JPS6233872B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 技術分野 本発明は、血液中の細菌を分離し培養するのに
使用される新規な血液処理器に関するものであ
る。

敗血症や菌血症等重篤な全身感染症においては
患者の血液中に細菌が存在しているのでこれら感
染症の診断には血液の細菌検査が行なわれる。ま
た抗菌剤の動物試験による薬効判定においても血
液の細菌検査が行なわれる。これらの細菌検査に
は先ず検体血液から細菌を培養および分離するこ
とが必要であり、次いで薬剤感受性試験や菌の同
定等が行なわれる。本発明の器具はこのような細
菌検査の際の検体処理に使用される。

（先行技術および問題点） 従来、血中細菌の培養および分離は、採取した
血液を液体栄養培地と混合して培地増殖した菌で
濁るまで培養し、次に増殖した菌を血液寒天平
板、チヨコレート寒天平板等の培地上に移殖して
さらに培養することによつてコロニ育成が行なわ
れている。

このように従来法においては血液から少ない細
菌を直接分離して培養することが困難であり、コ
ロニーを育成する前処理として増菌培養という付
加的操作で菌数を増すことを必要とするため繁雑
な操作と長時間を要している。特に上記のような
液体中での増菌培養は一般に長時間を要する。ま
た血液はそれ自体菌の増殖を抑制する作用を有
し、抗菌剤が投与されている場合には血液中での
菌の増殖は一層困難であり、検体中の細菌数が少
ない場合には検出不可能な場合もある。さらに、
菌を増殖培地から分離培地へ移殖する際、検査菌
が環境を汚染したりあるいは雑菌が検査菌に混入
したりして検査精度を低下させるおそれがある。

発明の目的 そこで本発明者等は鋭意研究を重ねた結果、細
菌混入血液をすくなくとも溶血剤、抗血液凝固剤
および液体培地からなる溶液と混合し、前記混合
物を細菌を通さない大きさの孔を有するフイルタ
と前記フイルタの裏面に接着された吸水体あるい
は液体培地を含浸乾燥させた吸水体とを前記フイ
ルタを上にして容器に収容してなるろ過培養器で
ろ過し、ろ過されたフイルタ上の細菌をそのまま
培養することにより血中細菌を分離培養する方法
を開発した。

この培養法によれば、血中細菌を増菌培養する
等の前処理操作を必要とせず直接血液中の細菌を
集め、他の培地に移殖することなくそのまま培養
することが可能である。而してこの培養法におい
ては、採血した血液を溶血剤、抗凝固剤および液
体培地からなる溶液を十分に混和する操作が必須
であり、この操作は、検査菌による環境汚染およ
び検体の汚染を防止するため、密閉容器中で行う
ことが要求される。

従つて発明の目的は、血液をすくなくとも溶血
剤および抗血液凝固剤からなる溶液あるいは溶血
剤、抗凝固剤および液体培地からなる溶液を密閉
系で混和することを可能とする器具を提供するこ
とにある。

しかして上記の目的は以下に示す本発明の器具
によつて達成される。

(1) すくなくとも溶血剤、抗血液凝固剤および液
体培地を含む溶液を収容し、かつ血液収容空間
を有する容器と前記容器開口部に密封可能に嵌
挿された弾性を有するゴム栓体とを有し、滅菌
処理されていることを特徴とする血液処理器。

(2) 血液収容空間が減圧にされている第１項記載
の血液処理器。

(3) 上記容器が筒状体と、該筒状体の内壁を液密
に摺動できるように配置した押子とからなる第
１項記載の血液処理器。

上記の構造を有する本発明の血液処理器を使用
することにより、血液は、溶血剤、抗血液凝固剤
および液体培地からなる溶液と密閉系で十分混和
することができ、血液中の細菌が環境を汚染した
り、外部の雑菌が血液検体中に混入したりするお
それがない。

発明の具体的説明 以下本発明の構成を図面に示す実施例に基づい
て詳細に説明する。

第１図に本発明の血液処理器の一実施例を示
す。この血液処理器はすくなくとも溶血剤、抗血
液凝固剤および液体培地の混合溶液２を収容した
容器１と前記容器１の開口部に密封可能に嵌着さ
れたゴム栓３とからなり容器１の内部は減圧に保
たれている。そして、ゴム栓３は着脱可能である
ことが好ましい。この血液処理器を用いて血液を
処理するには、採血した注射器（図示省略）の針
をゴム栓３を貫通するように突き刺し、容器１内
の減圧を利用して血液を容器１内に導入し、血液
導入完了後針を抜き、容器を転倒させて血液を容
器内の溶液と混和させる。溶血剤としてはサポニ
ンが好適に使用され、抗血液凝固剤としてはアミ
ロ硫酸ナトリウム、ポリアネトール硫酸ナトリウ
ム等が好適に使用される。これらの混合溶液には
さらに液体培地が混合されている。予め液体培地
が混合されているので次の操作で使用する分離培
養器の吸水体に培地を含浸させる必要がない。ま
た、菌の増殖が早くなる。

第２図は本発明の血液処理器の他の実施例を示
す。この血液処理器は筒状体４と該筒状体の内壁
を液密に摺動できるように配置した押子５からな
り、筒状体４の開口部にはゴム栓３が着脱可能で
かつ密封可能に嵌着され、筒状体４と押子５で形
成される空間に先の実施例と同様の溶血剤、抗血
液凝固剤および液体培地からなる混合液２が収容
されている。この血液処理器を用いて血液を処理
するには、採血した注射器の針をゴム栓３を貫通
するように突き刺し、注射器で血液を圧入すると
血液処理器の押子５が下方へ摺動しながら血液が
容器内に導入される。血液の導入完了後、容器を
転倒し血液を溶血剤、抗血液凝固剤および液体培
地と十分混和する。これら血液処理器は検体血液
に雑菌が混入するのを防ぐために、γ線照射また
はオートクレーブにより滅菌されている。

本発明の血液処理器で血液を処理することによ
り赤血球の破壊と血液凝固の防止が行なわれる。
これらの操作は、次の血液ろ過操作および血液細
菌の培養を円滑に行うために不可欠である。ま
た、液体培地が混入されているので混合処理も同
時にできる。

本発明の血液処理器で血液を処理した後ゴム栓
をはずし、次に示す分離培養器のフイルタ上に検
体血液を注ぐ。ろ過培養器は第３図に示す如く、
細菌を通さない大きさの孔を有するフイルタ６と
フイルタ６の裏面に接着された吸水体７とをフイ
ルタ６側を上にして収容した容器本体８と容器本
体８の開口部を着脱自在に被う蓋９とからなる。
容器本体８はフイルタ６、容器本体側壁１０およ
び蓋９により画成される空間１１ならびに吸水体
７、容器本体側壁１０および容器本体底１２によ
り画成される空間１３を有し、吸水体より下方に
通気孔１４が設けられている。

フイルタ６は血中細菌をろ過するためのもので
あつて細菌を通さない大きさの孔を有する。フイ
ルタ６の孔の大きさは0.75ミクロン以下好ましく
は0.45ミクロン程度である。フイルタ６の材質は
血液に対して不活性であれば特に制限はないが、
代表例としてニトロセルロース、ポリカーボネー
ト、ポリアミド、セルロースエステルなどをあげ
ることができ、市販のものとしてはミリポア（ミ
リポアコーポレーシヨン製品）、メトリセル（ゲ
ルマンインストルメントカンパニー製品）などが
あげられる。フイルタ６は血液がなじみやすいよ
うにそれ自体公知の方法によつて親水処理されて
いるのが望ましい。

吸水体７は、フイルタ６でろ過されたろ過血液
を吸収保持し、フイルタ６上に捕捉された細菌に
栄養を提供するためのものである。吸水体７はろ
液をほぼ全量吸収する能力をもつことが望まし
い。その材質としてはセルロース系のろ紙、不織
布等が適当である。吸水体７はフイルタ６の裏面
に接着剤等により密に密着固定されていることが
必要であり、密着度が不十分な場合はろ過が円滑
に行なわれず、またろ過後吸水体７からフイルタ
６上の細菌への栄養補給が十分行なわれない。

使用される接着剤としてはろ過を阻害しない低
融点重合体繊維による熱シールが好適である。一
体化されたフイルタ６と吸水体７は容器本体壁１
０に対し隙間なく嵌めこまれ固定されており、検
体血液がフイルタ６を透過せずに漏れ落ちるのを
防いでいる。フイルタ６および吸水体７の容器本
体壁への固定には接着剤を用いるかまたは図に示
すようにかしめ具１５により圧着する。この場合
には容器本体８の側壁１０部分に段部Ｓを形成
し、この段部Ｓに一体化されたフイルタ６と吸水
体７を載置してからかしめ具１５を圧入すればよ
い。フイルタ６の上方の空間１１は検体血液を貯
留するためのものであり、吸水体７の下方の空間
１３は吸水体７に吸収しきれなかつたろ液を受け
るためのものである。通気口１４はろ液により圧
迫された空間１３内の空気を排出するためのもの
であり、容器本体壁１０または容器本体底部１２
に大気と連通するように設けられる。この通気口
４の存在により検体血液全量が速やかに自然ろ過
される。通気口１４には雑音の侵入を防止するた
めに細菌フイルタ１６、例えば棉栓を嵌着するの
が望ましい。通気口１４が容器本体底部１２に設
けられるときは、貯留するろ液が通気口１４から
流出するのを防ぐため通気口１４のまわりに障壁
１７が設けられる。また容器本体底部１２全体に
障壁を同心円状に設け、ろ液が通気口１４の周辺
に集まるのを防止するのが望ましい。

以上の構成を有する血中細菌分離培養器はγ線
照射またはエチレンオキサイドガスによる滅菌処
理を行ない検査の信頼性を向上させる。

このように構成される分離培養器の形状は特に
限定されないが、一般に円形にするのが望まし
い。そのサイズも特に限定されることはないが例
えば検体として血液２mlを使用する場合、これに
適合させるためには容器本体の直径約60mm程度に
するのがよい。

かくして本発明の血液処理器で処理された血液
検体を上記の分離培養器のフイルタ６上に注ぎ蓋
９で開放口を被う。血液は自重で自然ろ過され
る。血中細菌はフイルタ６上に残り、血液はフイ
ルタ６を透過して吸水体７に吸収され、飽和量以
上の血液は滴下して容器本体底部１２に溜まる。
ろ液により圧迫された空気は通気口１４から排出
されるので、ろ過は検体血液の自重で円滑に行な
われる。ろ過終了後、該分離培養器を恒温に保持
することによりフイルタ６上に細菌のコロニーが
形成される。該コロニーから細菌を採取して細菌
の同定、薬剤感受性試験等の細菌検査が行なわれ
る。

発明の具体的作用効果 本発明の血液処理器によれば血液検体を密封状
態で溶血・抗凝固処理することができる。従つて
血中細菌による環境汚染を防止することができ、
また、検体中に外部から雑菌が混入するのを防止
できるので検査の信頼度を高めることができる。
さらに、本発明の血液処理器を使用することによ
り、溶血および抗凝固さらに培地との混合操作が
簡素化されるとともに処理後の培養器への移植に
伴なう検査菌による環境汚染および検査菌への雑
菌の混入も最少限となる。さらに、本発明の血液
処理器を使用することにより、採取された検体血
液中の全細菌が、そのまま分離培養されるので細
菌の検出率が高く、検体中の菌数を測定すること
も可能である。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明の血液処理器の一実施例を示す
断面図であり、第２図は他の実施例の断面図であ
る。第３図は、本発明の血液処理器とともに血中
細菌分離培養法において使用される血中細菌分離
培養器の断面図である。 １……容器、２……溶血剤および抗凝固剤の混
合溶液、３……ゴム栓、４……筒状体、５……押
子、６……フイルタ、７……吸水体、８……容器
本体、９……蓋、１４……通気口。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ すくなくとも溶血剤、抗血液凝固剤および液
   体培地を含む溶液を収容し、かつ血液収容空間を
   有する容器と前記容器開口部に密封可能に嵌挿さ
   れた弾性を有するゴム栓体とを有し滅菌処理され
   ていることを特徴とする血液処理器。 ２ 血液収容空間が減圧されている特許請求の範
   囲第１項記載の血液処理器。 ３ 容器が筒状体と、前記筒状体の内壁を液密に
   摺動できるように配置した押子とからなる特許請
   求の範囲第１項記載の血液処理器。