【発明の詳細な説明】[Detailed description of the invention]
本発明は体内脂質減少剤に関し、詳しくはシユ
ークロースにフラクトシルトランスフエラーゼを
作用させ、その結果生成されるシユークロースに
フラクトースが１〜４分子結合したオリゴ糖類を
主成分とする糖混合物の医療用新用途としての体
内脂質減少剤に関する。
近年、日欧米の先進諸国では、栄養過剰の食生
活による肥満者が増加し、高血圧、糖尿、高脂血
および脂肪肝等の各種の成人病の発現率が高ま
り、これらの原因となる肥満防止に重大な関心が
持たれている。この様な背景のもと、本発明者ら
は脂質代謝に影響を及ぼす物質を検索すべく実験
動物を用いて検討した結果、特定の糖混合物を常
時摂取することにより、体重増加が抑制され、血
液中の血糖値、コレステロール、トリグリセライ
ドの明確な減少が認められることを知見し、本発
明を完成した。
本発明はシユークロースにフラクトースが１〜
４分子結合したオリゴ糖類を主成分とする糖混合
物からなる体内脂質減少剤を提供するものであ
る。シユークロースにフラクトシルトランスフエ
ラーゼを作用させることによつて得られるシユー
クロースにフラクトースが１〜４分子結合したオ
リゴ糖類を主成分とする糖混合物（以下、ネオシ
ユガーと称する）の製造法については特開昭56−
154967号および特開昭57−12973号に開示されて
おり、これらに記載の方法により容易に製造し得
る。得られるネオシユガーにはオリゴ糖群、すな
わちシユークロースにフラクトースが１分子結合
した物質（以下、GF2と称する）、シユークロー
スにフラクトースが２分子結合した物質（以下、
GF3と称する）、シユークロースにフラクトース
が３分子結合した物質（以下、GF4と称する）、
シユークロースにフラクトースが４分子結合した
物質（以下、GF5と称する）等のオリゴ糖、未反
応のシユークロース及び転移反応により副成した
グルコース等が含まれている。そして、これらの
構成糖の組成は製造中の反応条件により種々の値
をとり得る。従つて、本発明に係るネオシユガー
の糖組成はどのような組合せも可能であるが、有
効性評価に使用した次の２例を代表例として記載
する。
The present invention relates to a lipid-reducing agent in the body, and more specifically, a new medical saccharide mixture whose main component is an oligosaccharide in which 1 to 4 molecules of fructose are bound to the sucrose produced by the action of fructosyltransferase on sucrose. This invention relates to an agent for reducing internal lipids as a use. In recent years, in developed countries such as Japan, Europe, and the United States, the number of obese people due to over-nutritious diets has increased, and the incidence of various adult diseases such as hypertension, diabetes, hyperlipidemia, and fatty liver has increased. is of great interest. Against this background, the present inventors used experimental animals to search for substances that affect lipid metabolism, and found that constant intake of a specific sugar mixture suppresses weight gain. The present invention was completed based on the finding that a clear decrease in blood sugar levels, cholesterol, and triglycerides was observed. In the present invention, fructose is added to sucrose from 1 to 1.
The object of the present invention is to provide an agent for reducing lipids in the body consisting of a sugar mixture whose main component is oligosaccharides bonded by four molecules. JP-A-Sho discloses a method for producing a sugar mixture whose main component is an oligosaccharide (hereinafter referred to as neo-sugar) in which 1 to 4 molecules of fructose are bound to sucrose obtained by the action of fructosyltransferase. 56−
It is disclosed in No. 154967 and Japanese Unexamined Patent Publication No. 12973/1983, and can be easily produced by the methods described therein. The obtained neoshugar contains oligosaccharide groups, namely a substance in which one molecule of fructose is bound to sucrose (hereinafter referred to as GF 2 ), and a substance in which two molecules of fructose are bound to sucrose (hereinafter referred to as GF 2).
GF 3 ), a substance in which three fructose molecules are bound to sucrose (hereinafter referred to as GF 4 ),
It contains oligosaccharides such as a substance in which four molecules of fructose are bound to sucrose (hereinafter referred to as GF 5 ), unreacted sucrose, and glucose by-produced by a transfer reaction. The composition of these constituent sugars can take various values depending on the reaction conditions during production. Therefore, any combination of the sugar compositions of Neosugar according to the present invention is possible, but the following two examples used for efficacy evaluation will be described as representative examples.
【表】
これらの５％および10％添加飼料を用い、正常
ラツトに６週間自由摂取させ経時的に体重、血液
および組織検査を実施した結果、毒性の発現を認
めず、添加量に比例した体重増加度の抑制を認め
た。また、血液検査では血糖、コレステロールお
よびトリグリセライドの明確な減少を認めた。さ
らに、剖検時に体脂肪の顕著な減少を認めた。ま
た、ゴールドチオグルコース起因肥満マウスにネ
オシユガー10％添加飼料をペアードフイーデイン
グ（Paired feeding）で４週間給餌し、経時的に
体重、血液検査を実施した結果、体重の減少とコ
レステロール、ホスホリピツドおよびトリグリセ
ライドの減少を認め、特に脂質の減少は顕著であ
つた。
これらの事実から、本発明のネオシユガーを常
時摂取することにより、肥満が防止され、既に肥
満となつた者では肥満が解消され、加えて血中の
コレステロール等の脂質も低下するものと考えら
れる。
また、フラクトース、グルコースおよびシユー
クロース等の糖質食を給餌すると血清と肝内脂質
の著増および明確な脂肪肝を発症する特殊な実験
系を用いてネオシユガー食を給餌したが、ネオシ
ユガーは血清と肝内脂質を増量せず、かつ全く脂
肪肝を誘発しなかつた。この事実と上記の正常ラ
ツトの試験結果から、本発明のネオシユガーは、
脂肪肝治療および脂肪肝発症防止作用を有すると
考えられる。
また、糖尿病動物を用いてネオシユガーを経口
もしくは腹腔内に３週間投与し、経時的に血中脂
質を検査した結果、いずれの投与経路で投与して
も、ネオシユガーは血糖、コレステロール、ホス
ホリピツドおよびトリグリセライドを明確に低下
させ、特に腹腔内投与時の効果は顕著であつた。
このことより、本発明のネオシユガーは、糖尿病
患者の高血糖および高脂血、とりわけ高脂血状態
を顕著に改善するものと考えられ、特に静脈内投
与での効果が期待出来る。
さらに、13週齢の自然発症高血圧ラツトにネオ
シユガー混餌食を８週間給餌し、経時的に体重、
血液、組織検査、肝内脂質量および血圧を測定し
た結果、体重増加度の鈍化と血中のコレステロー
ル、トリグリセライドおよびホスホリピツド、加
えて肝内脂質量の減少を認めた。また、血圧上昇
が抑制され、動物の上昇した血圧を低下させた。
この結果から本発明のネオシユガーは高血圧症
の防止および治療効果も充分期待され、特に肥満
と高脂血症を併せもつ高血圧患者への効果が期待
出来る。
このような一連の事実から本発明のネオシユガ
ーは、臨床でも肥満の予防作用を発現し、さらに
各種の原因による高脂血症を治療するものと考え
られるし、また高血圧症の予防と治療作用も充分
に期待し得ると考えられる。
なお、ネオシユガーＰ、Ｇの毒性は試験の結
果、ラツト、マウス雄雌共経口投与でLD509ｇ／
Kg以上であつた。
体内脂質減少剤としてのネオシユガーの実際的
な使用法としては特に制限はないが、経口適用も
しくは静脈内投与が望ましい。剤形としてはペレ
ツト、粉末、水溶液などが好ましい。経口適用の
場合は、飲用水に溶解し、水溶液として１回50ｇ
以下、好ましくは毎食後、１日３回摂取する方法
が望ましい。また、飲用以外の経口投与としては
あらゆる食品に砂糖の代替品として用い摂取させ
ることが出来る。静脈内適用の場合は、濃度15％
以下の水溶液としてもしくは各種の点滴用剤に一
定量添加し、それらの500ml剤を朝夕１日２回程
度、静脈内に点滴適用することが望ましい。
上述の方法により本発明のネオシユガーを摂取
させることにより、肥満、高脂血、脂肪肝および
高血圧の予防と治療が行なわれ、特に高脂血の入
院患者には経口と静脈内適用を併用することによ
り、迅速な効果の発現が期待される。このように
本発明のネオシユガーは体内脂質減少剤として、
肥満者と成人病患者が漸増する現代において、人
類の健康維持上極めて有用である。
以下、実施例によつて本発明の効果を説明す
る。
実施例 １
オリエンタル酵母工業KK製の精製飼料Ａ配合
の組成中の蔗糖５％、あるいは更に澱粉５％を除
いた飼料にネオシユガーＰ、ネオシユガーＧ、シ
ユークロースもしくはグルコースを５％あるいは
10％の割合に加えた飼料を作製した。それらを、
体重平均170ｇのウイスター系ラツト雄１群18匹
に６週間自由に摂取させ、経時的に体重を測定し
た。また、10％混餌群について給餌開始後、２、
４および６週目に各群６例宛採血し、経時的に血
液検査を行なつた。なお、平均摂餌量は次のとお
りであつた。
５％ 10％
ネオシユガーＰ 23.3ｇ 25.0ｇ
ネオシユガーＧ 28.7 26.4
グルコース 26.3 25.0
シユークロース 27.5 31.4
無処置 25.0 25.0
結果を第１図および第２図に示す。
実施例 ２
ゴールドチオグルコース30mg量を１回腹腔内投
与し、５週間放置して肥満となつたJCL−ICR系
の雄マウスを１群20匹として用い、実施例１の場
合と同様に作製した糖質10％添加飼料をペアード
フイーデイングで４週間給餌し、その間経時的に
血液検査を行なつた。結果を第３図に示す。
実施例 ３
蔗糖約90％で、蛋白質を含まない飼料を14日間
摂取させた10週齢のウイスター系ラツトの雄を１
群６匹として用い、それらに糖質各70％とカゼイ
ン、ビタミン等からなる飼料を６日間自由摂取さ
せた。７日目に採血と肝の摘出を行ない血清と肝
内の総脂質（コレステロール、トリグリセライ
ド、ホスホリピツド）を測定した。結果を第４図
に示す。
実施例 ４
８週齢のウイスター系ラツトの雄にストレプト
ゾトシン60mg／Kg量を１回静脈内投与し、２週間
放置した動物を１群30匹として用い、ネオシユガ
ーおよび蔗糖を腹腔内に２ｇ／Kg量３週間連続投
与し、その間経時的に血液検査を行なつた。結果
を第５図に示す。
実施例 ５
13週齢の自然発症性高血圧ラツト（SHR）の
雄を各１群40匹として用い、実施例１の場合と同
様に作製したネオシユガー10％添加飼料を８週間
ペアードフイーデイングで給餌し、その間経時的
に体重、血液、体内脂質、組織像および血圧を測
定した。結果を第６図に示す。
実施例 ６
８週齢のウイスター系のラツト雄を用いた。こ
の実験動物にはストレプトゾトシン60mg／Kg量を
１回静脈内投与し、２週間放置して糖尿病状態と
して供試した。
糖尿病状態とした上記実験動物を１群30匹とし
て用いた。ネオシユガーは4.5ｇ／Kg量を１日１
回３週間に亘り経口投与し、１、２および３週間
投与後にそれぞれ各群10匹ずつを採血に供し、血
液中の脂質を測定した。結果を第７図に示す。[Table] Using these 5% and 10% additive feeds, normal rats were fed ad libitum for 6 weeks, and body weight, blood, and tissue tests were conducted over time. As a result, no toxicity was observed, and the body weight was proportional to the amount added. Suppression of the degree of increase was observed. Blood tests also showed clear decreases in blood sugar, cholesterol and triglycerides. Furthermore, a significant decrease in body fat was observed at autopsy. In addition, we fed neosugar 10% supplemented diet to gold thioglucose-induced obese mice for 4 weeks by paired feeding, and conducted body weight and blood tests over time. Results showed a decrease in body weight and cholesterol, phospholipids, and triglycerides. A decrease in lipids was observed, and the decrease in lipids was particularly remarkable. Based on these facts, it is thought that regular intake of the NeoShuga of the present invention will prevent obesity, eliminate obesity in those who are already obese, and also reduce lipids such as cholesterol in the blood. In addition, we used a special experimental system in which feeding carbohydrates such as fructose, glucose, and sucrose caused a marked increase in serum and intrahepatic lipids, as well as distinct fatty liver, and fed a neosugar diet. It did not increase internal lipids and did not induce fatty liver at all. Based on this fact and the above test results on normal rats, the NeoSugar of the present invention
It is thought to have effects on treating fatty liver and preventing the onset of fatty liver. In addition, NeoXugar was administered orally or intraperitoneally for 3 weeks to diabetic animals, and blood lipids were examined over time.Results showed that NeoXugar lowered blood sugar, cholesterol, phospholipids, and triglycerides regardless of the administration route. The effect of intraperitoneal administration was particularly remarkable.
From this, it is thought that the Neosugar of the present invention significantly improves hyperglycemia and hyperlipidemia, especially hyperlipidemia, in diabetic patients, and is particularly effective when administered intravenously. In addition, 13-week-old spontaneously hypertensive rats were fed a neo-sugar-containing diet for 8 weeks, and body weight and
Blood and histological examinations, intrahepatic lipid levels, and blood pressure measurements revealed a slowdown in weight gain and a decrease in blood cholesterol, triglycerides, and phospholipids, as well as intrahepatic lipid levels. In addition, the increase in blood pressure was suppressed and the increased blood pressure of the animals was lowered. Based on these results, the Neosugar of the present invention is expected to be effective in preventing and treating hypertension, and is particularly expected to be effective for hypertensive patients who have both obesity and hyperlipidemia. Based on these facts, Neosugar of the present invention is thought to have a preventive effect on obesity in the clinical setting, and also to treat hyperlipidemia caused by various causes, and also has a preventive and therapeutic effect on hypertension. It is considered that this can be fully expected. In addition, the toxicity of Neosugar P and G was determined by oral administration to both male and female rats and mice, with an LD 50 of 9g/g.
It was over Kg. Although there are no particular restrictions on the practical use of Neosugar as a lipid-reducing agent in the body, oral application or intravenous administration is preferable. Preferred dosage forms include pellets, powder, and aqueous solutions. For oral application, dissolve in drinking water, 50g at a time as an aqueous solution.
Hereinafter, it is desirable to take the drug three times a day, preferably after each meal. In addition, for oral administration other than drinking, it can be used as a sugar substitute in all kinds of foods. For intravenous application, concentration 15%
It is preferable to add a certain amount of the following aqueous solution or to various infusion preparations, and apply the 500 ml preparation intravenously twice a day in the morning and evening. Obesity, hyperlipidemia, fatty liver, and hypertension can be prevented and treated by ingesting Neosugar of the present invention by the method described above, and in particular, oral and intravenous administration can be used in combination for hospitalized patients with hyperlipidemia. It is expected that the effects will appear quickly. In this way, the Neosugar of the present invention can be used as a lipid-reducing agent in the body.
In modern times, where the number of obese people and patients with adult diseases is increasing, it is extremely useful for maintaining human health. Hereinafter, the effects of the present invention will be explained with reference to Examples. Example 1 5% of sucrose in the composition of purified feed A formulation manufactured by Oriental Yeast Kogyo KK, or 5% of Neoshugar P, Neoshugar G, sucrose, or glucose was added to the feed excluding 5% of starch.
A feed containing 10% was prepared. Those,
A group of 18 male Wistar rats with an average body weight of 170 g were allowed to eat the drug ad libitum for 6 weeks, and their body weights were measured over time. In addition, for the 10% mixed feeding group, after the start of feeding, 2,
Blood was collected from 6 patients in each group at 4 and 6 weeks, and blood tests were conducted over time. The average food intake was as follows. 5% 10% Neoshugar P 23.3g 25.0g Neoshugar G 28.7 26.4 Glucose 26.3 25.0 Sucrose 27.5 31.4 No treatment 25.0 25.0 The results are shown in FIGS. 1 and 2. Example 2 A group of 20 JCL-ICR male mice were prepared in the same manner as in Example 1, with 30 mg of gold thioglucose administered intraperitoneally once and left for 5 weeks to become obese. A diet supplemented with 10% carbohydrate was fed for 4 weeks by paired feeding, and blood tests were conducted over time during this period. The results are shown in Figure 3. Example 3 One 10-week-old male Wistar rat was fed a diet containing approximately 90% sucrose and no protein for 14 days.
Groups of 6 animals were used, and they were given free access to feed consisting of 70% carbohydrate, casein, vitamins, etc. for 6 days. On the 7th day, blood was collected and the liver was removed, and serum and total lipids (cholesterol, triglyceride, phospholipids) in the liver were measured. The results are shown in Figure 4. Example 4 60 mg/Kg of streptozotocin was intravenously administered once to 8-week-old male Wistar rats, and the animals were left for 2 weeks (30 animals per group). Neosugar and sucrose were intraperitoneally administered at 2 g/Kg. The drug was administered continuously for 3 weeks, during which time blood tests were conducted. The results are shown in Figure 5. Example 5 13-week-old male spontaneously hypertensive rats (SHR) were used (40 rats in each group) and fed with Neosugar 10% supplemented feed prepared in the same manner as in Example 1 by paired feeding for 8 weeks. During this period, body weight, blood, body lipids, histology, and blood pressure were measured over time. The results are shown in Figure 6. Example 6 Eight-week-old male Wistar rats were used. These experimental animals were intravenously administered with streptozotocin at a dose of 60 mg/kg once, and left for 2 weeks to maintain a diabetic state. The above-mentioned experimental animals in a diabetic state were used in groups of 30 animals. Neo Shugar 4.5g/Kg once a day
The mice were orally administered for 3 weeks, and after 1, 2, and 3 weeks of administration, blood was collected from 10 animals in each group, and the lipids in the blood were measured. The results are shown in FIG.
【図面の簡単な説明】[Brief explanation of the drawing]
第１図ａ，ｂは実施例１の正常ラツトを使用し
た６週間糖質混餌試験における体重の経時的変化
を示し、ａは５％混餌群、ｂは10％混餌群であ
る。第２図ａは血液検査のうち血糖の経時的変化
を、第２図ｂはコレステロールの経時的変化を、
第２図ｃはトリグリセライドの経時的変化をそれ
ぞれ示す。第３図ａ，ｂ，ｃは実施例２のゴール
ドチオグルコース起因肥満マウスを使用した４週
間混餌試験における体内脂質の経時的変化を示
し、ａはコレステロールを、ｂはホスホリピツド
をｃはトリグリセライドを示す。第４図ａ，ｂは
実施例３の糖質過給餌ウイスター系ラツトの血清
中総脂質ａおよび肝内総脂質ｂの測定値を示す。
第５図ａ，ｂ，ｃは実施例４のストレプトゾトシ
ン起因糖尿病ラツトを使用した３週間腹腔内投与
における体内脂質の経時的変化を示し、第５図ａ
はコレステロール、第５図ｂはホスホリピツド、
第５図ｃはトリグリセライドを示す。第６図ａ〜
ｆは実施例５の自然発症高血圧ラツトを使用した
８週間のネオシユガー10％混餌試験における経時
変化を示し、ａは体重、ｂは血糖、ｃは血圧（４
週後のみ）および体内脂質（ｄはコレステロー
ル、ｅはホスホリピツド、ｆはトリグリセライ
ド）をそれぞれ示す。第７図は実施例６のストレ
プトゾトシン起因糖尿病ラツトの血清脂質に対す
るネオシユガーの経口投与による影響を示し、第
７図ａはコレステロール、第７図ｂはホスホリピ
ツド、第７図ｃはトリグリセライドの経時的変化
である。
Figures 1a and 1b show the changes in body weight over time in the 6-week carbohydrate feeding test using normal rats in Example 1, where a is the 5% feeding group and b is the 10% feeding group. Figure 2a shows the changes in blood sugar over time, and Figure 2b shows the changes in cholesterol over time.
FIG. 2c shows the changes in triglycerides over time. Figures 3 a, b, and c show changes in body lipids over time in the 4-week feeding test using gold thioglucose-induced obese mice in Example 2, where a shows cholesterol, b shows phospholipids, and c shows triglycerides. . Figures 4a and 4b show the measured values of serum total lipid a and intrahepatic total lipid b of the carbohydrate-superfed Wistar rats of Example 3.
Figures 5a, b, and c show changes in body lipids over time during intraperitoneal administration for 3 weeks in streptozotocin-induced diabetic rats of Example 4;
is cholesterol, Figure 5b is phospholipid,
Figure 5c shows triglycerides. Figure 6 a~
f shows the change over time in the 8-week neosugar 10% feeding test using spontaneously hypertensive rats in Example 5, a is body weight, b is blood sugar, and c is blood pressure (4
(only after one week) and body lipids (d is cholesterol, e is phospholipid, f is triglyceride), respectively. Figure 7 shows the effects of oral administration of Neosugar on serum lipids in streptozotocin-induced diabetic rats in Example 6, with Figure 7a showing changes in cholesterol, Figure 7b showing phospholipids, and Figure 7c showing changes over time in triglycerides. be.