【発明の詳細な説明】[Detailed description of the invention]
本発明は親水性樹脂の製造法に関するものであ
る。
詳しくは本発明は液体クロマトグラフイー、特
に分子量１万以下の水溶性物質を分離する際のゲ
ルパーミエーシヨンクロマトグラフイー用充填剤
として、好適な親水性樹脂の製造法に関するもの
である。
従来、ゲルパーミエーシヨンクロマトグラフイ
ー用充填剤としてはデキストランをエピクロルヒ
ドリン等で架橋した架橋デキストランゲル、アガ
ロース、又はアクリルアミドとメチレンビスアク
リルアミド等の共重合体である架橋ポリアクリル
アミドゲル等が使用されている。
しかしながら、これらの充填剤は、架橋度を小
さくしてゲルの網目構造を広くしてあるので粒子
がやわらかく、かつ機械的強度が小さい。従つて
加圧下のクロマトグラフイー操作では粒子が変形
し、圧損が生じる等の難点がある。
一方、この難点を改良したものとして、不飽和
カルボン酸のグリシジルエステルをエチレングリ
コールジメタクリレート等で架橋した共重合体の
エポキシ基を加水分解により開環したゲルパーミ
エーシヨンクロマトグラフイー用充填剤が知られ
ている。（例えば特開昭53−1087参照）しかしな
がら、このものは強度は改良されたものの分子量
１万以下の水溶性物質を分離するには、保持容量
即ち、物質の分画範囲における上限界分子量物質
の溶出容量と下限界分子量物質の溶出容量との差
が充分でなく、物質の分画範囲が一定の場合、保
持容量が大きい程近接する物質のピーク間距離が
長くなり分離性能が向上することからして、未だ
十分とはいえない。
本発明者等はかかる欠点を解決すべく鋭意検討
した結果、分子量１万以下の水溶性物質を分子量
の大きな順に分離するゲルパーミエーシヨンクロ
マトグラフイーにおいて、分離性が良好でしかも
機械的強度が大きい親水性樹脂を製造する方法を
みい出し、本発明に到達した。
即ち、本発明は、グリシジル基を有する架橋共
重合体を水に可溶かつ共重合体を膨潤させる溶媒
の水溶性の存在下で開環反応することを特徴とす
る親水性樹脂の製造方法に存する。
以下、本発明を更に詳細に説明する。
本発明のグリシジル基を有する架橋共重合体
は、不飽和カルボン酸のグリシジルエステルと架
橋剤としてのポリビニル化合物とを常法、例え
ば、特開昭53−1087号記載により共重合させるこ
とにより製造される。
不飽和カルボン酸のグリシジルエステルとして
は、グリシジルアクリレート、グリシジルメタク
リレート、グリシジルクロトネート、ジグリシジ
ルイタコネート、ジグリシジルフマレート、ジグ
リシジルマレート等が用いられる。一方、架橋剤
としてのポリビニル化合物としては、炭素数２〜
３のアルキレングリコールまたはこれらのポリア
ルキレングリコールと、アクリル酸またはメタク
リル酸とのエステル、例えば、エチレングリコー
ルジアクリレート、エチレングリコールジメタク
リレート、プロピレングリコールジアクリレー
ト、プロピレングリコールジメタクリレート、ポ
リエチレングリコールジアクリレート、ポリエチ
レングリコールジメタクリレート、ホリプロピレ
ングリコールジアクリレート、ポリプロピレング
リコールジメタクリレート等が用いられる。ま
た、プロパントリオールトリアクリレート、プロ
パントリオールトリメタクリレート等のポリオー
ルのアクリル酸又は、メタクリル酸エステル、ジ
ビニルベンゼン、ジビニルトルエン、ジビニルキ
シレン、ジビニルエチルベンゼン、ジビニルナフ
タレン等の芳香族化合物等も用いられる。
ポリビニル化合物は全重合性モノマーの５（重
量）％以上、好ましくは15（重量）％以上となる
ように使用する。
重合の際の希釈剤としては重合性モノマーの溶
媒でかつ重合反応に不活性なものを用いる。また
重合は、通常、懸濁重合方式で行われるので希釈
剤としては重合分散媒である水に不溶ないし難溶
性であることが必要である。
この様な希釈剤としては、ジクロルメタン、ジ
クロルエタン、トリクロルエタン等の脂肪族ハロ
ゲン化炭化水素、酢酸エチル、酢酸ブチル、フタ
ル酸ジメチル、フタル酸ジエチル等の脂肪族或は
芳香族エステル類等が挙げられる。希釈剤は重合
性モノマーと希釈剤との総量に対して少なくとも
30容量％以上、好ましくは40〜80容量％となるよ
う使用する。
重合開始剤としては通常、ベンゾイルパーオキ
サイド、ｔ−ブチルハイドロパーオキサイド、ラ
ウロイルパーオキサイド、クメンハイドロパーオ
キサイド、メチルエチルケトンパーオキサイド等
の過酸化物或は、アゾビスイソブチロニトリル、
アゾビスα，α−ジメチルパレロトリル、２，
2′−アゾビス−２，４−ジメチルバレロニトリ
ル、アゾビスα−メチルブチロニトリル、アゾビ
スイソブチルアミド等のアゾ系重合開始剤が使用
される。その使用量は重合性モノマーの0.1〜10
（重量）％である。
重合に際しては、重合性モノマーが、重合分散
媒である水へ溶解するのを防止するため、水に塩
化ナトリウム、塩化カルシウム等の塩類を溶解さ
せることもある。又、分散を安定化させる為には
ゼラチン、ポリビニルアルコール、カルボキシメ
チルセルロース等の分散安定剤を水中に加えるこ
ともできる。
水層の量は有機層の量とほぼ同容量以上で、特
に制約は無いが約10容量倍程度までの量で使用さ
れる。重合反応は通常50〜80℃で３〜８時間行な
われる。重合終了後、グリシジル基を有する共重
合体はろ過水洗し、必要ならば抽出後乾燥等の処
理を施すなど適宜の方法で分離される。
上記のようにして得られたグリシジル基を有す
る架橋共重合体は水に可溶性かつ共重合体を膨潤
させる溶媒の水溶液の存在下で開環反応すること
により、分子量１万以下の水溶性物質を分子量の
大きな順に分離するゲルパーミエーシヨンクロマ
トグラフイーにおいて分離性が良好でしかも機械
的強度が大きい親水性樹脂を容易に製造すること
ができる。
グリシジル基を有する架橋共重合体のグリシジ
ル基を開環する際に用いる水に可溶かつ共重合体
を膨潤する溶媒としては溶媒に水が数％以上とけ
ればよく、例えば線状のグリシジルポリマーを溶
解し、かつ水に可溶な性質の溶媒が挙げられる。
具体的にはアセトン、アセトニルアセトン、メチ
ルエチルケトン等のC3〜C5の低級脂肪族ケトン
類、１，４−ジオキサン等のC2〜C4の低級アル
キルエーテル又は環状エーテル、ジメチルスルホ
キシド等のアミド類等が挙げられる。これらの溶
媒の水溶性を用いると水を用いたときに比べ共重
合体の膨潤度が大きくなり好ましい。例えば、
１，４−ジオキサン水溶性を用いた場合の架橋度
25％共重合体の膨潤度は水での体積基準を1.0と
して場合、25体積％濃度で12.50、体積％濃度で
1.6、75体積％６濃度で1.8、100体積％濃度で1.9
となり、25体積％濃度以上で膨潤が始まる。溶媒
の使用量は溶媒の種類によつて異なるが、一般的
には、共重合体１ｇ当り１〜10mlで、25体積％以
上、好ましくは40〜80体積％の水溶液として使用
するのがよい。
グリシジル基の開環反応は、上記溶媒の水溶性
及び触媒の存在下撹拌状態で行なわれる。触媒と
して硫酸又は苛性ソーダを使用する場合、その使
用量は夫々、0.01〜3N又は0.1〜1Nとするのがよ
い。反応温度は20〜60℃で、反応時間は１〜５時
間である。
反応混合物は、冷却後純水で洗浄することによ
り本発明親水性樹脂が得られる。
上記反応を行えば架橋共重合体のエステル結合
を実質的に加水分解することなく、親水化のため
の開環反応を選択的に行うことができる。
本発明方法で得られた親水性樹脂は低分子量
（１万以下）の水溶性物質をゲルパーミエーシヨ
ンクロマトグラフにより分離する際の充填剤とし
て、保持容量が大きくかつ高い分離性を有すると
いう特徴を有する。
次の実施例および比較例により本発明を更に詳
細に説明するが、本発明はその要旨を越えない限
り、以下の実施例に限定されるものではない。
実施例 １
(a) グリシジルエステル基を有する架橋共重合体
粒子の製造
エチレングリコールジメタクレート90ｇ、グ
リシジルメタクリレート210ｇ、ジメチルフタ
レート411ｇおよび２，2′−アゾビス−２，４
−ジメチルバレロニトリル３ｇの混合物を脱塩
水2100mlにポリビニルアルコール21ｇの塩化ナ
トリウム84ｇを溶解した溶液に加え、高速で撹
拌しながら70℃８時間懸濁重合させた。反応物
を冷却したのち生成した共重合体粒子を取
し、水洗した。次いで、この共重合体をトルエ
ン1125mlと水375mlとの混合液中に入れ、室温
で３時間撹拌したのち過した。
更に、この共重合体を1.5のメタノールに
投入して撹拌することを２回反復したのち80℃
で８時間乾燥した。以上の操作を経た粒子を篩
分して、粒径８〜12μの共重合体100ｇを得た。
(b) 膨潤溶媒水溶液中での開環反応
(a)で得られた共重合体粒子20ｇを40mlの１，
４−ジオキサン及び0.1N−硫酸水溶液40mlの
混合溶媒中に入れよく混合する。これを水浴中
で50℃に加熱し、３時間撹拌してグリシジル基
の開環を行う。反応後に冷却し、得られた親水
性樹脂を純水で洗浄する。
(c) 樹脂の性能試験
上記親水性樹脂を分級し８〜10μの粒子径の
粒子を内径7.5mm、長さ600mmのステンレスカラ
ムに充填した。このカラムを用いて分子量既知
のポリエチレングリコールおよびエチレングリ
コールの0.5％水溶液について温度25℃、流速
１ml／mmで測定し、表−１の結果を得た。さら
にこの結果をグラフにプロツトし第１図の検量
線を得た。この検量線より排除限界分子量は６
×103で、エチレングリコール（分子量62）と
分子量６×103のポリエチレングリコールの間
の保持容量は6.49mlであつた。
分子量４×103、１×103、６×102のポリエ
チレングリコールおよびエチレングリコール
（分子量62）を含む混合サンプルをこの充填カ
ラムで分析したところ第２図のように各サンプ
ルがよく分離された。第２図のピークNo.とポリ
エチレングリコールの分子量の関係は以下の通
りである。尚ピークの検出は屈折率により行つ
た。
ピークNo.１：４×103、No.２：１×103、No.
３：６×102、No.４：62
実施例 ２
グリシジルエステル基を有する架橋共重合粒子
の製造は実施例１−(a)のジメチルフタレート溶媒
の変わりに１，２−ジクロルエタン432ｇを用い
た以外は同一組成、同一操作法で架橋共重合体を
製造した。
得られた共重合体を実施例１−(b)の操作法によ
り開環反応し親水性樹脂を得た。実施例１−(c)と
同様にこの親水性樹脂を内径7.5mmφ、長さ600mm
のステンレスカラムに充填した。分子量既知のポ
リエチレングリコールおよびエチレングリコール
の0.5％水溶液を測定し、表−２の結果を得た。
この結果をグラブにプロツトし、得られた検量線
より求めた排除限界分子量は６×103でエチレン
グリコール（分子量62）と分子量６×103のポリ
エチレングリコールの間の保持容量は8.07mlであ
つた。
実施例 ３
グリシジルメタクリレート225ｇ、トリメチロ
ールプロパントリメタクリレート75ｇ、１，２−
ジクロルエタン432ｇ、および２，2′−アゾビス
−２，４−ジメチルバレロニトリル３ｇよりなる
均一混合液を重合液として用いた以外は実施例１
−(a)と同一操作法で行い、架橋共重合体を製造し
た。
得られた共重合体35ｇを105mlの１，４−ジオ
キサン及ひ0.4N−硫酸水溶液35mlの混合溶媒中
に入れよく混合する。これを水浴中で50℃に加熱
し、５時間撹拌して、グリシジル基の開環を行
う。反応後に冷却し、水洗して親水性樹脂を得
た。実施例１−(c)と同様にこの親水性樹脂を分級
し、８〜10μの粒子径の粒子を内径7.5mmφ、長さ
600mmのステンレスカラムに充填した。このカラ
ムを用いて分子量既知のポリエチレングリコール
およびエチレングリコールの0.5％水溶液を測定
し、表−１の結果を得た。この結果をグラフにプ
ロツトし、得られた検量線より求めた排除限界分
子量は６×103であり、62〜６×103の分子量範囲
の保持容量は7.60mlであつた。
実施例 ４
実施例３で得た共重合体35ｇを105mlのアセト
ン及び2N−硫酸水溶液7.7mlの混合溶媒中に入れ
よく混合し、20℃、６時間撹拌しながらグリシジ
ル基の開環を行い、冷却後、水洗して親水性樹脂
を得た。この親水性樹脂を実施例３と同様にして
カラムに充填し、分子量既知のポリエチレングリ
コールおよびエチレングリコールを分析して検量
線を作成した。得られた検量線より求めたこのゲ
ルの排除限界分子量は６×103であり、62〜６×
103の分子量範囲の保持容量は7.65mlで膨潤溶媒
水溶液を変えても実施例３同様、保持容量の大き
なものができた。
比較例 １
実施例１−(a)で得た共重合体20ｇを2N−硫酸
水溶液80mlに入れよく混合し撹拌しながら、90
℃、５時間開環反応を行い、冷却後、水洗し親水
性樹脂を得た。この親水性樹脂を実施例１−(c)と
同様にしてカラムに充填し、分子量既知のポリエ
チレングリコールおよびエチレングリコールを分
析して検量線を作成したところ、表−１および第
３図のようになつた。検量線より求めた排除限界
分子量は６×103で実施例１と同様であるが、62
〜６×103の分子量範囲の保持容量は5.5mlと本発
明の親水性樹脂より小さかつた。また実施例１同
様に同一混合サンプルを分析したところ第４図の
ように保持容量が小さいため分離性が悪かつた。
尚、第４図中のピークNo.の意義は第２図中のもの
と同一である。
比較例 ２
実施例２で得た共重合体20ｇを2N−硫酸水溶
液80mlに入れよく混合し撹拌しながら90℃、５時
間開環反応を行い、冷却後、水洗して親水性樹脂
を得た。この親水性樹脂を実施例２と同様にして
カラムに充填し、分子量既知のポリエチレングリ
コールおよびエチレングリコールを分析して、検
量線を作成した。検量線より求めた排除限界分子
量は６×103で実施例２と同様であるが、62〜６
×103の分子量範囲の保持容量は4.8mlと本発明親
水性樹脂より小さく分子量１×103付近の成分を
含むサンプルの分離には適さなかつた。
The present invention relates to a method for producing a hydrophilic resin. Specifically, the present invention relates to a method for producing a hydrophilic resin suitable as a filler for liquid chromatography, particularly gel permeation chromatography for separating water-soluble substances with a molecular weight of 10,000 or less. Conventionally, as packing materials for gel permeation chromatography, crosslinked dextran gels made by crosslinking dextran with epichlorohydrin, agarose, or crosslinked polyacrylamide gels, which are copolymers of acrylamide and methylenebisacrylamide, etc., have been used. . However, these fillers have a low degree of crosslinking to widen the gel network structure, so the particles are soft and have low mechanical strength. Therefore, chromatographic operations under pressure have disadvantages such as deformation of particles and generation of pressure loss. On the other hand, as a solution to this problem, a packing material for gel permeation chromatography is available, which is made by ring-opening the epoxy group of a copolymer of unsaturated carboxylic acid glycidyl ester crosslinked with ethylene glycol dimethacrylate etc. by hydrolysis. Are known. (For example, see JP-A-53-1087.) However, although this product has improved strength, in order to separate water-soluble substances with a molecular weight of 10,000 or less, it is necessary to increase the retention capacity, that is, the upper limit molecular weight substance in the fractionation range of the substance. If the difference between the elution volume and the elution volume of the lower limit molecular weight substance is not sufficient and the fractionation range of the substance is constant, the larger the retention capacity, the longer the distance between the peaks of adjacent substances and the better the separation performance. However, it is still not enough. As a result of intensive studies to solve these drawbacks, the present inventors found that gel permeation chromatography, which separates water-soluble substances with a molecular weight of 10,000 or less in descending order of molecular weight, has good separation performance and mechanical strength. A method for manufacturing a large hydrophilic resin was discovered and the present invention was achieved. That is, the present invention relates to a method for producing a hydrophilic resin, which is characterized in that a crosslinked copolymer having a glycidyl group is subjected to a ring-opening reaction in the presence of a water-soluble solvent that is soluble in water and that swells the copolymer. Exists. The present invention will be explained in more detail below. The crosslinked copolymer having a glycidyl group of the present invention is produced by copolymerizing a glycidyl ester of an unsaturated carboxylic acid and a polyvinyl compound as a crosslinking agent by a conventional method, for example, as described in JP-A-53-1087. Ru. As the glycidyl ester of unsaturated carboxylic acid, glycidyl acrylate, glycidyl methacrylate, glycidyl crotonate, diglycidyl itaconate, diglycidyl fumarate, diglycidyl maleate, etc. are used. On the other hand, as a polyvinyl compound as a crosslinking agent, carbon number 2 to
3 alkylene glycols or esters of these polyalkylene glycols and acrylic acid or methacrylic acid, such as ethylene glycol diacrylate, ethylene glycol dimethacrylate, propylene glycol diacrylate, propylene glycol dimethacrylate, polyethylene glycol diacrylate, polyethylene glycol Dimethacrylate, polypropylene glycol diacrylate, polypropylene glycol dimethacrylate, etc. are used. Also used are acrylic acid or methacrylic acid esters of polyols such as propanetriol triacrylate and propanetriol trimethacrylate, and aromatic compounds such as divinylbenzene, divinyltoluene, divinylxylene, divinylethylbenzene, and divinylnaphthalene. The polyvinyl compound is used in an amount of 5% (by weight) or more, preferably 15% (by weight) or more of the total polymerizable monomers. As a diluent during polymerization, a diluent that is a solvent for the polymerizable monomer and is inert to the polymerization reaction is used. Further, since polymerization is usually carried out by suspension polymerization, the diluent must be insoluble or sparingly soluble in water, which is a polymerization dispersion medium. Examples of such diluents include aliphatic halogenated hydrocarbons such as dichloromethane, dichloroethane, and trichloroethane, and aliphatic or aromatic esters such as ethyl acetate, butyl acetate, dimethyl phthalate, and diethyl phthalate. . The diluent is at least
It is used so that the amount is 30% by volume or more, preferably 40 to 80% by volume. The polymerization initiator is usually a peroxide such as benzoyl peroxide, t-butyl hydroperoxide, lauroyl peroxide, cumene hydroperoxide, or methyl ethyl ketone peroxide, or azobisisobutyronitrile,
Azobisα,α-dimethylparerotril, 2,
Azo polymerization initiators such as 2'-azobis-2,4-dimethylvaleronitrile, azobis α-methylbutyronitrile, and azobisisobutyramide are used. The amount used is 0.1 to 10 of the polymerizable monomer.
(weight)%. During polymerization, salts such as sodium chloride and calcium chloride may be dissolved in water to prevent the polymerizable monomer from dissolving in water, which is a polymerization dispersion medium. Further, in order to stabilize the dispersion, a dispersion stabilizer such as gelatin, polyvinyl alcohol, or carboxymethyl cellulose can be added to the water. The amount of the aqueous layer is approximately the same volume or more than the amount of the organic layer, and although there are no particular restrictions, the amount used is up to about 10 times the volume. The polymerization reaction is usually carried out at 50-80°C for 3-8 hours. After the polymerization is completed, the copolymer having a glycidyl group is separated by an appropriate method such as filtering, washing with water, and, if necessary, performing treatments such as extraction and drying. The crosslinked copolymer having a glycidyl group obtained as described above undergoes a ring-opening reaction in the presence of an aqueous solution of a solvent that is soluble in water and swells the copolymer, thereby forming a water-soluble substance with a molecular weight of 10,000 or less. Hydrophilic resins that exhibit good separation properties in gel permeation chromatography, which separates in descending order of molecular weight, and have high mechanical strength can be easily produced. A solvent that is soluble in water and that swells the copolymer used when ring-opening the glycidyl group of a crosslinked copolymer having a glycidyl group may contain at least a few percent of water; for example, a linear glycidyl polymer. and water-soluble solvents.
Specifically, C3 to C5 lower aliphatic ketones such as acetone, acetonylacetone, and methyl ethyl ketone, C2 to C4 lower alkyl ethers or cyclic ethers such as 1,4-dioxane, and amides such as dimethyl sulfoxide. etc. The water solubility of these solvents is preferred because the degree of swelling of the copolymer becomes greater than when water is used. for example,
Degree of crosslinking when using water-soluble 1,4-dioxane
The degree of swelling of 25% copolymer is 12.50 at 25% concentration and 12.50 at 25% concentration when the volume basis in water is 1.0.
1.6, 1.8 at 75 volume% 6 concentration, 1.9 at 100 volume% concentration
Therefore, swelling begins at a concentration of 25% by volume or higher. The amount of solvent to be used varies depending on the type of solvent, but it is generally 1 to 10 ml per gram of copolymer, and preferably used as an aqueous solution of 25% by volume or more, preferably 40 to 80% by volume. The ring-opening reaction of the glycidyl group is carried out under stirring in the presence of a water-soluble solvent and a catalyst. When sulfuric acid or caustic soda is used as a catalyst, the amount used is preferably 0.01 to 3N or 0.1 to 1N, respectively. The reaction temperature is 20-60°C and the reaction time is 1-5 hours. The hydrophilic resin of the present invention is obtained by washing the reaction mixture with pure water after cooling. If the above reaction is carried out, the ring-opening reaction for making the crosslinked copolymer hydrophilic can be selectively carried out without substantially hydrolyzing the ester bonds of the crosslinked copolymer. The hydrophilic resin obtained by the method of the present invention can be used as a filler when separating low molecular weight (10,000 or less) water-soluble substances by gel permeation chromatography, and has the characteristics of having a large retention capacity and high separation performance. has. The present invention will be explained in more detail with reference to the following Examples and Comparative Examples, but the present invention is not limited to the following Examples unless the gist thereof is exceeded. Example 1 (a) Production of crosslinked copolymer particles having glycidyl ester groups 90 g of ethylene glycol dimethacrylate, 210 g of glycidyl methacrylate, 411 g of dimethyl phthalate and 2,2'-azobis-2,4
- A mixture of 3 g of dimethylvaleronitrile was added to a solution of 21 g of polyvinyl alcohol and 84 g of sodium chloride dissolved in 2100 ml of demineralized water, and suspension polymerization was carried out at 70° C. for 8 hours while stirring at high speed. After cooling the reaction product, the produced copolymer particles were collected and washed with water. Next, this copolymer was placed in a mixture of 1125 ml of toluene and 375 ml of water, stirred at room temperature for 3 hours, and filtered. Furthermore, this copolymer was added to 1.5 methanol and stirred twice, and then heated to 80°C.
It was dried for 8 hours. The particles subjected to the above operations were sieved to obtain 100 g of a copolymer with a particle size of 8 to 12 μm. (b) Ring-opening reaction in a swelling solvent aqueous solution 20 g of the copolymer particles obtained in (a) were mixed with 40 ml of 1,
Pour into a mixed solvent of 40 ml of 4-dioxane and 0.1N sulfuric acid aqueous solution and mix well. This is heated to 50°C in a water bath and stirred for 3 hours to open the glycidyl group. After the reaction, it is cooled and the obtained hydrophilic resin is washed with pure water. (c) Performance test of resin The above hydrophilic resin was classified and particles having a particle size of 8 to 10 μm were packed into a stainless steel column with an inner diameter of 7.5 mm and a length of 600 mm. Using this column, polyethylene glycol of known molecular weight and a 0.5% aqueous solution of ethylene glycol were measured at a temperature of 25° C. and a flow rate of 1 ml/mm, and the results shown in Table 1 were obtained. Furthermore, this result was plotted on a graph to obtain the calibration curve shown in FIG. From this calibration curve, the exclusion limit molecular weight is 6
×10 3 , the retention capacity between ethylene glycol (molecular weight 62) and polyethylene glycol having a molecular weight of 6 × 10 3 was 6.49 ml. When mixed samples containing polyethylene glycol with molecular weights of 4 x 10 3 , 1 x 10 3 and 6 x 10 2 and ethylene glycol (molecular weight 62) were analyzed using this packed column, each sample was well separated as shown in Figure 2. . The relationship between the peak number in FIG. 2 and the molecular weight of polyethylene glycol is as follows. Note that peak detection was performed using refractive index. Peak No. 1: 4×10 3 , No. 2: 1×10 3 , No.
3:6×10 2 , No.4:62 Example 2 For the production of crosslinked copolymer particles having glycidyl ester groups, 432 g of 1,2-dichloroethane was used instead of the dimethyl phthalate solvent in Example 1-(a). A crosslinked copolymer was produced using the same composition and the same operation method except for the above. The obtained copolymer was subjected to a ring-opening reaction according to the procedure described in Example 1-(b) to obtain a hydrophilic resin. Similar to Example 1-(c), this hydrophilic resin was made into a mold with an inner diameter of 7.5 mmφ and a length of 600 mm.
was packed into a stainless steel column. Polyethylene glycol of known molecular weight and a 0.5% aqueous solution of ethylene glycol were measured, and the results shown in Table 2 were obtained.
This result was plotted on a graph, and the exclusion limit molecular weight determined from the obtained calibration curve was 6 x 10 3 and the retention capacity between ethylene glycol (molecular weight 62) and polyethylene glycol with a molecular weight of 6 x 10 3 was 8.07 ml. Ta. Example 3 225 g of glycidyl methacrylate, 75 g of trimethylolpropane trimethacrylate, 1,2-
Example 1 except that a homogeneous mixed solution consisting of 432 g of dichloroethane and 3 g of 2,2'-azobis-2,4-dimethylvaleronitrile was used as the polymerization solution.
- A crosslinked copolymer was produced using the same procedure as in (a). 35 g of the obtained copolymer is placed in a mixed solvent of 105 ml of 1,4-dioxane and 35 ml of 0.4N sulfuric acid aqueous solution and mixed well. This is heated to 50° C. in a water bath and stirred for 5 hours to effect ring opening of the glycidyl group. After the reaction, the mixture was cooled and washed with water to obtain a hydrophilic resin. This hydrophilic resin was classified in the same manner as in Example 1-(c), and particles with a particle size of 8 to 10μ were separated into particles with an inner diameter of 7.5 mmφ and a length of
It was packed into a 600 mm stainless steel column. Using this column, polyethylene glycol of known molecular weight and a 0.5% aqueous solution of ethylene glycol were measured, and the results shown in Table 1 were obtained. This result was plotted on a graph, and the exclusion limit molecular weight determined from the obtained calibration curve was 6 x 103 , and the retention capacity for the molecular weight range of 62 to 6 x 103 was 7.60 ml. Example 4 35 g of the copolymer obtained in Example 3 was mixed well in a mixed solvent of 105 ml of acetone and 7.7 ml of a 2N sulfuric acid aqueous solution, and the glycidyl groups were ring-opened while stirring at 20°C for 6 hours. After cooling, it was washed with water to obtain a hydrophilic resin. This hydrophilic resin was packed into a column in the same manner as in Example 3, and polyethylene glycol and ethylene glycol of known molecular weight were analyzed to create a calibration curve. The exclusion limit molecular weight of this gel, determined from the obtained calibration curve, is 6×10 3 , which is 62 to 6×
The retention capacity for the molecular weight range of 10 3 was 7.65 ml, and even if the swelling solvent aqueous solution was changed, similar to Example 3, a product with a large retention capacity was obtained. Comparative Example 1 20 g of the copolymer obtained in Example 1-(a) was added to 80 ml of a 2N sulfuric acid aqueous solution, mixed well, and heated to 90 mL while stirring.
A ring-opening reaction was carried out at °C for 5 hours, and after cooling, the mixture was washed with water to obtain a hydrophilic resin. This hydrophilic resin was packed into a column in the same manner as in Example 1-(c), and polyethylene glycol and ethylene glycol of known molecular weight were analyzed to create a calibration curve, as shown in Table 1 and Figure 3. Summer. The exclusion limit molecular weight determined from the calibration curve was 6 × 10 3 , which is the same as in Example 1, but 62
The holding capacity for the molecular weight range of ~6×10 3 was 5.5 ml, which was smaller than the hydrophilic resin of the present invention. Further, when the same mixed sample was analyzed in the same manner as in Example 1, as shown in FIG. 4, the retention capacity was small and the separation performance was poor.
The meanings of the peak numbers in FIG. 4 are the same as those in FIG. 2. Comparative Example 2 20 g of the copolymer obtained in Example 2 was added to 80 ml of a 2N sulfuric acid aqueous solution, mixed well, and a ring-opening reaction was carried out at 90°C for 5 hours with stirring. After cooling, the mixture was washed with water to obtain a hydrophilic resin. . This hydrophilic resin was packed into a column in the same manner as in Example 2, and polyethylene glycol and ethylene glycol of known molecular weight were analyzed to create a calibration curve. The exclusion limit molecular weight determined from the calibration curve was 6 x 103 , which is the same as in Example 2, but 62 to 6
The holding capacity for the molecular weight range of ×10 3 was 4.8 ml, which was smaller than the hydrophilic resin of the present invention and was not suitable for separating samples containing components with molecular weights around 1 × 10 3 .
【表】【table】
【表】【table】
【図面の簡単な説明】[Brief explanation of the drawing]
第１図は実施例１で得た親水性樹脂を充填した
カラムについて分子量既知のポリエチレングリコ
ールおよびエチレングリコールの水溶液を用いて
求めた検量線図である。第２図は３種類の分子量
のポリエチレングリコールおよびエチレングリコ
ール混合物をサンプルとして用いて実施例１の充
填カラムで分析して得られた溶出曲線図である。
第３図は比較例１で得た親水性樹脂を充填したカ
ラムについて分子量既知のポリエチレングリコー
ルおよびエチレングリコールの水溶液を用いて求
めた検量線図である。第４図は３種類の分子量の
ポリエチレングリコールおよびエチレングリコー
ル混合物をサンプルとして用いて比較例１の充填
カラムで分析して得られた溶出曲線図である。
FIG. 1 is a calibration curve obtained for the column packed with the hydrophilic resin obtained in Example 1 using polyethylene glycol of known molecular weight and an aqueous solution of ethylene glycol. FIG. 2 is an elution curve diagram obtained by analyzing polyethylene glycols of three different molecular weights and an ethylene glycol mixture as samples using the packed column of Example 1.
FIG. 3 is a calibration curve obtained for the column packed with the hydrophilic resin obtained in Comparative Example 1 using polyethylene glycol of known molecular weight and an aqueous solution of ethylene glycol. FIG. 4 is an elution curve diagram obtained by analyzing polyethylene glycols and ethylene glycol mixtures of three different molecular weights as samples in a packed column of Comparative Example 1.