JPS6234725B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は抗ウイルス剤に係り、殊に異種死菌体
混合物を有効成分とする抗ウイルス剤に係る。

抗ウイルス剤に関しては、化学療法剤の開発と
相俟つて精力的に研究が進められ、その結果現在
ではアマンタジン系、ウラシル系薬剤などが使用
されるに至つているが、これら薬剤の殆んどが高
い副作用を有していて長期連用に問題がありウイ
ルス性疾患の治療に必ずしも優れているとは謂い
難いものであつた。一方、近年に至りウイルス感
染やウイルス増殖を抑制する因子としてインター
フエロン（IF）が開発されたが、これは人血か
ら抽出されしかもウイルス性肝炎治療に際して患
者１人当りに必要な量のIFを得には人血100を
必要とすると謂われており、従つてIFは薬剤と
して工業生産されるに至つていない。

本出願人は、異種死菌体混合物、殊にヒトの上
気道常在菌である肺炎球菌と、溶血連鎖球菌と、
ブドウ球菌と、カタルナイセリアと、四連球菌
と、緑膿菌と、インフルエンザ菌との死菌体混合
物を有効成分として含有している抗腫瘍剤に関し
て特許出願（特願昭53−36662、特開昭54−
129117）しているが、当該抗腫瘍剤が抗ウイルス
剤としてウイルス性疾患の治療にも充分に利用可
能であることを見出し本発明を完成するに至つ
た。

本発明による抗ウイルス剤の有効成分は前記特
開昭54−129117公報に開示のものと全く同一であ
り又本出願人により呼吸器疾患治療剤殊に気管支
喘息治療剤として「ブロンカスマベルナ」なる商
品名の下に市販されている薬剤の有効成分と同様
であるが、その製法及び使用法について念のため
述べれば次の通りである。

製 法 〔〕 継代培養 各種菌種につき下記要領で継代培養する。

(a) 肺炎球菌については肝臓ブイヨンで静置培
養する。

(b) ブドウ球菌、カタルナイセリア、四連球
菌、緑膿菌、インフルエンザ菌及び肺炎桿菌
についてはそれぞれ振盪培養し、純粋性を顕
微鏡にて検査する。

(c) 溶血連鎖球菌についてはチオグリコール酸
塩ブイヨンで静置培養する。

〔〕 培養 継代培養で得た各菌種につき純粋性及び抗原
性を検査した後に次の培地に菌を移植して後培
養を行なう。

(a) 肺炎球菌 ブドウ糖を加えた肝臓ブイヨンで静置培養 (b) ブドウ球菌、四連球菌、緑膿菌及び肺炎桿
菌 それぞれカゼイン水解物をベースとする液
体培地で通気性タンク培養 (c) カタルナイセリア コーヘン・ホウイーラーの液体培地で通気
性タンク培養 (d) インフルエンザ菌 ホルトの液体培地で通気性タンク培養 (e) 溶血連鎖球菌 カゼイン水解物をベースとする液体培地で
通気せずにタンク培養 〔〕 採取菌の調製 菌の原形質が凝固したり、又菌の抗原物質が
溶出しないように特に留意しつつ次の操作を行
なう。

(a) 肺炎球菌以外の各菌については静止期に菌
を採取し、その純粋性を顕微鏡にて検査した
後に、比濁法により菌数を計算し、次いで60
℃に於て60分間維持して殺菌する。38w／ｗ
％のホルマリンを0.4v／ｖ％割合で添加して
滅菌する。然る後、遠心分離して上清を棄却
し沈渣のみを集めて洗浄し、生理食塩水を加
えてこれに懸濁せしめ死菌体懸濁原液とす
る。

(b) 肺炎球菌については既述の後培養のための
移殖後約24時間を経過した後に菌を採取し、
(a)項と同様に処理して死菌体懸濁原液とす
る。

〔〕 無菌試験 各菌種の懸濁原液につきそれぞれ下記要領で
培養試験を行ない無菌状態であることを確認す
る。

(a) チオグリコール酸塩培地で10日間培養（培
養温度32℃） (b) ペプトン／ブドウ糖培地で10日間培養（培
養温度32℃） (c) ザブロー培地で10日間培養（培養温度20〜
25℃） 〔〕 原液の混合 無菌試験を経た原液（各原液は各々単一菌種
の死菌体を含有している）相互を無菌的操作の
下に撹拌器付タンク内で混合する。

使用法 注射液となされる場合には、原液混合物に防
腐剤としてフエノールが0.4w／ｗ％の割合で
添加混合され、次いでアンプルに１ml宛充填さ
れた後にアンプルが封緘される。注射液は１ml
中に各菌種の死菌体を例えば次の如く含有して
いる。

肺炎球菌 50×10⁶個 溶血連鎖球菌 40×10⁶個 ブドウ球菌 500×10⁶個 カタルナイセリア 60×10⁶個 四連球菌 20×10⁶個 緑膿菌 250×10⁶個 肺炎桿菌 40×10⁶個 インフルエンザ菌 40×10⁶個 本発明による抗ウイルス剤の生物活性を確認す
るためにvesicular stomatitis virus（USV、
Indiana strain）の細胞変性抑制試験によるイン
ターフエロン様物質誘起実験、抗癌作用実験及び
毒性試験を下記要領で行なつた処下記の結果が得
られた。

１ インターフエロン様物質誘起実験 (a) 使用動物 ddYマウス、雄、10週令、体重40ｇ前後、 １群 ４匹 (b) 本発明による抗ウイルス剤、投与量及び投
与経路 抗ウイルス剤 前記「使用法」の項に記載の注射液 投与量 ５ml／Kg各１回 投与経路 腹腔内（i.p.）、 皮下注（s.c.）及び 静脈内（i.v.） (c) 実験方法 マウスを４群に分け、内１群を対照とし他
の３群の各群については投与経路に従い本発
明製剤を注射投与し20時間後に対照も含めて
各マウスから採血する。分離した血清のイン
ターフエロン様活性をフインター（Finter
N.B.）等の方法〔The Assay and
Standerdization of Interferon and
Interferon Inducers“Interferon and
Interferon Inducers”第２版第135頁、1973
年〕により測定する。

(d) 実験結果 実験結果は下記の通りであり、本発明によ
る抗ウイルス剤は3.3〜４倍程度の活性上昇
をもたらすことが認められた。

血清希釈率 対 照 20 i.p. 80 s.c. 60 i.v. 60 ２ 抗癌作用実験 ICR系マウス（１群10匹）にEhrlich腹水腫
瘍５×10⁴セル／0.25mlを移植する。移植後24
時間後から本発明製剤（前記「使用法」の項に
記載の注射液）を１日につき１回10日間に亘り
腹腔内注射により投与した処105.9％の延命が
認められた。

３ 毒性試験 本発明による抗ウイルス剤に関し急性毒性を
試験した処次の結果が得られた（LD₅₀ml／
Kg）。

経 口 皮 下 腹 腔 マウス（雄） 107.5 112.0 108.0 ラツト（雄） 87.5 120.0 59.0 本発明による抗ウイルス剤の注射目的用製剤
の臨床的使用方法を示せば次の通りである。

(a) 予備試験 皮内針付ツベルクリン注射器を用いて膨疹
直径が約４mmとなるように皮下注射し（投与
量約0.02ml）、投与48時間後に発赤の径を測
定し20〜30mm以下であれば使用可能と判定す
る。

(b) 投与方法 通常１日１回以下とし、投与量は成人に関
し0.3mlより開始し0.5ml、0.7ml、1.0mlの順
に増量する。その後の維持量としては１mlと
することが好ましい。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 肺炎球菌と、溶血連鎖球菌と、ブドウ球菌
   と、カタルナイセリアと、四連球菌と、緑膿菌
   と、肺炎桿菌と、インフルエンザ菌の死菌体混合
   物を有効成分として含有していることを特徴とす
   る、抗ウイルス剤。 ２ 特許請求の範囲第１項記載の抗ウイルス剤に
   於て、溶液１ml中に 肺炎球菌 50×10⁶個と、 溶血連鎖球菌 40×10⁶個と、 ブドウ球菌 500×10⁶個と、 カタルナイセリア 60×10⁶個と、 四連球菌 20×10⁶個と、 緑膿菌 250×10⁶個と、 肺炎桿菌 40×10⁶個と、 インフルエンザ菌 40×10⁶個 の死菌体と、防腐剤としてのフエノール４mgとを
   含有していることを特徴とする、注射目的用抗ウ
   イルス剤。