JPH0792459B2 - 免疫学的試験方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、免疫学的抗原抗体反応
に基づいて種々の疾病の診断および血液型等のタイピン
グを行なうための免疫学的試験方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】免疫学的な凝集反応に基づいて検体サン
プル中に存在する分析すべき抗原または抗体を検出する
試験方法においては、反応容器の底面に担体粒子による
沈降像を形成するマイクロタイター法が古くから普及し
ている。マイクロタイター法では、通常、半球状または
円錘状の凹面を底部とするウエルを多数設けたマイクロ
プレートが使用される。かかるマイクロタイター法にお
いては、担体粒子をいかに迅速に沈降させながら凝集反
応を行うかが大きな課題である。特開平２−１２４４６
４号公報は、磁性担体を用いて迅速に沈降像を形成させ
る方法である。この従来技術を第１図（Ａ），（Ｂ）に
基づいて説明する。

【０００３】第１図（Ａ）はマイクロプレートを上方よ
り見た図であり、第１図（Ｂ）はマイクロタイター法を
行う際のマイクロプレートおよび磁石の配置を示す平面
図である。第１図（Ａ）および（Ｂ）に示すように、マ
イクロプレート１のウエル２は半球状底面を形成し、そ
の下方には平坦面を水平に向けた円盤形状の磁石４が支
持台３の上に固定されている。かかる構成において、マ
イクロプレート１のウエル２に検体サンプルの所定量お
よび磁性担体を含む試薬の所定量を分注して凝集反応を
行う。ここで、磁性担体には前処理として、分析すべき
抗原または抗体と結合する物質が予め固定されている。

【０００４】第２図（Ａ）および第３図（Ａ）はマイク
ロタイター法による反応原理を示す図であり、第２図
（Ｂ）および第３図（Ｂ）は同法により得られる沈降像
を示す図である。まず、検体サンプル中に分析すべき抗
原または抗体が存在する場合、第２図（Ａ）のように、
沈降した複数の磁性担体５が分析すべき抗原または抗体
６を介して結合し、凝集塊を形成する。凝集塊を形成し
た磁性担体５は、第２図（Ｂ）に示したように、ウエル
底面に一様に広がった陽性（＋）の沈降像を形成する。
一方、検体サンプル中に分析すべき抗原または抗体が存
在しない場合、第３図（Ａ）のようにマイクロプレート
１のウエル底面の中心に非凝集の磁性担体５が沈降す
る。沈降した非凝集の磁性担体５は、第３図（Ｂ）に示
したように、ウエル中心にボタン状に集まった陰性
（−）の沈降像を形成する。このように、ウエル底面に
形成した沈降像は、肉眼または光学的測定機によって、
陽性か陰性かに判定される。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】従来のマイクロタイタ
ー法によれば、沈降像の大きさ、明瞭性等といった性能
は反応容器の底面形状に大きく依存していた。その上、
マイクロプレート等の反応容器の底面形状および底面積
は、製造メーカーや製品番号等により異なる場合が多い
ために、個々の反応容器の間で性能がばらつき易かっ
た。特に、反応容器の底面形状または底面の面積が異な
ると、反応性を確保するために、それぞれ組成、分注
量、担体濃度等も変更せざるを得ず、判定結果を比較す
るのが困難であった。

【０００６】一方、反応容器底面の傾斜を利用して沈降
像を形成させる場合、形成後の沈降像が、担体粒子の自
重や電気的反発力により、或いは磁力、遠心力、振動等
の外力によって崩れ易くなる。かかる沈降像の崩れもま
た、反応容器の底面形状に依存して、種々の程度を示
す。沈降像が崩れると、特に陽性と判定すべき検体サン
プルを誤って陰性と判定する場合もあるので、重大な問
題である。そこで、平坦な底面から成る反応容器を水平
方向に対し傾斜させて沈降像を形成し、然る後に反応容
器の底面を水平方向に合致させる方法も考えられる。し
かしながら、反応容器を動かす際に、液全体も移動した
り揺れたりして、沈降像を構成する担体粒子が再度浮い
たり移動し易いので信頼性に欠ける。

【０００７】本発明は、マイクロプレート等の反応容器
の底面形状に依存せず、常に均一な沈降像が得られる免
疫学的試験方法を提供するものである。

【０００８】

【課題を解決するための手段および作用】本発明は、上
記事情に鑑みてなされたものであり、分析すべき抗原ま
たは抗体と結合する物質を固定した磁性担体を用い、反
応容器の壁面に該担体の抗原抗体反応に基づく沈降像を
形成して、サンプル中の分析すべき抗原ないし抗体の有
無を検出する免疫学的試験方法において、反応容器の壁
面の少く共１点から徐々に距離が離れるような傾斜面を
有する磁石または徐々に磁力が弱くなる勾配磁界を有す
る磁石を反応容器の外方に位置させることを特徴とする
ものである。

【０００９】従来法では、反応容器の壁面の傾斜のみを
利用して磁性担体による沈降像を形成していたので、壁
面形状の違いによって沈降像の形状がばらついてしま
う。これに対して、本発明では、反応容器の外方に位置
させる磁石の形状を傾斜させるか或いは磁石に勾配磁界
をもたせることにより、沈降像を磁気的に形成させるも
のである。従って、反応容器の壁面がどのような形状で
あっても、磁石の形状ないし磁界の勾配を変化させるこ
とにより、常に均一な沈降像が得られる。

【００１０】また本発明は、上述した発明の構成を用い
て、分析すべき抗原または抗体と結合する物質を固定し
た磁性担体の所定量とサンプルの所定量とを反応容器に
分注して反応させ、磁力を作用させることにより前記磁
性担体を前記反応容器の壁面に向けて沈降させて沈降像
を形成し、沈降像の形状に基づいて分析すべき抗原また
は抗体の有無を判定することを特徴とするものであるか
ら信頼性の高い免疫学的試験が行える。

【００１１】本発明にて使用する磁性担体は、永久磁石
ないし電磁石等の磁界発生源に向かって移動する性質を
有するものである。担体としては、平均粒子径が 0.1〜
50μｍの球形ないしそれに類する多角体であり、磁性体
自身が粒子状であるものか或るいは径 0.1μｍ未満の磁
性微粒子を所定重量だけ含有させた親水性表面をもつ重
合体もしくはコアセルベート体を使用できる。かかる磁
性担体の製造方法は、公知技術の中でいずれか適したも
のを用いればよく、必要に応じて着色処理を行う。親水
性表面を構成する材料にはポリスチレン、塩化ビニル、
シリカ、カーボン、ゼラチン、アルブミン等があり、必
要に応じて親水性ないし反応性を高めるための物質や官
能基を付与する。

【００１２】本発明においては、陽性と陰性の両方の沈
降像を形成するいかなる比重もしくは径から成る磁性担
体も使用することができる。例えば、径が１μｍ以下の
微粒子や中空粒子のような低比重の担体で沈降像を形成
するには、比較的強い磁力を印加するのが好ましい。比
重 2.0を超えるような高比重の担体には、比較的弱い磁
力を印加するのが好ましい。

【００１３】本発明に使用する磁石は、組成を問わず、
所定反応液に浮遊する磁性担体を数分以内に沈降させる
ことのできる磁力を有するものであればよいが、好まし
くは、位置を問わずほぼ均一な磁力を有するものがよ
い。また、磁石の磁極はＮ極であれＳ極であれ、同様の
効果を奏する。更に、沈降像の形成過程或いは形成終了
以降の経過観察を行うためには、磁石の上面を白色ない
し銀色塗料等により着色したり、反応容器と磁石との間
に透磁性の平板状の鏡を配置させるとよい。

【００１４】本発明において使用される反応容器とは、
磁性担体とサンプルが反応して沈降像を形成するまでの
間、該磁性担体とサンプルの一定量を保持できる壁面を
有しているものをいう。例えば、マイクロプレートのよ
うに液体等の収容に適した凹部をもつ反応容器や、スラ
イドガラスのように水平方向にてサンプル等を保持でき
る平板状の反応容器が使用できる。

【００１５】反応容器の材質については、透磁性のみが
要求され、ガラス、プラスチック類、紙等が使用でき
る。必要に応じて抗原ないし抗体を固相化し易い程度の
親水性表面を持つものを用いる。抗原等を固定化する技
術は、既に種々の方法が公知であるので、そのいずれか
を採用すればよい。また、固定化する対象としては、検
出すべき物質と特異的に結合するか或いは競合する物質
が選ばれ、好ましくは反応容器の少く共沈降像を形成す
る範囲に亘って隙間なく均一に固定化するべきである。

【００１６】また本発明では、従来のマイクロタイダー
法に準じて、反応容器の底面に磁性担体を沈降させるの
が普通である。このとき、磁石は反応容器の下方に位置
させて磁性担体を沈降させる。しかしながら、本発明で
は必ずしも磁性担体を重力方向に沈降させる必要はな
い。従って、側面または上面にて磁性担体およびサンプ
ルと接触するような反応容器においては、反応容器の側
方または上方に磁石を位置させることにより、上面ない
し側面のいずれにも沈降像を形成することができる。

【００１７】

【実施例】以下、本発明を実施する態様を図面を用いて
詳細に説明する。第４図（Ａ）および第４図（Ｂ）は、
本発明の方法を説明するための模式図である。平底のウ
エルを有するマイクロプレート１を反応容器とし、その
下方には、ウエルの底部壁面に対して、壁面の中心点で
最も近く壁面の円周方向にいくほど徐々に距離が離れる
ように、半球状の凸面を上方に向けて形成してなる磁石
４が配置している。ここで、第４図（Ａ）および（Ｂ）
の磁石４は、ＮまたはＳのいずれかの磁極を半球面とす
る永久磁石であり、マイクロプレート１の各ウエルの底
部壁面に対して中心点より同心円状に徐々に磁力が弱く
なるような磁界を有している。このような構成は、第１
図（Ｂ）に示したような、半球状底面を有するマイクロ
プレート１および水平面を上面とする磁石４といった従
来法の組み合わせで形成されるのと実質的に同等な収束
性の引力を磁性担体５に与える。

【００１８】ここで、分析すべき抗原または抗体を含有
する検体サンプルの所定量を該抗原または抗体に対する
物質を固定した磁性担体５の所定量と反応させた場合、
第４図（Ａ）に示すようにマイクロプレート１の底部壁
面上に分析すべき抗原または抗体６を介して凝集した磁
性担体５が磁石４の磁界の作用により沈降し、底面を転
がることなく堆積して、第３図（Ａ）と同様に広がった
沈降像を形成する。一方、分析すべき抗原または抗体を
含まない検体サンプルと磁性担体との反応では、第４図
（Ｂ）に示すように非凝集の個々の磁性担体５が、沈降
後もマイクロプレート１の傾斜底面上を転がって、底面
中心部に収束し集まるので、第３図（Ｂ）と同様にボタ
ン状の沈降像を形成する。尚、磁石４の半球状凸面は、
半球状凹底面を有するウエル内壁の形状を模した曲率と
するのが好ましい。

【００１９】第５図は、第４図（Ａ）および第４図
（Ｂ）における磁石４の他の例を示す平面図である。第
５図に示す磁石４は円錘形状の凸面を上部とし、好まし
くは、従来の円錘状凹型底面のウエル形状を模した曲率
で成型される。また、第５図では円錘形の先端部を僅か
に平坦面とし、この平坦面に非凝集の担体を集めること
により、一定面積の陰性像を形成できるよう加工してあ
る。

【００２０】第６図は、第４図または第５図における磁
石４が永久磁石であるのに対して、電磁石で構成した場
合の例を示す縦断面図である。第６図の電磁石は、鋲形
状の磁性部材７ａの外周に複数の円筒形状の磁性部材７
ｂを段階的に低くなるよう重ねることにより、上端を同
心円状の段差とし、これら磁性部材７ａおよび７ｂにそ
れぞれ巻線８が巻かれて成る。ここで、巻線８は、一定
電圧の電流を受けた時に各磁性部材７ａおよび７ｂを同
程度の磁力で帯磁させるよう、変圧器および電源に接続
すると共に、スイッチ９によりオンオフされる仕組みに
なっている。

【００２１】かかる第６図の構成では、電源をスイッチ
９のオン動作によって変圧器に接続し、変圧器を経た電
流が巻線８を流れることにより、磁性部材７ａおよび７
ｂが同程度に磁化される。ここで、第６図の電磁石は、
上方に対して同心円状に徐々に中心から外周へと弱くな
るような磁界を発生するので、第４図（Ａ）および第４
図（Ｂ）と同様の沈降像を形成する。

【００２２】また、第６図のように電磁石を用いる場合
には、磁性部材７ａおよび７ｂのそれぞれに巻線を巻く
必要はなく、例えば鋲状磁性部材７ａおよび筒状磁性部
材７ｂの下端部を一体化して、その一体化した部分に巻
線８を巻いても、上記電磁石と同様に磁化できる。更
に、第６図の磁性部材７ａおよび７ｂの上端の高さを一
致させ、その代わりに、巻線８の巻数を異ならせる等の
調整により、磁力が中心より徐々に弱くなるよう電気的
に制御してもよい。

【００２３】第７図（Ａ）は、反応容器として半球状底
面のウエルを有するマイクロプレート１を用いる際の磁
石形状に関する変形例である。第７Ａ図の磁石４の上面
は、ウエル底面と磁石４の間の距離が、ウエル底面の傾
斜が緩やかな中心付近ほど近く、ウエル底面の傾斜が急
な周辺ほど、遠く位置するような凹面を形成している。
このとき、この磁石４の凹面の曲率は、半球状底面の曲
率との兼ね合いにより、実質的に、第１図（Ｂ）に示し
た構成を半球状底面ではなく円錘状底面のウエルに変更
したのと同等な収束性磁界を生ずるよう成型されてい
る。

【００２４】一方、第７図（Ｂ）は、反応容器として円
錘状底面のウエルを有するマイクロプレート１を用いる
際の磁石形状に関する変形例である。第７図（Ｂ）磁石
４の上面は、第７図（Ａ）の場合とは逆に、ウエル底面
と磁石４の間の距離が、ウエル底面の周辺部から中心に
向かうにつれて徐々に遠く位置するような凹面を形成し
ている。このとき、この磁石４の凹面の曲率は、円錘状
底面の曲率との兼ね合いにより、実質的に、第１図
（Ｂ）に示したような半球状底面による構成と同等な収
束性磁界を生ずるよう成型されている。

【００２５】このような第７図（Ａ）および第７図
（Ｂ）に示した構成によれば、円錘状または半球状底面
のウエルを有するマイクロプレートにおいて、製造メー
カー、ロット番号等を変えることなく、同一プレートで
それぞれ半球状または円錘状底面のウエルと同様な凝集
反応を互換的に行うことができる。

【００２６】実験例 〈ヒトＩｇＧ固相化プレートの作成〉ＮＵＮＣ社の平底
プレート（２×８ｗｅｌｌ ウエル径６ｍｍ、製品番号
４６９９１４）の各ウエルに、ヒトＩｇＧ（ＩＣＮ；生
化学工業、製品番号６４−１４５）を0.01ＭＰＢＳ、ｐ
Ｈ7.43で15.6μｇ／ｍｌに希釈したものを50μｌ／ウエ
ルずつ分注し、室温で30分間インキュベートした。ＰＢ
Ｓで洗浄後、自然乾燥させた。

【００２７】〈抗ヒトＩｇＧ感作磁性ビーズの調整〉磁
性ゼラチン粒子（オリンパス光学工業（株）製）の懸濁
液（粒子濃度５％（Ｗ／Ｗ）） 200μｌを、0.01ＭのＰ
ＢＳ、ＰＨ7.43で洗浄した。タンニン酸のＰＢＳ溶液を
１ｍｌ添加して、37℃で30分間インキュベートした。Ｐ
ＢＳ溶液で洗浄後、抗ヒトＩｇＧヤギ抗体（ＣＡＰＰＥ
Ｌ社）のＰＢＳ溶液（濃度25μｇ／ｍｌ）を１ｍｌ添加
して、37℃で１時間インキュベートした。ＰＢＳで洗浄
後、 0.2％ウシ血清アルブミン、0.05％ＮａＮ₃ を含む
0.01ＭのＰＢＳ、ｐＨ7.43で0.25％（Ｗ／Ｗ）に浮遊さ
せた。

【００２８】〈未感作磁性ビーズの調整〉上記感作磁性
ビーズの調整において、抗ヒトＩｇＧヤギ抗体の濃度を
０μｇ／ｍｌとした以外は同様に処理した。

【００２９】〈反応パターンの形成〉上記ＩｇＧ固相プ
レートを水平に静置し、２個のウエルにそれぞれ上記感
作ビーズおよび未感作ビーズを25μｌ／ウエルずつ添加
した。撹拌直後、水平に静置した。第８図（Ａ）に示し
たようにマイクロプレート１の平底ウエルの一端が接触
するように、径24ｍｍ、高さ22ｍｍの円柱状の鋳鉄性磁
石４を傾むけて（角度θ＝20°）５分間で反応パターン
を形成させた。

【００３０】この結果、感作ビーズによる陽性像は第８
Ａ図のように、ほぼ一様に広がったパターンを形成した
のに対し、未感作ビーズによる陰性像は第８図（Ｂ）の
ように、磁石４が接触した箇所に収束したパターンを生
成した。また磁石４の面はＮ極、Ｓ極を問わず同様効果
を示した。更に、平底ウエルに形成した陽性像は、磁石
の適用を止めてからも１週間以上安定に保持された。こ
のように、底面が平坦である反応容器に対して、底面の
一端より徐々に距離が離れるように磁石を傾斜させるこ
とにより、磁性担体による凝集反応の沈降像を形成する
ことができた。また、上記実験例における別の２個のウ
エルに、それぞれ上記感作ビーズおよび未感作ビーズを
添加し撹拌した後で、上記円柱状の磁石４の上面を水平
方向に向けて各ビーズを１分以内でウエル一面に均等に
沈降させてから、然る後に、磁石４を傾けても、同様に
反応パターンを形成した。更に、別個のウエル２個につ
いて、各ビーズを一旦自然沈降させた後に傾けた磁石４
を適用した場合にも、同様に反応パターンを形成した。
このことは、本発明の方法が、従来の自然沈降、磁石、
遠心等により反応容器の底面に対して一旦沈降像を形成
させた後にも適用でき、それによって反応容器の形状に
依存しない均一形状の沈降像が得られる可能性を示唆す
るものである。

【００３１】なお、本発明は上述した例に限定されず、
以下のように種々の変更ができる。上述の実験例におい
ては、反応容器の一端を磁石と接触させて、かつ角度を
θ＝20°としたが、水平方向ないし反応容器の壁面に対
し50°未満の傾斜であれば、同様の効果を奏する。水平
方向に対する角度が壁面に対して50°を越えると、傾斜
に沿って作用する磁力の減衰が激し過ぎて、沈降像が反
応容器の形状に影響されるので本発明の効果を達成しな
い。また、最適反応時間、磁性担体の移動特性、担体粒
子濃度、浮遊液の組成、磁力等を考慮すれば、容器底面
と磁石とを適宜離間させたり、傾斜角度を変更すること
は容易に実施できる。例えば、傾斜角度または勾配磁界
をより急勾配にすれば、或る限界まではパターン形成速
度を速めることができるし、逆により緩勾配にすれば、
反応性の差違を幅広く比較することができるので、多目
的ないし多項目の試験を行える。

【００３２】また、磁石の寸法および磁力は沈降像の広
がり面積と関係する。従って、高倍希釈処理を要するか
初期症状である等の理由で、分析すべき抗原ないし抗体
が微量ないし低反応性であるような検体サンプルを分析
する場合には、反応容器の底面面積を変更せずとも、磁
石のサイズを小型化することにより、沈降像を縮小させ
て反応性、感度、パターン明瞭性等を増強させることが
できる。

【００３３】また、上述した実施例では反応容器とし
て、複数のウエルを有するマイクロプレートを用いた
が、本発明においては必ずしもウエル状の凹部を形成す
る必要はない。例えば第９図（Ａ）および（Ｂ）には、
平板上で凝集反応を行なう装置が示されている。即ち、
透磁性材料から成る水平板９の下方に、第８図（Ａ）と
同様なる形状で且つ軸11を中心に回動可能である磁石４
を複数個離間して配置する。このとき磁石４と水平板９
の離間距離は磁石４を回動させたときに、水平板９の下
面に当接可能な範囲であり、しかも軸11の全てを同一方
向に、且つ同一水平面上に位置させる。また、第９図
（Ａ）に示すように水平板９の上面には突起等の図示せ
ぬ位置決め部材によって、磁石４の真上となる位置に沈
降像を形成するための板状試験片10を着脱可能に載置し
ている。板状試験片10は、上面が水平方向に対し平坦で
あると共に抗原抗体反応または固相化処理できる程度の
透磁性部材（ガラス、プラスチック等）から成り、使い
捨てとする。尚、磁石４の回動操作および板状試験片の
交換操作は図示せぬ回動機構および交換装置により実施
される。

【００３４】かかる構成においては、まず上記実験例と
同様の固相化処理を板状試験片10の上面に行なった後、
第９図（Ｂ）に示したようにピペッタからサンプルおよ
び磁性担体を含む試薬を添加し混合する。次に、各磁石
４を同一方向に同時に回動させると、第９図（Ｂ）のよ
うに各磁石４がいずれも同一角度で水平板９と当接する
ので、所定沈降反応後に第８図（Ｂ）および（Ｃ）で示
したような陽性または陰性の沈降像を形成させる。最後
に、再び各磁石４を同時に回動して水平板９と平行に配
向させると、磁性担体の全てが板状試験片10の上面に対
して垂直なる引力を受けるので、振動等による崩れを生
じることなく、長時間安定に沈降像を保つことができ
る。

【００３５】更に、本発明の方法による沈降像の形成を
開始して一定時間後に、反応容器の壁面に並行して常に
垂直方向から磁力が作用するような構成の磁石を反応容
器の外方に位置させることにより、沈降像を保持するこ
ともできる。例えば、Ｎ極またはＳ極の表面から均一な
磁界を発生する磁石を用いた場合、半球状底部のウエル
を用いたは場合、半球状底部の壁面から離間する分だけ
半径の長い半球状の凹平面に対して、磁界の向きがそれ
ぞれ垂直となるように、多数の小型磁石を一面に貼付し
た磁石が組み合わせとして選択される。また、円錘状底
部のウエルに対しては、同一角度の円錘状の凹面に、同
様に磁石を貼付した磁石が組み合わせとして選択され
る。更に、平底ウエルに対しては第１図（Ｂ）に示した
ような平坦且つ水平な上面形状を有する磁石が組み合わ
せとして選択される。

【００３６】作用を述べると、まず自然沈降ないし磁
力、遠心等により、磁性担体の沈降像を形成する途中過
程で上記の組み合わせにより選択された磁石をウエルの
下方に位置させる。このとき、既にウエル底部の上壁面
に到達した磁性担体はウエル壁面に対し垂直方向に磁力
を受け、他の沈降途中の磁性担体は距離上最も近いウエ
ル壁面に向かってほぼ均等個数ずつ一面に沈降した後ウ
エル壁面に垂直な磁力を受けることになる。このように
ウエル壁面上の磁性担体は、もはや壁面上を転がること
ができず、全体としては、形成途中の沈降像をほぼ忠実
に留めた状態を保持することができる。

【００３７】一方、沈降像を形成終了したところで同様
に磁石を位置させる。このとき、全ての磁性担体はウエ
ル壁面に対し垂直な磁力を受けるため、上記と同様に沈
降像は安定化する。以上の安定化は、特に反応容器の底
壁面に上述したような抗原または抗体等のコーティング
処理が施されている場合に有効であり、比較的短時間磁
力を与えるだけで長時間の安定化が得られる可能性もあ
る。更に、長時間例えば半日以上の安定化を行う場合
は、比較的高湿度の環境下に置くか密封用のシールを貼
付することにより、なるべく蒸発を防止するような処理
を施す。

【００３８】尚、本発明の方法は、請求の範囲を外れな
い程度において、適宜、磁石の形状ないし磁力分布を補
正することができる。例えば、磁極の縁に相当する部分
は不均一な磁界を生じ易いので、反応容器の底面より充
分大きい磁石を用いてもよい。

【００３９】

【発明の効果】本発明によれば、反応容器の壁面に対し
徐々に距離が離れるような傾斜面または勾配磁界を有す
る磁石を反応容器の外方に位置させることにより、磁性
担体による沈降像を形成したので、反応容器の底部形状
に依存することなく、常に均一な沈降像が得られる。

【００４０】また沈降像を形成するための壁面の形状を
平坦な水平面とした発明によれば、沈降反応性はもっぱ
ら磁石の形状および寸法に伴なう磁力分布によって調節
できることになる。従って、１個の同一磁石を共用する
か或いは複数個の同一構成の磁石を用いることにより、
一定の沈降反応性が得られるので再現性良く均一な沈降
像が得られる。

【００４１】更に形成された沈降像の形状に基づいて分
析すべき抗原または抗体の有無を判定した発明によれ
ば、種々の疾病の診断や血液型等のタイピングにおける
信頼性を高めることができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】第１図（Ａ）は、従来法を実施する装置を上か
ら見た図、第１図（Ｂ）は、従来法を実施する装置を横
から見た断面図、

【図２】第２図（Ａ）は、マイクロタイター法における
陽性反応を示す模式図、第２図（Ｂ）は、マイクロタイ
ター法による陽性像を上から見た図、

【図３】第３図（Ａ）は、マイクロタイター法による陰
性反応を示す模式図、第３図（Ｂ）は、マイクロタイタ
ー法による陰性像を上から見た図、

【図４】第４図（Ａ）および第４図（Ｂ）は、本発明の
方法を説明する模式図、

【図５】第５図は、本発明の方法に用いる磁石の形状の
変形例を示す図、

【図６】第６図は、本発明の方法に用いる電磁石の構成
を示す図、

【図７】第７図（Ａ）は、半球状底面のマイクロプレー
トを使用する場合の本発明の方法を示す模式図第７図
（Ｂ）は、円錘状底面のマイクロプレートを使用する場
合の本発明の方法を示す模式図、

【図８】第８図（Ａ）は、本発明の方法を実施する装置
の構成を示す図、第８図（Ｂ）および第８図（Ｃ）は、
第８図（Ａ）の装置で得られる沈降像を上から見た図、

【図９】第９図（Ａ）は、本発明の方法を実施する装置
の変形例を上から見た図、第９図（Ｂ）は、第９図
（Ａ）の装置を横から見た図である。

【符号の説明】

１ マイクロプレート ２ ウエル ３ 支持台 ４ 磁石 ５ 磁性担体 ６ 分析すべき抗原または抗体 ７ａ，７ｂ 磁性部材 ８ 巻線 ９ 水平板 10 板状試験片 11 軸

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】分析すべき抗原または抗体と結合する物質
   を固定した磁性担体を用い、反応容器の壁面に該担体の
   抗原抗体反応に基づく沈降像を形成して、サンプル中の
   分析すべき抗原ないし抗体の有無を検出する免疫学的試
   験方法において、反応容器の壁面の少く共１点から徐々
   に距離が離れるような傾斜面を有する磁石または徐々に
   磁力が弱くなる勾配磁界を有する磁石を反応容器の外方
   に位置させることを特徴とする免疫学的試験方法。
2. 【請求項２】沈降像を形成するための壁面の形状が水平
   方向に対し平坦であることを特徴とする特許請求項１に
   記載の免疫学的試験方法。
3. 【請求項３】分析すべき抗原または抗体と結合する物質
   を固定した磁性担体の所定量とサンプルの所定量とを反
   応容器に分注して反応させ、磁力を作用させることによ
   り前記磁性担体を前記反応容器の壁面に向けて沈降させ
   て沈降像を形成し、沈降像の形状に基づいて分析すべき
   抗原または抗体の有無を判定することを特徴とする請求
   項１または２に記載の免疫学的試験方法。