JPH0699636B2 - クチナシ青色系色素組成物の製法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、例えば、飲食品類、保健医薬品類、香粧品類
などにおける天然源色素として有用な公知のクチナシ青
色系色素含有材料から、容易な操作で工業的に有利に該
材料中で黄色系色素を選択的に除去し、冴えた鮮明な青
色色調を有する安定なクチナシ青色系色素組成物を製造
する方法に関する。

更に詳しくは、本発明はクチナシ抽出物の酵素処理物、
クチナシ抽出物の微生物による培養処理物及びクチナシ
抽出物の第１級アミノ義含有物質との反応生成物よりな
る群からえらばれたクチナシ青色系色素含有材料を、水
混和性有機溶媒で処理し、この際、該溶媒処理系の水含
量が、該水混和性有機溶媒の含水率として表わして、約
60重量％以下、好ましくは約５〜約60重量％となる条件
で処理し且つ処理した系から固形分層を採取することを
特徴とするクチナシ青色系色素組成物の製法に関する。

従来、あかね科クチナシ属に属する植物の例えば果実も
しくはその抽出物（本発明において、これらを包含して
クチナシ抽出物と総称する）に、例えばβ−グルコシダ
ーゼなどの如き酵素を作用させて得られるクチナシ抽出
物の酵素処理物、クチナシ抽出物を含有する培地に例え
ばバチルス属或いはハンゼヌラ属に属する微生物を接種
培養して得られるクチナシ抽出物の微生物による培養処
理物、更には、クチナシ抽出物に例えばアミノ酸、ペプ
タイド及び蛋白質などの如き第１級アミノ基含有物質を
作用させて得られるクチナシ抽出物の第１級アミノ基含
有物質との反応生成物が、該クチナシ抽出物中に含有さ
れるイリドイド配糖体から変換されたクチナシ青色系色
素を含有するクチナシ青色系色素含有材料として有用で
あることが知られている。

そして、従来、工業的に生産されているクチナシ青色系
色素組成物は、上述のようなクチナシ青色系色素含有材
料をそのまま乾燥して粉末状としたり、或いは該クチナ
シ青色系色素含有材料から不溶物（固形分）を除去し濃
縮したペースト状の色素濃縮物として供給されるのが普
通である。勿論、このようなクチナシ青色系色素含有材
料の色素組成物の純度を上げる目的で精製手段を施すこ
とも知られているが、鮮明な青色色調を有する安定なク
チナシ青色系色素組成物を製造することは困難である。

例えば、特公昭52−13971号（特開昭51−6230号）に
は、パチルス属に属する微生物を、あかね科クチナシ属
に属する植物の抽出物の添加培地に培養し、培地中にも
との色調と異る色調と色素組成物を生成蓄積せしめ、こ
れを採取することを特徴とする色素組成物の製造法が提
案されている。

この提案には、製造された緑色ないし青色の水溶性色素
組成物の回収に際しては使用目的に応じて公知の方法す
なわち液体培養の場合には培養液そのまま、又は培養液
の液を、固体培養の場合には培地磨砕物または溶媒抽
出物等を適宜に使い分けて色素組成物を回収することが
できると記載され、更に、たとえば液体培養においては
菌体を別するのみで清澄な緑色ないし青色の色素溶液
が得られ、尚、色素組成物の純度を上げることを必要と
する場合には更に溶媒抽出法、各種吸着剤による吸着溶
出法等の公知の精製法を利用して高純度の色素組成物を
得ることも可能であると記載されている。

そして、この提案の実施例６には、乾燥したクチナシ果
実を粉砕機にかけて粗砕した粗砕物を配合したクチナシ
抽出物含有固体培地を用いた培養処理物を、滅菌冷却後
に、80％エタノール溶液で抽出して培地中に蓄積した緑
色色素組成物を抽出し、得られた抽出液をメンブラン・
フイルターで過して液層の緑色色素組成物含有エタノ
ール水溶液を採取し、これを減圧濃縮して水溶性緑色色
素組成物含有水溶液を得ることが記載されている。

更に、この提案の第１図には、バチルス・ズブチリスを
用いた振盪培養物の培養液について吸光度−波長曲線
が示され、培養開始後120時間における培養液（色素
液）には約600mμ（590mμ）付近に吸光度ピークが出現
し、更に、培養開始時からの約420mμ付近の吸光度ピー
クが、若干のピーク高さの減少を伴うものの、実質的に
そのまま存在していることが示されている。又更に、こ
の提案の全実施例において吸光度データが記載されてお
り、いずれの色素組成物についても、590mμ及び420mμ
における吸光度ピークの存在が示されている。これら全
実施例の吸光度ピークを例えば青色系色素に由来する約
590nmにおける吸光度を（Ａ）及び黄色系色素に由来す
る約420nmにおける吸光度を（Ｂ）とし、その比（Ａ）
／（Ｂ）を算出してみると、例えば下記の如く表すこと
ができる。

この結果からも明らかな如く、上記提案によつて得られ
た色素組成物は何れも（Ａ）／（Ｂ）が1.0前後であ
り、その色調は後述する様に緑乃至緑がかつた青色であ
ることを示している。

本発明者等の検討によれば、上記提案において青色色素
組成物含有水溶液もしくは粉末と記載された色素組成物
を包含して、従来のクチナシ青色系色素含有材料は冴え
た鮮明な青色色調を示さず、緑色乃至緑色がかつた煤ん
だ青色であつて、冴えた鮮明な青色色調の望まれる用途
への利用に制約がある難点がある。

本発明者等はこのように難点を克服した鮮明な青色色調
を呈するクチナシ青色系色素組成物を提供できる製法を
提供すべく研究を行つてきた。

その結果、クチナシ抽出物はイリドイド配糖体のほか
に、例えばクロシンなどの黄色系色素を著量に含有して
おり、この黄色系色素は前述のように酵素処理、微生物
による培養処理、更には第１級アミノ基含有物質との反
応などの該イリドイド配糖体の青色系色素への変換処理
によつても、その変換作用を殆んど受けずに残留するた
めと考えられるが、該変換処理後のクチナシ青色系色素
含有材料は、青色系色素のほかに黄色系色素及び未変換
イリドイド配糖体（黄色系）を混有し、斯くて、その混
有比率によつて差異はあるにせよ、緑色乃至緑色がかつ
た煤んだ青色しか本質的に呈し得ず、冴えた鮮明な青色
色調のクチナシ青色系色素組成物は提供できないことを
知つた。

前記特公昭52−13971号には、培地中に生成蓄積された
もとの色調と異なる色調の色素組成物を採取して得られ
た組成物の溶解性について、水に対する溶解性が非常に
良く水存在下においてはアセトン、アルコール等の親水
性有機溶媒に可溶であると記載され、その実施例６につ
いて前述したとおり、80％エタノール溶液による緑色色
素含有抽出液層を採取している。

本発明者等は、冴えた鮮明な青色色調のクチナシ青色系
色素組成物を容易に取得できる製法を開発すべく研究を
進めてきた。

その結果、クチナシ抽出物の酵素処理、微生物による培
養処理或は第１級アミノ基含有物質との反応などの該抽
出物中に含有されるイリドイド配糖体の青色系色素への
変換処理によつて形成されるクチナシ青色系色素含有材
料に於て、該材料中に含有される青色系色素変換物と、
該変換処理によつて青色系色素に変更されなかつたクロ
シシの如き黄色系色素及び未変換イリドイド配糖体との
間にはそれらの水混和性有機溶媒に対する溶解性に、こ
れらを分離可能な程度の可成り大きさ差があることを発
見した。

更に研究を進めた結果、該クチナシ青色系色素は、水も
しくは水過剰の比較的水分割合の大きい水−水混和性有
機溶媒混合系には良く溶解するが、水分割合の小さい水
−水混和性有機溶媒混合系に対しては、該クチナシ青色
系色素の溶解性は顕著に低下し、一方黄色系色素はなお
該混合系に溶存すること、とくに、水分量が約60重量％
以下、好ましくは約５〜約60重量％の水−水混和性有機
溶媒系においては、該青色系色素の大部分は固形分層
（不溶物層）に移行し且つ該黄色系色素の大部分は液層
に移行し、斯くて、固形分層を採取することによつて、
顕著に改善された冴えた鮮明な青色色調のクチナシ青色
系組成物を、極めて容易な手段で工業的に有利に取得で
きることを発見した。

本発明者等の研究によれば、たとえば、後記実施例１に
おけるクチナシ青色系色素含有材料（粗製青色色素濃縮
液）について第１図に示すように、従来のクチナシ青色
系色素組成物は、約440nm付近に黄色系色素に由来する
吸光度ピーク及び約600nm付近に青色系色素に由来する
吸光度ピークを有し、この約440nm付近における吸光度
（Ｂ）と約600nm付近における吸光度（Ａ）との比率
（Ａ）／（Ｂ）は1.63と小さく、得られた色素組成物は
緑色ないし縁がかつた煤んだ青色を呈するのに対して、
後記実施例１において第２図に示すように、上述の新し
い知見に基づいた本発明方法によつて得られたクチナシ
青色系色素組成物においては、上記約440nm付近の吸光
度ピークが実質的に消失し且つ約600nm付近の吸光度ピ
ークが増大して、比率（Ａ）／（Ｂ）は3.10と約２倍に
増加していて、冴えた鮮明な青色色調を有するクチナシ
青色系色素組成物が得られることがわかつた。

従つて、本発明の目的は顕著に改善された鮮明な青色色
調を有する安定なクチナシ青色系色素組成物の製法を提
供するにある。

本発明の上記目的及び更に多くの他の目的ならびに利点
は、以下の記載から一層明らかとなるであろう。

本発明方法によれば、クチナシ抽出物の酵素処理物、ク
チナシ抽出物の微生物による培養処理物及びクチナシ抽
出物の第１級アミノ基含有物質の反応生成物よりなる群
から選らばれたそれ自体公知のクチナシ青色系色素含有
材料を、水混和性有機溶媒で処理する。

この際、本発明方法によれば、該水混和性有機溶媒処理
系の水分量が、該水混和性有機溶媒の含水率として表わ
して、すなわち、処理されるクチナシ青色系色素含有材
料が水分を含有する場合には、その水分量も含めた該水
混和性有機溶媒の含水率として、該水混和性有機溶媒の
含水率が約60重量％以下、好ましくは約５〜約60重量
％、一層好ましくは約10〜約30重量％となる条件で処理
し、且つ処理した系から固形分層を採取することによつ
て、クチナシ青色系色素含有材料中の黄色系色素及び未
変換イリドイド配糖体を主とする挟雑成分を液層中に溶
存させた状態で、主としてクチナシ青色系色素からなる
目的成分を固形分層に移行させて、所望の冴えた鮮明な
青色色調を有するクチナシ青色系色素成分を分離採取す
ることができる。

本発明で利用するクチナシ青色系色素含有材料及びその
製法は知られており、本発明において利用できる。例え
ば、クチナシ抽出物の酵素処理物であるクチナシ青色系
色素含有材料は、たとえば、特開昭56−92792号、特公
昭54−13451号などに記載されて公知であるように、あ
かね科クチナシ属に属する植物の果実もしくは該果実の
抽出物に、例えばβ−グルコシダーゼ、などの如き酵素
を作用させることによつて製造することができる。又、
例えば、クチナシ抽出物の微生物による培養処理物であ
るクチナシ青色系色素含有材料は、例えば、前記特公昭
52−13971号、特公昭59−16751号、特開昭54−96532
号、特開昭54−152026号、特開昭59−20357号などに記
載されて公知であるように、該植物の果実もしくは該果
実抽出物含有培地にバチルス属、ハンゼヌラ属、サツカ
ロミセス属、モナスカス属、アスペルギルス属、リゾー
プス属等に属する微生物を接種培養することによつて製
造することができる。更に、例えば、クチナシ抽出物の
第１級アミノ基含有物質との反応生成物であるクチナシ
青色系色素含有材料は、例えば、特開昭52−53932号、
特公昭54−13451号、などに記載されて公知であるよう
に、クチナシ抽出物に例えばゼラチン、カゼイン、アル
ブミン、酵素蛋白などの如き蛋白質類；ペプトン、蛋白
加水分解物などの如きペプタイド類：グリシン、ロイシ
ン、アラニン、バリン、アスパラギン酸、グルタミン酸
などの如きアミノ酸類などの如き第１級アミノ基含有物
質を作用させる処理によつて製造することができる。

これらの処理は併用することもでき、本発明において、
クチナシ抽出物の酵素処理物、クチナシ抽出物の微生物
による培養処理物及びクチナシ抽出物の第１級アミノ基
含有物質との反応生成物よりなる群からえらばれたクチ
ナシ青色系色素含有材料とは、上記の如き処理物のほか
に併用処理物を包含する呼称である。

本発明方法においては、上述の如きそれ自体公知のクチ
ナシ青色系色素含有材料を、水混和性有機溶媒で処理
し、この際、前述のように、該水混和性有機溶媒処理系
の水分量が、使用する水混和性有機溶媒の含水率として
表わして、約60重量％以下となる条件で処理する。処理
系の水分量が、使用する水混和性有機溶媒の含水率とし
て表わして約60重量％を超えて多量すぎると、クチナシ
青色系色素の処理系液層中への溶解性が急増して本発明
の目的が達成できなくなる。

利用する水混和性有機溶媒の例としては、たとえば、メ
タノール、エタノール、ｎ−プロピルアルコール、イソ
−プロピルアルコール、エチレングリコール、プロピレ
ングリコールなどの如き１価もしくは多価アルコール
類、アセトンと如きケトン類などを例示することができ
る。これらは複数種併用することができる。これら水混
和性有機溶媒の中でもエタノール及びアセトンの利用が
より好ましい。

本発明方法の実施に際しては、クチナシ青色系色素含有
材料を上記例示の如き水混合性有機溶媒で処理する際の
該有機溶媒処理系の水分量が、該有機溶媒の含水率とし
て表わして約60重量％以下の条件を充足するかぎり、該
有機溶培が含水有機溶媒の形でも実質的に水分を含有し
ない有機溶媒の形でも利用することができる。上記含水
率条件を充足するかぎり、水混和性有機溶媒の使用量は
適宜に選択変更できるが、クチナシ青色系色素含有材料
１重量部に対して、例えば、約0.5〜約10重量部、好ま
しくは約２〜約５重量部の使用量を例示することができ
る。

本発明方法の実施に際して、クチナシ青色系色素含有材
料を水混和性有機溶媒で処理する条件は、任意に選択す
ることができる。例えば、クチナシ青色系色素含有材料
に水混和性有機溶媒を前記含水率条件を充足するように
加え、例えば室温〜使用溶媒の沸点温度で、約10分〜約
５時間撹拌後、たとえば静置して、二層に分離するのを
持つて、デカンテーシヨン等により溶媒層を除去し、沈
降した下層の固形分層を採取することにより実施でき
る。所望により、上記処理を繰り返し行つても良い。得
られた固形分層は黄色系色素を含有せず、高純度で鮮明
な青色を呈する。該固形分層は所望により水を加えて稀
釈し、更に過などを行つても良い。

従来公知方法によつて得られたクチナシ青色系色素組成
中には青色系色素のほかに、クロシンなどの黄色系色素
及び未変換のイリドイド配糖体などが混在しているが、
本発明方法によれば、青色変換物は水もしくは希アルコ
ール類には溶解するが、含水率約60％以下の水混和性有
機溶媒に対しては極端に溶解度が低下して析出するとい
う新しい知見を利用してクチナシ青色系色素含有材料を
該溶媒処理系の水分量が該溶媒の含水率として表わして
約60重量％以下、好ましくは約５〜約60重量％となる条
件で水混和性有機溶媒で処理することにより、該溶媒相
に黄色系色素などの不純物を移行させて除去し、不溶部
を採取することにより、高純度で鮮明な色調を示すクチ
ナシ青色系色素組成物を得ることができる。

実施例 実施例 １ 乾燥クチナシ果実の粗粉砕物1kgに水8kgを加え、50℃で
８時間撹拌抽出した後、不溶物を別して抽出液を得
た。

次いでこの抽出液を減圧濃縮し、固形分70％のクチナシ
果実抽出濃縮物500gを得た。

この濃縮物50g、Ｌ−グルタミン酸ナトリウム5g及び水5
00gを２容フラスコに入れて溶解し、1N−NaOH水溶液
を用いてpH6.5に調整した。次いで酵素モルシン（盛進
製薬製品）5gを添加し、約45℃にて20時間撹拌して青色
変換反応を行つた後90℃にて15分間加熱して酵素を失活
させ、粗製青色系色素溶液515gを得た。この色素溶液の
595nmにおける吸光度（Ａ）は382、または440nmにおけ
る吸光度（Ｂ）は234であつた。

この色素溶液を減圧濃縮し、濃縮液170gを得た。次いで
この濃縮液に92重量％エタノール500gを加え、（エタノ
ール含水率として表わして処理系の水分量25重量％）、
撹拌して均一に混合した後、24時間静置して上層のエタ
ノール相をデカンテーシヨンにより除去し、得られた沈
殿物に水300gを加えて溶解し、目的とする精製クチナシ
青色系色素液350gを得た。

この精製色素液の595nmにおける吸光度（Ａ）は460また
は440nmにおける吸光度（Ｂ）は153であつた。これらの
結果を第１表及び第１図、第２図に示した。

第１表の結果からも明らかな如く、本発明方法によつて
得られた青色系色素は顕著に明色化された鮮明な青色で
あつた。

実施例 ２ 実施例１で使用したクチナシ果実抽出濃縮物（固形分70
％）10g及び水590gを２容フラスコに入れて溶解し、1
N−NaOHを用いてpH5.0に調整した。次いで酵素アシラー
ゼ（天野製薬製品）1gを添加し撹拌溶解後、15時間静置
した。その後撹拌を再開し、500rpmにて40時間撹拌を継
続した。

得られた青色系色素変換物溶液を90℃15分間加熱処理し
て酵素を失活させ、次いで減圧濃縮を行つて、濃縮液36
gを得た。この濃縮液の595nmにおける吸光度（Ａ）は60
0及び440nmにおける吸光度（Ｂ）は476であつた。

得られた濃縮液に92重量％のエタノール130gを加え（エ
タノールの含水率として表わして、処理系の水分量約25
重量％）10分間撹拌後、室温にて１時間静置した。２層
に分離した上層の含水エタノール層は黄緑色に着色し
た。このエタノール層をデカンテーシヨンにより除き、
飴状の沈殿物として得られた下層の固形分層に水を加え
て溶解し、精製クチナシ青色系色素液18gを得た。この
精製クチナシ青色系色素液の595nmにおける吸光度
（Ａ）は1100、及び440nmにおける吸光度（Ｂ）は380従
つてその比（Ａ）／（Ｂ）は2.89であり、冴えた鮮明な
青色を呈した。結果を第２表に示した。

実施例 ３ コーンスターチ20g、硝酸アンモニウム1.5g、コーンス
テイープリカー1.0g、リン酸一カリウム0.6g、リン酸二
ナトリウム4.0g、硫酸マグネシウム0.5gを純水１に溶
解し、これに440nmにおける1mlあたりの吸光度が1,400
であるクチナシ抽出液を100ml添加する。

この培地のpHを6.0とし500ml肩付き振盪フラスコに50ml
づつ入れ、120℃15分間殺菌を行なつた。

麹スラントで８日間培養したハンゼヌラアノマーラ（Ha
nsenla anomala）OUT6316をフラスコ１本あたり２白金
耳接種し、30℃８日間振盪培養を行つた。

得られた緑色の培養液１を採り、85℃で30分間殺菌し
た後、珪藻土を助剤として過し、液900mlを得た。
この色素液の1mlあたりの吸光度は440nm（Ｂ）で106、5
95nm（Ａ）において75であつた。

この色素液900mlをロータリーエバポレーターを用いて
減圧濃縮し、濃縮液300mlを得、次いでこの濃縮液を撹
拌しながら、90重量％エタノール1,000mlを添加し（エ
タノール含水率として表わして処理系の約27％）一夜放
置後、エタノール層をデカンテーシヨンにより除き、沈
殿部に水100gを加えて均一に溶解して、精製青色系色素
液135gを得た。この色素液の595nmにおける吸光度
（Ａ）は428及び440nmにおける吸光度（Ｂ）は185であ
り、（Ａ）／（Ｂ）は2.3で冴えた鮮やかな青色を呈し
ていた。その結果を第３表に示した。

本発明によつて得られる精製クチナシ青色系色素組成物
は黄色系色素の含有量が顕著に削減されており従来のク
チナシ青色系色素組成物に比較し、鮮明な青色を示し、
また未変換の不安定なイリドイド配糖体も含有しないの
で変色などのトラブルを回避でき、各種飲食品、保健医
薬品などに好適に利用することができる。

【図面の簡単な説明】

第１図に実施例１において用いたクチナシ抽出物を酵素
処理によつて青色に変換させて得られた粗製青色系色素
濃縮液及び第２図に本発明方法実施例１によつて得られ
た精製クチナシ青色系色素の可視部吸収曲線を示した
（1ml→500ml）。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】クチナシ抽出物の酵素処理物、クチナシ抽
   出物の微生物による培養処理物及びクチナシ抽出物の第
   １級アミノ基含有物質との反応生成物よりなる群からえ
   らばれたクチナシ青色系色素含有材料を、水混和性有機
   溶媒で処理し、その際、該溶媒処理系の水分量が、該水
   混和性有機溶媒の含水率として表わして、10〜30重量％
   の範囲内となる条件で処理し且つ処理した系からクチナ
   シ青色系色素を固形分層として採取することを特徴とす
   るクチナシ青色系色素組成物の製法。