Deprecated: The each() function is deprecated. This message will be suppressed on further calls in /home/zhenxiangba/zhenxiangba.com/public_html/phproxy-improved-master/index.php on line 456
JPH0653065B2 - β―フェネチルアルコール、酢酸β―フェネチル高生産性酵母菌株とその育種法及びそれを用いた酒類の製造法 - Google Patents
[go: Go Back, main page]

JPH0653065B2 - β―フェネチルアルコール、酢酸β―フェネチル高生産性酵母菌株とその育種法及びそれを用いた酒類の製造法 - Google Patents

β―フェネチルアルコール、酢酸β―フェネチル高生産性酵母菌株とその育種法及びそれを用いた酒類の製造法

Info

Publication number
JPH0653065B2
JPH0653065B2 JP1230382A JP23038289A JPH0653065B2 JP H0653065 B2 JPH0653065 B2 JP H0653065B2 JP 1230382 A JP1230382 A JP 1230382A JP 23038289 A JP23038289 A JP 23038289A JP H0653065 B2 JPH0653065 B2 JP H0653065B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
phenethyl
yeast
strain
phenethyl alcohol
alcohol
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
JP1230382A
Other languages
English (en)
Other versions
JPH0394670A (ja
Inventor
修 秋田
孝之 小幡
昌道 原
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
KOKUZEICHO JAPAN
Original Assignee
KOKUZEICHO JAPAN
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by KOKUZEICHO JAPAN filed Critical KOKUZEICHO JAPAN
Priority to JP1230382A priority Critical patent/JPH0653065B2/ja
Publication of JPH0394670A publication Critical patent/JPH0394670A/ja
Publication of JPH0653065B2 publication Critical patent/JPH0653065B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Alcoholic Beverages (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 (産業上の利用分野) 本発明は、β−フェネチルアルコールと酢酸β−フェネ
チルを同時に高生産する酵母菌の育種法及び分離した酵
母菌株、さらにはその酵母菌を用いた香気に特徴を有す
酒類の製造方法に関するものである。
香気成分は酒類の品質を決定する重要な要因の一つであ
る。香気成分は酒類醸造に使用される酵母菌サッカロマ
イセス(Saccharomyces)属セレビシエ(cerevisiae)によ
り発酵期間中に主に生成される。
酒類の需要開発にあたっては特徴ある品質の製品の開発
が望まれており、香気に特徴ある製品もその一つであ
る。バラ様の甘い香りを有すβ−フェネチルアルコール
と酢酸β−フェネチルの弁別閾値はビールにおいてそれ
ぞれ125ppmおよび3ppmとされている(橋本:香料No.11
2,p23(1975))。一方酒類中のβ−フェネチルアルコー
ルと酢酸β−フェネチル含量は、ビールで10〜100ppmと
3〜5ppm、清酒で20〜70ppmと5〜8ppm、ワインで10〜7
5ppmと1〜2ppm、焼酎で9〜27ppmと2〜28ppm、ウィス
キー類で15〜30ppmと1〜5ppmであり(新版醸造成分一
覧 日本醸造協会編(1977))、弁別閾値以下またはそれ
に近い量である。従ってこれらの香気を特徴とする製品
を得るためには、現在の酵母の生成能力をさらに高めた
酵母菌を使用する必要がある。以上のことから、β−フ
ェネチルアルコールと酢酸β−フェネチルを高生産する
酵母菌の育種は、酒類の製造分野において新製品の開発
への寄与が期待されるものである。
(従来の技術) これまでに、β−フェネチルアルコールと酢酸β−フェ
ネチルを高生産する酵母菌の分離を目的とした育種例は
ない。
(発明が解決しようとする問題点と解決するための手
段) 本発明は上記実情に鑑み、新たに醸造酵母からβ−フェ
ネチルアルコールと酢酸β−フェネチルを高生産する酵
母菌の分離育種をめざしたものであり、鋭意実験と研究
を重ねた結果従来の酵母に比べ著量のβ−フェネチルア
ルコールと酢酸β−フェネチルを生産する酵母菌の分離
方法を開発し、この方法により酵母サッカロマイセス(S
accharomyces)属セレビシエ(cerevisiae)Kyokai7-FPAR1
8(微工研菌寄第10868号)を育種したものである。さら
に育種酵母の使用により香気に優れた特徴を持つ酒類の
製造に成功したものである。
酵母によるβ−フェネチルアルコールを含む高級アルコ
ール類の生成はアミノ酸の代謝と密接な関係にあり、酵
母に取り込まれたアミノ酸が脱アミノさらに脱炭酸後還
元されて炭素数の一つ少ないアルコールとなる系と、ア
ミノ酸の合成系の中間代謝物であるケト酸から同様の反
応により生成される系の二つの系路がある。合成系から
の高級アルコールの生成はその系を通してできるアミノ
酸が多量にある場合、そのアミノ酸が合成系の酵素をフ
ィードバック阻害することにより抑制される。このフィ
ードバック阻害が不完全になった変異株ではアミノ酸の
存在の有無にかかわらず常に高級アルコールが生産され
ることとなる。フィードバック阻害が不完全になった変
異株を取得する方法の一つに、それ自身もフィードバッ
ク阻害する性質を持つアミノ酸のアナログを用い、この
アナログに対して耐性を獲得した変異株の中から分離す
る方法がある。本発明においてはβ−フェネチルアルコ
ールを高生産する変異株の分離のために、フェニルアラ
ニンのアナログであるp−フルオロフェニルアラニンを
主に用いたが、その他のフェニルアラニンのアナログで
あるm−フルオロフェニルアラニン、o−フルオロフェ
ニルアラニン、グリシルフェニルアラニン、β−2−チ
エニルアラニンの使用も可能である。これはフェニルア
ラニンがフィードバック阻害をする酵素の一つである3
−デオキシ−D−アラビノ−ヘプツロン酸7−リン酸シ
ンターゼに対して上記のアナログがいずれも阻害効果を
有することに基づいている(TAKAHASI et al.:Can.J.B
iochem.,49,1016(1971))。
酢酸β−フェネチルの高生産はβ−フェネチルアルコー
ル高生産にともなって期待できる。これは酵母のアルコ
ールアセチルトランスフェラーゼによりアセチルCoAと
β−フェネチルアルコールの縮合反応により生成される
ため、基質の一つであるβ−フェネチルアルコールの増
加に伴って酢酸β−フェネチルも高生産となるためであ
る(秋田ら:醸協、82、369(1987))。本育種法において
親株として用いる酵母は変異処理をせずに使用しても目
的のアナログ耐性酵母は分離可能であるが、通常の変異
処理をした後に分離を行ってもなんら支障はない。
分離したアナログ耐性変異株を用い発酵試験を行い、発
酵液中のβ−フェネチルアルコールと酢酸β−フェネチ
ルを定量しこれらを著量生産し、発酵も親株と変わりな
いものを目的の酵母菌株として分離する。さらに分離酵
母により酒類の製造を行い、香気に優れた特徴を有し香
味の調和のとれた酒類を製造できる酵母を選択する。
(発明の効果) 実用酵母からその優れた醸造特性を損なうことなく新し
い性質を獲得した変異株を分離するのは一般に多くの労
力を要する極めて困難な作業である。
本発明はアナログ耐性株を分離するポジティブセレクシ
ョンを基本としており、目的とする変異株のみを効率的
に分離できる。本分離法の活用は実用酵母の育種におい
て極めて有効である。さらに育種したβ−フェネチルア
ルコール、酢酸β−フェネチルを高生産する酵母は香気
に特徴を有す酒類の製造に好適である。
(実施例) 実施例1(p−フルオロフェニルアラニン耐性酵母の分
離例1) サッカロマイセス(Saccharomyces)属セレビシエ(cerevi
siae)に属する協会7号清酒酵母を、YCB培地(イー
ストカーボンベース1.17%、カザミノ酸0.5%)に接種
し増殖させた後、無菌的に集菌洗浄し、2%グリコース
を含む0.1M、pH7.0のリン酸バッファー10mlに懸濁し
た。これに0.3mlのエチルメタンスルフォン酸を添加し3
0℃でゆっくり振とうし変異処理を行った。変異処理後
の生存率は57%であった。変異処理後の菌体を10mlのチ
オ硫酸ナトリウムで1回、10mlの減菌水で2回洗浄後10
mlの減菌水に懸濁しその400μ(生酵母数約7×107
をp−フルオロフェニルアラニン0.5mg/mlを含むYNB
寒天培地(イーストナイトロジェンベース0.67%、グル
コース5%、寒天2%)数枚に塗布した。25℃で培養す
ると約1週間でコロニーが認められた。このコロニーを
さらに同様の培地で数回植継いだものをp−フルオロフ
ェニルアラニン耐性酵母として分離した。
実施例2(p−フルオロフェニルアラニン耐性酵母から
のβ−フェネチルアルコール、酢酸β−フェネチル高生
産株の分離) 実施例1で分離したp−フルオロフェニルアラニン耐性
変異株80株について、YCB培地(イーストカーボン
ベース1.17%、カザミノ酸0.5%、グルコース15%)を
用いて25℃、静置で発酵試験を行った。発酵液中のβ−
フェネチルアルコールと酢酸β−フェネチル含量をキャ
ピラリーガスクロマトグラフィーにより定量した。カラ
ムはPEG 20M15m×0.53mm(i.d.)(ガスクロ工業)
を使用した。
第1図に示したように親株の協会7号が100ppm以下のβ
−フェネチルアルコールと5ppm程度の酢酸β−フェネチ
ルを生成したのに対し、p−フルオロフェニルアラニン
耐性変異株の約30%が、300ppm以上のβ−フェネチルア
ルコールと10ppm以上の酢酸β−フェネチルを生成し
た。以上のようにp−フルオロフェニルアラニン耐性変
異株を分離することにより、そのなかから高頻度でβ−
フェネチルアルコールと酢酸β−フェネチルを多量生成
する株が得られた。またこれらの株のうち代表的な9株
でのエタノールおよび香気成分生成量を第1表に示し
た。エタノールの生成は親株と変わりなく、イソアミル
アルコール、酢酸イソアミルは親株より多い傾向にあっ
たが、特異的にβ−フェネチルアルコールを高生産する
変異株であることが判る。またβ−フェネチルアルコー
ルの生成とフェニルアラニンの消費量との間には相関が
なくβ−フェネチルアルコールは脱抑制されたフェニル
アラニン合成系から生成されたものと考えられる。
実施例3(β−フェネチルアルコール、酢酸β−フェネ
チル高生産変異株による糖化後発酵試験) 実施例2で得られたβ−フェネチルアルコール、酢酸β
−フェネチル高生産変異株を用い我々の開発した糖化後
発酵(秋田ら:醸協誌、81、537(1986))を行った。糖化
液は精白歩合75%の白米と麹を6:1の比率で、水は白
米の3倍量使用し、耐熱性液化酵素と糖化酵素により液
化糖化して調整した(大場、秋田、中村:特公昭61-518
64)。糖化液の組成をグルコース18.2%、アミノ酸17.7
mM(アミノ態窒素327mg/とした。発酵は発酵栓をつけ
た500mlの三角フラスコに300mlの糖化液を入れ、スター
ラーで攪拌しながら15℃一定条件で行った。初発の酵母
数は5×106/mlとした。グルコースが1%以下になった
時点で発酵終了とした。発酵酒の成分組成を第2表に示
した。合成培地を発酵させた場合と同様変異株で特異的
にβ−フェネチルアルコールと酢酸β−フェネチルの含
有量が親株に比べ著しく多くなった。変異株によるエタ
ノール、酸度の生成とも親株と顕著な差がなく実用上問
題がなかった。
実施例4(β−フェネチルアルコール、酢酸β−フェネ
チル高生産変異株による清酒醸造試験) 難波らの方法(醸協誌、73、295(1978))により総米150
gの清酒醸造試験を実施し結果を第3表に示した。22
日目に発酵終了とし遠心分離により上槽した。
耐性株のエタノール生成は親株と変わりなく香気成分で
はβ−フェネチルアルコール、酢酸β−フェネチルが顕
著に多く、イソアミルアルコール、酢酸イソアミルも親
株より多い傾向にあった。酸度、アミノ酸度は親株と大
きな差はなかった。なおアミノ酸度がすべてに低いのは
α化米を使用したためである。以上のことから分離耐性
株が実際の清酒仕込みにおいても十分な実用性を有し、
さらに本株の特性であるβ−フェネチルアルコール、酢
酸β−フェネチル高生産性が発揮され香気にこれまでに
ない特徴を有する清酒を製造することができた。
実施例5(p−フルオロフェニルアラニン耐性酵母の分
離例2) サッカロマイセス(Saccharomyces)属セレビシエ(cerevi
siae)に属する1倍体酵母A5-8-1(aleul)から実施例1と
同様の方法にてp−フルオロフェニルアラニン耐性株の
分離を行った。本酵母は実験室酵母でありサッカロマイ
セス(Saccharomyces)属セレビシエ(cerevisiae)の代表
的な株である。分離した耐性株はロイシン要求性を示し
親株の変異株であることを確認した。分離株によるYC
B培地(イーストカーボンベース1.17%、カザミノ酸0.
5%、グルコース15%)を用いた発酵試験でのβ−フェ
ネチルアルコール、酢酸β−フェネチルの生産量を第4
表に示した。
耐性株から親株に比べ著量のβ−フェネチルアルコー
ル、酢酸β−フェネチルを生成する株が分離できた。
実施例6(p−フルオロフェニルアラニン耐性酵母の分
離例3) サッカロマイセス(Saccharomyces)属セレビシエ(cerevi
siae)に属する1倍体酵母C4488-1A(α leu2〔KIL-
k〕)から実施例1と同様の方法にてp−フルオロフェ
ニルアラニン耐性株の分離を行った。本酵母は実験室酵
母でありサッカロマイセス(Saccharomyces)属セレビシ
エ(cerevisiae)の代表的な株である。耐性株はロイシン
要求性を示し親株の変異株であることを確認した。分離
株によるYCB培地(イーストカーボンベース1.17%、
カザミノ酸0.5%、グルコース15%)を用いた発酵試験
を行いその時のβ−フェネチルアルコール、酢酸β−フ
ェネチルの生成量を第5表に示した。
耐性株から親株に比べ著量のβ−フェネチルアルコー
ル、酢酸β−フェネチルを生成する株を分離できた。
実施例5、6から本発明のβ−フェネチルアルコール、
酢酸β−フェネチル高生産酵母菌株の分離法はサッカロ
マイセス(Saccharomyces)属セレビシエ(cerevisiae)に
広く活用できることが示された。
【図面の簡単な説明】
第1図は実施例2における、親株の協会7号清酒酵母と
親株から分離したp−フルオロフェニルアラニン耐性株
によるβ−フェネチルアルコールと酢酸β−フェネチル
の生産を示す図。

Claims (4)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】サッカロマイセス(Saccharomyces)属セレ
    ビシエ(cerevisiae)に属する酵母を変異処理または変異
    処理することなく、通常では生育できない濃度のフェニ
    ルアラニンのアナログを含む培地で生育できるようにな
    ったアナログ耐性変異株を分離し、さらに耐性変異株か
    らβ−フェネチルアルコールと酢酸β−フェネチル高生
    産性酵母を分離育種する方法。
  2. 【請求項2】サッカロマイセス(Saccharomyces)属セレ
    ビシエ(cerevisiae)に属する清酒酵母を変異処理または
    変異処理することなく、通常では生育できない濃度のp
    −フルオロフェニルアラニンを含む培地で生育できるよ
    うになった耐性変異株を分離し、さらに耐性変異株から
    β−フェネチルアルコールと酢酸β−フェネチル高生産
    性酵母を分離育種する方法。
  3. 【請求項3】上記(2)の方法により分離されたサッカ
    ロマイセス(Saccharomyces)属セレビシエ(cerevisiae)K
    yokai7-FPAR18(微工研菌寄第10868号)で表示されるβ
    −フェネチルアルコールと酢酸β−フェネチル高生産性
    酵母。
  4. 【請求項4】上記(1)の方法により分離されたサッカ
    ロマイセス(Saccharomyces)属セレビシエ(cerevisiae)
    に属するβ−フェネチルアルコールと酢酸β−フェネチ
    ル高生産性酵母を用いることを特徴とする酒類の製造
    法。
JP1230382A 1989-09-07 1989-09-07 β―フェネチルアルコール、酢酸β―フェネチル高生産性酵母菌株とその育種法及びそれを用いた酒類の製造法 Expired - Lifetime JPH0653065B2 (ja)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP1230382A JPH0653065B2 (ja) 1989-09-07 1989-09-07 β―フェネチルアルコール、酢酸β―フェネチル高生産性酵母菌株とその育種法及びそれを用いた酒類の製造法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP1230382A JPH0653065B2 (ja) 1989-09-07 1989-09-07 β―フェネチルアルコール、酢酸β―フェネチル高生産性酵母菌株とその育種法及びそれを用いた酒類の製造法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPH0394670A JPH0394670A (ja) 1991-04-19
JPH0653065B2 true JPH0653065B2 (ja) 1994-07-20

Family

ID=16906993

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP1230382A Expired - Lifetime JPH0653065B2 (ja) 1989-09-07 1989-09-07 β―フェネチルアルコール、酢酸β―フェネチル高生産性酵母菌株とその育種法及びそれを用いた酒類の製造法

Country Status (1)

Country Link
JP (1) JPH0653065B2 (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220073466A (ko) * 2020-11-26 2022-06-03 한국식품연구원 효모 사카로마이세스 세레비지애 gnpea4, 그를 이용하여 제조한 페네에틸알코올 및 페네틸아세테이트 성분 증가 향미 우수 증류주의 제조방법, 및 그로부터 제조된 증류주

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4098841B2 (ja) * 1996-02-23 2008-06-11 カゴメ株式会社 発酵飲食品の製造方法
CN102203274B (zh) * 2008-10-29 2017-04-05 株式会社钟化 L‑氨基酸的制造方法
KR102139018B1 (ko) * 2017-05-25 2020-07-28 지앙난대학교 고수율 β-페닐에탄올의 양조 효모 균주 및 이의 용도
JP6839165B2 (ja) * 2018-12-28 2021-03-03 三和酒類株式会社 インドール生産酵母を用いる蒸留酒の製造方法およびインドール高生産酵母とその育種方法
JP7734475B2 (ja) * 2019-11-20 2025-09-05 サッポロビール株式会社 アルコール飲料、及びその製造方法、並びに高アルコール飲料のアルコール感抑制方法
JP7696315B2 (ja) * 2022-05-16 2025-06-20 キリンホールディングス株式会社 ビール風味発酵飲料およびその製法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2683058B2 (ja) * 1988-09-27 1997-11-26 協和醗酵工業株式会社 アルコール飲料又は発酵調味料の製造法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220073466A (ko) * 2020-11-26 2022-06-03 한국식품연구원 효모 사카로마이세스 세레비지애 gnpea4, 그를 이용하여 제조한 페네에틸알코올 및 페네틸아세테이트 성분 증가 향미 우수 증류주의 제조방법, 및 그로부터 제조된 증류주

Also Published As

Publication number Publication date
JPH0394670A (ja) 1991-04-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2530650B2 (ja) 低アルコ−ルまたは無アルコ−ルビ−ルの製造法
CA2228816A1 (en) Ferulic acid decarboxylase
JPH0653065B2 (ja) β―フェネチルアルコール、酢酸β―フェネチル高生産性酵母菌株とその育種法及びそれを用いた酒類の製造法
JP3898652B2 (ja) チロソール高生産性酵母変異株及び該酵母を用いた発酵アルコール飲料の製造法
JP3506280B2 (ja) 新規酵母及びその用途
JP2683058B2 (ja) アルコール飲料又は発酵調味料の製造法
JPH0714335B2 (ja) 変異酵母の培養法
US6916639B2 (en) Erythritol-producing moniliella strains
JP4269037B2 (ja) 有機酸高含有清酒の製造方法
JP4402207B2 (ja) アルコール耐性酵母
JP6839165B2 (ja) インドール生産酵母を用いる蒸留酒の製造方法およびインドール高生産酵母とその育種方法
JP3835564B2 (ja) 新規酵母及びその用途
JP4008539B2 (ja) 有機酸高生産新規酵母及びその用途
JP2670037B2 (ja) 蒸留酒の製造法
JP3094107B1 (ja) 高アルコール耐性酵母の育種法
JP2001314182A (ja) 乳酸菌を使用する清酒の製造方法
JP4570702B2 (ja) 香味成分含有量の割合が改変された酒類の製造法
JP3069689B2 (ja) 発酵速度を増大させた酵母の育種
JP3942718B2 (ja) 酒類、食品の製造方法
JPH0956374A (ja) 新規サッカロミセス・セレビシエおよびその分離方法
JP3865324B2 (ja) 新規酵母及びその用途
JP3026200B2 (ja) 高濃度アルコール含有もろみを製造する酵母の育種法
JPH03112479A (ja) アルコール飲料等の製造法
JP3337897B2 (ja) 新規な醸造用酵母
JP4059454B2 (ja) 酒類、食品の製造方法