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JPS6348224A - 家禽大腸菌症ワクチン - Google Patents
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JPS6348224A - 家禽大腸菌症ワクチン - Google Patents

家禽大腸菌症ワクチン

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JPS6348224A JP61191119A JP19111986A JPS6348224A JP S6348224 A JPS6348224 A JP S6348224A JP 61191119 A JP61191119 A JP 61191119A JP 19111986 A JP19111986 A JP 19111986A JP S6348224 A JPS6348224 A JP S6348224A
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は家禽大腸菌症ワクチンに関し、さらに詳しくは
、家禽由来の不活化した大腸菌の菌体を超音波処理した
ことを特徴とする家禽大腸菌症予防用の不活化ワクチン
、並びに該ワクチンを用いる家禽大腸菌症の予防法に関
するものである。
［発明の背景］ 家禽における大腸菌症には、大腸菌症敗血症を始め、関
節炎、出血性腸炎等の種々の疾患が含まれるが、中でも
敗血症のブロイラー鶏での集団発生は養鶏家にとって極
めて大きい経済的損失をもたらすことから、重大な問題
となっている。従来、各種の化学療法剤や抗生物質を用
いて予防および治療が行なわれていたが、耐性菌の増加
に伴ってその効果が低下しており、ワクチンの開発が待
たれていた。これまでに知られているのは、不活化した
大腸菌の全細胞を用いた不活化ワクチンのみであり、か
かる全細胞不活化ワクチンでは毒性が高く、かつ予防効
果が充分でなかった。一方、毒性の低減及び薬剤耐性菌
の出現の抑制などを図るために、ワクチンの経肛門部投
与法が提案されている（特開昭５８−１３１９’２０号
）。本発明者らは、これらの方法を更に改良すべく種々
研究を重ねた結果、本発明を完成するに至った。
［問題点を解決するための手段］ 本発明者らは、予め不活化した大腸菌菌体を超音波処理
すると、大腸菌症に対する予防効果が増強されることを
見出し、本発明を完成するに至った。
即ち、本発明は、不活化１−た大腸菌菌体を超音波処理
したことを特徴とする家禽大腸菌症ワクチン、並びに該
ワクチンを使用する家禽大腸菌症の予防法を提供するも
のである。
本発明のワクチンを製造するには、まず、大腸菌症に感
染している家禽の臓器（例えば気のう部）または糞便か
ら単離した大腸菌を、ホルマリン、フェノール、アセト
ンまたはアルコール等の化学物質を用いる方法、あるい
は凍結乾燥や加熱処理等の他の方法で不活化する。次い
て、不活化した大腸菌を超音波処理に付して細胞を損傷
破壊することにより本発明のワクチンを得る。超音波処
理は、例えば、商品名、セル・ディスルーパー（Ｃｅｌ
ｌＤ　１ｓｒｕｐｅｒ）　２００　［ブランソン（ＢＲ
ＡＭＳＯＮ）製］を用い、ＰＢＳ　（りん酸緩衝液）中
の菌体に水冷下、最大出力、発振サイクル５０％で５分
間、３回処理することにより行うことができる。
その他、当業者既知の同等の装置を用いてもよい。
また、超音波処理の条件は、大腸菌の菌体を損傷破壊さ
せることを前提として適宜、設定することができ、前記
の条件に限定されるものではない。
この様にして得られた本発明のワクチンは、そのままで
も有効であるが、さらに、水酸化アルミニウムゲル、フ
ロイントの完全アジュバント等のアジュバントを加えて
免疫原性を高めることもできる。さらには、他の免疫的
抗原や非病原性の抗原を混合し、併用してもよい。
［発明の作用］ 本発明ワクチンは種々の経路から投与することができる
が、細菌毒性に由来する副作用（体重減少等）が発現す
るおそれのない、肛門部接種法（特開昭５８−’１３１
９２０号）によるのが最も好ましい。通常、本発明のワ
クチン０．００２〜０．２酎（約２ｘ　１０’　〜２ｘ
　Ｉ　０１０ＣＦＵ／ｍｃ）をニワトリ、アヒル、七面
鳥等の肛門部に接種すると大腸菌症を有効に予防するこ
とができ、集団発生を阻止することができる。
以下に実施例を挙げ、本発明をさらに詳細に説明する。
［実施例］ 大腸菌症を呈する病鶏の気のう部から分離した大腸菌（
０２）をブイヨン培地中、３７℃で２４時間培養した後
、ホルマリン０．２％を加えて不活化した。１．５ＸＩ
　Ｏ’ＣＦＵ’／ｘ（（細胞／ｆｆ１１２）以上の細胞
密度を有するこの培養ブイヨン培地の一部をとり、ブラ
ンソン（ＢＲＡＮＳＯＮ）製、商品名セル・ディスルー
パー（Ｃｅｌｌ　　Ｄｉｓｒｕｐｅｒ）２００を使用し
て、最大出力、発振サイクル５０％の条件で水冷下５分
間を３回実施することにより超音波処理してワクチン（
Ｉ）を得た。
他方、上記の不活化した培養ブイヨン培地の一部をとり
、遠心（１４０００）１，２０分間、４°Ｃ）して菌体
を集め、ＰＢＳ　で２ｘ　１０１０ＣＦＵ／ｍｇ濃度に
調製した菌液を上記同様に超音波処理し、ワクチン（Ｔ
Ｉ）を得た。ＰＢＳ　液は、Ｎ　ａ　Ｈｘ　Ｐ　Ｏ４−
ｌ　　２Ｈ２０１１，９９、ＮａＨ，Ｐ　　Ｏ４・　２
　　Ｈ＊０３．６９およびＮａＣＱ９．６ｇを蒸留水で
１ｏｏＯｚ４に調節した後、滅菌処理したものである。
［発明の効果］ 本発明のワクチンの接種方法並びに家禽大腸菌症に対す
る免疫効果の判定方法およびその結果を−４〜 実験例に示す。
夾１阿 ■、対照ワクチンの調製 実施例においてホルマリンにより不活化処理して得た培
養ブイヨン培地を、それぞれ対照ワクチン（１）および
（ＩＩ）として用いた。
２、ワクチン接種および評価 岬化後３０時間以内の雛（ブロイラー専用種、チャンキ
ー）各１１羽に、本発明ワクチンまたは対照ワクチンを
肛門部から０．０３ｍ１２点滴接種点滴量昭５８−１３
１９２０参考）した。次いで、これらの雛が２１日令に
達した時点で、ワクチンと同一菌株を１羽当り６ＸＩＯ
’ＣＦＵ静脈内接種し、感染させた。なお、対照（１２
羽）にはワクチンを接種せず、感染処置のみを行った。
効果の判定は、感染後７日目の生存羽数（耐過率とその
χ２検定）によった。
結果を表１に示す。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １、不活化した大腸菌菌体を超音波処理したことを特徴
    とする家禽大腸菌症ワクチン。 ２、不活化した大腸菌菌体を超音波処理した家禽大腸菌
    症ワクチンを家禽の総排泄腔に摂取することを特徴とす
    る家禽大腸菌症の予防法。
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