JPH0338276B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

この発明は薬理活性を有するFR−900506物質
またはその塩およびその製造法に関する。 さらに詳細には、この発明は免疫抑制活性、抗
菌活性等のような薬理活性を有する新規なFR−
900506物質またはその塩およびその製造法に関す
る。 すなわち、この発明の一つの目的は、移植によ
る拒絶反応、骨髄移植による移植片対宿主病、自
己免疫疾患、感染症等の治療および予防に有用な
新規FR−900506物質またはその塩を提供するこ
とである。 この発明のもう一つの目的は、醗酵法による
FR−900506物質またはその塩の製造法を提供す
ることである。 この発明のFR−900506物質は、ストレプトミ
セス（Streptomyces）属に属する新菌種を醗酵
することにより得られる培養ブロスから純粋な形
で初めて分離されたものである。 この発明の発明者等は鋭意研究の結果、FR−
900506物質の化学構造を決定することに成功し
た。 この発明の新規なFR−900506物質は下記一般
式で示すことができる。 ［化学名：17−アリル−１，14−ヒドロキシ−12
−［２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘ
キシル）−１−メチルビニル］−23，25−ジメトキ
シ−13，19，21，27−テトラメチル−11，28−ジ
オキサ−４−アザトリシクロ［22.3.1.0^4,9］オク
タコス−18−エン−２，３，10，16−テトラオ
ン］ この発明のFR−900506物質において、コンホ
ーマーあるいは不斉炭素原子および二重結合に起
因する光学異性体および幾何異性体のような１対
以上の立体異性対が存在することがあり、そのよ
うなコンホーマーあるいは異性体もこの発明の範
囲内に包含される。 この発明のFR−900506物質の製造法を以下詳
細に説明する。 この発明のFR−900506は、ストレプトミセ
ス・ツクバエンシス（Streptomyces
tsukubaensis）No.9993のようなストレプトミセス
属に属する、FR−900506物質生産菌株を培地中
で醗酵させることにより生産することができる。 FR−900506物質の醗酵による生産について以
下に説明する。 微生物 FR−900506物質の生産に使用される菌は、ス
トレプトミセス属に属するFR−900506生産菌株
であり、そのうちストレプトミセス・ツクバエン
シスNo.9993が茨城県筑波郡豊里町で採取された土
壌試料から新たに分離された。 この新たに分離されたストレプトミセス・ツク
バエンシスNo.9993の凍結乾燥標本は、工業技術院
微生物工業研究所（茨城県筑波郡矢田部町東１丁
目１−３）に1984年10月５日付で寄託番号微工研
菌寄第7886号として寄託され、次いで1985年19月
19日付で新しい寄託番号微工研条寄第927号とし
て同寄託機関のブタペスト条約ルートに切り換え
られた。 新規なFR−900506物質の生産において、この
明細書に記載した菌は単に説明のためにのみ掲げ
たものであり、それに限定されるものではない。
この発明にはまた、自然突然変異菌ならびにＸ線
照射、紫外線照射、Ｎ−メチル−N′−ニトロ−
Ｎ−ニトロソグアニジン、２−アミノプリン等に
よる慣用の処理によつてつくられる人工突然変異
菌をも含む、FR−900506物質を産生できるいか
なる突然変異菌を使用する場合も含まれる。 ストレプトミセス・ツクバエンシスNo.9993は下
記のような形態学的性質、培養特性、生物学的お
よび生理学的特徴を有する。 [1] 形態学的性質 主に、シヤーリング（Shirling）およびゴツ
トリープ（Gottlieb）に記載の方法［シヤーリ
ング・イー・ビーおよびデイー・ゴツトリー
プ：メソツズ・フオー・キヤラクテリゼーシヨ
ン・オブ・ストレプトミセス・スペシーズ（イ
ンターナシヨナル・ジヤーナル・オブ・システ
マチツク・バクテリオロジー）（Methods for
characterization of Streptomyces species.
International Journal of Systematic
Bacteriology）第16巻、第313〜340頁、1966
年］を分類学的検討に用いた。 形態学的観察は、オートミール寒天、イース
ト・マルトエキストラクト寒天および無機塩・
スターチ寒天上、30℃で14日間生育させた培養
物を用い、光学および電子顕微鏡を用いて行つ
た。 成熟胞子体は各胞子鎖に10〜50個または50個
を超える数の胞子を有する直鎖状または波状
（Rectiflexibiles）を形成した。電子顕微鏡で
の観察によればこの胞子は楕円形の円筒状で、
大きさは0.5〜0.7×0.7〜0.8μｍである。胞子表
面は滑らかであつた。 [2] 培養特性 培養特性は上記シヤーリングおよびゴツトリ
ープ、ならびにワクスマン（Waksman）［ワ
クスマン・エス・エー：ザ・アクチノマイセツ
ツ、第２巻、クラシフイケーシヨン・アイデン
テイフイケーシヨン・アンド・デスクリプシヨ
ン・オブ・ゼネラ・アンド・スペシーズ。ザ・
ウイリアムス・アンド・ウイルキンス・カンパ
ニー、バルチモア、1961年（Waksman、S.
A.：The actinomycetes，Vol.2：
Classification、identifcation and
description of genera and species.The
Williams and Wilkins Co.、Baltimore、
1961）］に記載の10種類の培地で観察した。 30℃で14日間培養した。この研究で使用した
色名は新色名帖（東京、日本色彩研究所の手引
書）に基づいた。オートミール寒天、イース
ト・マルトエキストラクト寒天および無機塩・
スターチ寒天上で成育させた場合、コロニーは
灰色系に属していた。可溶性色素はイースト・
マルトエキストラクト寒天で生成したが、他の
培地では生成しなかつた。結果を表１に示す。

【表】

【表】 細胞壁組成分析を、ベツカー等の方法［ベツ
カー・ビー・、エム・ピー・レシヴアリエル、
アール・イー・ゴードンおよびエイチ・エー・
レシヴアリエル：ラピツド・デイフエレンシエ
ーシヨン・ビトヴイーン・ノカルジアおよびス
トレプトミセス・バイ・ペーパークロマトグラ
フイー・オブ・オーフ・セル・ヒドロリゼー
ツ：アプライド・マイクロバイオロジー
（Becker、B.、M.P.Lechvalier、R.E.Gordon
and H.A.Lechevalier：Rapid differentiation
between Nocardia and Streptomyces by
paper chromatography of whole cell
hydrolysates：Appl.Microbiol.）第12巻、第
421〜423頁、1964年］および山口の方法（山
口、テイー・：コンパリゾン・オブ・ザ・セ
ル・ウオール・コンポジシヨン・オブ・モルホ
ロジカリー・デイステインクト・アクチノマイ
セツツ：ジヤーナル・オブ・バクテリオロジー
（Yamaguchi、T.：Comparison of the cell
wall composition of morphologically
distinct actinomycetes：J.Bacteriol.）第89
巻、第444〜453頁、1965年］の方法によつて行
つた。菌株No.9993の全細胞加水分解物の分析結
果は、LLMジアミノピメリン酸が存在するこ
とを示した。従つてこの菌株の細胞壁はタイプ
に属すると考えられる。 [3] 生物学的および生理学的性質 菌株No.9993の生理学的性質は、前記シヤーリ
ングおよびゴツトリープに記載されている方法
によつて測定した。その結果を表２に示す。生
育温度範囲および生育至適温度は、イースト・
マルトエキストラクト寒天上、温度勾配培養器
（東洋化学産業株式会社製）を使用して測定し
た。生育温度範囲は18〜35℃で、生育至適温度
は28℃であつた。ミルクのペプトン化およびゼ
ラチン液化は陽性であつた。メラミン色素の産
出は陰性であつた。

【表】

【表】 炭素源の利用性をプリドハムおよびゴツトリ
ープの方法［プリドハム・テイー・ジー・およ
びデイー・ゴツトリープ：ザ・ユーテイライゼ
ーシヨン・オブ・カーボン・コンパウンズ・バ
イ・サム・アクチノマイセツテールズ・アズ・
アン・エイド・ウオー・スペシーズ・デターミ
ネーシヨン：ジヤーナル・オブ・バクテリオロ
ジー（Pridham、T.G.and D.Gottlieb：The
utilization of carbon compounds by some
Actinomycetales as an aid for species
determination：J.Bacteriol.）第56巻、第107
〜114頁、1948年］によつて試験した。30℃で
14日間培養後に、生育状況を観察した。 この菌株の炭素源の利用性を表３にまとめて
示す。グリセリン、マルトースおよびコハク酸
ナトリウムは菌株No.9993により利用された。さ
らにまた、Ｄ−グルコース、シユークロース、
Ｄ−マンノースおよびサリシンは多少利用す
る。

【表】

【表】 −：利用しない
菌株No.9993の顕微鏡学的観察および細胞壁組
成分析の結果から、この菌株がワクスマン
（Waksman）およびヘンリシ（Henrici）、
1943年、によるストレプトミセス属に属するこ
とが明らかとなつた。 すなわち、この菌株を公表されている性状
［インターナシヨナル・ジヤーナル・オブ・シ
ステマテイツク・バクテリオロジー
（International Journal of Systematic
Bacteriology）第18巻、第69〜189頁、第279
〜392頁、1968年および第19巻、第301〜512頁、
1969年、ならびにバージエイズ・マニユアル・
オブ・デターミネイテイブ・バクテリオロジー
（Bergey′s Manual of Determinative
Bacteriology）第８版、1974年］に照らして、
ストレプトミセス属の種々の種と比較した。 比較の結果、菌株No.9993はストレプトミセ
ス・アブラヴイエンシス・ニシムラ等
（Streptomyces aburaviensis Nishimura et.
al.）、ストレプトミセス・アヴエラネウス・バ
ルダツシおよびグレイン（Streptomyces
avellaneus Baldacci and Grein）およびスト
レプトミセス・ミサキエンシス・ナカムラに類
似していると考えられる。 従つて菌株No.9993の培養特性を、対応するス
トレプトミセス・アブラヴイエンシス
IFO12830、ストレプトミセス・アヴエラネウ
スIFO13451およびストレプトミセス・ミサキ
エンシスIFO12891と比較した。その結果菌株
No.9993はストレプトミセス・ミサキエンシス
IFO12891に最も類似していた。従つて菌株No.
9993をさらに上記表１、２および３に示したス
トレプトミセス・ミサキエンシスIFO12891と
詳細に比較した。この結果から、菌株No.9993は
ストレプトミセス・ミサキエンシスIFO12891
と下記の点で区別することができ、従つて菌株
No.9993はストレプトミセスの新種であると考え
られ、この微生物が茨城県筑波郡で採取した土
壌にちなんでストレプトミセス・ツクバエンシ
ス・スプ・ノブ（Streptomyces tsukubaensis
sp.nov.）と命名された。 ストレプトミセス・ミサキエンシスIFO12891と
の相違 菌株No.9993の培養特性は、ストレプトミセス・
ミサキエンシスIFO12891とは、オートミール寒
天、イースト・マルトエキストラクト寒天、グル
コース・アスパラギン寒天、スザペツク寒天およ
びポテト・デキストロース寒天を用いて培養した
とき異なる。 菌株No.9993のスターチ加水分解は陰性である
が、ストレプトミセス・ミサキエンシス
IFO12891の場合は陽性である。 菌株No.9993のゼラチン液化は陽性であるが、ス
トレプトミセス・ミサキエンシスIFO12891の場
合は陰性である。 炭素源の利用性においては、菌株No.9993はグリ
セリン、マルトースおよびコハク酸ナトリウムを
利用するが、ストレプトミセス・ミサキエンシス
IFO12891はこれらを利用しない。さらに、菌株
No.9993はＤ−ガラクトースおよびイヌリンを利用
しないが、ストレプトミセス・ミサキエンシス
IFO12891はこれらを利用できる。 FR−900506物質の産生 この発明の新規なFR−900506物質は、例えば
ストレプトミセス・ツクバエンシスNo.9993、（寄
託番号：微工研条寄第927号）のようなストレプ
トミセス属に属するFR−900506物質生産菌株を
培地中で培養することにより産生できる。 一般的には、FR−900506物質は、FR−900506
物質生産菌株を、同化しうる炭素源および窒素源
を含有する水性培地中で、好ましくは例えば振と
う培養、深部培養等の好気性条件下で培養するこ
とにより産生できる。 培地の好ましい炭素源としては、グルコース、
キシロース、ガラクトース、グリセリン、スター
チ、デキストリン等のような炭水化物が挙げられ
る。他の炭素源としてはマルトース、ラムノー
ス、ラフイノース、アラビノース、マンノース、
サリシン、コハク酸ナトリウム等が挙げられる。 好ましい窒素源としてはイースト・エキストラ
クト、ペプトン、グルテンミール、綿実粉、大豆
粉、コーン・ステイープ・リカー、乾燥イース
ト、小麦胚芽、羽毛粉、落花生粉等、ならびに例
えば硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム、燐酸
アンモニウム等のアンモニウム塩、尿素、アミノ
酸等のような無機または有機窒素化合物が挙げら
れる。 炭素源および窒素源は好ましくはそれらの組合
わせで使用されるが、微量の生育因子および相当
量の無機栄養素を含有していれば純度の低い物質
も使用でき、必ずしも純粋な形で使用する必要は
ない。所望により培地に炭酸ナトリウムまたは炭
酸カルシウム、燐酸ナトリウムまたは燐酸カリウ
ム、塩化ナトリウムまたは塩化カリウム、沃化ナ
トリウムまたは沃化カリウム、マグネシウム塩、
銅塩、コバルト塩等の無機塩を添加してもよい。
特に培養培地が著しく発泡する場合には、必要に
より液状パラフイン、脂肪油、植物油、鉱油また
はシリコンのような消泡剤を添加してもよい。 FR−900506物質を大量生産する条件としては、
深部好気培養が好ましい。少量生産にはフラスコ
またはびん中で振とう培養または表面培養が行わ
れる。さらにまた、大型タクク内で生育を実施す
る場合には、FR−900506物質の生産工程におけ
る生育遅延を回避するために、微生物の前培養を
用いて生産タンク中に菌を接種するのが好まし
い。すなわち、比較的少量の培養灰地に微生物の
胞子または菌糸を接種し、その接種灰地を培養し
て微生物の前培養接種物をまず生産し、次いで培
養した前培養接種物を無菌的に大型タンクに移す
のが望ましい。この前培養接種物を生産する培地
は、FR−900506物質の生産に使用される培地と
実質的に同じであつてもよく、また異なつてもよ
い。 培養混合物の撹拌および通気は種々の方法で行
うことができる、撹拌はプロペラまたはこれに準
ずる撹拌装置を用いるか、醗酵器を回転させるか
または振とうするか、種々のポンプ装置を用いる
か、または培地中に滅菌空気を通すことによつて
も行うことができる。通気は滅菌空気を醗酵混合
物中を通過させることにより行つてもよい。 醗酵は通常、約20℃〜40℃の温度範囲、好まし
くは25〜35℃で、約50〜150時間行われるが、醗
酵条件および醗酵規模によつて適宜変化させれば
よい。 このようにして生産されたFR−900506物質は、
他の既知の生物学的活性物質の回収に通常使用さ
れる慣用の方法で培養培地から回収することがで
きる。生産されたFR−900506は、培養菌糸中お
よび濾液中に見出され、従つてFR−900506物質
は、培養ブロスの濾過または遠心分離によつて得
られる菌糸および濾液から、減圧濃縮、凍結乾
燥、常用の溶媒による抽出、PH調整、例えば陰イ
オン交換樹脂または陽イオン交換樹脂、非イオン
性吸着樹脂等の常用の樹脂による処理、例えば活
性炭、ケイ酸、シリカゲル、セルロース、アルミ
ナ等の常用の吸着剤による処理、結晶化、再結晶
化等の慣用の方法によつて分離、精製することが
できる。 FR−900506物質の物理化学的性質 上記醗酵法によつて生産されたFR−900506物
質は下記の物理化学的性質を有する。 (1) 形状および色調： 白色粉末 (2) 元素分析値： Ｃ：64.72％、Ｈ：8.78％、Ｎ：1.59％ 64.59％、 8.74％、 1.62％ (3) 呈色反応： 陽性：硫酸セリウム反応、硫酸反応、エールリ
ツヒ反応、ドラーゲンドルフ反応、沃素蒸気
反応 陰性：塩化第二鉄反応、ニンヒドリン反応、モ
ーリツシユ反応 (4) 溶解性： 可溶：メタノール、エタノール、アセトン、酢
酸エチル、クロロホルム、ジエチルエーテ
ル、ベンゼン 難溶：ヘキサン、石油エーテル 不溶：水 (5) 融点： 85〜90℃ (6) 比旋光度： ［α］²³ _D：−73゜（Ｃ＝0.8、CHCl₃） (7) 紫外線吸収スペクトル： 末端吸収 (8) 赤外線吸収スペクトル： ν^CHCl _nax３：3680、3580、3520、2930、2870、
2830、1745、1720、1700、1645、1450、
1380、1350、1330、1310、1285、1170、
1135、1090、1050、1030、1000、990、960
（sh）、918cm^-1 (9) ¹³C核磁気共鳴スペクトル： δ（ppm、CDCl₃）：｛212.59（ｓ）、212.45（ｓ）｝
、
｛196.18（ｓ）、192.87（ｓ）｝、｛169.07（ｓ）、
168.90（ｓ）｝、｛164.90（ｓ）、166.01（ｓ）｝、
｛138.89（ｓ）、139.67（ｓ）｝、｛135.73（ｄ）、
135.60（ｄ）｝、｛132.52（ｓ）、131.99（ｓ）｝、
｛130.27（ｄ）、130.21（ｄ）｝、｛122.87（ｄ）、
123.01（ｄ）｝、｛116.57（ｔ）、116.56（ｔ）｝、
｛97.35（ｓ）、98.76（ｓ）｝、84.41（ｄ）、｛77.79
（ｄ）、78.22（ｄ）｝、｛75.54（ｄ）、76.97（ｄ）
｝、
｛73.93（ｄ）、73.09（ｄ）｝、｛73.72（ｄ）、72.57
（ｄ）｝、｛70.05（ｄ）、69.15（ｄ）｝、56.75（ｄ
）、
｛53.03（ｄ）、53.13（ｄ）｝、｛48.85（ｔ）、48.62
（ｔ）｝、｛40.33（ｄ）、40.85（ｄ）｝、39.40（ｔ
）、
31.58（ｔ）、30.79（ｔ）、｛27.72（ｔ）、26.34
（ｔ）｝、26.46（ｄ）、24.65（ｔ）、｛20.45（ｑ）
、
19.73（ｑ）｝、｛14.06（ｑ）、14.23（ｑ）｝、｛9.6
9
（ｑ）、9.98（ｑ）｝ 上記スペクトルのチヤートを図１に示す。 (10) ¹H核磁気共鳴スペクトル： 上記スペクトルのチヤートを図２に示す。 (11) 薄層クロマトグラフイー：

【表】 (12) 物質の性質： 中性物質 FR−900506物質に関して、 ¹³Cおよび¹H核磁
気共鳴スペクトルの測定の際、この物質は種々の
化学シフトにおいてそれぞれ１対のシグナルを示
す。 このような特徴を有するFR−900506物質は、
さらに下記の性質を有する。 () ¹³C核磁気共鳴スペクトルを25℃および60
℃において測定したところ、それぞれ１対のシ
グナルの強度比が変化する。 () 薄層クロマトグラフイーおよび高速液体ク
ロマトグラフイーを測定したところ、FR−
900506物質はそれぞれ薄層クロマトグラフイー
では単一スポツトとして、高速液体クロマトグ
ラフイーでは単一ピークとして現れる。 FR−900506物質のこの白色粉末はアセトニト
リルから再結晶すると結晶の形状に変化し、この
結晶は下記の物理化学的性質を有する。 (1) 形状および色調： 無色のプリズム状結晶 (2) 元素分析値： Ｃ：64.30％、Ｈ：8.92％、Ｎ：1.77％ 64.20％、8.86％、1.72％ (3) 融点： 127〜129℃ (4) 比旋光度： ［α］²³ _D：−84.4゜（Ｃ＝1.02、CHCl₃） (5) ¹³C核磁気共鳴スペクトル： δ（ppm、CDCl₃）：｛211.98（ｓ）、211.74（ｓ）｝
、
｛196.28（ｓ）、193.56（ｓ）｝、｛168.97（ｓ）、
168.81（ｓ）｝、｛164.85（ｓ）、165.97（ｓ）｝、
｛138.76（ｓ）、139.51（ｓ）｝、｛135.73（ｄ）、
135.63（ｄ）｝、｛132.38（ｓ）、131.90（ｓ）｝、
｛130.39（ｄ）、130.17（ｄ）｝、｛122.82（ｄ）、
122.96（ｄ）｝、116.43（ｔ）、｛97.19（ｓ）、
98.63（ｓ）｝、84.29（ｄ）、｛77.84（ｄ）、78.21
（ｄ）｝、｛77.52（ｄ）、76.97（ｄ）｝、｛69.89
（ｄ）、69.00（ｄ）｝、｛56.63（ｄ）、54.87（ｄ）
｝、
｛53.97（ｄ）、52.82（ｄ）｝、｛48.76（ｔ）、48.31
（ｔ）｝、｛40.21（ｄ）、40.54（ｄ）｝、31.62（ｔ
）、
30.72（ｔ）、24.56（ｔ）、｛21.12（ｔ）、20.86
（ｔ）｝、｛20.33（ｑ）、19.74（ｑ）｝、｛16.47
（ｑ）、16.10（ｑ）｝、｛15.88（ｑ）、15.75（ｑ）
｝、
｛13.89（ｑ）、14.05（ｑ）｝、｛9.64（ｑ）、9.96
（ｑ）｝ 上記スペクトルのチヤートを図３に示す。 (6) ¹H核磁気共鳴スペクトル： 上記スペクトルのチヤートを図４に示す。 その他の物理化学的性質、すなわちFR−
900506物質の無色のプリズム状結晶の呈色反応、
溶解性、紫外線吸収スペクトル、赤外線吸収スペ
クトル、薄層クロマトグラフイーおよび物性の性
質は、白色粉末のそれらと同じであつた。 上記物理化学的性質およびＸ旋解析から、FR
−900506物質は上記の化学構造を有することがわ
かつた。 FR−900506物質における塩としては、無毒の、
医薬として許容される慣用の塩であり、例えばナ
トリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、例
えばカルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ
土金属塩、アンモニウム塩、例えばドリエチルア
ミン塩、Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミン塩等の
アミン塩のような無機または有機塩基との塩が挙
げられる。 この発明のFR−900506物質は、免疫抑制作用、
抗菌作用等のような薬理作用を有し、従つて、心
臓、腎臓、肝臓、骨髄、皮膚等の臓器あるいは組
織の移植に対する拒絶反応、骨髄移植によつて起
る移植片対宿主反応、慢性関節リウマチ、全身性
エリテマトーデス、橋本甲状腺炎、多発性硬化
症、重症筋無力症、型糖尿病、ブドウ膜炎等の
自己免疫疾患、病原菌によつて起る感染症等の治
療および予防に有用である。 このような薬理作用を有することを示すため、
本発明のFR−900506物質の薬理試験データを以
下に示す。 試験１ 試験管内混合リンパ球反応（MLR）におけるFR
−900506物質の抑制効果 各ウエルにC57BL／６応答細胞（Ｈ−2^b）５×
10⁵個と、マイトマイシンＣ処理（マイトマイシ
ンC25μｇ／mlで37℃で30分間処理しRPMI1640
培地で３回洗浄する）したBALB／Ｃ刺激細胞
（Ｈ−2^d）５×10⁵個を0.2mlの10％牛胎仔血清加
RPMI1640培地［炭酸水素ナトリウム２ｍＭ、ペ
ニシリン（50単位／ml）およびストレプトマイシ
ン（50μｇ／ml）を添加］に加えたマイクロタイ
タープレート中でMLR試験を行う、湿度100％、
二酸化炭素５％、空気95％に保つた培養器内で、
37℃で、68時間、細胞を培養し、４時間 ³H−チ
ミジン（0.5μCi）でパルスして、細胞を集める。
FR−900506物質をエタノールに溶解し、
RPMI1640培地に希釈し、培養物に添加し最終濃
度を0.1μｇ／ml以下になるようにする。 結果を表４に示す。この発明のFR−900506物
質は、マウスMLRを抑制した。

【表】 試験２ FR−900506物質の抗菌活性 各種真菌に対するFR−900506物質の抗菌活性
を、サブロー寒天中、寒天倍々希釈法によつて測
定した。30℃で24時間培養した後、最小発育阻止
濃度（MIC）をμｇ／mlで表わす。 この発明のFR−900506物質は、真菌、例えば
アスペルギルス・フミガーツスIF05840およびフ
サリウム・オキシスルポルムIF05942に対して、
表５および６に記載するような抗菌活性を示し
た。

【表】

【表】 試験３ ラツトにおける同種皮膚移植片生存に対するFR
−900506物質の効果 ドナー（フイツシヤー）ラツトの腹部皮膚移植
片を、レシピエント（WKA）ラツトの外側胸部
に移植する。５日目に包帯を除去する。移植片上
皮の90％以上が壊死する拒絶反応があるまで、移
植片を毎日検査する。 FR−900506物質をオリーブ油に溶解し、移植
日より毎日14日間連続筋肉内投与する。 表７に示すように、オリーブ油を14日間連続筋
肉内投与したラツトにおいて、皮膚同種移植片は
８日以内にすべて拒絶されるが、FR−900506物
質で毎日処置したものは、皮膚同種移植片生存が
明らかに延長した。

【表】 試験４ ラツトにおける型コラーゲン誘発関節炎に対す
るFR−900506物質の効果 コラーゲンを２mg／mlの濃度になるよう冷
0.01M酢酸に溶解する。溶液を等容量の不完全フ
ロインドアジユバンド中で乳化する。総量0.5ml
のこの乳化物を雌性ルイス系ラツトの背中の数ケ
所と尾の１、２ケ所に皮内注射する。FR−
900506物質をオリーブ油に溶解し、経口投与す
る。同量の型コラーゲンで免疫した対照ラツト
には、オリーブ油のみを経口投与する。関節炎の
発現率を観察する。 試験結果を表８に示す。型コラーゲン免疫化
と同じ日から14日間オリーブ油で処理したラツト
全てに、関節炎が誘発された。 FR−900506物質を14日間毎日投与すると、３
週間の観察期間中、関節炎の誘発を完全に抑制し
た。

【表】 質

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 一般式： で示されるFR−900506物質またはその塩。 ２ ストレプトミセス属に属するFR−900506物
   質生産菌を培地に培養し、得られる培養物から
   FR−900506物質を分離採取し、必要により塩に
   導くことを特徴とするFR−900506物質またはそ
   の塩の製造法。 ３ FR−900506物質生産菌がストレプトミセ
   ス・ツクバエンシスである特許請求の範囲第２項
   記載の製造法。 ４ FR−900506物質生産菌がストレプトミセ
   ス・ツクバエンシスNo.9993である特許請求の範囲
   第３項記載の製造法。