JPH0813833B2

JPH0813833B2 - 新規フラボノイド配糖体及びその製造方法

Info

Publication number: JPH0813833B2
Application number: JP62035485A
Authority: JP
Inventors: 博史神田; 博伊東
Original assignee: 株式会社太田胃散
Priority date: 1987-02-20
Filing date: 1987-02-20
Publication date: 1996-02-14
Anticipated expiration: 2011-02-14
Also published as: JPS63203682A

Description

【発明の詳細な説明】この発明はタデ科植物、殊に例えば藍（Polygonum Ti
nctorium Lour.）より単離される新規フラボノイド配糖
体及びその製造方法に関する。

詳しくは本発明は一般式（Ｉ）（式中のＺはグルコピラノシル基を示す）で表わされるフラボノイド配糖体及びその製造方法に関
する。

それら物質は、優れた抗トロンビン様の生理活性を有
しているから、それら物質を有効成分として含有する抗
トロンビン様の生理作用を有する薬剤を製造することが
出来る。

フラボノイド類化合物は植物界に広く存在しており、
例えば、くだもの、野菜、堅果、種子、葉、花、樹皮等
に含有されているが、それらは全て、２−フェニール−
クロモン又は２−フェニルベンズピロンを基本とした化
合物とされている（Elliott Middleton Jr;Trends in P
harmacological Sciences Vol.5 p335 1984）。そのこ
とは薬用とし用いられる植物に於いても同様である。そ
して、それらフラボノイド類はマメ科、キク科、アヤメ
科、バラ科、クワ科、マキ科、ヒユ科等に分布してい
て、殊にマメ科に多いと云われている。

タデ科植物に於いても、これらフラボノイドの存在は
知られており、例えば、川崎等（Bot Mag Tokyo Vol.9
9,No.1053 p63−74 1986）はタデ科に属する28種類の生
薬の葉中より33種類のフラボノイドを分離している。し
かし、タデ科に関するフラボノイドの報告は少ない。

一方、これらフラボノイド類化合物の生理活性は極め
て多岐に亘っていて、既に、例えば、毛細血管抵抗性
（A.Szent−Gyorgyi,S.Rusznyak;Nature,138,p27,193
6）、心臓、特に冠状血管拡張作用（K.Bohm;Arzneimitt
er−Forsch.（Drug Res.）,6 ,38 1956）、抗肝臓毒作
用（O.Eichler,Hahn;Arch.exper.Path.PharmaKol.,206,
674,1949）、消炎作用、抗アレルギー作用、抗出血作用
（Kuhnau.J.World Rev.Nutr.diet.24 117−191 1976）
（Gabor,M.:inhand book of Experimental pharmacolog
y:Anti−Inflammatory drugs（Vane,J.R and Ferreira,
S.H.,eds）,p698−739,Springer−Verlag,New York 197
9），瀉下作用（H.oshio,M.miyamoto,Y.sanno,Y.kase,Y
akugaku Zasshi,95,484,1975）、鎮痙作用（M.Gabor;Th
e Anti−Inflammatory Action of Flavonoids.,Academi
ai Kiado,bud apest,1972）、抗ウイルス作用（Middlet
on,E.Jr and Drezewiecki,G:Biochem.Pharmacol.31,144
9−1453 1982）及びアラキドン酸代謝に対する作用、殊
にフォスフォリパーゼA2の阻害作用（Lee.TP.,MateeLia
no,M.T.and Middleton,E.Jr;Life Sci.31,2765−2774 1
982）等が報告されている。

アイは、タデ科の一年草で、古くから全草を染料とし
て用いているが、葉は藍葉、果実は藍実と呼ばれて漢方
では解熱・解毒に用いている。

ところで、この藍中に含有されるフラボノイド類化合
物に関しての成分的研究は少なく、これまで、ケンフェ
ロール−３−０−グリコシド類等に関する極めて限られ
たものに過ぎない。

今、タデ科の藍の含有する前記Ｉ式で示される新規フ
ラボノイド及びその配糖体が優れた血小板凝集制御作用
を有することが見出された。

近年、食生活の洋風化、医学薬学の進歩、平均寿命の
延長、老年人口の増大に伴い、虚血性心疾患、脳血管、
糖尿病などの血栓性疾患の重要性がますます高まってき
ている。そして近時、血栓の形成には血管内皮細胞の障
害、血小板の活性化、フィブリン形成、線溶系の破綻、
血液の変化、網内系の関与が重視されている。特に血栓
形成の開始時に重要なのは障害血管壁への血小板の粘
着、血小板内容物の放出、凝集反応である。

従って、それら疾患に対する血小板凝集制御作用を持
つ薬物の臨床的意義は極めて大きい。

血液の凝固は血漿中に存在しているフィブリノーゲン
がトロンビンの働きによってそのアルギニン−グリシン
結合が切断され、血漿に不溶のフィブリンを生成析出
し、フィブリンは更に、カルシウムイオンの存在で重合
固化し、凝固する現象である。この過程に於いて血小板
膜燐脂質からアラキドン酸が遊離される際にホスホリパ
ーゼの作用が必要である。このホスホリパーゼを活性化
するのがトロンビンである。所謂、この作用を阻害して
血小板凝集の抑制効果を発現する作用が抗トロンビン作
用、或は抗トロンビン様作用と呼ばれる。

本発明のフラボノイド配糖体、すなわち3,4′,5−ト
リヒドロキシ−6,7−（メチレンジオキシ）フラボン−
３−グルコピラノシドは、優れた抗トロンビン様作用を
示す。

本発明のフラボノイド配糖体は、藍の低級脂肪族アル
コールエキスをクロマトグラフィーに付し、そのメタノ
ール溶出画分をさらにクロマトグラフィーに付しクロロ
ホルム、メタノールで溶出して分離することによって製
造することができる。

この際、原料として用いる藍の低級脂肪族アルコール
エキスは、好ましくは藍の地上部を細切りしメタノール
などの低級アルコールで熱時抽出することにより調製さ
れる。

本発明のフラボノイド配糖体、すなわち3,4′,5−ト
リヒドロキシ−6,7−（メチレンジオキシ）フラボン−
３−グルコピラノシドの物性を示す。

性状：無色粉末状結晶、融点:294−297℃ 下記の構造式中に該当する核磁気共鳴スペクトルは下
記のとおりである。

13C−NMR（δ in DMSO−d6）Ｃ−2:156.6（ｓ）Ｃ−3:133.2（ｓ）Ｃ−4:177.8（ｓ）Ｃ−5:151.6（ｓ）Ｃ−6:140.3（ｓ）Ｃ−7:153.7（ｓ）Ｃ−8: 89.3（ｄ）Ｃ−9:159.9（ｓ）Ｃ−10:106.8（ｓ）Ｃ−１（−Ｏ−CH2−Ｏ−）:102.8（ｔ）Ｃ−１′:120.6（ｓ）Ｃ−２′,6′:130.8×２（ｄ）Ｃ−３′,5′:115.0×２（ｄ）Ｃ−４′:159.9（ｓ）Ｇ−１″:100.7（ｄ） −２″: 74.1（ｄ） −３″: 76.3（ｄ） −４″: 69.8（ｄ） −５″: 77.4（ｄ） −６″: 60.8（ｔ） 1H−NMR（δ in DMSO−d6）Ｃ−１（−Ｏ−CH2−Ｏ−）:6.16（2H.S）Ｃ−８（−Ｈ）:6.86（1H.S）Ｃ−３′Ｃ−５′（−Ｈ）:6.91（2H.d J＝９）Ｃ−２′,C−６′（−Ｈ）:8.08（2H.d J＝９）Ｃ−５（−HO）:12.40（1H.brS）この配糖体は、例えば、β−グリコシダーゼを用いて
加水分解すると、Ｃ−３位の核磁気共鳴スペクトルの糖
に基づくシグナルが消失する。又、Ｃ−２、Ｃ−３、Ｃ
−４に基づくカーボンシグナルにより、ケンフェロール
のそれに良く一致していることが判る。

以下、本発明の化合物の製造法を、実施例によって説
明するが、本発明はそれに限られるものではない。

実施例アイの地上部を細切し、その2Kgを10Lのメタノールで
熱時抽出する。この操作を３回繰り返し、溶剤を除去し
て、200.9gの抽出物を得た。その60gをダイアイオンク
ロマトグラフィーDIAION HP−20で水、30％メタノー
ル、50％メタノール、70％メタノール、100％メタノー
ル及びクロロホルムで順次流下させ、70％メタノール抽
出部8.06g（以下、この抽出物をMeOH ext.と略称）を得
る。このうち、6.4gをクロロホルム、メタノールを展開
溶剤としてシリカゲルカラムクロマトグラフィー（カラ
ム径3.2cm、長さ50cm）を行い10画分を得る。うち、第
６−８画分を集め、639mgの物質を得た。これを常法で
クロロホルム、メタノール混液で再結晶し、200mgの無
色粉末状の結晶3,4′,5−トリヒドロキシ−6,7−（メチ
レンジオキシ）フラボン−３−グルコピラノシド（以下
このものをPt−１と略称する）を得た。

次いで、このものをβ−グリコシダーゼを用いて加水
分解して、3,4′,5−トリヒドロキシ−6,7−（メチレン
ジオキシ）フラボンを得た。

それらの分画を使用してその血小板凝集制御作用につ
き試験を行った。

実験例：血小板凝集抑制試験実験には健康なヒトの血液を用いた。採血には前２週
間薬物使用歴のない被検者を選んだ。血小板凝集能の試
験は、Bornの比濁法を用い、調整した多血小板血漿（PR
P）の凝集能を測定した。即ち、30万個／mm³に調整した
PRP440μｌを37Cに保ち、攪拌しながら被検薬物Pt−１
の溶液又は藍のメタノールエキスを加え、１分間インキ
ュベーションした後、凝集剤ADP50μｌ（最終濃度５μ
ｌ）を加えて、凝集によって生じる透過光量の経時的変
化を凝集特性とし、これを電気信号に変えてチャート上
に描写した。次いで、Pt−１の濃度的効果を検討しIC50
（50％阻止濃度）を算出した。

第１図は、縦軸に透過率の百分率、横軸に時間を取
り、対照群、MeOH ext.群、Pt−１群に就いて行った試
験結果を示すものである。

その結果から明らかなように、Pt−１には対照に比較
し著しい血小板凝集制御作用が認められた。一方、MeOH
ext.はその効果が低かった。

第２図はPt−１の濃度を変化させ50％阻止有効濃度を
検討した結果で、縦軸は対照を基準としその透過率を百
分率で示し、横軸はPt−１の投与量をmg/mlで表した図
である。第２図に明らかにようにPt−１のIC50値は約4.
0×10^-4Mであって、血小板凝集抑制剤として一般によく
知られているエタフェノン及びトラピシン（氏家新生
外、日薬理誌,81 493−498 1983）と殆ど同じである
か、その効果に匹敵したおり、極めて優れたものである
ことを示している。

【図面の簡単な説明】

第１図及び第２図は、本発明のフラボノイド配糖体の効
果を示す説明図である。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式（式中のＺはグルコピラノシル基を示す）で表わされるフラボノイド配糖体。
【請求項２】藍の低級脂肪族アルコールエキスをクロマ
トグラフィーに付し、そのメタノール溶出画分をさらに
クロマトグラフィーに付しクロロホルム、メタノールで
溶出して一般式（式中のＺはグルコピラノシル基を示す）で表わされるフラボノイド配糖体を分離することを特徴
とするフラボノイド配糖体の製造方法。