JPS6132319B2

JPS6132319B2 -

Info

Publication number: JPS6132319B2
Application number: JP17232880A
Authority: JP
Inventors: Shingo Matsumura; Hiroshi Enomoto; Koji Kitaguchi; Masakuni Ozaki; Masahiko Kitano; Toshio Watabe
Original assignee: Nippon Shinyaku Co Ltd
Current assignee: Nippon Shinyaku Co Ltd
Priority date: 1980-12-05
Filing date: 1980-12-05
Publication date: 1986-07-25
Also published as: JPS57112400A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は次の一般式〔〕〔式中R¹、R²、R³及びR⁴は同一又は異なつ
て、水素又はアセチル基を表わし、R⁵及びR⁶は
水素又はメチル基を表わし、Ｘは

【式】又は

【式】を表わす。ただし、R⁵とR⁶は同一ではない。〕で表わされるコレステリルピラノシ
ド誘導体、20（ｓ）−コレステリルピラノシド誘
導体、27−ノル−25−ケトコレステリルピラノシ
ド誘導体又は20（ｓ）−27−ノル−25−ケトコレ
ステリルピラノシド誘導体及び、それらの免疫抑
制作用、抗炎症作用を有する医薬に関する。上記、一般式〔〕で示される化合物のうち好
適に使用されるものを例示すれば25−ヒドロキシ
コレステリル−β−Ｄ−グルコピラノシド誘導体
及び20（ｓ）−25−ヒドロキシコレステリルβ−
Ｄ−グルコピラノシド誘導体である。これらの化合物は全て新規物質であり、本発明
はこれらの化合物に免疫抑制作用、抗炎症作用が
あることを見出したことからなるものである。ステロイド骨格を有する化合物は多様な生物学
的活性を有しており医薬として用いられているも
のも多い。それらのうちコレステロールは生体内
に広く、量的にも充分存在し、生体膜の構成、機
能の中で重要な役割を演じていることが解明され
つつある非常に重要な化合物である。又、コレステロールから誘導される種々のステ
ロイドホルモン及び胆汁酸等も生体にとつて重要
な物質である。最近ステロイドの特定の位置が酸
化された化合物の生物学的活性に関して非常に興
味深い記載が多く見られる。７−ケトコレステロ
ール及び７−ハイドロキシコレステロールが免疫
抑制作用を有し、また７−β−ハイドロキシコレ
ステロール、７−β−ハイドロキシカンペステロ
ール及びエルゴステロールパーオキシドに正常細
胞には作用しない濃度で免疫細胞の増殖を抑制す
る作用が認められたとの記載がある（J.Chem.
Research（Ｓ）、1977、217；ibid、1977、218；
ibid、1977、219；ibid、1979、84−85）。更にコ
レステロール生合成機構の研究において、コレス
テロールの代謝産物がコレステロールの生合成を
フイードバツグ機構により抑制していることが見
いだされた。又、各組織におけるコレステロール
の生合成が細胞分裂に関与していることが知られ
ているので、これらコレステロール代謝産物の癌
治療への応用が期待される。しかしコレステロー
ルの代謝中間体そのものは非常に代謝され易いの
でin vivoでの作用は余り期待出来ない。この点
を改良するために、３位のハイドロキシ基のエス
テル化が試みられているが、未だ満足な結果は得
られていない（Science Vol.201、No.4355、498〜
501（1978））。ステロイド骨格を有する化合物は医薬として
種々のものが用いられているが、一般に副作用が
強い。例えば副腎皮質ステロイドホルモン製剤は
免疫抑制剤及び抗炎症剤として広く用いられてい
るが、副腎皮質ステロイド製剤特有の副作用、即
ち満月状顔貌、神経過敏、陶酔及び高血圧症等を
有するのでその使用は著しく制限されており、そ
の副作用の低減が渇望されている。本発明者らは、ステロール配糖体及びその誘導
体に血管補強、止血作用のあることを見い出し
た。その折これらのステロール配糖体の生理活性
の発現には２相性のあることを見い出している。
即ち、薬物投与後数時間後に強い生理活性を示し
た後、活性が低下するが、数十時間後に再び強い
活性が現れるという現象である。この事実はステ
ロール配糖体が生体内で代謝され、代謝産物が蓄
積され数十時間後に再び活性を示すものと解釈す
ることも可能である。本発明者らは以上述べた事実に注目し高い生理
活性を保持すると共に副腎ステロイドホルモン固
有の副作用を有せず化学的物理的に安定でかつ生
体内で異化作用を受けにくい化合物を求めて鋭意
研究を行つたが、その結果アグリコンとして25位
が酸化されたコレステロール、及びその20s異性
体、更には27−ノル−25−ケトコレステロールを
有するステリルピラノシド類が強い免疫抑制作
用、抗炎症作用を有し、かつ低毒性であり、代謝
を受けにくいことを見い出し本発明を完成した。本発明の免疫抑制作用、抗炎症作用を有する化
合物は一般式〔〕で示されるコレステリルピラ
ノシド誘導体、20（ｓ）−コレステリルピラノシ
ド誘導体、27−ノル−25−ケトコレステリルピラ
ノシド誘導体又は20（ｓ）−27−ノル−25−ケト
コレステリルピラノシド誘導体等である。この一般式〔〕で示される化合物としては第
１表に示す８種の化合物を例示した。これらの化合物は以下に記載する経路に従つて
合成した。

【表】式〔〕ａ又は〔〕ｂで示される化合物、ス
テリルー2′、3′、4′、6′−テトラーＯーアセチル
−β−Ｄ−グルコピラノシド類(5)、(6)、(7)、(8)は
夫々対応する式〔〕ａ又は〔〕ｂで示される
３−ヒドロキシステロール類(1)、(2)、(3)、(4)をア
セトブロモグルコシドと反応するいわゆる
Konigs−Knorr反応によつて製造される。式〔〕ａ又は〔〕ｂで示される３−ヒドロ
キシステロール類は既知化合物で種々の方法、例
えば（JCS chem：Comm、1974、15；G.
P.2415676.Biochemistory，1969、８、671.Helv.
chem.Acta、1974、57、764.ibid、1974、57、
771.）によつて製造することが出来るが、本発明
の原料としてはHelv.chem.Acta，1974、57、771
の方法に従つて製造した。反応は、式〔〕ａ又
は〔〕ｂの化合物を有機溶媒（例えば塩化メチ
レン、クロロホルム、二塩化エチレン、エーテル
又はそれ等の混合物）に溶解し、新しく調整した
酸化銀AgO、脱水剤（例えば水素化カルシウ
ム、ドライエライト）、好ましくは若干のヨウ素
の存在下に、そして好ましくは遮光下にブロモア
セトグルコシドの有機溶媒（前記溶媒）溶液を撹
拌下に滴下することによつて行なわれ容易に式
〔〕ａ又は〔〕ｂの化合物ステリル−2′、
3′、4′、6′−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グ
ルコピラノシド類(5)、(6)、(7)、(8)類を得ることが
出来る。式〔〕ａ又は〔〕ｂで示される化合
物ステリル−β−Ｄ−グルコピラノシド類(9)、
(10)、(11)、(12)は夫々対応する式〔〕ａ又は〔〕
ｂで示されるステリル−2′、3′、4′、6′−テトラ
−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド類
(5)、(6)、(7)、(8)を加水分解することによつて製造
される。反応は式〔〕ａ又は〔〕ｂの化合物を有機
溶媒（例えばメタノール、エタノール、ジオキサ
ン又はそれ等の混合物）に溶解し、アルカリ（例
えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナ
トリウム、炭酸カリウム）を固型のまゝ、もしく
は前記溶媒又は水に溶かして加えて、好ましくは
室温で撹拌することによつて行なわれ、容易に式
〔〕ａ又〔〕ｂの化合物ステリル−β−Ｄ−
グルコシド類(9)、(10)、(11)、(12)を得ることが出来
る。また式〔〕ａで示される化合物(5)、(6)は、
夫々対応する式〔〕ｂで示される化合物(7)、(8)
をメチルマグネシウムハライドと反応するグリニ
ヤール反応によつて製造される。反応は、式
〔〕ｂの化合物を有機溶媒（例えばエーテル、
テトラヒドロフラン又はそれ等の混合物）に溶解
し、撹拌しながら好ましくは窒素気流下にメチル
マグネシウムヨーダイドのエーテル溶液を滴下反
応することによつて行なわれ容易に式〔〕ａの
化合物(5)、(6)得ることが出来る。一般式〔〕ａ、〔〕ｂの化合物は免疫抑制
作用を非常に低濃度で示し、更に抗炎症作用をも
示す。以下に一般式〔〕ａ、〔〕ｂの化合物の薬
理作用有効量等を示す。マウス遅延型過敏反応に及ぼす影響（抑制作
用）。実験方法ａ使用動物：SPF−ICR、♀、14週令ｂ緬羊赤血球（SRBC）：日本生物材料セン
ターの採血後１ケ月を経過していないもの。ｃ対照薬剤：cortisone acetate（東京化成）ｄ調整方法：各薬剤とも試験管内（15mm×
105mm）でステアリン酸ポリオキシル40と充
分混和し、0.5％CMC溶液で0.25mg／Kg、１
mg／Kg、４mg／Kgとなるように調整した。投
与量はマウス当り0.2mlとした。ｅ DTH：SRBCを1.5×10⁵cells／mouse／
0.25ml静脈内免疫し、各薬剤は同時に１回経
口投与した。Controlにはステアリン酸ポリ
オキシル40の0.5％CMC溶液を0.2ml投与し
た。感作日から４日目にマウス左足蹠皮内に
SRBC1×10⁸cells／40mlを接種し、反応を誘
発、24時間後の左右の足蹠の厚さを“Sony
μ−mate”で測定し、この時の左右の厚
さの差を反応値とした。結果を第２表に示した。

【表】この様に本発明の化合物は低用量で強い免疫
抑制作用を示した。以下本発明化合物の製造にかんする実施例を挙
げて説明するが本発明はこれらに限定されるもの
ではない。実施例１（27−ノル−25−ケトコレステリル）2′、3′、
4′、6′−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グル
コピラノシド（７）の製造 27−ノル−25−ケトコレステロール（３）3.0
ｇを乾燥塩化メチレン100mlと乾燥二塩化エチレ
ン100mlに溶解し、遮光下、この溶液に新たに製
した酸化銀15.0ｇ、水素化カルシウム2.0ｇ及び
ヨウ素0.1ｇを加える。次いで室温で撹拌しなが
らブロモアセチルグルコシド15ｇを乾燥塩化メチ
レン50mlに溶かした溶液を１時間を要して滴下す
る。約半量滴下時に反応液に更に酸化銀5.0ｇ及
びヨウ素0.1ｇを添加する。室温で10時間撹拌し
たのち過する。液に活性炭1.0ｇを加えて10
分間撹拌したのち過する。液は窒素気流中減
圧下に溶媒を留去する。残留物をシリカゲルカラ
ムクロマトグラフイーで分離して、ベンゼン、エ
ーテル（１：１）混合溶媒溶出部より、粗製の標
記化合物6.0ｇを得る。エタノールより再結晶す
れば融点156.4℃の無色針状結晶の標記化合物4.9
ｇを得る。収率は87.1％である。物性値１融点 156.4℃ ２赤外線吸収スペクトル ν^ＫＢｒ _ｎａｘcm^-1 1755
，
1715 ３質量分析ｍ／ｅ：716（Ｍ⁺）４施光度〔α〕^２４ _Ｄ：−27.3゜（クロロホルム：
Ｃ＝0.8781）５元素分析値〔C₄₀H₆₀O₁₁〕Ｃ％Ｈ％計算値 67.02 8.44 実測値 66.93 8.69 実施例２（25−ハイドロキシコレステリル）−2′、3′、
4′、6′−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グル
コピラノシド（５）の製造（27−ノル−25−ケトコレステリル）−2′、
3′、4′、6′−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グ
ルコピラノシド（７）3.1ｇを脱水したエーテル
200mlと脱水したテトラハイドロフラン50mlに溶
解する。窒素気流下、室温でメチルマグネシウム
ヨーダイドのエーテル溶液（１中に約２モル含
有）５mlをエーテル30mlで稀釈した溶液を滴下す
る。反応液を室温で1.5時間撹拌する。次いで硫
酸ナトリウムの飽和水溶液を加えて過剰のグリニ
ヤール試薬を分解する。無水硫酸ナトリウムを加
えたのち過し、固形物をクロロホルム100mlで
洗浄する。有機溶媒部を合わせて、窒素気流中減
圧下溶媒を留去し2.5ｇの粘稠油状物質を得る。
シリカゲルカラムクロマトグラフイーで精製し、
更にアセトン、ノルマルヘキサンで再結晶すれ
ば、標記化合物1.7ｇが無色針状結晶として得ら
れる。収率は47.3％である。物性値１融点 185.8℃ ２赤外線吸収スペクトル ν^ＫＢｒ _ｎａｘcm^-13515，
1760 ３質量分析ｍ／ｅ：732（Ｍ⁺）４施光度〔α〕^２５ _Ｄ：−25.5゜（クロロホルム：
Ｃ＝0.5245）５元素分析値〔C₄₁H₆₄O₁₁〕Ｃ％Ｈ％計算値 67.19 8.80 実測値 67.15 9.12 実施例３ 25−ハイドロキシコレステリル−β−Ｄ−グル
コピラノシド（９）（25−ハイドロキシコレステリル）−2′、3′、
4′、6′−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコ
ピラノシド（５）775mgをジオキサン５mlとメタ
ノール50mlに溶かし、無水炭酸カリウム700mgを
水４mlに溶かした溶液を加えて、室温で1.5時間
撹拌する。反応液を氷水２中に投入し生ずる沈
澱を取し550mgの無色の粗結晶を得る。ジオキ
サンで再結晶すれば標記化合物520mgが無色結晶
性粉末として得られる。収率は86.6％である。物性値１融点 274.0℃（着色分解）２赤外線吸収スペクトル ν^ＫＢｒ _ｎａｘcm^-13390 ３質量分析ｍ／ｅ：545（Ｍ⁺−18）４施光度〔α〕^２５ _Ｄ：−48.3゜（ピリジン：Ｃ＝
1.0100）５核磁気共鳴スペクトルδ（C₅D₅N）：0.67
（ｓ、3H）0.95（ｓ、3H） 0.97（ｄ、3H）
1.42（ｓ、6H）5.35（ｍ、2H）６元素分析値〔C₃₃H₅₆O₇〕Ｃ％Ｈ％計算値 70.17 9.99 実測値 69.95 10.18 実施例４ 20（ｓ）−25−ハイドロキシコレステリル−
2′、3′、4′、6′−テトラ−Ｏ−アセチル−β−
Ｄ−グルコピラノシド（６）の製造 20（ｓ）−25−ハイドロキシコレステロール
（２）1.5ｇを乾燥塩化メチレン100mlと乾燥エー
テル100mlに溶解し、遮光下、この溶液に新たに
製した酸化銀3.0ｇと水素化カルシウム500mg及び
ヨウ素100mgを加える。次いで室温で撹拌しなが
らブロモアセチルグルコシド12.0ｇを乾燥塩化メ
チレン40mlに溶かした溶液を30分を要して滴下す
る。約半量滴下時に反応液に更に酸化銀3.0ｇを
添加する。室温で１夜撹拌したのち過する。
液に活性炭500mgを加えて10分間撹拌したのち
過する。液は窒素気流中減圧下に溶媒を留去
し、得られる油状物質をシリカゲルカラムクロマ
トグラフイーで精製して1.47ｇの結晶を得る。収
率は53.8％である。物性値１融点 165.0℃ ２赤外線吸収スペクトル ν^ＫＢｒ _ｎａｘcm^-1 3500
1760 ３質量分析ｍ／ｅ：732（Ｍ⁺）４核磁気共鳴スペクトル δ（CDCl₈）：0.69
（ｓ、3H）0.82（ｄ、3H、Ｊ＝７Hz）、0.99
（ｓ、3H）、1.21（ｓ、6H）1.95、1.98、2.01、
2.03〔12H（ｓ、3H×３）〕5.30（ｍ、1H）５施光度〔α〕^２４ _Ｄ−36.1゜（クロロホルム、Ｃ
＝0.555％）６元素分析値〔C₄₁H₆₄O₁₁〕Ｃ％Ｈ％計算値 67.19 8.80 実測値 67.18 8.84 実施例５ 20（ｓ）−25−ハイドロキシコレステリル−β
−Ｄ−ダルコピラノシド（10）の製造 20（ｓ）−25−ハイドロキシコレステリル−
2′、3′、4′、6′−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ
−グルコピラノシド（６）750mgを６mlのジオキ
サンと40mlのメタノールを加えて溶かし、無水炭
酸カリウム624mgを水４mlに溶かした溶液を加え
て、室温で30分間撹拌する。反応液を氷水中に投
入して生ずる沈澱を取し充分水洗して450mgの
粗結晶を得る。ジオキサンで再結晶すれば標記化
合物390mgが無色結晶性粉末として得られる。収
率は67.1％である。物性値１融点 255℃（着色分解）２赤外線吸収スペクトル ν^ＫＢｒ _ｎａｘcm^-1 3400 ３質量分析 546（Ｍ⁺−18）４核磁気共鳴スペクトル δ（C₅D₅N）：0.67
（ｓ、3H）0.85〜1.00（broad、6H）、1.42
（ｓ、6H）、5.45（ｍ、1H）５施光度〔α〕^２５ _Ｄ−55.1゜（ピリジン、Ｃ＝
0.558％）６元素分析値〔C₃₃H₅₆O₇〕Ｃ％Ｈ％計算値 70.17 9.99 実測値 70.10 10.22 実施例６ 25−ハイドロキシコレステリル−2′、3′、4′、
6′−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピ
ラノシド（５）の製造 25−ハイドロキシコレステロール（１）4.0ｇ
を乾燥塩化メチレン200mlに溶解し、遮光下、こ
の溶液に新たに製した酸化銀8.0ｇを水素カルシ
ウム2.0ｇ及びヨウ素200mgを加える。次いで室温
で撹拌しながらブロモアセチルグルコシド15ｇを
乾燥塩化メチレン100mlに溶かした溶液を30分要
して滴下する。約半量滴下時に反応液に更に酸化
銀4.0ｇを添加する。以下実施例４と同様にして
標記化合物3.1ｇを得た。収率は42.6％である。物性値は実施例２と同じ
であつた。

Claims

【特許請求の範囲】１次の一般式〔〕〔式中R¹、R²、R³及びR⁴は同一又は異なつ
て、水素又はアセチル基を表わし、R⁵及びR⁶は
水素又はメチル基を表わし、Ｘは【式】又は【式】を表わす。ただし、R⁵とR⁶は同一ではない。〕で表わされる化合物。２次の一般式〔〕〔式中R¹、R²、R³及びR⁴は同一又は異なつ
て、水素又はアセチル基を表わし、R⁵及びR⁶は
水素又はメチル基を表わし、Ｘは【式】又は【式】を表わす。ただし、R⁵とR⁶は同一ではない。〕で表わされる化合物を主成分とする
免疫抑制剤。３免疫抑制剤が抗炎症剤である特許請求の範囲
第２項記載の免疫抑制剤。