ−グルカナーゼが使用されている。さらに、こ
の真菌溶解酵素を義歯洗浄剤あるいは真菌感染症
の治療剤として使用しようとする試みもある。 上記した如く、β−１・３−Ｄ−グルカナーゼ
は種々の微生物から単離されているが（後記文献
１〜６参照）、市販されているものとしては、
Zymolyase5000およびZymolyase60000（製
造、麒麟麦酒；販売、生化学工業、Arthrobacter
luteus由来）、Kitalase（製造、クミアイ化学
工業、Rhizoctonia solani由来）、YL−５（製
造、天野製薬、Achromobacter iunatus由来）、
Celeflo（製造、Novo Industria、Bacillus、
subtilis由来）、Novozym234（製造、Novo
Imdustria、Trichoderma horzianum由来）、
Finizym（製造、Novo Industria、
Aspergillus、niger由来）などが挙げられる。こ
れらの市販のβ−１・３−Ｄ−グルカナーゼは、
いずれも上記の種々の用途に使用し得るものであ
るが、一般的にいつて工業用のものは力価が低
く、試薬用のものは力価は高いが非常に高価であ
る。従つて従来から、β−１・３−Ｄ−グルカナ
ーゼの溶菌活性を活性化する方法が多くの研究者
によつて検討されて来た。例えば、T.Kanekoら
は、２−メルカプトエタノール、チオグリコール
酸ナトリウム、システインおよび亜硫酸ナトリウ
ムなどの還元剤によつてCandida lipolyticaの生
菌の溶菌活性が10〜20％上昇すること、およびあ
る種の界面活性剤の前処理によつて酵母の溶菌感
受性が上昇することを報告している（文献７）。
また、K.Kitamuraらによれば、亜硫酸ナトリウ
ムと塩化カリウムを併用するとパン酵母の溶菌活
性が約50％上昇するという（文献８）。 上記の方法は、β−１・３−Ｄ−グルカナーゼ
の溶菌活性を活性化するという点ではいずれも有
用なものであるが、それぞれ欠点を有し、理想的
な方法とは言い難い。即ち、還元剤は一般に高価
であり、かつあらゆる目的に使用し得るものでは
なく、また、上記文献７に記載された界面活性
剤、即ち、ナトリウムドデシルサルフエート、ナ
トリウムドデシルベンゼンスルホネート、セチル
トリメチルアンモニウムクロリド、セチルピリジ
ニウムブロミド、ツウイーン20および80はさほど
顕著な活性化作用を有するものではない。 本発明者らは、β−１・３−Ｄ−グルカナーゼ
が種々の異なつた目的に使用されることから、使
用目的に応じて適当な活性化物質を選択し得るこ
とが必要であると感じ、広範囲の物質群について
検討した結果、ラウロイルサルコシン酸ナトリ
ウムに代表されるＮ−アシルサルコシン系陰イオ
ン界面活性剤、ポリオキシエチレンアルキルフ
エニルエーテル（以下PAPEと略す）、ポリオキ
シエチレンアルキルエーテル、（以下PAEと略
す）およびポリオキシエチレンポリオキシプロピ
レンアルキルエーテルからなる群から選ばれる非
イオン界面活性剤、塩化ベンザルコニウム、ア
ンモニウムクロリドおよびグルクロン酸クロルヘ
キシジンからなる群から選ばれる陽イオン殺菌
剤、メチルパラベンおよびプロピルパラベンか
らなる群から選ばれるパラオキシ安息香酸エステ
ル系防腐剤、および動物起源の蛋白質分解酵素
（例えばトリプシン）および微生物起源の蛋白質
分解酵素（例えばプロナーゼＥ（科研化学社
製）およびアルカラーゼ（Novo Industria（デ
ンマーク）社製）など）からなる群から選ばれる
蛋白質分解酵素の少なくとも１種またはそれらの
混合物がβ−１・３−Ｄ−グルカナーゼの溶菌活
性の活性化作用を有することを見出し、本発明を
完成するに至つた。 以下に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明
する。尚、以下の実施例において、溶菌活性の基
質として、対数増殖期のCandida albicans（酵
母）IFO1385、Candida tropicalis IFO1400、
Candida guilliermondii IFO0566、Torulopsis
inconspicua IFO0621、Torulopsis glabrata
IFO0622およびSaccharomyces cerevisiae
A224Aを用いた。これらの菌株は広島大学歯学
部口腔細菌学教室から入手した。 実施例 １ β−１・３−Ｄ−グルカナーゼ活性化物質 サブローブドウ糖培地（Difco）での前培養を
経て培養した対数増殖期のCandida albicans
IFO1385株を遠心分離し、蒸留水で洗浄した後、
660nｍにおける濁度が約１になる様に蒸留水に
懸濁させる。この酵母の生菌懸濁液３mlに、それ
ぞれ50ｍＭ燐酸緩衝液に溶解したβ−１・３−Ｄ
−グルカナーゼ（Zymolyase5000）溶液１mlお
よび下記の表１に示す被験物質溶液１mlを加え、
37℃で振盪し、10分、30分、および60分後の
660nｍにおける濁度を測定し、次式により被験
物質の溶菌活性を計算した。 溶菌活性＝OD減少率（％）＝ＯＤｉ−ＯＤｔ／ＯＤｉ×
100 ここでODiは反応開始時の、ODtはｔ分後の
660nｍにおける濁度を表わす。 結果を以下の表１に示す。
【表】
【表】
Ｒ○
＊1) BL〓9EX (日光ケミカル社製)使用
Ｒ○
＊2) NP〓10 (日光ケミカル社製)使用
上記の表１から明らかな様に、表１に挙げた被
験物質は、全て顕著なβ−１・３−Ｄ−グルカナ
ーゼの溶菌活性の活性化作用を示した。尚、塩化
ベンザルコニウムおよびグルクロン酸クロルヘキ
シジンは、低濃度で強力な活性化作用を示した
が、高濃度ではむしろ酵素の溶菌活性を阻害し
た。 実施例 ２ 活性化剤の併用効果 実施例１の実験の結果、PAPEおよびグルクロ
ン酸クロルヘキシジンは、いずれも著しい活性化
作用を有することがわかつたが、反応液を検鏡し
た結果、溶菌していない酵母細胞が若干残存して
いることがわかつた。そこでこれらの化合物を併
用した場合、完全な溶菌が起るかどうかを実施例
１と同様に操作して調べた。結果を第１図に示
す。 第１図において、Ａ，Ｂ，Ｃ，ＤおよびＥは以
下の意義を有する。 Ａ……PAPE（NP−10使用）＋グルクロン酸ク
ロルヘキシジン（コントロール） Ｂ……Zymolyase5000（コントロール） Ｃ……Zymolyase5000＋PAPE Ｄ……Zymolyase5000＋グルクロン酸クロルヘ
キシジン Ｅ……Zymolyase5000＋PAPE＋グルクロン酸
クロルヘキシジン 尚、Zymolyase5000、PAPEおよびグルクロ
ン酸クロルヘキシジンの終濃度は、それぞれ0.5
mg/ml、0.05％および0.001％とした。 図から明らかな様に、PAPEとグルクロン酸ク
ロルヘキシジンを併用した場合、単独使用の場合
と比べて初期の溶菌活性が非常に強力であり、30
分後には95％以上のOD減少率を示した。尚、こ
の時点で検鏡したところ、ほぼ全ての菌が溶菌し
ていることがわかつた。 上記の如き併用効果は、グルクロン酸クロルヘ
キシジンとPAEとの間、及び塩化ベンザルコニ
ウムとPAPEおよびPAEとの間にもみられた。 実施例 ３ 各種菌株の生菌に対する、起源の異なる各種β
−１・３−Ｄ−グルカナーゼの溶菌活性に及ぼ
す活性化剤の併用効果 実施例１と同様の方法で、６種の菌株の生菌に
対するZymolyase5000、Novozym234および
Kitalaseの溶菌活性を及ぼすPAPE（NP−10
使用）と塩化ベンザルコニウムの併用効果を調べ
た。結果を以下の表２に示す。
＊1) BL〓9EX (日光ケミカル社製)使用
Ｒ○
＊2) NP〓10 (日光ケミカル社製)使用
上記の表１から明らかな様に、表１に挙げた被
験物質は、全て顕著なβ−１・３−Ｄ−グルカナ
ーゼの溶菌活性の活性化作用を示した。尚、塩化
ベンザルコニウムおよびグルクロン酸クロルヘキ
シジンは、低濃度で強力な活性化作用を示した
が、高濃度ではむしろ酵素の溶菌活性を阻害し
た。 実施例 ２ 活性化剤の併用効果 実施例１の実験の結果、PAPEおよびグルクロ
ン酸クロルヘキシジンは、いずれも著しい活性化
作用を有することがわかつたが、反応液を検鏡し
た結果、溶菌していない酵母細胞が若干残存して
いることがわかつた。そこでこれらの化合物を併
用した場合、完全な溶菌が起るかどうかを実施例
１と同様に操作して調べた。結果を第１図に示
す。 第１図において、Ａ，Ｂ，Ｃ，ＤおよびＥは以
下の意義を有する。 Ａ……PAPE（NP−10使用）＋グルクロン酸ク
ロルヘキシジン（コントロール） Ｂ……Zymolyase5000（コントロール） Ｃ……Zymolyase5000＋PAPE Ｄ……Zymolyase5000＋グルクロン酸クロルヘ
キシジン Ｅ……Zymolyase5000＋PAPE＋グルクロン酸
クロルヘキシジン 尚、Zymolyase5000、PAPEおよびグルクロ
ン酸クロルヘキシジンの終濃度は、それぞれ0.5
mg/ml、0.05％および0.001％とした。 図から明らかな様に、PAPEとグルクロン酸ク
ロルヘキシジンを併用した場合、単独使用の場合
と比べて初期の溶菌活性が非常に強力であり、30
分後には95％以上のOD減少率を示した。尚、こ
の時点で検鏡したところ、ほぼ全ての菌が溶菌し
ていることがわかつた。 上記の如き併用効果は、グルクロン酸クロルヘ
キシジンとPAEとの間、及び塩化ベンザルコニ
ウムとPAPEおよびPAEとの間にもみられた。 実施例 ３ 各種菌株の生菌に対する、起源の異なる各種β
−１・３−Ｄ−グルカナーゼの溶菌活性に及ぼ
す活性化剤の併用効果 実施例１と同様の方法で、６種の菌株の生菌に
対するZymolyase5000、Novozym234および
Kitalaseの溶菌活性を及ぼすPAPE（NP−10
使用）と塩化ベンザルコニウムの併用効果を調べ
た。結果を以下の表２に示す。
【表】
表２から明らかな様に、PAPEと塩化ベンザル
コニウムを併用すると、いずれの菌株に於いて
も、顕著な活性化作用を示した。特に、
Zymolyase5000に対して感受性の低いC.
tropicalis IFO1400とT.inconspicua IFO0621で
は、それぞれ78％および95％の活性の上昇がみら
れた。この様なβ−１・３−Ｄ−グルカナーゼの
溶菌活性の活性化作用はKitalaseおよび
Novozym234にも見られ、このことから、本発
明に係る活性化剤はあらゆる起源のβ−１・３−
Ｄ−グルカナーゼの溶菌活性の活性化に有効であ
り、かつ表２に示した全ての菌株に適用し得るこ
とがわかる。 文 献 (1) A.E.Moore and B.A.Stone、1972.A β−
１・３−glucan hydrolase from Nicotiana
glutinosa 1.Extraction、purification and
physical properties.、Biochem.Biophys.
Acta、258：238−247. (2) J.P.G.Ballesta and M.Alexander、1972.
Susceptibility of several basidiomycetes to
microbial lysis.、Trans.Br.mycol.Soc.、58：
481−487. (3) K.Horikoshi and Y.Atsukawa、1973.β−
１・３−Glucanase produced by alkalophilic
bacteria Bacillus No.K−12−5.、Agr.Biol.
Chem.、37：1449−1456. (4) G.H.Fleet and H.J.Phaff、1974.Lysis of
yeast cell walls：Glucanases from Bacillus
circulans WL−12.、J.Bacteriol.、119：207−
219. (5) T.Obata、K.Fujioka、S.Hara and Y.
Namba、1977.The synergistic effect among
β−１・３−glucanases from Oerskovia
sp.CK on lysis of viable yeast cells.、Agr.
Biol.Chem.、41：671−677. (6) デビツド・アレン・ルイズ・デービエス、ア
ンソニー・マイクル・サムウエル・ポープ、昭
和54年、細胞溶解性酵素含有医薬組成品ならび
にその製造法、日本公開特許公報、昭54−
2310。 (7) T.Kaneko、K.Kitamura and Y.
Yamamoto、1973.Susceptibilities of yeasts
to yeast cell wall lytic enzymes of
Arthrobacter luteus.Agr.Biol.Chem.、37：
2295−2302. (8) K.Kitamura and Y.Yamamoto、1981.Lysis
of yeast cells showing low susceptibility to
Zymolyase.、Agr.Biol.Chem.、45：1761−
1766.
コニウムを併用すると、いずれの菌株に於いて
も、顕著な活性化作用を示した。特に、
Zymolyase5000に対して感受性の低いC.
tropicalis IFO1400とT.inconspicua IFO0621で
は、それぞれ78％および95％の活性の上昇がみら
れた。この様なβ−１・３−Ｄ−グルカナーゼの
溶菌活性の活性化作用はKitalaseおよび
Novozym234にも見られ、このことから、本発
明に係る活性化剤はあらゆる起源のβ−１・３−
Ｄ−グルカナーゼの溶菌活性の活性化に有効であ
り、かつ表２に示した全ての菌株に適用し得るこ
とがわかる。 文 献 (1) A.E.Moore and B.A.Stone、1972.A β−
１・３−glucan hydrolase from Nicotiana
glutinosa 1.Extraction、purification and
physical properties.、Biochem.Biophys.
Acta、258：238−247. (2) J.P.G.Ballesta and M.Alexander、1972.
Susceptibility of several basidiomycetes to
microbial lysis.、Trans.Br.mycol.Soc.、58：
481−487. (3) K.Horikoshi and Y.Atsukawa、1973.β−
１・３−Glucanase produced by alkalophilic
bacteria Bacillus No.K−12−5.、Agr.Biol.
Chem.、37：1449−1456. (4) G.H.Fleet and H.J.Phaff、1974.Lysis of
yeast cell walls：Glucanases from Bacillus
circulans WL−12.、J.Bacteriol.、119：207−
219. (5) T.Obata、K.Fujioka、S.Hara and Y.
Namba、1977.The synergistic effect among
β−１・３−glucanases from Oerskovia
sp.CK on lysis of viable yeast cells.、Agr.
Biol.Chem.、41：671−677. (6) デビツド・アレン・ルイズ・デービエス、ア
ンソニー・マイクル・サムウエル・ポープ、昭
和54年、細胞溶解性酵素含有医薬組成品ならび
にその製造法、日本公開特許公報、昭54−
2310。 (7) T.Kaneko、K.Kitamura and Y.
Yamamoto、1973.Susceptibilities of yeasts
to yeast cell wall lytic enzymes of
Arthrobacter luteus.Agr.Biol.Chem.、37：
2295−2302. (8) K.Kitamura and Y.Yamamoto、1981.Lysis
of yeast cells showing low susceptibility to
Zymolyase.、Agr.Biol.Chem.、45：1761−
1766.
第１図はβ−１・３−Ｄ−グルカナーゼの溶菌
活性に及ぼすPAPEとグルクロン酸クロルヘキシ
ジンの併用効果を表わすグラフである。 Ａ……PAPE＋グルクロン酸クロルヘキシジ
ン、Ｂ……Zymolyase5000、Ｃ……Zymolyase
5000＋PAPE、Ｄ……Zymolyase5000＋グル
クロン酸クロルヘキシジン、Ｅ……Zymolyase
5000＋PAPE＋グルクロン酸クロルヘキシジン。
活性に及ぼすPAPEとグルクロン酸クロルヘキシ
ジンの併用効果を表わすグラフである。 Ａ……PAPE＋グルクロン酸クロルヘキシジ
ン、Ｂ……Zymolyase5000、Ｃ……Zymolyase
5000＋PAPE、Ｄ……Zymolyase5000＋グル
クロン酸クロルヘキシジン、Ｅ……Zymolyase
5000＋PAPE＋グルクロン酸クロルヘキシジン。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ Ｎ−アシルサルコシン系陰イオン界面活性
剤、ポリオキシエチレンアルキルフエニルエーテ
ル、ポリオキシエチレンアルキルエーテルおよび
ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキ
ルエーテルからなる群から選ばれる非イオン界面
活性剤、塩化ベンザルコニウム、アンモニウムク
ロリドおよびグルクロン酸クロルヘキシジンから
なる群から選ばれる陽イオン殺菌剤、メチルパラ
ベンおよびプロピルパラベンからなる群から選ば
れるパラオキシ安息香酸エステル系防腐剤、およ
び蛋白質分解酵素から選ばれる少なくとも一種の
化合物をβ−１・３−Ｄ−グルカナーゼと共に使
用することを特徴とするβ−１・３−Ｄ−グルカ
ナーゼの真菌溶解活性の活性化法。 ２ β−１・３−Ｄ−グルカナーゼがZymolyase
5000、Zymolyase60000、Kitalase、YL−
５、Celeflo、Novozym234またはFinizym
である第１項に記載の方法。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57183421A JPS5971688A (ja) | 1982-10-18 | 1982-10-18 | β−１，３−Ｄ−グルカナ−ゼの真菌溶解活性の活性化法 |
| DE19833337566 DE3337566A1 (de) | 1982-10-18 | 1983-10-15 | Verfahren zur verstaerkung der fungus-lytischen aktivitaet von ss-1,3-d-glucanase |
| US06/542,861 US4576914A (en) | 1982-10-18 | 1983-10-17 | Method for enhancing a fungus-lytic activity of β-1,3-D-glucanase |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57183421A JPS5971688A (ja) | 1982-10-18 | 1982-10-18 | β−１，３−Ｄ−グルカナ−ゼの真菌溶解活性の活性化法 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60245129A Division JPS61199785A (ja) | 1985-10-30 | 1985-10-30 | β−１，３−Ｄ−グルカナ−ゼの真菌溶解活性を活性化する方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5971688A JPS5971688A (ja) | 1984-04-23 |
| JPS6111592B2 true JPS6111592B2 (ja) | 1986-04-03 |
Family
ID=16135481
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57183421A Granted JPS5971688A (ja) | 1982-10-18 | 1982-10-18 | β−１，３−Ｄ−グルカナ−ゼの真菌溶解活性の活性化法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4576914A (ja) |
| JP (1) | JPS5971688A (ja) |
| DE (1) | DE3337566A1 (ja) |
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| EP0556521A1 (en) * | 1992-01-09 | 1993-08-25 | Becton, Dickinson and Company | Sample processing using disinfectant |
| US5919688A (en) * | 1994-10-14 | 1999-07-06 | Novo Nordisk A/S | Enzyme with B-1, 3-glucanase activity |
| KR100285275B1 (ko) * | 1998-06-23 | 2001-05-02 | 김충섭 | 개질효소 및 그 개질방법 |
| US20050037039A1 (en) * | 2003-08-12 | 2005-02-17 | Yarbrough William M. | Composition for treatment of tinea pedis and method of use |
| EP1908449B1 (en) * | 2005-07-26 | 2011-12-14 | Two Cells Co., Ltd | Sterilizer selective to cariogenic bacterium, and method for sterilization of cariogenic bacterium |
| JP7296110B2 (ja) * | 2019-07-25 | 2023-06-22 | 富次郎 原 | 抗菌剤、農薬、および微生物による植物伝染病害の防除方法 |
| CN116004699A (zh) * | 2022-08-09 | 2023-04-25 | 重庆市中药研究院 | 一种peg介导的腐皮镰刀菌原生质体遗传转化的方法 |
| CN115505583A (zh) * | 2022-10-09 | 2022-12-23 | 武汉新华扬生物股份有限公司 | 一种液体酶保护剂及其应用 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4335101A (en) * | 1971-08-10 | 1982-06-15 | Merck & Co., Inc. | Oral hygiene enzymes and method for preparation |
| US3969189A (en) * | 1971-12-14 | 1976-07-13 | Kumiai Chemical Industry Co., Ltd. | Cell wall-lysing complex enzymes and a process for the production thereof |
| US3761353A (en) * | 1972-01-13 | 1973-09-25 | Rohm & Haas | Enzymatic protein solubilization |
| GB1446203A (en) * | 1973-02-28 | 1976-08-18 | Novo Industri As | Preparation of an enzyme product |
| US4067773A (en) * | 1975-09-02 | 1978-01-10 | William Zinsser & Co. | Enzyme-containing article for removing paper adhered to a surface |
| JPS58134014A (ja) * | 1982-02-03 | 1983-08-10 | Rooto Seiyaku Kk | 義歯洗浄用組成物 |
-
1982
- 1982-10-18 JP JP57183421A patent/JPS5971688A/ja active Granted
-
1983
- 1983-10-15 DE DE19833337566 patent/DE3337566A1/de active Granted
- 1983-10-17 US US06/542,861 patent/US4576914A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US4576914A (en) | 1986-03-18 |
| DE3337566C2 (ja) | 1989-07-20 |
| JPS5971688A (ja) | 1984-04-23 |
| DE3337566A1 (de) | 1984-04-19 |
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