JPH0832637B2 - 合成免疫原 - Google Patents
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- JPH0832637B2 JPH0832637B2 JP61028749A JP2874986A JPH0832637B2 JP H0832637 B2 JPH0832637 B2 JP H0832637B2 JP 61028749 A JP61028749 A JP 61028749A JP 2874986 A JP2874986 A JP 2874986A JP H0832637 B2 JPH0832637 B2 JP H0832637B2
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Description
【発明の詳細な説明】 本発明はキャリヤーに結合（カップル）した少なくと
も１種の抗原又は抗原決定基からなる免疫原と、両親媒
性アジュバントを含むコンパウンド（化合物）と、前記
免疫原及び両親媒性アジュバント含有コンパウンドの各
々の製法と、免疫化活性を有し且つ前記免疫原を含む医
薬製剤（薬剤組成物）とに係る。
も１種の抗原又は抗原決定基からなる免疫原と、両親媒
性アジュバントを含むコンパウンド（化合物）と、前記
免疫原及び両親媒性アジュバント含有コンパウンドの各
々の製法と、免疫化活性を有し且つ前記免疫原を含む医
薬製剤（薬剤組成物）とに係る。
人間及び動物においては、非自己由来抗原の接種によ
って免疫応答が生起し得る。これは特に、ウィルス、バ
クテリア、寄生虫等々の如き病原体生物による感染から
人間及び動物を保護する場合に利用されるが、また非病
原性物質に対する抗体の産生を刺激する場合、例えば診
断テスト及び免疫学的断種もしくは虚勢に使用される抗
血清を産生する場合にも利用される。
って免疫応答が生起し得る。これは特に、ウィルス、バ
クテリア、寄生虫等々の如き病原体生物による感染から
人間及び動物を保護する場合に利用されるが、また非病
原性物質に対する抗体の産生を刺激する場合、例えば診
断テスト及び免疫学的断種もしくは虚勢に使用される抗
血清を産生する場合にも利用される。
このような能動免疫は通常、保護すべき被検者又は動
物に病原体の不活性化した又は弱毒化した株を接種する
ことによって実施される。
物に病原体の不活性化した又は弱毒化した株を接種する
ことによって実施される。
不活性化物質の接種における欠点の１つは、不活性化
の間に生じる抗原の部分的変性に起因して免疫力がしば
しば低下することにある。弱毒化株の接種には、これら
の株が依然として或る程度の病原性を保有しているか又
は自然突然変異によって再び病原性になるという危険が
伴う。
の間に生じる抗原の部分的変性に起因して免疫力がしば
しば低下することにある。弱毒化株の接種には、これら
の株が依然として或る程度の病原性を保有しているか又
は自然突然変異によって再び病原性になるという危険が
伴う。
以上の理由から、これに代るより良い方法が益々強く
求められている。その一環として、特にキャリヤーに結
合した抗原もしくは抗原決定基からなる免疫原の使用が
行なわれている。この方法では、それ自体免疫応答を生
起せしめないような抗原又は抗原決定基さえも免疫原と
しての活性を示すようになり得る。
求められている。その一環として、特にキャリヤーに結
合した抗原もしくは抗原決定基からなる免疫原の使用が
行なわれている。この方法では、それ自体免疫応答を生
起せしめないような抗原又は抗原決定基さえも免疫原と
しての活性を示すようになり得る。
この目的に使用される種々のキャリヤーは通常、一般
的使用、例えば人間における使用を困難にする欠点、例
えば毒性及び内因物質との交差反応の可能性等を有す
る。
的使用、例えば人間における使用を困難にする欠点、例
えば毒性及び内因物質との交差反応の可能性等を有す
る。
本発明の目的はこのような欠点を解消することにあ
る。
る。
本発明の免疫原は、少なくとも１種類の両親媒性アジ
ュバントの会合分子（例えばミセル）を主体として含
み、抗原及び／又は抗原決定基がこれら両親媒性アジュ
バントの少なくとも一部分に共有結合されることを特徴
とする。
ュバントの会合分子（例えばミセル）を主体として含
み、抗原及び／又は抗原決定基がこれら両親媒性アジュ
バントの少なくとも一部分に共有結合されることを特徴
とする。
本発明の免疫原の抗原及び／又は抗原決定基は例えば
ポリペプチド、タンパク質、タンパク質断片、オリゴ糖
もしくは多糖、オリゴヌクレオチドもしくはポリヌクレ
オチド、又は他の抗原性物質（化合物）であってよい。
これらは一例としてウィルス、バクテリア、寄生虫等の
如き病原体生物から誘導し得、場合によってはこれら生
体に由来する抗原の断片からなり得、又は天然の抗原も
しくは抗原決定基に相当するように合成するか或いはこ
れら天然の抗原もしくは抗原決定基から誘導し得る。本
発明の免疫原はまた、例えばホルモンもしくはホルモン
アナログ又は特定薬物等に対応する抗原もしくは抗原決
定基を含み得る。更に、抗原は抗イディオタイプ抗体又
はその適切な断片であってもよい。このような抗イディ
オタイプ抗体は関連免疫学的特性に関して抗原又は抗原
決定基に類似している。
ポリペプチド、タンパク質、タンパク質断片、オリゴ糖
もしくは多糖、オリゴヌクレオチドもしくはポリヌクレ
オチド、又は他の抗原性物質（化合物）であってよい。
これらは一例としてウィルス、バクテリア、寄生虫等の
如き病原体生物から誘導し得、場合によってはこれら生
体に由来する抗原の断片からなり得、又は天然の抗原も
しくは抗原決定基に相当するように合成するか或いはこ
れら天然の抗原もしくは抗原決定基から誘導し得る。本
発明の免疫原はまた、例えばホルモンもしくはホルモン
アナログ又は特定薬物等に対応する抗原もしくは抗原決
定基を含み得る。更に、抗原は抗イディオタイプ抗体又
はその適切な断片であってもよい。このような抗イディ
オタイプ抗体は関連免疫学的特性に関して抗原又は抗原
決定基に類似している。
抗原及び抗原決定基は生物学的又は微生物学的試料か
ら単離し得、その後所望であれば精製し得る。また、そ
れが適切な場合には、前記試料からより大きめの分子を
単離し、これを分裂又は断片化することによって得るこ
ともできる。
ら単離し得、その後所望であれば精製し得る。また、そ
れが適切な場合には、前記試料からより大きめの分子を
単離し、これを分裂又は断片化することによって得るこ
ともできる。
更に、特に低分子量の抗原及び抗原決定基は化学的合
成によっても有利に得られる。この方法は例えば小さい
ポリペプチド，オリゴヌクレオチド及びオリゴ糖の場合
極めて容易に使用し得る。
成によっても有利に得られる。この方法は例えば小さい
ポリペプチド，オリゴヌクレオチド及びオリゴ糖の場合
極めて容易に使用し得る。
このような小さい抗原分子は、但し特定的にはより大
きい分子も、特定分子の産生をコードする組換DNAを含
む細胞培養株又は微生物培養株を用いても有利に製造し
得る。また、組換DNA技術を用いて、例えば複数の異な
る病原体から誘導されるか又は１つの病原体の複数の変
種から誘導される種々の天然抗原に存在する複数の抗原
決定基を含むような抗原分子を製造することもできる。
きい分子も、特定分子の産生をコードする組換DNAを含
む細胞培養株又は微生物培養株を用いても有利に製造し
得る。また、組換DNA技術を用いて、例えば複数の異な
る病原体から誘導されるか又は１つの病原体の複数の変
種から誘導される種々の天然抗原に存在する複数の抗原
決定基を含むような抗原分子を製造することもできる。
この場合抗原決定基とは、これを指向する１種以上の
抗体に対する認識部位を形成し得る化学的構造（体）を
意味する。従ってこの場合の抗原決定基は１つ以上のエ
ピトープからなり得る。抗原決定基はまた、いわゆるハ
プテン、即ち比較的小さい大きさを有するためにキャリ
ヤーに結合されない限り免疫原としては作用し得ない独
立して存在する化学的実体、も意味する。
抗体に対する認識部位を形成し得る化学的構造（体）を
意味する。従ってこの場合の抗原決定基は１つ以上のエ
ピトープからなり得る。抗原決定基はまた、いわゆるハ
プテン、即ち比較的小さい大きさを有するためにキャリ
ヤーに結合されない限り免疫原としては作用し得ない独
立して存在する化学的実体、も意味する。
本発明の免疫原に使用し得る適切な両親媒性アジュバ
ントの特定具体例としては、アブリジン（avridine,N,N
−ジオクタデシル−Ｎ′,N′−ビス（２−ヒドロキシエ
チル）−プロパンジアミン）、リポイダルアミン（lipo
idal amine）４−アミノメチル−１−（2,3−（ジ−ｎ
−デシルオキシ）−ｎ−プロピル）−４−フェニルピペ
リジン、ジメチル−ジオクタデシルアンモニウムブロマ
イド、ラウリル−ムラミル−ジペプチド、ラウリルテト
ラペプチド（N2−［Ｎ−（Ｎ−ラウリル−Ｌ−アラニ
ル）−γ−Ｄ−グルタミル］−N6−（グリシル）−D,D
−L,L−2,6−ジアミンピメラミン酸、Ｌ−チロシン及び
そのアルキル誘導体、マルト−ステトラパルミテート、
プルロニックポリオール、Ｌ−チロシン−アゾベンゼン
−ｐ−アルソネート、ソルビタンモノオレエート（スパ
ン（Span）80）、トレハロース誘導体（トレハロースジ
ミコレートなど）、レチノール酸（retinoic acid）及
びその誘導体、D,L−α−トコフェロール（ビタミン
Ｅ）、リピドＡ及び類縁グリコシド、例えばサポニン
（キラヤ サポナリア モリーナ（Quillaja saponaria
Molina）の樹皮からのキル（Quil）Ａなど）及びカル
ボポール（Carbopol）934(R)、カルボポール940(R)、カ
ルボポール941(R)の如きカルボメル（carbomers）、並
びに疎水性及び親水性フェニル誘導体のコポリマーが挙
げられる。
ントの特定具体例としては、アブリジン（avridine,N,N
−ジオクタデシル−Ｎ′,N′−ビス（２−ヒドロキシエ
チル）−プロパンジアミン）、リポイダルアミン（lipo
idal amine）４−アミノメチル−１−（2,3−（ジ−ｎ
−デシルオキシ）−ｎ−プロピル）−４−フェニルピペ
リジン、ジメチル−ジオクタデシルアンモニウムブロマ
イド、ラウリル−ムラミル−ジペプチド、ラウリルテト
ラペプチド（N2−［Ｎ−（Ｎ−ラウリル−Ｌ−アラニ
ル）−γ−Ｄ−グルタミル］−N6−（グリシル）−D,D
−L,L−2,6−ジアミンピメラミン酸、Ｌ−チロシン及び
そのアルキル誘導体、マルト−ステトラパルミテート、
プルロニックポリオール、Ｌ−チロシン−アゾベンゼン
−ｐ−アルソネート、ソルビタンモノオレエート（スパ
ン（Span）80）、トレハロース誘導体（トレハロースジ
ミコレートなど）、レチノール酸（retinoic acid）及
びその誘導体、D,L−α−トコフェロール（ビタミン
Ｅ）、リピドＡ及び類縁グリコシド、例えばサポニン
（キラヤ サポナリア モリーナ（Quillaja saponaria
Molina）の樹皮からのキル（Quil）Ａなど）及びカル
ボポール（Carbopol）934(R)、カルボポール940(R)、カ
ルボポール941(R)の如きカルボメル（carbomers）、並
びに疎水性及び親水性フェニル誘導体のコポリマーが挙
げられる。
本発明の免疫原は前述の如き分子化合物、又は例えば
種々の形状及び／又は大きさを有し得るミセル複合体
（micellar complexes）のように会合した多数の前記分
子を含む。
種々の形状及び／又は大きさを有し得るミセル複合体
（micellar complexes）のように会合した多数の前記分
子を含む。
前記会合分子（例えばミセル）は複数の同種の両親媒
性アジュバント間の相互作用、又は２種類以上の異なる
両親媒性アジュバント間の相互作用により形成され得
る。
性アジュバント間の相互作用、又は２種類以上の異なる
両親媒性アジュバント間の相互作用により形成され得
る。
本発明免疫原では抗原及び／又は抗原決定基が両親媒
性アジュバントの少なくとも一部分に共有結合される。
性アジュバントの少なくとも一部分に共有結合される。
この結合の性質は、両親媒性アジュバント並びに抗原
及び／又は抗原決定基上でこの結合に関与する基に依存
すると共に、特定反応成分自体の性質にも依存する。こ
の結合は抗原もしくは抗原決定基の前記基とアジュバン
ト分子の前記基との間で直接生起し得るか、又は抗原及
び抗原決定基とアジュバント分子との間にいわゆる「リ
ンカー（linker）」を存在せしめて間接的に生起し得
る。
及び／又は抗原決定基上でこの結合に関与する基に依存
すると共に、特定反応成分自体の性質にも依存する。こ
の結合は抗原もしくは抗原決定基の前記基とアジュバン
ト分子の前記基との間で直接生起し得るか、又は抗原及
び抗原決定基とアジュバント分子との間にいわゆる「リ
ンカー（linker）」を存在せしめて間接的に生起し得
る。
本発明の免疫原は１種類の抗原又は抗原決定基と結合
する会合分子（例えばミセル）、又は少なくとも２種の
異なる抗原及び／又は抗原決定基と結合する会合分子
（例えばミセル）で構成し得る。後者の場合は異なる種
類が、それに対する免疫（対抗免疫）が望まれるような
１つの特定病原体又は物質もしくは、必要であれば、こ
の物質の種々の変種の特徴を表わし得、又は互いに無関
係な複数の異なる種類のそれに対する免疫が望まれるよ
うな病原体及び／又は別の物質の特徴を表わし得る。
する会合分子（例えばミセル）、又は少なくとも２種の
異なる抗原及び／又は抗原決定基と結合する会合分子
（例えばミセル）で構成し得る。後者の場合は異なる種
類が、それに対する免疫（対抗免疫）が望まれるような
１つの特定病原体又は物質もしくは、必要であれば、こ
の物質の種々の変種の特徴を表わし得、又は互いに無関
係な複数の異なる種類のそれに対する免疫が望まれるよ
うな病原体及び／又は別の物質の特徴を表わし得る。
前述の如き本発明の免疫原は所望であれば安定化させ
得る。このような安定化は例えば、抗原及び／又は抗原
決定基の少なくとも一部分及び／又は両親媒性アジュバ
ントの少なくとも一部分を互いに結合させることによっ
て達成し得る。また、結合してもしなくても該免疫原を
安定化のためにカプセルに封入して使用することもでき
る。適切なカプセルとしては例えば体内で分解し得るポ
リマーからなるものが挙げられる。このようなポリマー
にはポリ乳酸（polylactic acid）、ポリグリコール
酸、乳酸とグリコール酸との混合ポリマー、ポリアミノ
酸、乳酸と１種類以上のアミノ酸との混合ポリマー、重
合アルブミン等がある。
得る。このような安定化は例えば、抗原及び／又は抗原
決定基の少なくとも一部分及び／又は両親媒性アジュバ
ントの少なくとも一部分を互いに結合させることによっ
て達成し得る。また、結合してもしなくても該免疫原を
安定化のためにカプセルに封入して使用することもでき
る。適切なカプセルとしては例えば体内で分解し得るポ
リマーからなるものが挙げられる。このようなポリマー
にはポリ乳酸（polylactic acid）、ポリグリコール
酸、乳酸とグリコール酸との混合ポリマー、ポリアミノ
酸、乳酸と１種類以上のアミノ酸との混合ポリマー、重
合アルブミン等がある。
本発明の免疫原の製造には様々な方法を使用し得る。
一例として、少なくとも１つの抗原及び／又は抗原決
定基と少なくとも１つの両親媒性アジュバントとのコン
パウンド（化合物）から出発することができる。抗原及
び／又は抗原決定基と両親媒性アジュバントとは所望で
あれば１つ以上のリンカーにより互いに結合させてもよ
い。このような両親媒性アジュバントの誘導体も本発明
の一部をなす。
定基と少なくとも１つの両親媒性アジュバントとのコン
パウンド（化合物）から出発することができる。抗原及
び／又は抗原決定基と両親媒性アジュバントとは所望で
あれば１つ以上のリンカーにより互いに結合させてもよ
い。このような両親媒性アジュバントの誘導体も本発明
の一部をなす。
本発明の免疫原は、前述の如きコンパウンド（化合
物）の場合に通常使用される方法によりこの種のコンパ
ウンドから会合分子（例えばミセル）を形成し、次いで
この免疫原を分離するという手順で前記コンパウンドか
ら製造し得る。そのためには、少なくとも１つの抗原及
び／又は抗原決定基と少なくとも１つの両親媒性物質と
を含む１種類のコンパウンドから出発し得るが、少なく
とも２つの異なる抗原及び／又は抗原決定基を含むコン
パウンド混合物から免疫原を製造することも可能であ
る。
物）の場合に通常使用される方法によりこの種のコンパ
ウンドから会合分子（例えばミセル）を形成し、次いで
この免疫原を分離するという手順で前記コンパウンドか
ら製造し得る。そのためには、少なくとも１つの抗原及
び／又は抗原決定基と少なくとも１つの両親媒性物質と
を含む１種類のコンパウンドから出発し得るが、少なく
とも２つの異なる抗原及び／又は抗原決定基を含むコン
パウンド混合物から免疫原を製造することも可能であ
る。
好ましくは、前記ミセルは前述の如き両親媒性アジュ
バントの誘導体を少なくとも臨界ミセル濃度に等しい量
だけ含む溶液を超音波処理して製造する。所望であれ
ば、前記アジュバント誘導体を、対応するか又は異なる
遊離の両親媒性アジュバントと混合し、この混合物か
ら、部分的に未結合アジュバント分子からなる混合ミセ
ルを含む免疫原を製造することもできる。
バントの誘導体を少なくとも臨界ミセル濃度に等しい量
だけ含む溶液を超音波処理して製造する。所望であれ
ば、前記アジュバント誘導体を、対応するか又は異なる
遊離の両親媒性アジュバントと混合し、この混合物か
ら、部分的に未結合アジュバント分子からなる混合ミセ
ルを含む免疫原を製造することもできる。
本発明の免疫原の別の製法では、抗原及び／又は抗原
決定基を、共有結合反応で通常用いられる方法により、
主として両親媒性アジュバントからなる会合分子（例え
ばミセル）に共有結合させ、その後免疫原を単離する。
この結合はアジュバントミセルの反応基と抗原及び／又
は抗原決定基の反応基との間の反応を通して行なわれ
る。
決定基を、共有結合反応で通常用いられる方法により、
主として両親媒性アジュバントからなる会合分子（例え
ばミセル）に共有結合させ、その後免疫原を単離する。
この結合はアジュバントミセルの反応基と抗原及び／又
は抗原決定基の反応基との間の反応を通して行なわれ
る。
所望であれば、両親媒性アジュバント、抗原及び／又
は抗原決定基は反応基を含むリンカーを有し得る。
は抗原決定基は反応基を含むリンカーを有し得る。
適切な反応基としては、アミン基、カルボキシル基、
ヒドロキシル基、チオール基、ジスルフィド基、カルボ
ニル基、マレイミド基及び活性化カルボキシル基等が挙
げられる。
ヒドロキシル基、チオール基、ジスルフィド基、カルボ
ニル基、マレイミド基及び活性化カルボキシル基等が挙
げられる。
本発明の免疫原は製法に拘らず所望であれば安定化
（例えばアジュバント分子、抗原及び／又は抗原決定基
の相互結合による）及び／又は加水分解による消化から
の保護（例えば結合してもしなくてもよい免疫原を体内
で分解し得るポリマーの如きカプセル内に封入する）が
可能である。
（例えばアジュバント分子、抗原及び／又は抗原決定基
の相互結合による）及び／又は加水分解による消化から
の保護（例えば結合してもしなくてもよい免疫原を体内
で分解し得るポリマーの如きカプセル内に封入する）が
可能である。
抗原、抗原決定基及び／又は両親媒性アジュバントの
相互結合は、結合すべき成分との反応に適した反応基を
少なくとも２つ有する任意の試薬を用いて生起させ得
る。ポリペプチドの結合の場合には、例えばグルタルア
ルデヒドもしくはホルムアルデヒド又は同質二官能性
（homobifunctional）試薬（ビスアミデートもしくはビ
スクシンイミジルエステル）もしくは異種二官能性（he
terobifunctional）試薬（例えばアジドフェニル基とマ
レイミド基、アミデート基、スクシンイミジル基、ハロ
ケトン基又は活性化フルオロベンゼン基とを有する化合
物）の如き二官能性試薬を用いると有利である。
相互結合は、結合すべき成分との反応に適した反応基を
少なくとも２つ有する任意の試薬を用いて生起させ得
る。ポリペプチドの結合の場合には、例えばグルタルア
ルデヒドもしくはホルムアルデヒド又は同質二官能性
（homobifunctional）試薬（ビスアミデートもしくはビ
スクシンイミジルエステル）もしくは異種二官能性（he
terobifunctional）試薬（例えばアジドフェニル基とマ
レイミド基、アミデート基、スクシンイミジル基、ハロ
ケトン基又は活性化フルオロベンゼン基とを有する化合
物）の如き二官能性試薬を用いると有利である。
体内で消化され得且つ免疫原の封入に適しているポリ
マー材料の具体例は既に列挙した。これら材料はこの目
的に適した従来の方法で免疫原の上または周りに施用し
得る。
マー材料の具体例は既に列挙した。これら材料はこの目
的に適した従来の方法で免疫原の上または周りに施用し
得る。
本発明の免疫原は特にワクチンとして使用するのに適
している。
している。
このようなワクチンは主に、人間または動物を或る種
の病原体（ウィルス、バクテリア、寄生虫等々）もしく
はアレルゲンに対して免疫する場合、いわゆる「プライ
ミング（priming）」（体を特定遊離抗体の形成のため
に直接刺激するのではなく、後で生じる感染もしくは再
接種後に強力な免疫反応が誘起されるように予め条件付
けておくこと）を行なう場合、又は例えば免疫学的断種
もしくは去勢（生殖プロセスに必要な物質、例えば或る
種のホルモンに対する抗体を産生させる）を行なう場合
に使用し得る。
の病原体（ウィルス、バクテリア、寄生虫等々）もしく
はアレルゲンに対して免疫する場合、いわゆる「プライ
ミング（priming）」（体を特定遊離抗体の形成のため
に直接刺激するのではなく、後で生じる感染もしくは再
接種後に強力な免疫反応が誘起されるように予め条件付
けておくこと）を行なう場合、又は例えば免疫学的断種
もしくは去勢（生殖プロセスに必要な物質、例えば或る
種のホルモンに対する抗体を産生させる）を行なう場合
に使用し得る。
前記ワクチンは所望であれば、例えば同一ミセルに結
合させる２つ以上の異なる抗原及び／又は抗原決定基を
含み得、又は各々が特定タイプの抗原もしくは抗原決定
基を１つ有するような本発明の免疫原を２つ以上混合し
たものを含み得る。これらの種々の抗原及び／又は抗原
決定基は種々の病原体等又は同一病原体の変種等を表わ
し得る。
合させる２つ以上の異なる抗原及び／又は抗原決定基を
含み得、又は各々が特定タイプの抗原もしくは抗原決定
基を１つ有するような本発明の免疫原を２つ以上混合し
たものを含み得る。これらの種々の抗原及び／又は抗原
決定基は種々の病原体等又は同一病原体の変種等を表わ
し得る。
本発明の免疫原をワクチン接種の目的に使用できるよ
うにするためには、この免疫原を特定医薬投与に適した
形態に変換しなければならない。筋内投与又は皮下投与
の場合には、この免疫原を適切な液体、例えば生理食塩
水と混合する必要がある。
うにするためには、この免疫原を特定医薬投与に適した
形態に変換しなければならない。筋内投与又は皮下投与
の場合には、この免疫原を適切な液体、例えば生理食塩
水と混合する必要がある。
例えばスプレーなどの形態で鼻腔内投与又は眼内投与
する場合にも水性媒質が最も適している。経口投与の如
き局部投与の場合には通常、免疫原と例えば口腔内に存
在する糖分解酵素、又は胃内に存在するタンパク質分解
酵素、又はデタージェントから一時的に保護せしめるよ
うな投与形態を用いる必要がある。
する場合にも水性媒質が最も適している。経口投与の如
き局部投与の場合には通常、免疫原と例えば口腔内に存
在する糖分解酵素、又は胃内に存在するタンパク質分解
酵素、又はデタージェントから一時的に保護せしめるよ
うな投与形態を用いる必要がある。
このような保護は例えば本発明の免疫原を１つ以上一
緒に適切な物質内に封入するか、免疫原を遅延放出（de
layed-release）及び／又は調節放出（controlled-rele
ase）投与形態に組成するか、又はポリペプチド抗原及
び／又は抗原決定基ではタンパク質分解酵素に敏感な部
位をタンパク質開裂が生起し得ないか或いは大幅に抑制
されるように化学的に改質することによって実施し得
る。
緒に適切な物質内に封入するか、免疫原を遅延放出（de
layed-release）及び／又は調節放出（controlled-rele
ase）投与形態に組成するか、又はポリペプチド抗原及
び／又は抗原決定基ではタンパク質分解酵素に敏感な部
位をタンパク質開裂が生起し得ないか或いは大幅に抑制
されるように化学的に改質することによって実施し得
る。
実施例１ チオール化キルＡ（thiolated Quil A）の製造 A.還元アミノ化による方法 ケー・ダルスガート（Ｋ・Dalsgaard）（全ウィルス
研究論文集（Archiv fuer die gesamte Virusforschun
g）「サポニンアジュバント（Saponin Adjuvants）」4
4,243-254（1974年））に従い、DEAE−セファセル（Sep
hacel）上で予め精製したキルA45mgをpH8.0の0.1モル/l
リン酸ナトリウム緩衝液0.8ml中に溶解する。この透明
溶液をメタノール1.5mlで希釈し、次いで２−（２−ピ
リジルジチオ）−エチルアミン.HCl60mgを前記リン酸塩
緩衝液0.2ml中に溶解した溶液と混合する。シアノボロ
水素化ナトリウムの１モル/lメタノール溶液0.05mlを加
え、この反応混合物を室温で20時間撹拌する。酢酸0.05
mlを加えた後、5mモル/lEDTAを含むpH6.0の0.1モル/lリ
ン酸ナトリウム緩衝液中のセファデックス（Sephadex）
G-25を用いてゲル過により低分子量成分を除去する。
研究論文集（Archiv fuer die gesamte Virusforschun
g）「サポニンアジュバント（Saponin Adjuvants）」4
4,243-254（1974年））に従い、DEAE−セファセル（Sep
hacel）上で予め精製したキルA45mgをpH8.0の0.1モル/l
リン酸ナトリウム緩衝液0.8ml中に溶解する。この透明
溶液をメタノール1.5mlで希釈し、次いで２−（２−ピ
リジルジチオ）−エチルアミン.HCl60mgを前記リン酸塩
緩衝液0.2ml中に溶解した溶液と混合する。シアノボロ
水素化ナトリウムの１モル/lメタノール溶液0.05mlを加
え、この反応混合物を室温で20時間撹拌する。酢酸0.05
mlを加えた後、5mモル/lEDTAを含むpH6.0の0.1モル/lリ
ン酸ナトリウム緩衝液中のセファデックス（Sephadex）
G-25を用いてゲル過により低分子量成分を除去する。
その後キルＡを含む画分にジチオエリトリトールを濃
度が20mモル/lになるまで加える。室温で20分放置した
後、前記リン酸塩/EDTA緩衝液中でセファデックスG-25
を介してゲル過することによりチオール化キルＡを単
離する。
度が20mモル/lになるまで加える。室温で20分放置した
後、前記リン酸塩/EDTA緩衝液中でセファデックスG-25
を介してゲル過することによりチオール化キルＡを単
離する。
B.アミド化による方法 精製したキルA10mgを水0.2ml及びジメチルホルムアミ
ド0.2ml中に溶解する。１モル/lHClによってこの溶液の
pHを３〜3.5にし、その後6.0mgの１−エチル−３−（３
−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド.HClを撹
拌しながら加える。室温で３分後に２−（２−ピリジル
ジチオ）−エチルアミン.HCl7.0mgをpH8.0の0.2モル/l
リン酸ナトリウム緩衝液0.2mlに溶解したものを加え
る。エチルジイソプロピルアミンを加えてこの溶液のpH
を８にする。30分後、pHが５〜６になるまで酢酸を加
え、次いで5mモル/lEDTAを含むpH6.0の0.1モル/lリン酸
ナトリウム緩衝液中のセファデックスG-25を介してゲル
過することにより、誘導体化した（derivatised）キ
ルＡを単離する。
ド0.2ml中に溶解する。１モル/lHClによってこの溶液の
pHを３〜3.5にし、その後6.0mgの１−エチル−３−（３
−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド.HClを撹
拌しながら加える。室温で３分後に２−（２−ピリジル
ジチオ）−エチルアミン.HCl7.0mgをpH8.0の0.2モル/l
リン酸ナトリウム緩衝液0.2mlに溶解したものを加え
る。エチルジイソプロピルアミンを加えてこの溶液のpH
を８にする。30分後、pHが５〜６になるまで酢酸を加
え、次いで5mモル/lEDTAを含むpH6.0の0.1モル/lリン酸
ナトリウム緩衝液中のセファデックスG-25を介してゲル
過することにより、誘導体化した（derivatised）キ
ルＡを単離する。
前記Ａの方法と同様にジチオエリトリトールによる還
元と、チオール化キルＡの分離とを行なう。
元と、チオール化キルＡの分離とを行なう。
C.2,2,2−トリフルオロエタンスルホニルクロリドでの
活性化による方法 Ａの場合と同様に精製したキルA50mgを乾燥ピリジン
中に溶解し、この溶液を真空下で蒸発させる。この操作
をもう一度繰返す。このようにして得たキルＡを乾燥ジ
オキサン（0.5ml）中に懸濁させ、次いで８μｌの2,2,2
−トリフルオロエタンスルホニルクロリドを激しく撹拌
しながら加える。室温で10分撹拌した後、該混合物を予
め４℃に冷却しておいた0.05モル/lHCl5mlで希釈し、次
いで４℃で0.01モル/lHCl（２×１）に対する透析を
５時間行なう。
活性化による方法 Ａの場合と同様に精製したキルA50mgを乾燥ピリジン
中に溶解し、この溶液を真空下で蒸発させる。この操作
をもう一度繰返す。このようにして得たキルＡを乾燥ジ
オキサン（0.5ml）中に懸濁させ、次いで８μｌの2,2,2
−トリフルオロエタンスルホニルクロリドを激しく撹拌
しながら加える。室温で10分撹拌した後、該混合物を予
め４℃に冷却しておいた0.05モル/lHCl5mlで希釈し、次
いで４℃で0.01モル/lHCl（２×１）に対する透析を
５時間行なう。
得られたキルＡ溶液に、40mgの２−（２−ピリジルジ
チオ）−エチルアミン.HClをpH8.0の0.5モル/lリン酸ナ
トリウム緩衝液1mlに溶解した溶液を４℃で加える。NaO
Hの添加によってpHを8.0にし、その後該混合物を４℃で
18時間撹拌する。5mモル/lのEDTAを含むpH6.0の0.2モル
/lリン酸塩緩衝液中のセファデックスG-25を用いてゲル
過することにより誘導体化キルＡを分離する。
チオ）−エチルアミン.HClをpH8.0の0.5モル/lリン酸ナ
トリウム緩衝液1mlに溶解した溶液を４℃で加える。NaO
Hの添加によってpHを8.0にし、その後該混合物を４℃で
18時間撹拌する。5mモル/lのEDTAを含むpH6.0の0.2モル
/lリン酸塩緩衝液中のセファデックスG-25を用いてゲル
過することにより誘導体化キルＡを分離する。
Ａの場合と同様にジチオエリトリトールでの還元とチ
オール化キルＡの分離とを行なう。
オール化キルＡの分離とを行なう。
実施例２ β−エンドルフィン−（6-17）−免疫原Ｉ A.活性化アブリジンの製造 無水トリフルオロメタンスルホン酸2.82g（10mモル）
を塩化メチレン20ml中に溶解した溶液に、N,N−ジオク
タデシル−Ｎ′Ｎ′−ビス−（２−ヒドロキシエチル）
−プロパンジアミン［アブリジン:CP 20961］1.67g（25
mモル）を加える。ピリジン0.4ml（5.2mモル）を加え、
この混合物を室温で60分間撹拌する。水に2.5g（32mモ
ル）のチオール酢酸を溶解し且つNaOHでpHを7.5にした
溶液を加える。この２相系を60分間激しく撹拌する。塩
化メチレン層を分離し、MgSO4で乾燥し、蒸発させる。
残留物を塩化メチレン／エーテルら再晶出する。
を塩化メチレン20ml中に溶解した溶液に、N,N−ジオク
タデシル−Ｎ′Ｎ′−ビス−（２−ヒドロキシエチル）
−プロパンジアミン［アブリジン:CP 20961］1.67g（25
mモル）を加える。ピリジン0.4ml（5.2mモル）を加え、
この混合物を室温で60分間撹拌する。水に2.5g（32mモ
ル）のチオール酢酸を溶解し且つNaOHでpHを7.5にした
溶液を加える。この２相系を60分間激しく撹拌する。塩
化メチレン層を分離し、MgSO4で乾燥し、蒸発させる。
残留物を塩化メチレン／エーテルら再晶出する。
塩化メチレン中のアブリジンＳ−アセチル誘導体をア
ブリジンと混合する（1:1）。溶媒を蒸発させ、残留物
を0.1モル/lのNaClと0.05モル/lのEDTAとを含むpH7.0の
0.1モル/lリン酸ナトリウム緩衝液中に分散させる（5mg
/ml）。この分散液をN2下60℃で５分間超音波処理する
［ブランソン ソニファイアー（Branson Sonifier）；
マイクロチップ（microtip）,20W］。
ブリジンと混合する（1:1）。溶媒を蒸発させ、残留物
を0.1モル/lのNaClと0.05モル/lのEDTAとを含むpH7.0の
0.1モル/lリン酸ナトリウム緩衝液中に分散させる（5mg
/ml）。この分散液をN2下60℃で５分間超音波処理する
［ブランソン ソニファイアー（Branson Sonifier）；
マイクロチップ（microtip）,20W］。
B.β−エンドルフィン−（6-17）−免疫原の製造 実施例Ａで製造した誘導体化アブリジンの溶液に脱酸
素化した（deoxygenated）pH7.2の0.5モル/lヒドロキシ
ルアミンを最終濃度が0.04モル/lになるまで加える。こ
の混合物をN2雰囲気下35℃に30分間維持する。その後、
0.005モル/lのEDTAを含むpH6.0の0.1モル/lリン酸ナト
リウム緩衝液中にチオール化アブリジンに対して1.5当
量のβ−エンドルフィン−（6-17）マレイミド誘導体 を溶解した溶液を20℃で加える。
素化した（deoxygenated）pH7.2の0.5モル/lヒドロキシ
ルアミンを最終濃度が0.04モル/lになるまで加える。こ
の混合物をN2雰囲気下35℃に30分間維持する。その後、
0.005モル/lのEDTAを含むpH6.0の0.1モル/lリン酸ナト
リウム緩衝液中にチオール化アブリジンに対して1.5当
量のβ−エンドルフィン−（6-17）マレイミド誘導体 を溶解した溶液を20℃で加える。
この混合物をN2下で15時間撹拌し、次いで0.1モル/l
のNaClを含むpH7.4の0.05モル/lリン酸ナトリウム緩衝
液に対して透析する。
のNaClを含むpH7.4の0.05モル/lリン酸ナトリウム緩衝
液に対して透析する。
実施例３ β−エンドルフィン−（6-17）−免疫原II 5mモル/lのEDTAを含むpH6.0の0.1モル/lリン酸塩緩衝
液中1.2モル当量（チオール基に基く）のβ−エンドル
フィン−（6-17）マレイミド誘導体、即ち を1Aで製造したチオール化キルＡの溶液（7mg/ml）に加
える。
液中1.2モル当量（チオール基に基く）のβ−エンドル
フィン−（6-17）マレイミド誘導体、即ち を1Aで製造したチオール化キルＡの溶液（7mg/ml）に加
える。
この混合物を室温で１時間反応させ、次いで150mモル
/mlのNaClを含むpH7.4の0.02モル/lリン酸ナトリウム緩
衝液に対して０℃で15時間透析する。
/mlのNaClを含むpH7.4の0.02モル/lリン酸ナトリウム緩
衝液に対して０℃で15時間透析する。
実施例４ パルボウィルス免疫原 A.ブタパルボウィルス抗原の製造 ブタパルボウィルス（PPV）の65kD外殻タンパク質
を、モリター，ティー・ダブル（Molitor,T.W.），ジョ
オ，エッチ・エス（Joo,H.S.）及びコレット，エム・エ
ス（Collet,M.S.）によりウィルス学誌（J.Virology）4
5,842-854（1983年）に開示された方法に従い単離す
る。−PPV含有組織培養上澄に濃縮CaCl2溶液をCaCl2濃
度が25mモル/lになるまで加え、 −その結果生じたウィルス沈澱物を12,000×ｇで20分間
遠心分離処理し、 −ウィルス含有ペレットをCsCl勾配遠心分離にかけ、 −密度1.3g/mlの画分を分離し、透析した後１％ドデシ
ル硫酸ナトリウム（SDS）で３分間処理し、 −SDS/PAGE分画により65kDタンパク質を単離し、透析し
且つ凍結乾燥した。
を、モリター，ティー・ダブル（Molitor,T.W.），ジョ
オ，エッチ・エス（Joo,H.S.）及びコレット，エム・エ
ス（Collet,M.S.）によりウィルス学誌（J.Virology）4
5,842-854（1983年）に開示された方法に従い単離す
る。−PPV含有組織培養上澄に濃縮CaCl2溶液をCaCl2濃
度が25mモル/lになるまで加え、 −その結果生じたウィルス沈澱物を12,000×ｇで20分間
遠心分離処理し、 −ウィルス含有ペレットをCsCl勾配遠心分離にかけ、 −密度1.3g/mlの画分を分離し、透析した後１％ドデシ
ル硫酸ナトリウム（SDS）で３分間処理し、 −SDS/PAGE分画により65kDタンパク質を単離し、透析し
且つ凍結乾燥した。
B.ブタパルボウィルス抗原の誘導体化 Ａで得たタンパク質を濃度が3mg/mlになるまでpH7.5
の0.1モル/lリン酸ナトリウム緩衝液中に溶解し、次い
で５モル当量のＮ−スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレ
イミド−メチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレー
ト（SMCC）により室温で30分間処理する。
の0.1モル/lリン酸ナトリウム緩衝液中に溶解し、次い
で５モル当量のＮ−スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレ
イミド−メチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレー
ト（SMCC）により室温で30分間処理する。
0.9％のNaClと5mモル/lのEDTAとを含むpH6.0の0.1モ
ル/lリン酸ナトリウム緩衝液中のセファデックスG-25を
介するゲル過により過剰SMCCを除去する。
ル/lリン酸ナトリウム緩衝液中のセファデックスG-25を
介するゲル過により過剰SMCCを除去する。
C.免疫原の製造 Ｂで製造した誘導体化PPV外殻タンパク質を実施例1A
で得たチオール化キルＡと1:4（キルA:タンパク質）
（重量／重量）の割合で混合する。
で得たチオール化キルＡと1:4（キルA:タンパク質）
（重量／重量）の割合で混合する。
この溶液を５時間室温に維持し、その後250,000×
ｇ、＋４℃で10時間10-40％（重量／重量）庶糖濃度勾
配遠心にかけて免疫原を分離する。
ｇ、＋４℃で10時間10-40％（重量／重量）庶糖濃度勾
配遠心にかけて免疫原を分離する。
次いで、150mモル/lのNaClを含むpH7.4の0.02モル/l
リン酸塩緩衝液に対してPPV免疫原を透析する。
リン酸塩緩衝液に対してPPV免疫原を透析する。
実施例５ パルボウィルスペプチド免疫原 PPV外殻タンパク質の部分配列に対応するペプチドの
マレイミド誘導体（アムジェンAMGenから入手） を実施例３の方法でチオール化キルＡに結合させる。
マレイミド誘導体（アムジェンAMGenから入手） を実施例３の方法でチオール化キルＡに結合させる。
実施例６ HBsAg免疫原 HBsAg（Ｂ型肝炎表面抗原）から誘導されたアミノ末
端疎水部分の無いポリペプチドを、フジサワ（Fujisaw
a）他の方法に従い（核酸リサーチ（Nucleic Acids Res
earch）11,3581-3590（1983）年）大腸菌を用いて製造
する。これらのバクテリアから抽出したポリペプチドを
アフィニティクロマトグラフィにより精製する。
端疎水部分の無いポリペプチドを、フジサワ（Fujisaw
a）他の方法に従い（核酸リサーチ（Nucleic Acids Res
earch）11,3581-3590（1983）年）大腸菌を用いて製造
する。これらのバクテリアから抽出したポリペプチドを
アフィニティクロマトグラフィにより精製する。
アジュバントへの結合前に、実施例4Bで説明したよう
にSMCCを用いて前記精製HBsAg誘導体を活性化する。
にSMCCを用いて前記精製HBsAg誘導体を活性化する。
次いで実施例4Cと同様の方法により、前記活性化ポリ
ペプチドをチオール化キルＡに結合させる。
ペプチドをチオール化キルＡに結合させる。
実施例７ パルボウィルス免疫原 A.チオール化キルＡの製造 キルＡ（20mg）をジメチルホルムアミド（0.5ml）中
に溶解する。HCl（10μモル;DMF中1N溶液）を加え且つ
該溶液を０℃に冷却した後、カルボニルジイミダゾール
（DMF0.04ml中20μモル）を加える。この反応混合物を
０℃で30分撹拌する。２−（２−ピリジルジチオ）−エ
チルアミン・HCl（50μモル）及びエチルジイソプロピ
ルアミン（50μモル）を加える。得られた透明溶液を18
時間室温に維持する。真空回転蒸発によりDMFを除去
し、得られたシロップを水（2ml）に溶解する。5mモル/
lのEDTAをも含むpH6.0の0.1モル/lリン酸ナトリウム中
のセファデックスG-25でのゲル過により誘導体化キル
Ａを分離する。実施例1Aで説明したようにジチオエリト
リトールでの還元とセファデックスG-25でのゲル過と
を行なってチオール化キルＡを得る。
に溶解する。HCl（10μモル;DMF中1N溶液）を加え且つ
該溶液を０℃に冷却した後、カルボニルジイミダゾール
（DMF0.04ml中20μモル）を加える。この反応混合物を
０℃で30分撹拌する。２−（２−ピリジルジチオ）−エ
チルアミン・HCl（50μモル）及びエチルジイソプロピ
ルアミン（50μモル）を加える。得られた透明溶液を18
時間室温に維持する。真空回転蒸発によりDMFを除去
し、得られたシロップを水（2ml）に溶解する。5mモル/
lのEDTAをも含むpH6.0の0.1モル/lリン酸ナトリウム中
のセファデックスG-25でのゲル過により誘導体化キル
Ａを分離する。実施例1Aで説明したようにジチオエリト
リトールでの還元とセファデックスG-25でのゲル過と
を行なってチオール化キルＡを得る。
B.誘導体化ブタパルボウィルス抗原の製造 実施例4Aの方法で分離したパルボウィルスタンパク質
（2mg）をpH7.6の0.1モル/lリン酸ナトリウム中に溶解
した溶液を、Ｎ−スクシンイミジル３−（２−ピリジル
ジチオ）−プロピオナート（SPDP;エタノール0.3ml中3.
2μモル）により室温で３時間処理する。5mモル/lのEDT
Aも含むpH6.0の0.1モル/lリン酸ナトリウム中のセファ
デックスG-25でのゲル過により２−ピリジルジスルフ
ィド置換タンパク質を分離する。
（2mg）をpH7.6の0.1モル/lリン酸ナトリウム中に溶解
した溶液を、Ｎ−スクシンイミジル３−（２−ピリジル
ジチオ）−プロピオナート（SPDP;エタノール0.3ml中3.
2μモル）により室温で３時間処理する。5mモル/lのEDT
Aも含むpH6.0の0.1モル/lリン酸ナトリウム中のセファ
デックスG-25でのゲル過により２−ピリジルジスルフ
ィド置換タンパク質を分離する。
C.免疫原の製造 Ａの方法で得たチオール化キルＡ（0.6μモルの遊離
チオール基を含む）の溶液を、Ｂの方法で得た２−ピリ
ジルジスルフィド−置換ブタパルボウィルスタンパク質
（0.45μモルの２−ピリジルジスルフィド基を含む）の
溶液に加える。
チオール基を含む）の溶液を、Ｂの方法で得た２−ピリ
ジルジスルフィド−置換ブタパルボウィルスタンパク質
（0.45μモルの２−ピリジルジスルフィド基を含む）の
溶液に加える。
この結合反応はピリジン−２−チオンの放出を測定す
ることによりモニターされ、２時間以内で完了する。こ
のキルＡ−タンパク質接合体を、150mモル/lのNaClも含
むpH7.4の0.02モル/lリン酸ナトリウムに対して透析す
る。
ることによりモニターされ、２時間以内で完了する。こ
のキルＡ−タンパク質接合体を、150mモル/lのNaClも含
むpH7.4の0.02モル/lリン酸ナトリウムに対して透析す
る。
実施例８ 免疫原の効力 生後６週間のスイスアルビノマウス10匹からなるグル
ープ２組に、KLH又はキルＡのいずれかに結合した狂犬
病ウィルス外殻ペプチドを繰返しi.p.接種した。
ープ２組に、KLH又はキルＡのいずれかに結合した狂犬
病ウィルス外殻ペプチドを繰返しi.p.接種した。
このペプチドはアミノ酸配列 Asp-Tyr-Arg-Trp-Leu-Arg-Thr-Val-Lys-Thr-Thr-Lys-Gl
y-Ser. を有する。50μｇのキルＡ又は500μｇのKLHのいずれか
に結合した前記ペプチド50μｇを各マウスに繰返し接種
した。
y-Ser. を有する。50μｇのキルＡ又は500μｇのKLHのいずれか
に結合した前記ペプチド50μｇを各マウスに繰返し接種
した。
これらマウスの血清を1/80に希釈し、第３及び第４回
目の接種の後で夫々次のテストシステムを用いる酵素標
識イムノソーベントアッセイ（ELISA）によりテストし
た。
目の接種の後で夫々次のテストシステムを用いる酵素標
識イムノソーベントアッセイ（ELISA）によりテストし
た。
第３回目接種の後：ウィルスでコーティングしたマイ
クロタイタープレート−マウス血清−抗マウスIg-HRP−
接合体。
クロタイタープレート−マウス血清−抗マウスIg-HRP−
接合体。
第４回目接種の後：ヒト抗狂犬病モノクローナル抗体
でコーティングしたマイクロタイタープレート−ERAウ
ィルス抗原−マウス血清−抗マウスIg−HRP−接合体。
でコーティングしたマイクロタイタープレート−ERAウ
ィルス抗原−マウス血清−抗マウスIg−HRP−接合体。
結果を次表に示す。
下記のペプチドを接種したマウスの血清 応答（450nm）
第３接種後 第４接種後 KLH−ペプチド 0.185 0.939 Quil-Aペプチド 0.200 0.997 対照血清 0.072 0.240 この結果から明らかなように、キルＡ−ペプチド複合
体に対して生じる抗体はKLH−ペプチド複合体に対する
抗体と少なくとも同程度の優れたウィルス結合性を示
す。
第３接種後 第４接種後 KLH−ペプチド 0.185 0.939 Quil-Aペプチド 0.200 0.997 対照血清 0.072 0.240 この結果から明らかなように、キルＡ−ペプチド複合
体に対して生じる抗体はKLH−ペプチド複合体に対する
抗体と少なくとも同程度の優れたウィルス結合性を示
す。
実施例９ サポニン誘導体のアジュバント効果 生後９週間のスイスアルビノマウス10匹からなるグル
ープ４組に偽性狂犬病（PR）抗原を単独で又はテストす
べきアジュバントと共にi.m.接種した。
ープ４組に偽性狂犬病（PR）抗原を単独で又はテストす
べきアジュバントと共にi.m.接種した。
3,9及び15週間後に血清を採取し、酵素結合イムノソ
ーベントアッセイ（ELISA）で抗PR応答をテストすべく
プールした。
ーベントアッセイ（ELISA）で抗PR応答をテストすべく
プールした。
結果を次表に示す。
これらの結果はキルＡのアジュバント活性がアジュバ
ントの誘導体化後も、さらにはペプチドの結合後さえも
そのまま存続することを示している。
ントの誘導体化後も、さらにはペプチドの結合後さえも
そのまま存続することを示している。
Claims (11)
- 【請求項１】キャリヤーに結合した少なくとも１種類の
抗原及び／又は抗原決定基から成っており、このキャリ
ヤーが主として少なくとも１種類の両親媒性アジュバン
ト分子の会合分子から成り、該アジュバント分子の少な
くとも一部分が前記抗原及び／又は抗原決定基に共有結
合していることを特徴とする免疫原。 - 【請求項２】抗原及び／又は抗原決定基が少なくとも１
つのリンカーを介して両親媒性アジュバント分子に結合
していることを特徴とする特許請求の範囲第１項に記載
の免疫原。 - 【請求項３】両親媒性アジュバントとしてサポニンを含
むことを特徴とする特許請求の範囲第１項又は第２項に
記載の免疫原。 - 【請求項４】複数の異なる種類の抗原及び／又は抗原決
定基を含んでおり、これら抗原及び／又は抗原決定基
が、対抗免疫が望まれる複数の異なる種類の病原体及び
／又はその他の物質に特有のものであることを特徴とす
る特許請求の範囲第１項乃至第３のいずれかに記載の免
疫原。 - 【請求項５】抗原決定基及び／又は抗原及び／又は両親
媒性アジュバント分子の少なくとも一部分が互いに結合
していることを特徴とする特許請求の範囲第１項乃至第
４項のいずれかに記載の免疫原。 - 【請求項６】カプセル内に封入されていることを特徴と
する特許請求の範囲第１項乃至第５項のいずれかに記載
の免疫原。 - 【請求項７】キャリヤーに結合した少なくとも１種類の
抗原及び／又は抗原決定基から成る免疫原であり、この
キャリヤーが主として少なくとも１種類の両親媒性アジ
ュバント分子の会合分子から成り、該アジュバント分子
の少なくとも一部分が前記抗原及び／又は抗原決定基に
共有結合している前記免疫原の製法であって、所望であ
れば少なくとも１種類の遊離両親媒性アジュバントを存
在させて、少なくとも１つの両親媒性グリコシドと少な
くとも１つの抗原及び／又は抗原決定基とから成り、こ
れらが互いに共有結合している少なくとも１種類の両親
媒性アジュバント分子含有化合物から、目的に合った従
来法で会合分子を形成し、次いでこうして形成した免疫
原を単離し、その後所望であればこの免疫原を安定化し
及び／又は加水分解性開裂に対して保護することを特徴
とする方法。 - 【請求項８】両親媒性アジュバント分子含有化合物が、
少なくとも１つの両親媒性アジュバント分子と、少なく
とも１つの抗原及び／又は抗原決定基とを、この種の化
合物に対して通常用いられる方法により結合させて得ら
れることを特徴とする特許請求の範囲第７項に記載の方
法。 - 【請求項９】キャリヤーに結合した少なくとも１種類の
抗原及び／又は抗原決定基から成る免疫原であり、この
キャリヤーが主として少なくとも１種類の両親媒性アジ
ュバント分子の会合分子から成り、該アジュバント分子
の少なくとも一部分が前記抗原及び／又は抗原決定基に
共有結合している前記免疫原の製法であって、必要に応
じ少なくとも１つのリンカーを有する抗原及び／又は抗
原決定基と、必要に応じ１つ以上のリンカーを有し且つ
主に少なくとも１種類の両親媒性アジュバントからなる
会合分子とを公知の方法で反応させ、それによって前記
抗原及び／又は抗原決定基又はこれらに結合していても
よいリンカーと、前記両親媒性アジュバント又はこれに
結合していてもよいリンカーとの間に共有結合を生起さ
せ、次いでこうして形成した免疫原を単離し、その後所
望であればこの免疫原を安定化し及び／又は加水分解性
開裂に対して保護することを特徴とする方法。 - 【請求項１０】キャリヤーに結合した少なくとも１種類
の抗原及び／又は抗原決定基から成る免疫原であり、こ
のキャリヤーが主として少なくとも１種類の両親媒性ア
ジュバント分子の会合分子から成り、該アジュバント分
子の少なくとも一部分が前記抗原及び／又は抗原決定基
に共有結合している複数の前記免疫原を遅延放出投与形
態で含むことを特徴とする免疫作用を有する薬剤組成
物。 - 【請求項１１】キャリヤーに結合した少なくとも１種類
の抗原及び／又は抗原決定基から成る免疫原であり、こ
のキャリヤーが主として少なくとも１種類の両親媒性ア
ジュバント分子の会合分子から成り、該アジュバント分
子の少なくとも一部分が前記抗原及び／又は抗原決定基
に共有結合している２つ以上の異なる種類の前記免疫原
を含むことを特徴とする混合ワクチン製剤。
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