JPH0725682B2

JPH0725682B2 - 抗原虫剤

Info

Publication number: JPH0725682B2
Application number: JP61149685A
Authority: JP
Inventors: 琢磨佐々木; 有佑綿矢
Original assignee: Asahi Glass Co Ltd
Current assignee: AGC Inc
Priority date: 1986-06-27
Filing date: 1986-06-27
Publication date: 1995-03-22
Anticipated expiration: 2010-03-22
Also published as: JPS638334A

Description

【発明の詳細な説明】本発明は抗原虫剤に関する。さらに詳しくは、本発明は
とりわけライシュマニア（Leishmania）属、トリパノソ
ーマ（Tripanosoma）属などに属する寄生病原原虫に起
因する疾患の予防・治療に有用な抗原虫剤に関する。

ライシュマニア症（Leishmania）、トリパノソーマ症
（Tripanosoma）はそれぞれ、ライッシュマニア属およ
びトリパノソーマ属に属する寄生病原原虫に起因する疾
患であり、温帯〜熱帯の特定地方に流行する慢性感染症
である。

ライシュマニア属に属する寄生原虫としては、たとえば
黒熱病（Kala−azar）の病原原虫ライシュマニア・ドノ
バニ（Leishmania donovani），東洋腫（Oriental sor
e）の病原原虫ライシュマニア・トロピカ（Leishmania
tropica）、また南米のエスプンジア（Espundia）の病
原原虫ライシュマニア・ブラジリエンシス（Leishmania
braziliensis）およびライシュミニア・メキシカナ（L
eishmania mexicana）などが知られている。またトリパ
ノソーマ属に属する寄生原虫としては、たとえばアフリ
カトリパノソーマ症（African Trypanosomiasis）の病
原原虫トリパノソーマ・ガンビエンス（Trypanpsoma ga
mbiense），トリパノソーマ・ローデシエンス（Trypano
somarhodesiense）が、またアメリカトリパノソーマ症
（American trypanosomiasis）の病原原虫トリパノソー
マ・クルース（Trypanosoma cruzi）などが知られてい
る。

現在、これらの寄生病原原虫に起因する疾患の治療剤と
して使用されている薬物には、ペンタミジン（Pentamid
ine），ペントスタン（Pentostane）またアムホテリシ
ンＢ（amphotericine B）、スラミン（suramin）、イセ
チオン酸スチルバミン（Stilbamin isethonate）、トリ
パルサミド（Tryparsamide）などがあるが、これらの薬
物はいずれも強い副作用を有するため、患者は入院して
医師の厳重な管理下にこれらの薬物の投与を受け、また
治療を受ける必要がある。

しかし、ライシュマニア症およびトリパノソーマ症の流
行する地域には発展途上国が相対的に多く、これらの諸
国では熟練した医療従事者が不足しているため、より有
効で副作用が少なく、また簡便に使用できる抗寄生原虫
剤の開発が強く望まれている。

抗原虫剤として、ヌクレオシド系の化合物が知られてい
る。たとえば、発明者らは、以前３′−デオキシイノシ
ンが抗原虫剤として有効であることを見い出した（特願
昭60−184018号公報参照）。また、４′−フルオロヌク
レオシド類が抗原虫剤として提案されている（特願昭48
−22479号公報参照）。しかし、これらは、必ずしも充
分な薬効を有しているとはいえず、さらに有効な抗原虫
剤が求められている。本発明者は、病原性原虫に起因す
る疾病の治療により有効な薬剤を開発すべく、鋭意研究
を重ねた結果、特定の３′−デオキシ−３′−フルオロ
プリンヌクレオシド類がライシュマニア症およびトリパ
ノソーマ症の病原原虫に対し、著しい薬効を示すことを
見い出し、この知見に基づいて本発明を完成するに至っ
た。

すなわち、本発明は、３′−デオキシ−３′−フルオロ
アデノシンまたは３′−デオキシ−３′−フルオロイノ
シンを含有してなる抗原虫剤を提供するものである。

３′−デオキシ−３′−フルオロプリンヌクレオシド
類は、文献未知の化合物である。この化合物の詳細およ
びこの化合物の製造法は、本出願人の出願した先願（特
願昭60−220186号）に記載されている。本発明における
特定の３′−デオキシ−３′−フルオロプリンヌクレオ
シド類はプリン残基がアデニン残基またはヒポキサンチ
ン残基である化合物である。以下に上記先願に記載され
ている３′−デオキシ−３′−フルオロプリンヌクレ
オシド類およびその製造法の概略を説明するが、本発明
における化合物の製造法は必ずしもこれに限定されるも
のではない。

３′−デオキシ−３′−フルオロプリンヌクレオシド
類は下記（Ｉ）で表わされる化合物（ただし、Ｒはプリ
ン残基を表わす）である。

本発明における化合物ではこの式（Ｉ）におけるＲがア
デニン残基あるいはヒポキサンチン残基である。この化
合物は、１位がハロゲン原子、アルコキシ基、水酸基、
あるいは保護された水酸基などの基である３−デオキシ
−３−フルオロ−β−Ｄ−リボフラノシド誘導体の該１
位にプリン残基を導入することにより製造される。ま
た、該フルオロ−β−Ｄ−リボフラノシド誘導体は、１
位がハロゲン原子、アルコキシ基、あるいは保護された
水酸基であり、かつ２位と５位の水酸基が保護されてい
るβ−Ｄ−キシロフラノシド誘導体の３位の水酸基をフ
ッ素化剤でフッ素化することにより得られる。３位の水
酸基に脱離基を導入しておくとフッ素化が容易である。
フッ素化により、フッ素原子は立体特異的に３位の水酸
基の反対位置に導入され水酸基が脱離する。上記β−Ｄ
−キシロフラノシド誘導体は３位の水酸基のみが選択的
に保護されず、他の水酸基はすべて保護されていなけれ
ばならない。保護剤に対する水酸基の反応性は微妙に異
なるので、これを利用して上記β−Ｄ−キシロフラノシ
ド誘導体を製造することができる。３−デオキシ−３−
フルオロ−β−Ｄ−リボフラノシド誘導体の上記製法の
流れを以下に示す。

上記において、R¹はハロゲン原子、アルコキシ基、ある
いは保護された水酸基を表わす。特に、メトキシ基など
の低級アルコキシ基が好ましい。r²はアルキリデン基を
表わし、特にイソプロピリデン基が好ましい。R³および
R⁴は水酸基の保護基を表わす。たとえば、トリ（アルキ
ル、アリール、あるいはアルアルキル）シリル基、アシ
ル基、アルアルキル基などが適当である。特にR³はベン
ジル基などのアルアルキル基、R⁴はｔ−ブチルジメチル
シリル基などのトリアルキルシリル基が好ましい。Ｙは
脱離基などを表わし、たとえばメタンスルホニル基、ト
リフルオロメタンスルホニル基、ｐ−トルエンスルホニ
ル基、アセチル基などがあり、特にトリフルオロメタン
スルホニル基が好ましい。フッ素化剤としては、種々の
フッ素化剤を使用することができるが、その内でもフッ
素化テトラ（アルキルあるいはアルアルキル）アンモニ
ウムが好ましい。特に低級アルキル基を有するフッ素化
テトラアルキルアンモニウムが適当で、フッ素化テトラ
ブチルアンモニウムが最も好ましい。上記（６）の化合
物に公知の方法でプリン残基を導入した後脱保護する
か、脱保護した後プリン残基を導入して、目的とする前
記式（Ｉ）で表わされる化合物を得る。プリン残基の導
入は、たとえば文献（Wright,Carbahydrate Reseach,1
8,345（1971））記載の方法を採用することができる。

フルオロヌクレオシド類を前記病原虫に起因する疾患の
予防・治療のために人その他の温血動物に投与する場合
には、それ自体、あるいは通常用いられる方法により、
たとえば薬理的に許容されうる担体、賦形剤、希釈剤、
溶解補助剤などを使用して、たとえば粉末、顆粒、錠
剤、カプセル剤、注射剤、坐剤などの形態で、経口的ま
たは非経口的に投与することができる。投与量は症状、
罹患動物の栄養状態、年令、薬物などの投与経路などに
より異なるが、たとえば、ライシュマニア症またはトリ
パノソーマ症に罹患した成人に治療のために、経口投与
する場合には１日１〜５回程度、フルオロヌクレオシド
類として１日当り約５〜100mg/kg体重が、また非経口投
与の場合には１日１〜５回程度、１日当り約１〜40mg/k
g体重が好んで用いられる。

次に、本発明の詳細を合成例および実施例で説明する
が、本発明は必ずしもこれらに限定されるものではな
い。なお、合成例は前記製法に従って、化合物（１）か
ら化合物（６）を製造し、次にプリン残基を導入して
３′−デオキシ−３′−フルオロアデノシンおよび３′
−デオキシ−３′−フルオロイノシンを製造する例であ
る。

合成例メチル２−Ｏ−ベンジル−3,5−Ｏ−イソプロピリ
デン−β−Ｄ−キシロフラノシド［式（２）において、
R¹がメトキシ基、R³がベンジル基、R²がイソプロピリデ
ン基である化合物］の合成。

メチル3,5−Ｏ−イソプロピリデン−β−Ｄ−キシロフ
ラノシド12.6g（61.6mmol）と、酸化銀（15.0g）のN,N
−ジメチルホルムアミド懸濁液にベンジルブロミド（2
1.1g）を加え、室温で36時間撹拌した。反応液を濾過
し、水を加え、クロロホルム抽出した。有機層を水で洗
浄後、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。カラムク
ロマトグラフで精製した、ベンジルエーテル12.6g（収
率69％）を得た。¹ H−NMR（CDCl₃）：δ1.38（s,6H）,3.41（s,3H）,3.8
−4.5（m,5H）,4.59（s,2H）,4.98（s,1H）,7.32（s,5
H）。

メチル２−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−キシロフラノシ
ド［式（３）において、R¹がメトキシ基、R³がベンジル
基である化合物］の合成。

メチル２−Ｏ−ベンジル−3,5−Ｏ−イソプロピリデン
−β−Ｄ−キシロフラノシド30.1g（0.10mol）を酢酸
（60ml）−水（24ml）に溶かし、50℃の湯浴上で１時間
反応させた。次いで湯浴を50℃に保ったままで低沸点物
を溜出させた。カラムクロマトグラフで精製しジオール
20.9g（収率80％）を得た。

Rf0.40（ベンゼン−酢酸エチル＝1:1）。

メチル２−Ｏ−ベンジル−５−Ｏ−ｔ−ブチルジメ
チル−β−Ｄ−キシロフラノシド［式（４）において、
R¹がメトキシ基、R²がｔ−ブチルジメチルシリル基、R³
がベンジル基である化合物］の合成。

合成例で合成したジオール20.9g（82mmol）を、N,N−
ジメチルホルムアミド（80ml）に溶解し、イミダゾール
（16.8g）を加えた。この溶液に、塩化ｔ−ブチルジメ
チルシラン12.4gのN,N−ジメチルホルムアミド（60ml）
を０℃で30分かけて滴下した。３時間撹拌の後常法に従
い後処理した。カラムクロマトグラフ精製して、シリル
エーテル30.2g（収率100％）を得た。¹ H−NMR（CDCl₃）：δ0.10（s,6H）,0.91（s,9H）,3.37
（s,3H）,3.9−4.1（m,3H）,4.2−4.4（m,3H）,4.61
（s,2H）,4.93（s,1H）,7.32（s,5H）。

メチル２−Ｏ−ベンジル−３−デオキシ−３−フル
オロ−β−Ｄ−リボフラノシド［式（６）において、R¹
がメトキシ基、R³がベンジル基である化合物］の合成。

上記合成例で合成したメチル２−Ｏ−ベンジル−５−
Ｄ−ｔ−ブチルジメチルシリル−β−Ｄ−キシロフラノ
シド13.0g（35.0mmol）のジクロロメタン（80ml）溶液
に2.6−ルチジン11.4gを加え０℃に冷却した。ここへ無
水トリフルオロメタンスルホン酸（20.0g）を15分かけ
て滴下し、さらに30分反応させた。氷を加え後処理し、
ショートカラムクロマトグラフで粗生成物を16.8gを取
り出した。

このものをテトラヒドロフラン（60ml）に溶解し、フッ
素化テトラブチルアンモニウムのテトラヒドロフラン溶
液（ｆ＝1.0）92mlを０℃で20分かけて滴下した。０℃
で24時間室温で３時間撹拌の後、テトラヒドロフランを
留去し、飽和硫酸アンモニウム水溶液で処理した。カラ
ムクロマトグラフ精製をし、標記のフッ素化体を5.4g得
た。¹⁹ F−NMR（CDCl₃）：（CCl₃F基準）−207.1（ddd,j＝5
3.7,22.0,13.4Hz），¹ H−NMR（CDCl₃）：δ3.47（s,3H）,4.0−4.2（m,2H）,
4.55（s,2H）,4.6−5.2（m,5H）,7.33（s,5H）。

IR（CHCl₃）3300cm^-1。

３′−デオキシ−３′−フルオロアデノシンの合
成。

上記合成例で合成したベンジルエーテル5.4g（21.1mm
ol）をエタノール70mlに溶解し、５％−パラジウム黒5.
5g存在下、室温、常圧で水素添加した。10時間後セライ
ト545を通し濾過をして濃縮した。

粗生成物をピリジン35mlに溶解し、ベンゾイルクロリド
6.1gを加え室温で36時間反応した。ビリジン留去後、カ
ラムクロマトグラフ精製し、メチル2.5−ジ−Ｏ−ベン
ゾイル−３−フルオロ−β−Ｄ−リボフラノシドを2.2g
得た。¹⁹ F−NMR（CDCl₃）：（CCl₃F基準）−211.6（ddd,j＝5
3.2,18.1,4.9Hz），このジベンゾイル体2.2g（5.9mmol）を酢酸（0.4ml）に
溶かす。ここに30％−臭化水素−酢酸溶液を加えて室温
で３時間撹拌する。酢酸、無水酢酸など完全に留去後、
ニトロメタン（10ml）に溶解し、アデニンモノベンゾエ
ート1.3gのニトロメタン溶液（80ml）に加え、さらにシ
アン化第２水銀2gを加え、１時間加熱還流した。ニトロ
メタンを留去後30％ヨウ化カリウム水溶液、水で洗浄し
濃縮した。ショートカラムで粗分離し、次の反応に用い
た。

トリベンゾイル体1.29gをメタノール（38ml）に溶解
し、ここに1M−ナトリウムメトキシド−メタノール溶液
を加え、１時間加熱還流した。メタノールを留去後水
（40ml）を加え、2N−酢酸水溶液で中和した。水層をク
ロロホルムで抽出し、有機物を除去した後、濃縮した。
99.5％−エタノールから再結晶し、最終生成物である標
記の３′−デオキシ−３′−フルオロアデノシン0.60g
を得た。¹⁹ F−NMR（DMSO−d₆）：（CCl₃F基準）−197.8（dt,54.
4,22.1Hz），¹ H−NMR（DMSO−d₆）：δ3.6−3.7（m,2H）,4.29（dt,J
＝27.6,3.7Kz,1H）,4.8−5.0（m,1H）,5.09（dd,J＝54.
4,4.2Hz,1H）,5.69（dd,J＝7.3,4.9Hz,1H）,5.89（d,J
＝6.3Hz,1H）,5.93（d,J＝8.1Hz,1H）,7.39（s,2H）,8.
13（s,1H）,8.36（s,1H）。¹³ C−NMR（DMSO−d₆）：δ61.1（d,J＝12.2Hz,C−
５′）,72.0（d,J＝15.9Hz,C−２′）,83.9（D,J＝22.0
Hz,C−４′）,86.9（Ｃ−１′）,93.1（d,J＝181.8Hz,C
−３′）,119.4（Ｃ−５）,140.1（Ｃ−８）,149.11
（Ｃ−４）,152.4（Ｃ−２）,156.2（Ｃ−６）。

IR（KBr錠剤）3300,1650cm^-1。

融点205.6℃。

３′−デオキシ−３′−フルオロイノシンの合成上記合成例で製造した３′−デオキシ−３′−フルオ
ロアデノシン（900mg）とアデノシンデアミナーゼ（4.2
mg,シグマ社製）とを100mM重炭酸−トリエチルアミン溶
液（90ml,pH7.1）に加え、37℃で１時間反応を行なっ
た。反応液を減圧下30℃で蒸発乾固した後熱エタノール
（300ml）を加えて溶解し、不溶解分を別した。液
を蒸発乾固し、３′−デオキシ−３′−フルオロイノシ
ンの結晶750mgを得た。

λmax λmin UV吸収 pH0（1N−HCl中）251nm 221nm pH7（65mmリン酸緩衝液） 248nm 223nm 実施例１３′−デオキシ−３′−フルオロアデノシンのライシュ
マニア・トロピカ（Leishmania tropica）に対する増
殖阻害活性の検定は次のように行なった。L.tropica
は、ダルベッコー改変イーグル培地（20％牛胎児血清、
25mMへペス緩衝液、ヘミン及びヒポキサンチン含有）を
用い25℃で培養した。１×10⁵細胞/mlの細胞密度のL.tr
opicaを含む培地1mlに３′−デオキシ−３′−フルオロ
アデノシンを最終濃度114×10^-4M〜3.6×10^-9Mとなるよ
うに添加（添加群）し、３′−デオキシ−３′−フルオ
ロアデノシン無添加の対照群とともに、25℃で72時間培
養し、細胞密度を計測した。増殖％は次式により算出し
た。

対照群と比較して50％増殖阻害する３′−デオキシ−
３′−フルオロアデノシンのモル濃度EC₅₀は3.2×10^-8M
（２回の実験の平均値）であった。

実施例２実施例１における３′−デオキシ−３′−フルオロアデ
ノシンの代りに３′−デオキシ−３′−フルオロイノシ
ンを用いて、実施例１と同じ試験を行なった。その結
果、３′−デオキシ−３′−フルオロイノシンのEC₅₀は
2.3×10^-7Mであった。

実施例３３′−デオキシ−３′−フルオロアデノシンのライシュ
マニア（L.donovani）に対する増殖阻害活性の検定を行
なった。実施例１におけるL.tropicaの代りにL.donovan
iを培養し、実施例１と同じ方法でL.donovaniに対する
３′−デオキシ−３′−フルオロアデノシンのEC₅₀を測
定した。その結果、EC₅₀は2.5×10^-7Mであった。

実施例４実施例３と同じ方法で、L.donovaniに対する３′−デオ
キシ−３′−フルオロイノシンのEC₅₀を測定した。その
結果、EC₅₀は1.0×10^-6Mであった。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】３′−デオキシ−３′−フルオロアデノシ
ンまたは３′−デオキシ−３′−フルオロイノシンを含
有してなる抗原虫剤。