JPH0643306B2

JPH0643306B2 - 癌細胞転移抑制剤

Info

Publication number: JPH0643306B2
Application number: JP3109588A
Authority: JP
Inventors: 勉鶴岡; 春海福安; 治夫山本; 暁中林; 崇士鶴岡; 重治井上; 信一近藤
Original assignee: Meiji Seika Kaisha Ltd
Current assignee: Meiji Seika Kaisha Ltd
Priority date: 1988-02-12
Filing date: 1988-02-12
Publication date: 1994-06-08
Anticipated expiration: 2009-06-08
Also published as: JPH01207235A

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明はＮ−置換−１−デオキシノジリマイシン誘導体
群の癌細胞抗転移作用による癌細胞転移抑制剤に関す
る。

〔従来の技術〕

従来の制癌剤は悪性細胞を活性物質の有する殺細胞性或
いは人の免疫系を介して死滅させる活性物質を成分とす
る薬剤が主体であった。この種の薬剤は現在多く研究さ
れ、臨床に用いられているものも有る。しかし癌の治療
に対して未だ充分なものとは言えない。また、固型癌に
関しては外科手術或いは放射線による治療も数多く行わ
れている。これらの現行の種々の療法の有効性は癌細胞
の転移を抑制することで、更に高められる事が期待され
ているが、抗転移を作用の主体とする物質は数少なく、
臨床で用いられているものは皆無である。

〔発明が解決しようとする課題〕

本発明は癌の治療を有効、適切に行うに使用する癌細胞
の転移を顕著に抑制する物質を見出し、これを有効成分
とする癌細胞転移抑制剤を提供することを目的とするも
のである。

〔課題を解決するための手段〕

癌の転移は（イ）癌細胞の原発巣からの遊離、（ロ）脈
管内への播種、（ハ）毛細血管での停滞，栓塞等を経て
標的組織内へ到達し増殖を開始するプロセスである。

本発明者らは、この癌の転移の抑制作用を評価する実験
評価系を組み、この実験評価系により下記一般式（１）
で示されるＮ−置換−１−デオキシノジリマイシン誘導
体が極めて優れた癌細胞転移抑制作用を有することを見
出し本発明を完成した。

本発明は一般式（Ｉ）〔式中Ａは二重結合を有するか有しない炭素数３〜５の
直鎖状又は分枝鎖状の炭化水素基を表し、Ｒ_１，Ｒ_２は
同一又は異なる水素原子、低級アルキル基、又はハロゲ
ン原子を示す〕で表されるＮ−置換−１−デオキシノジリマイシン誘導
体を有効成分とする癌細胞転移抑制剤である。

本発明の有効成分である一般式（Ｉ）で表されるＮ−置
換−１−デオキシノジリマイシンは１−デオキシノジリ
マイシンを原料としジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中
で炭酸水素ナトリウム及びアラルキルハライドを反応さ
せ、反応液から単離して得ることができる（特公昭55-9
051号公報、特公昭55-47655号公報参照）。尚これらの
原料である１−デオキシノジリマイシンは本発明者らに
よって、放射菌の代謝産物であるノジリマイシン（５−
アミノ−５−デオキシ−Ｄ−グルコピラノース）（特公
昭43-760号公報参照）の還元反応により得られる公知の
ものである（Tetrahedron,24巻，2125〜2144頁，1968
年）。

そして、このＮ−置換−１−デオキシノジリマイシン誘
導体は血糖上昇抑制作用を有していることは知られてい
る（特公昭55-9051号公報及び特公昭55-47655号公報参
照）。しかしこの物質が癌細胞転移抑制作用を有するこ
とは知られていない。

本発明の有効成分であるＮ−置換−１−デオキシノジリ
マイシン誘導体としては次の化合物が挙げられる。ただ
し、これらに限定されるものではない。

Ｎ−（３−フェニルプロピル）−１−デオキシノジリマ
イシン、Ｎ−（４−フェニルブチル）−１−デオキシノ
ジリマイシン、Ｎ−（３−フェニルブチル）−１−デオ
キシノジリマイシン、Ｎ−（５−フェニルペンチル）−
１−デオキシノジリマイシン、Ｎ−（３−フェニル−２
−プロペニル）−１−デオキシノジリマイシン、Ｎ−
（４−フェニル−３−ブテニル）−１−デオキシノジリ
マイシン、Ｎ−（３−メチル−３−フェニル−２−プロ
ペニル）−１−デオキシノジリマイシン、Ｎ−（３−ｍ
−メチルフェニル−２−プロペニル）−１−デオキシノ
ジリマイシン、Ｎ−（３−ｐ−メチルフェニル−２−プ
ロペニル）−１−デオキシノジリマイシン、Ｎ−（３−
ｏ−クロルフェニル−２−プロペニル）−１−デオキシ
ノジリマイシン、Ｎ−（３−ｐ−クロルフェニル−３−
メチル−２−プロペニル）−１−デオキシノジリマイシ
ン、Ｎ−（３−ｐ−メチルフェニル−３−メチル−２−
プロペニル）−１−デオキシノジリマイシン、Ｎ−（３
−ｐ−ブロモフェニル−２−プロペニル）−１−デオキ
シノジリマイシン。

本発明の癌細胞転移抑制剤は上記のＮ−置換−１−デオ
キシノジリマイシンを含有する経口、非経口製剤として
臨床的に静脈、動脈、皮膚、皮下、皮内、直腸及び筋肉
内に経由、又は経口にて投与される。また腫瘍に直接投
与することにより、より強い効果が期待できる。投与量
は投与形態、剤型或いは患者の年令、体重、病態により
異なるが、概ね１日100〜3000mgを１回又は数回投与す
る。

非経口製剤としては無菌の水性又は非水性溶液剤或いは
乳濁剤があげられる。非水性の溶液剤又は乳濁剤の基剤
としてはプロピレングリコール、ポリエチレングリコー
ル、グリセリン、オリーブ油、とうもろこし油、オレイ
ン酸エチル等があげられる。また、経口製剤としてはカ
プセル剤、錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤等があげられ
る。これらの製剤には、賦形剤として澱粉、乳糖、マン
ニット、エチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチ
ルセルロース等が配合され、滑沢剤としてステアリン酸
マグネシウム又はステアリン酸カルシウムを添加する。
結合剤としてはゼラチン、アラビアゴム、セルロースエ
ステル、ポリビニルピロリドン等が用いられる。

なお、本発明の有効成分であるＮ−置換−１−デオキシ
ノジリマイシン誘導体であるＮ−（３−フェニルプロピ
ル）−１−デオキシノジリマイシン及びＮ−（３−フェ
ニル−２−プロペニル）−１−デオキシノジリマイシン
のマウスでの急性毒性（ＬＤ_５０値）は両方ともip投与
で0.5g/kg以上である。

次に本発明の製剤例並びに効果について説明する。

〔実施例１〕Ｎ−（３−ｐ−ブロモフェニル−２−プロペニル）−１
−デオキシノジリマイシン 50mg 乳糖 130mg ジャガイモデンプン 70mg ポリビニルピロリドン 10mg ステアリン酸マグネシウム 2.5mg 乳糖及びジャガイモデンプンを混合し、これにポリビニ
ルピロリドンの20％エタノール溶液を加え均一に湿潤さ
せ、１mmの網目の篩を通し、45℃にて乾燥させ、再度１
mmの網目の篩を通した。こうして得た顆粒をステアリン
酸マグネシウムと混和し錠剤に成型した。

〔実施例２〕Ｎ−（５−フェニルペンチル）−１−デオキシノジリマ
イシンを約10μの粒子になるまでピンミルで粉砕した
後、その500mgを注射用バイアルに充填する。別にTween
80５mg及び日局精製ゼラチン10mgを注射用蒸留水５ｍ
に溶かし、溶解液とする。用時、先のバイアルに充填さ
れたＮ−（５−フェニルペンチル）−１−デオキシノジ
リマイシンに、この溶解液５ｍを加えよく振りまぜ懸
濁液とし、適当量を筋肉内投与する。

効果試験試験法マウスの腫瘍であるメラノーマＢ16株よりフィドラー(F
idler)の方法(Method in Cancer Research,15巻，399〜
439頁，1978年）を基にＢ16高転移株を選択し、使用し
た。

転移抑制作用の評価はキジマースダ(Kijima-Suda)らの
方法(Cancer Research，46巻，858〜862頁，1986年）を
基にして行った。

先ずＢ16高転移株を牛胎児血清を加えたダルベコ培地に
植え、一般式（Ｉ）で表されるＮ−置換−１−デオキシ
ノジリマイシンを加え、２〜４日間、５％ＣＯ_２の存在
下37℃で培養し、増殖した細胞をトリプシンとＥＤＴＡ
溶液で培養容器より剥がした。この細胞を平衡塩類溶液
で生細胞として１ｍ当たり１×10^６細胞になるように
懸濁した。

この懸濁液の0.1ｍをマウス尾静脈より移植し、14日
間飼育した後、開腹して肺を摘出し、肺表面及び内部に
形成されたＢ16高転移株のコロニーを計数し、薬剤処理
をしなかった対照と比較した。

試験例１Ｎ−（３−フェニルプロピル）−１−デオキ
シノジリマイシンの細胞障害性Ｂ16高転移株及びマウス由来の腫瘍細胞Ｌ929株を10％
牛胎児血清を加えたダルベコ培地で５％ＣＯ_２の存在下
37℃で培養した後、トリプシンとＥＤＴＡ溶液で細胞を
培養容器より剥がし、１ｍ当たりＢ16高転移株は１×
１０^４細胞，Ｌ929株は１×10^３細胞になるように上記
の培地に懸濁した。この懸濁液の150μをＮ−（３−
フェニルプロピル）−１−デオキシノジリマイシン或い
はアドリアマイシン（対照）溶液50μにそれぞれ加え
混合した。これをＢ16高転移株では３日間，Ｌ929株で
は４日間培養し、倒立顕微鏡下で生死を判定し、細胞障
害性を判定した。その結果は表１の通りであった。

以上の試験結果より明らかな通り、本発明の有効成分で
あるＮ−（３−フェニルプロピル）−１−デオキシノジ
リマイシンはＢ16高転移株及びＬ929株に対して100μｇ
／ｍという高濃度でも顕著な細胞障害性を示さなかっ
た。

試験例２Ｎ−（３−フェニルプロピル）−１−デオキ
シノジリマイシンの抗転移作用Ｂ16高転移株を10％牛胎児血清を加えたダルベコ培地に
植え、Ｎ−３−フェニルプロピル）−１−デオキシノジ
リマイシンを１ｍ当たり30,100,又は300μｇ加え、５
％ＣＯ_２の存在下37℃で３日間培養した。試験例１と同
様の方法で細胞を培養容器より剥がし、１ｍ当たり生
細胞が１×10^６細胞になるよう平衡塩類溶液に懸濁し、
その0.1ｍをＢＤＦ_１マウス（８週令、雄）の尾静脈
に投与して移植した。14日間飼育観察後、開腹して肺を
摘出し、肺表面及び内部に形成されたＢ16高転移株のコ
ロニーを計数した。その結果を表２に示した。

以上の試験結果より明らかな通り、本発明の有効成分で
あるＮ−（３−フェニルプロピル）−１−デオキシノジ
リマイシンは薬剤濃度を上げるのに従って肺に形成され
るコロニーの数は少なくなっており、肺への転移が強く
抑制されている。

試験例３Ｎ−（３−フェニル−２−プロペニル）−１
−デオキシノジリマイシン及びＮ−（３−ｐ−クロルフ
ェニル−３−メチル−２−プロペニル）−１−デオキシ
ノジリマイシンの抗転移作用試験例２においてＮ−（３−フェニルプロピル）−１−
デオキシノジリマイシンの代わりに、Ｎ−（３−フェニ
ル−２−プロペニル）−１−デオキシノジリマイシン、
Ｎ−（３−ｐ−クロルフェニル−３−メチル−２−プロ
ペニル）−１−デオキシノジリマイシンを使用して、試
験例２と同様の方法で抗転移作用を調べた。ただし、本
例ではＢ16高転移株をマウス当たり2.5×10^５細胞づつ
各群３匹づつ移植した。その結果は表３の通りであっ
た。

以上の試験結果より明らかな通り、本発明の有効成分で
あるＮ−（３−フェニル−２−プロペニル）−１−デオ
キシノジリマイシン、Ｎ−（３−ｐ−クロルフェニル−
３−メチル−２−プロペニル）−１−デオキシノジリマ
イシンによりＢ16高転移株の肺への転移が著しく抑制さ
れていた。

〔発明の効果〕

本発明の癌細胞転移抑制剤は癌細胞の拡散，転移を極め
て顕著に抑制し、かつ細胞障害性が非常に少ない薬剤で
ある。従って、既存の制癌剤と同時に投与して、また、
外科手術療法或いは放射線療法時に使用することで制癌
効果を著しく高め得ることができる極めて有用な薬剤で
ある。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者中林暁神奈川県横浜市港北区師岡町760番地明治製菓株式会社薬品研究所内 (72)発明者鶴岡崇士神奈川県横浜市港北区師岡町760番地明治製菓株式会社薬品研究所内 (72)発明者井上重治神奈川県横浜市港北区師岡町760番地明治製菓株式会社薬品研究所内 (72)発明者近藤信一神奈川県横浜市港北区師岡町760番地明治製菓株式会社薬品研究所内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式〔式中Ａは二重結合を有するか有しない炭素数３〜５の
直鎖状または分枝鎖状の炭化水素基を表し、Ｒ_１，Ｒ_２
は同一又は異なる水素原子、低級アルキル基、又はハロ
ゲン原子を示す〕で表されるＮ−置換−１−デオキシノジリマイシン誘導
体を有効成分とする癌細胞転移抑制剤。