【発明の詳細な説明】[Detailed description of the invention]
本発明は抗喘息剤、特にブロモクリプチンの抗
喘息剤としての新規用途に関する。この化合物は
標準試験たとえばドイツ公開公報第2509471号お
よびエイ・エム・ジヨンソン（A.M.Johnson）
ら、ブリテイツシユ・ジヤーナル・オブ・フアー
マコロジー（Brit.J.Pharmac.）（1976年）第56
巻、59〜68頁に開示されている試験においてドー
パミン作用薬としての活性を示す。すなわち、こ
のドーパミン作用薬はラツトに体重Kg当り30mgを
腹腔内投与すると、常同性の（Streotyped）嗅
ぎ込む、なめるおよび咬む動作を誘発する。
この化合物はエイ・エム・ジヨンソンらによつ
て開示された試験で７時間以上にわたり１または
それ以下の常同症評点を有する。一般に、常同性
動作は前以てピモザイドを１mg／Kg投与すること
によりブロツクされる。
この化合物は、またヒドロキシドーパミンによ
つて一側性に黒質に病変を与えられたラツトに、
用量に応じた対側性の回転を誘発することにより
示されるように、ドーパミン作用レセプターに直
接の効果を及ぼす。この化合物はエイ・エム・ジ
ヨンソンらによつて開示された試験で、少くとも
１mg／Kgの最少有効服用量を有する。
本化合物は標準臨床試験で示されるように喘息
病の治療および予防に抗喘息剤として有用である
ことが判明した。たとえば、ブロモクリプチンは
毎日約2.5〜20mgの服用量で６週間投与される。
抗喘息効果はまた動物における標準実験によつ
て確認される。
適当な動物試験は次のものを包含する。
(a) コンツエツト−ロスラー（Konzett−
Possler）５−HT−誘発気管支けいれん試験に
おいて、本化合物はモルモツトの気管支けいれ
んを0.5〜６mg／Kg（静脈注射）の投与量で抑
制する。
(b) ラツトにおける受動皮膚アナフイラキシ−試
験で、抗原反応の抑制が0.1〜１mg／Kg静脈注
射の投与量で得られる。セロリニンの皮膚作用
の抑制もまた観察される。
(c) 試験管内でのラツトの腹腔内マスト細胞試験
で、本化合物は10〜200μｇ／mlの濃度の化合
物48／80で誘発されたヒスタミンの放出を抑制
する。
試験方法は次の通りである。
試験(a)：モルモツトにおける５−HT−誘発気管
支けいれん試験は、コンツエツト−ロスラーの
アルヒブ・フユル・エクスペリメンタル・パト
ロジー・ウント・フアルマコロジー（Arch.
Exper.Pathol.Pharmacol.）第195巻第71頁
（1940年）記載の方法に準拠する。モルモツト
を麻酔し、コンツエツト−ロスラーの方法（上
記文献）により気管支抵抗を測定できるように
しておく。種々の量の試験化合物を静脈内注射
により投与し、５−HT（セロトニン）によつ
て誘発される気管支けいれん応答に拮抗する能
力を評価する。
試験(b)：ラツトにおける受動的皮ふアナフイラキ
シ−（PCA）テストはイムノロジー
（Immunology）第７巻第681頁（1964年）中の
ジエイ・モタ（J.Mota）の方法に準拠する。
メスのラツト（体重180〜200ｇ）を0.1mlの生
理的食塩水中に溶解した２mgの卵白（メルクNo.
967）及び血液で培養した0.5mlの百日ぜきワク
チン（スイス血清種痘研究所、ベルン；第
115324；４×1010個／ml）を腹膜筋肉内投与す
ることにより感作しておく。14日後この動物か
ら採血し、血液を遠心分離し、血清を採取し冷
蔵する。この様にして得られた血清（抗血清）
を未処理のメスラツトの背中の４個所に（注射
部位当りたとえば１：２希釈血清0.1ml）皮下
注射する。24時間後、おのおののラツトに体重
１Kg当り約0.1mg〜約3.2mgを経口で又は体重１
Kg当り約0.56mg〜約0.56mgを注射により投与す
る。経口投与の60分後あるいは注射投与の直後
又は５〜30後に、0.25％のエバンス青（メルク
No.3169）を含む生理的食塩水に溶解した卵白
（５mg／ml）を注射投与する。この卵白は皮膚
アナフイラキシー反応を誘発し、その強度はエ
バンス青が４個所の感作部位のそれぞれの周囲
の組織へ拡散する程度に比例する。卵白の投与
の30分後、ラツトをエーテルで死亡させ、おの
おのの動物の背中の皮膚の下面を露出させ、お
のおのの４個所の感作部位を囲む青く染色した
部分の直径を測定する。テスト化合物の投与に
ついては４〜６匹のラツトで調査し、その平均
の直径を４匹の溶媒処理の対照ラツトにより得
られた平均値と比較する。抑制パーセンテージ
は対照における平均直径のパーテンテージとし
て得られる。
試験(c)：ヒスタミン解放の抑制作用はイー・ジエ
イ・クスナー（E.J.Kusner）等によりジヤー
ナル・オブ・フアーマコロジ−・アンド・エク
スペリメンタル・セラピユテイクス（J.
Pharmacol.Exp.Therap.）第184巻第41−46頁
（1973）に述べられている基本的方法に次の修
正を加えたラツトの腹腔内マスト細胞試験にお
いてヒスタミン解放の抑制により確認できる。
４℃で350ｇの遠心分離によるマスト細胞の沈
降の後、沈降物を１mlのハンクの平衡塩溶液
（HBSS）（PH6.9に緩衝）に溶解し貯える。生成
懸濁液を遠心分離し、再度HBSSで洗つて沈降
させる。この精製マスト細胞をHBSS中の２ml
の懸濁液とする。これに自然ヒスタミン解放を
測定するために２mlのHBSSを加えるか、ある
いは化合物48／80（Ｎ−メチルホモアニシルア
ミンホルムアルデヒド濃縮物；ブラフス・ウエ
ルカム・アンド・カンパニー・インコーポレイ
テツド、アメリカ合衆国ニユーヨーク製ヒスタ
ミンリベレーター）により誘起されるヒスタミ
ン解放を測定するために２mlのHBSS及び2.24
mgの化合物48／80を加えるか、あるいは試験化
合物の存在下で上記48／80により誘起されるヒ
スタミン解放を測定するために2.24mgの化合物
48／80及び1.8〜180mg／mlの試験化合物を含む
２mlのHBSSを加える。
化合物48／80により誘起されるヒスタミン解
放から自然ヒスタミン解放を引算したものを
100％ヒスタミン解放として扱う。試験化合物
の存在下で48／80により誘起されるヒスタミン
解放から自然ヒスタミン解放を引算したもの
が、試験化合物による抑制パーセンテージを決
定するために上記100％値と比較される［ヒス
タミン測定は通常の方法により、たとえば上記
クスナー等の論文又はクスナー（Kusner）及
びヘルチト（Herzig）のアドバンシズ・イ
ン・オートメイテツド・アナリシス
（Advances in Automated Aualys is）429
（1971）に記載されている様に行われる］。
これらの試験方法は当該技術においてよく知ら
れており、たとえば試験(b)および(c)は1976年12月
８日に公開された特開昭51−142543号に開示され
ている。
上記の用途に対する投与量は、勿論投与方法お
よび治療する症状たとえばアレルギー性喘息、内
因性喘息、細菌性喘息、アトピー性喘息、非アト
ピー性喘息によつて変わる。しかしながら一般
に、一日当り化合物を約0.01〜25mg／Kg（動物体
重）の用量で投与すると満足な結果が得られる。
より大きな哺乳類では、一日の投与量が約１〜25
mgで満足な結果が得られ、１〜20mgや良く、一日
２〜４回の分割服用量または持効性剤形で与える
のが良い。適当な毎日の総投与量は約2.5〜10mg
で、経口投与に適した投与剤形は、固体または液
体の担体または希釈剤と混合した約0.25〜５mgの
化合物からなるものである。
本化合物は医薬として許容される酸付加塩の形
で投与することができる。このような酸付加塩形
は既知であり、遊離塩基形と同程度の活性を示
す。このような形の例としてはメシレート、酒石
酸塩および臭化水素酸塩が挙げられる。
本化合物は独立してあるいは医薬組成物として
投与される。このような組成物は既知であり、常
套の方法でたとえば経腸投与用に錠剤、散剤、顆
粒剤、カプセル剤、懸濁液、溶液剤、シロツプ剤
およびエリキシル剤、あるいは非経口投与用に注
射用溶液および懸濁液、あるいは吸入用に噴霧組
成物として製剤される。
次の実施例は本発明に用いるのに適した組成物
を示す。ブロモクリプチンは２−ブロモエルゴク
リプチンと呼ぶ。
実施例 １
２−ブロモ−α−エルゴクリプチン錠剤：−
経腸投与に適した次の成分を含有する錠剤が既
知の方法で製造される。
成 分 重量
２−ブロモ−α−エルゴクリプチンン・メタンス
ルホネート 2.87mg（塩基2.5mgに相当）
ラクトース 96.18mg
トウモロコシ澱粉 14.00mg
ポリビニルピロリドン 5.00mg
ステアリン酸マグネシウム 0.70mg
タルク 1.20mg着色剤 0.05
120mg
上記錠剤を毎日2.5〜20mgの服用量で喘息状態
の治療の臨床試験に用いた。これらの試験の結
果、２−ブロモ−α−エルゴクリプチンの毎日の
服用量は7.5〜20mgであると考えられる。
実施例 ２
２−ブロモ−α−エルゴクリプチンカプセル
剤：−
経腸投与に適した次の成分を含有するゼラチン
硬カプセルが既知の方法で製造される。このカプ
セルは毎日３×１カプセルの服用量で喘息の治療
に用いれる。
The present invention relates to an anti-asthmatic agent, particularly a novel use of bromocriptine as an anti-asthmatic agent. This compound has been tested in standard tests such as German Published Application No. 2509471 and AM Johnson.
et al., Brit.J.Pharmac. (1976) No. 56
It exhibits activity as a dopamine agonist in the tests disclosed in Vol. 59-68. Specifically, this dopamine agonist induces stereotypic sniffing, licking, and biting behaviors when administered intraperitoneally to rats at 30 mg/kg body weight. This compound has a stereotypy score of 1 or less over 7 hours in the test disclosed by A.M. Johnsson et al. In general, stereotypic behavior is blocked by prior administration of 1 mg/Kg of pimozide. This compound also showed significant effects in rats with unilateral substantia nigra lesions caused by hydroxydopamine.
It has a direct effect on dopaminergic receptors, as shown by inducing contralateral rotation in a dose-dependent manner. This compound has a minimum effective dose of at least 1 mg/Kg in the test disclosed by A.M. Johnson et al. The compounds have been found to be useful as anti-asthmatic agents in the treatment and prevention of asthma disease as shown in standard clinical trials. For example, bromocriptine is administered at a dose of approximately 2.5 to 20 mg daily for six weeks. Anti-asthmatic effects are also confirmed by standard experiments in animals. Appropriate animal studies include: (a) Konzett-Rossler
In the 5-HT-induced bronchospasm test (Possler), this compound suppresses bronchospasm in guinea pigs at doses of 0.5-6 mg/Kg (intravenous injection). (b) In a passive dermal anaphylaxis test in rats, inhibition of the antigen response is obtained at doses of 0.1-1 mg/Kg intravenously. Suppression of the skin effects of serolinine is also observed. (c) In an in vitro rat intraperitoneal mast cell test, the compound inhibits histamine release induced by compound 48/80 at concentrations of 10-200 μg/ml. The test method is as follows. Test (a): The 5-HT-induced bronchospasm test in guinea pigs was carried out by Konzet-Rossler, Arch.
The method is based on the method described in Exper. Pathol. Pharmacol.), Vol. 195, p. 71 (1940). The guinea pigs are anesthetized so that bronchial resistance can be measured by the method of Konzet-Rossler (cited above). Various amounts of test compounds are administered by intravenous injection and evaluated for their ability to antagonize the bronchospasm response induced by 5-HT (serotonin). Test (b): The passive skin anaphylaxis (PCA) test in rats is based on the method of J. Mota in Immunology, Vol. 7, p. 681 (1964).
Female rats (weight 180-200 g) were treated with 2 mg of egg white (Merck No. 1) dissolved in 0.1 ml of physiological saline.
967) and 0.5 ml pertussis vaccine cultured in blood (Swiss Serum Smallpox Institute, Bern;
115324; 4×10 10 cells/ml) is sensitized by intraperitoneal intramuscular administration. After 14 days, the animals are bled, the blood is centrifuged, and the serum is collected and refrigerated. Serum (antiserum) obtained in this way
is subcutaneously injected (for example, 0.1 ml of 1:2 diluted serum per injection site) at 4 points on the back of untreated female rats. After 24 hours, each rat was given about 0.1 mg to about 3.2 mg per kg of body weight orally or 1 kg of body weight.
About 0.56 mg to about 0.56 mg per kg is administered by injection. 0.25% Evans Blue (Merck
No. 3169) dissolved in physiological saline (5 mg/ml) is administered by injection. The albumen induces a skin anaphylactic reaction, the intensity of which is proportional to the extent to which Evans Blue diffuses into the tissue surrounding each of the four sensitization sites. Thirty minutes after administration of egg white, rats are killed with ether, the underside of the skin on the back of each animal is exposed, and the diameter of the blue-stained area surrounding each of the four sensitization sites is measured. Administration of test compound is studied in 4-6 rats and the mean diameter is compared to the mean value obtained by 4 vehicle-treated control rats. Percentage inhibition is given as a percentage of the mean diameter in the control. Test (c): The inhibitory effect on histamine release was reported by EJ Kusner et al. in the Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics (J.
This can be confirmed by inhibition of histamine release in a rat intraperitoneal mast cell test using the basic method described in Pharmacol.
After sedimentation of the mast cells by centrifugation at 350 g at 4°C, the sediment is dissolved in 1 ml of Hank's Balanced Salt Solution (HBSS) (buffered to pH 6.9) and stored. The resulting suspension is centrifuged, washed again with HBSS and sedimented. The purified mast cells were added to 2 ml of HBSS.
A suspension of To this was added 2 ml of HBSS to measure spontaneous histamine release, or Compound 48/80 (N-Methyl Homoanisylamine Formaldehyde Concentrate; Histamine Liberator, Bluffs Wellcome & Co., Inc., New York, USA). 2 ml of HBSS and 2.24 ml of HBSS to measure the histamine release induced by
mg of compound 48/80 or 2.24 mg of compound to measure histamine release induced by 48/80 in the presence of test compound.
Add 2 ml of HBSS containing 48/80 and 1.8-180 mg/ml of test compound. Compound 48/80-induced histamine release minus spontaneous histamine release
Treated as 100% histamine release. The histamine release induced by 48/80 in the presence of the test compound minus the spontaneous histamine release is compared with the 100% value above to determine the percentage inhibition by the test compound [histamine measurements are By method, for example, the article by Kusner et al. or Kusner and Herzig, Advances in Automated Analysis is 429
(1971)]. These test methods are well known in the art; for example, tests (b) and (c) are disclosed in Japanese Patent Publication No. 142543/1976, published December 8, 1976. Dosages for the above uses will, of course, vary depending on the method of administration and the condition being treated, such as allergic asthma, intrinsic asthma, bacterial asthma, atopic asthma, and non-atopic asthma. Generally, however, satisfactory results are obtained when the compound is administered at doses of about 0.01 to 25 mg/Kg (animal body weight) per day.
In larger mammals, the daily dose is about 1-25
Satisfactory results have been obtained with doses of 1 to 20 mg, preferably given in divided doses 2 to 4 times a day or in a sustained-release dosage form. A suitable daily total dose is about 2.5-10mg
A dosage form suitable for oral administration consists of about 0.25 to 5 mg of the compound mixed with a solid or liquid carrier or diluent. The compounds can be administered in the form of pharmaceutically acceptable acid addition salts. Such acid addition salt forms are known and exhibit comparable activity to the free base form. Examples of such forms include mesylate, tartrate and hydrobromide. The compounds may be administered independently or as a pharmaceutical composition. Such compositions are known and can be formulated in conventional manner, for example as tablets, powders, granules, capsules, suspensions, solutions, syrups and elixirs for enteral administration, or by injection for parenteral administration. It may be formulated as solutions and suspensions for use in administration, or as aerosol compositions for inhalation. The following examples demonstrate compositions suitable for use in the present invention. Bromocriptine is called 2-bromoergocriptine. Example 1 2-bromo-α-ergocriptine tablets:- Tablets containing the following ingredients suitable for enteral administration are manufactured in a known manner. Ingredients Weight 2-Bromo-α-ergocriptine methanesulfonate 2.87mg (equivalent to 2.5mg of base) Lactose 96.18mg Corn starch 14.00mg Polyvinylpyrrolidone 5.00mg Magnesium stearate 0.70mg Talc 1.20mg Colorant 0.05 120mg Above tablets was used in clinical trials for the treatment of asthmatic conditions at doses of 2.5 to 20 mg daily. As a result of these studies, the daily dose of 2-bromo-alpha-ergocriptine appears to be between 7.5 and 20 mg. Example 2 2-Bromo-α-ergocriptine Capsules: - Hard gelatin capsules suitable for enteral administration containing the following ingredients are manufactured in a known manner. This capsule is used in the treatment of asthma in a daily dose of 3x1 capsule.
【表】
実施例 ３および４
注射用滅菌懸濁液および経口液体懸濁液：−
次の医薬組成物が常套の方法を用いて下記有効
成分量で調剤される。注射用懸濁液および経口液
体懸濁液は単位用量に有用な製剤を表わし、喘息
の治療に投与される。注射用懸濁液は一日に一回
投与するのに適しており、経口液体懸濁液はこの
目的のためには一日２〜４回適当に投与される。TABLE Examples 3 and 4 Sterile Injectable Suspensions and Oral Liquid Suspensions:- The following pharmaceutical compositions are prepared using conventional methods in the amounts of active ingredient indicated below. Injectable suspensions and oral liquid suspensions represent useful unit dosage formulations for administration in the treatment of asthma. Injectable suspensions are suitable for administration once a day, while oral liquid suspensions are suitably administered for this purpose two to four times a day.
【表】
ウムシリケート
[Table] Umu silicate
【表】
実施例 ５
ブロモクリプチンのLD50およびドーパミン作
用活性（公知の作用である常同症および対側性回
転誘発）を測定した。方法は、前記のドイツ公開
公報第2509471号およびブリテイツシユ・ジヤー
ナル・オブ・フアーマコロジー（Brit.J.
Pharmac.）第56巻59−68頁の記載にしたがつ
た。
この試験で、次の結果が得られた。[Table] Example 5 The LD 50 and dopaminergic activity (known effects of stereotypy and contralateral rotation induction) of bromocriptine were determined. The method is described in the above-mentioned German Published Publication No. 2509471 and in the Brit.J. Pharmacology.
Pharmac.) Vol. 56, pp. 59-68. This test yielded the following results.
【表】
性
2.5 0.1 1100
実施例 ６
ブロモクリプチンの臨床検査を行つた。この検
査に含まれる全ての患者は、ステロイド類および
気管支拡張薬を用いた一般的な治療法に反応しな
い喘息を有していた。薬剤の初期用量は、１日に
つき2.5mgであるが、１日につき20mgの維持用量
まで徐々に強化された。患者の中で、その検査に
含まれるための診断基準を満たす者は、夜または
朝の起床時に発生する気管閉塞が定時的・周期的
な増加を示す４人だつた。この群中、３人は、ブ
ロモクリプチン投与の間、症状および機能測定値
に持続的な改善を示した。このことは、ステロイ
ド投与量の相当の削減およびこれらの患者の徴候
となる気管支拡張薬の要求量の減少を可能にし
た。これら３人中、２人においては、夜に使用さ
れるサルブタモールスパンデツド類が、両方の薬
剤を同時に用いる間のみ、気管閉塞の防止におい
て、ブロモクリプチンと相乗効果をもたらしたよ
うに思われる。第３番目の首尾よく治療された患
者においては、ブロモクリプチンは副作用の可能
性があるために一時的に中止したが、喘息の即時
の再発が認められた。この群の第４番目の患者
は、治療の間全く改善を示さなかつた。
次に本発明の技術的範囲に包含される実施態様
の具体例を列挙すれば次のとおりである。
(1) ドーバミン作用薬としての活性を有するブロ
モクリプチンを有効成分とする抗喘息剤。
(2) ブロモクリプチンの一日の服用量が１〜25mg
である前記第(1)項記載の抗喘息剤。
(3) ブロモクリプチンを約0.25〜５mg含有する単
位用量形態で投与する前記第(1)項記載の抗喘息
剤。
(4) ブロモクリプチンと適当な医薬担体または希
釈剤からなる喘息の治療に適した医薬組成物。
この発明はさらに下記方法を可能にする。
(5) ブロモクリプチンの治療的有効量を動物に投
与することを特徴とする動物における喘息状態
の治療法。[Table] Gender
2.5 0.1 1100
Example 6 A clinical test of bromocriptine was conducted. All patients included in this study had asthma that was unresponsive to common treatments with steroids and bronchodilators. The initial dose of the drug was 2.5 mg per day, which was gradually titrated to a maintenance dose of 20 mg per day. Among the patients, four patients met the diagnostic criteria for inclusion in the study and showed a periodic increase in tracheal obstruction that occurred at night or upon awakening in the morning. Among this group, three showed sustained improvement in symptoms and functional measures during bromocriptine administration. This has allowed for a considerable reduction in steroid dosage and the requirement for symptomatic bronchodilators in these patients. In 2 of these 3 patients, salbutamol spandex used at night appeared to be synergistic with bromocriptine in preventing tracheal obstruction only while both drugs were used simultaneously. In the third successfully treated patient, bromocriptine was temporarily discontinued due to potential side effects, but an immediate recurrence of asthma was noted. The fourth patient in this group showed no improvement during treatment. Next, specific examples of embodiments included within the technical scope of the present invention are listed below. (1) An anti-asthmatic agent whose active ingredient is bromocriptine, which has dobamine agonist activity. (2) The daily dose of bromocriptine is 1 to 25 mg.
The anti-asthmatic agent according to item (1) above. (3) The anti-asthmatic agent according to item (1) above, which is administered in a unit dosage form containing about 0.25 to 5 mg of bromocriptine. (4) A pharmaceutical composition suitable for the treatment of asthma, comprising bromocriptine and a suitable pharmaceutical carrier or diluent. The invention further enables the following method. (5) A method for treating an asthmatic condition in an animal, comprising administering to the animal a therapeutically effective amount of bromocriptine.