JPH0658364B2 - カテコ−ルアミン最終代謝産物分析装置 - Google Patents
カテコ−ルアミン最終代謝産物分析装置Info
- Publication number
- JPH0658364B2 JPH0658364B2 JP60182759A JP18275985A JPH0658364B2 JP H0658364 B2 JPH0658364 B2 JP H0658364B2 JP 60182759 A JP60182759 A JP 60182759A JP 18275985 A JP18275985 A JP 18275985A JP H0658364 B2 JPH0658364 B2 JP H0658364B2
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- JP
- Japan
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- catecholamine
- final metabolite
- mobile phase
- hva
- vma
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Description
【発明の詳細な説明】 イ．技術の利用分野 本発明は、尿中のカテコール最終代謝産物を定量分析す
る液体クロマログラフ装置に関する。
る液体クロマログラフ装置に関する。
ロ．従来技術 尿に含まれているバニリルマンデル酸（以下、ＶＭＡと
呼ぶ）やホモバニリン酸（以下、ＨＶＡと呼ぶ）等のカ
テコール最終代謝産物の測定は、神経芽細胞腫のスクリ
ーニングの目的で液体クロマトグラフ装置を使用して行
なわれているが、尿中に含まれている夾雑物を除去する
ために酢酸エチル等の有機溶媒による抽出操作を必要と
し、分析作業に手間がかかるという問題があった。
呼ぶ）やホモバニリン酸（以下、ＨＶＡと呼ぶ）等のカ
テコール最終代謝産物の測定は、神経芽細胞腫のスクリ
ーニングの目的で液体クロマトグラフ装置を使用して行
なわれているが、尿中に含まれている夾雑物を除去する
ために酢酸エチル等の有機溶媒による抽出操作を必要と
し、分析作業に手間がかかるという問題があった。
ハ．目的 本発明はこのよな問題に鑑み、抽出作業を不要として迅
速に分析を行なうことができるカテコールアミン最終代
謝産物分析用の液体クロマトグラフ装置を提供すること
を目的とする。
速に分析を行なうことができるカテコールアミン最終代
謝産物分析用の液体クロマトグラフ装置を提供すること
を目的とする。
ニ，発明の構成 すなわち、本発明が特徴とするところは、酸性緩衝液と
アセトニトリルの混合溶液を移動相に、またシアノプロ
ピル基を化学結合したシリカゲル坦体を固定相に使用し
た点にある。
アセトニトリルの混合溶液を移動相に、またシアノプロ
ピル基を化学結合したシリカゲル坦体を固定相に使用し
た点にある。
ホ．実施例 そこで、以下に本発明の詳細を図示した実施例に基づい
て説明する。
て説明する。
第１図は、本発明の一実施例を示すものであって、図中
符号１はシアノプロピル基が化学結合されたシリカゲル
粒子を充填したカラムで、一端がポンプ２を介して後述
する移動相液３を収容する容器４に、他側が電気化学検
出器５に接続している。３は、前述の移動相液で、酒石
酸や酢酸、リン酸等の酸性緩衝液と５容量パーセントの
アセトニトリルを混合して調製されている。なお、図中
符号６は、試料注入口を示す。
符号１はシアノプロピル基が化学結合されたシリカゲル
粒子を充填したカラムで、一端がポンプ２を介して後述
する移動相液３を収容する容器４に、他側が電気化学検
出器５に接続している。３は、前述の移動相液で、酒石
酸や酢酸、リン酸等の酸性緩衝液と５容量パーセントの
アセトニトリルを混合して調製されている。なお、図中
符号６は、試料注入口を示す。
この実施例において、カラム１に移動相液３を流した状
態で、採取した尿をカラム１に注入すると、尿に含まれ
ている夾雑成分は、極めて短時間で分離して検出器５に
流入する。他方、目的成分であるＶＭＡ、ＨＶＡは、夾
雑成分の影響を受けることなく相互が分離したピークと
して電気化学的検出器により検出される。
態で、採取した尿をカラム１に注入すると、尿に含まれ
ている夾雑成分は、極めて短時間で分離して検出器５に
流入する。他方、目的成分であるＶＭＡ、ＨＶＡは、夾
雑成分の影響を受けることなく相互が分離したピークと
して電気化学的検出器により検出される。
［実施例］ 移動相液として５ミリモルの酒石酸を９５容量％とアセ
トニトリルを５容量％とを混合してなるものを、またカ
ラムとして５μｍの球状シリカ坦体にシアノプピル基を
化学結合した充填剤を内径６mm、長さ１５cmのチューブ
に充填してなる液体クロマトグラフ装置を使用し、標準
ＶＭＡ、ＶＬＡ及びＨＶＡを蒸留水に混合溶解してなる
標準試料について分析を行なったところ、第２図に示し
たようにＶＭＡ、ＶＬＡ及びＨＶＡのピークをそれぞれ
分離して検出することができた。
トニトリルを５容量％とを混合してなるものを、またカ
ラムとして５μｍの球状シリカ坦体にシアノプピル基を
化学結合した充填剤を内径６mm、長さ１５cmのチューブ
に充填してなる液体クロマトグラフ装置を使用し、標準
ＶＭＡ、ＶＬＡ及びＨＶＡを蒸留水に混合溶解してなる
標準試料について分析を行なったところ、第２図に示し
たようにＶＭＡ、ＶＬＡ及びＨＶＡのピークをそれぞれ
分離して検出することができた。
次に、平常な小児と神経芽細胞腫患児の尿を移動相液と
同一組成からなる希釈液により１０倍程度に希釈してか
ら上述した装置により分析を行なったところ、試料注入
から１０分経過した時点で、それぞれ第３図(イ)(ロ)に示
したように、尿中に含まれる夾雑物の影響を受けること
なくＶＭＡとＨＶＡのピークを分離して検出することが
でき、しかも病状に対応してＶＭＡ及びＨＶＡのピーク
高さを顕著に区別して検出できた。
同一組成からなる希釈液により１０倍程度に希釈してか
ら上述した装置により分析を行なったところ、試料注入
から１０分経過した時点で、それぞれ第３図(イ)(ロ)に示
したように、尿中に含まれる夾雑物の影響を受けること
なくＶＭＡとＨＶＡのピークを分離して検出することが
でき、しかも病状に対応してＶＭＡ及びＨＶＡのピーク
高さを顕著に区別して検出できた。
このことから、尿に含まれているＶＭＡ及びＨＶＡを夾
雑物の影響を受けることなく高い精度で定量できること
が解った。
雑物の影響を受けることなく高い精度で定量できること
が解った。
また、アセトニトリルの濃度を３乃至８容量％の範囲内
で変化させて測定したところ、アセトニトリルの濃度が
小さくなると目的成分が溶出するまでの時間が長くなる
ものの、実用上何らの問題はなかった。
で変化させて測定したところ、アセトニトリルの濃度が
小さくなると目的成分が溶出するまでの時間が長くなる
ものの、実用上何らの問題はなかった。
また、アセトニトリルと酸性緩衝液の容量比を変化させ
る、いわゆるグラジエント溶離法を適用して分析を行な
ったところ、目的成分溶出時間を短縮することができ
た。
る、いわゆるグラジエント溶離法を適用して分析を行な
ったところ、目的成分溶出時間を短縮することができ
た。
また、検出器として蛍光検出器と使用したところ、同上
の電気化学的検出器と同様に妨害成分の影響をうけるこ
となく目的成分だけを選択的に検出することができた。
の電気化学的検出器と同様に妨害成分の影響をうけるこ
となく目的成分だけを選択的に検出することができた。
なお、上述した実施例においては、神経芽細胞腫の患者
の検診に有用なＶＭＡ、ＶＬＡ、ＨＶＡを対象として説
明したが、他のカテコールアミン採取最終産物について
も検出することができた。また、酒石酸の代わりに酢酸
やリン酸等の他の酸性緩衝液を使用したところ何ら検出
精度に影響を与えることはなかった。
の検診に有用なＶＭＡ、ＶＬＡ、ＨＶＡを対象として説
明したが、他のカテコールアミン採取最終産物について
も検出することができた。また、酒石酸の代わりに酢酸
やリン酸等の他の酸性緩衝液を使用したところ何ら検出
精度に影響を与えることはなかった。
ヘ．効果 以上、説明したように本発明によればアセトニトリルと
酸性緩衝液の混合物を移動相に、またシアノプロピル基
を化学結合したシリカゲル坦体を固定相に使用したの
で、せいぜい希釈程度の前処理を施すだけでカテコール
アミン最終代謝産物を高い精度で短時間に定量的に分析
することができ、神経芽細胞腫の集団検診等における検
体の迅速処理に極めて有効な装置を実現することができ
る。
酸性緩衝液の混合物を移動相に、またシアノプロピル基
を化学結合したシリカゲル坦体を固定相に使用したの
で、せいぜい希釈程度の前処理を施すだけでカテコール
アミン最終代謝産物を高い精度で短時間に定量的に分析
することができ、神経芽細胞腫の集団検診等における検
体の迅速処理に極めて有効な装置を実現することができ
る。
第１図は、本発明の一実施例を示す装置の構成図、第２
図及び第３図は、同上装置による測定結果の一例を示す
クロマトグラム図である。 １……カラム、３……移動相液
図及び第３図は、同上装置による測定結果の一例を示す
クロマトグラム図である。 １……カラム、３……移動相液
Claims (1)
- 【請求項１】アセトニトリルを含む酸性緩衝液を移動相
に、シアノプロピル基を化学結合したシリカゲル担体を
固定相に備えてなるカテコールアミン最終代謝産物分析
装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60182759A JPH0658364B2 (ja) | 1985-08-19 | 1985-08-19 | カテコ−ルアミン最終代謝産物分析装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60182759A JPH0658364B2 (ja) | 1985-08-19 | 1985-08-19 | カテコ−ルアミン最終代謝産物分析装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6242055A JPS6242055A (ja) | 1987-02-24 |
| JPH0658364B2 true JPH0658364B2 (ja) | 1994-08-03 |
Family
ID=16123934
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60182759A Expired - Fee Related JPH0658364B2 (ja) | 1985-08-19 | 1985-08-19 | カテコ−ルアミン最終代謝産物分析装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0658364B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS56154519A (en) * | 1980-05-02 | 1981-11-30 | Hiroyuki Kanai | Rotary ring for yarn spinning |
| JP7016079B2 (ja) * | 2018-03-23 | 2022-02-04 | 国立大学法人東海国立大学機構 | 小児がん検査用尿中代謝物マーカー |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP5923388B2 (ja) | 2012-06-01 | 2016-05-24 | 東洋機械金属株式会社 | 射出成形機の成形条件設定装置 |
-
1985
- 1985-08-19 JP JP60182759A patent/JPH0658364B2/ja not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP5923388B2 (ja) | 2012-06-01 | 2016-05-24 | 東洋機械金属株式会社 | 射出成形機の成形条件設定装置 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 島津高速液体クロマトグラフ応用データ集（ＣＡ１９０−２５４）Ｐ．５６ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6242055A (ja) | 1987-02-24 |
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| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |