JPH0464591B2 - - Google Patents
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- JPH0464591B2 JPH0464591B2 JP60181928A JP18192885A JPH0464591B2 JP H0464591 B2 JPH0464591 B2 JP H0464591B2 JP 60181928 A JP60181928 A JP 60181928A JP 18192885 A JP18192885 A JP 18192885A JP H0464591 B2 JPH0464591 B2 JP H0464591B2
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- Japan
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- color
- sample
- solution
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- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N31/00—Investigating or analysing non-biological materials by the use of the chemical methods specified in the subgroup; Apparatus specially adapted for such methods
- G01N31/22—Investigating or analysing non-biological materials by the use of the chemical methods specified in the subgroup; Apparatus specially adapted for such methods using chemical indicators
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
- G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
- G01N21/78—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator producing a change of colour
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
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- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
- Investigating Or Analyzing Materials By The Use Of Electric Means (AREA)
- Electrostatic Separation (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
室内塵ダニ（Dermatophagoides pteronyssi
−nus、farinaeなど）は、近年増大する注目を
引くようになつてきた［G.ホフマン著“密閉
空間中の空気の品質（Luftualita¨t in
Innenra¨umen）“グスタフフイツシヤー、シユ
トウツトガルトーニユーヨーク刊、1982年385
〜401頁］。その理由は、人口のかなりの割合
（約５％と計算されている）が室内のちりの成
分に帰因する喘息症状に苦しんでいることが認
められていることになる。
−nus、farinaeなど）は、近年増大する注目を
引くようになつてきた［G.ホフマン著“密閉
空間中の空気の品質（Luftualita¨t in
Innenra¨umen）“グスタフフイツシヤー、シユ
トウツトガルトーニユーヨーク刊、1982年385
〜401頁］。その理由は、人口のかなりの割合
（約５％と計算されている）が室内のちりの成
分に帰因する喘息症状に苦しんでいることが認
められていることになる。
これらの成分は主として上記の室内塵ダニの
排泄物（feces）及び死んだダニの残片
（fragments）である。生息しているダニ及び
死んだダニの腸管は、健康の障害を誘発するア
レルゲンを含有する［E.ペトリら、アレルゴロ
ジー（Allergologic）、第５巻、第３号
（1982）、109〜119頁］。生息するダニ自体は、
それが生きている間に生産するアレルゲンの量
の約1000分の１を含有するに過ぎない。排泄物
自体には菌類が繁殖することが多く、一方、そ
れが同様にアレルゲンを生じさせる可能性があ
る。アレルゲンの大部分の量は、初めのダニの
集団個体数を抑制処理により駆除し又は低下さ
せる場合にすら、ちりの堆積物中に認められ
る。
排泄物（feces）及び死んだダニの残片
（fragments）である。生息しているダニ及び
死んだダニの腸管は、健康の障害を誘発するア
レルゲンを含有する［E.ペトリら、アレルゴロ
ジー（Allergologic）、第５巻、第３号
（1982）、109〜119頁］。生息するダニ自体は、
それが生きている間に生産するアレルゲンの量
の約1000分の１を含有するに過ぎない。排泄物
自体には菌類が繁殖することが多く、一方、そ
れが同様にアレルゲンを生じさせる可能性があ
る。アレルゲンの大部分の量は、初めのダニの
集団個体数を抑制処理により駆除し又は低下さ
せる場合にすら、ちりの堆積物中に認められ
る。
おおいを付けた家具、ベツド、床及び壁中に
は、特にそれらが繊維材料で覆われている場合
には、室内塵ダニが生息する。面域に関して
は、じゆうたんの寄与がもつとも大きいものと
思われる。
は、特にそれらが繊維材料で覆われている場合
には、室内塵ダニが生息する。面域に関して
は、じゆうたんの寄与がもつとも大きいものと
思われる。
歩いたり使用したりすることによつて床や布
張りの家具からきわめて細かいほこりが立ち、
それがほとんど通気のない近付き難い場所、た
とえば食器棚の裏に集まることが多くある。実
際に電気掃除機の使用中にすら一部のこのよう
なきわめて細かいほこりが立ち、かくしてそれ
がダニ自体は生息していない場所に到達する。
何れにしても、ほこりが立つことが多ければ多
いほど、影響を受ける室中の者にとつて悩みは
大きい。
張りの家具からきわめて細かいほこりが立ち、
それがほとんど通気のない近付き難い場所、た
とえば食器棚の裏に集まることが多くある。実
際に電気掃除機の使用中にすら一部のこのよう
なきわめて細かいほこりが立ち、かくしてそれ
がダニ自体は生息していない場所に到達する。
何れにしても、ほこりが立つことが多ければ多
いほど、影響を受ける室中の者にとつて悩みは
大きい。
室内塵アレルギーの原因の除去は、その原因
が既知であることを前提とする。たとえば花粉
によるアレルギー（花粉症）のような、他のア
レルギーもまた存在する。しかしながら、室内
塵アレルギーは、ダニの排泄物やダニの残留物
（residues）がほとんど断えることなく存在し
ていることから、それに冒されている者にとつ
て年間を通じての苦しみである。かくして、医
者と患者は、ダニの蔓延（infestation）がある
かどうかの問題に絶えず直面している。
が既知であることを前提とする。たとえば花粉
によるアレルギー（花粉症）のような、他のア
レルギーもまた存在する。しかしながら、室内
塵アレルギーは、ダニの排泄物やダニの残留物
（residues）がほとんど断えることなく存在し
ていることから、それに冒されている者にとつ
て年間を通じての苦しみである。かくして、医
者と患者は、ダニの蔓延（infestation）がある
かどうかの問題に絶えず直面している。
特願昭59−248836号（P3344087.5）及び特願
昭59−273503号（P3404821.9）においては、ア
レルゲン含有ダニ残留物の検出のための簡単な
方法を見出すという目的を達成するための方策
が記されている。芳香族ジアゾ化合物、たとえ
ばジアゾスルフアニル酸はダニの排泄物の存在
において赤煉瓦色の発色を生じ、その濃度は、
本出願人が確認したように、ちり試料中に存在
するダニの排泄物の濃度に比例する。
昭59−273503号（P3404821.9）においては、ア
レルゲン含有ダニ残留物の検出のための簡単な
方法を見出すという目的を達成するための方策
が記されている。芳香族ジアゾ化合物、たとえ
ばジアゾスルフアニル酸はダニの排泄物の存在
において赤煉瓦色の発色を生じ、その濃度は、
本出願人が確認したように、ちり試料中に存在
するダニの排泄物の濃度に比例する。
この研究の継続として、主特許中に記された
ダニ排泄物の濃度の評価方法は、ちり試料の全
体的なアレルギー学的活性の評価に対しても適
していることが、ここに明らかとなつた。かく
して、呈色反応によりアレルゲン含有室内塵の
定性的及び半定量的検出の遂行が可能であるば
かりでなく、その室内塵中に含まれるアレルゲ
ンによる汚染についての情報を取得することも
また可能である。
ダニ排泄物の濃度の評価方法は、ちり試料の全
体的なアレルギー学的活性の評価に対しても適
していることが、ここに明らかとなつた。かく
して、呈色反応によりアレルゲン含有室内塵の
定性的及び半定量的検出の遂行が可能であるば
かりでなく、その室内塵中に含まれるアレルゲ
ンによる汚染についての情報を取得することも
また可能である。
それは、本発明の方法による測定結果を、技
術の現状に従つて、現在もつとも効果的である
とみなされている試験方法、すなわち放射性ア
レルゴ吸収剤試験［radioallergosorbent test
（RAST）］と比較することによつて確認され
る。
術の現状に従つて、現在もつとも効果的である
とみなされている試験方法、すなわち放射性ア
レルゴ吸収剤試験［radioallergosorbent test
（RAST）］と比較することによつて確認され
る。
RAST法及びここに記す方法（呈色反応の
使用）の両者により同一ちり試料に対して得た
試験結果の統計的分析、及び顕微鏡によつて調
べたダニの集団固体数に対するそれらの関係
は、統計的分析をスピアマンの相関係法方法
［シドニーシーゲル著“ノンパラメトリツク統
計学”、マツクグローヒルインターナシヨナル
ブツクカンパナー、オークランド（1956）］に
よつて行なうときに、全体的なアレルギー学的
活性の評価における高度の一致を示した。
使用）の両者により同一ちり試料に対して得た
試験結果の統計的分析、及び顕微鏡によつて調
べたダニの集団固体数に対するそれらの関係
は、統計的分析をスピアマンの相関係法方法
［シドニーシーゲル著“ノンパラメトリツク統
計学”、マツクグローヒルインターナシヨナル
ブツクカンパナー、オークランド（1956）］に
よつて行なうときに、全体的なアレルギー学的
活性の評価における高度の一致を示した。
本発明による方法は、当該ちり試料を単に抽
出する必要があるのみで、次いで抽出物につい
て直接に色濃度を測定することが可能であるこ
とから、RAST法と比較して著るしく簡単に
遂行することができる。RAST法の手順は比
較的複雑であり、且つその各段階はそれぞれ個
有の問題をかかえている。それ故、指示のため
の放射性物質の使用を要しない方法の試みが行
なわれている［この点に関しては、D.ノルテ、
“アレルギーの診断”（Allergie−
diagonostik″）、ダストリフエルラーク、カー
ルフアイストル、ミユンヘン−ダイセンホーフ
エン（1981）、特に29頁以下；及びM.ウエルナ
ー及びV.ラツパート、“アレルギーの実際的診
断”（Praktische Allergiediagnostik）、ゲオ
ルグチーメ、シユトウツトガルト（1979）、96
頁以下、参照］。
出する必要があるのみで、次いで抽出物につい
て直接に色濃度を測定することが可能であるこ
とから、RAST法と比較して著るしく簡単に
遂行することができる。RAST法の手順は比
較的複雑であり、且つその各段階はそれぞれ個
有の問題をかかえている。それ故、指示のため
の放射性物質の使用を要しない方法の試みが行
なわれている［この点に関しては、D.ノルテ、
“アレルギーの診断”（Allergie−
diagonostik″）、ダストリフエルラーク、カー
ルフアイストル、ミユンヘン−ダイセンホーフ
エン（1981）、特に29頁以下；及びM.ウエルナ
ー及びV.ラツパート、“アレルギーの実際的診
断”（Praktische Allergiediagnostik）、ゲオ
ルグチーメ、シユトウツトガルト（1979）、96
頁以下、参照］。
呈色反応の評価についての本出願人によるこ
れらの新しい知見は、主特許の本発明による拡
張、すなわち定量的な測定を思いつかせた。
れらの新しい知見は、主特許の本発明による拡
張、すなわち定量的な測定を思いつかせた。
本発明による方法のいくつかの好適実施態様
を以下に説明する： 検査すべきちり試料中において検出を妨害す
る成分は、あらかじめ加熱した水−アルコール
溶剤混合物を用いる処理によつて除去すること
が好ましい。
を以下に説明する： 検査すべきちり試料中において検出を妨害す
る成分は、あらかじめ加熱した水−アルコール
溶剤混合物を用いる処理によつて除去すること
が好ましい。
検出に関係する成分は残留するちり試料から
アルカリ金属水酸化物の水−アルコール溶液を
用いる抽出によつて取り出される。この手順に
ついての詳細は、主特許、すなわち特願昭59−
248836号に記されている。
アルカリ金属水酸化物の水−アルコール溶液を
用いる抽出によつて取り出される。この手順に
ついての詳細は、主特許、すなわち特願昭59−
248836号に記されている。
たとえば特願昭59−273503号による試験紙の
使用による試験紙の使用によつて、上記のよう
にして得た抽出物の試料に対する予備試験にお
いて、予想される色濃度を確認することが可能
である。詳細はこの特許願中に記されている。
使用による試験紙の使用によつて、上記のよう
にして得た抽出物の試料に対する予備試験にお
いて、予想される色濃度を確認することが可能
である。詳細はこの特許願中に記されている。
濃度に依存して、１乃至10mlの抽出物の部分
試料を採取して、炭酸ナトリウム溶液、次いで
芳香族ジアゾ化合物、たとえばジアゾスルフア
ニル酸を加える。芳香族ジアゾ化合物について
の詳細は主特許中に記されている。
試料を採取して、炭酸ナトリウム溶液、次いで
芳香族ジアゾ化合物、たとえばジアゾスルフア
ニル酸を加える。芳香族ジアゾ化合物について
の詳細は主特許中に記されている。
顕色のための約20分の後に、水−アルコール
溶剤混合物を加え、かくして得た呈色溶液を、
規準としてブランク試料を用いて、分光光度計
により測定する。
溶剤混合物を加え、かくして得た呈色溶液を、
規準としてブランク試料を用いて、分光光度計
により測定する。
測定結果をグアニン検定曲線を用いて評価す
る。
る。
上記の手順についての詳細な設計は、この分
野の分析の専門家によつて容易に遂行すること
ができよう。限定的なものではない単なる一例
として、以下のようにして本発明を実施するこ
とができる。
野の分析の専門家によつて容易に遂行すること
ができよう。限定的なものではない単なる一例
として、以下のようにして本発明を実施するこ
とができる。
実施例
１ 秤量
測定重量：250mgのアレルゲン含有室内塵
２ 清浄化
ちり試料を、容量10mlの遠心分離管中で、60
℃に予熱してある“溶液”５mlによつて浸出
する。遠心分離及び傾瀉後に、この工程を繰返
す。
℃に予熱してある“溶液”５mlによつて浸出
する。遠心分離及び傾瀉後に、この工程を繰返
す。
３ 抽出
なお湿つている予備洗浄したちり試料を、遠
心分離管中で３mlの“溶液”と混合し、次い
で遠心分離する。３mlの“溶液”を用いて洗
浄を行なう。
心分離管中で３mlの“溶液”と混合し、次い
で遠心分離する。３mlの“溶液”を用いて洗
浄を行なう。
４ 発色
このようにして得た、洗液をも含む、検出溶
液を過したのち、メスフラスコ中で蒸溜水に
よつて全体で100mlとする。この溶液の１〜10
ml（予備試験に基づいて予想される色濃度に依
存する）をピペツトにより25mlのメスフラスコ
中に計り入れ、３mlの濃度20％の炭酸ナトリウ
ム溶液と２mlの濃度0.05％のジアゾスルフアニ
ル酸溶液を加える。20分後に10mlの“溶液”
を加え、次いで混合物を蒸留水によつて正確に
25mlに仕上げる。
液を過したのち、メスフラスコ中で蒸溜水に
よつて全体で100mlとする。この溶液の１〜10
ml（予備試験に基づいて予想される色濃度に依
存する）をピペツトにより25mlのメスフラスコ
中に計り入れ、３mlの濃度20％の炭酸ナトリウ
ム溶液と２mlの濃度0.05％のジアゾスルフアニ
ル酸溶液を加える。20分後に10mlの“溶液”
を加え、次いで混合物を蒸留水によつて正確に
25mlに仕上げる。
５ 色の測定
測定はブランク試料を基準として490ナノメ
ートルにおいて行なう。グアニンによる検定曲
線（“溶液”中に20〜100μｇの種々の濃度の
グアニンを含有する溶液を25mlのメスフラスコ
中で調整し、上記４、に記した方法に従つて発
色を行なうことによつて求めたもの）を用いて
評価を行なう。
ートルにおいて行なう。グアニンによる検定曲
線（“溶液”中に20〜100μｇの種々の濃度の
グアニンを含有する溶液を25mlのメスフラスコ
中で調整し、上記４、に記した方法に従つて発
色を行なうことによつて求めたもの）を用いて
評価を行なう。
溶液：容量で20部のメタノール及び容量で
100部の水 溶液：200mlの“溶液”中の1.9ｇのKOH
100部の水 溶液：200mlの“溶液”中の1.9ｇのKOH
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 家屋内に存在するちりの試料をアルカリ金
属水酸化物の水−アルコール溶液中に十分に懸
濁させ、それによつて得た抽出物について芳香
族ジアゾ化合物を用いる呈色反応を行つて呈色
の濃度を評価する、アレルゲン含有の室内塵料
中の室内塵ダニ起源のアレルギー学的活性の定
量的測定法において、 色濃度の評価が色濃度を定量的に測定するこ
とによつて行なわれることを特徴とする測定
法。 ２ 色測定は分光光度計を使用して行なう、特
許請求の範囲第１項記載の方法。 ３ 使用するちり試料は（清浄化のために）あ
らかじめ水−アルコール混合物によつて予備処
理してある、特許請求の範囲第１又は２項記載
の方法。 ４ 強アルカリ性であることが（検出に関係す
る成分の抽出のために）有利である溶液の量
を、引続く発色のために最低の量に限定する、
特許請求の範囲第１〜３項の何れかに記載の方
法。 ５ 特許請求の範囲第４項記載のようにして得
た強アルカリ性抽出物のアルカリ性を希釈（水
による）によつて測定濃度を著るしく低下さ
せ、ここで該測定濃度はアゾ染料の生成に対す
る条件が炭酸ナトリウム溶液（過剰であること
が有利）の添加によつて最適化される、特許請
求の範囲第１〜４項の何れかに記載の方法。 ６ ちり試料の処理のために本発明で行なう方
法により規定量のグアニンを溶解し、次いで、
ちり試料から取得した抽出物に対して本発明に
述べた方法により呈色反応を行なう、ことによ
つて取得した検定曲線を使用して測定結果を評
価する、特許請求の範囲第１〜５項の何れかに
記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3430896.2 | 1984-08-22 | ||
| DE19843430896 DE3430896A1 (de) | 1984-08-22 | 1984-08-22 | Verfahren zum nachweis von allergenhaltigem hausstaub |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6159261A JPS6159261A (ja) | 1986-03-26 |
| JPH0464591B2 true JPH0464591B2 (ja) | 1992-10-15 |
Family
ID=6243637
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60181928A Granted JPS6159261A (ja) | 1984-08-22 | 1985-08-21 | アレルゲン含有室内塵の検出方法 |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0174448B1 (ja) |
| JP (1) | JPS6159261A (ja) |
| AT (1) | ATE41059T1 (ja) |
| AU (1) | AU584916B2 (ja) |
| CA (1) | CA1256006A (ja) |
| DE (1) | DE3430896A1 (ja) |
| DK (1) | DK377785A (ja) |
| ES (1) | ES8700757A2 (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE4233565A1 (de) * | 1992-09-30 | 1993-06-17 | Crabiell Peter | Analyse- und reduzierungsverfahren von allergenen und deren ursachen |
| GB9913487D0 (en) * | 1999-06-11 | 1999-08-11 | Pirzad Ramin | Dust mite detection |
| DE10327327A1 (de) * | 2003-06-16 | 2005-01-27 | Hofmann, Frieder, Dipl.-Biol. | Verfahren zum Aufbereiten einer aus Partikeln bestehenden Probe |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2502786B1 (fr) * | 1981-03-24 | 1985-06-21 | Stallergenes Laboratoire | Procede de fixation d'antigenes et d'anticorps sur support de polysaccharides, et utilisation du produit ainsi obtenu pour les dosages immunologiques |
| DE3404821A1 (de) * | 1984-02-10 | 1985-08-14 | Werner & Mertz Gmbh, 6500 Mainz | Verfahren zum nachweis von allergenhaltigem hausstaub |
| DE3344087C1 (de) * | 1983-12-06 | 1985-04-11 | Werner & Mertz Gmbh, 6500 Mainz | Verfahren zum Nachweis von allergenhaltigem Hausstaub |
| JPS6435293A (en) * | 1987-07-30 | 1989-02-06 | Nippon Butsuri Tanko Kk | Wave motion generating method and device therefor |
-
1984
- 1984-08-22 DE DE19843430896 patent/DE3430896A1/de active Granted
-
1985
- 1985-06-19 AT AT85107570T patent/ATE41059T1/de not_active IP Right Cessation
- 1985-06-19 EP EP85107570A patent/EP0174448B1/de not_active Expired
- 1985-08-20 AU AU46477/85A patent/AU584916B2/en not_active Expired
- 1985-08-20 DK DK377785A patent/DK377785A/da not_active Application Discontinuation
- 1985-08-21 JP JP60181928A patent/JPS6159261A/ja active Granted
- 1985-08-21 ES ES546303A patent/ES8700757A2/es not_active Expired
- 1985-08-21 CA CA000489187A patent/CA1256006A/en not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA1256006A (en) | 1989-06-20 |
| DK377785A (da) | 1986-02-23 |
| AU4647785A (en) | 1986-02-27 |
| DK377785D0 (da) | 1985-08-20 |
| EP0174448A2 (de) | 1986-03-19 |
| AU584916B2 (en) | 1989-06-08 |
| EP0174448A3 (en) | 1986-03-26 |
| JPS6159261A (ja) | 1986-03-26 |
| ATE41059T1 (de) | 1989-03-15 |
| DE3430896A1 (de) | 1986-03-06 |
| ES546303A0 (es) | 1986-10-16 |
| ES8700757A2 (es) | 1986-10-16 |
| EP0174448B1 (de) | 1989-03-01 |
| DE3430896C2 (ja) | 1989-05-18 |
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