JPH0734759B2 - 体液中の抗トロンビン▲ｉｉｉ▼を測定する方法及び試薬 - Google Patents
体液中の抗トロンビン▲ｉｉｉ▼を測定する方法及び試薬Info
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- JPH0734759B2 JPH0734759B2 JP2185456A JP18545690A JPH0734759B2 JP H0734759 B2 JPH0734759 B2 JP H0734759B2 JP 2185456 A JP2185456 A JP 2185456A JP 18545690 A JP18545690 A JP 18545690A JP H0734759 B2 JPH0734759 B2 JP H0734759B2
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Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、試料とトロンビン及びトロンビンの作用下に
発色する色原性基質との反応及び生じる色の測定によ
る、体液中の抗トロンビンIIIを測定する方法並びにそ
のために好適な試薬に関する。
発色する色原性基質との反応及び生じる色の測定によ
る、体液中の抗トロンビンIIIを測定する方法並びにそ
のために好適な試薬に関する。
抗トロンビンIIIは、その調節に役立つ血液凝固系の１
因子である。血液凝固は、種々のプロテアーゼのカスケ
ード様結合作用により起こる。前後に接続された活性化
工程の最後のものは、トロンビンを放出し、これは、再
びフイブリノーゲンの分解により、フイブリンモノマー
を生じ、これは凝集し、血栓を形成する。最も重要な調
節剤は抗トロンビンIII（AT III）であり、これはトロ
ンビン及び他の血液凝固に寄与するプロテアーゼと一緒
になつて錯体（これは活性中心をブロックする）を形成
することができる。血液中の抗トロンビンIII−含分
は、健康なヒトでは、比較的狭い範囲内に存在する。減
少された抗トロンビンIII−含分は、消費凝固病（Verbr
auchskoagulopathie）、重症の肝臓疾病又は類似の病気
により著るしく制限されうる。低減された抗トロンビン
III−含分は、現在、一般に血栓症の危険率と評価され
る。従つて、多くの場合に、抗トロンビンIII−含分
は、急性血栓症の場合にも低減されている。従つて、抗
トロンビンIII−含分は、臨床診断学における重要なパ
ラメータである。
因子である。血液凝固は、種々のプロテアーゼのカスケ
ード様結合作用により起こる。前後に接続された活性化
工程の最後のものは、トロンビンを放出し、これは、再
びフイブリノーゲンの分解により、フイブリンモノマー
を生じ、これは凝集し、血栓を形成する。最も重要な調
節剤は抗トロンビンIII（AT III）であり、これはトロ
ンビン及び他の血液凝固に寄与するプロテアーゼと一緒
になつて錯体（これは活性中心をブロックする）を形成
することができる。血液中の抗トロンビンIII−含分
は、健康なヒトでは、比較的狭い範囲内に存在する。減
少された抗トロンビンIII−含分は、消費凝固病（Verbr
auchskoagulopathie）、重症の肝臓疾病又は類似の病気
により著るしく制限されうる。低減された抗トロンビン
III−含分は、現在、一般に血栓症の危険率と評価され
る。従つて、多くの場合に、抗トロンビンIII−含分
は、急性血栓症の場合にも低減されている。従つて、抗
トロンビンIII−含分は、臨床診断学における重要なパ
ラメータである。
既に、免疫学的方法を基礎とするか又は色原性基質の使
用下における抗トロンビンIIIを検出する種々の方法が
公知である。後者の場合には、試料に、この試料中に存
在するAT IIIと反応し、失活されるトロンビンを添加す
る。次いで、過剰のトロンビンを、トロンビンの作用に
より着色された物質を形成する色原性基質と共にインキ
ュベートし、色形成を評価することにより検出し、この
際、抗トロンビンIII−含分は、色形成に対し間接的に
関係している。抗トロンビンIIIの測定法は、例えば、
次の文献に記載されている：ベルグマイヤー（Bergmeie
r）のメソツズ・オブ・エンザイマテイック・アナリシ
ス（Methode of Enzymatic Analysis;Verlag Chemie）
第３版、５巻441〜448;I.ウイット（Witt）のノイエ・
メトーデン・デル・ゲリンヌグスアナリイゼ・ミット・
クロモゲン・ズプストラーテン（Neue Methoden der Ge
rinnungsanalyse mit Chromogen Substraten）、ストル
モルケン（Stormorken）のノイエ・メトーデン・デル・
ゲリンヌングスアナリイゼ（Neue Methoden der Gerinn
ungsanalyse）119〜121頁、オデガルド（Odegard）等に
よるヘモスタシス（Haemostasis）、7:202〜209（197
8）；フアリード（Faread）等によるクロモゲニック・
ペプチド・ズプストラーテス（Chromogenic Paptide Su
bstrates;M.F.Scully and V.V.Kakkar.Churchill Livin
gstone発行）（1979）、183〜191及びアビルトガールド
（Abildgaard）等によるThromb.Res.11、549〜553（197
7）。
用下における抗トロンビンIIIを検出する種々の方法が
公知である。後者の場合には、試料に、この試料中に存
在するAT IIIと反応し、失活されるトロンビンを添加す
る。次いで、過剰のトロンビンを、トロンビンの作用に
より着色された物質を形成する色原性基質と共にインキ
ュベートし、色形成を評価することにより検出し、この
際、抗トロンビンIII−含分は、色形成に対し間接的に
関係している。抗トロンビンIIIの測定法は、例えば、
次の文献に記載されている：ベルグマイヤー（Bergmeie
r）のメソツズ・オブ・エンザイマテイック・アナリシ
ス（Methode of Enzymatic Analysis;Verlag Chemie）
第３版、５巻441〜448;I.ウイット（Witt）のノイエ・
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よるヘモスタシス（Haemostasis）、7:202〜209（197
8）；フアリード（Faread）等によるクロモゲニック・
ペプチド・ズプストラーテス（Chromogenic Paptide Su
bstrates;M.F.Scully and V.V.Kakkar.Churchill Livin
gstone発行）（1979）、183〜191及びアビルトガールド
（Abildgaard）等によるThromb.Res.11、549〜553（197
7）。
一般に、試験時の防害をさけるために、試料は非常に著
るしく稀釈される。それというのも、試料の固有色、濁
り及びpH−値の偏り並びに塩含分は、試験バッチ中の試
料量を少なく測定できる程、測定結果に少なく影響する
からである。従つて、殊に分析装置での反応速度論的測
定の実施の際には、1:1500までの範囲の試料稀釈率で操
作される。しかしながら、このことは、日常作業（Rout
ine）（特殊な緊急状態）にとつては非実際的である。
るしく稀釈される。それというのも、試料の固有色、濁
り及びpH−値の偏り並びに塩含分は、試験バッチ中の試
料量を少なく測定できる程、測定結果に少なく影響する
からである。従つて、殊に分析装置での反応速度論的測
定の実施の際には、1:1500までの範囲の試料稀釈率で操
作される。しかしながら、このことは、日常作業（Rout
ine）（特殊な緊急状態）にとつては非実際的である。
従つて、公知の検出法を改良し、分析装置内で実施する
ことができ、短時間で、かつ試料稀釈することなしに実
施可能であり、特有の標準の使用を可能とする方法を提
供することが本発明の課題である。
ことができ、短時間で、かつ試料稀釈することなしに実
施可能であり、特有の標準の使用を可能とする方法を提
供することが本発明の課題である。
この課題は、試料とトロンビン及びトロンビンの作用下
に発色する色原性橋質との反応及び生じる色の測定によ
る、体液中の抗トロンビンIIIの測定法により解決さ
れ、この反応は変性剤又はテトラペプチドGly−Pro−Ar
g−Proの存在で実施し、基質として、トロンビンに対す
るその感度がTos−Gly−Pro−Arg−pNAと比べて1/5〜1/
100の低いオリゴペプチド基質を使用することにより成
る。
に発色する色原性橋質との反応及び生じる色の測定によ
る、体液中の抗トロンビンIIIの測定法により解決さ
れ、この反応は変性剤又はテトラペプチドGly−Pro−Ar
g−Proの存在で実施し、基質として、トロンビンに対す
るその感度がTos−Gly−Pro−Arg−pNAと比べて1/5〜1/
100の低いオリゴペプチド基質を使用することにより成
る。
ここで、変性剤とは、蛋白質の鎖の間の非共役結合を解
除する蛋白質変性剤である。
除する蛋白質変性剤である。
意外にも、変性剤もしくはテトラペプチドの添加及びト
ロンビンに対して比較的鈍感なオリゴペプチド基質の使
用により、抗トロンビンIIIを正確かつ再現可能に測定
することが成巧し、この際、長い試験シリーズも分析装
置に悪影響を及ぼすことなく実施することができる。
ロンビンに対して比較的鈍感なオリゴペプチド基質の使
用により、抗トロンビンIIIを正確かつ再現可能に測定
することが成巧し、この際、長い試験シリーズも分析装
置に悪影響を及ぼすことなく実施することができる。
体液内の抗トロンビンIIIを測定するために、試料溶液
にトロンビンを過剰に（抗トロンビンIIIに対して）加
える。この際に、抗トロンビンIIIとトロンビンから錯
体が生じる。このような錯結合されたトロンビンはもは
やプロテアーゼ活性を有しない。次いで、この溶液に、
トロンビンにより色形成下に分解されうる基質を添加す
る。過剰に存在する錯結合されなかつたトロンビンのみ
が、基質と反応する。測定信号は試料の抗トロンビンII
I濃度と反比例する。この方法を実施するために、抗ト
ロンビンIIIとトロンビンとの間の反応を促進するヘパ
リンを添加するのが有利である。
にトロンビンを過剰に（抗トロンビンIIIに対して）加
える。この際に、抗トロンビンIIIとトロンビンから錯
体が生じる。このような錯結合されたトロンビンはもは
やプロテアーゼ活性を有しない。次いで、この溶液に、
トロンビンにより色形成下に分解されうる基質を添加す
る。過剰に存在する錯結合されなかつたトロンビンのみ
が、基質と反応する。測定信号は試料の抗トロンビンII
I濃度と反比例する。この方法を実施するために、抗ト
ロンビンIIIとトロンビンとの間の反応を促進するヘパ
リンを添加するのが有利である。
この方法に好適な基質が多くあるが、そのうち、最も多
く使用されるものはTos−Gly−Pro−Arg−pNA−アセテ
ート（Chromozym TH）である。この試薬は高感度を有
する。
く使用されるものはTos−Gly−Pro−Arg−pNA−アセテ
ート（Chromozym TH）である。この試薬は高感度を有
する。
本発明によれば、付加的に第１工程に変性剤又はテトラ
ペプチドGly−Pro−Arg−Proを添加する。長い試験工程
で、非稀釈試料の使用の際にはトロンビン出発値は一定
のまま残らないことが判明した。このことは、前記成分
の添加により排除される。変性剤としては、この分野で
公知の物質が好適である。尿素又は塩酸グアニジンを使
用するのが有利である。この変性剤を、この試験で0.1
〜１モル／又は基質溶液中で１〜６モル／の濃度で
使用するのが有利である。成分としてテトラペプチドを
使用する際には、これをテスト中で0.04〜1mg/mlの範囲
で添加するのが有利である。
ペプチドGly−Pro−Arg−Proを添加する。長い試験工程
で、非稀釈試料の使用の際にはトロンビン出発値は一定
のまま残らないことが判明した。このことは、前記成分
の添加により排除される。変性剤としては、この分野で
公知の物質が好適である。尿素又は塩酸グアニジンを使
用するのが有利である。この変性剤を、この試験で0.1
〜１モル／又は基質溶液中で１〜６モル／の濃度で
使用するのが有利である。成分としてテトラペプチドを
使用する際には、これをテスト中で0.04〜1mg/mlの範囲
で添加するのが有利である。
変性剤もしくはテトラペプチドは、既に試薬溶液に添加
するか又は試料溶液を試薬溶液と共にインキュベートす
る際に添加することができる。変性剤として尿素を使用
する際には、尿素を、まず基質と一緒に添加するのが有
利である。それというのも、尿素は、トロンビン安定性
に不都合な影響を有するからである。
するか又は試料溶液を試薬溶液と共にインキュベートす
る際に添加することができる。変性剤として尿素を使用
する際には、尿素を、まず基質と一緒に添加するのが有
利である。それというのも、尿素は、トロンビン安定性
に不都合な影響を有するからである。
本発明方法の更なる主要特徴はクロモチーム（Chromozy
m ）THに比べその感度が1/5〜1/100であるトロンビン
に対しる色原性オリゴペプチド基質の使用である。この
条件を満たすすべての基質、例えば、CBZ−Val−Gly−A
rg−pNH、Ｈ−Ｄ−Pro−Phe−Arg−pNA、Ｈ−Ｄ−Val−
Lue−Arg−pNA、Bz−Val−Leu−Arg−PNH、Bz−Leu−Le
u−Arg−pNA、Bz−Phe−Leu−Arg−pNA並びにBz−Leu−
Ile−Arg−pNA（CBZ:カルボベンゾキシ、Bz:ベンゾイ
ル、Ｄ−pro:D−プロリン、Ｄ−Val:D−バリン、pNA:p
−ニトロアニリン）が好適である。
m ）THに比べその感度が1/5〜1/100であるトロンビン
に対しる色原性オリゴペプチド基質の使用である。この
条件を満たすすべての基質、例えば、CBZ−Val−Gly−A
rg−pNH、Ｈ−Ｄ−Pro−Phe−Arg−pNA、Ｈ−Ｄ−Val−
Lue−Arg−pNA、Bz−Val−Leu−Arg−PNH、Bz−Leu−Le
u−Arg−pNA、Bz−Phe−Leu−Arg−pNA並びにBz−Leu−
Ile−Arg−pNA（CBZ:カルボベンゾキシ、Bz:ベンゾイ
ル、Ｄ−pro:D−プロリン、Ｄ−Val:D−バリン、pNA:p
−ニトロアニリン）が好適である。
これらの例として挙げられている化合物は、全て色原体
として、トロンビンにより分解されるｐ−ニトロアニリ
ンを有する。他の慣用の色原体例えば基質中のpNAの代
りに存在しうる５−アミノ−２−ニトロ安息香酸又はメ
トキシ−ニトロアニリンも好適である。基質として、
式:R−OCO−Gly−Pro−Arg−pNA（ここでＲはＣ−原子
数１〜３を有するアルキル基を表わし、特にメチル基が
有利である）のペプチドを使用するのが有利である。
として、トロンビンにより分解されるｐ−ニトロアニリ
ンを有する。他の慣用の色原体例えば基質中のpNAの代
りに存在しうる５−アミノ−２−ニトロ安息香酸又はメ
トキシ−ニトロアニリンも好適である。基質として、
式:R−OCO−Gly−Pro−Arg−pNA（ここでＲはＣ−原子
数１〜３を有するアルキル基を表わし、特にメチル基が
有利である）のペプチドを使用するのが有利である。
特に、クロモツイム THに比べて1/10〜1/30の低い感度
を有する基質を使用するのが有利である。
を有する基質を使用するのが有利である。
基質が試験溶液中に存在する基質濃度は、そのミハエリ
ス定数に依り決まる。その都度のミハエリス定数は２〜
20倍の範囲の基質濃度が好適である。
ス定数に依り決まる。その都度のミハエリス定数は２〜
20倍の範囲の基質濃度が好適である。
この方法に使用されるトロンビン濃度は、本発明によれ
ば、技術水準で使用されているトロンビン濃の30倍ま
で、有利に７〜15倍〔トロンビン約630U/試験溶液１
（25℃で基質としてのTos−Gly−Pro−Arg−pNAを有す
る国際酵素単位トロンビン）までに相当〕まで高めるこ
とができる。この範囲内であるが、より少なくないトロ
ンビンを用いて、本発明方法でなお直線状較正曲線を得
ることができ、従つて、反応速度測定の実施は広範囲
で、かつ特に快適な試験実施が分析装置で、標準を用い
るだけで可能になる。即ち、測定範囲にわたる直線性が
得られない場合は、多数の標準を用いて操作すべきであ
り、このことが、例えば緊急の場合に重要であるこの試
験の迅速使用を困難にする。
ば、技術水準で使用されているトロンビン濃の30倍ま
で、有利に７〜15倍〔トロンビン約630U/試験溶液１
（25℃で基質としてのTos−Gly−Pro−Arg−pNAを有す
る国際酵素単位トロンビン）までに相当〕まで高めるこ
とができる。この範囲内であるが、より少なくないトロ
ンビンを用いて、本発明方法でなお直線状較正曲線を得
ることができ、従つて、反応速度測定の実施は広範囲
で、かつ特に快適な試験実施が分析装置で、標準を用い
るだけで可能になる。即ち、測定範囲にわたる直線性が
得られない場合は、多数の標準を用いて操作すべきであ
り、このことが、例えば緊急の場合に重要であるこの試
験の迅速使用を困難にする。
試料量は、この試験の測定範囲並びに技術的可能性に依
つて決まる。下限は、分析装置のために１μである。
上限は分析装置の型に依り決まり、通例５μより多く
ない。この試料量が高いとと、その値は同じ試験条件下
では、狭い測定範囲を提供し、更に、より高い試料量で
は、フイブリン形成による妨害の程度が増大する。他
方、より少ない試料量では、特有の測定信号が低下し、
このことは、非常に少ない量の秤取正確度の上昇に伴な
い、この試験の精度の劣悪化をもたらす。
つて決まる。下限は、分析装置のために１μである。
上限は分析装置の型に依り決まり、通例５μより多く
ない。この試料量が高いとと、その値は同じ試験条件下
では、狭い測定範囲を提供し、更に、より高い試料量で
は、フイブリン形成による妨害の程度が増大する。他
方、より少ない試料量では、特有の測定信号が低下し、
このことは、非常に少ない量の秤取正確度の上昇に伴な
い、この試験の精度の劣悪化をもたらす。
本発明のもう一つの目的は、抗トロンビンIIIの測定試
薬であり、これは、トロンビン、変性剤又はテトラペプ
チドGly−Pro−Arg−Pro並びにトロンビンの作用下に発
色し、クロモツイム THと比べて1/5〜1/100のトロンビ
ンに対する感度を有する色原性基質を含有する。
薬であり、これは、トロンビン、変性剤又はテトラペプ
チドGly−Pro−Arg−Pro並びにトロンビンの作用下に発
色し、クロモツイム THと比べて1/5〜1/100のトロンビ
ンに対する感度を有する色原性基質を含有する。
有利な実施形では、この試薬は、付加的になおヘパリン
を含有する。
を含有する。
次の実施例につき本発明を詳述する： 例１（比較） （技術水準Bergmeyerによる方法） トロンビン（500U/）１部をトリス/HCl−緩衝液〔pH
8.1;これは同時にヘパリンを充分な量（2USP−単位/m
l）で含有する〕20部と混合する。トロンビン出発値の
測定のために、このトロンビン試薬2mlに、生理食塩水
0.10mlを、かつ酵素／基質−反応の開始時にトロンビン
基質溶液（クロモツイム TH:Tos−Gly−Pro−Arg−pN
A、試験バッチ中0.16mモル／）0.200mlを添加する。
このように規定された試験バッチ中では、反応速度（Δ
E/min）が405nmで25℃では0.220、37℃では0.400に達す
る。
8.1;これは同時にヘパリンを充分な量（2USP−単位/m
l）で含有する〕20部と混合する。トロンビン出発値の
測定のために、このトロンビン試薬2mlに、生理食塩水
0.10mlを、かつ酵素／基質−反応の開始時にトロンビン
基質溶液（クロモツイム TH:Tos−Gly−Pro−Arg−pN
A、試験バッチ中0.16mモル／）0.200mlを添加する。
このように規定された試験バッチ中では、反応速度（Δ
E/min）が405nmで25℃では0.220、37℃では0.400に達す
る。
例 ２ 試料溶液中の抗トロンビンIIIを例１に記載の方法で測
定するが、ここでは、クロモツイム THを本発明の基質
で代えた。
定するが、ここでは、クロモツイム THを本発明の基質
で代えた。
試料稀釈しない手による試験： 非稀釈試料 0.01ml（試験量1ml当り試料6.6μに相
当） トロンビン試薬 1.25ml（試験中のトロンビン308U/
、技術水準に対して14.74倍） 基 質 0.25ml（試験中のメチル−OCO−Gly−Pro−Arg
−PNA0.298mモル／、尿素0.5モル／） 分析装置での試験： −ヒタチ（Hitabhi）704/705: 非稀釈試料 0.003ml（試験量1ml当り試料7.1μに相
当） トロンビン試薬 0.350ml（試験中のトロンビン308U/
及びGly−Pro−Arg−Pro248mg/） 基 質 0.0700ml（試験中のMeO−Gly−Pro−Arg−pNA
0.298mモル／） −ヒタチ717: 非稀釈試料 0.002ml（試験量1ml当り試料6.6μに相
当） トロンビン試薬 0.250ml（試験中のトロンビン308U/
及びGly−Pro−Arg−Pro248mg/） 基 質 0.050ml（試験中のMeOCO−Gly−Pro−Arg−pNA
0.298mモル／） このヒタチ装置の酵素／基質−反応速度の測定可能性の
限度は約1.00（ΔE/min）である。
当） トロンビン試薬 1.25ml（試験中のトロンビン308U/
、技術水準に対して14.74倍） 基 質 0.25ml（試験中のメチル−OCO−Gly−Pro−Arg
−PNA0.298mモル／、尿素0.5モル／） 分析装置での試験： −ヒタチ（Hitabhi）704/705: 非稀釈試料 0.003ml（試験量1ml当り試料7.1μに相
当） トロンビン試薬 0.350ml（試験中のトロンビン308U/
及びGly−Pro−Arg−Pro248mg/） 基 質 0.0700ml（試験中のMeO−Gly−Pro−Arg−pNA
0.298mモル／） −ヒタチ717: 非稀釈試料 0.002ml（試験量1ml当り試料6.6μに相
当） トロンビン試薬 0.250ml（試験中のトロンビン308U/
及びGly−Pro−Arg−Pro248mg/） 基 質 0.050ml（試験中のMeOCO−Gly−Pro−Arg−pNA
0.298mモル／） このヒタチ装置の酵素／基質−反応速度の測定可能性の
限度は約1.00（ΔE/min）である。
他の公知の分析装置でも、この高いΔE/min−値では、
もはや不可能な分析限度につき当たる。もちろん、同じ
ことが手による試験にもあてはまり、ここでは、前記条
件下で予め稀釈せずに、基質としてクロモツイム THを
用いると、25℃で3.3のΔＥ−値が現われ、37℃で6.0の
ΔＥ−値が現われる。
もはや不可能な分析限度につき当たる。もちろん、同じ
ことが手による試験にもあてはまり、ここでは、前記条
件下で予め稀釈せずに、基質としてクロモツイム THを
用いると、25℃で3.3のΔＥ−値が現われ、37℃で6.0の
ΔＥ−値が現われる。
高い感度（クロモツイム THの17％もしくは20％）の基
質を用いると、全ての試験バージヨン（例えば37℃もし
くは高いトロンビン濃度）で非常に良好な結果で実施さ
れるとはかぎらないことが明らかであり、本発明方法を
有利に試料稀釈せずに実施できる範囲が認められる。
質を用いると、全ての試験バージヨン（例えば37℃もし
くは高いトロンビン濃度）で非常に良好な結果で実施さ
れるとはかぎらないことが明らかであり、本発明方法を
有利に試料稀釈せずに実施できる範囲が認められる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ヘルムート・リル ドイツ連邦共和国ヴイーレンバツハ・ツー クシユピツツシユトラーセ 24
Claims (3)
- 【請求項１】試料とトロンビン及びトロンビンの作用下
に発色する色原性基質との反応及び生じる色の測定によ
り、体液中の抗トロンビンIIIを測定する方法におい
て、この反応を、蛋白質変性剤又はテトラペプチドGly
−Pro−Arg−Proの存在下で実施し、基質として、トロ
ンビンに対するその感度がTos−Gly−Pro−Arg−pNAと
比べて1/5〜1/100の低いオリゴペプチド基質を使用する
ことを特徴とする、体液中の抗トロンビンIIIを測定す
る方法。 - 【請求項２】オリゴペプチド基質として、式： Ｒ−OCO−Gly−Pro−Arg−pNA ［式中Ｒは、Ｃ−原子数１〜３を有するアルキル基であ
る］を有するペプチドを使用する、請求項１記載の方
法。 - 【請求項３】トロンビン、蛋白質変性剤又はテトラペプ
チドGly−Pro−Arg−Pro及びトロンビンの作用下に発色
する基質として、Tos−Gly−Pro−Arg−pNAと比べたそ
の感度が1/5〜1/100の低いオリゴペプチド基質を含有す
ることを特徴とする、抗トロンビンIIIの測定試薬。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3923340A DE3923340A1 (de) | 1989-07-14 | 1989-07-14 | Verfahren und reagenz zur bestimmung von antithrombin iii |
| DE3923340.5 | 1989-07-14 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0353898A JPH0353898A (ja) | 1991-03-07 |
| JPH0734759B2 true JPH0734759B2 (ja) | 1995-04-19 |
Family
ID=6385054
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2185456A Expired - Fee Related JPH0734759B2 (ja) | 1989-07-14 | 1990-07-16 | 体液中の抗トロンビン▲ｉｉｉ▼を測定する方法及び試薬 |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0408075B1 (ja) |
| JP (1) | JPH0734759B2 (ja) |
| AT (1) | ATE119578T1 (ja) |
| AU (1) | AU622339B2 (ja) |
| DD (1) | DD298444A5 (ja) |
| DE (2) | DE3923340A1 (ja) |
| ES (1) | ES2069635T3 (ja) |
| ZA (1) | ZA905489B (ja) |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU628960B2 (en) * | 1989-04-07 | 1992-09-24 | Teijin Limited | Method of immunologically assaying human thrombin- antithrombin III complex, assay reagent and kit therefor |
| JPH078298A (ja) * | 1993-06-28 | 1995-01-13 | Nippon Shoji Kk | アンチトロンビンｉｉｉ活性の測定方法および該測定用試薬キット |
| DE59703340D1 (de) * | 1996-08-17 | 2001-05-17 | Aventis Behring Gmbh | Verfahren zur Quantifizierung von Glykosaminoglykanen in Antithrombin III-haltigen Lösungen |
| US6165795A (en) * | 1998-06-25 | 2000-12-26 | Cardiovascular Diagnostics, Inc. | Methods for performing fibrinogen assays using dry chemical reagents containing ecarin and magnetic particles |
| DE102005003145B4 (de) | 2005-01-21 | 2006-10-19 | Dade Behring Marburg Gmbh | Stablies, chromogenes Flüssigreagenz und dessen Verwendung in gerinnungsdiagnostischen Tests |
| GB0914883D0 (en) | 2009-08-26 | 2009-09-30 | Univ Belfast | Compound |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3005540A1 (de) * | 1980-02-14 | 1981-08-20 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren und reagens zur bestimmung der biologischen aktivitaet von heparin im plasma |
| US4473639A (en) * | 1982-09-15 | 1984-09-25 | Miles Laboratories, Inc. | Reagent strip test for antithrombin-III |
| DE3244030A1 (de) * | 1982-11-27 | 1984-05-30 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Chromogene verbindungen, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung |
| DE3811647A1 (de) * | 1988-04-07 | 1989-10-26 | Behringwerke Ag | Verfahren und verpackung enthaltend mittel zur kinetischen bestimmung von faktor xiii |
-
1989
- 1989-07-14 DE DE3923340A patent/DE3923340A1/de not_active Withdrawn
-
1990
- 1990-07-11 AU AU58885/90A patent/AU622339B2/en not_active Ceased
- 1990-07-12 DD DD90342731A patent/DD298444A5/de not_active IP Right Cessation
- 1990-07-13 AT AT90113483T patent/ATE119578T1/de active
- 1990-07-13 DE DE59008621T patent/DE59008621D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1990-07-13 ZA ZA905489A patent/ZA905489B/xx unknown
- 1990-07-13 EP EP90113483A patent/EP0408075B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1990-07-13 ES ES90113483T patent/ES2069635T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1990-07-16 JP JP2185456A patent/JPH0734759B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0353898A (ja) | 1991-03-07 |
| ZA905489B (en) | 1991-04-24 |
| ES2069635T3 (es) | 1995-05-16 |
| EP0408075A3 (en) | 1992-02-26 |
| AU622339B2 (en) | 1992-04-02 |
| EP0408075B1 (de) | 1995-03-08 |
| DE59008621D1 (de) | 1995-04-13 |
| EP0408075A2 (de) | 1991-01-16 |
| AU5888590A (en) | 1991-01-17 |
| DE3923340A1 (de) | 1991-01-24 |
| ATE119578T1 (de) | 1995-03-15 |
| DD298444A5 (de) | 1992-02-20 |
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