【発明の詳細な説明】[Detailed description of the invention]
本発明は、構造式〔〕
で表されるチクセツサポニンを主成分とする血
液賦活作用を有する補気薬である。
補気薬とは、例えば、「現代医療と漢方薬」（株
式会社医薬ジヤーナル社、1989年10月16日発行）
第90〜91頁に示されるように、漢方では主として
各系統的器官の生理的な機能が不十分な状態を治
療する薬物で、とくに消化器系と呼吸器系の機能
を促進し、体力を増強するものである。これはこ
の薬物が漢方における生体の恒常性を維持する三
要素（気、血、水）のうち、気の不足するとき、
その補強・増加を司る働きを有するためである。
そして、「症例から学ぶ和漢診療学」（株式会社医
学書院、1990年10月１日発行）第５〜６頁の図４
から前記三要素のうち、気が不足するとき、血の
生成が少なくなつて気を補うことになるというこ
とができ、補気作用がマウス切断尾部からの出血
量の減少により計測できることを知見した。この
薬理実験を指標として補気作用を有する物質を検
索し、ウコギ科のチクセツニンジン（Panax
japonicus C.A.Meyer）より得た上記式〔〕で
表されるチクセツサポニンに補気作用のあるこ
とを見い出し、チクセツサポニンが血液賦活作
用を有する補気薬であることを立証し、本発明を
完成した。
本発明の補気薬の主成分であるチクセツサポニ
ンは、例えば圧司らの方法〔薬学雑誌88，325
−329（1968）〕により得ることができる。すなわ
ち、チクセツニンジンの根茎を粉砕し、50％メタ
ノール含有水で温時抽出し抽出液を濃縮し、濃縮
エキスを水に溶解した水溶液をｎ−ブタノールに
て抽出する。このｎ−ブタノール抽出液を濃縮し
て得たエキスをｎ−ブタノール・酢酸エチルエス
テル・水（２：１：２）を混合して得られる上層
溶媒、下層溶媒を用いて、向流分配を行い、粗チ
クセツサポニンを得る。次いでこの粗チクセツ
サポニンをシリカゲルを用いたカラムクロマト
グラフイーに付し、クロロホルム・メタノール・
水（13：７：２）を混合して得られる下層溶媒で
溶出することにより、約0.9％の収率で無色プリ
ズム晶のチクセツサポニンを得ることができ
る。
このチクセツサポニンの製造の具体例を示す
と次の如くである。
乾燥したチクセツニンジンの根茎の粉砕物1.0
Kgを10の50％メタノール〔メタノール・水
（１：１）混合液〕で温時３回抽出し、この混合
溶媒を合せて減圧濃縮し、350ｇのエキスを得る。
このエキスを水４に溶解し、分液ロート中で
800mlのｎ−ブタノールで５回抽出を行い、この
ｎ−ブタノール抽出液を合せてｎ−ブタノールを
減圧濃縮し、約134ｇのエキスを得る。このエキ
スをｎ−ブタノール・酢酸エチルエステル・水
（２：１：２）を混合して得られる上層溶媒、下
層溶媒各１を用いて向流分配を行い、粗チクセ
ツサポニン分画を得、溶剤を留去して約55ｇの
粗チクセツサポニン分画を得る。
次に粗チクセツサポニン分画をシリカゲル
600ｇを用いたカラムクロマトグラフイーに付し、
クロロホルム・メタノール・水（13：７：２）を
混合して得られる下層溶媒で展開して100mlづつ
分取し、クロロホルム・メタノール・水（13：
７：２）の溶出部のうち薄層クロマトグラフイー
により単一成分とわかつた溶出部から溶剤を留去
し、残留物をエタノールで再結晶することにより
約0.9％の収率で無色プリズム晶のチクセツサポ
ニンを得た。
上記のようにして得られたチクセツサポニン
の性状は次の通りであり、文献値〔N.Kondo，
K.Aoki，H.Ogawa，R.Kasai and J.Shoji，
Chem.Pharm.Bull.（Tokyo），18，1558−1562
（1970）〕と一致した。
チクセツサポニン
色、性状 無色プリズム晶
融 点 196−197゜
比施光度 〔α〕19 D＋1.5゜（Ｃ＝2.00、メタノー
ル）
赤外線吸収スペクトル（νNujol naxcm-1）
3300−3400（OH）、1160（Ｃ−Ｏ）
元素分析値（C47H80O17・2H2O）
計算値 Ｃ：59.24 Ｈ：8.80
実測値 Ｃ：59.01 Ｈ：9.04
次にチクセツサポニンが出血量減少作用を有
することについて実験例を挙げて説明する。
ddY系雄性マウス（５週齢、体重約20ｇ）５匹
づつ構成された群を用い、各マウスにチクセツサ
ポニン生理食塩水溶液を静脈内、腹腔内および
経口的に投与した。投与後（静脈内投与、腹腔内
投与では10分後、経口投与では30分後）、マウス
の尾の先端より２cmの所をカミソリにて切断し、
切断口を3.8％クエン酸ナトリウム水溶液６ml中
に挿入して、出血し始めてから１分間採血する。
次いでクイツクライザー（東亜医療電子、0.5％
KCN含有）で溶血させて、その流出した血液量
を吸光光度計（波長：540nm；対照液：3.8％ク
エン酸ナトリウム水溶液）で測定する。また、対
照群のマウスには生理食塩水を投与した。
そして、次式により出血量減少率を求めた。
出血量減少率（％）
＝100−
チクセツサポニン投与群の吸光度の平均／対照群の吸
光度の平均
×100
その結果を第１表に示す。
The present invention has the structural formula [] It is a supplementary air medicine with blood stimulant effect whose main ingredient is tikusetsusaponin. For example, "Modern Medicine and Chinese Herbal Medicine" (Iyaku Journal Co., Ltd., published October 16, 1989)
As shown on pages 90-91, in Chinese medicine, it is a drug that mainly treats conditions where the physiological functions of various systematic organs are insufficient, and in particular promotes the functions of the digestive system and respiratory system, and improves physical strength. It is something that strengthens. This drug is used in Chinese medicine when there is a lack of Qi, one of the three elements (qi, blood, water) that maintain the homeostasis of the body.
This is because it has the function of reinforcing and increasing it.
Figure 4 on pages 5-6 of "Learning Japanese and Chinese Clinical Practice from Cases" (Igaku Shoin Co., Ltd., published October 1, 1990)
From this, it can be said that when Qi is insufficient among the three elements, blood production decreases to compensate for Qi, and it was found that the replenishment effect can be measured by the decrease in the amount of bleeding from the severed tail of a mouse. . Using this pharmacological experiment as an indicator, we searched for substances that have a supplementary effect, and searched for substances that have a supplementary effect.
They discovered that the tikusetusaponin expressed by the above formula [] obtained from Japonicus CAMeyer) has a supplementing action, and established that the tikusetusaponin is a supplementary medicine that has a blood-activating effect, thus completing the present invention. did. Chikusetsusaponin, which is the main component of the supplementary medicine of the present invention, can be prepared, for example, by the method of Souji et al. [Yakugaku Zasshi 88 , 325
-329 (1968)]. That is, the rhizomes of ginseng are crushed, extracted with hot water containing 50% methanol, the extract is concentrated, and an aqueous solution of the concentrated extract dissolved in water is extracted with n-butanol. The extract obtained by concentrating this n-butanol extract was subjected to countercurrent distribution using an upper layer solvent and a lower layer solvent obtained by mixing n-butanol, ethyl acetate, and water (2:1:2). , to obtain crude saponin. Next, this crude saponin was subjected to column chromatography using silica gel, and chloroform, methanol,
By eluting with a lower solvent obtained by mixing water (13:7:2), colorless prismatic saponin can be obtained in a yield of about 0.9%. A specific example of the production of this saponin is as follows. Ground dried ginseng rhizome 1.0
Kg is extracted three times with 10% 50% methanol [methanol/water (1:1) mixture] while hot, and the mixed solvents are combined and concentrated under reduced pressure to obtain 350 g of extract.
Dissolve this extract in 4 ml of water and place in a separatory funnel.
Extraction is performed five times with 800 ml of n-butanol, and the n-butanol extracts are combined and the n-butanol is concentrated under reduced pressure to obtain about 134 g of extract. This extract was subjected to countercurrent distribution using one portion each of an upper layer solvent and a lower layer solvent obtained by mixing n-butanol, ethyl acetate, and water (2:1:2) to obtain a crude saponin fraction. The solvent is distilled off to obtain about 55 g of crude saponin fraction. Next, transfer the crude saponin fraction to silica gel.
Subjected to column chromatography using 600g,
Develop with the lower layer solvent obtained by mixing chloroform, methanol, water (13:7:2), collect 100 ml each, and add chloroform, methanol, water (13:7:2).
7:2), which was found to be a single component by thin layer chromatography, was distilled off from the solvent, and the residue was recrystallized with ethanol to produce colorless prism crystals with a yield of about 0.9%. of saponin was obtained. The properties of the Chikusetsusaponin obtained as above are as follows, and the literature values [N.Kondo,
K. Aoki, H. Ogawa, R. Kasai and J. Shoji,
Chem.Pharm.Bull. (Tokyo), 18 , 1558−1562
(1970)]. Saponin Color, properties Colorless prismatic crystals Melting point 196-197゜ Specific light intensity [α] 19 D +1.5゜ (C = 2.00, methanol) Infrared absorption spectrum (ν Nujol nax cm -1 ) 3300-3400 (OH ), 1160 (C-O) Elemental analysis value (C 47 H 80 O 17・2H 2 O) Calculated value C: 59.24 H: 8.80 Actual value C: 59.01 H: 9.04 Next, tikusetusaponin has a bleeding reduction effect. This will be explained using an experimental example. Groups of 5 male ddY mice (5 weeks old, weighing approximately 20 g) were used, and a physiological saline solution of saline saponin was administered to each mouse intravenously, intraperitoneally, and orally. After administration (10 minutes after intravenous or intraperitoneal administration, 30 minutes after oral administration), cut the mouse's tail 2 cm from the tip with a razor.
Insert the cut end into 6 ml of 3.8% sodium citrate aqueous solution and collect blood for 1 minute after bleeding begins.
Next is Quits Clyzer (Toa Medical Electronics, 0.5%
(contains KCN) and measure the amount of blood flowing out using an absorptiometer (wavelength: 540 nm; control solution: 3.8% sodium citrate aqueous solution). In addition, mice in the control group were administered physiological saline. Then, the bleeding reduction rate was determined using the following formula. Bleeding reduction rate (%) = 100−
Average absorbance of saponin administration group/average absorbance of control group x 100 The results are shown in Table 1.
【表】
第１表に示すとおりチクセツサポニンは明ら
かに出血量減少作用を有することが認められた。
次に、チクセツサポニンの急性毒性について
実験例を示して説明する。
チクセツサポニンの生理食塩水溶液をマウス
に静脈内、腹腔内および経口的にそれぞれ投与
し、72時間後の生死の判定によるLD50値（50％
致死量）を算出した。計算にはアツプ・アンド・
ダウン（Up and down）法〔1969年南山堂発
行、高木、小沢共編「薬物学実験」第204〜205ペ
ージ参照〕を用いた。前記アツプアンドダウン法
とは、あらかじめ目的薬剤のLD50量を中心とし
てその用量を上下に等比にとつておき、ある用量
を一匹の動物に与えて、死亡したら用量を下げ、
生存したら用量を挙げるというように順次上げ、
下げ（アツプアンドダウン）して実験を進める手
法である。その結果は第２表に示す如くである。[Table] As shown in Table 1, it was found that saponin clearly has a bleeding reduction effect. Next, the acute toxicity of saponin will be explained using experimental examples. A physiological saline solution of saponin was administered to mice intravenously, intraperitoneally, and orally, and the LD 50 value (50%
(lethal dose) was calculated. Calculations include up and...
The up and down method [see pages 204-205 of "Pharmacological Experiments" co-edited by Takagi and Ozawa, published by Nanzando, 1969] was used. The above-mentioned up-and-down method is based on the LD 50 amount of the target drug, and the doses are set in equal proportions above and below the target drug, a certain dose is given to one animal, and when the animal dies, the dose is lowered.
If the patient survives, increase the dose gradually.
This is a method of proceeding with the experiment by going up and down. The results are shown in Table 2.
【表】
第２表に示すLD50値と出血量減少率を比較し
た場合、チクセツサポニンの出血量減少率の有
効量に較べ急性毒性は弱いことが認められた。即
ち、チクセツサポニンは静脈内投与ではLD50
値の20分の１以下の投与量（15mg）で、腹腔内投
与ではLD50値の80分の１以下の投与量（15mg）
で、経口投与でもLD50値の100分の１以下の投与
量（50mg）で出血量減少作用を発現し、このチク
セツサポニンの有効量とLD50値との間に差が
あることから、チクセツサポニンはすぐれた出
血量減少作用を有し、出血量減少剤としても有効
であることが認められた。
次に出血量減少作用から考えて、チクセツサポ
ニンの有効投与量は大量出血時の緊急的な血液
賦活においては、静脈注射では、１回量15〜25
mg、腹腔内投与では１回量15〜40mg、経口投与で
は50〜100mgで、通常の血液賦活を期待する場合
は、さらに少量でたりる。また症状に合せて１日
３回までの適用が適当と認められる。
本発明の血液賦活作用を有する補気薬の臨床上
の応用としては、出血量減少実験及び中国医学の
理念に基づき次の各項がある。
(1) 大手術、事故等による大量出血に際して、緊
急に血液の機能を高め、危険状態を脱出する。
適用の方法としては、単独投与、輸液との併用
がある。
(2) 疲労時、急速に疲労回復をはかる。または、
労働、運動等における疲労の防止。
(3) 長期連用により、リユーマチ、神経痛等の難
治疾患の改善に用いる。
(4) その他一般の健康保持。
チクセツサポニンは、製剤に用いられる適当
な溶剤、賦形剤、補助剤などを使用して、製剤製
造の常法に従つて液剤、注射剤、散剤、顆粒剤、
錠剤、カプセル剤などの製剤をつくることができ
る。
処方にあたつては、チクセツサポニンを単独
で、もしくは適宜組合せて用いることができ、ま
た他の医療活性成分との配合剤としてもよい。
経口投与のために少くとも一種の賦形剤、例え
ばデンプン、乳糖、白糖、マンニツト、カルボキ
シメチルセルロース等を用いて錠剤、丸剤、カプ
セル剤、散剤、顆粒剤等に処方できる。
この種の製剤には、適宜前記賦形剤の他に、例
えばステアリン酸マグネシウム、ラウリン硫酸ナ
トリウム、タルク等の滑沢剤、デキストリン、結
晶セルロース、ポリビニルピロリドン、アラビア
ゴム、トウモロコシデンプン、ゼラチン等の結合
剤、バレイシヨデンプン、カルボキシメチルセル
ロース等の崩壊剤を使用することができる。また
懸濁剤、エマルジヨン剤、シロツプ剤、エリキシ
ル剤として投与することができ、これら剤型に
は、矯味矯臭剤、着色剤を含有してもよい。
非経口用製剤として、適当な基剤と混和してク
リーム、軟膏剤、パツプ剤、または坐剤とするこ
とができる。
非経口用製剤としては、注射剤のための滅菌さ
れた水性、非水性の溶液、又は懸濁液とすること
ができる。
希釈剤として一般に注射用蒸留水、生理食塩
水、デキストロース水溶液、注射用植物油、プロ
ピレングリコール、ポリエチレングリコール等を
用いることができる。さらに必要に応じて、適宜
等張化剤、溶解補助剤、安定剤、防腐剤、無痛化
剤等を加えてもよい。また、この種の剤型の場
合、滅菌された注射用媒体に溶解することが望ま
しい。
次に実施例を示して本発明をさらに具体的に説
明するが、本発明はこれによつて制限されるもの
ではない。
実施例 １
チクセツサポニン25ｇを60℃に加温した滅菌
生理食塩水５に溶解し、無菌的にバイアルにチ
クセツサポニンが25mg含有するように５mlづつ
分配し、密封して注射剤を製造した。
本注射剤は成人患者１人当り症状に応じて１回
３〜５mlを、１日３回静脈内投与する。
実施例 ２
チクセツサポニン10ｇを細粉とし、これを乳
糖89ｇおよびステアリン酸マグネシウム１ｇと混
合し、この混合物を単発式スラツグ打錠機にて打
錠して直径20mm、重量約2.3ｇのスラツグ錠を作
り、これをオシレーターにて破砕し、整粒し、篩
別して20〜50メツシユの粒子の良好な顆粒剤を得
た。
この顆粒剤は、症状に合せて１回量150〜400
（チクセツサポニンとして15〜40mgに相当）と
して１日に３回服用する。
実施例 ３
チクセツサポニン20ｇを無水ケイ酸20ｇと混
合し、これを微結晶セルロース10ｇ、ステアリン
酸マグネシウム0.5ｇ、乳糖49.5ｇを加え混合し、
この混合物を単発式打錠機にて打錠して径７mm、
重量125mgの錠剤を製造した。
本錠剤１錠は、チクセツサポニン25mgを含有
する。本錠剤は１回２〜４錠、１日３回服用す
る。
実施例 ４
チクセツサポニン100mgを細末とし、No.３の
ゼラチンカプセルに充填してカプセル剤を得た。
本カプセル剤は症状に合せて１回１カプセル、
１日３回まで服用する。[Table] When comparing the LD 50 value shown in Table 2 with the bleeding reduction rate, it was found that the acute toxicity was weaker than the effective dose of tikusetsusaponin for the bleeding reduction rate. That is, when administered intravenously, tikusetsusaponin has a LD 50
The dose (15mg) is less than 1/20th of the LD50 value, and the dose (15mg) is less than 1/80th of the LD50 value when administered intraperitoneally.
Even when administered orally, a bleeding reduction effect occurs at a dose (50 mg) less than 1/100 of the LD 50 value, and there is a difference between the effective dose of this saponin and the LD 50 value. Thiksetsusaponin has an excellent effect of reducing bleeding volume and was also found to be effective as a bleeding volume reducing agent. Next, considering the effect of reducing bleeding volume, the effective dose of tikusetsusaponin is 15 to 25 mg per dose for intravenous injection for emergency blood activation in the case of massive bleeding.
mg, a single dose of 15 to 40 mg for intraperitoneal administration, 50 to 100 mg for oral administration, and even smaller amounts are required if normal blood activation is expected. It is also considered appropriate to apply up to three times a day depending on the symptoms. The clinical applications of the blood stimulant medicine of the present invention are as follows based on the bleeding reduction experiment and the philosophy of Chinese medicine. (1) Immediately improve blood function and escape from a dangerous situation in the event of massive bleeding due to major surgery, accident, etc.
Application methods include single administration and combination with infusion. (2) Rapidly recover from fatigue when fatigued. or
Preventing fatigue during work, exercise, etc. (3) Used for long-term use to improve intractable diseases such as rheumatoid arthritis and neuralgia. (4) Other general health maintenance. Thiksetsusaponin can be prepared into liquids, injections, powders, granules,
Preparations such as tablets and capsules can be made. When formulating, tikusetusaponin can be used alone or in appropriate combinations, or may be used in combination with other medically active ingredients. For oral administration, they can be formulated into tablets, pills, capsules, powders, granules, etc. using at least one excipient such as starch, lactose, sucrose, mannitrate, carboxymethyl cellulose, etc. In addition to the above-mentioned excipients, this type of preparation may contain lubricants such as magnesium stearate, sodium laurine sulfate, and talc, and binders such as dextrin, crystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, gum arabic, corn starch, and gelatin. A disintegrating agent such as an agent, potato starch, carboxymethyl cellulose, etc. can be used. It can also be administered as a suspension, emulsion, syrup, or elixir, and these dosage forms may contain flavoring agents and coloring agents. As a parenteral preparation, it can be mixed with a suitable base to form a cream, ointment, poultice, or suppository. Parenteral preparations can be sterile aqueous or non-aqueous solutions or suspensions for injection. As a diluent, distilled water for injection, physiological saline, aqueous dextrose solution, vegetable oil for injection, propylene glycol, polyethylene glycol, etc. can generally be used. Furthermore, if necessary, an isotonizing agent, a solubilizing agent, a stabilizer, a preservative, a soothing agent, etc. may be added as appropriate. Moreover, in the case of this type of dosage form, it is desirable to dissolve it in a sterile injection medium. EXAMPLES Next, the present invention will be explained in more detail with reference to Examples, but the present invention is not limited thereto. Example 1 25 g of Chikusetsaponin was dissolved in sterile physiological saline 5 heated to 60°C, and 5 ml each containing 25mg of Chikusetsaponin was dispensed into vials aseptically and sealed to produce an injection. . This injection is administered intravenously to each adult patient at a dose of 3 to 5 ml, three times a day, depending on the symptoms. Example 2 10 g of saponin was made into a fine powder, mixed with 89 g of lactose and 1 g of magnesium stearate, and this mixture was tableted using a single-shot slug tablet machine to form slug tablets with a diameter of 20 mm and a weight of about 2.3 g. This was crushed with an oscillator, sized, and sieved to obtain good granules of 20 to 50 mesh particles. This granule has a dosage of 150 to 400 depending on the symptoms.
(equivalent to 15 to 40 mg of saponin) taken three times a day. Example 3 20g of saponin was mixed with 20g of silicic anhydride, and 10g of microcrystalline cellulose, 0.5g of magnesium stearate, and 49.5g of lactose were added and mixed.
This mixture was compressed into tablets with a diameter of 7 mm using a single-shot tablet machine.
Tablets weighing 125 mg were produced. One tablet of this tablet contains 25 mg of tikusetusaponin. This tablet is taken 2 to 4 tablets at a time, three times a day. Example 4 100 mg of saponin was pulverized and filled into No. 3 gelatin capsules to obtain capsules. This capsule is taken one capsule at a time, depending on the symptoms.
Take up to 3 times a day.