JPS6142826B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は尿素およびその誘導体の定量法に関す
る。

尿素およびその誘導体に共通した比色定量法と
して実用的に用い得る方法はきわめて少く、酸性
溶液中でジアセチルモノオキシム、ジアセルモノ
オキシムとアンチピリン、またはジアセチルモノ
オキシムとチオミカルバジドにより発色させて比
色定量する方法があげられるぐらいである。しか
しながらこれらの方法はいずれも濃厚なリン酸溶
液中で100℃に加熱するか、あるいはかなり濃厚
な硫酸溶液中で37℃に長く加熱することが必要で
あつて、しかもジアセチルモノオキシムは特異な
臭気をもち、人によつては不快感を生じる。した
がつてこれらの方法は繁用に耐える良法とはいい
難い。

これらの点に鑑み本発明者らは種々検討の結果
尿素およびその誘導体がＮ―（１―ナフチル）―
N′―ジエチルエチレンジアミンおよび０―フタ
ルアルデヒドにより鋭敏に発色することを見出し
た。

本発明はこれらの新知見に基づいて完成された
もので、試料にＮ―（１―ナフチル）―N′―ジ
エチルエチレンジアミンおよび０―フタルアルデ
ヒドを作用させて反応液の吸光度を測定すること
を特徴とする尿素およびその誘導体の定量法であ
る。

この反応は1N塩酸中で37℃、15分間加温で行
なわれるので、操作はきわめて容易であり、試薬
取扱い上の危険も少く、臭気も発しない。反応は
短時間で終了し、反応液は赤色から橙褐色に変化
するので、反応後吸光度（465nm）を測定して比
色定量できるばかりでなく、初速度法（520nm）
を利用して定量することもできる。また試薬溶液
は安定であつて、本法は実用的な尿素およびその
誘導体の定量法として価値あるものである。

尿素の分析のために０―フタルアルデヒドとＮ
―（１―ナフチル）エチレンジアンを用いる方法
が提案されている（クリニカル・ケミストリー第
21巻、第８号、1136頁、1975年）がこの方法も多
量の濃硫酸を用いる上、ブランク値が高いことが
難点であるに比し、本発明によればこれらの難点
が一挙に解決され、上記利点を有する。

実施例 １ 試薬１の調製 Ｎ―（１―ナフチル）―N′―ジエチルエチレ
ンジアミンシユウ酸塩0.854ｇを水500mlに加温し
て溶かし、冷却後ポリオキシエチレンラウリルエ
ーテル（Brij35）１ｇを溶かす。

試薬２の調製 ０―フタルアルデヒド1.34ｇを2N塩酸500mlに
加温して溶かす。

分析方法 尿素溶液50μに試薬１および２をそれぞれ２
mlずつ加え、37℃で15分間加温したのち流水で２
分間冷却し、空試験液を対照として波長465nmで
吸光度を測定する。この方法により尿素0.05〜
1.0μＭの範囲において尿素量と吸光度は直線関
係にあるから、予め作成した検量線から尿素量を
定量する。

フエニル尿素液50μにつき同様に操作すると
尿素の場合と同様の結果を得る。実施例 ２ メチル尿素液50μにつき実施例１と同様に操
作し、波長520nmで吸光度を測定する。メチル尿
素は0.01〜0.3μＭの範囲において吸光度と直線
関係にある。

エチル尿素溶液あるいはシトルリン溶液につい
て同様に操作すると、メチル尿素の場合と同様の
結果を得る。

実施例 ３ 試薬３の調製と定量 ０―フタルアルデヒド1.34ｇを50％エタノーに
溶かし25mlとする。

尿素溶液50μに試薬１を２mlおよび2N塩酸
２mlを加え、37℃で10分間加温する。これに試薬
３を100μ加え、波長520nmにおいて37℃、３
分間の増加する吸光度の値を測定する。この方法
により尿素0.05〜1.5μＭの範囲において尿素量
と吸光度の変化は直線関係にあり、予め作成した
検量線から尿素が定量される。

実施例 ４ シトルリン溶液50μにつき実施例３と同様に
操作し、波長520nmにおける吸光度の変化を測定
する。シトルリンは0.02〜0.4μＭの範囲におい
て吸光度の変化と直線関係にある。

メチル尿素あるいはエチル尿素溶液を用い、同
様に操作するとシトルリンの場合と同様の結果を
得る。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ 試料にＮ―（１―ナフチル）―N′―ジエチ
   ルエチレンジアミンおよび０―フタルアルデヒド
   を作用させて反応液の吸光度を測定することを特
   徴とする尿素およびその誘導体の定量法。