JPH088862B2 - グラニユロ−シスウイルスの培養方法 - Google Patents
グラニユロ−シスウイルスの培養方法Info
- Publication number
- JPH088862B2 JPH088862B2 JP62199267A JP19926787A JPH088862B2 JP H088862 B2 JPH088862 B2 JP H088862B2 JP 62199267 A JP62199267 A JP 62199267A JP 19926787 A JP19926787 A JP 19926787A JP H088862 B2 JPH088862 B2 JP H088862B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- larvae
- virus
- cpgv
- carried out
- species
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/14011—Baculoviridae
- C12N2710/14051—Methods of production or purification of viral material
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- External Artificial Organs (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 バクロウイルス科に属するグラニユロ−シスウイルス
は感受性昆虫の幼虫により経口摂取された後、この昆虫
の種々の器官及び組織内で増殖する。細胞変性効果によ
り昆虫の幼虫は死滅する。
は感受性昆虫の幼虫により経口摂取された後、この昆虫
の種々の器官及び組織内で増殖する。細胞変性効果によ
り昆虫の幼虫は死滅する。
コドリンガ〔ハマキガ科のシジア（Cydia）（＝ラス
ペイレシア（Laspeyresia）＝カルポカプサ（Carpocaps
a）ポモネラ（pomonella）Ｌ〕のグラニユローシスウイ
ルスは1963年、カリフオルニア州バークレーでコドリン
ガの幼虫から単離された〔タナダ（TANADA）,Y.:J.Inse
ct Pathol.６,1984参照〕。略称は「CpGV」である。CpG
Vは果樹栽培において植物保護を完全に行う立場からコ
ドリンガの選択的駆除に非常に適している〔フーバー
（HUBER）、Mitt.Dtsch.Ges.allg.angew.Ent.４,55,198
3参照〕。
ペイレシア（Laspeyresia）＝カルポカプサ（Carpocaps
a）ポモネラ（pomonella）Ｌ〕のグラニユローシスウイ
ルスは1963年、カリフオルニア州バークレーでコドリン
ガの幼虫から単離された〔タナダ（TANADA）,Y.:J.Inse
ct Pathol.６,1984参照〕。略称は「CpGV」である。CpG
Vは果樹栽培において植物保護を完全に行う立場からコ
ドリンガの選択的駆除に非常に適している〔フーバー
（HUBER）、Mitt.Dtsch.Ges.allg.angew.Ent.４,55,198
3参照〕。
CpGVの生産は、コドリンガの幼虫の中で、即ち幼虫最
終齢にあるこの幼虫にグラニユローシスウイルスを感染
させ続いてウイルスを幼虫の死骸から抽出することによ
り行われる〔例えば、フーバー（HUBER）,J.:Mitt.Dtsc
h.Ges.allg.angew.Ent.２,141,1981;グレン（GLEN）,D.
M.＆ペイネ（PAYNE）,C.C.:Ann.appl.Biol.104,87,1984
参照〕。
終齢にあるこの幼虫にグラニユローシスウイルスを感染
させ続いてウイルスを幼虫の死骸から抽出することによ
り行われる〔例えば、フーバー（HUBER）,J.:Mitt.Dtsc
h.Ges.allg.angew.Ent.２,141,1981;グレン（GLEN）,D.
M.＆ペイネ（PAYNE）,C.C.:Ann.appl.Biol.104,87,1984
参照〕。
コドリンガの幼虫に対するCpGVの非常に高い毒性の故
に、増殖回分にCpGVがインフエステーシヨンするのを避
けるためコドリンガの大量増殖の半無菌の条件下で行う
必要がある。この半無菌の増殖は、非常に労働集約的で
ありかつ費用がかかる。
に、増殖回分にCpGVがインフエステーシヨンするのを避
けるためコドリンガの大量増殖の半無菌の条件下で行う
必要がある。この半無菌の増殖は、非常に労働集約的で
ありかつ費用がかかる。
今や驚くべきことに本発明者らはCpGV生産をハマキガ
科の別の種において有利な方法で実施できることを発見
した。
科の別の種において有利な方法で実施できることを発見
した。
従って本発明の対象は、シジアポモネラ（Cydia pomo
nella）グラニユローシスウイルスを培養するにあた
り、このウイルスに対しコドリンガの幼虫よりも高い、
係数として５〜100,000好ましくは10〜5,000のLD50値を
有するハマキガ科の種の幼虫の中でこのウイルスを増殖
させることを特徴とする、このウイルスの培養方法であ
る。
nella）グラニユローシスウイルスを培養するにあた
り、このウイルスに対しコドリンガの幼虫よりも高い、
係数として５〜100,000好ましくは10〜5,000のLD50値を
有するハマキガ科の種の幼虫の中でこのウイルスを増殖
させることを特徴とする、このウイルスの培養方法であ
る。
本法は、ヒメハマキガ亜科の幼虫の中で、例えばグラ
ホリタ・モレスタ（Grapholita molesta）、リアシオニ
ア・ブオリアナ（Rhyacionia buoliana）、シジア・ニ
グリカナ（Cydia nigricana）又はクリプトフレビア・
レウコトレトラ（Crypthophlebia leucotretra）の幼虫
の中で、特にクリプトフレビア・レウコトレトラ・メイ
ル（Crypthophlebia leucotretra Meyr）の幼虫の中で
行うのが好ましい。最後に種に対し、これまでCpGVに関
する病原性は全く知られていなかった。
ホリタ・モレスタ（Grapholita molesta）、リアシオニ
ア・ブオリアナ（Rhyacionia buoliana）、シジア・ニ
グリカナ（Cydia nigricana）又はクリプトフレビア・
レウコトレトラ（Crypthophlebia leucotretra）の幼虫
の中で、特にクリプトフレビア・レウコトレトラ・メイ
ル（Crypthophlebia leucotretra Meyr）の幼虫の中で
行うのが好ましい。最後に種に対し、これまでCpGVに関
する病原性は全く知られていなかった。
本発明による方法は半無菌ではない、即ち通常の衛生
的な条件下で行われる。ハマキガ科の幼虫を飼育するた
めに温度は既知のCpGV増殖方法において一般に行われて
いる温度より高い温度が選択される。このようにしてCp
GVの生産方法は著しく簡略化することができる。
的な条件下で行われる。ハマキガ科の幼虫を飼育するた
めに温度は既知のCpGV増殖方法において一般に行われて
いる温度より高い温度が選択される。このようにしてCp
GVの生産方法は著しく簡略化することができる。
ヒメハマキガ科の種の増殖は、トウモロコシ粉又は豆
粉のような炭素源、コムギの麦芽及びビール酵母又は飼
料酵母、アスコルビン酸のようなタンパク源、ビタミン
源及び微量元素源、静真菌性剤並びに寒天のようなゲル
化剤及び／又は水結合性物質から成る半合成培養基上で
20〜34℃、好ましくは26〜30℃の温度で行われる。この
条件下で一世代の発生には20〜50日間かかる。
粉のような炭素源、コムギの麦芽及びビール酵母又は飼
料酵母、アスコルビン酸のようなタンパク源、ビタミン
源及び微量元素源、静真菌性剤並びに寒天のようなゲル
化剤及び／又は水結合性物質から成る半合成培養基上で
20〜34℃、好ましくは26〜30℃の温度で行われる。この
条件下で一世代の発生には20〜50日間かかる。
CpGVによる幼虫の感染は、幼虫初期、好ましくは第２
又は第３齢において、栄養培養基の表面を汚染すること
により行う。次いで昆虫の幼虫を上述した温度に保つ。
感染後５〜14日、好ましくは６〜９日したらウイルスを
含有する死骸を後処理しここからCpGVを既知の方法で単
離する。
又は第３齢において、栄養培養基の表面を汚染すること
により行う。次いで昆虫の幼虫を上述した温度に保つ。
感染後５〜14日、好ましくは６〜９日したらウイルスを
含有する死骸を後処理しここからCpGVを既知の方法で単
離する。
（実施例） 次の実施例により本発明をさらに詳細に説明する。
クリプトフレビア・レウコトレトラにおけるCpGVの生産 羽化したばかりの蛾、C.レウコトレトラ（雌雄比約1:
1）をプラスチツクフオームで覆った産卵かご−かごの
上部にある開口部は透明なフイルムでおおわれている−
に移す。蛾は透明なフイルム上に卵を生み、このフイル
ムは毎日取り替えられる。蛾の栄養として水を使用し、
部分的に酵母抽出物を付け加える。孵化温度は24〜30℃
である。
1）をプラスチツクフオームで覆った産卵かご−かごの
上部にある開口部は透明なフイルムでおおわれている−
に移す。蛾は透明なフイルム上に卵を生み、このフイル
ムは毎日取り替えられる。蛾の栄養として水を使用し、
部分的に酵母抽出物を付け加える。孵化温度は24〜30℃
である。
卵から孵化した幼虫から100匹ごとを各々200mlの半合
成培養基−培養基1kgあたり寒天20g、トウモロコシ荒び
き粉140g、コムギ麦芽35g、ビール酵母38g、アスコルビ
ン酸5g、安息香酸2.3g、ｐ−ヒドロキシ安息香酸1.8g及
び水760gから成る−上にのせる。保温温度28℃で６日
後、即ち幼虫が第２齢の最後〜第３齢の最初である時点
において培養基の表面をグラニユローシスウイルスの懸
濁液で汚染する。2.5×106ウイルス/cm2の濃度に調整す
る。６〜９日後ウイルスを含有する死骸を培養基から吸
引過し、顆粒を種々の遠心分離により精製する。収量
は培養基200mlあたりウイルス粒子（顆粒）1.0〜1.2×1
012個であった。
成培養基−培養基1kgあたり寒天20g、トウモロコシ荒び
き粉140g、コムギ麦芽35g、ビール酵母38g、アスコルビ
ン酸5g、安息香酸2.3g、ｐ−ヒドロキシ安息香酸1.8g及
び水760gから成る−上にのせる。保温温度28℃で６日
後、即ち幼虫が第２齢の最後〜第３齢の最初である時点
において培養基の表面をグラニユローシスウイルスの懸
濁液で汚染する。2.5×106ウイルス/cm2の濃度に調整す
る。６〜９日後ウイルスを含有する死骸を培養基から吸
引過し、顆粒を種々の遠心分離により精製する。収量
は培養基200mlあたりウイルス粒子（顆粒）1.0〜1.2×1
012個であった。
Claims (5)
- 【請求項１】シジア・ポモネラ（Cydia pomonella）グ
ラニユローシスウイルス（CpGV）を培養するにあたり、
このウイルスに対しコドリンガの幼虫よりも高い、係数
として５〜100,000のLD50値を有するハマキガ科の種の
幼虫の中でこのウイルスを増殖させることを特徴とする
上記ウイルスを培養する方法。 - 【請求項２】コドリンガの幼虫よりも高い、係数として
10〜5,000のLD50値を有するハマキガ科の種の幼虫の中
で行う特許請求の範囲第１項記載の方法。 - 【請求項３】ヒメハマキガ亜科の幼虫の中で行う特許請
求の範囲第１項または第２項記載の方法。 - 【請求項４】グラホリタ・モレスタ（Grapholita moles
ta）、リアシオニア・ブオリアナ（Rhyacionia buolian
a）、シジア・ニグリカナ（Cydia nigricana）又はクリ
プトフレビア・レウコトレトラ（Cryptophlebia leucot
retra）の幼虫の中で行う特許請求の範囲第１項から第
３項までのうちのいずれか一つに記載の方法。 - 【請求項５】クリプトフレビア・レウコトレトラ（Cryp
tophlebia leucotretra）の幼虫の中で行う特許請求の
範囲第１項から第４項までのうちのいずれか一つに記載
の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3627396.1 | 1986-08-13 | ||
| DE19863627396 DE3627396A1 (de) | 1986-08-13 | 1986-08-13 | Verfahren zur zuechtung von granuloseviren |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63185377A JPS63185377A (ja) | 1988-07-30 |
| JPH088862B2 true JPH088862B2 (ja) | 1996-01-31 |
Family
ID=6307270
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62199267A Expired - Lifetime JPH088862B2 (ja) | 1986-08-13 | 1987-08-11 | グラニユロ−シスウイルスの培養方法 |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4789632A (ja) |
| EP (1) | EP0256457B1 (ja) |
| JP (1) | JPH088862B2 (ja) |
| AT (1) | ATE71654T1 (ja) |
| AU (1) | AU600295B2 (ja) |
| CA (1) | CA1291056C (ja) |
| DE (2) | DE3627396A1 (ja) |
| DK (1) | DK420287A (ja) |
| IL (1) | IL83493A (ja) |
| NZ (1) | NZ221402A (ja) |
| ZA (1) | ZA875955B (ja) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4911913A (en) * | 1989-03-07 | 1990-03-27 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Multiple embedded nuclear polyhedrosis virus from celery looper with activity against lepidoptera |
| WO2004021781A2 (en) * | 2002-09-09 | 2004-03-18 | Citrus Research International (Pty) Limited | Cryptophlebia leucotreta granulovirus (crlegv-sa) as a biological control agent |
| CN118979018B (zh) * | 2024-05-23 | 2025-04-01 | 沈阳农业大学 | 苹果蠹蛾核型多角体病毒毒株及其在生物杀虫剂中的应用 |
| CN118749498A (zh) * | 2024-08-21 | 2024-10-11 | 中国农业科学院深圳农业基因组研究所(岭南现代农业科学与技术广东省实验室深圳分中心) | 一种苹果蠹蛾颗粒体病毒饲喂方法 |
-
1986
- 1986-08-13 DE DE19863627396 patent/DE3627396A1/de active Granted
-
1987
- 1987-08-08 EP EP87111489A patent/EP0256457B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1987-08-08 AT AT87111489T patent/ATE71654T1/de not_active IP Right Cessation
- 1987-08-08 DE DE8787111489T patent/DE3776027D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1987-08-11 JP JP62199267A patent/JPH088862B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1987-08-11 NZ NZ221402A patent/NZ221402A/xx unknown
- 1987-08-11 IL IL83493A patent/IL83493A/xx not_active IP Right Cessation
- 1987-08-11 US US07/084,284 patent/US4789632A/en not_active Expired - Fee Related
- 1987-08-12 ZA ZA875955A patent/ZA875955B/xx unknown
- 1987-08-12 AU AU76800/87A patent/AU600295B2/en not_active Ceased
- 1987-08-12 CA CA000544289A patent/CA1291056C/en not_active Expired - Fee Related
- 1987-08-12 DK DK420287A patent/DK420287A/da not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0256457A3 (en) | 1989-07-26 |
| JPS63185377A (ja) | 1988-07-30 |
| CA1291056C (en) | 1991-10-22 |
| AU7680087A (en) | 1988-02-18 |
| IL83493A0 (en) | 1988-01-31 |
| ATE71654T1 (de) | 1992-02-15 |
| US4789632A (en) | 1988-12-06 |
| EP0256457B1 (de) | 1992-01-15 |
| DK420287A (da) | 1988-02-14 |
| NZ221402A (en) | 1989-01-06 |
| ZA875955B (en) | 1988-03-30 |
| DE3627396C2 (ja) | 1989-11-23 |
| DK420287D0 (da) | 1987-08-12 |
| IL83493A (en) | 1992-12-01 |
| DE3776027D1 (de) | 1992-02-27 |
| AU600295B2 (en) | 1990-08-09 |
| DE3627396A1 (de) | 1988-02-18 |
| EP0256457A2 (de) | 1988-02-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105176828B (zh) | 球孢白僵菌XNBb-04菌株及其培养方法 | |
| WO2016111480A1 (ko) | 곤충병원성 보베리아 바시아나 및 이를 이용한 농업해충 방제용 액상제제 | |
| CN117467566B (zh) | 一株Rossellomorea marisflavi及其应用 | |
| Claydon | Insecticidal secondary metabolites from entomogenous fungi: Entomophthora virulenta | |
| JPH088862B2 (ja) | グラニユロ−シスウイルスの培養方法 | |
| KR20180079240A (ko) | 신규한 뷰베리아 바시아나 엠130 균주 및 그를 이용한 온실가루이와 담배가루이에 대한 생물학적 방제 방법 | |
| CN107182943B (zh) | 一种室内大量饲养迟眼蕈蚊的方法 | |
| JPH0615447B2 (ja) | ウイルスを利用した殺虫剤及びその調製法 | |
| CN112021336A (zh) | 基于复合微生物速效农药颗粒剂防治草地贪夜蛾的方法 | |
| JP3902216B1 (ja) | 昆虫寄生菌の子実体の生産方法 | |
| RU2763055C1 (ru) | СПОСОБ ПРОИЗВОДСТВА СПОР МИКРОСПОРИДИИ Nosema pyrausta | |
| CN110616154A (zh) | 一种以黑水虻虫蛹为寄主培育的蛹虫草及其培育方法 | |
| CN107006430A (zh) | 一种规模化生产小卷蛾斯氏线虫新方法 | |
| CN114916504A (zh) | 斯氏线虫的培养方法、斯氏线虫蛹胶囊制剂及其制备方法 | |
| CN120384054B (zh) | 一株番茄潜叶蛾颗粒体病毒株及应用 | |
| CN108142382B (zh) | 一种规模化饲养桃蛀螟的方法 | |
| CN115720963B (zh) | 一种新渡户线虫培养基及培养方法 | |
| JPH09215499A (ja) | 有用タンパク質の製造方法およびこれに用いるカイコ | |
| CN106417378B (zh) | 一种防治螟虫广谱杆状病毒生物农药及制备方法 | |
| RU2781982C1 (ru) | СПОСОБ МАССОВОЙ НАРАБОТКИ СПОР МИКРОСПОРИДИИ Nosema pyrausta | |
| CN112961838B (zh) | 一株豆天蛾质型多角体病毒毒株及其增殖方法与应用 | |
| CN121555330B (zh) | 一株产孢的瘿棉蚜绿僵菌菌株及其在西花蓟马防治中的应用 | |
| CN115725515B (zh) | 草地贪夜蛾核型多角体病毒及其生产方法 | |
| CN110402965A (zh) | 甘蓝夜蛾核型多角体病毒杀虫混合物及其杀虫增效方法 | |
| SU726164A1 (ru) | Питательна среда дл выращивани нематод рода |