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JPH0780782B2 - 貯蔵安定で認容性のエリトロポエチン製剤及びその製法 - Google Patents
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JPH0780782B2 - 貯蔵安定で認容性のエリトロポエチン製剤及びその製法 - Google Patents

貯蔵安定で認容性のエリトロポエチン製剤及びその製法

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JPH0780782B2
JPH0780782B2 JP63220591A JP22059188A JPH0780782B2 JP H0780782 B2 JPH0780782 B2 JP H0780782B2 JP 63220591 A JP63220591 A JP 63220591A JP 22059188 A JP22059188 A JP 22059188A JP H0780782 B2 JPH0780782 B2 JP H0780782B2
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Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明の目的は安定で非免疫原性の、生理的に良好に認
容性で、溶解させたか又は凍結乾燥させたヒト蛋白質、
特にエリトロポエチンのガレヌス製剤及びその製法であ
る。
従来の技術 ヒト蛋白質は生体固有の、僅少量で産生する蛋白質、例
えば組織プラスミノ−ゲンアクチベータ（ｔ−PA）、ス
トレプトキナーゼ、ウロキナーゼ、インターフエロン、
種々のコロニー刺激因子（CSF）又はエリトロポエチン
（EPO）である。調製で優先的に使われるEPOを例にし
て、本発明を説明する。
エリトロポエチン（EPO）は、骨髄でヘモグロビンもし
くは赤血球の形成を刺激する糖蛋白質である。この蛋白
質は主に腎臓で合成され、血清中に僅少量で見出されか
つ生理的条件下では一部尿中に排泄される。
腎機能不全でEPOが不足すると、腎性貧血の原因とな
る。このような場合に、生理的量、即ちμｇのEPOを１
回又は数回投与することにより赤血球の形成が再び惹起
される。生体は僅かな用量変化にも敏感に反応するの
で、投与量は正確に再現可能でなければならない。一般
に、EPOは水溶性として筋肉内に又は静脈内に注射され
あるいはスプレーとして鼻腔粘膜に投与される。
しかしながら、初めはヒトの尿から得られた生成物〔三
宅及びその他共著、“J.Biol.Chem."、Vol.25、5558〜5
564頁（1977年）〕であり、またその間に遺伝子工学的
に生成した生成物（国際公開第85−02610号明細書）で
もあるEPOは水溶液中で不安定でありかつ−80℃で貯蔵
する際に著しい活性損失が起ることが知られている。こ
の両方の生成物はグリコシル化モデル及び活性において
若干異なつており、血清中に含まれているEPOとの直接
的な比較は公知にならなかつた。活性損失は、一方では
貯蔵で使われるアンプルの表面の触媒作用、痕跡量の重
金属、空中酸素等によるEPOの破壊に起因し、他方ではE
PO分子が容器の壁に沈着することによつても起り、その
際に一部変性も起り得る。前記のように各単位用量中に
数μｇで含まれているだけなので、吸着による損失は短
い貯蔵時間後でも著しい。
それ故、ヨーロツパ公開特許第178576号明細書には、ヒ
ト−又は牛血清アルブミン、レシチン、デキストラン、
セルロース、ポリエチレングリコール等のようなポリマ
ー化合物の添加により、管壁へのこの沈着を阻止するこ
とが記載されており、こうすることによつて、EPOは20
℃で約２時間貯蔵後でも75〜98％で見出され、前記のよ
うな添加物を含まないと僅か16％である。しかし放射性
標識（14C）の検出だけが行なわれ、この実験はEPOの破
壊に対する安定性については表わしていない。
長期安定性は試験してもこの剤では達成されず、即ちマ
ウス試験のEPO−有効性は著しく減少し、更にこの剤は
注射の際に免疫原性反応を誘発し得る。
更に、ヨーロツパ公開特許178665号明細書から、特に凍
結乾燥したEPO製剤の安定剤が公知である。重合体物質P
EG4000、ゼラチン及びデキストラン40と共に種々の糖、
糖アルコール、アミノ酸、無機塩及びチオール化合物が
挙げられている。これらの物質とヒト血清アルブミン、
ゼラチン及びデキストランとの組合せも挙げられてい
る。この文献でも凍結乾燥した生成物を２カ月間貯蔵し
た後の放射性が測定されている。それは87〜99％であ
り、これに対して添加物を含まないと60％である。製造
直後の凍結乾燥体が標準として使用されているので、製
剤を製造した際にその活性損失がどの程度高いかは記載
されていない。この製剤もマウス試験において高い有効
作用の損失を有する。
発明が解決しようとする課題 それ故、貯蔵安定でもある認容性のEPO製剤、即ち主体
内有効作用を維持し、アンプルや注射器の壁に吸着され
ずかつ簡単に注射可能な形状にすることのできるその製
剤を見出すという課題が生じた。
課題を解決するための手段 この課題が、特許請求の範囲で詳しく特徴が挙げられて
いる成分の組合せにより解決されることは驚異的であ
る。実験から明らかなように、単一成分はこれらの性質
を有していないかあるいは僅かに有しているに過ぎな
い。
安定化には尿素と種々のアミノ酸の添加が重要である。
尿素は５〜50g/l、殊に10〜15g/lで使用する。アミノ酸
としては、例えばグリシン、Ｌ−アラニン、Ｌ−アルギ
ニン、Ｌ−ロイシン、Ｌ−２−フエニルアラニン、Ｌ−
グルタミン酸、Ｌ−トレオニン及びＬ−イソロイシンが
挙げられる。種々のアミノ酸の混合物は特に有効な効果
を有する。これは0.5〜50g/l、殊に１〜20g/lの量で使
用し、その際に全量が５〜25g/lであると有利である。
更に、生理的認容性の緩衝液が必要であり、これは、注
射溶液に必要な低い濃度（約20〜100ミリモル/l）でEPO
に必要なpH範囲6.5〜7.4、殊に7.0〜7.2を調節する。リ
ン酸塩緩衝液以外に、グリシネート、炭酸塩、クエン酸
塩等が使用可能であり、その際に反対イオンとしてはナ
トリウムイオン以外にカリウムイオン又はアンモニウム
イオンを使うことができる。付加的に、緩衝作用は含ま
れているアミノ酸により惹起される。
アンプル壁及び注射器へのEPOの付着は僅少量の洗浄剤
の添加により著しく低下する。本製剤は主に注射に使わ
れるので、この物質は生理的に、特に静脈内で認容性で
なければならない。濃度0.05〜5g/l、特に0.1〜0.5gが
有効であることが明らかになつた。種々のポリマクロゴ
ール（Polymacrgol）類のような非イオン性湿潤剤、特
にポリエチレンソルビタンラウレート（ツイーン20又は
80）、ソルビタントリオレエート（スパン35又は80）又
はグリセリンオレイル酸ポリグリコールエーテル（Labr
afil ）がこの目的に有効であることが明らかになつた
が、他の認容性物質も同じように使用することができ
る。
加工の際に、例えば使用した金属製の装置からどうして
も駆出する重金属イオンのEPOに対する影響を低減する
ために、溶液に可溶性カルシウム塩0.01〜5g/l、殊に塩
化カルシウム約0.02〜0.2g/lを添加すると有利であるこ
とが明らかになつた。他の生理的に認容性の錯体ビルダ
ー、例えばクエン酸塩、EDTA、NTA、パントテン酸塩も
同様に使用することができる。
溶剤としては注射用の精製水を使用し、この溶剤に等張
性を調節するために塩化ナトリウム又は相応する物質、
例えばマンニツト、ソルビツト等を添加する。
本発明による製剤を製造するに当り、すべての助剤を必
要量の水中に溶かし、活性度約100000〜200000U/mg（蛋
白質）を有するEPO製剤を添加混合し、アンプル中に滅
菌濾過し、凍結させかつ注意深く低温で凍結乾燥させ
る。得られた製剤は窒素下に０℃で２年間以上、室温で
１年間以上保管し得る。水で再生する際に、製剤は数秒
間で、混濁せずに溶解し、それ故直接静脈内に又は筋肉
内に注射することができあるいは等張溶液（例えば食塩
溶液）で稀釈後に注入することができる。
凍結工程には特別な意味がある。助剤の種類及び量を、
凍結させるべき溶液の共融点が−50〜−30℃であるよう
に選択する。コンピュータ制御される最適化プログラム
により、凍結乾燥の３段階のために次のような最適な条
件が確定した： 凍結時間：−40℃で12〜14時間 主要乾燥：塩水（Sole）温度＋10℃、圧力10-1ミリバー
ル、48〜60時間 後乾燥：塩水（Sole）温度＋20℃、圧力10-3ミリバー
ル、４〜６時間 この際に、Δｐ−測定装置及び伝導性測定部により主要
乾燥を停止すべき時点を知ることは重要である。そうす
ることにより凍結乾燥すべき生成物が速く加温されない
ようにしかつ凍結した溶液の溶解及びそれに関連する活
性損失を回避する。
使用する助剤は、均一に構造化された凍結乾燥すべき凍
結体が得られかつ凍結乾燥の間に多孔性骨格（ケーキ）
が得られ、そのケーキから氷の最適な昇華がとりわけ主
要乾燥の終結時にも可能であるように選択する。後乾燥
は前記のように＋20℃で４〜６時間行なう。この注意深
い処理は、そうでない場合に凍結乾燥すべき物体の活性
損失をもたらすので、重要である。
一般に、このように凍結乾燥した生成物はカール・フイ
ツシヤー（Karl Fischer）によれば含水率約２〜５％を
有する。この残留含水量は、該当する処方で使われる助
剤の種類と量に左右される。
安定化したEPOの水溶液は直接アンプルに充填すること
もできかつ凍結乾燥せずに使用可能な形状として市販す
ることができる。しかしそのために耐久性は凍結乾燥体
に比べて短かく、０℃で約１年間、室温で数カ月であ
る。
実施例 次に本発明を実施例により詳説する。
例１エリトロポエチン2000単位注射用乾燥物質 （ビン35000本のバツチ） 攪拌機を備えた滅菌100l−V2A−二重套釜中で次の助剤
を溶解する： 尿素 700.0g 塩化ナトリウム 70.0g ツイーン20 7.0g リン酸二水素ナトリウム・1H2O 38.4g リン酸水素二ナトリウム・2H2O 350.0g 塩化カルシウム・2H2O 8.4g グリシン 105.0g Ｌ−ロイシン 140.0g Ｌ−イソロイシン 140.0g Ｌ−トレオニン 35.0g Ｌ−グルタミン酸 35.0g Ｌ−フエニルアラニン 70.0g 注射用水 全量70.0l この助剤溶液30lにEPO力価140000U/mlのエトリロポエチ
ン原料バツチ214.3mlを加えかつ最終容量35lにしかつ十
分に攪拌する。残りの助剤溶液を用い濾過系を洗浄す
る。バツチ溶液を孔径0.2μｍの膜フイルターを介して
て滅菌濾過する。この滅菌濾過溶液を1ml−注射ビンに
無菌条件下に充填しかつ次の条件下に凍結乾燥装置中で
凍結乾燥する： 凍結時間：−40℃で12〜14時間 主要乾燥：塩水温度＋10℃、圧力10-1ミリバール、48〜
60時間 後乾燥：塩水温度＋20℃、圧力10-3ミリバール、４〜６
時間 このようにして、嵩高の連続孔の注射用乾燥物質が得ら
れ、これは冷蔵庫で少なくとも２年間、室温で少なくと
も１年間保管可能でありかつ数時間で注射用水2ml中に
混濁せずにかつ粒子を含まずに溶解する。
例２エリトロポエチン凍結乾燥物200単位 （ビン35000本のバツチ） エリトロポエチン 46.7ml（＝7000000U） 塩化ナトリウム 100.0g ツイーン20 10.0g リン酸二水素ナトリウム・1H2O 155.0g リン酸水素二ナトリウム・2H2O 500.0g 塩化カルシウム・2H2O 10.0g 尿素 1000.0g Ｌ−ロイシン 150.0g Ｌ−トレオニン 120.0g Ｌ−フエニルアラニン 165.0g 注射用水 全量70.0l 助剤を注射用水70l中に溶かし、その後35lずつに分け
る。一方の35lに必要量のEPO作用物質を加える。他方の
35lは濾過系の洗浄に使用する。バツチ溶液を膜フイル
ター（孔径0.2μｍ）を介して滅菌濾過する。この滅菌
濾過溶液を1ml−注射ビンに無菌条件下に充填しかつ例
１と同じ条件下に凍結乾燥する。
このようにして、白色で多孔性の水2mlに十分に溶ける
凍結乾燥体が得られ、これは冷蔵庫で２年間、室温で１
年間は著しい活性損失もなく貯蔵することができる。
例３エリトロポエチン凍結乾燥体1000単位 （ビン35000本のバツチ） エリトロポエチン 233.33ml（＝35000000U） 塩化ナトリウム 100.0g ツイーン20 12.0g リン酸二水素ナトリウム・H2O 140.0g リン酸水素二ナトリウム・2H2O 450.0g 塩化カルシウム・2H2O 10.0g 尿素 700.0g グリシン 1050.0g Ｌ−ロイシン 92.0g Ｌ−グルタミン酸 103.0g Ｌ−フエニルアラニン 115.5g 注射用水 全量70.0l 助剤を注射用水70l中に溶かし、その後で35lずつに分け
る。一方の35lに必要量のEPO作用物質を加える。他方の
35lは濾過系の洗浄に使用する。バツチ溶液を膜フイル
ター（孔径0.2μｍ）を介して滅菌濾過する。滅菌濾過
した溶液を1ml−注射ビンに無菌条件下に充填しかつ例
１と同じ条件下に凍結乾燥する。このようにして白色の
多孔性の水2mlに良好に可溶性の凍結乾燥体が得られ、
これは冷蔵庫で２年間あるいは室温で１年間大きな活性
損失なしに貯蔵することができる。
例４エリトロポエチン凍結乾燥体500単位 （ビン35000本のバツチ） エリトロポエチン 116.67ml（＝17500000U） 塩化ナトリウム 70.0g ツイーン20 7.0g リン酸二水素ナトリウム・H2O 38.5g リン酸水素二ナトリウム・2H2O 490.0g 塩化カルシウム・2H2O 5.6g 尿素 840.0g Ｌ−ロイシン 92.4g Ｌ−グルタミン酸 105.0g Ｌ−フエニルアラニン 19.0g 注射用水 全量70.0l 助剤を注射用水70l中に溶かし、それを35lずつに分け
る。一方の35lに必要量のEPO作用物質を加える。他方の
35lは濾過系の洗浄に使用する。バツチ溶液を膜フイル
ター（孔径0.2μｍ）を介して滅菌濾過する。この滅菌
濾過した溶液を1ml−注射ビンに無菌条件下に充填しか
つ例１と同じ条件下に凍結乾燥する。このようにして多
孔性の、水2mlに良好に可溶性の白色凍結乾燥体が得ら
れ、これは冷蔵庫で２年間あるいは室温で１年間大きな
活性損失なしに貯蔵することができる。
例５エリトロポエチン凍結乾燥体750単位 （ビン35000本のバツチ） エリトロポエチン 175ml（＝26250000U） 塩化ナトリウム 100.0g ツイーン20 12.0g リン酸二水素ナトリウム・H2O 140.0g リン酸水素二ナトリウム・2H2O 450.0g 塩化カルシウム・2H2O 10.0g グリシン 1250.0g Ｌ−イソロイシン 98.0g Ｌ−グルタミン酸 130.0g Ｌ−フエニルアラニン 145.0g 注射用水 全量70.0l 助剤を注射用水70l中に溶かし、それを35lずつに分割す
る。一方の35lに必要量のEPO作用物質を加える。他方の
35lは濾過系の洗浄に使用する。バツチ溶液を膜厚フイ
ルター（孔径0.2μｍ）を介して滅菌濾過する。この滅
菌濾過溶液を1ml−注射ビンに無菌条件下に充填しかつ
例１と同じ条件下に凍結乾燥する。このようにして、多
孔性の、水2mlに良好に溶ける白色凍結乾燥体が得ら
れ、これは冷蔵庫で２年間あるいは室温で１年間大きな
活性損失なしに貯蔵することができる。
例６ 種々の安定剤の有効作用を試験するために、主要安定剤
として尿素を含有する、EPO1000U/mlの標準処方にポリ
ビニルピロリドン／蛋白質もしくは種々のアミノ酸を加
えかつ生成物を凍結乾燥する。結果は表１に総括する。
EPOの安定性は凍結乾燥体を35℃もしくは０℃で６週間
貯蔵した後で、G.クリスタル（Krystal）の方法〔“Ex
p.Hematol."、第11巻、649〜660頁（1983年）〕により
マウス脾臓試験で次のように測定した。
体重約20gの雌B6C3F1−マウス（Zentralinstitut fr
Versuchstierkunde、ハノーヴア在）に連続して２日間
フエニルヒドラジンビド クロリド60mg/kgを腹腔内に
注射する。更に３日後に脾臓を摘出し、脾臓細胞を滅菌
完全培地（ダルベツコ変性イーグル培地＋Ｌ−グルタミ
ン584.0mg/l＋２−メルカプトエタノール0.1ミリモル/l
＋牛胎児血清20％）中に懸濁させかつ有核細胞４×106/
mlに希釈する。予め試験物質あるいはEPO−標準をBSA緩
衝液中に溶解してその都度の好適な濃度で添加した懸濁
液を微量滴定プレートに分配する（凹部１個当り0.2m
l）。恒温保持（22時間、37℃、空気＋15％CO2）した後
で、凹部１個当り１μCiの3H−エチル−チミジン20μｌ
を加え、再び37℃で２時間恒温保持する。その後、その
内容物を細胞ハーヴエスターを用いて案内しかつ蒸留水
で洗浄する。3H−チミジンの導入をβ−シンチレーシヨ
ンカウンターで計測しかつ標準製剤に対して評価した。
常用標準として、遺伝学研究所（Genetics Institute,C
ambridge、マサチユーセツツ州、米国）のEPO112U/ml
（及び蛋白質503mg/ml）を含有するPOO9EPOH標準〔WEO
“International Reference Preparation of Erythropo
ietin,Human,Urinary for Bioassay（第２回I.R.P.,197
1年制定）”のEPO参照標準に対して調製〕を使用した。
標準濃度は範囲10〜100mU/mlであつた。
EPO活性について試験すべき凍結乾燥体を初めに各アン
プルを注射用水2ml中に溶かし、更に常用標準の場合と
同様にBSA緩衝液〔NaCl8.75g、CaCl2・2H2O1.95g、BSA
（Calbiochem社製牛血清アルブミン）1.00g、注射用水
全量１〕で希釈した。3H−メチル−チミジン（特異活
性:2Ci/ミリモル）はニユー・イングランド・ニユーク
リア（New England Nuclear）から入手した。
例７ 例６と同じように試験したが、若干変更した処方に尿素
及び異なるアミノ酸もしくは混合物を加えた。比較のた
めに、ヨーロツパ特許第178665号に相当するマンニツト
含有処方を一緒に試験した。結果は表２に記載した。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 47/34 Ｊ (72)発明者 ハンス‐イエルク・マルクル ドイツ連邦共和国エレルシユタツト・アウ フ・デル・クレー ６ (72)発明者 フリツツ・デマー ドイツ連邦共和国ヒルシユベルク‐ロイテ ルスハウゼン・カスタニエンヴエーク 21

Claims (10)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】エリトロポエチン、生理的に認容性の緩衝
    剤並びに場合により錯体ビルダー、等張性調節剤、塩化
    カルシウム及び注射用の他の常用の物質を含有する貯蔵
    安定で認容性のエリトロポエチン製剤において、注射剤
    形で 尿素 5 〜50g/1 アミノ酸 1 〜50g/1 非イオン性湿潤剤 0.05〜 5g/1 を含有することを特徴とする、貯蔵安定で認容性のエリ
    トロポエチン製剤。
  2. 【請求項２】アミノ酸が、グリシン、Ｌ−アラニン、Ｌ
    −アルギニン、Ｌ−ロイシン、Ｌ−２−フェニルアラニ
    ン、Ｌ−グルタミン酸、Ｌ−トレオニン及び／又はＬ−
    イソロイシンを含有する混合物である請求項１記載の製
    剤。
  3. 【請求項３】湿潤剤としてポリエチレンソルビタンラウ
    レートを使用する請求項１又は２記載の製剤。
  4. 【請求項４】製剤が凍結乾燥形で存在する請求項１から
    ３までのいずれか１項記載の製剤。
  5. 【請求項５】製剤が液状の注射形で存在する請求項１か
    ら３までのいずれか１項記載の製剤。
  6. 【請求項６】注射単位用量１〜5ml当りエリトロポエチ
    ン100〜1000000Uを含有する請求項１から５までのいず
    れか１項記載の製剤。
  7. 【請求項７】注射単位用量１〜5ml当りエリトロポエチ
    ン100〜20000Uを含有する請求項７記載の製剤。
  8. 【請求項８】エリトロポエチン、生理的に認容性の緩衝
    剤並びに場合により錯体ビルダー、等張性調節剤、塩化
    カルシウム及び注射用の他の常用の物質を含有する貯蔵
    安定で認容性のエリトロポエチン製剤を製造する方法に
    おいて、初めに尿素５〜50g/1、アミノ酸１〜50g/1及び
    非イオン性湿潤剤0.05〜5g/1の溶液を製造し、常用の助
    剤をこの溶液に加え、かつ引続いてエリトロポエチンを
    添加混合することを特徴とする、貯蔵安定で認容性のエ
    リトロポエチン製剤の製法。
  9. 【請求項９】初めにすべての助剤を水中に溶かし、これ
    にエリトロポエチンを添加し、アンプル中の混合物を滅
    菌濾過しかつ−20℃を下廻る温度で注意深く凍結乾燥す
    る請求項８記載の方法。
  10. 【請求項１０】初めにすべての助剤を水中に溶かし、こ
    れにエリトロポエチンを添加しかつアンプルに充填する
    請求項８記載の方法。
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Families Citing this family (71)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5981485A (en) * 1997-07-14 1999-11-09 Genentech, Inc. Human growth hormone aqueous formulation
NZ232813A (en) * 1989-03-10 1992-08-26 Snow Brand Milk Products Co Ltd Human fibroblast glycoprotein, cell differentiation, blood vessel endothelial cell growth factor, cellular immunology inforcing factor of 78 or 74 thousand daltons plus or minus two thousand daltons
JPH0341033A (ja) * 1989-07-07 1991-02-21 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 安定なモチリン類含有製剤
DE3939346A1 (de) * 1989-11-29 1991-06-06 Behringwerke Ag Arzneimitel zur subkutanen oder intramuskulaeren applikation enthaltend polypeptide
DE4014654A1 (de) * 1990-05-08 1991-11-14 Behringwerke Ag Galenische waessrige formulierungen von erythropoietin und ihre verwendung
DE4126984A1 (de) * 1991-08-15 1993-02-18 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur herstellung von humanprotein-enthaltenden, gut vertraeglichen arzneimitteln fuer infusions- oder injektionszwecke
DE4126983A1 (de) * 1991-08-15 1993-02-18 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur herstellung von humanprotein-enthaltenden, konservierten arzneimitteln fuer infusions- oder injektionszwecke
US5912015A (en) * 1992-03-12 1999-06-15 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Modulated release from biocompatible polymers
US5716644A (en) * 1992-06-11 1998-02-10 Alkermes, Inc. Composition for sustained release of non-aggregated erythropoietin
US20030035845A1 (en) * 1992-06-11 2003-02-20 Zale Stephen E. Composition for sustained release of non-aggregated erythropoietin
US5674534A (en) * 1992-06-11 1997-10-07 Alkermes, Inc. Composition for sustained release of non-aggregated erythropoietin
US5661125A (en) * 1992-08-06 1997-08-26 Amgen, Inc. Stable and preserved erythropoietin compositions
EP0582933A1 (de) * 1992-08-11 1994-02-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Therapeutisches System zur parenteralen Verabreichung von hämatopoetischen Wachstumsfaktoren
DE4242919A1 (de) * 1992-12-18 1994-06-23 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur Herstellung von lagerstabilen wässrigen pharmazeutischen Zubereitungen von G-CSF
US5358708A (en) * 1993-01-29 1994-10-25 Schering Corporation Stabilization of protein formulations
US6372716B1 (en) * 1994-04-26 2002-04-16 Genetics Institute, Inc. Formulations for factor IX
FR2719479B1 (fr) * 1994-05-04 1996-07-26 Sanofi Elf Formulation stable lyophilisée comprenant une protéine: kit de dosage.
JP2747979B2 (ja) * 1994-08-19 1998-05-06 雪印乳業株式会社 ヒト由来の糖蛋白質からなる生理活性因子を有効成分とする医薬
IL116085A (en) * 1994-12-16 1999-12-31 Ortho Pharma Corp Spray dried erythropoietin
ZA966075B (en) * 1995-07-27 1998-01-19 Genentech Inc Protein formulation.
WO1997007788A2 (en) * 1995-08-31 1997-03-06 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Composition for sustained release of an agent
DE19539574A1 (de) * 1995-10-25 1997-04-30 Boehringer Mannheim Gmbh Zubereitungen und Verfahren zur Stabilisierung biologischer Materialien mittels Trocknungsverfahren ohne Einfrieren
US20030138402A1 (en) * 1995-12-25 2003-07-24 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. Dry compositions
US5770700A (en) * 1996-01-25 1998-06-23 Genetics Institute, Inc. Liquid factor IX formulations
TW518219B (en) * 1996-04-26 2003-01-21 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Erythropoietin solution preparation
TR199901968T2 (xx) * 1996-12-24 1999-12-21 Biogen, Inc. Sabit s�v� interferon form�lleri.
US20030190307A1 (en) 1996-12-24 2003-10-09 Biogen, Inc. Stable liquid interferon formulations
DE19716154A1 (de) * 1997-04-18 1998-10-22 Boehringer Mannheim Gmbh Stabile pharmazeutische Darreichungsform für Peptide, Proteine und Nukleinsäuren
RU2152206C1 (ru) * 1997-05-22 2000-07-10 Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Таблетированная форма рекомбинантного человеческого эритропоэтина для перорального применения и способ ее получения
PT986644E (pt) * 1997-07-23 2007-01-31 Roche Diagnostics Gmbh Preparação de eritropoietina por activação genética endógena com promotores virais
US6548296B1 (en) * 1997-07-23 2003-04-15 Roche Diagnostics Gmbh Methods for identifying human cell lines useful for endogenous gene activation, isolated human lines identified thereby, and uses thereof
AR019025A1 (es) * 1998-04-09 2001-12-26 Roche Diagnostics Gmbh Uso de eritropoyetina en bajas dosis para producir un preparado farmaceutico para el tratamiento de hemocromatosis, preparado farmaceutico combinadoutilizado segun dicho uso y envase farmaceutico unitario que contiene al referido preparado farmaceutico combinado
EP0965349A1 (de) * 1998-06-18 1999-12-22 Roche Diagnostics GmbH Verwendung von Erythropoietin zur Behandlung von Hämochromatosen
RU2128517C1 (ru) * 1998-07-20 1999-04-10 Колобков Сергей Леонидович Стабилизированный водный раствор эритропоэтина
JP2000247903A (ja) * 1999-03-01 2000-09-12 Chugai Pharmaceut Co Ltd 長期安定化製剤
CA2369444C (en) * 1999-04-09 2009-08-18 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Pharmaceutical compositions of erythropoietin
US7345019B1 (en) * 1999-04-13 2008-03-18 The Kenneth S. Warren Institute, Inc. Modulation of excitable tissue function by peripherally administered erythropoietin
AU6875900A (en) 1999-09-08 2001-04-10 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Protein solution preparation and method of stabilizing the same
RU2182141C2 (ru) * 2000-03-20 2002-05-10 Братский государственный технический университет Композиция для изготовления легкобетонных изделий
AU2005225151B2 (en) * 2000-05-15 2008-05-29 F. Hoffmann-La Roche Ag New pharmaceutical composition
ME00673B (me) * 2000-05-15 2011-12-20 Hoffmann La Roche Nova farmaceutska smjesa
JP5485489B2 (ja) * 2000-08-11 2014-05-07 中外製薬株式会社 抗体含有安定化製剤
US20030072737A1 (en) * 2000-12-29 2003-04-17 Michael Brines Tissue protective cytokines for the protection, restoration, and enhancement of responsive cells, tissues and organs
US7767643B2 (en) 2000-12-29 2010-08-03 The Kenneth S. Warren Institute, Inc. Protection, restoration, and enhancement of erythropoietin-responsive cells, tissues and organs
RU2191594C1 (ru) * 2001-04-03 2002-10-27 Григорян Седа Суреновна Средство и способ повышения резистентности к инфекции
RU2192882C1 (ru) * 2001-04-18 2002-11-20 Эпштейн Олег Ильич Лекарственное средство и способ лечения патологического синдрома, обусловленного нарушением кроветворения
EG24184A (en) * 2001-06-15 2008-10-08 Otsuka Pharma Co Ltd Dry powder inhalation system for transpulmonary
DE10149030A1 (de) 2001-10-05 2003-04-10 Viscum Ag Stabile galenische gefriergetrocknete Arzneimittelzubereitung von rViscumin
US7132100B2 (en) 2002-06-14 2006-11-07 Medimmune, Inc. Stabilized liquid anti-RSV antibody formulations
US7425618B2 (en) * 2002-06-14 2008-09-16 Medimmune, Inc. Stabilized anti-respiratory syncytial virus (RSV) antibody formulations
SI21257A (sl) * 2002-07-17 2004-02-29 LEK farmacevtska dru�ba d.d. Stabilni farmacevtski pripravek, ki vsebuje eritropoietin
DE10234192B4 (de) * 2002-07-26 2009-11-26 Epoplus Gmbh Co.Kg Verwendung von Erythropoetin
US20040208869A1 (en) * 2003-01-30 2004-10-21 Medimmune, Inc. Uses of anti-integrin alphanubeta3 antibody formulations
EP1641486B1 (en) * 2003-06-10 2012-04-18 LG Life Sciences Ltd. Stable, aqueous solution of human erythropoietin, not containing serum albumin
FR2857267B1 (fr) * 2003-07-09 2006-03-10 Lab Francais Du Fractionnement Formulation stabilisante et solubilisante pour les proteines cryoprecipitables.
KR100560697B1 (ko) * 2003-08-06 2006-03-16 씨제이 주식회사 알부민을 함유하지 않는 에리스로포이에틴 제제
WO2005032467A2 (en) * 2003-09-29 2005-04-14 Warren Pharmaceuticals, Inc. Tissue protective cytokines for the treatment and prevention of sepsis and the formation of adhesions
US7141544B2 (en) * 2003-10-10 2006-11-28 Baxter International, Inc. Stabilization of pharmaceutical protein formulations with small peptides
EP1537876A1 (en) * 2003-12-01 2005-06-08 BioGeneriX AG Erythropoietin solution formulation
DE202004020676U1 (de) * 2004-03-10 2005-11-10 Bioceuticals Arzneimittel Ag Erythropoietin-Flüssigformulierung
US7772182B2 (en) * 2004-08-05 2010-08-10 Alza Corporation Stable suspension formulations of erythropoietin receptor agonists
DE102005033250A1 (de) 2005-07-15 2007-01-18 Bioceuticals Arzneimittel Ag Verfahren zur Reinigung von G-CSF
PE20110543A1 (es) * 2008-08-15 2011-08-04 Ironwood Pharmaceuticals Inc Formulacion solida oral que comprende linaclotida, cation de calcio y leucina
CA2770077A1 (en) * 2009-08-06 2011-02-10 Ironwood Pharmaceuticals, Inc. Formulations comprising linaclotide
US20130059797A1 (en) * 2009-11-03 2013-03-07 Forest Laboratories Holdings Limited Linaclotide for the Treatment of Chronic Constipation
BR112012017982A2 (pt) * 2010-01-19 2016-05-03 Hanmi Science Co Ltd formulações líquidas para conjugado de eritropoietina de longa ação
UA108636C2 (xx) 2010-02-17 2015-05-25 Пептид
EP2603232B1 (en) 2010-08-11 2019-09-25 Ironwood Pharmaceuticals, Inc. Stable formulations of linaclotide
MX347354B (es) 2011-08-17 2017-04-24 Ironwood Pharmaceuticals Inc Tratamientos para trastornos gastrointestinales.
EA022327B1 (ru) * 2013-01-04 2015-12-30 Общество С Ограниченной Ответственностью "Рубикон" Инъекционное ветеринарное средство в форме раствора для борьбы с полиинвазиями животного и способ его получения
US10052361B2 (en) 2014-03-29 2018-08-21 Intas Pharmaceuticals Ltd Liquid pharmaceutical composition of conjugated erythropoietin

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3865801A (en) * 1973-06-15 1975-02-11 Atomic Energy Commission Stabilization of urinary erythropoietin using sodium p-aminosalicylate and extracting into phenol
JPS6197229A (ja) * 1984-10-18 1986-05-15 Chugai Pharmaceut Co Ltd 安定なエリトロポエチン製剤
EP0214281B1 (en) * 1985-03-06 1992-09-09 Survival Technology, Inc. Protein absorption enhancing agents

Also Published As

Publication number Publication date
FI884051A0 (fi) 1988-09-02
CS274681B2 (en) 1991-09-15
KR960009929B1 (ko) 1996-07-25
LV10178A (lv) 1994-10-20
IL87628A0 (en) 1989-01-31
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NO178687B (no) 1996-02-05
FI884051L (fi) 1989-03-06
AU2173988A (en) 1989-04-27
PH25618A (en) 1991-08-08
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ZA886528B (en) 1989-05-30
PT88417B (pt) 1992-10-30
DK174811B1 (da) 2003-12-01
IL87628A (en) 1993-07-08
EP0306824B1 (de) 1992-06-24
CS590188A2 (en) 1990-12-13
RU2043118C1 (ru) 1995-09-10
FI93517B (fi) 1995-01-13
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DE3729863A1 (de) 1989-03-16
CN1031801A (zh) 1989-03-22
KR890004718A (ko) 1989-05-09
LV10178B (en) 1995-04-20
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NO883926L (no) 1989-03-06
HUT47863A (en) 1989-04-28
ES2051806T3 (es) 1994-07-01
JPS6471818A (en) 1989-03-16
NO178687C (no) 1996-05-15
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PL157944B1 (en) 1992-07-31
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UA26123A (uk) 1999-06-07
PT88417A (pt) 1989-07-31
DD273004A5 (de) 1989-11-01
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US4992419A (en) 1991-02-12
DK483188D0 (da) 1988-08-30
DE3872334D1 (de) 1992-07-30

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