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JPH0713640B2 - 固相イムノアッセイ法 - Google Patents
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JPH0713640B2 - 固相イムノアッセイ法 - Google Patents

固相イムノアッセイ法

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JPH0713640B2
JPH0713640B2 JP63068000A JP6800088A JPH0713640B2 JP H0713640 B2 JPH0713640 B2 JP H0713640B2 JP 63068000 A JP63068000 A JP 63068000A JP 6800088 A JP6800088 A JP 6800088A JP H0713640 B2 JPH0713640 B2 JP H0713640B2
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Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は被分析体のアッセイ法、より詳細には固相アッ
セイ法に関する。
（従来の技術） 各種の被分析体のアッセイがいわゆる固相アッセイ法に
より行われている。固相アッセイ法においては、少なく
とも測定すべきリガンド（被分析体）に特異的な結合剤
を固形支持体に支持させる。このためこのアッセイ法で
はアッセイに際して形成された結合相と遊離相を分離す
るために付加的な試薬を用いる必要がない。
一般にこの種の固形支持体はチユーブ、固体粒子、など
の形状であり、場合により固相は“ディップスティック
（dip−stick）”の形状のものであった。
ディップスティック固相アッセイ法の場合、結合剤はデ
ィップスティックに支持されており、この結合剤を含む
ディップスティックが被分析体を含有するアッセイ液に
浸漬される。一般にこの種の溶液はさらにトレーサーを
含有する。その場合、ディップスティック上のトレーサ
ーの存在および／または量は被分析体の尺度として用い
られる（被分析体の質的または量的尺度）。
（発明が解決しょうとする課題） 本発明は被分析体を測定するための改良された固相アッ
セイ法の提供、より詳細には固相アッセイ法を目的とす
る。
（課題を解決するための手段） 本発明の一観点によれば、第１部分および第２部分を備
え、第１部分と第２部分は相互に毛管流により連絡して
おり、これにより物質が毛管現象によって流動する固形
支持体が提供される。これらの第１および第２部分は、
第１部分が被分析体を含む材料と接触し、この第１部分
の材料が支持体の第１部分からその第２部分への毛管現
象により輸送される状態で固形支持体上に配置される。
固形支持体の第２部分には結合剤が含まれる。これは少
なくとも被分析体の結合剤であり、アッセイ形式がいわ
ゆる競合アッセイ形式である場合はアッセイに用いられ
るトレーサーの結合剤でもある。
固形支持体にはトレーサーも含まれる。これはリガンド
部分、およびトレーサーのリガンド部分に結合した検出
可能なラベル部分からなる。アッセイ形式がいわゆる競
合アッセイ形式である場合、トレーサーのリガンド部分
に固形支持体の第２部分に含まれる結合剤が結合する。
アッセイ形式がいわゆるサンドイッチアッセイ形式であ
る場合、トレーサーのリガンド部分に被分析体が結合す
る。
トレーサーは固形支持体のトレーサー部分において、以
下の様式で固形支持体に支持される。すなわち湿潤する
とトレーサーは毛管現象によって固形支持体の第２部分
へ輸送され、次いで被分析体の存在および／または不在
および／または被分析体量に応じて、のちにより詳細に
説明するように固形支持体の第３部分へ輸送されうる様
式で支持される。
固形支持体のトレーサー部分は固形支持体の別個の部分
であってもよく、固形支持体の第１部分（試料が添加さ
れる部分）であってもよい。
固相の第２部分に支持される結合剤は、結合剤が固定化
された状態を保ち、毛管現象によって固形支持体の第３
部分へ輸送されることのない様式で支持されている。
固形支持体の第３部分は毛管現象によって第２部分から
第３部分へ輸送されたトレーサーを検出するための部分
である。第３部分にはトレーサーを検出するための物質
が支持されていてもよく、支持されていなくてもよい。
あるいは第３部分は第２部分に結合しなかった材料を受
容する機能をもつのみでもよい。
本発明によれば、第２部分の結合剤に直接に結合するこ
とにより（競合アッセイ形式の場合）、または結合剤に
間接的に結合することにより（サンドイッチアッセイ形
式の場合、トレーサーは結合剤に結合した被分析体に結
合する）固形支持体の第２部分に固定化されたトレーサ
ーの量は、試料中の被分析体の存在および／または量に
依存する。いわゆるサンドイッチアッセイ形式の場合、
固形支持体の第２部分から第３部分へ毛管現象により送
られるトレーサーの量は試料中の被分析体の量に反比例
する。またいわゆる競合アッセイ形式の場合、固形支持
体の第２部分から第３部分へ毛管現象により送られるト
レーサーの量は試料中の被分析体の量に正比例する。
本発明の好ましい形態においては、固形支持体および各
種成分は被分析体を競合アッセイ形式により測定する様
式で調製および使用され、トレーサーは固形支持体の第
１部分に支持されている。
特に好ましい形態においては、のちにより詳細に説明す
るようにトレーサーの検出可能な標識部分は検出可能な
標識を含むサック（sac）または脂質小胞（しばしばリ
ポソームと呼ばれる）からなる。
アッセイ法が競合アッセイ法である好ましい形態を採用
する場合、トレーサーは固形支持体の第１部分に支持さ
れ、固形支持体の第１部分は測定すべき被分析体を含有
する試料で湿潤される。固形支持体を試料で湿潤させる
と、試料およびトレーサーが双方とも毛管現象によって
固形支持体の第２部分へ流入する。ここには被分析体お
よびトレーサーの双方に特異的な結合剤が含まれてお
り、この結合剤は固形支持体の第２部分に固定化されて
いる。試料部分の被分析体の存在および／または量に応
じて、トレーサーは固形支持体の第２部分にある結合剤
に結合する。第２部分の結合剤に結合しなかったトレー
サーは次いで固形支持体の第３部分へ毛管現象により流
入し、そこで検出および／または測定される。アッセイ
形式が単純な“有”または“無”の形式である場合（試
料中の被分析体の存否のみを判定する）、固形支持体の
第２部分に支持される結合剤は、試料中に検出可能な量
の被分析体が存在しない場合には固形支持体の第３部分
に検出可能なトレーサーが存在しない状態になる量で支
持されている。明らかに、試料中の被分析体の量が増加
するのに伴って固形支持体の第２部分にある結合剤に結
合しないトレーサーの量は増加し、これにより固形支持
体の第３部分に存在するトレーサーの量は増加する。従
って、固形支持体の第２部分に残留するトレーサーおよ
び／または毛管現象によって固形支持体の第３部分へ流
入するトレーサーを測定し、この第２および／または第
３部分において検出されたトレーサーの量を“標準曲
線”と比較し、試量中の被分析体の量を測定することに
よって、定量的アッセイを行うことができる。従ってア
ッセイに際しトレーサーおよび／または被分析体の測定
は定性的または定量的いずれも可能である。
サンドイッチアッセイ形式の場合、トレーサーは固形支
持体の第１部分と異なる、固形支持体のトレーサー部分
に支持されることが好ましい。トレーサーのリガンド部
分に被分析体が結合し、固形支持体の第２部分にある結
合剤は被分析体に特異的である。固形支持体の第１部分
に試料を含有する被分析体を接触させ、固形支持体のト
レーサー部分を湿潤させ、トレーサーおよび被分析体の
双方を支持体の第２部分に支持された結合剤へ毛管現象
によって流動させる。被分析体に結合したトレーサーの
量は試料中の被分析体の量に正比例し、被分析体に結合
したトレーサーおよび結合していないトレーサーは毛管
現象によって固形支持体の第２部分へ流入する。固形支
持体の第２部分において被分析体は被分析体に特異的な
固定化結合剤に結合する。結合していないトレーサー
（固定化結合剤に結合した被分析体に結合していないト
レーサー）は毛管現象によって固形支持体の第３部分へ
流入する。固形支持体の第３部分にあるトレーサーを試
料中の被分析体の存在および／または量の尺度として検
出することができる。
“有”または“無”型のサンドイッチアッセイ形式の場
合、固形支持体の第１部分に用いられるトレーサーの
量、および固形支持体の第２部分にある結合剤の量は、
検出可能な量の被分析体が存在する場合には本質的に検
出可能な量のトレーサーが固形支持体の第３部分へ流入
しないものである。
サンドイッチアッセイ形式の場合、固形支持体の第２部
分に用いられる結合剤の量は、試料中に存在すると思わ
れる被分析体が本質的にすべて第２部分の結合剤に結合
する量である。
アッセイに用いられる固形支持体は試料から被分析体を
吸収することができ、かつ湿潤した際被分析体およびト
レーサーを毛管作用によって固形支持体の第１部分から
第２部分を通って第３部分へ流動させることができるも
のである。さらに固形支持体はトレーサーおよび結合剤
を支持しうるものである。適切な固形支持体の代表例と
してはガラス繊維、セルロース、ナイロン、架橋デキス
トラン、各種のクロマトグラフィー用紙、ニトロセルロ
ースなどが挙げられる。特に好ましい材料はニトロセル
ロースである。
固形支持体は好ましくはストリップの形状をもち、第２
および第３部分はストリップの同一平面上に、物質が毛
管作用により第１帯域から第２帯域を通って第３帯域へ
流入しうる様式で配列されている。好ましい形状はスト
リップ状であるが、その形状および形式が前記の各種機
能を実施する別個の部分を形成しうる限り、他の多種多
様な形状または形式のいずれをも採用しうる。
前記のアッセイに用いられるトレーサーはリガンド部
分、およびこのリガンド部分に結合した検出可能な標識
部分からなる。検出可能な標識部分の検出可能な標識は
多種多様な検出可能な標識のいずれであってもよいが、
本発明の好ましい形態においては検出可能な標識は固形
支持体の第２および／または第３部分において色の変化
を生じるものであり、これは可視的な色の変化である
か、または色の変化を検出するのに計測器を必要とする
ものである。好ましい形態によれば、用いられる標識は
固形支持体の第２および／または第３部分において、計
測器を用いずに見ることができる色の変化を生じる。た
とえばこの色の変化は、検出可能な標識として酵素を用
い、固形支持体の第３部分にこの酵素の基質を施し、こ
の基質が酵素と接触した際に可視的な検出可能な色の変
化を生じることにより得られる。あるいは、検出可能な
標識が基質であり、固形支持体の第３部分にその酵素が
施され、これにより第３部分において酵素が基質標識と
接触することによって検出可能な色の変化が生じるもの
であってもよい。他の検出可能な標識の代表例（色の変
化を検出するために計測器を必要としてもよく、必要と
しなくてもよい）としては、各種の色原体、たとえば螢
光性物質、吸収性色素などが挙げられる。以下に競合ア
ッセイ法に示されるように、好ましい標識部分は検出可
能なマーカーを含む小胞であり、検出可能なマーカーは
可視である。
トレーサーのリガンド部分はアッセイ形式に依存する。
アッセイが競合アッセイである場合、トレーサーのリガ
ンド部分は被分析体またはその適宜な同族体である。適
宜な同族体とは、そのリガンドの同族体にも被分析体の
結合剤が特異的に結合することを意味する。アッセイ形
式がサンドイッチ型のアッセイである場合、トレーサー
のリガンド部分は被分析体または抗体（被分析体がこれ
に特異的に結合する）が特異的に結合するリガンドであ
る。
アッセイに用いられる結合剤は少なくとも被分析体に結
合するものである。前記のようにアッセイ形式が競合型
のアッセイ形式である場合、結合剤はトレーサーのリガ
ンド部分にも結合する。
当技術分野で一般に知られているように、被分析体が抗
原またはハプテンである場合には結合剤は天然の結合剤
または被分析体に特異的な抗体（多クローン抗体および
／または単クローン抗体）のいずれであってもよい。被
分析体が抗体である場合には、結合剤はその抗体に特異
的な抗原、またはその被分析抗体に特異的に結合する抗
体のいずれであってもよい。
結合剤は結合剤を固定化する様式、たとえば吸着、共有
結合などにより固形支持体に支持させることができる。
結合剤を固形支持体に固定化する方法は当技術分野で一
般に知られている。
固形支持体の第１部分に支持されるトレーサーは、第１
部分が湿潤した場合、トレーサーが毛管作用により流動
する様式で支持される。たとえばトレーサーは支持体の
第１部分に吸収されていてもよい。
本発明の特に好ましい形態によれば、競合アッセイ法の
場合、トレーサーは小胞に結合したリガンドからなり、
この小胞は検出可能なマーカーを含み、トレーサーは固
形支持体に支持されている。本発明者はこの種のトレー
サーを前記の種類の固形支持体に支持させるのが可能で
あること、この種のトレーサーは固形支持体が被分析体
を含有するかまたは含有すると推定される試料で湿潤し
た場合に毛管現象によって流動することを見出した。
使用される脂質小胞（リポソーム）は多種多様な脂質か
ら調製することができ、これにはリン脂質、糖脂質が含
まれ、代表例としてはレシチン、スフィンゴミエリン、
ジパルミトイルレシチン、ジステアロイルホスファチジ
ルコリンなどが挙げられる。リポソームを調製するため
に用いられる両親媒性脂質は一般に親水基、たとえばホ
スファト基、カルボキシル基、スルファト基またはアミ
ノ基、ならびに疎水基、たとえば飽和および不飽和脂肪
族炭化水素残基、および１個または２個以上の芳香族ま
たは脂環式基により置換された脂肪族炭化水素残基を含
む。リポソームを調製するための壁形成化合物にはさら
にステロイド成分、たとえばコレステロール、コレスタ
ノールなどが含まれる。リポソームを調製するための化
合物は一般に当技術分野で知られており、本発明を完全
に理解するためにこれに関してさらに詳述する必要はな
いと思われる。
リポソームは当技術分野で一般に用いられる方法により
調製できる。たとえばリポソームを逆相蒸発法により調
製することができ、この場合リポソームを調製する際に
用いられる化合物１種または２種以上をまず有機相に溶
解し、次いで水相を添加し、均質なエマルジョンを形成
させる。エマルジョンを調製したのち有機溶剤を蒸発さ
せてゲル様物質となし、これを水性媒質中で撹拌または
分散させることによってリポソームに変える。
リポソームの製法はたとえば米国特許第4,241,046号、
第4,342,826号および国際特許出願公開wo80−01515号明
細書に記載されている。
ある物質をリポソームに封入したい場合、その物質をリ
ポソームが形成される水溶液に含有させることによっ
て、リポソームにその物質を封入させることができる。
あるいは米国特許出願第659,200号明細書（1984年９月1
3日出願）に記載の方法により、あらかじめ形成された
空のリポソーム（封入すべき物質を含まないもの）にそ
の物質を封入することもできる。
リポソームは米国特許第4,522,803号明細書に記載の方
法によっても調製することができる。
リポソーム内に閉込められ、または封入される物質（そ
の物質はリポソームの水性コンパートメント内または二
重膜内にある）は検出可能なマーカー、たとえば色素、
放射性標識、螢光物質、化学発光物質、電子スピン共鳴
物質など；検出可能なマーカーの基質などである。ある
いはリポソーム内にマーカーを封入するのではなく、リ
ポソームを検出可能なマーカーで誘導体化することもで
きる。
リポソームはトレーサーを形成するためのリガンドで誘
導体化される。当技術分野で知られている方法、たとえ
ば共有結合、誘導体化または活性化などによりリポソー
ムをリガンドで誘導体化することができる。リポソーム
をリガンドで誘導体化する場合、リポソームの形成に用
いられる化合物１種または２種以上をリポソームの形成
前にリガンドで誘導体化するか、またはリポソームの形
成後にリポソームをリガンドで誘導体化することができ
る。リポソームをリガンドで誘導体化する方法、および
誘導体化リポソームの調製に適したカップリング剤など
は当技術分野で知られており、本発明を完全に理解する
ためにこれに関してさらに詳述する必要はないと思われ
る。
検出可能なマーカー部分が競合アッセイ法に用いるマー
カーを含むリポソームからなる好ましいトレーサーを使
用する場合、アッセイは各種トレーサー一般に関して先
に述べたと同様に行われ、ただしトレーサーがトレーサ
ーの検出可能なマーカー部分としてリポソームを含む。
特に好ましい形態においては、アッセイに用いられるト
レーサーは粒状の可視標識に結合したリガンドである。
粒状標識は金属もしくは合金（たとえばコロイド状の
金）またはサック、特に可視色素を含むリポソームであ
る。好ましくはサックに含まれるマーカーはサックを溶
解しなくても見える色素またはある種の他の物質であ
る。
リガンドおよび粒状標識からなるトレーサーは、リガン
ドを疎水性色素もしくは顔料の、または色素もしくは顔
料でコーチングしたポリマー核の水性分散液で標識する
ことによっても調製される。この種の標識は米国特許第
4,373,932号明細書（1983年２月15日発行）に、より詳
細に記載されている。この特許に従って調製されたトレ
ーサーも本発明におけるトレーサーとして用いられる。
上記特許明細書に示されるように、標識として用いられ
る着色有機化合物は疎水性ゾル状であり、この疎水性有
機色素または顔料は水に不溶性であるか、またはごく限
られた程度に可溶性であるにすぎない。
可視粒状標識は可視ポリマー粒子、たとえば好ましくは
球状の着色ポリスチレン粒子であってもよい。
トレーサーが可視である本発明のアッセイ法に用いられ
るトレーサーの調製に使用できる他の粒状標識の代表例
としては下記のものが挙げられる。フェリチン、フィコ
エリトリンその他のフィコビリ蛋白質；析出または不溶
性金属または合金；菌類、藻類または細菌の色素または
誘導体、たとえば細菌クロロフィル；植物材料または誘
導体金属ゾルなど。この形態の場合、少なくとも結合剤
を含む物品部分は、この部分に結合したトレーサーが可
視である量の結合剤を支持しうる表面積をもつ材料から
形成される。一般にこの表面積は少なくとも１μg/cm2
の濃度、きわめて一般的には少なくとも10μg/cm2の濃
度の結合剤を支持しうる。特に好ましい材料はニトロセ
ルロースである。これらの材料およびトレーサーは米国
特許出願第579,667号明細書（1984年２月14日出願）に
記載されている。これをここに参考として引用する。
本発明をさらに添付の図面を参照しながら説明する。
図面は本発明によるディップスティックの略図である。
図面にはトレーサーが支持された第１部分A;結合剤が支
持されている第２部分B;およびトレーサーが測定される
可能性のある第３部分Ｄを含むストリップが示されてい
る。特に示されるように、部分Ｃが部分ＢとＤの間にあ
り、部分ＢとＤの間に間隔を与えている。これによりト
レーサー測定部分が結合剤を含む部分から一定距離分離
している。
酵素を検出可能な標識として用いる競合アッセイ形式の
場合、部分Ａは酵素で標識されたリガンドを含み、リガ
ンド部分は被分析体またはその適宜な同族体である。部
分Ｂは被分析体およびトレーサーのリガンド部分に特異
的な結合剤を含み；部分Ｄは上記酵素と相互作用して色
の変化を生じる、酵素基質を含むであろう。
使用する際には、ストリップ10の部分Ａを被分析体が含
まれる試料と接触させる。これにより部分Ａは試料で湿
潤するであろう。部分Ａのトレーサーおよび試料は毛管
現象により部分Ｂへ輸送され、ここでトレーサーと被分
析体は結合剤上の結合部位に対し競合する。非結合トレ
ーサーおよび非結合被分析体は毛管現象によって部分Ｃ
を通過して部分Ｄへ移動し、ここでトレーサーがある場
合には部分Ｄの基質と相互作用して色の変化を生じる。
前記のように、アッセイ法は“有−無”アッセイ法また
は定量的アッセイ法のいずれであってもよく、部分Ｄに
おけるトレーサーの検出は採用するアッセイ法に依存す
る。
トレーサーがその検出のために付加的な物質を必要とし
ない検出可能な標識を含む場合、部分Ｄは付加的な物質
を必要としないであろう。すなわち部分Ｄもブランクで
あろう。たとえばトレーサーが検出可能な標識として色
素を含むリポソームを含有する場合、トレーサーは部分
Ｄに付加的な物質を支持させることなく測定できる。あ
るいはたとえば検出可能な標識をリポソームから放出す
る必要がある場合、部分Ｄは適切な溶解剤（lysing age
nt）、たとえばリポソームを溶解する酵素または界面活
性剤を含み、部分Ｄにおいてトレーサーの検出のために
リポソームから標識を放出させる。
さらに、トレーサーを部分Ｃにおいて測定することも可
能であり、その際部分Ｄにおいてはトレーサーの測定を
行うか、または行わない。たとえば標識が酵素である場
合には、部分Ｃに基質を添加することができる。
上記物質はディップスティックとして使用することがで
きる。あるいは試料を部分Ａに施すこともできる。従っ
て物品は水平または垂直いずれの向きでも使用できる。
本発明は多種多様な被分析体、たとえば下記のものを検
出および／または測定するために利用できる。薬物；治
療用薬物および乱用薬物を含む；ホルモン、ビタミン、
蛋白質：あらゆる種類の抗体、ペプチドを含む；ステロ
イド；細菌；菌類；ウイルス；寄生虫；細菌、菌類、ウ
イルスまたは寄生虫の成分または産物；あらゆる種類の
アレルゲン；正常細胞または悪性細胞の産物または成分
など。たとえば特にT4;T3;ジゴキシン;HCG;インシユリ
ン；テオフィリン；黄体形成ホルモン；各種疾患状態の
原因となる、またはそれらに伴う生物、たとえば化膿性
連鎖球菌（streptococcus pyrogenes）（Ａ群）、単純
ヘルペスＩおよびII、サイトメガロウィルス、クラミジ
ア属菌（chlamydiae）、風疹抗体などが挙げられる。
本発明をさらに以下の実施例により説明する。
実 施 例 ポリスチレンの0.5×8cmのストリップにまずスコッチ
（Scotch、登録商標）＃969接着剤転写テープ（スリー
エム、ミネソタ州セントポール55144）を貼付すること
によりディップスティックを作成した。0.5×0.5cmの正
方形の細孔５μｍニトロセルロース（エス−アンド・エ
ス、ニユーハンプシャー州キーン）からなる帯域Ｂにア
フィニテイ精製した家兎抗Ａ群連鎖球菌抗原３μをス
ポットし、次いで３％ウシ血清アルプミンでブロックし
た。乾燥後、これをディップスティックのテープ貼付面
に、スティックの下から約1cmのところに施した。0.5×
6.5cmの紙ストリップ（ワットマン、3mm）をニトロセ
ルロースのすぐ上方に、これと接触させて施した（帯域
ＣおよびＤで示される位置）。次いで乾燥セファデック
スG50ファイングレード（ファルマシア）からなる帯域
Ａを施す。
スルホーローダミン色素を充填した検出用リポソームは
オコンネルら（クリニ．ケミ．（Clin.Chem.）31:1424
〔1985〕）に概説された方法により調製される。これら
をアフィニティ精製した家兎抗Ａ群連鎖球菌抗原に共有
結合させた。
検出用リポソームを下から0.5cmの帯域Ａにスポットし
（２μ）、風乾した。リポソームはグリセリン２％、
ジメチルスルホキシド0.05％、EDTA 20mMを含有する0.
05Mトリス緩衝液（pH6.8）中にある。
Ａ群連鎖球菌は培養プレートから採取され、食塩液（0.
9％NaCl）で洗浄され、菌数１×109個/mlに調整され
た。細菌１×108個を含むアリコート（0.1ml）をＡ群炭
水化物抗原を露出させる微量亜硝酸抽出法で処理した。
この方法は0.1M・HCl 0.3mlを4M・NaNO240μと混合
し、これを連鎖球菌に添加し、３分後に1Mトリス塩基40
μで中和することよりなる。抽出およびディップステ
ィック分析を容易にするためにHClおよび後続の希釈液
は0.1％ツイーン−20非イオン界面活性剤を含有する。
抽出された抗原を用いて菌数８×106〜1.25×105個/ml
の希釈系列を調製した。これら希釈液のアリコート（0.
5ml）を12×75mmの試験管に入れ、ディップスティック
を各試験管内の液体に入れた。抽出された抗原を含有す
る液体がスティックに吸上げられるのに伴って、これは
捕捉抗体のスポットを通って検出用リポソームを運搬す
る。抗原が存在すると、これが捕捉抗体スポットに結合
し、若干のリポソームも結合し、その結果帯域Ｂに赤色
のスポットが現われる。残りのリポソームおよび抗原溶
液は通過して帯域Ｄへ入る。
アッセイ結果は帯域Ｂに赤色のスポットを生じた最小菌
体濃度を観察することにより“読取る”ことができる。
この例の結果を次表に示す。これは終末点５×105個/ml
であることを示す。これはＡ群ストレプトコッカス・フ
ァリンギチス（Streptococcus pharyngitis）の直接咽
喉スワプ診断に必要な感度に近接する。
（発明の効果） 本発明はアッセイを行うのに容易に使用できる物品およ
び方法を提供するという点で有利である。この物品およ
び方法は、トレーサーが物品に含まれるのでトレーサー
の添加を必要としない。さらにこの物品および方法は迅
速アッセイ法を提供しうる。
これらおよび他の利点はここに教示されるものから当業
者には自明であろう。
以上の教示からみて本発明につき多数の改良および変法
が可能であり、従って本発明は個々に記述されたもの以
外の形態で実施することができる。
【図面の簡単な説明】
図面は本発明の物品であるディップスティック（10）の
略図であり、各記号は下記のものを表わす。 A:第１部分（トレーサーを含む） B:第２部分（結合剤を含む） C:分離帯域 D:第３部分（測定部分）
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 特開 昭53−47894（ＪＰ，Ａ) 特開 昭60−192261（ＪＰ，Ａ)

Claims (15)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】同一平面上に存在し互いに毛管流により連
    絡可能である第１部分および第２部分からなるが、その
    際、 上記第１部分は、その中に移動可能なように支持された
    トレーサーを含む試料添加部位であって、該トレーサー
    は被分析体に特異的な、不溶性小胞マーカーに結合した
    リガンドからなり；そして 上記第２部分は、その中に固定化された結合剤を含み、
    上記小胞マーカーの在否を可視的に検出する部位であっ
    て、該結合剤は被分析体に特異的であって、第２部分中
    で結合したトレーサーが可視化される量で存在する； 試験ストリップからなる、液体試料中の被分析体の在否
    を測定するためのアッセイ装置。
  2. 【請求項２】不溶性小胞マーカーが着色リポソーム、着
    色重合体ビーズ、金属、合金および重合染料粒子からな
    る群から選択される、特許請求の範囲第１項記載の装
    置。
  3. 【請求項３】不溶性小胞マーカーが着色リポソームであ
    る、特許請求の範囲第２項記載の装置。
  4. 【請求項４】不溶性小胞マーカーが着色重合体ビーズで
    ある、特許請求の範囲第２項記載の装置。
  5. 【請求項５】被分析体が抗原であり、かつ上記リガンド
    および結合剤がその抗体である、特許請求の範囲第１項
    記載の装置。
  6. 【請求項６】上記リガンドおよび結合剤が抗原またはそ
    の類似物であり、かつ、被分析体がその抗体である、特
    許請求の範囲第１項記載の装置。
  7. 【請求項７】上記結合剤がリガンドに特異的である、特
    許請求の範囲第１項記載の装置。
  8. 【請求項８】上記第１部分と第２部分と同一平面上に第
    ３部分を含み、上記すべての部分が互いに毛管流により
    連絡可能である、特許請求の範囲第７項記載の装置。
  9. 【請求項９】検出可能な小胞マーカーが着色リポソー
    ム、着色重合体ビーズ、金属、合金および重合染料粒子
    からなる群から選択される、特許請求の範囲第７項記載
    の装置。
  10. 【請求項１０】小胞マーカーが着色リポソームである、
    特許請求の範囲第７項記載の装置。
  11. 【請求項１１】小胞マーカーが着色重合体ビーズであ
    る、特許請求の範囲第７項記載の装置。
  12. 【請求項１２】ビーズがポリスチレンビーズである、特
    許請求の範囲第11項記載の装置。
  13. 【請求項１３】被分析体が抗原である、特許請求の範囲
    第７項記載の装置。
  14. 【請求項１４】被分析体が抗体である、特許請求の範囲
    第７項記載の装置。
  15. 【請求項１５】（ａ）特許請求の範囲第１項記載の装置
    の第１部分に液体試料を添加し； （ｂ）上記液体試料がトレーサーと混合されるのに十分
    であり、かつ、該トレーサー−被分析体混合物が特許請
    求の範囲第１項記載の装置の第２部分に流れるのに十分
    な時間放置し；そして （ｃ）上記第２部分中の上記小胞マーカーの在否を可視
    的に測定することにより結果を読み取る 工程からなる、液体試料中の被分析体の在否を測定する
    一段階法。
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