JPH0145866B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は血液試料分離剤に関するものである。 血液分析を行うにあたり、一般的には全血を遠
心分離操作により、血清（あるいは血漿）部分と
血餅（あるいは血球）部分に分離し、血清（ある
いは血漿）部分をピペツトアウトし、これを臨床
分析に用いてきた。しかし、この場合は、操作が
煩雑で手間がかかると同時に血清をピペツトアウ
トする際に、血球成分が混入し、分析値に影響を
及ぼす場合があるため、操作に熟練した人が必要
であつたり、保存や移送の際に血清（あるいは血
漿部分）に衝撃により血球成分が混入したりする
など不都合な点が多い。 従来から比重の異なる液体を遠心分離操作によ
り、相分離させ種々の分析を容易にする試みが行
われていて、前記の血液検査のための採血管に全
血を採取し、遠心分離を行い、血清（あるいは血
漿）を血餅（あるいは血球成分）等から分離する
際に、血清（あるいは血漿）と血餅（血球成分）
との中間の比重を有し、二成分の中間に障壁を形
成する分離用組成物を用い、血清（あるいは血
漿）中への血球成分の混入を防ぐと同時に、血清
（あるいは血漿）部分の取出しを傾斜することの
みで行うことが知られている。 たとえば特開昭49−89389号公報あるいは米国
特許第3780935号明細書には分離用組成物として
シリコーン流体と疎水的シリカ微粉末との混合物
からなるゲル状物質を使用することが開示されて
いる。このゲル状物質はシリコーン流体に混合し
た微粉末シリカによつて、チキソトロピー性を付
与したものであり、遠心分離操作により、流動し
て分離すべき相間に移動し、遠心終了時には、傾
斜操作や、弱い衝撃によつて容易に破壊されるこ
とのない安定な障壁が形成される。しかし、この
組成物はシリコーン流体とシリカ表面とが反応
し、時間とともに組成物の粘度低下が促進し、つ
いには、安定した障壁を形成する能力がなくな
り、傾斜により、障壁が乱れ血清部分に血球が混
入し、血清の分析精度に悪影響を及ぼす恐れのあ
ることが、特開昭51−83654号公報に詳細に述べ
られている。 また、特開昭53−51189号公報には液状エポキ
シ化あるいはマレイン化ポリブタジエン、微粉末
シリカおよび構造形成剤として少量のトリエチレ
ングリコールを用いる組成物を使用することが開
示されている。しかし、この場合においても、ポ
リブタジエン変性体を用いるため、変性しないポ
リブタジエンよりも改良されているとは言え、室
温、空気中に保存することにより、組成物の粘度
が変化するという欠点はチキソトロピー性を強化
するための低分子量ジオールなどの構造形成剤が
必要なため、それが血清部分へ溶出して、血清の
分析精度に悪影響を及ぼす可能性が考えられる。 さらには、特開昭53−146795号公報に(a)炭素数
４ないし12個を有する飽和脂肪族ジカルボン酸、
(b)75重量％またはそれ以上のC₃₆二塩基性酸を含
有する重合体状脂肪酸、および(c)炭素数３ないし
８個を有する分枝鎖脂肪族２価アルコール、この
ような分枝鎖２価アルコールの混合物またはこの
ような分枝鎖脂肪族２価アルコールを少くとも50
重量％含有する炭素数２ないし８個を有する直鎖
脂肪族２価アルコールとの混合物の本質的に化学
量論的量の反応生成物よりなり、而して(a)対(b)の
当量比が0.80：0.20ないし0.97：0.03の範囲にあ
り、このポリエステルが約2000ないし8000の平均
分子量、2000ないし8000センチストークスの210
〓運動粘度および1.015ないし1.060ｇ／cm³の範囲
の密度を有するものである、血液分離組立器具の
障壁剤と有用なコポリエステル組成物もまた開示
されている。しかし、この場合もネオペンチルグ
リコール、１，２−プロパンジオールなどの分岐
鎖含有低分子量ジオールを用いているために目的
のポリエステルの分子量および粘度を完全にコン
トロールするのが困難であり、しいては組成物の
チキソトロピー性が変動し易い恐れがある。 本発明の目的は血液成分の分析にあたつて、血
清（あるいは血漿）部分と血餅（あるいは血球）
部分の中間の比重を有し、かつ血液部分に対して
不活性なポリエーテルエステルを用いて血清（あ
るいは血漿）の分離操作の効率化および保存、移
送中の血球等の混入を防ぐことである。 本発明者等はこれらの目的を達成するために
種々鋭意検討した結果、本発明に到達した。すな
わち本発明は数平均分子量600〜8000のポリオキ
シアルキレングリコールと炭素数６〜80のジカル
ボン酸またはその誘導体および必要により低分子
量ジオールとから得られ、数平均分子量が1500〜
50000であり、粘度が10〜3000ポイズ（20℃）で
あるポリエーテルエステルに不活性充填剤および
必要により界面活性剤および構造形成剤を含有さ
せ、かつ密度が1.010〜1.070ｇ／cm³であることを
特徴とする血液試料分離剤である。 適当な採血管に本発明の血液試料分離剤（以下
分離剤と略記）を適当量（例えば10mlの血清分離
用採血管には分離剤を2.0ｇ入れる。）入れて、採
血し、血清を得たい時には血液が凝固するまで放
置した後、遠心分離操作を行うと、比重が血清と
血餅の中間にある分離剤は遠心分離操作中に血清
と血餅の中間に移動し、両者の相間に安定な隔壁
を形成する。したがつて、血清を採取するために
ピペツトアウトする必要がなく採血管を傾斜する
だけで血清を得ることができ、ピペツトアウトす
る際の相間の乱れによる血球成分の混入による分
析値の変動がさけられる。 また、本発明の血液試料分離剤は粘度安定性に
優れる。 本発明の血液試料分離剤は従来の欠点を改良
し、しかも安価に製造し得る血清および血漿の分
離剤である。 本発明に用いるポリエーテルエステルは分子量
1500〜50000（好ましくは3000〜20000）であり、
粘度が10〜3000ポイズ（好ましくは15〜1000ポイ
ズ）である。また、0.850〜1.050（好ましくは
0.900〜1.045ｇ／cm³）の比重を有することが望ま
しく、血液成分に対して不活性である均質なポリ
エーテルエステルであることが望ましい。 本発明に用いるポリエーテルエステルは一例と
して数平均分子量600〜8000のポリオキシアルキ
レングリコール１モルと炭素数８〜80のジカルボ
ン酸0.50〜0.98モルを反応させて製造する。 ポリオキシアルキレングリコールとしてはポリ
プロピレングリコール、プロピレンオキサイド−
エチレンオキサイド共重合体、ポリテトラメチレ
ングリコール、ポリペンタメチレングリコール、
ポリヘキサメチレングリコールなどが挙げられ
る。これらのポリアルキレングリコールは単独で
も、あるいは２種以上であつてもよい。特に、ポ
リプロピレングリコール、ポリテトラメチレング
リコールのそれぞれ単独、またはこれら両者の混
合物が好ましい。ポリオキシアルキレングリコー
ルの数平均分子量は600〜8000であり、特に600〜
3000であることが好ましい。 炭素数６〜80のジカルボン酸としては、脂肪
族、脂環族または芳香族ジカルボンであつて、例
えばアジピン酸、テレフタル酸、イソフタル酸、
Ｏ−フタル酸、ナフタレンジカルボン酸、コハク
酸、アゼライン酸、セバシン酸、ウンデカンジオ
ン酸、ドデカンジオン酸およびオレイン酸、リノ
レイン酸、リノール酸、エレオステアリン酸およ
び類似の炭素数８ないし40のオレフイン状不飽和
モノカルボン酸の重合によつて得られる炭素数16
〜80の二量体酸などがあげられる。特にオレイン
酸、リノレイン酸およびリノール酸を二量化した
ジカルボン酸が好ましい。 また、場合によつてはエチレングリコール、プ
ロピレングリコール、ブタンジオール、ヘキサン
ジオールなどの炭素数２〜16の低分子量ジオール
を得られるポリエーテルエステルに対し20重量％
以下共重合させてもよい。 上記ポリオキシアルキレングリコールまたはポ
リオキシアルキレングリコールと少量の低分子ジ
オールを添加した総ジオール成分の仕込みモル比
とジカルボン酸の仕込みモル比は1.0：0.5ないし
1.0：0.98の割合で、通常のエステル化および／
または重縮合触媒の存在下、通常のエステル化法
および装置を使用する。窒素気流下150〜250℃で
撹拌し、反応により生成する水を除去しながら加
熱し、次いで200〜250℃で0.1〜50mmHgに減圧
し、エステル化を促進し、酸価を適当な値まで低
下させる。 エステル化触媒としてはリン酸、硫酸、ｐ−ト
ルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、シユウ酸
第１錫塩、アルキル鉛酸化物、チタン酸テトラブ
チル、酢酸亜鉛、炭酸ナトリウム等があげられ
る。触媒量および種類は限定されたものでなく
種々変化させ得るが、通常、触媒量は0.001〜0.8
重量％程度を用いる。 本発明に用いるポリエーテルエステルは数平均
分子量が1500〜50000、好ましくは5000〜30000で
ある。平均分子量が1500未満であると、オリゴマ
ー量が増し、分析結果に悪影響を及ぼすと同時に
得られる組成物により形成される障壁強度が弱く
なり、目的を果さなくなる。50000を越えると浮
上性が小さくなり、遠心分離操作中にスムースに
血清と血球の中間に移行しなくなる。 本発明に用いるポリエーテルエステルは20℃に
おいて粘度が10〜3000ポイズ、好ましくは15〜
1000ポイズである。また密度が0.850〜1.050ｇ／
cm³、好ましくは0.900〜1.045ｇ／cm³であることが
望ましい。 本発明の血液試料分離剤は上記ポリエーテルエ
ステルに比重調整およびチキソトロピー性を付与
する目的のために、上記ポリエステル100重量部
に対し不活性充填剤を１〜40重量部（好ましくは
５〜30重量部）含ませる。 得られる組成物の密度は1.010〜1.070ｇ／cm³
（好ましくは1.025〜1.065ｇ／cm³）である。粘度
（20℃）は1000〜30000ポイズ（好ましくは2000〜
10000ポイズ）であることが望ましい。 本発明において粘度の測定はＢ型回転粘度計を
用い、200mlビーカー中に、組成物200ｇを入れ
て、温度20℃に行なう。 本発明に用いる不活性充填剤としては沈降シリ
カ、蒸発シリカ、およびシランまたはポリシロキ
サンで処理された疎水性シリカの如き種々の無定
形シリカ、アルミナ、タルク、その他シリケー
ト、ベントナイト、酸化チタン、および鉱物クレ
イなどが挙げられる。特に沈降シリカ、蒸発シリ
カおよび疎水性シリカなど無定形シリカが好まし
い。 本発明組成物の密度が1.010ｇ／cm³以下となる
と血清部分よりも軽くなり、また1.070ｇ／cm³よ
り大きくなると血餅部よりも重くなり、遠心分離
操作を行つても血清部分と血餅部分の中間に組成
分が移行せず分離剤としての効果を果さない。 また、本発明の組成物の粘度は特に限定されな
いが、1000ポイズ以下になると、組成物により血
清と血餅部分の中間に形成される障壁強度が弱く
なり小さな衝撃で障害がこわれるようになり、
30000ポイズ以上になると、実用的な遠心分離操
作では組成物が中間層に浮上せず、試験管の底に
とどまつて分離剤としての効果を果さないことが
ある。 不活性充填剤を分離させたポリエーテルポリエ
ステル組成物からなる本発明の血液試料分離剤は
容易に血清（あるいは血漿）部分と血餅（あるい
は血球）部分の中間の界面に位置し、障壁を形成
するように、遠心処理中に流動する。遠心処理後
は上記組成物が容易にチキソトロピー性を発現し
て高粘度の連続した安定な障壁を形成する。 本発明組成物は浮上性を向上させるために界面
活性剤、例えばポリオキシエチレン硬化ひまし油
モノラウレート、、ポリオキシエチレン硬化ひま
し油トリステアレート等を10重量％以下含有して
もよい。界面活性剤としては、特にポリオキシエ
チレン硬化ひまし油トリステアレートが好まし
い。 本発明組成物は組成物の障壁強上を向上さすた
めにポリジメチルシロキサン−ポリエチレングリ
コールブロツク共重合体のような構造形成剤を２
重量％以下含有させてもよい。 本発明の血液試料分離剤は上記ポリエーテルエ
ステルを主成分とすることにより、血清、血餅の
分離が可能であり、かつ粘度変化が少なく、長期
間の放置が可能である。さらに血液に対して不活
性であつて、血液成分の分析において誤差を生じ
させない。 以下、実施例により本発明を具体的に説明す
る。実施例中、単に部とあるのは重量部を意味す
る。 実施例 １ 数平均分子量1000の１，２−ポリプロピレング
リコール1192部とオレイン酸の２量体化により得
た炭素数34のジカルボン酸（以下ダイマー酸と称
する、分子量561.7）608部およびチタン酸テトラ
ブチル0.103部、およびトリメチルチホスフエー
ト0.085部を３のオートクレーブにとり、窒素
気流下、常圧で撹拌しながら、160〜230℃まで３
時間かけて昇温し、反応により生成してくる水を
除去した。次いで、230℃で760mmHgから0.5mm
Hgまで１時間かけて徐々に減圧とした。さらに
240℃に昇温し、0.5mmHgの減圧下、反応により
生成する水を除去しながら、さらに４時間反応を
行つた。 得られたポリエーテルエステルは密度0.995
ｇ／cm³、粘度50ポイズ／20℃であり、水酸基価
11.2、酸価3.8を有していた。このポリエーテル
エステル100部と疎水性アエロジルR972（商品名、
日本アエロジル社製の疎水性シリカ微粉末）12部
とを混合し、密度1.048ｇ／cm³、粘度11000ポイ
ズ／20℃のチキソトロピー性物質を得た。得られ
た組成物を室温で空気中と真空中で保存した場合
の粘度変化を第１表に示す。

【表】 次いで、この組成物を50〜70℃に加温し、適当
なノズルを有する分注器を用いて10c.c.用の血清分
離用採血管に1.5ｇ分注した後、真空工程で脱胞
を行つた。 次いで採血管を真空工程で採血量10c.c.に設定し
た真空中でゴム栓で密封した。これらの採血管を
用い採血後、遠心分離（2500rpm×10分、腕長12
cm）を行つた結果、いずれの場合も血清と血球と
の間にバリヤー層が形成され、これらの採血管を
逆さにして数日間放置してもバリヤーは全く破壊
されなかつた。 またデカンテーシヨンにより血清を取り出し、
臨床検査を行つたところ、血清分離剤を用いずに
血清をピペツトアウトで取出した場合の分析値と
各試験項目とも一致した。この事より、本発明の
ポリエーテルエステル組成物は血液に対し、不活
性であることが明らかである。 実施例 ２ 数平均分子量700の１，２−ポリプロピレング
リコール700部、ダイマー酸505部およびチタン酸
テトラブチル0.075部およびトリメチルホスフエ
ート0.064部を３オートクレーブにとり、実施
例１と同様の条件下でポリエーテルエステルを製
造した。 得られたポリエーテルエステルは密度0.990
ｇ／cm³、粘度60ポイズ／20℃であり、水酸基価
12.3、酸価4.05を有していた。このポリエーテル
エステル100部と疎水性アエロジルR972、８部と
アエロジル200（商品名、日本アエロジル社製）４
部とを混合し、密度1.045ｇ／cm³、粘度15300ポイ
ズ／20℃のチキソトロピー性物質を得た。得られ
た組成物を室温で空気中と真空中で保存した場合
の粘度変化を第２表に示す。

【表】 次いで、この組成物を50〜70℃に加温し、以下
実施例１と同様に操作し、血清を取り出し、臨床
検査を行つたところ、血清分離剤を用いずに血清
をピペツトアウトで取出した場合の分析値と各試
験項目とも一致した。この事より、本発明のポリ
エーテルエステル組成物は血液に対し不活性であ
ることが明らかである。 実施例 ３ 数平均分子量1000のポリテトラメチレングリコ
ール1000部、ダイマー酸505部およびチタン酸テ
トラブチル0.075部およびトリメチルホスフエー
ト0.064部を３オートクレーブにとり、実施例
１と同様の条件下でポリエーテルエステルを製造
した。得られたポリエーテルエステルの密度
0.985ｇ／cm³、粘度63ポイズ／20℃であり、水酸
基価10.3、酸価1.7を有していた。このポリエー
テルエステル100部と疎水性アエロジル14部とを
混合し密度1.045ｇ／cm³、粘度9300ポイズ／20℃
のチキソトロピー性物質を得た。得られた組成物
を室温で空気中と真空中で保存した場合の粘度変
化を第３表に示す。

【表】 次いで、この組成物を50〜70℃に加温し、以下
実施例１と同様に操作し、血清を取り出し、臨床
検査を行つたところ、血清分離剤を用いずに血清
をピペツトアウトで取り出した場合の分析値と各
試験項目とも一致した。この事より、本発明のポ
リエーテルエステルは血液に対して不活性である
ことが明らかである。 実施例 ４ 実施例１〜３の組成物を各々60℃に加温し、適
当なノズルを有する分注器を用いて、10c.c.（内径
13mm、高さ100mm）用の血清分離用採血管に各々
２ｇを分注したのち、真空工程で脱泡を行つた。
ついで採血管を真空工程で採血量10c.c.に設定した
真空中でゴム栓で密封した。これ等の採血管を用
い、同一の人より各々10c.c.採血後、遠心分離
（2500rpm、10分間、腕長12cm）を行つた結果、
いずれの場合も血清と血餅との間に厚さ８〜12mm
の血清分離剤のバリヤー層が形成され、完全に血
清がデカンテーシヨンにより分離された。 第４表にこれ等の血清を臨床分析した結果を、
血清分離剤を用いず、ピペツトアウトにより血清
を分離し、分析した結果と比較して示す。

【表】 第４表のごとく、臨床検査において本発明のポ
リマーは検査結果に全く影響を及ぼさず、血液成
分に対して不活性であることが証明された。 (注) BUN（blood urea nitogen test）：ジアセチル
モノオキシム法 UA（uric acid test）：還元法 Crea（creatinine test）：ヤツフエ反応 TP（total protein）：Biuret法 Alb（alubumin test）：HABCA法 IgG（immunoglobulin Ｇ test）：SRID法 IgM（immunoglobulin Ｍ test）：SRID法 GOT（glutamate oxaloacetate transaminase
test）：UV法 GPT（glutamate pyruvate transaminase
test）：UV法 LDH（lactate dehydrogenase test）：UV法 LAP（leucine aminopeptidase test）：Bassy
−lowry法 ALP（alkaline phosphatase test）：Goldberg
法 γ−GTP（γ−glutamyl transpeptidase
test）：UV法 β−Lipo（β−lipo−Protein test）：
immunocrite法 PL（Phospholipid test）：酵素法 Ｔ−Ch（total cholesterol test）：酵素法 TG（triglycerid test）：savdesai−manning法 FAA（free fatty acid test）：Cu−バソクブロ
イン法 Na（sodium test）：炎吸光分光分析法 Ｋ（potassium test）：炎吸光分光分析法 Cl（chlorine test）：滴定法 Fe（iron test）：松原法 比較例 １ 数平均分子量200のポリプロピレングリコール
220部およびアジピン酸145部およびチタンテトラ
ブチル0.150を実施例１と同様の条件でポリエー
テルエステルを製造した。得られたポリエーテル
エステルの密度は1.098ｇ／cm³であり、水酸基価
31.0、酸価15.3、粘度130ポイズ（20℃）を有し
ていた。 このポリエーテルエステルを50〜70℃に加温
し、以下、実施例１と同様に操作したところ、遠
心分離を行つてもポリエーテルエステルは血清と
血餅の中間には浮上せず、試験管の底に残つてい
た。このポリエーテルエステルは血清分離剤とし
ての機能を有していない事が分つた。 比較例 ２ 実施例１で得たポリエーテルエステル100部に
アエロジル200を25部混合し、密度1.095ｇ／cm³、
粘度38000ポイズ（20℃）のポリエーテルエステ
ル組成物を得た。 この組成物を50〜70℃に加温し、以下、実施例
１と同様に操作したところ、遠心分離を行つても
組成物は血清と血餅の中間には浮上せず、試験管
の底に残つていた。このことより、この組成物は
血清分離剤としての機能をはたさないことが明ら
かである。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ 主として、数平均分子量600〜8000のポリオ
   キシアルキレングリコール［Ａ］と、炭素数６〜
   80のジカルボン酸またはその誘導体［Ｂ］とから
   得られ、数平均分子量が1500〜50000であり、粘
   度が10〜3000ポイズ（20℃）であるポリエーテル
   エステル［Ｃ］に、不活性充填剤［Ｄ］を含有さ
   せ、かつ密度が1.010〜1.070ｇ／cm³であり、［Ａ］
   と［Ｂ］とのモル比が1.0：0.5〜1.0：0.98であ
   り、［Ｃ］と［Ｄ］との重量比が100：１〜100：
   40であることを特徴とする血液試料分離剤。