JPS6241690B2 - - Google Patents
Info
- Publication number
- JPS6241690B2 JPS6241690B2 JP59022032A JP2203284A JPS6241690B2 JP S6241690 B2 JPS6241690 B2 JP S6241690B2 JP 59022032 A JP59022032 A JP 59022032A JP 2203284 A JP2203284 A JP 2203284A JP S6241690 B2 JPS6241690 B2 JP S6241690B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- fsh
- mixture
- hormone
- ratio
- embryos
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 claims abstract description 47
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 claims abstract description 47
- 229940040129 luteinizing hormone Drugs 0.000 claims abstract description 43
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 24
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 15
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 claims abstract description 12
- 206010042573 Superovulation Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 claims description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 11
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims description 8
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims description 8
- 230000035800 maturation Effects 0.000 claims description 7
- 241000282887 Suidae Species 0.000 claims description 6
- 230000003325 follicular Effects 0.000 claims description 5
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 claims 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 abstract description 2
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 abstract 1
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 abstract 1
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 abstract 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 14
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 description 6
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 description 6
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 6
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 6
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 4
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 4
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 4
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 229940094892 gonadotropins Drugs 0.000 description 3
- 230000009027 insemination Effects 0.000 description 3
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 2
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 2
- 230000013020 embryo development Effects 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 2
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000013 Ammonium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N N-acetyl-beta-neuraminic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000004451 Pituitary Gonadotropins Human genes 0.000 description 1
- 108010081865 Pituitary Gonadotropins Proteins 0.000 description 1
- 208000034790 Twin pregnancy Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- CDXSJGDDABYYJV-UHFFFAOYSA-N acetic acid;ethanol Chemical class CCO.CC(O)=O CDXSJGDDABYYJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 1
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000012173 estrus Effects 0.000 description 1
- 239000000745 gonadal hormone Substances 0.000 description 1
- 244000309465 heifer Species 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 230000009916 joint effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000000938 luteal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000027758 ovulation cycle Effects 0.000 description 1
- 210000004681 ovum Anatomy 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 210000005000 reproductive tract Anatomy 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000001360 synchronised effect Effects 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/59—Follicle-stimulating hormone [FSH]; Chorionic gonadotropins, e.g.hCG [human chorionic gonadotropin]; Luteinising hormone [LH]; Thyroid-stimulating hormone [TSH]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Percussion Or Vibration Massage (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Ultra Sonic Daignosis Equipment (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、豚の脳下垂体からの一定比率の
FSH(濾胞成熟ホルモン)およびLH(黄体形成
ホルモン)の混合物に関する。
FSH(濾胞成熟ホルモン)およびLH(黄体形成
ホルモン)の混合物に関する。
従来技術
牛、やぎおよび羊において誘発された多数の排
卵、または過剰排卵は、農業経済にとつての所定
の目的である最大利益:計画的妊娠、双胎妊娠そ
して特に胚移植を得るための基本的な問題であ
る。
卵、または過剰排卵は、農業経済にとつての所定
の目的である最大利益:計画的妊娠、双胎妊娠そ
して特に胚移植を得るための基本的な問題であ
る。
飼育動物種において、胚移植は、特別に有能な
雌(例えば、乳の高生産)から、選ばれた雄の精
子を用いて受精される卵子の最大量を得るのに役
立つ。これらの遺伝学的にすぐれた胚を、妊娠を
最後まで実行する傾向にある別の動物に移植す
る。
雌(例えば、乳の高生産)から、選ばれた雄の精
子を用いて受精される卵子の最大量を得るのに役
立つ。これらの遺伝学的にすぐれた胚を、妊娠を
最後まで実行する傾向にある別の動物に移植す
る。
概略的に、胚移植を2工程に区分できる。:
最初の工程の間、「提供者」の雌において、性
腺刺激ホルモンの投与によつて、自発的に成熟に
至るような、1個の濾胞の代わりに数個の濾胞の
成熟を誘発する。
腺刺激ホルモンの投与によつて、自発的に成熟に
至るような、1個の濾胞の代わりに数個の濾胞の
成熟を誘発する。
第2の工程の間、あらかじめ性腺刺激ホルモン
を用いて処理を受けた動物の生殖路中に集めら
れ、後ほど人工受精に付された、形態学的に正常
な胚を、「同期」させた別の雌であつてかつ「受
容者」と呼ばれる雌に移植する。
を用いて処理を受けた動物の生殖路中に集めら
れ、後ほど人工受精に付された、形態学的に正常
な胚を、「同期」させた別の雌であつてかつ「受
容者」と呼ばれる雌に移植する。
この過剰排卵の結果は、下記の理由により、い
くつかの場合において、良好な経済的結果には至
らない: a 極めて不足ないくつかの胚形成、または/お
よび生存できない奇形の胚形成; b 遺伝的にすぐれた雌における次の過剰排卵を
妨げ得る、卵巣の損傷の誘発。
くつかの場合において、良好な経済的結果には至
らない: a 極めて不足ないくつかの胚形成、または/お
よび生存できない奇形の胚形成; b 遺伝的にすぐれた雌における次の過剰排卵を
妨げ得る、卵巣の損傷の誘発。
数個の濾胞に対するホルモン刺激手順は最も注
意深い調節および調整を要するという事実に関す
るところの一般的一致がある。
意深い調節および調整を要するという事実に関す
るところの一般的一致がある。
多数の排卵、または過剰排卵は、通常、妊娠し
た雌の血液から抽出したPMSG(Pregnant Mare
Serum Gonadotropin、妊娠した雌の血清性腺刺
激ホルモン)か、あるいはそれとは別に豚および
馬のような飼育動物の脳下垂体から抽出した
FSH(濾胞成熟ホルモン)を投与することによ
つて誘発される。
た雌の血液から抽出したPMSG(Pregnant Mare
Serum Gonadotropin、妊娠した雌の血清性腺刺
激ホルモン)か、あるいはそれとは別に豚および
馬のような飼育動物の脳下垂体から抽出した
FSH(濾胞成熟ホルモン)を投与することによ
つて誘発される。
PMSGは、その容易な投与と共にその広い利用
性のゆえに、すべての飼育動物の過剰排卵におい
て長年にわたり支配的な地位を有していた。この
ホルモンは、FSHタイプおよびLHタイプの共同
の作用性を有する1分子のみからなり、高い含有
量のn−アセチル−ノイラミン酸を有しそして1
回のみの注射後何日間も循環血液中に残存する。
それゆえ、PMSGを用いて、1回のみの注射にお
いて通常の投与量の投与を行なうことにより満足
な刺激を得ることが可能である。
性のゆえに、すべての飼育動物の過剰排卵におい
て長年にわたり支配的な地位を有していた。この
ホルモンは、FSHタイプおよびLHタイプの共同
の作用性を有する1分子のみからなり、高い含有
量のn−アセチル−ノイラミン酸を有しそして1
回のみの注射後何日間も循環血液中に残存する。
それゆえ、PMSGを用いて、1回のみの注射にお
いて通常の投与量の投与を行なうことにより満足
な刺激を得ることが可能である。
しかしながら、PMSGを用いて行なつた過剰排
卵処理に対する応答は、このホルモンの使用を正
確な計画および期間内で実施する場合でさえ、極
めてさまざまな形をとる。
卵処理に対する応答は、このホルモンの使用を正
確な計画および期間内で実施する場合でさえ、極
めてさまざまな形をとる。
さらに、PMSGは、投与後の、自発的循環の反
復における長期遅滞によつて、明白な卵巣構造の
所定の変化を生ずる。これらの遅滞は、別の種類
の性腺紙激ホルモンを用いた過剰排卵処理から生
じる遅滞よりずつと長い。
復における長期遅滞によつて、明白な卵巣構造の
所定の変化を生ずる。これらの遅滞は、別の種類
の性腺紙激ホルモンを用いた過剰排卵処理から生
じる遅滞よりずつと長い。
循環血液内のPMSGの長期にわたる存在でさ
え、いくらかの望しくない結果、例えばいろいろ
な応答、および高率の異常胚の生産、の原因とな
り得ることが考えられる。
え、いくらかの望しくない結果、例えばいろいろ
な応答、および高率の異常胚の生産、の原因とな
り得ることが考えられる。
前記理由により、今や、飼育動物の脳下垂体か
ら抽出されたFSHがPMSGにとつて代わる傾向に
ある。
ら抽出されたFSHがPMSGにとつて代わる傾向に
ある。
文献からわかるように、最も使用される製品
は、豚の脳下垂体から抽出されるFSHからなる
FSH−Pであり、その用いられる投与量は、標
準のアーマー(Armour)FSHのmgと同じ量であ
る。
は、豚の脳下垂体から抽出されるFSHからなる
FSH−Pであり、その用いられる投与量は、標
準のアーマー(Armour)FSHのmgと同じ量であ
る。
アーマー(Armour)に付与された米国特許第
2799621号(1957)によれば、そこに記載の方法
によつて得たFSHは実質的にLHを欠いているの
でとりわけ有用である。さらに、この特許によれ
ば、FSHは所定の適用を有しその適用において
はLHの実質的欠如が有効であるので、前記の事
実は本質的に重要な発見である。
2799621号(1957)によれば、そこに記載の方法
によつて得たFSHは実質的にLHを欠いているの
でとりわけ有用である。さらに、この特許によれ
ば、FSHは所定の適用を有しその適用において
はLHの実質的欠如が有効であるので、前記の事
実は本質的に重要な発見である。
最近発行された文献から下記の結論を得る。す
なわち、実際に好ましい投与計画は、5日間にわ
たり、少しもLHを加えずに30〜32mgのFSH−P
の投与からなることである。
なわち、実際に好ましい投与計画は、5日間にわ
たり、少しもLHを加えずに30〜32mgのFSH−P
の投与からなることである。
発明の目的
本発明の主要な目的は、豚の脳下垂体から抽出
される一定比率のFSHおよびLHの組成物
(FSH/LH比が0.5〜2.5の範囲にある)であり、
この組成物は飼育動物中での過剰排卵の誘発にお
いて、FSH−およびPMSGの双方を用いて得られ
た結果よりすぐれた結果を与えるものである。
される一定比率のFSHおよびLHの組成物
(FSH/LH比が0.5〜2.5の範囲にある)であり、
この組成物は飼育動物中での過剰排卵の誘発にお
いて、FSH−およびPMSGの双方を用いて得られ
た結果よりすぐれた結果を与えるものである。
本発明の他の目的は、以下の記載から明白とあ
るであろう。
るであろう。
発明の構成の具体的説明
FSHの投与およびLHの投与を、おのおの、参
照調製液としてFSHおよびLHの生物学的投与用
の第1HMG国際標準品を使用して、ステイールマ
ンおよびポーレイ(Steelman and Pohley)の方
法(ステイールマン エス.エル.およびポーレ
イ エフ.エム.−Endocrinology 53:
604.1953)およびパーロー(Parlow)法(パーロ
ー エイ.エフ.(Parlow A.F.)、アルバート
エイ.(Albert A.)編Human Pituitary
Gonadotropins 300〜310−C.C.Thomas,
Springfield,Illinois)を用いて実施すると、本
開示に従つてつくられた組成物中のFSH/LH比
は0.5〜2.5の間に含まれた。
照調製液としてFSHおよびLHの生物学的投与用
の第1HMG国際標準品を使用して、ステイールマ
ンおよびポーレイ(Steelman and Pohley)の方
法(ステイールマン エス.エル.およびポーレ
イ エフ.エム.−Endocrinology 53:
604.1953)およびパーロー(Parlow)法(パーロ
ー エイ.エフ.(Parlow A.F.)、アルバート
エイ.(Albert A.)編Human Pituitary
Gonadotropins 300〜310−C.C.Thomas,
Springfield,Illinois)を用いて実施すると、本
開示に従つてつくられた組成物中のFSH/LH比
は0.5〜2.5の間に含まれた。
本開示に従つて豚の脳下垂体から生産される
FSH/LH組成物の抽出方法および精製方法の詳
細を以下に記載する。
FSH/LH組成物の抽出方法および精製方法の詳
細を以下に記載する。
本方法に用いる生の原料は、好ましくは、豚の
凍結した脳下垂体腺からなり、それは注意深く集
められそして貯蔵されねばならない。
凍結した脳下垂体腺からなり、それは注意深く集
められそして貯蔵されねばならない。
当業界の通常の方法において、他の分離方法は
もちろん使用することができるが、この抽出物は
遠心法によつて残余また不溶性部分から分離され
る。同様に、透析に代えて限外過法を用いるこ
ともできる。
もちろん使用することができるが、この抽出物は
遠心法によつて残余また不溶性部分から分離され
る。同様に、透析に代えて限外過法を用いるこ
ともできる。
本方法のすべての段階を、性腺刺激ホルモンの
変性を防ぐために、十分に低温で実施しなければ
ならない。通常、10℃以下の温度が勧められる。
この凍結の豚脳下垂体を、フエニル−メタン−ス
ルホニル−フルオリドを含有するアセトン中で4
℃において解かし、次いで均質化した。この均質
化した物質をアセトン性粉末を得るために、過
し、アセトンを用いて数回洗浄し、予備冷却し、
そして真空下で乾燥させた。
変性を防ぐために、十分に低温で実施しなければ
ならない。通常、10℃以下の温度が勧められる。
この凍結の豚脳下垂体を、フエニル−メタン−ス
ルホニル−フルオリドを含有するアセトン中で4
℃において解かし、次いで均質化した。この均質
化した物質をアセトン性粉末を得るために、過
し、アセトンを用いて数回洗浄し、予備冷却し、
そして真空下で乾燥させた。
このアセトン性粉末を、40%のエタノールおよ
びフエニル−メタン−スルホニル−フルオリドを
含有するPH5の4℃に予備冷却したアセテート−
エタノール緩衝液に加えた。この混合物を4℃で
20時間撹拌した。アセテート−エタノールで抽出
したこの産物の遠心法により、80%のエタノール
含有量まで調整されている透明な上澄を得た。こ
のようにして得た沈殿を、デカンテーシヨンおよ
び遠心法によつて集めた。
びフエニル−メタン−スルホニル−フルオリドを
含有するPH5の4℃に予備冷却したアセテート−
エタノール緩衝液に加えた。この混合物を4℃で
20時間撹拌した。アセテート−エタノールで抽出
したこの産物の遠心法により、80%のエタノール
含有量まで調整されている透明な上澄を得た。こ
のようにして得た沈殿を、デカンテーシヨンおよ
び遠心法によつて集めた。
この後、不溶性タンパクを除去するために炭酸
水素アンモニウムでの抽出を実施し、次いでこの
不溶性残余を遠心法で除去し、この上澄を水に対
して透析し次いで凍結乾燥を行ない、未精製の豚
の性腺刺激ホルモンを得た。
水素アンモニウムでの抽出を実施し、次いでこの
不溶性残余を遠心法で除去し、この上澄を水に対
して透析し次いで凍結乾燥を行ない、未精製の豚
の性腺刺激ホルモンを得た。
未精製物質の溶液を蒸留水で調製し、そして硫
酸アンモニウムを用いてPH5.3までおよび30%飽
和まで調製した。得られた沈殿を遠心法で分離
し、そしてこの上澄を硫酸アンモニウムを用いて
PH7.3および50%飽和まで調製した。
酸アンモニウムを用いてPH5.3までおよび30%飽
和まで調製した。得られた沈殿を遠心法で分離
し、そしてこの上澄を硫酸アンモニウムを用いて
PH7.3および50%飽和まで調製した。
大部分のLHを含有する沈殿をこの後遠心法で
集め、水に対して透析し、次いで凍結乾燥した。
以下「LH画分」と称するこの画分はいくらかの
少量のFSHをも含有していた。
集め、水に対して透析し、次いで凍結乾燥した。
以下「LH画分」と称するこの画分はいくらかの
少量のFSHをも含有していた。
次いでこの上澄の硫酸アンモニウム濃度を90%
飽和まで調製し、この混合物を数時間放置した。
FSHに富む沈殿を集め、透析し、そして凍結乾
燥した。以下「FSH画分」と称するこの画分は
いくらかの少量のLHをも含有していた。
飽和まで調製し、この混合物を数時間放置した。
FSHに富む沈殿を集め、透析し、そして凍結乾
燥した。以下「FSH画分」と称するこの画分は
いくらかの少量のLHをも含有していた。
前記の方法によつて得た「FSH画分)および
「LH画分」は、おのおの、少量のLHおよびFSH
によつて汚染されていた。一方の調製物と他方の
調製物とでは汚染物の存在が変化するので、
FSHおよびLHの所望の組成物を有する混合物を
得るために必要とされる量を計算するために、汚
染物の量を双方の画分において正確に測定しなけ
ればならない。
「LH画分」は、おのおの、少量のLHおよびFSH
によつて汚染されていた。一方の調製物と他方の
調製物とでは汚染物の存在が変化するので、
FSHおよびLHの所望の組成物を有する混合物を
得るために必要とされる量を計算するために、汚
染物の量を双方の画分において正確に測定しなけ
ればならない。
一定比率のFSHおよびLHの混合物を調製する
ための出発物質を以下に記載する。
ための出発物質を以下に記載する。
「a」mg当りのFSHの国際単位、および
「b」mg当りのLHの国際単位を含有する「FSH
画分」。
「b」mg当りのLHの国際単位を含有する「FSH
画分」。
「c」mg当りのFSHの国際単位、および
「d」mg当りのLHの国際単位を含有する「LH画
分」。
「d」mg当りのLHの国際単位を含有する「LH画
分」。
「T」単位のFSHを含有しかつFSH/LH比=
「R」である組成物を得るために混合物中に含さ
れる「FSH画分」および「LH画分」に対する、
おのおのの量「x」および「y」(ミリグラムで
表わされる)を下記式から得る。
「R」である組成物を得るために混合物中に含さ
れる「FSH画分」および「LH画分」に対する、
おのおのの量「x」および「y」(ミリグラムで
表わされる)を下記式から得る。
x=T/R・c−R・d/b・c−a・d
y=T/R・R・b−a/b・c−a・d
例えば、比(「R」)FSH/LH.=1を有する
「T」=120000国際単位のFSHを得るためには、
ミリグラム当り27.3国際単位のFSHおよびミリグ
ラム当り6.73国際単位のLHを含有する「x」ミ
リグラムの「FSH画分」を、ミリグラム当り8.9
国際単位のFSHおよびミリグラム当り811.7国際
単位のLHを含有する「y」ミリグラムの「LH画
分」と混合しなければならない。
「T」=120000国際単位のFSHを得るためには、
ミリグラム当り27.3国際単位のFSHおよびミリグ
ラム当り6.73国際単位のLHを含有する「x」ミ
リグラムの「FSH画分」を、ミリグラム当り8.9
国際単位のFSHおよびミリグラム当り811.7国際
単位のLHを含有する「y」ミリグラムの「LH画
分」と混合しなければならない。
前記の式を適用して、下記の値を得る。
x=120000/1・8.9−1×811.7/6.
73×8.9−27.3×811.7=4359.2 y=120000/1・1×6.73−27.3/6.
73×8.9−27.3×811.7=111.7 従つて、120000国際単位のFSHおよび120000
国際単位のLH(比FSH/LH=1)を含有する組
成物を得るためには、4359.2mgの「FSH画分」を
111.7mgの「LH画分」と混合しなければならな
い。
73×8.9−27.3×811.7=4359.2 y=120000/1・1×6.73−27.3/6.
73×8.9−27.3×811.7=111.7 従つて、120000国際単位のFSHおよび120000
国際単位のLH(比FSH/LH=1)を含有する組
成物を得るためには、4359.2mgの「FSH画分」を
111.7mgの「LH画分」と混合しなければならな
い。
すべての飼育動物において、提供者の雌から、
生存しかつ移植可能な最大量の胚を得るためにさ
まざまな種類のホルモンおよび投与計画によつて
過剰排卵を誘発することが、過去および現在の目
標である。最近、前記種類に、薬理学的研究に使
用される動物、例えば、猿、犬および猫を含め
た。
生存しかつ移植可能な最大量の胚を得るためにさ
まざまな種類のホルモンおよび投与計画によつて
過剰排卵を誘発することが、過去および現在の目
標である。最近、前記種類に、薬理学的研究に使
用される動物、例えば、猿、犬および猫を含め
た。
しかしながら、カナダの農務省(Department
Agriculture)によつて1977年に発行された(ベ
タリツジケイ.ジエイ.(Betteridge K.J.)編、
1977,Canada Depertment of Agriculture,
Monograph 16)この問題に関する一般的検討か
らわかるように、所定の統計的に求められた結果
は雌牛に対してしか有効でない。
Agriculture)によつて1977年に発行された(ベ
タリツジケイ.ジエイ.(Betteridge K.J.)編、
1977,Canada Depertment of Agriculture,
Monograph 16)この問題に関する一般的検討か
らわかるように、所定の統計的に求められた結果
は雌牛に対してしか有効でない。
1700頭以上の提供者の雌牛に基づいた計算によ
れば、移植可能な胚の収率は、極端に不定ではあ
るが、平均して動物当り5個以下である(ムール
アール.エム.(Moor R.M.)他、Vol.i,page
43,9th International Congress on Animal
Reproduction and Artifical Insemination−
Madrid 1980)。
れば、移植可能な胚の収率は、極端に不定ではあ
るが、平均して動物当り5個以下である(ムール
アール.エム.(Moor R.M.)他、Vol.i,page
43,9th International Congress on Animal
Reproduction and Artifical Insemination−
Madrid 1980)。
本発明による組成物を、牛の種で試験し、前記
の平均よりはるかにすぐれた結果を得た。
の平均よりはるかにすぐれた結果を得た。
本発明によつて調製したFSHおよびLHの混合
物を用いた処理計画であつて十分な乳生産期のフ
リージヤン牛(Frisian cow)に適したものは、
投与量を減少させながら総量で1000国際単位の
FSHおよび1000国際単位のLHを投与するもので
あつて、発情周期の9日目〜11日目から開始し5
日間にわたる投与からなる。
物を用いた処理計画であつて十分な乳生産期のフ
リージヤン牛(Frisian cow)に適したものは、
投与量を減少させながら総量で1000国際単位の
FSHおよび1000国際単位のLHを投与するもので
あつて、発情周期の9日目〜11日目から開始し5
日間にわたる投与からなる。
処理の3日目の晩に、黄体退行を刺激するため
に1アンプルのプロスタグランジンを投与した。
発情周期の開始から12時間後に人工受精を開始
し、2〜3回の人工受精を行なつた。
に1アンプルのプロスタグランジンを投与した。
発情周期の開始から12時間後に人工受精を開始
し、2〜3回の人工受精を行なつた。
2回目の受精後7日目に、外科的方法によら
ず、子宮角を洗浄することによつて、胚を取り出
した。
ず、子宮角を洗浄することによつて、胚を取り出
した。
この系を用いて、生産した卵子の受精から得ら
れるすべての胚、並びに、もしあるなら未受精の
卵子を容器中に集めた。
れるすべての胚、並びに、もしあるなら未受精の
卵子を容器中に集めた。
集めた胚を顕微鏡下で注意深く検査し、胚の形
態学上の特徴に従つて移植可能な胚と移植できな
い胚に分けた。
態学上の特徴に従つて移植可能な胚と移植できな
い胚に分けた。
乳生産期間のフリージヤン牛において、前期計
画によつて処理し、下記の平均値を得た。
画によつて処理し、下記の平均値を得た。
胚の総数 =14.571
移動可能な胚の総数 =11.142
産肉用の品種、例えば「マルキジアン
(marchigiane)」または「キアニン(chianine)」
においては、総投与量として750国際単位のFSH
および750国際単位のLHで十分である。
(marchigiane)」または「キアニン(chianine)」
においては、総投与量として750国際単位のFSH
および750国際単位のLHで十分である。
この投与量の投与計画、およびこの処理の他の
各詳細は、乳生産期間のフリージヤン牛に対して
前記したものと同一である。
各詳細は、乳生産期間のフリージヤン牛に対して
前記したものと同一である。
「マルキシジアン」牛および「キアニン」牛に
おいては、下記の平均値を得た。
おいては、下記の平均値を得た。
胚の総数 =14.142
移植可能な胚の総数 =10.571
前記の報告した平均値が「野外での」動物の処
理から得られたものであることは、強調べすき極
めて重要なことである。
理から得られたものであることは、強調べすき極
めて重要なことである。
「野外での」処理に代えて、すべての動物を十
分なあらゆる技術的条件下に処置し得る専門病院
で処理した場合には、かなりの改善した結果を得
ることは、当業者に十分理解されるところであ
る。
分なあらゆる技術的条件下に処置し得る専門病院
で処理した場合には、かなりの改善した結果を得
ることは、当業者に十分理解されるところであ
る。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1 豚の脳下垂体から抽出されるFSH(濾胞成
熟ホルモン)およびLH(黄体形成ホルモン)の
混合物であつて、FSH/LH比が0.5〜2.5の範囲
にある混合物。 2 FSH/LH比が実質的に1に等しい、特許請
求の範囲第1項記載のFSHおよびLHの混合物。 3 豚の脳下垂体からつくられるFSH(濾胞成
熟ホルモン)およびLH(黄体形成ホルモン)の
混合物であつて、FSH/LH比が0.5〜2.5の範囲
にある混合物の調製方法であつて、FSHに富む
画分およびLHに富む画分を調製し、所望の
FSH/LH比の混合物を得るために、双方の画分
の必要量を混合する方法。 4 FSHに富む画分が実質的に所定のLHによる
汚染を伴うFSHからなり、LHに富む画分が実質
的に所定のFSHによる汚染を伴うLHからなる、
特許請求の範囲第3項記載の方法。 5 豚の脳下垂体から抽出されるFSH(濾胞成
熟ホルモン)およびLH(黄体形成ホルモン)の
混合物であつて、FSH/LH比が0.5〜2.5の範囲
にある混合物を用いる、飼育動物における過剰排
卵誘発剤。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT47699/83A IT1197570B (it) | 1983-02-11 | 1983-02-11 | Miscele di fsh e lh da ipofisi porcine in rapporto definito |
| IT47699A/83 | 1983-02-11 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59193828A JPS59193828A (ja) | 1984-11-02 |
| JPS6241690B2 true JPS6241690B2 (ja) | 1987-09-04 |
Family
ID=11261968
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59022032A Granted JPS59193828A (ja) | 1983-02-11 | 1984-02-10 | 豚の脳下垂体からの一定比率のfshおよびlhの混合物 |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4959354A (ja) |
| EP (1) | EP0119168B1 (ja) |
| JP (1) | JPS59193828A (ja) |
| AT (1) | ATE63822T1 (ja) |
| AU (1) | AU548304B2 (ja) |
| CA (1) | CA1222952A (ja) |
| DE (2) | DE3484626D1 (ja) |
| DK (1) | DK164201C (ja) |
| ES (1) | ES529666A0 (ja) |
| IL (1) | IL70925A (ja) |
| IT (1) | IT1197570B (ja) |
| NO (1) | NO167438C (ja) |
| ZA (1) | ZA84896B (ja) |
Families Citing this family (25)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4725579A (en) * | 1985-02-21 | 1988-02-16 | Serono Laboratories, Inc. | Method of in vitro fertilization by a unique combination of gonadotropins |
| US4780451B1 (en) * | 1987-01-23 | 1995-04-04 | Asua International Inc | Composition and method for producing superovulation in cattle |
| FR2744367B1 (fr) * | 1996-02-02 | 1999-07-09 | Emperaire Jean Claude | Medicaments pour le declenchement de l'ovulation |
| US7235524B2 (en) | 1997-01-31 | 2007-06-26 | Applied Research System Ars Holding N.V. | Medicaments for initiating ovulation |
| EP2264427B1 (en) | 1997-01-31 | 2017-05-03 | Xy, Llc | Optical apparatus with focussing reflector for converging radiation onto a flow of particles, and related method of analysis |
| US6071689A (en) * | 1997-12-31 | 2000-06-06 | Xy, Inc. | System for improving yield of sexed embryos in mammals |
| US6149867A (en) | 1997-12-31 | 2000-11-21 | Xy, Inc. | Sheath fluids and collection systems for sex-specific cytometer sorting of sperm |
| PT1917974E (pt) | 1998-07-30 | 2011-02-22 | Xy Llc | Sistema de inseminação artificial não cirúrgica em equinos |
| GB2365445A (en) * | 1998-10-12 | 2002-02-20 | Geron Bio Med Ltd | Porcine occcytes with improved developmental competence |
| PT1176976E (pt) * | 1999-05-07 | 2006-11-30 | Applied Research Systems | Utilização de lh administrada na fase folicular média e tardia para o tratamento de mulheres anovulatórias. |
| US7208265B1 (en) | 1999-11-24 | 2007-04-24 | Xy, Inc. | Method of cryopreserving selected sperm cells |
| IL152714A (en) | 2000-05-09 | 2014-03-31 | Xy Llc | High-purity spermatozoa populations carrying chromosome-x and chromosome-y |
| WO2002043486A1 (en) | 2000-11-29 | 2002-06-06 | Xy, Inc. | System for in-vitro fertilization with spermatozoa separated into x-chromosome and y-chromosome bearing populations |
| US7713687B2 (en) | 2000-11-29 | 2010-05-11 | Xy, Inc. | System to separate frozen-thawed spermatozoa into x-chromosome bearing and y-chromosome bearing populations |
| JP4595067B2 (ja) | 2002-08-01 | 2010-12-08 | エックスワイ,エルエルシー | 低圧精子細胞分離システム |
| US8486618B2 (en) | 2002-08-01 | 2013-07-16 | Xy, Llc | Heterogeneous inseminate system |
| CA2534394C (en) | 2002-08-15 | 2013-01-08 | Xy, Inc. | High resolution flow cytometer |
| US7169548B2 (en) | 2002-09-13 | 2007-01-30 | Xy, Inc. | Sperm cell processing and preservation systems |
| BRPI0408857B1 (pt) | 2003-03-28 | 2018-09-11 | Inguran Llc | aparelho, métodos e processos para separar partículas e para prover esperma de animal separado por sexo |
| ES2541121T3 (es) | 2003-05-15 | 2015-07-16 | Xy, Llc | Clasificación eficiente de células haploides por sistemas de citometría de flujo |
| DK2801363T3 (en) | 2004-03-29 | 2018-05-28 | Inguran Llc | PROCEDURE FOR STORING SORTED SPERMATOZOES |
| CA2574499C (en) | 2004-07-22 | 2016-11-29 | Monsanto Technology Llc | Process for enriching a population of sperm cells |
| US7618770B2 (en) | 2005-07-29 | 2009-11-17 | Xy, Inc. | Methods and apparatus for reducing protein content in sperm cell extenders |
| RU2469738C1 (ru) * | 2011-06-17 | 2012-12-20 | Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Уральская государственная академия ветеринарной медицины" | Способ проведения суперовуляции у коров-доноров эмбрионов |
| KR101349009B1 (ko) | 2012-05-03 | 2014-01-21 | 대한민국 | 포유류의 일시적인 저영양상태를 이용한 체내수정란 생산방법 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2030209A (en) * | 1931-11-16 | 1936-02-11 | Wisconsin Alumni Res Found | Isolation and purification of hormones |
| US2356803A (en) * | 1940-03-05 | 1944-08-29 | Squibb & Sons Inc | Gonad-stimulating hormones and methods of obtaining and separating them |
| US2356802A (en) * | 1943-09-10 | 1944-08-29 | Gen Electric | Arc welding apparatus |
| FR3819M (fr) * | 1963-03-11 | 1966-01-10 | Serono Ist Farm | Nouvelle hormone hypophysaire a activité différenciée. |
| SU197709A1 (ja) * | 1965-02-20 | 1967-08-18 | ||
| DK144731C (da) * | 1976-07-30 | 1982-10-18 | Nordisk Insulinlab | Fremgangsmaade til isolering af proteinhormoner stammende fra humant hypofysevaev |
| US4780451B1 (en) * | 1987-01-23 | 1995-04-04 | Asua International Inc | Composition and method for producing superovulation in cattle |
-
1983
- 1983-02-11 IT IT47699/83A patent/IT1197570B/it active Protection Beyond IP Right Term
-
1984
- 1984-01-31 AU AU23938/84A patent/AU548304B2/en not_active Expired
- 1984-02-07 ZA ZA84896A patent/ZA84896B/xx unknown
- 1984-02-08 DE DE8484830028T patent/DE3484626D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1984-02-08 DE DE198484830028T patent/DE119168T1/de active Pending
- 1984-02-08 EP EP84830028A patent/EP0119168B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1984-02-08 AT AT84830028T patent/ATE63822T1/de not_active IP Right Cessation
- 1984-02-09 CA CA000447098A patent/CA1222952A/en not_active Expired
- 1984-02-10 NO NO840498A patent/NO167438C/no not_active IP Right Cessation
- 1984-02-10 ES ES529666A patent/ES529666A0/es active Granted
- 1984-02-10 JP JP59022032A patent/JPS59193828A/ja active Granted
- 1984-02-10 IL IL70925A patent/IL70925A/xx not_active IP Right Cessation
- 1984-02-10 DK DK061984A patent/DK164201C/da not_active IP Right Cessation
-
1987
- 1987-07-14 US US07/073,901 patent/US4959354A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO840498L (no) | 1984-08-13 |
| EP0119168B1 (en) | 1991-05-29 |
| AU548304B2 (en) | 1985-12-05 |
| IT1197570B (it) | 1988-12-06 |
| ZA84896B (en) | 1984-09-26 |
| DK61984A (da) | 1984-08-12 |
| NO167438B (no) | 1991-07-29 |
| IL70925A (en) | 1987-10-20 |
| DK164201B (da) | 1992-05-25 |
| ES8504457A1 (es) | 1985-05-16 |
| EP0119168A3 (en) | 1987-05-06 |
| DK61984D0 (da) | 1984-02-10 |
| DK164201C (da) | 1992-10-19 |
| IT8347699A0 (it) | 1983-02-11 |
| DE119168T1 (de) | 1985-01-31 |
| CA1222952A (en) | 1987-06-16 |
| IL70925A0 (en) | 1984-05-31 |
| US4959354A (en) | 1990-09-25 |
| EP0119168A2 (en) | 1984-09-19 |
| ATE63822T1 (de) | 1991-06-15 |
| AU2393884A (en) | 1984-08-16 |
| ES529666A0 (es) | 1985-05-16 |
| JPS59193828A (ja) | 1984-11-02 |
| DE3484626D1 (de) | 1991-07-04 |
| NO167438C (no) | 1991-11-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPS6241690B2 (ja) | ||
| JP6823013B2 (ja) | 卵胞同期化後の単回リコンビナントウシfsh | |
| US5162306A (en) | Composition and method for producing superovulation in mammals | |
| Nuti et al. | Superovulation and recovery of zygotes from Nubian and Alpine dairy goats | |
| JPH01157916A (ja) | 誕生時の新生児の体重を増加させ且つ生後の成長を促進する方法 | |
| Bellows et al. | Superovulation and multiple births in beef cattle | |
| DE3787185T2 (de) | Methode zur Erhöhung des Wachstums des Brustzellgewebes. | |
| US20220143131A1 (en) | Compositions and Methods for increasing Reproduction Performance in Non Human Mammals Using Recombinant Luteinizing Hormone | |
| US4980166A (en) | Method of regulating animal reproduction | |
| Crighton | The induction of pregnancy during lactation in the sow: the effects of a treatment imposed at 21 days of lactation | |
| JP3181459B2 (ja) | 牛の過剰排卵誘起方法 | |
| Johnson et al. | Gonadotropin induced multiple births in beef cows following estrus synchronization | |
| Alwan et al. | Superovulation and oocyte recovery in the ewe | |
| EP0310288A2 (en) | Improved ovulation treatment | |
| Diaz et al. | Reproductive performance and synchronization of estrus in brown swiss and holstein cows and heifers using PGF2 | |
| US2007328A (en) | Gonad-stimulating substance and process of producing it | |
| RU2038780C1 (ru) | Способ стимуляции репродуктивной функции коров | |
| Elsawy et al. | Pros And Cons Of Artificial Insemination In Rabbits Raised Under Current Climate Change Era | |
| Cole | Control of oestrus and ovulation in domestic animals with gonadotrophins | |
| Piper et al. | Qenetic and non-genetic approaches to increasing prolificacy in beef cattle. | |
| RU2071352C1 (ru) | Способ вызывания синхронизированной суперовуляции у половозрелых свиней | |
| Van Heerden | Investigation into the cause of abortion in Angora goats in South Africa | |
| Ciornei et al. | Polyovulatory response and in vivo embryo production at the romanian indigenous buffalo, out of breeding season in NE of Romania | |
| JPH03117446A (ja) | Fshによる牛の双子生産方法 | |
| Kamal et al. | Extraction and Isolation of Gamma Globulin from the Bovine Thymus Gland1 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |