JPH0791185B2

JPH0791185B2 - 抗アンドロゲン剤

Info

Publication number: JPH0791185B2
Application number: JP30861087A
Authority: JP
Inventors: 昌庸黒野; 秀史山川; 卓也越坂; 建彦鈴木; 英一加藤; 誠子大石; 國夫八木
Original assignee: 株式会社ビタミン研究所
Priority date: 1987-07-08
Filing date: 1987-12-08
Publication date: 1995-10-04
Anticipated expiration: 2010-10-04
Also published as: JPH01104011A

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は医薬に係り、殊に抗アンドロゲン剤に係る。

（従来の技術）抗アンドロゲン作用とはテストステロンの男性ホルモン
活性を軽減させる作用であり、これは５α−ジヒドロテ
ストステロン（５α−DHT）とアンドロゲン受容体との
結合を阻害すること、テストステロンを５α−DHTに還
元する酵素の作用を阻害すること等によりもたらされ
る。

アンドロゲン依存性疾患例えば多毛症、痙瘡、男性型禿
頭、前立腺肥大症、前立腺腫瘍、男児性早熟等の治療及
び予防のために現在用いられている抗アンドロゲン剤
は、主として、ステロイドを母核とする化合物を有効成
分とするものである。

（発明が解決しようとする問題点及び発明の目的）従来の抗アンドロゲン剤は、ステロイドを母核とする化
合物を有効成分としているために、その副作用の発現を
抑制する観点から、使用量等に制限を受けているのが実
情である。

従って、本発明の目的は、ステロイド型母核を有してい
ない新規なタイプの抗アンドロゲン剤を提供することに
ある。

（問題点を解決し、目的を達成する手段及び作用）本発明によれば、上記の問題点は1,3,5,8−テトラヒド
ロキシキサントン、1,3,6,8−テトラヒドロキシキサン
トン、1,3,5−トリヒドロキシキサントン、1,3,6−トリ
ヒドロキシキサントン、1,3,8−トリヒドロキシキサン
トン、1,3−ジヒドロキシキサントン及び、1,6−ジヒド
ロキシキサントンから選択された少なくとも１種類の化
合物を有効成分とする抗アンドロゲン剤により解決さ
れ、上記の目的が達成される。

即ち、本発明者等は、ステロイド型母核を有していない
新規な抗アンドロゲン物質を見い出すために鋭意研究を
重ねた結果、1,3,5,8−テトラヒドロキシキサントン、
1,3,6,8−テトラヒドロキシキサントン、1,3,5−トリヒ
ドロキシキサントン、1,3,6−トリヒドロキシキサント
ン、1,3,8−トリヒドロキシキサントン、1,3−ジヒドロ
キシキサントン及び1,6−ジヒドロキシキサントンが、
このような物質であることを確認して発明を完成するに
至ったのである。

本発明による抗アンドロゲン剤の有効成分である上記の
各化合物は自体公知であり、或る種の植物に含有されて
おり、この場合には常法による抽出精製により得ること
ができる。例えば、 1,3,5,8−テトラヒドロキシキサントン（慣用名：デス
メチルベリディフォリン）はセンブリ、ムラサキセンブ
リ、イヌセンブリ、ニイタカセンブリ、チレッタ草等に
含有されており、これ等を原料とし、富森等の手法であ
る「薬学雑誌」第89巻、第410−417頁、1969年に記載の
方法により抽出精製することができる。

尚、本発明による抗アンドロゲン剤の有効成分である上
記の各化合物は、その構造が比較的簡単であるために化
学合成によって製造することもできる。例えば1,3,6−
トリヒドロキシキサントンはP.K.Grover等の方法、即ち
「J.Chem.Soc.」第3982−3985頁、1955年に記載の方法
により、レゾルシノールと2,4,6−トリヒドロキシ安息
香酸とを用いて合成することができる。

（剤型及び投与量）本発明による抗アンドロゲン剤に剤型的制限はなく錠
剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、カプセル剤、内服液剤、坐
剤、外皮用剤（リニメント剤、ローション剤、外用クリ
ーム剤乃至軟膏剤）等であることができ、この製剤化は
常法により行うことができる。投与量は疾患の種類、症
状、剤型、患者の年齢等により異なるが、成人を対象と
する場合に、有効成分の投与量として経口投与では0.00
2−10mg/日、坐剤では0.005−25mg/日を１−４回に分け
て投与するのが適当である。又外皮用剤では有効成分を
0.00001−0.1重量％含有する製剤となし、これを症状に
応じ１日数回塗布させることにより投与するのが好まし
い。

（実施例等）次に、薬効試験例及び製剤例により、本発明を更に詳細
に説明する。

薬効試験例１（アンドロゲン受容体結合阻害作用）本試験はTakayasu等の方法である「J.Steroid Bioche
m.」第19巻、第1141−1146頁、1983年に記載の方法に準
拠して行った。

ａ）アンドロゲン受容体溶液の調製雄性シリアンハムスターを去勢し、16時間後にflank gl
andの皮脂腺を摘出し、50mM−トリス塩酸緩衝液（pH7.
4）、1.5mM−EDTA、1mM−DTT、10mM−Na₂MoO₄及び10％
（W/V）グリセロールを含有する５−10倍容の溶液で上
記の皮脂腺をホモジネートした後に、3000rpm、０−４
℃で10分間遠心して上清を採取し、この上清を更に3000
0rpm、０−４℃で１時間遠心して上清を採取した。この
２回目に得られた上清をアンドロゲン受容体溶液として
用いる。

ｂ）アンドロゲン受容体結合阻害活性の測定1nM
［³H］−R1881（メチルトリエノロン、86.0Ci/mmol）
と、１μＭトリアムシノロンアセトニドと、上記ａ）項
による受容体溶液と、種々の検体試料との混合溶液（全
量150μｌ）を０℃で16時間インキュベートした後に、
0.5％の活性炭及び0.05％量のデキストランＴ−70を含
有する溶液500μｌを添加して０℃で10分間放置し、次
いで3000rpmで10分間遠心して上清を得た。この上清300
μｌを採取し、液体シンチレーションカクテルと混合し
た後に、液体シンチレータを用いて受容体への［³H］−
R1881の特異的総合量を測定し、得られたデータを次式
に導入し阻害率として阻害活性を求め、この阻害率から
50％阻害濃度を算出した。

阻害率（％）＝［（ｃ−ｓ）/c］x100 c:検体試料を添加しない場合の受容体蛋白と［³H］−R1
881との特異的結合量 s:検体試料を添加した場合の受容体蛋白と［³H］−R188
1との特異的結合量ｃ）結果結果は下記の表１に示される通りであった。

検体： A;1,3,5,8−テトラヒドロキシキサントン B;1,3,6,8−テトラヒドロキシキサントン C;1,3,5−トリヒドロキシキサントン D;1,3,6−トリヒドロキシキサントン E;1,3,8−トリヒドロキシキサントン F;1,3−ジヒドロキシキサントン G;1,6−ジヒドロキシキサントン薬効試験例２（５α−リダクターゼ阻害作用）ａ）５α−リダクターゼ標品の調整この標品の調整は、J.D.Wilson等の方法である「J.Bio
l.Chem.」第246巻、第2544−2593頁、1971年に記載の方
法に準拠して、下記のように行われた。

ウィスター系の雄性ラット（体重:260−290g）から前立
腺を摘出し、該前立腺の皮膜及び脂肪組織を取り除い
て、１匹当り約480mgの前立腺を得た。この前立腺1g当
り3.3mlの割合で、0.88Mスクロース−1.5mM CaCl₂溶液
を添加し、ウルトラトラックス（Janke ＆ Kunke社
製）及びテフロンホモジナイザーを用いて磨砕した。得
られたホモジネートをガーゼにより濾過し、濾液を500x
gで10分間遠心した後に上清を除去し、用いた前立腺1g
当り4.1mlの割合で、上記のスクロース−CaCl₂溶液を沈
渣に添加して該沈渣を懸濁させ、この懸濁液を550xgで1
0分間遠心した後に、上清を除去した。この操作、即ち
沈渣の懸濁−遠心処理−上清除去による沈渣の洗浄操作
を５回繰り返した。このようにして得られた沈渣に、下
記の組成を有する緩衝液Ａを、用いた前立腺1g当り0.7m
lの割合で添加して懸濁させた後に超音波処理した。

緩衝液A:0.01Mトリス塩酸緩衝液（pH7.4）、 50μM EDTA、 5mM MgCl₂及び 500μＭメルカプトエタノール。

超音波処理後に、溶液を12000xgで10分間遠心し、沈渣
を集めた。用いた前立腺1g当り0.3mlの割合で、下記の
緩衝液Ｂを沈渣に添加し、得られた懸濁液を更に超音波
処理し、次いで12000xgで10分間遠心した後に上清（一
次上清）を採取した。遠心処理により分離された沈渣に
関し、上記と同様にして緩衝液Ｂを添加し、超音波処理
及び遠心処理を行って二次的な上清を採取し、この上清
と先に採取した一次上清とを合併して５α−リダクター
ゼ標品（以下、単に「酵素溶液」と称する）とした。

緩衝液B:0.3M NaCl及び 0.1M Na₂HPO₄−NaH₂PO₄（pH7.0）。

尚、上記の諸操作は０−４℃の温度条件下で行われた。

上記の諸操作を実施した処、ラット30匹から酵素溶液が
11ml得られた。この酵素溶液の蛋白濃度をLowry法によ
り測定した処、5.1mg/mlであった。

ｂ）高速液体クロマトグラフィー−蛍光分析による５
α−リダクターゼ活性阻害の測定本試験において、ステロイド類の蛍光標識及び高速液体
クロマトグラフィーによる分析操作は後藤等の方法（特
開昭58−57356公報）を参照して行った。

５α−リダクターゼ活性を測定する場合には、基質とし
て、従来、一般的には放射性標識を施したテストステロ
ンが用いられてきたが、本試験においては、前出のJ.D.
Wilson等の方法において用いられている４−プレグネン
−17α,21−ジオール−3,20−ジオンを基質として用い
た。

操作方法は下記の通りである。

0.583μM4−プレグネン−17α,21−ジオール−3,20−ジ
オンと、種々の検体試料（検体濃度:100μＭ）と、100
μM NADPHと、0.04M燐酸ナトリウム緩衝液（pH6.6）
と、上記のａ）項に記載の酵素溶液200μｌとの混合溶
液（全量:1ml）を35℃において１時間インキュベートし
た。次いで、酢酸エチルを添加して酵素反応を停止させ
ると共に、反応溶液から基質及びその還元生成物である
５α−プレグナン−17α,21−ジオール−3,20−ジオン
を抽出した。この抽出液を濃縮して乾固させ、残渣に１
−アンスロイルニトリル0.87μmolと、キヌクリジン3.6
μmolと、アセトニトリル200μｌとを添加し、60℃にお
いて30分間反応させた。窒素気流下に溶媒を除去し、残
渣をヘキサンに溶解させた後に、0.04N水酸化ナトリウ
ム水溶液を含浸させたエキストレルート１カラム（Merc
k社製）に通して過剰の標識試薬及び夾雑物を除去した
後に、ジクロロメタンを用いて溶出させることにより、
基質及びその還元生成物である５α−プレグナン−17
α,21−ジオール−3,20−ジオンにおける21位のヒドロ
キシ基が１−アンスロイル化された化合物を得た。

これら化合物を下記に示される条件下で、高速液体クロ
マトグラフィー（HPLC）に付して分離定量することによ
り４−プレグネン−17α,21−ジオール−3,20−ジオン
が５α−プレグナン−17α,21−ジオール−3,20−ジオ
ンに還元される量を測定した。

HPLC条件：装置；島津LC−4A（島津製作所製）、検出器；島津蛍光分光光度計RF−530（島津製作所
製）、EX379nm、EM459nm、カラム;COSMOSIL 5C18（4.6×100mm）、移動相；水／メタノール（14:86）、流速;1.0ml/min.、温度;25℃。

得られたデータを次式に導入し、阻害率として阻害活性
を算出した。

阻害率（％）＝（１−a/b）×100 a:検体試料を添加した場合の５α−プレグナン−17α,2
1−ジオール−3,20−ジオンの生成量 a:検体試料を添加しない場合の５α−プレグナン−17
α,21−ジオール−3,20−ジオンの生成量ｃ）結果結果は下記の表２に示される通りであった。

検体： A:1,3,5,8−テトラヒドロキシキサントン、 B:1,3,6,8−テトラヒドロキシキサントン、 C:1,3,5−トリヒドロキシキサントン、 D:1,3,6−トリヒドロキシキサントン、 E:1,3,8−トリヒドロキシキサントン、 F:1,3−ジヒドロキシキサントン、及び G:1,6−ジヒドロキシキサントン製剤例１（リニメント剤）処方： 1,3,5,8−テトラヒドロキシキサントン 2.5mg トラガント 50 g グリセリン 30 ml エタノール 100 ml精製水残部全量 1000 ml 乳鉢にエタノールを採取し、1,3,5,8−テトラヒドロキ
シキサントンを添加して溶解させ、これにトラガントを
添加して混合し、次にグリセリンを添加して混合し、更
に精製水500mlを添加しながら混合して糊状物となし、
その後に更に精製水を添加して全量を1000mlとし混合す
ることによりリニメント剤を製造した。製剤例２（ローション剤）処方： 1,3,5,8−テトラヒドロキシキサントン 0.5mg ヒドロキシプロピルセルロース１ g マクロゴール400 10 ml エタノール 10 ml精製水残部全量 100 ml 1,3,5,8−テトラヒドロキシキサントンをエタノールに
溶解させ、マクロゴール400を添加して充分に混和し、
これにヒドロキシプロピルセルロースを添加して混和し
た後に精製水を添加して全量を100mlとなし、次いで真
空ホモジナイザーで処理してローション剤を製造した。

参考例（製剤用組成物） 1,3,5,8−テトラヒドロキシキサントンを100倍量のエタ
ノールに溶解させ、これに５倍量のデキストリンを添加
し充分に混和して均一物となし、乾燥させて製剤用組成
物を得た。

尚、上記の製剤用組成物においては担体としてデキスト
リンが用いられているが、これは自体公知の他の製剤用
担体例えば澱粉、乳糖、軽質無水珪酸、メタ珪酸アルミ
ン酸マグネシウム等に代替することもできる。製剤例３（外用クリーム剤乃至軟膏剤）処方：製剤用組成物（参考例） 30 （ｇ）セバシン酸ジエチル８鯨蝋５ポリオキシエチレンオイルエーテル燐酸ナトリウム６
安息香酸ナトリウム 0.5 ワセリン残部全量 100 上記の処方で且つ常法により外用クリーム剤乃至軟膏剤
を製造した。製剤例４（坐剤）処方：製剤用組成物（参考例） 60（mg）油脂製基剤（カカオ脂） 1640 １個当り 1700 上記の処方で且つ常法により成形して坐剤を製造した。製剤例５（散剤）処方：製剤用組成物（参考例） 30（mg）乳糖 800 コーンスターチ 170 １包当り 1000 上記の処方で且つ常法により散剤を製造した。製剤例６（顆粒剤）処方：製剤用組成物（参考例） 30（mg）乳糖 754 コーンスターチ 200 ヒドロキシプロピルセルロース 16 １包当り 1000 上記の処方で且つ常法により顆粒剤を製造した。製剤例７（錠剤、コーティング錠及び糖衣錠）処方：製剤用組成物（参考例） 30 （mg）結晶セルロース 40 乳糖 52.5 コーンスターチ 30 ステアリン酸マグネシウム 7.5 １錠当り 160 上記の処方で且つ常法により錠剤を製造した。

一方、このようにして得た錠剤の一部について下記のコ
ーティング処方（重量比）で且つ常法により水溶性皮膜
コーティング錠となした。

水溶性被膜コーティング処方：ヒドロキシプロピルセルロース 40 マクロゴール6000 10 酸化チタン３タルク５精製水 942 更に、上記の錠剤の一部について下記のサブコーティン
グ処方及びカラーリング処方（重量比）で且つ常法によ
り糖衣錠となした。

サブコーティング処方：白糖 40 ゼラチン 0.5 アラビアゴム 1.4 沈降炭酸カルシウム 22 タルク 15.6 精製水 20 カラーリング処方：白糖 10 酸化チタン 73 レーキ色素 56 精製水５製剤例８（硬カプセル剤）処方：製剤用組成物（参考例） 30（mg）乳糖 104 コーンスターチ 40 ヒドロキシプロピルセルロース 16 １カプセル当り 190 製剤用組成物に乳糖とコーンスターチとを添加して混合
し、これにヒドロキシプロピルセルロースの水溶液を添
加して練合し、押出し造粒機を用いて常法により顆粒を
製造した。この顆粒をゼラチン硬カプセルに充填して硬
カプセル剤を製造した。

（発明の効果）本発明による抗アンドロゼン剤の有効成分である1,3,5,
8−テトラヒドロキシキサントン、1,3,6,8−テトラヒド
ロキシキサントン、1,3,5−トリヒドロキシキサント
ン、1,3,6−トリヒドロキシキサントン、1,3,8−トリヒ
ドロキシキサントン、1,3−ジヒドロキシキサントン及
び1,6−ジヒドロキシキサントンは、アンドロゲン依存
性疾患の治療及び予防に従来用いられてきた薬物と異な
り、ステロイド型母核を有していないので、使用安全性
が高い。

尚、これ等の化合物自体は公知の化合物であり、種々の
植物から抽出精製することができ、又構造も簡単であり
化学合成も可能であるので、本発明による抗アンドロゲ
ン剤は廉価で提供することができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者加藤英一愛知県名古屋市中村区千成通３丁目36 (72)発明者大石誠子岐阜県岐阜市松風町１丁目９ (72)発明者八木國夫愛知県名古屋市名東区西里町２丁目21

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】1,3,5,8−テトラヒドロキシキサントン、
1,3,6,8−テトラヒドロキシキサントン、1,3,5−トリヒ
ドロキシキサントン、1,3,6−トリヒドロキシキサント
ン、1,3,8−トリヒドロキシキサントン、1,3−ジヒドロ
キシキサントン及び1,6−ジヒドロキシキサントンから
選択された少なくとも１種類の化合物を有効成分として
いることを特徴とする、抗アンドロゲン剤。