MXPA05010881A

MXPA05010881A - Vacunas e inmunoterapias a base de proteina de choque termico mejorada.

Info

Publication number: MXPA05010881A
Application number: MXPA05010881A
Authority: MX
Inventors: Brian H Barber
Original assignee: Antigenics Inc
Priority date: 2003-04-11
Filing date: 2004-04-09
Publication date: 2006-05-31
Also published as: WO2004091493A3; AU2004229458B2; JP2007525448A; KR20050121721A; EP1617804A2; AU2004229458A1; WO2004091493A2; EP1617804A4; BRPI0409321A; CA2521809A1

Abstract

Se describen antigenos hibridos que comprenden al menos un dominio antigenico, al menos un dominio de enlace de proteina de choque termico, y al menos un enlazador de peptido mejorado que son utiles para la induccion de una respuesta inmune al dominio antigenico cuando se administra solo o en un complejo con al menos una proteina de choque termico. Los antigenos y complejos hibridos pueden utilizarse para tratar enfermedades infecciosas y canceres que expresan un antigeno del dominio antigenico.

Description

VACUNAS E INMUNOTERAPIAS A BASE DE PROTEÍNA DE CHOQUE TÉRMICO MEJORADAS INTRODUCCIÓN La presente invención se relaciona a métodos y composiciones para inducir una respuesta inmune en un sujeto, en donde al sujeto se le administra una cantidad efectiva de al menos uno o más antígenos híbridos definidos opcionalmente en combinación con una o más proteínas de choque térmico . Pueden usarse estos métodos y composiciones en el tratamiento de enfermedades infecciosas y cánceres .

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Se observaron originalmente proteínas de choque térmico para expresarse en cantidades incrementadas en las células de mamífero que se expusieron a las elevaciones repentinas de temperatura, mientras que la expresión de la mayoría de las proteínas celulares está significativamente reducida. Ha sido subsecuentemente determinado que se producen las proteínas en respuesta a los diversos tipos de tensión, incluyendo la privación de glucosa. Como se utiliza en la presente, el término "proteína de choque térmico" se utilizará para abarcar las proteínas que se etiquetan expresamente tal como otras proteínas de tensión, incluyendo homólogos de tales proteínas que se expresan constitutivamente (i.e., en la ausencia de condiciones estresantes) . Los ejemplos de proteínas de choque térmico incluyen BiP (también referidas como grp78) , hsp70, hsc70, gp96 (grp94) , hsp60, hsp40 y hsp90. Las proteínas de choque térmico tienen la capacidad de unir a otras proteínas en sus estados non-nativos, y en particular para unir los peptidos nacientes que surge de los ribosomas o se extruyen en el retículo endoplásmico . Hendrick and Hartl, Ann. Rev. Biochem. 62: 349-384 (1993); Hartl, Naturaleza 381: 571-580 (1996). Además, se han mostrado proteínas de choque térmico para jugar un papel importante en el doblado y esamblado apropiado de las proteínas en el citosol, retículo endoplásmico y mitocondria en vista de esta función, se refieren como "acompañantes moleculares" . Frydman et al., Nature 370: 111-117 (1994); Hendrick and Hartl, Ann. Rev. Biochem. 62: 349-384 (1993); Hartl, Nature 381: 571-580 (1996) . Por ejemplo, la proteína BiP, un miembro de una clase de proteínas de choque térmico referido como la familia hsp70, se ha encontrado que une la cadena pesada de inmunoglobulina µ recientemente sintetizada, desdoblada previa a su ensamble con la cadena ligera en el retículo endoplásmico. Hendershot et al., J. Cell. Biol. 104: 761-767 (1987) . Otra proteína de choque térmico, gp96, es un miembro de la familia hsp90 de proteínas de tensión que se localiza en el retículo endoplásmico . Li y Srivastava, EMBO J. , 12: 3143-3151 (1993); Mazzarella y Green, J. , Biol. Chem. 262:8875-8883 (1987). Se ha propuesto que gp96 puede ayudar en el ensamble de proteínas de multi-subunidades en el retículo endoplásmico. Wiech et al., Nature 358: 169-170 (1992) . Se ha observado que las proteínas de choque térmico preparadas de los tumores en los animales experimentales pueden ser capaces de inducir las respuestas inmunes de una manera específica de tumor; esto es para decir, proteína de choque térmico purificada de un tumor particular podría inducir a una respuesta inmune en un animal experimental que inhibiría el crecimiento del mismo tumor, pero no otros tumores. Srivastava and Maki, Curr. Topics Microbiol. 167: 109-123 (1991) . No se han encontrado genes que codifiquen las proteínas de choque térmico para mostrar el polimorfismo de ADN específico de tumor. Srivastava y Udono, Curr. Opin. Immunol. 6:728-732 (1994) . La electroforesis de gel de alta resolución ha indicado que gp96 puede estar heterogéneo en el nivel molecular. Feldweg y Srivastava, Int. J\ Cáncer 63:310-314 (1995) . La evidencia sugiere que la fuente de heterogeneidad pueda ser poblaciones de péptidos pequeños adherentes en la proteína de choque térmico que puede numerar en centenares. Id. Se ha propuesto que una amplia diversidad de péptidos adheridos a las proteínas de choque térmico sintetizadas de tumor pueden dar tales proteínas capaces de producir una respuesta inmune en sujetos que tienen los fenotipos HLA diversos, en contraste con imnunogenes más tradicionales que pueden ser un poco restringidos de HLA en su eficacia. Id. Nieland et al. (Proc. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 93: 6135-6139 (1996)) identificó un péptido antigénico que contienen un linfocito T citotóxico (CTL) , epítope de virus de estomatitis vesicular (VSV) , unidos a gp96 producido por células infectadas por VSV. Los métodos de Neiland evitaron la identificación de cualquier péptidos adicional u otros compuestos que también pueden haber sido unidos al gp96, y fueron por consiguiente incapaces de caracterizar además el material de peso molecular elevado que se une al gp96 y se detecta por cromatografía líquida de presión elevada. Se ha reportado que un péptido sintético que comprende iteraciones múltiples de antígeno palúdico NANP (Asp Ala Asp Pro) , químicamente reticulado para hsp65 o hsp70 micobacterial fijo a glutaraldehído, fue capaz de inducir la formación del anticuerpo (i.e., una respuesta humoral) en los ratones en la ausencia de cualquier adyuvante agregado; un efecto similar se observó utilizando la proteína de choque térmico de la bacteria Escherichia coli. Del Guidice, Experientia 50: 10S1-1066 (1994); Barrios et al., Clin. Exp. Immunol. 98:224-228 (1994); Barrios et al . , Eur. J. Immunol. 22: 1365-1372 (1992). La reticulación del peptido sintético para calentar la proteina de ataque térmico y posiblemente la fijación de glutaraldehído se requirió para la inducción del anticuerpo. Barrios et al., Clin. Exp. Immunol . 98:229-233. La PCT/US96/13363 describe antígenos híbridos que comprenden un dominio antigénico y un dominio de enlace de proteína de choque térmico que, en un compuesto con una proteína de choque térmico, induce a las respuestas inmunológicas a los antígenos y son de este modo útiles para el tratamiento de cáncer y enfermedades infecciosas. La PCT/US98/22335 describe los dominios de enlace de la proteína de choque térmico adicionales para usos similares, así como la capacidad para el antígeno híbrido administrado solo para inducir una respuesta inmune . Se ha descubierto ahora que las mejoras en el enlazador de péptido presente entre al menos un dominio antigénico y al menos una proteína de choque térmico que une el dominio en un antígeno híbrido que se conduce en un incremento en la actividad biológica. Este incremento también se encuentra que proporciona un incremento induciendo una respuesta inmune contra la porción antigénica del antígeno híbrido. Es hacia estos enlazadores de péptido mejorados, péptidos híbrido que los contiene y sus usos con y sin proteína de choque térmico, que la aplicación presente se dirige .

COMPENDIO DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona a los métodos y composiciones para inducir una respuesta inmune en un sujeto, donde al menos un antígeno híbrido definido opcionalmente en un compuesto con una proteína de choque térmico se administra al sujeto. El antígeno híbrido comprende al menos un dominio antigénico y al menos un dominio de enlace de proteína de choque térmico, y al menos un enlazador de peptido entre los mismos . La inducción de una respuesta inmune a un antígeno asociado con una enfermedad tal como una enfermedad infecciosa o tumor es útil para el tratamiento de la enfermedad. El dominio antigénico o inmunogénico del antígeno híbrido puede ser una proteína entera o antígeno de peptido, o puede ser sólo una porción del antígeno seleccionado, por ejemplo un epítope seleccionado del antígeno. El dominio de enlace de protelna de choque térmico es un peptido que une a una proteína de choque térmico, preferiblemente un péptido de 7-15 aminoácidos que enlaza a una proteína de choque térmico, y más preferiblemente a un péptido hidrofóbico que une a una proteína de choque térmico, y más preferiblemente un péptido hidrofóbico de 7-15 aminoácidos que enlaza a una proteína de choque térmico. El enlazador tiene una secuencia dentro de Phe Phe Arg Lys (FFRK SEC. DE IDENT. NO.: 1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FR N, SEC. DE IDENT. NO.: 1002); Arg Lys Asn (RKN) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFR N, SEC. DE IDENT.

NO. -.1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QL ) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (A VL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001) ; Lys Asn ( N) ; Arg Lys (RK) ; o AAi-AA2-AA3-leucina, en donde AAX es A, S, V, E, G, L, or , preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es K, V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K; y AA3 es V, S, F, K, A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QLK) , Arg Lys (RK) y Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO..-1001) se prefiere, y Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO . : 1000) es más preferido. La presente invención proporciona métodos para administrar tales antígenos híbridos solos, así como las composiciones de proteína de choque térmico/antígeno híbrido, el último comprende (i) combinar uno o más proteína de choque térmico con uno o más antígenos híbridos in vitro, bajo condiciones donde la unión del antígeno híbrido a la proteína de choque térmico ocurre para formar un compuesto de antígeno híbrido/proteína de choque térmico; y (ii) administrar el antígeno híbrido, unir a la proteína de choque térmico, en una cantidad efectiva a un sujeto con necesidad de tal tratamiento. Alternativamente, pueden introducirse los antígenos híbridos opcionalmente en combinación con la proteína de choque térmico a un sujeto administrando al sujeto un ácido nucleico que codifica el antígeno híbrido, opcionalmente con ácido nucleico que codifica la proteína de choque térmico. De este modo, en un primer aspecto, la invención se dirige a un antígeno híbrido que consiste esencialmente de un dominio antigénico de un agente infeccioso o antígeno tumoral, un dominio de enlace que enlaza no covalentemente a una proteína de choque térmico, y un enlazador de péptido que separa el dominio antigénico y el dominio de enlace, y en donde el enlazador de péptido está dentro de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.: 1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FR N, SEC. DE IDENT. NO.: 1002) ; Arg Lys Asn (RKN) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.:1001); Lys Asn (KN) ; Arg Lys (RK) ; o AAi-AA2-AA3-leucina, en donde AAX es A, S, V, E, G, L, o , preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es K, V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K; y AA3 es V, S, F, K, A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QLK) , Arg Lys (RK) y Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO. : 1001) se prefiere, y Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT.. NO.:1000) es la más preferida. En un segundo aspecto, la invención se dirige a un antígeno híbrido que consiste esencialmente de una pluralidad de dominios antigénicos de uno o más agentes infecciosos o uno o más antígenos de tumor, al menos un dominio de enlace que enlaza no covalentemente a una proteína de choque térmico, y al menos un enlazador de péptido que separa los dominios antigénicos y al menos un dominio de enlace, y donde al menos un enlazador de péptido está dentro de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.: 1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FR N, SEC. DE IDENT. NO.: 1002); Arg Lys Asn (RKN) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFR N, SEC. DE IDENT. NO.: 1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (A VL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001); Lys Asn ( N) ; Arg Lys (RK) ; o ???- A2-AA3-1eucina, en donde AA es A', S, V, E, G, L, o K, preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es K, V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K; y AA3 es V, S, F, K, A, E, o T, preferiblemente F, más pre eriblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QLK) , Arg Lys (RK) y Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001) se prefiere, y Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO. :1000) es la más preferida. En una modalidad particular al menos uno de los dominios antigénicos en el antígeno híbrido mencionado es un epítope de T auxiliar. En un tercer aspecto, la invención se dirige a un antígeno híbrido que comprende un dominio antigénico de un agente infeccioso o antígeno tumoral y un dominio de enlace que enlaza no covalentemente a una proteína de choque térmico, y el enlazador de peptido entre el mismo, y donde al menos un enlazador de peptido está dentro de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC . DE IDENT. NO.: 1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1002); Arg Lys Asn (RKN) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (A VL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001); Lys Asn (KN) ; Arg Lys (RK) ; o AA1-AA2-AA3-leucina, en donde AAi es A, S, V, E, G, L, o K, preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es K, V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K; y AA3 es V, S, F, K, A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QLK) , Arg Lys (RK) y Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001) se prefiere, y Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO. -.1000) es el más preferido. En una modalidad particular, el antigeno híbrido antes mencionado tiene un enlazador de peptido que separa el dominio antigenico y el dominio de enlace. En un cuarto aspecto, la invención se dirige a un antígeno híbrido que comprende una pluralidad de dominios antigénicos de uno o más agentes infecciosos o uno o más antígenos de tumor y al menos un dominio de enlace que enlaza no covalentemente a una proteína de choque térmico, y al menos un enlazador de péptido entre el mismo, y donde al menos un enlazador de péptido está dentro de Phe Phe Arg Lys (FF K; SEC. DE IDENT. NO.: 1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FRKN, SEC. DE IDENT.NO. : 1002) ; Arg Lys Asn (RKN) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (A VL; SEC . DE IDENT. NO.: 1001); Lys Asn (KN) ; Arg Lys (RK) ; o AA1-AA2-AA3-leucina, en donde AA es A, S, V, E, G, L, o K, preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es K, V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K; y AA3 es V, S, F, K, A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QLK) , Arg Lys (RK) y Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001) se prefiere, y Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.:1000) es el más preferido . En una modalidad particular al menos uno de los dominios antigénicos es un epítope de T auxiliar. En un quinto aspecto, la invención se dirige a una composición para inducir una respuesta inmune en un agente infeccioso o antígeno tumoral que comprende al menos un antígeno híbrido, el antígeno híbrido que comprende un dominio antigénico del agente infeccioso o antígeno tumoral, un dominio de enlace que enlaza no covalentemente a una proteína de choque térmico, y al menos un enlazador de péptido entre los mismos, y donde al menos un enlazador de péptido está dentro de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO. -.1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1002); Arg Lys Asn (RKN) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLk) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001); Lys Asn (KM) ; Arg Lys (RK) ; o ???-AA2-AA3-leucina, en donde AAi es A, S, V, E, G, L, o K, preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es K, V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K; y AA3 es V, S, F, , A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QLK) , Arg Lys (RK) y Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC . DE IDENT. NO..1001) se prefiere, y Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.: 1000) es el más preferido. En una modalidad, la composición comprende una pluralidad de antígenos híbridos, y uno de los antígenos híbridos puede comprender un epítope T auxiliar. En un sexto aspecto, la invención se dirige a una composición para inducir una respuesta inmune en un agente infeccioso o antígeno tumoral que comprende al menos un antígeno híbrido, el antígeno híbrido que comprende una pluralidad de dominios antigénicos al menos uno de los cuales es del agente infeccioso o antígeno tumoral, al menos un dominio de enlace que enlaza no covalentemente a una proteína de choque térmico, y al menos un enlazador de péptido entre los mismos, y donde al menos un enlazador de péptido está dentro de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.:1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FR , SEC. DE IDENT. NO.: 1002); Arg Lys Asn (RK ) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QL ) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO. :1001) ; Lys Asn (KN) ; Arg Lys (RK) ; o AAi-AA2-AA3-leucina, en donde ??? es A, S, V, E, G, L, o K, preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es K, V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K; y AA3 es V, S, F, K, A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QLK) , Arg Lys (RK) y Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO. :1001) se prefiere, y Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.:1000) es el más preferido. En un séptimo aspecto, la invención se dirige a una composición para inducir una respuesta inmune en un agente infeccioso o antigeno tumoral que comprende al menos un antígeno híbrido, el antígeno híbrido que consiste esencialmente de un dominio antigénico del agente infeccioso o antígeno tumoral, un dominio de enlace que enlaza no covalentemente a una proteína de choque térmico, y un enlazador de péptido que separa el dominio antigénico y el dominio de enlace, y donde al menos un enlazador de péptido está dentro de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.: 1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1002) ; Arg Lys Asn (RKN) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC. DE IDENT. NO.:1003) ; Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QL ) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC . DE IDENT. NO.: 1001); Lys Asn (KN) ; Arg Lys (RK) ; o AAX-AA2-AA3-leucina, en donde AAi es A, S, V, E, G, L, o K, preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es K, V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente ; y AA3 es V, S, F, K, A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QLK) , Arg Lys (RK) y Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001) se prefiere, y Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.:1000) es el más preferido. En una modalidad, la composición antes mencionada comprende una pluralidad de antigenos híbridos. En otro aspecto, al menos uno de la pluralidad de antígenos híbridos comprende un epítope T auxiliar. En un octavo aspecto, la invención se dirige a una composición para inducir una respuesta inmune en un agente infeccioso o antígeno tumoral que comprende al menos un antígeno híbrido, el antígeno híbrido que consiste esencialmente de una pluralidad de dominios antigénicos al menos uno de los cuales es del agente infeccioso o antígeno tumoral, al menos un dominio de enlace que enlaza no covalentemente a una proteína de choque térmico, y al menos un enlazador de péptido que separa el dominio antigenico y el dominio de enlace, y donde al menos un enlazador de péptido está dentro de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.: 1000) ; Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FRKN, SEC. DE IDENT. NO. : 1002); Arg Lys Asn (RKN) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC. DE IDENT. NO. :1003) ; Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.:1001); Lys Asn (KN) ; Arg Lys (RK) ; o AA3.-AA2-AA3-leucina, en donde ? es A, S, V, ?, G, L, o K, preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es K, V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K; y AA3 es V, S, F, K, A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. En una modalidad, al menos uno de los dominios antigénicos comprende un epítope T auxiliar. En un noveno aspecto, la invención se dirige a un método para inducir una respuesta inmune en un agente infeccioso o antígeno tumoral que comprende administrar a un sujeto un compuesto de una proteina de choque térmico y un antígeno híbrido que comprenden al menos un dominio antigénico del agente infeccioso o antígeno tumoral, al menos un dominio de enlace que comprende un péptido que enlaza no covalentemente a una proteína de choque térmico, y un enlazador de peptido entre los mismos; en donde el antígeno híbrido y la proteína de choque térmico están enlazados no covalentemente, y donde al menos un enlazador de peptido está dentro de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO. : 1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FRKN, SEC. DE IDENT. NO.:1002); Arg Lys Asn (RKN) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO. :1001) ; Lys Asn (KN) ; Arg Lys; o AAi-AA2-AA3-leucina, en donde ??? es A, S, V, E, G, L, o K, preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; ??2 es K, V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K; y AA3 es V, S, F, K, A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QLK) , Arg Lys (RK) y Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001) se prefieren, y Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.:1000) es el más preferido. En una modalidad, el compuesto comprende una pluralidad de antígenos híbridos. En una modalidad, al menos uno de los antígenos híbridos es un epítope T auxiliar. En otra modalidad, el antígeno híbrido comprende una pluralidad de dominios antigénicos, y al menos uno de los dominios antigénicos puede ser un epítope T auxiliar. En aún otra modalidad en donde el compuesto comprende una pluralidad de antígenos híbridos al menos uno de los antígenos híbridos comprende una pluralidad de dominios antigénicos. En otra modalidad de este aspecto de la invención, la protelna de choque térmico es un hsp70. En un décimo aspecto, la invención se dirige a un método para inducir una respuesta inmune en un agente infeccioso o antigeno tumoral que comprende administrar a un sujeto un compuesto de una proteína de choque térmico y un antígeno híbrido, el antígeno híbrido que consiste esencialmente de al menos un dominio antigénico del agente infeccioso o antígeno tumoral, un dominio de enlace que enlaza no covalentemente a una proteína de choque térmico, y un enlazador de péptido que separa el dominio antigénico y el dominio de enlace, y donde al menos un enlazador de péptido está dentro de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.: 1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1002); Arg Lys Asn (RKN) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC. DE IDENT. NO. : 1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001) ; Lys Asn (KN) ; Arg Lys (RK) ; o ???-??2-??-3 -la leucina, en donde AAX es A, S, V, E, G, L, o , preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es K, V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K; y AA3 es V, S, F, K, A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QLK) , Arg Lys (RK) y Ala Lys V l Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.:1001) se prefiere, y Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.: 1000) es el más preferido . En una modalidad, el compuesto comprende una pluralidad de antigenos híbridos. En otra modalidad, al menos uno de los antígenos híbridos es un epítope T auxiliar. En una modalidad adicional, el antígeno híbrido comprende una pluralidad de dominios antigénicos. En aún una modalidad adicional, al menos uno de los dominios antigénicos es un epítope T auxiliar. En aún otra modalidad, el compuesto comprende una pluralidad de antígenos híbridos, al menos uno de los antígenos híbridos comprende una pluralidad de dominios antigénicos. En una modalidad preferida de este aspecto, la proteína de choque térmico es un hsp70. En un décimo primer aspecto, la invención se dirige a un método para inducir una respuesta inmune en un agente infeccioso o antígeno tumoral que comprende administrar a un sujeto al menos un antígeno híbrido que comprende al menos un dominio antigénico del agente infeccioso o antígeno tumoral, al menos un dominio de enlace que comprende un peptido que enlaza no covalentemente a una proteína de choque térmico, y al menos un enlazador de péptido entre los mismos, y donde al menos un enlazador de péptido está dentro de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC . DE IDENT. NO.: 1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1002); Arg Lys Asn (RKN) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC. DE IDENT. NO. :1003) ; Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.:1001); Lys Asn (K ) ; Arg Lys (RK) ; o AA1-AA2-AA3-leucina, en donde ?? es A, S, V, E, G, L, o K, preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es K, V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K; y AA3 es V, S, F, K, A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QLK) , Arg Lys (RK) y Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001) se prefiere, y Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.:1000) es el más preferido. En una modalidad, el compuesto comprende una pluralidad de antígenos híbridos. En otra modalidad, al menos uno de los antígenos híbridos es un epítope T auxiliar. En otra modalidad, el antígeno híbrido comprende una pluralidad de dominios antigénicos . En una modalidad adicional, al menos uno de los dominios antigénicos es un epítope T auxiliar. En todavía una modalidad adicional, el compuesto comprende una pluralidad de antígenos híbridos, al menos uno de los antígenos híbridos que comprenden una pluralidad de dominios antigénicos. En otra modalidad de este aspecto de la invención, un enlazador de péptido separa el dominio antigénico y dominio de enlace . En una duodécima modalidad, la invención se dirige a un método para inducir una respuesta inmune en un agente infeccioso o antígeno tumoral que comprende administrar a un sujeto al menos un antígeno híbrido, el antigeno híbrido que consiste esencialmente de al menos un dominio antigénico de un agente infeccioso o antígeno tumoral, un dominio de enlace que enlaza no covalentemente a una proteína de choque térmico, y un enlazador de péptido que separa el dominio antigénico y el dominio de enlace, y donde al menos un enlazador de péptido está dentro de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.: 1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1002); Arg Lys Asn (RKN) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001); Lys Asn ( N) ; Arg Lys (RK) ; o la AAi-AA2-AA3-leucina, en donde AAi, es A, S, V, E, G, L, o K, preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es K, V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K; y AA3 es V, S, F, K, A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QLK) , Arg Lys (RK) y Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001) se prefiere, y Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.:1000) es el más preferido. En una modalidad, el compuesto comprende una pluralidad de antígenos híbridos. En una modalidad adicional, al menos uno de los antígenos híbridos es un epítope T auxiliar. En otra modalidad, el antígeno híbrido comprende una pluralidad de dominios antigénicos. En aún otra modalidad, al menos uno de los dominios antigénicos es un epítope T auxiliar. En todavía una modalidad adicional, el compuesto comprende una pluralidad de antígenos híbridos, al menos uno de los antígenos híbridos comprende una pluralidad de dominios antigénicos. En un décimo tercer aspecto, la invención se dirige a un método para tratar una enfermedad infecciosa o cáncer que comprende administrar a un sujeto un compuesto de una proteína de choque térmico y un antígeno híbrido que comprende al menos un dominio antigénico de un agente infeccioso o antígeno tumoral asociado con la enfermedad infecciosa o cáncer, un dominio de enlace que comprende un péptido que enlaza no covalentemente a una proteína de choque térmico, y un enlazador de péptido entre los mismos; y en donde el antígeno híbrido y la proteína de choque térmico están enlazados no covalentemente, y donde al menos un enlazador de péptido está dentro de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.: 1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FR , SEC. DE IDENT. NO. : 1002) ; Arg Lys Asn (RKN) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK) , Gln Leu Glu (OLE) , Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001); Lys Asn (KN) ,- Arg Lys (RK) ; o AAi-AA2-AA3-leucina, en donde ??? es A, S, V, E, G, L, o , preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es K, V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K y AA3 es V, S, F, , A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QLK) , Arg Lys (RK) y Ala Lys Val Leu (A VL; SEC. DE IDENT. NO..-1001) se prefiere, y Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.: 1000) es el más preferido. En una modalidad, el compuesto comprende una pluralidad de antigenos híbridos. En otra modalidad, al menos uno de los antxgenos híbridos es un epltope T auxiliar. En aún otra modalidad, el antígeno híbrido comprende una pluralidad de dominios antigénicos. En aún otra modalidad, al menos uno de los dominios antigénicos es un epítope T auxiliar. En todavía una modalidad adicional, el compuesto comprende una pluralidad de antxgenos híbridos, al menos uno de los antxgenos híbridos que comprenden una pluralidad de dominios antigénicos. En una modalidad de este aspecto de la invención, un enlazador de péptido separa el dominio antigénico y el dominio de enlace. En una modalidad preferida de este aspecto de la invención, la proteína de choque térmico es un hsp70. ,· En un decimocuarto aspecto, la invención se dirige a un método para tratar una enfermedad infecciosa o cáncer que comprende administrar a un sujeto un compuesto de una proteína de choque térmico y un antígeno híbrido, el antígeno híbrido que consiste esencialmente de al menos un dominio antigénico del agente infeccioso o antígeno tumoral asociado con la enfermedad infecciosa o cáncer, al menos un dominio de enlace que enlaza no covalentemente a una proteína de choque térmico, y un enlazador de péptido que separa el dominio antigénico y dominio de enlace, y donde al menos un enlazador de péptido está dentro de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.: 1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1002); Arg Lys Asn (RKN) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFR N, SEC. DE IDENT. NO.: 1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QL ) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001); Lys Asn ( N) ; Arg Lys (RK) ; o la A x-AAa-AA3-leucina, en donde AA, es A, S, V, E, G, L, o K, preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es , V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K; y AA3 es V, S, F, K, A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QLK) , Arg Lys (RK) y Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001) se prefiere, y Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.:1000) es el más preferido. En una modalidad, el compuesto comprende una pluralidad de antígenos híbridos. En otro aspecto, al menos uno de los antígenos híbridos es un epítope T auxiliar. En todavía otro aspecto, el antígeno híbrido comprende una pluralidad de dominios antigénicos . En todavía otro aspecto, al menos uno de los dominios antigénicos es un epítope T auxiliar. En un aspecto adicional, el compuesto comprende una pluralidad de antígenos híbridos, al menos uno de los antígenos híbridos comprende una pluralidad de dominios antigénicos . En una modalidad preferida, la proteína de choque térmico es un hsp70. En un décimo quinto aspecto, la invención se dirige a un método para tratar una enfermedad infecciosa o cáncer que comprende administrar a un sujeto al menos un antígeno híbrido que comprende al menos un dominio antigénico de un agente infeccioso o antígeno tumoral asociado con la enfermedad infecciosa o cáncer, un dominio de enlace que comprende un péptido que enlaza no covalentemente a una proteína de choque térmico, y un enlazador de péptido entre los mismos, y en donde al menos un enlazador de péptido está dentro de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO. -.1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FRK , SEC. DE IDENT. NO.: 1002); Arg Lys Asn (R N) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFR N, SEC. DE IDENT. NO.:1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.:1001); Lys Asn (KN) ; Arg Lys (RK) ; o AA;i.-AA2-AA3-leucina, en donde i es A, S, V, E, G, L, o K, preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es , V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K; y AA3 es V, S, F, K, A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QLK) , Arg Lys (RK) y Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001) se prefiere, y Phe Phe Arg Lys (FFR ; SEC. DE IDENT. NO.:1000) es el más preferido. En una modalidad, el compuesto comprende una pluralidad de antígenos híbridos. En otro aspecto, al menos uno de los antígenos híbridos es un epítope T auxiliar. En todavía otro aspecto, el antígeno híbrido comprende una pluralidad de dominios antigénicos. En aún un aspecto adicional , al menos uno de los dominios antigénicos es un epítope T auxiliar. En todavía otro aspecto, el compuesto comprende una pluralidad de antígenos híbridos, al menos uno de los antígenos híbridos comprende una pluralidad de dominios antigénicos. En una modalidad de este aspecto de la invención, un enlazador de péptido separa el dominio antigénico y dominio de enlace. En un decimosexto aspecto, la invención se dirige a un método para tratar una enfermedad infecciosa o cáncer que comprende administrar a un sujeto al menos un antígeno híbrido, el antígeno híbrido que consiste esencialmente de al menos un dominio antigénico del agente infeccioso o antígeno tumoral asociado con una enfermedad infecciosa o cáncer, un dominio de enlace que enlaza no covalentemente a una proteína de choque térmico, y un enlazador de péptido que separa el dominio antigénico y el dominio de enlace, y donde al menos un enlazador de péptido está dentro de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO. -.1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FR N, SEC. DE IDEN . NO.: 1002); Arg Lys Asn (RKN) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1003) ; Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001); Lys Asn (KN) ; Arg Lys (RK) ; o ???-AA2-AA3-leucina, en donde AAa es A, S, V, E, G, L, o , preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es , V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K; y AA3 es V, S, F, K, A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QLK) , Arg Lys (RK) y Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO . : 1001) se prefiere, y Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.:1000) es el más preferido. En una modalidad, el compuesto comprende una pluralidad de antígenos híbridos. En otra modalidad, al menos uno de los antígenos híbridos es un epítope T auxiliar. En todavía otra modalidad, el antígeno híbrido comprende una pluralidad de dominios antigénicos. En aún otra modalidad, al menos uno de los dominios antigénicos es un epítope T auxiliar. En otra modalidad, el compuesto comprende una pluralidad de antígenos híbridos, al menos uno de los antígenos híbridos comprende una pluralidad de dominios antigénicos . En un decimoséptimo aspecto la invención se dirige a un péptido dentro de Phe Phe Arg Lys, (FFRK; SEC . DE IDENT. NO.: 1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1002); Arg Lys Asn (R N) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC. DE IDENT. NO.-.1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001); Lys Asn ( N) ; Arg Lys (RK) ; o AA1-AA2-AA3-leucina, en donde AAi es A, S, V, E, G, L, o K, preferiblemente' V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es K, V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente ; y AA3 es V, S, P, K, A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. En un decimoctavo aspecto, la invención se dirige a un polipéptido inmunogénico que comprende una pluralidad de dominios antigénicos, al menos un dominio de enlace de proteína de choque térmico y al menos un enlazador de péptido entre los mismos donde al menos un enlazador de péptido está dentro de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.: 1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FRKN, SEC. DE IDENT. NO. : 1002) ; Arg Lys Asn (RKN); Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK), Gln Leu Glu (QLE), Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.:1001); Lys Asn (KN) ; Arg Lys (RK) ; o ???-??2-??3-leucina, en donde ???, es A, S, V, E, G, L, o K, preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es K, V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K; y AA3 es V, S, F, K, A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QL ) , Arg Lys ( K) y Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001) se prefiere, y Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.:1000) es el más preferido. En un decimonoveno aspecto, la invención se dirige a un polinucleótido que codifica cualquiera de los antígenos híbridos en el primero, segundo, tercer o cuarto aspecto antes mencionado . En un vigésimo aspecto, la invención se dirige a un método para inducir una respuesta inmune a una enfermedad infecciosa o cáncer que comprende administrar a un sujeto un polinucleótido que codifica un antígeno híbrido que comprende un dominio antigénico de un agente infeccioso o antígeno tumoral asociado con la enfermedad infecciosa o cáncer, un dominio de enlace de proteína de choque térmico y un enlazador de péptido entre los mismos dentro de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.: 1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1002); Arg Lys Asn (R N) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC. DE IDENT. NO. : 1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001); Lys Asn (KN) ; Arg Lys (RK) , o AAi- 2 - A3-1eucina, en donde ??? es A, S, V, E, G, L, o K, preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es K, V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K; y AA3 es V, S, F, K, A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QLK) , Arg Lys (RK) y Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001) se prefiere, y Phe Phe Arg Lys (FFR ; SEC . DE IDENT. NO.:1000) es el más preferido . En un vigésimo primero aspecto, la invención se dirige a un método para inducir una respuesta inmune en una enfermedad infecciosa o cáncer que comprende administrar a un sujeto un polinucleótido que codifica un antígeno híbrido como se menciona en lo anterior, y un polinucleótido que codifica una proteína de choque térmico. En una modalidad preferida, la protelna de choque térmico codificada es hsp70. En cualquiera o todos los aspectos mencionado de la invención, el antígeno de la enfermedad infecciosa puede derivarse de un agente infeccioso tal como una bacteria, virus, protozoario, micoplasma, hongo, levadura, parásito, o prión, a modo de un ejemplo no limitante. Un cáncer o antígeno tumoral asociado con el cáncer pueden derivarse de un sarcoma, un linfoma, una leucemia, o un carcinoma, un melanoma, carcinoma del pecho, carcinoma de la próstata, carcinoma ovárico, carcinoma del cerviz, carcinoma del colon, carcinoma del pulmón, glioblastoma, o astrocitoma, a modo de los ejemplos no limitantes. El dominio antigénico del agente infeccioso o cáncer comprende un antígeno derivado de o asociado con la enfermedad infecciosa o antígeno tumoral, tal que la inducción de una respuesta inmune al antigeno del agente infeccioso o antígeno de cáncer, respectivamente, es útil para tratar la enfermedad infecciosa o cáncer correspondientes . Esta solicitud reclama la prioridad bajo 35 U.S.C.§119 (e) en las solicitudes provisionales No. de serie 60/462,469, presentada el 11 de abril del 2003; No. de serie 60/463,746, presentada el 18 de abril del 2003; y No. de serie 60/503,417, presentada el 16 de septiembre del 2003 todos los tres de los cuales se incorporan en la presente para referencia en su totalidad.

BREVE DESCRIPCIÓN DEL DIBUJO La Figura 1 muestra los resultados de un estudio de un reto contra el tumor en cuya inmunización fue realizó utilizando un antígeno híbrido o compuesto de un antígeno híbrido con una proteína de choque térmico, seguido de siete días después por el reto con un tumor que expresa el antígeno.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Para los propósitos de claridad de la descripción, y no a modo de limitación, la descripción detallada se divide en las siguientes subdivisiones : (i) antígenos híbridos, (ii) proteínas de choque térmico; y (iii) métodos de administración.

Antígenos híbridos Un antígeno híbrido, de acuerdo con la invención comprende al menos un dominio antigénico (inmunogénico) , al menos un dominio de enlace de proteína de choque térmico, y un enlazador de péptido entre al menos dos de estos dominios, en donde el enlazador de péptido está entre Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC . DE IDENT. NO.:1000), Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FR , SEC. DE IDENT. NO.: 1002); Arg Lys Asn (R N) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC. DE IDENT. NO: 1003) ; Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001), Lys Asn (KN) ; Arg Lys (RK) ; o AAi-AA2-AA3-leucina, en donde AAi es A, S, V, ?, G, L, o K, preferiblemente V, más preferiblemente S, y más preferiblemente A; AA2 es K, V, o E, preferiblemente E, más preferiblemente V y más preferiblemente K; y AA3 es V, S, F, , A, E, o T, preferiblemente F, más preferiblemente S y más preferiblemente V. Entre lo anterior, Gln Leu Lys (QLK) , Arg Lys (RK) y Ala Lys Val Leu (A VL; SEC . DE IDENT. NO.:1001) se prefieren, y Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.: 1000) es el más preferido. De este modo, el antígeno híbrido sirve al menos de dos funciones, es decir (i) contiene un epítope capaz de inducir la respuesta inmune deseada; y (ii) es capaz de unir físicamente a una proteína de choque térmico. Como se observa en lo siguiente, tal enlace puede ocurrir in vivo tal que la administración del antígeno híbrido solo inducirá la respuesta inmune deseada y proporcionará el efecto terapéutico deseado. El término "antígeno" como se utiliza en la presente, se refiere a un compuesto que puede estar compuesto de aminoácidos, carbohidratos, ácidos nucleicos o lípidos individualmente o en cualquier combinación. El término "antígeno híbrido" como se utiliza en la presente, se refiere a un compuesto que une a una o más proteínas de choque térmico y que es representativa del inmunógeno hacia el cual una respuesta inmune se dirige deseablemente. Por ejemplo, donde el inmunógeno es un virus de influenza, el antígeno híbrido puede comprender un fragmento del péptido de la proteína matriz del virus de la influenza. Como se usa en la presente, el término "inmunogeno" se aplica a la célula neoplástica, célula infectada, patógeno, o componente del mismo, hacia el cual una respuesta inmune se requerirá, considerando que el antígeno híbrido comprende una porción de ese inmunogeno que puede producir la respuesta deseada y que une a una o más proteínas de choque térmico. En particular, el dominio antigénico del antígeno híbrido se selecciona para producir una respuesta inmune en una enfermedad particular o patógeno, incluyendo los péptidos obtenidos de las moléculas MHC, los productos del gen ADN mutados, y los productos de ADN directos tales como aquellos obtenidos de las células de tumor. Aunque la invención puede aplicarse en cualquier tipo de inmunogeno, los inmunógenos de interés particular son aquéllos asociados con, derivado de, o predichos para asociarse con una enfermedad neoplástica, incluyendo pero no limitados a un sarcoma, una linfoma, una leucemia, o un carcinoma, y en particular, con melanoma, carcinoma de pecho, carcinoma de próstata, carcinoma ovárico, carcinoma del cerviz, carcinoma del colon, carcinoma del pulmón, glioblastoma, astrocitoma, etc. Las selecciones de los antígenos de melanoma útil en los antígenos híbridos de la presente invención pueden encontrarse, a modo de ejemplo no limitante, en la PCT/US01/12449 ( O0178655) , incorporada aquí para referencia en su totalidad. Además, las mutaciones de los productos del gen supresor de tumor tal como p53 , o los productos de oncogen tal como ras también pueden proporcionar antigenos híbridos para usarse de acuerdo con la invención. En las modalidades adicionales, el inmunógeno puede asociarse con una enfermedad infecciosa, y, como tal, puede ser una bacteria, virus, protozoario, micoplasma, hongo, levadura, parásito, o prión. Por ejemplo, pero no a modo de la limitación, el inmunógeno puede ser un virus del papiloma humano (véase en lo siguiente) , un virus herpes tal como herpes simplex o herpes zóster, un retrovirus tal como virus de la inmunodeficiencia humana 1 ó 2, un virus de la hepatitis, un virus de la influenza, un rinovirus, virus del sincitial respiratorio, citomegalovirus, adenovirus, Mycoplasma pneu oniae, una bacteria del género Salmonella, Staphylococcus, Streptococus, Enterococcus, Clostridium, Escherichia, Klebsiella, Vibrio, Mycobacterium, amiba, un parásito palúdico, Tripanosoma cruzi, etc. Los inmunógenos pueden obtenerse directamente por el aislamiento de un neoplasma, una célula infectada, un espécimen de un sujeto infectado, un cultivo celular, o un cultivo del organismo, o puede sintetizarse por técnicas química o recombinantes . A modo de ejemplos no limitantes, los péptidos antigénicos adecuados, particularmente para el uso en un antígeno híbrido, para el uso contra los virus, la bacteria y similar puede diseñarse por la búsqueda a través de sus secuencias por los epltopes de péptido restringido de la clase I MHC que contienen secuencias de enlace HLA tal como pero no limitadas a las secuencias de enlace de péptido HLA-A2 : Xaa (Leu/Met) XaaXaaXaa (Val/lle/Leu/Thr) XaaXaa (Val/Leu) (SEC. DE IDENT. NO.: 2), por ejemplo, de los virus : Ser Gly Pro Ser Asn Thr Pro Pro Giu lie (SEC de IDENT. NO: 31); Ser Gly Val Glu Asn Pro Gly Gly Tyr Cys Leu (SEC de IDENT. NO: 32); Lys Ala Val Tyr Asn Phe Ala Thr Cys Gly (SEC de IDENT. NO: 33); Arg Pro Gln Ala Ser Gly Val Tyr Met (SEC de IDENT. NO: 34); Phe Gln Pro Gln Asn Gly Gln Phe He (SEC de IDENT. NO: 35); ?ß Glu Gly Gly Trp Thr Gly Met He (SEC de IDENT. NO: 36); Thr Tyr Val Ser Val Ser Thr Ser Thr Leu (SEC de IDENT. NO: 37); Phe Glu Ala Asn Gly Asn Leu lie (SEC de IDENT. NO: 38); lie Tyr Ser Thr Val Ala Ser Ser Leu (SEC de IDENT. NO: 39); Thr Tyr Gln Arg Thr Arg Ala Leu Val (SEC de IDENT. NO: 40); Cys Thr Glu Leu Lys Leu Ser Asp Tyr (SEC de IDENT. NO: 41); Ser Asp Tyr Glu Gly Arg Leu lie (SEC de IDENT. NO: 42); Glu Glu Gly Ala lie Val Gly Glu. lie (SEC de IDENT. NO: 43); Val Ser Asp Gly Gly Pro Asn Leu Tyr (SEC de IDENT. NO: 44); Ala Ser Asn Glu Asn Met Glu Thr Met (SEC de IDENT. NO: 45); Ala Ser Asn Glu Asn Met Asp Ala Met (SEC de IDENT. NO: 46); Lys Leu Gly Glu Phs Tyr Asn Gln Met Met (SEC de IDENT. NO: 47); Leu Tyr Gln Asn Val Gly Thr Tyr Val (SEC de IDENT. NO- 48); Thr Tyr Val Ser Val Gly Thr Ser Thr Leu (SEC de IDENT. NO: 49); Phe Glu Ser Thr Gly Asn Leu Le (SEC de IDENT. NO: 50); Val Tyr Gln He Leu Ala He Tyr Ala (SEC de IDENT. NO: 51); lie Tyr Ala Thr Val Ala Gly Ser Leu (SEC de IDENT. NO: 52); Gly lie Leu Gly Phe Val Phe Thr Leu (SEC de IDENT. NO: 53); lie Leu Gly Phe Val Phe Thr Leu Tnr Val (SEC de IDENT. NO: 54); Be Leu Arg Gly Ser Val Ala His Lys (SEC de IDENT. NO: 55); Glu Asp Leu Arg Val Leu Ser Phe lie (SEC de IDENT. NO: 56); Glu Leu Arg Ser Arg Tyr Trp Ala ?ß (SEC de IDENT. NO: 57); Ser Arg Tyr Trp Ala De Arg Thr Arg (SEC de IDENT. NO: 58); Lys Thr Gly Gly Pío lie Tyr Lys Arg (SEC de IDENT. NO: 59); Phe Ala Pro Gly Asn Tyr Pro Ala Leu (SEC de IDENT. NO: 60); Arg Arg Tyr Pro Asp Ala Val Tyr Leu (SEC de IDENT. NO: 61); Asp Pro Val lie Asp Arg Leu Tyr Leu (SEC de IDENT. NO: 62); 5 Ser Pro Gly Arg Ser Phe Ser Tyr Phe (SEC de IDENT. NO: 63); Tyr Pro Ala Leu Gly Leu His Glu Phe (SEC de IDENT. NO: 64); Thr Tyr Lys Asp Thr Val Gln Leu (SEC de IDENT. NO: 65); Phe Tyr Asp Gly Phe Ser Lys Val Pro Leu (SEC de IDENT. NO: 66); Phe lie Ala Gly Asn Ser Ala Tyr Glu Tyr Val (SEC de IDENT. NO: 67); Tyr Pro His Phe Met Pro Thr Asn Leu (SEC de IDENT. NO: 68); o Ala Pro Thr Ala Gly Ala Phe Phe Phe (SEC de IDENT. NO: 69); Ser Thr Leu Pro Glu Thr Thr Val Val Arg Arg (SEC de IDENT. NO: 70); Phe Leu Pro Ser Asp Phe Phe Pro Ser Val (SEC de IDENT. NO: 71); Trp Leu Ser Leu Leu Val Pro Phe Val (SEC de IDENT. NO: 72); Gly Leu Ser Pro Thr Val Trp Leu Ser Val (SEC de IDENT. NO: 73); Asp Leu Met Gly Tyr lie Pro Leu Val (SEC de IDENT. NO: 74); Leu Met Gly Tyr ?ß Pro Leu Val Gly Ala (SEC de ID NO:75); 5 Ala Ser Arg Cys Trp Val Ala Met (SEC de IDENT. NO: 76); Lys Leu Val Ala Leu Gly He Asn Ala Val (SEC de IDENT. NO: 77); Phe Leu Arg Gly Arg Ala Tyr Gly Leu (SEC de IDENT. NO: 78); Arg Arg De Tyr Asp Leu lie Glu Leu (SEC de IDENT. NO:79); He Val Thr Asp Phe Ser Val De Lys (SEC de IDENT. NO: 80); Arg Arg Arg Trp Arg Arg Leu Thr Val (SEC de IDENT. NO:81); o Glu Glu Asn Leu Leu Asp Phe Val Arg Phe (SEC de IDENT. NO: 82); Cys Leu Gly Gly Leu Leu Thr Met Val (SEC de IDENT. NO: 83); Ser Ser lie Glu Phe Ala Arg Leu (SEC de IDENT. NO: 84); Leu Tyr Arg Thr Phe Ala Gly Asn Pro Arg Ala (SEC de IDENT. NO: 85); Asp Tyr Ala Thr Leu Gly Val Gly Val (SEC de IDENT. NO: 86); Leu Leu Leu Gly Thr Leu Asn De Val (SEC de IDENT. NO: 87); Leu Leu Met Gly Thr Leu Gly lie Val (SEC de IDENT. NO: 88); Thr Leu Gln Asp lie Val Leu His Leu (SEC de IDENT. NO: 89); Gly Leu His Cys Tyr Glu Gln Leu Val (SEC de IDENT. NO: 90); Pro Leu Lys Gln His P e Gln lie Val (SEC de IDENT. NO: 91); Arg Leu Val Thr Leu Lys Asp lie Val (SEC de IDENT. NO: 92); Arg Ala His Tyr Asn lie Val Thr Phe (SEC de IDENT. NO: 93); Leu Leu Phe Gly Tyr Pro Val Tyr Val (SEC de IDENT. NO: 94); Ser Ala lie Asn Asn Tyr Ala Gln Lys Leu (SEC de IDENT. NO: 95); His Gln Ala He Ser Pro Arg Thr Leu (SEC de IDENT. NO: 96); Gln Met Val His Gln Ala Be Ser Pro Arg Thr Leu (SEC de IDENT. NO: 97); Cys Lys Gly Val Asn Lys Glu. Tyr Leu (SEC de IDENT. NO: 98); Gln Gly lie Asn Asn Leu Asp Asn Leu (SEC de IDENT. NO: 99); Asn Asn Leu Asp Asn Leu Arg Asp Tyr (SEC de IDENT. NO:100); Ser Glu Phe Leu Leu Glu Lys Arg lie (SEC de IDENT. NO: 101); Ser Tyr lie Gly Ser lie Asn Asn He (SEC de IDENT. NO: 102); lie Leu Gly Asn Lys lie Val Arg Met Tyr (SEC de IDENT. NO: 103); Arg Leu Arg Pro Gly Gly Lys Lys Lys (SEC de IDENT. NO: 04); Glu He Lys Asp Thr Lys Glu Ala Leu (SEC de IDENT. NO: 105); Gly Glu lie Tyr Lys Arg Trp lie lie (SEC de IDENT. NO: 106); Glu He Tyr Lys Arg Trp He He Leu (SEC de IDENT. NO: 107); Arg Tyr Leu Lys Asp Gln Gln Leu Leu (SEC de IDENT. NO: 108); Arg Gly Pro Gly ATg Ala Phe Val Thr He (SEC de IDENT. NO: 109); He Val Gly Leu Asn Lys ?ß Val Arg (SEC de IDENT. NO: 110); Thr Val Tyr Tyr Gly Val Pro Val Trp Lys (SEC de IDENT. NO: 1 H); Arg Leu Arg Asp Leu Leu Leu He Val Thr Arg (SEC de IDENT. NO: 112); Lys Arg Trp He He Leu Gly Leu Asn Lys (SEC de IDENT. NO: 113); Ser Phe Asn Cys Gly Gly Glu Phe Phe (SEC de IDENT. NO: 114); Gly Arg Ala Phe Val Thr He Gly Lys (SEC de IDENT. NO: 115); Thr Pro Gly Pro Gly Val Arg Tyr Pro Leu (SEC de IDENT. NO: 116); Gln Val Pro Leu Arg Pro Met Thr Tyr Lys (SEC de IDENT. NO: 117); Thr Glu Met Glu Lys Glu Gly Lys He (SEC de IDENT. NO: 118); He Leu Lys Glu Pro Val His Gly Val (SEC de IDENT. NO: 119); Val Glu Ala Glu He Ala His Gln He (SEC de IDENT. NO: 120); Arg Gly Tyr Val Tyr Gln Gly Leu (SEC de IDENT. NO: 121); Tyr Ser Gly Tyr He Phe Arg Asp Leu (SEC de IDENT. NO: 122); Val Gly Pro Val Phe Pro Pro Gly Met (SEC de IDENT. NO: 123); lie He Tyr Arg Phe Leu Leu lie (SEC de IDENT. NO: 124); de bacteria: Lys Tyr Gly Val Ser Val Gln Asp He (SEC de IDENT. NO: 125); De Gln Val Gly Asn Thr Arg Thr fle (SEC de IDENT. NO: 126); Thr Pro His Pro Ala Arg üe Gly Leu (SEC de IDENT. NO: 127); de parásitos: Ser Tyr lie Pro Ser Ala Glu Lys lie (SEC de IDENT. NO: 128); Lys Pro Lys Asp Glu Leu Asp Tyr (SEC de IDENT. NO: 129); Lys Ser Lys Asp Glu Leu Asp Tyr (SEC de IDENT. NO: 130): Lys Pro Asn Asp Lys Ser Leu Tyr (SEC de IDENT. NO: 131); Lys Tyr Leu Lys Lys üe Lys Asn Ser Leu (SEC de IDENT. NO: 132); Tyr Glu Asn Asp De Glu Lys Lys He (SEC de IDENT. NO: 133); Asn Tyr Asp Asn Ala Gly Thr Asn Leu (SEC de IDENT. NO: 134); Asp Glu Leu Asp Tyr Glu Asn Asp üe (SEC de IDENT. NO: 135); Ser Tyr Val Pro Ser Ala Glu Gln He (SEC de IDENT. NO: 136); de cánceres: Phe Glu Gln Asn Thr Ala Gln Pro(S(SEC de IDENT. NO: 137); Phe Glu Gln Asn Thr Ala Gln Ala (SEC de IDENT. NO: 138); Glu Ala Asp Pro Thr Gly His Ser Tyr (SEC de IDENT. NO: 139); Glu Val Asp Pro He Gly His Leu Tyr (SEC de IDENT. NO: 140); Ala Ala Gly He Gly He Leu Thr Val (SEC de IDENT. NO: 141); Tyr Leu Glu Pro Gly Pro Val Thr Ala (SEC de IDENT. NO: 142); He Leu Asp Gly Thr, Ala Thr Leu Arg Leu (SEC de IDENT. NO: 143); Met Leu Leu Ala Leu Leu Tyr Cys Leu (SEC de IDENT. NO: 144); Tyr Met Asn Gly Thr Met Ser Gln Val (SEC de IDENT. NO: 145); Leu Pro Tyr Leu Gly Trp Leu Val Phe (SEC de IDENT. NO: 146); Phe Gly Pro Tyr Lys Leu Asn Arg Leu (SEC de IDENT. NO: 147); Lys Ser Pro Trp Phe Thr Thr Leu (SEC de IDENT. NO: 148); Gly Pro Pro His Ser Asn Asn Phe Gly Tyr (SEC de IDENT. NO: 149); y ?ß Ser Thr Gla Asn His Arg Ala Leu (SEC de IDENT. NO: 150) ammensee et al., Immtmogenetics 41:178-223 (1995)), Xaa(Leu/Met)XaaXaaXaaXaaXaaXaaVal (SEC de IDENT. NO: 3) (Tarpey et al., Immunolog 81:222-227 (1994)), Xaa(Val/Gln)XaaXaáXaaXaaXaaXaaLeu (SEC de IDENT. NO: 28), por ejemplo, del virus: Tyr Gly He Leu Gly Lys Val Phe Thr Leu (SEC de IDENT. NO: 151); Ser Leu Tyr Asn Thr Val Ala Thr Leu (SEC de IDENT. NO:152); (Barouch et aI.,J. Exp. Med. 182:1847-1856 (1995)).

Los epitopes anteriores so únicamente ejemplares de selecciones disponibles asociadas con varias enfermedades infecciosas y cáncer, y se proporcionan sin ningún propósito, no importa que sea limitativo. Puede también ser deseable considerar el tipo de respuesta inmune que se desea. Por ejemplo, bajo ciertas circunstancias, una respuesta inmune humoral, puede ser apropiada. En otros casos, y ciertamente en donde una respuesta inmune dirigida hacia las células neoplásicas o células infectadas que se pretende que se produzca, es particularmente deseable una respuesta inmune celular. Por consiguiente, los epítopes particulares asociados con la activación de las células B, las células auxiliadoras T, o las células T citotóxicas pueden identificarse y seleccionarse para la incorporación dentro del antígeno híbrido.

Puede ser deseable utilizar un antígeno híbrido asociado con una enfermedad autoinmune o una alergia. Tal antígeno híbrido puede administrarse, junto con una o más proteínas de choque térmico, en una cantidad suficiente para ser tolerogénico o para inhibir una respuesta inmune preexistente al antígeno híbrido en un sujeto. La cantidad de la proteína de choque térmico requerida para inhibir la respuesta inmune se espera que sea sustancialmente mayor que la cantidad requerida para estimulación. Aunque el tamaño del antígeno híbrido puede variar dependiendo de la proteína de choque térmico utilizada, en las modalidades no limitantes de la invención, el antígeno híbrido puede ser del tamaño de un péptido que tiene entre 10 y 500 residuos aminoácido, y de preferencia ser del tamaño de un péptido que tiene entre 14 y 100, más preferiblemente 18 y 50 residuos aminoácido. Como tal, puede ser deseable producir un fragmento de un inmunógeno para servir como el dominio antigénico de un antígeno híbrido, o, alternativamente, para sintetizar un antígeno híbrido por métodos de ADN químicos o recombinantes . Basado en las consideraciones anteriores, un antígeno híbrido puede prepararse, y luego probarse para su capacidad para unirse a la proteína de choque térmico. En algunos casos, la unión del antígeno híbrido a una proteína de choque térmico particular puede facilitarse por la presencia de al menos otra proteína, la cual puede ser una proteína de choque térmico. Por ejemplo, la unión del antígeno híbrido a una proteína de choque térmico puede evaluarse etiquetando el antígeno híbrido con una etiqueta detectable, tal como una etiqueta radioactiva, fluorescente, enzimática o pigmentada, combinando el antígeno híbrido con una proteína de choque térmico bajo condiciones que serían esperadas para permitir que ocurra la unión, y luego aislar la proteína de choque térmico mientras se remueve cualquier antígeno híbrido no unido, y determinar si cualquier antígeno híbrido etiquetado se ha adherido a la proteína de choque térmico. Como un ejemplo específico, y no a modo de limitación, la capacidad de un antígeno híbrido para unirse a la proteína BiP de choque térmico puede evaluarse combinando 2 jug de BiP con hasta aproximadamente 1150 pmoles del antígeno híbrido radioactivamente etiquetado en tampón que contiene 50 m de Tris HC1 (pH 7.5), 200 mM de NaCl, y 1 mM de Na2EDTA, en un volumen final de 50 µ?, durante 30 minutos a 37 grados centígrados. El antígeno híbrido no unido puede entonces removerse a partir del antígeno híbrido BiP unido por centrifugación a 100 g desalando a través de 1 mi de columna Sephadex-G durante 2 minutos. Penefsky, J". Biol . Chem. 252:2891 (1977) . Para evitar la unión a la resina, las columnas pueden tratarse primero con 100 µ? de albúmina de suero bovino en el mismo tampón y centrifugarse como en lo anterior. El antígeno híbrido unido puede entonces cuantificarse por conteo de centello líquido. Véase Flynn et al., Science 245:385-390 (1989). Debido a que la hidrólisis de ATP dirige la liberación de los peptidos a partir de muchas proteínas de choque térmico conocidas, la cantidad de la actividad de ATPasa puede con frecuencia utilizarse para cuantificar la cantidad de la unión de antígeno híbrido a la proteína de choque térmico. Un ejemplo de cómo tal ensayo puede realizarse se establece en Flynn et al., Science 245:385-390 (1989) . El dominio de unión de proteína de choque térmico se selecciona de manera que el antígeno híbrido se unirá in vitro o in vivo a una proteína de choque térmico, tal como BiP, hsp70, gp96 o hsp90, o un miembro de las familias de la proteína de choque térmico anteriores, solo o en combinación con las proteínas de choque térmico secundarias tales como hsp40 o hsp60. Ejemplos no limitantes de los peptidos, que cumplen este criterio, pueden identificarse por colecciones de cribado de antígenos conocidos para unirse adecuadamente a una o más proteínas de choque térmico como se describe en Blond-Elguindi et al., Cell 75:717-728 (1993): Leu Phe Trp Pro Phe Glu Trp lie (SEC de IDENT. NO: 153); Asp Gly Val Gly Ser Phe He Gly (SEC de IDENT. NO:154); Glu Ser Leu Trp Asn Pro Gln Cys (SEC de IDENT. NO:155); Leu His Phe Asp Val Leu Trp Arg (SEC de IDENT. NO: 156); Cys His Leu Lys Met Val Pro Trp (SEC de IDENT. NO: 157); Asn Ser Val Leu Val Cys Glu Leu (SEC de IDENT. NO: 158); Asp Arg Gly His Ser Tfar Tyr Sei (SEC de IDENT. NO : 159); Asp Val Trp Gly Trp Val Tbr Trp (SEC de IDENT. NO: 160); He Glu Phe Arg Val Glu Leu Phe ¦ (SEC de IDENT. NO: 161); Leu Trp Leu Glu Leu Ser Leu Ser (SEC de IDENT. NO: 162); Val Gly He Cys Ala Leu Phe Gly (SEC de IDENT. NO: 163); Pro Tyr Pro Ser Gly Leu Asp Ser (SEC de IDENT. NO: 164); Phe Trp Gly Val Leu Pro Tyr Pro (SEC de IDENT. NO: 165); Phe Thr His Gly le Ser Leu Tyr (SEC de IDENT. NO: 166); Asn His Ser Phe Gly Gly Ser Thr (SEC de IDENT. NO: 167); Val Asp Tyr Val Tyr Phe His His (SEC de IDENT. NO: 1 8); Phe Leu Asp lie lie Gly Tyr Gly (SEC de IDENT. NO: 169); Trp Asp Asp Leu Leu His Gly Arg (SEC de IDENT. NO: 170); Leu Arg Leu Leu Gly Thr Leu Asn (SEC de IDENT. NO: 171); Phe Glu Gln His Asn Gln Glu Pro (SEC de IDENT. NO: 172); Phe Val Gly Thr Val Thr Trp Ser (SEC de IDENT. NO: 173); Leu Trp Ala Leu Thr Tyr Arg Gly (SEC de IDENT. NO: 174); Ser Trp Gly Ser Asn Gly Gly Phe (SEC de IDENT. NO: 175); Asp Met Trp Arg Arg Ala Val Gln (SEC de IDENT. NO: 176); Cys Arg Val lie Tyr His Ala Thr (SEC de IDENT. NO: 177); Met Val Val Ala Arg Cys Gly His (SEC de IDENT. NO: 178); His Met Trp lie Asn Trp Val Gln (SEC de IDENT. NO: 179); Cys Ala Gly Arg Cys Phe Gly Tyr (SEC de IDENT. NO: 180); Cys Thr His Val Leu Ala Tyr Ser (SEC de IDENT. NO: 181); Sei Trp Met Pro Trp Leu Thr Met (SEC de IDENT. NO: 182); Leu Glu Txp Cys He Trp Arg Tyr (SEC de IDENT. NO: 183); Cys Leu Ala Cys lie lie His Ser (SEC de IDENT. NO: 184); Phe Trp Phe Pro Trp Asp Arg Ser (SEC de IDENT. NO: 185); Trp Arg Thr Gly Val Phe His Gly (SEC de IDENT. NO: 186); Met His Leu Arg Val Ala Asp Arg (SEC de IDENT. NO: 187); Ala Leu Asp Leu Tyr Leu Tyr Val (SEC de IDENT. NO: 188); Phe Phe Trp Phe Thr Leu Lys Glu (SEC de IDENT. NO: 189); Leu Ser Phe Ala Gly Trp Gly Val (SEC de IDENT. NO: 190); Met Met Met Leu Gly Arg Ala Pro (SEC de IDENT. NO: 191); Trp Ser Phe Tyr Thr Trp Leu Asn (SEC de IDENT. NO: 192); Phe Val Trp Met Arg Trp lie Asp (SEC de IDENT NO: 193); Met Gln Val Asn Thr Pro Asp Asn (SEC de IDENT. NO: 194); Phe Trp Gly Trp Leu He Pro Trp (SEC de IDENT. NO: 195); Trp Gly Trp Val Trp Trp Asp (SEC de IDENT. NO: 196); Trp ?ß Phe Pro Trp De Gln Leu (SEC de IDENT. NO: 197); Trp Met Phe Asn Trp Pro Trp Tyr (SEC de IDENT. NO: 198); Met Asn Met De Val Leu Asp Lys (SEC de IDENT. NO: 199); Phe Trp Gly Trp Pro Gly Trp Ser (SEC de IDENT. NO: 200); Trp Leu He Arg Val Gly Thr Ala (SEC de IDENT. NO: 201); Gly Leu Leu Thr His Leu lie Trp (SEC de IDENT. NO:202); Leu Trp Trp Leu Asn Val His Gly (SEC de IDENT. NO: 203); Trp Trp Trp Be Asn Asp Glu Ser (SEC de IDENT. NO: 204); Ala Asn Pro Ser Leu Ala Thr Tyr (SEC de IDENT. NO: 205); Trp Leu Gln Gly Trp Trp Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 206); Met Met Pro Val Thr Ser Phe Arg (SEC de IDENT. NO: 207); Gly Trp Met Asp Trp Trp Tyr Tyr (SEC de IDENT. NO: 208); Leu Ala SerMet Arg Asn SerMet (SEC de IDENT. NO:209); Asp Leu Met Arg Trp Leu Gly Leu (SEC de IDENT. NO: 210); Tyr Phe Tyr Ala Trp Trp Leu Asp (SEC de IDENT. NO: 211); Leu Gly His Leu Trp Thr Gln Val (SEC de IDENT. NO: 212); Leu Trp Trp Arg Asp Val Met Ala (SEC de IDENT. NO: 213); Pite De Trp Trp Ala Pro Leu Ala (SEC de IDENT. NO: 214); Gly Ser Val Gly Gly Gly Val Val (SEC de IDENT. NO: 215); Asp Ser His Asp Asp Trp ArgMet(SEC de IDENT. NO: 216); Phe Trp Arg Phe Asp Tyr Tyr Phe (SEC de IDENT. NO: 217); Trp Thr Trp Trp GIu Trp Leu Ala (SEC de IDENT. NO: 218); Trp Leu Trp Asp Trp He Val Val (SEC de IDENT. NO: 21 ); Gly Trp Thr Trp Phe Phe Asp Met (SEC de IDENT. NO: 220); Ala Trp Trp Gln His Phe Ee Val (SEC de IDENT. NO: 221); Leu Trp Trp Asp Ee De Thr Gly (SEC de IDENT. NO: 222); Phe Thr Tyr Gly Ser Arg Trp Leu (SEC de IDENT. NO: 223); Phe Ser Leu Trp Pro Leu Ala Trp (SEC de IDENT. NO: 224); Gly lie lie Leu Gly Tyr Asn Val (SEC de IDENT. NO: 225); Ser Trp Met Thr Trp lie Glu Hís (SEC de IDENT. NO: 226); Gly Trp Trp Val Thr Trp Pro Trp (SEC de IDENT. NO: 227); Val Val Ser Pto Trp Trp Leu Gly (SEC de IDENT. NO: 225); Asn Val Leu Ser Arg Gly Phe Ser(SEC de IDENT. NO: 229); Ser Phe Glu Ser Leu Gly Gly Leu (SEC de IDENT. NO: 230); lie Thr Lys Gly Ser SerPhe Pro(SEC de IDENT. NO: 231); Leu Asp Trp Ala Arg Lys Leu Arg (SEC de IDENT. NO: 232); Thr Ala Trp Asn Leu Leu Gly Tyr (SEC de IDENT. NO: 233); Phe Gly Gln Gly Re Lys His Val (SEC de IDENT. NO: 234); Asp Val Val Trp Gln Arg Leu Leu (SEC de IDENT. NO:235); Tyr Val Asp Arg Phe lie Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 236); Lys Met Ala Arg Pro Glu Gly Asn (SEC de IDENT. NO:237); Leu Gly Arg Trp Gly His Glu Ser (SEC de IDENT. NO: 238); Ser lie Trp Ser Leu Leu Val Leu (SEC de IDENT. NO: 239); Val Trp Leu Asp Leu Leu Leu Ser (SEC de IDENT. NO: 240); Tyr Leu Thr Asp Ser Le.u Phe Gly (SEC de IDENT. NO: 241); Thr Trp Trp Pro Ser He Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 242); Tyr Gly Leu Trp Trp Phe Pro Trp (SEC de IDENT. NO: 243); Phe Ser Pro Ala Asp Thr Arg Tyr (SEC de IDENT. NO: 244); Cys Asn Arg Leu Gln lie Asp Cys (SEC de IDENT. NO: 245); Ser Leu Val Ala Ala Arg Asa Leu (SEC de IDENT. NO: 246); Phe Thr De His Asn Val Ala Val (SEC de IDENT. NO: 247); Met Gly Pro Leu Gly Pro Leu Leu (SEC de IDENT. NO: 248); Arg Gln Leu Ser Glu Leu Phe Val (SEC de IDENT. NO: 249); Arg Val Val Cys Gln Ala Leu Leu (SEC de IDENT. NO: 250); Trp Pro His Leu Trp Trp Leu Asp .(SEC de IDEIMT. NO: 251); Trp Met Asp Trp Val Trp His Thr .(SEC de IDENT. NO: 252); Trp Trp Gly Tyr Leu lie Cys Gln .(SEC de IDENT. NO: 253); Phe Arg Gly Leu Ser Glu Gly Pro (SEC de IDENT. NO: 254); Ser Trp Phe Asp Trp Leu Val Ala (SEC de IDENT. NO: 255); Val Val Met Trp Tyr Ser Val Asp (SEC de IDENT. NO: 256); Trp Gly Trp Ser Leu Ala Thr (SEC de IDENT. NO: 257); Leu Gly Trp Phe Asp Arg Phe Phe (SEC de IDENT. NO: 258); Ala Trp Trp Trp Pro Thr Tyr Val (SEC de IDENT. NO: 259); Gly Phe Leu Ser Ser Trp Phe Leu (SEC de IDENT. NO: 260); Gly Val lie Asn Cys Ala Gly Thr (SEC de IDENT. NO: 261); Val Cys Ala Arg Ala Ala His Leu (SEC de IDENT. NO: 262); Qly Asn Ser Tyr Gly Asp Gly Gly (SEC de IDENT. NO: 263); Gly Phe Leu Ser Ser Trp Phe Leu (SEC de IDENT. NO: 264); Phe Asp Gln Pro Gly Arg Phe Leu (SEC de IDENT. NO: 265); Arg Ser His Ala Thr Gly Val Val (SEC de IDENT. NO: 266); Gly Tyr Trp Ala Met Met Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 267); Cys His Ser Met Trp Asp Gly Leu (SEC de IDENT. NO:268); Phe lie Trp Arg Gly Trp Pro His (SEC de IDENT. NO: 269); Leu Ser Phe Leu Gly Gly Arg Leu (SEC de IDENT. NO: 270); Phe Ser Gly Val Arg Gln Pro Asn (SEC de IDENT. NO: 271); Trp Gly Trp Met Pro Phe Tyr Tyr (SEC de IDENT. NO: 272); Phe Thr Arg Pro Ala Val Val Asp (SEC de IDENT. NO: 273); Asp Leu Trp Thr Trp Leu Gly Leu (SEC de IDENT. NO: 274); Cys Asp Thr Ala Ala Val Ala Asp (SEC de IDENT. NO: 275); Trp Trp Val Lys His His Met Leu (SEC de IDENT. NO: 276); He Ala Phe Leu Arg Asp Asn Arg (SEC de IDENT. NO: 277); Leu Ala Arg Pro Asp His Tyr Ser (SEC de IDENT. NO: 278); Met Glu Ser Lys Arg Trp Thr Val (SEC de IDENT. NO:279); Met He Leu Lys Gly Tyr Ser Arg [SEC de IDENT. NO: 280); Ala Pro Ser Asp Tyr Asp Glu Ser (SEC de IDENT. NO: 281); His Trp Leu Arg Ser Lys Arg Thr (SEC de IDENT. NO: 282); Gly Ala Arg Val Trp Asn Tyr Gln (SEC de IDENT. NO: 283); Leu Ser Asn Trp Asn Met Arg Leu (SEC de IDENT. NO: 284); Cys Gly Ala Ala Gln Gln Gly Met (SEC de IDENT. NO: 285); y Gly Ser Ser Met Val Val Gln Arg (SEC de IDENT. NO:286).

Utilizando esta técnica, Blond-Elguindi ha concluido que la proteína BiP de choque térmico reconoce los polipéptidos que contienen una región heptamérica que tienen la secuencia. Hy(Trp/X)HyHXy (SEC. DE IDENT. NO.: 29) en donde Hy representa un residuo aminoácido hidrofóbico, particularmente triptofano, leucina o fenilalanina (SEC. DE IDENT. NO. : 30), y X es cualquier aminoácido . Las secuencias de unión de protexna de choque térmico de afinidad elevada que incorpora este motivo incluye : His Trp Asp Phe Ala Trp Pro Trp (SEC. DE IDENT. NO.: 1) ; y Phe Trp Gly Leu Trp Pro Trp Glu (SEC. DE IDENT. NO. : 4) . Otros motivos de unión de proteína de choque térmico han sido también identificados. Por ejemplo, Auger, et al., Nature Medicine 2:306-310 (1996) han identificado dos motivos de unión de pentapéptido . Gln Lys Arg Ala Ala (SEC. DE IDENT. NO.: 5) y Arg Arg Arg Ala Ala (SEC. DE IDENT. NO. : 6) En tipos HLA-D asociados con artritis reumatoide que se unen a las proteínas de choque térmico. Los motivos de unión de choque térmico han sido también identificados como consistiendo de siete a quince péptidos largos del residuo que se enriquecen en los aminoácidos hidrofóbicos Lys Arg Gln lie Tyr Asp Leu Glu Met Asn Arg Leu Gly Lys (SEC de IDENT. NO:287); Leu Ser Ser Leu Phe Arg Pro Lys Arg Arg Pro üe Tyr Lys Ser (SEC de IDENT. NO: 288); Lys Leu lie Gly Val Leu Ser Ser Leu Phe Arg Pro Lys (SEC de IDENT. NO:289); Arg Arg Pro üe Tyr Lys Ser Asp Val Gly Met Ala His Phe Arg (SEC de IDENT. NO::290); Cys Lys He Gln Ser Thr Pro Val Lys Gln Ser (SEC de IDENT. NO: 291); Tyr His Cys Asp Gly Phe Gln Asn Glu (SEC de IDENT. NO: 292); Val Gly üe Asp Leu Gly Thr Thr Tyr Ser Cys (SEC de IDENT. NO: 293); Ser Asn Gly Ser Leu Gln Cys Arg üe Cys (SEC de IDENT. NO:294) (Flynn et al., Science 245: 385-390 (1989)), Además, otros péptidos de unión de proteína de choque térmico incluyen: Gly Lys Trp Val Tyr üe (SEC de IDENT. NO: 295); Ala Lys Arg Glu Thr Lys (SEC de IDENT. NO-.296); Lys Trp Val His Leu Phe (SEC de IDENT. NO: 297); Arg Leu Val Leu Val Leu (SEC de IDENT. NO: 298); Trp Lys Trp Gly He Tyr (SEC de IDENT. NO: 299); Ser Ser His Ala Ser Ala (SEC de IDENT. NO: 300); Trp Gly Pro Trp Ser Phe (SEC de IDENT. NO: 301); Ala üe Pro Gly Lys Val (SEC de IDENT. NO: 302); Arg Val His Asp Pro Ala (SEC de IDENT. NO: 303); Arg Ser Val Ser Ser Phe (SEC de IDENT. NO: 304); Leu Gly Thr Arg Lys Gly (SEC de IDENT. NO : 305); Lys Asp Pro Leu Phe Asn (SEC de IDENT. NO: 306); Leu Ser Gln His Thr Asn (SEC de IDENT. NO: 307); Asn Arg Leu Leu Leu Thr (SEC de IDENT. NO: 308); Tyr Pro Leu Trp Val lie (SEC de IDENT. NO: 309); Leu Leu lie Be Asp Arg (SEC de IDENT. NO: 310); Arg Val lie Ser Leu Gln (SEC de IDENT. NO: 311); Gk Val Ser Arg Glu Asp (SEC de IDENT. NO: 312); Ser Be Leu Arg SerThr (SEC de IDENT. NO: 313); Pro Gly Leu Val Trp Leu (SEC de IDENT. NO: 314); Val Lys Lys Leu Tyr lie (SEC de IDENT. NO: 315); Asn Asn Arg Leu Leu Asp (SEC de IDENT. NO: 316); Ser Lys Gly Arg Trp Gly (SEC de IDENT. NO: 317); lie Arg Pro Ser Gly He (SEC de IDENT. NO: 318); Ala Ser Leu Cys Pro Thr (SEC de IDENT. NO: 319); Asp Val Pro Gly Leu Arg (SEC de IDENT. NO: 320); Arg His Arg Glu Val Gln (SEC de IDENT. NO: 321); Leu Ala Axg Lys Arg Ser (SEC de IDENT. NO: 322); Ser Val Leu Asp His Val (SEC de IDENT. NO: 323); Asn Leu Leu Arg Arg Ala (SEC de IDENT. NO: 324); Ser Gly He Ser Ala Trp (SEC de IDENT. NO: 325); Phe Tyr P e Trp Val Arg (SEC de IDENT. NO: 326); Lys Leu Phe Leu Pro Leu (SEC de IDENT. NO: 327); Thr Pro Thr Leu Ser Asp (SEC de IDENT. NO: 328); Thr His Ser Leu lie Leu (SEC de IDENT. NO: 329); Leu Leu Leu Leu Ser Arg (¿EC de T ÉNT. NO: 330); Leu Leu Arg Val Arg Ser (SEC de IDENT. NO: 331); Glu Arg Arg ser Arg Gly (SEC de IDENT. NO: 332); Arg Met Leu Gln Leu Ala (SEC de IDENT. NO: 333); Age Gly Trp Ala Asn Ser (SEC de IDENT. NO: 334); Arg Pro Phe Tyr Ser Tyr (SEC de IDENT. NO: 335); Ser Ser Ser Trp Asn Ala (SEC de IDENT. NO: 336); Leu Gly His Leu Glu Glu (SEC de IDENT. NO: 337); Ser Ala Val Thr Asn Thr (SEC de IDENT. NO: 338); Leu Arg Arg Ala Ser Leu (SEC de IDENT. NO: 339); Leu Arg Arg Trp Ser Leu (SEC de IDENT. NO: 340); Lys Trp Val His Leu Phe (SEC de IDENT. NO: 341); Asn Arg Leu Leu Leu Thr (SEC de IDENT. NO: 342); Ala Arg Leu Leu Leu Thr (SEC de IDENT. NO: 343); Asn Ala Leu Leu Leu Thr (SEC de IDENT. NO: 344); Asn Arg Leu Ala Leu Thr (SEC de IDENT. NO: 345); Asn Leu Leu A g Leu Thr (SEC de IDENT. NO:346); Asn Arg Leu Trp Leu Thr (SEC de ID NO:347); Asn Arg Leu Leu Leu Ala (SEC de ID NO:348); Met Gln Glu Arg lie Thr Leu Lys Asp Tyr Ala Met (SEC de IDENT. NO: 349); Leu Arg Arg Trp Ser Leu Gly (SEC de IDENT. NO: 353); Lys Trp Val His Leu Phe Gly (SEC de IDENT. NO: 354); Asn Arg Leu Leu Leu Thr Gly (SEC de IDENT. NO: 355); Ala Arg Leu Leu Leu Thr Gly (SEC de IDENT. NO: 356); Asn Ala Leu Leu Leu Thr Gly (SEC de IDENT. NO: 357); Asn Arg Leu Ala Leu Thr Gly(SEC de IDENT. NO: 358); Asn Leu Leu Arg Leu Thr Gly (SEC de IDENT. NO: 359); Asn Arg Leu Trp Leu Thr Gly (SEC de IDENT. NO: 360); Asn Arg Leu Leu Leu Ala Gly (SEC de IDENT. NO: 361); Gly Lys Trp Val Tyr He Gly (SEC de IDENT. NO: 295); Ala Lys Arg Glu Thr Lys Gly (SEC de IDENT. NO: 296); Lys Trp Val His Leu Phe Gly (SEC de IDENT. NO: 297); Arg Leu Val Leu Val Leu Gly (SEC de IDENT. NO: 298); Trp Lys Trp Gly líe Tyr (SEC de IDENT. NO: 299); Ser Ser His Ala Ser Ala (SEC de IDENT. NO: 300); Trp Gly Pro Trp Ser Phe (SEC de IDENT. NO: 301); Ala He Pro Gly Lys Val (SEC de IDENT. NO: 302); Arg Val His Asp Pro Ala Gly (SEC de IDENT. NO: 303); Arg Ser Val Ser Ser Phe Gly(SEC de IDENT. NO: 304); Leu Gly Thr Arg Lys Gly Gly (SEC de IDENT. NO: 305); Lys Asp Pro Leu Phe Asn Gly (SEC de IDENT. NO: 306); Leu Ser Gln His Thr Asn Gly (SEC de IDENT. NO: 307); Asa Arg Leu Leu Leu Thr Gly (SEC de IDENT. NO: 308); Tyr Pro Leu Trp Val lie Gly (SEC de IDENT. NO: 309); Leu Leu Ee He Asp Arg Gly (SEC de IDENT. NO: 310); Arg Val He Ser Leu Gln Gly (SEC de IDENT. NO: 311); Glu Val Ser Arg Glu Asp Gly (SEC de IDENT. NO: 312); Ser lie Leu Arg Ser Thr Gly (SEC de IDENT. NO:313); Pro Gly Leu Val Trp Leu Gly (SEC de IDENT. NO: 314); Val Lys Lys Leu Tyr lie Gly (SEC de IDENT. NO: 315); Asn Asn Arg Leu Leu Asp Gly (SEC de IDENT. NO: 316); Ser Lys Gly Arg Trp Gly Gly (SEC de IDENT. NO: 317); lie Arg Pro Ser Gly lie Gly (SEC de IDENT. NO: 318); Ala Ser Leu Cys Pro Thr Gly (SEC de IDENT. NO: 319); Asp Val Pro Gly Leu Arg Gly (SEC de IDENT. NO: 320); Arg His Arg Glu Val Gln Gly (SEC de IDENT. NO: 321); Leu Ala Arg Lys Arg Ser Gly (SEC de IDENT. NO: 322); Ser Val Leu Asp His Val Gly (SEC de IDENT. NO: 323); Asn Leu Leu Arg Arg Ala Gly (SEC de IDENT. NO: 324); Ser Gly lie Ser Ala Trp Gly (SEC de IDENT. NO: 325); Phe Tyr Phe Trp Val Arg Gly (SEC de IDENT. NO: 326); Lys Leu Phe Leu Pro Leu Gly (SEC de IDENT. NO: 327); Thr Pro Thr Leu Ser Asp Gly (SEC de IDENT. NO: 28); Thr His Ser Leu He Leu Gly (SEC de IDENT. NO: 32 ); Leu Leu Leu Leu Ser Arg Gly (SEC de IDENT. NO:330); Leu Leu Arg Val Arg Ser Gly (SEC de IDENT. NO: 331); Glu Arg Arg ser Arg Gly Gly (SEC de IDENT. NO: 332); Axg et Leu Gln Leu Ala Gly (SEC de IDENT. NO: 333); Age Gly Trp Ala Asn Ser Gly (SEC de IDENT. NO: 334); Arg Pro Phe Tyr Ser Tyr Gly (SEC de IDENT. NO: 335); Ser Ser Ser Trp Asn Ala Gly (SEC de IDENT. NO: 336); Leu Gly Hs Leu Glu Glu Gly (SEC de IDENT. NO:337); y Ser Ala Val Thr Asn Thr Gly (SEC de IDENT. NO: 338); como se describe por Gragerov et al., J. olec Biol. 235:848-854 (1984). Otros dominios de unión de proteína de choque térmico incluyen Phe Tyr Gla Leu Ala Leu Thr(SEC de IDENT. N0:),Phe Tyr Gln Leu Ala Leu Thr Trp(SEC de IDENT. NO:), Arg Lys Leu Phe Phe Asn Leu Arg(SEC de IDENT. NO:), Arg Lys Leu Phe Phe Asn Leu Arg Trp (SEC de IDENT. NO:), Lys Phe Glu Arg Gln (SEC de IDENT. NO:), Asn lie Val Arg Lys Lys Lys (SEC de IDENT. NO:), y Arg Gly Tyr Val Tyr Gln Gly Leu(SEC de IDENT. NO: Además, otros dominios de unión de choque térmico incluyen aquellos descritos en la WO 9922761.Xaa representa cualquier aminoácido. HTTVYGAG (SEC de IDENT. NO: 82); TETPYPTG (SEC de IDENT. NO: 83); LTTPFSSG (SEC de IDENT. NO: 84); GVPLTMDG (SEC de IDENT. NO: 85); KLPTVL G (SEC de IDENT. NO: 86); CRFHGNRG (SEC de IDENT. NO: 87); YTRDFEAG (SEC de IDENT. NO: 88); SSAAGPRG (SEC de IDENT. NO: 89); SUQYSRG (SEC de IDENT. NO: 90); DALMWP Xaa G (SEC de IDENT. NO: 91); SS Xaa SLYIG (SEC de IDENT. NO: 92); F TSTRTG (SEC de IDENT. NO: 93); TVQHVAFG (SEC de IDENT. NO: 94); DYSFPPLG (SEC de IDENT. NO: 95); VGS ESLG (SEC de IDENT. NO: 96); F Xaa PMI Xaa SG (SEC de IDENT. NO: 97); APPKVTMG (SEC de IDENT. NO: 98); IAT TPKG (SEC de IDENT. NO: 99); KPPLFQIG (SEC de IDENT. NO: 100); YHTAHNMG (SEC de IDENT. NO: 101); SYIQATHG (SEC de IDENT. NO: 102); SSFATFLG (SEC de IDENT. NO: 103); TTPPNFAG (SEC de IDENT. NO: 104); ISLDPKMG (SEC de IDENT. NO: 105); SLPLFGAG (SEC de IDENT. NO: 106); NLLKTTLG (SEC de IDENT. NO: 107); DQNLPRRG (SEC de IDENT. NO:i08); SHFEQLLG (SEC de IDENT. NO: 109); TPQLHHGG (SEC de IDENT. NO: 110); APLDRITG (SEC de IDENT. NO: 111); FAPLIAHG (SEC de IDENT. NO: U2); SWIQTFMG (SEC de IDENT. NO: 113); NTWPHMYG (SEC de IDENT. NO: 114); EPLPTTLG (SEC de IDENT. NO: US); HGPHLFNG (SEC de IDENT. NO: 116); YLNSTLAG (SEC de IDENT. NO: H7); HLHSPSGG (SEC de IDENT. NO: 118); TLPHRLNG (SEC de IDENT. NO: U9); SSPREVHG (SEC de IDENT. NO: 120); NQVDTARG (SEC de IDENT. NO: 121); YPTPLLTG (SEC de IDENT. NO: 122); HPAAFPWG (SEC de IDENT. NO: 123); LLPHSSAG (SEC de IDEIMT. NO: 124); LETYTASG (SEC de IDENT. NO: 125); KYVPLPPG (SEC de IDENT. NO: 126); APLALHAG (SEC de IDENT. NO: 127); YESLLTKG (SEC de IDENT. NO: 128); SHAASGTG (SEC de IDENT. NO: 129); GLATV SG (SEC de IDENT. NO: 130); GATSFGLG (SEC de IDENT. NO: 131); KPPGPVSG (SEC de IDENT. NO: 132); TLYVSGNG (SEC de IDENT. NO: 133); HAPF SQG (SEC de IDENT. NO: 134); VAFTRLPG (SEC de IDENT. NO: 135); LPTRTPAG (SEC de IDENT. NO: 136); ASFDLLIG (SEC de IDENT. NO: 137); RMNTEPPG (SEC de IDENT. NO: 138); MTPLTTG (SEC de IDENT. NO: 139); ANATPLLG (SEC de IDENT. NO: 140); TIWPPPVG (SEC de IDENT. NO:141); QT VMTTG (SEC de IDENT. NO: 142); NHAVFASG (SEC de IDENT. NO: 143); LHAA Xaa TSG (SEC de IDENT. NO: 144); TWQPYFHG (SEC de IDENT. NO: 145); APLALHAG (SEC de IDENT. NO: 146); TAHDLTVG (SEC de IDENT. NO: 147); NMTNMLTG (SEC de IDENT. NO: 148); GSGLSQDG (SEC de IDENT. NO: 149); TPI TIYG (SEC de IDENT. NO: 150); SHLY SSG (SEC de IDENT. NO: 151); YTLVQPL (SEC de IDENT. NO: 152); TPDUPK (SEC de IDENT. NO: 153); TYPDLRY (SEC de IDENT. NO: 154); DRTHATS (SEC de IDENT. NO:155); MSTTFYS (SEC de IDENT. NO:156); YQHAVQT (SEC de IDENT. NO: 157); FPFSAST (SEC de IDENT. NO: 158); SSFPPLD (SEC de IDENT. NO: 159); MAPSPPH (SEC de IDENT. NO: 160); SSFPDLL (SEC de IDENT. NO:161); HSYNRLP (SEC de IDENT. NO: 162); HLTHSQR (SEC de IDENT. NO: 163); QAAQSRS (SEC de IDENT. NO: 164); FATHHEG (SEC de IDENT. NO: 165); SMPEPLI (SEC de IDENT. NO: 166); IPRYHLI (SEC de IDENT. NO: 167); SAPHMTS (SEC de IDENT. NO: 168); ÍCAPVWAS (SEC de IDENT. NO: 169); LPHWLLI (SEC de IDENT. NO: 170); ASAGYQI (SEC de IDENT. NO: 171); VTP TGS (SEC de IDENT. NO: 172); EHPMFVL (SEC de IDENT. NO: 173); VSSFVTS (SEC de IDENT. NO: 174); STHFTWP (SEC de IDENT. NO: 175); QQWWSPD (SEC de IDENT. NO: 176); GPPHQDS (SEC de IDENT. NO: 177); TLPSTI (SEC de IDENT. NO: 178); HQPSRWV (SEC de IDENT. NO: 179); YGNPLQP (SEC de IDENT. NO: 180); FHWWWQP (SEC de IDENT. NO: 181); ITLKYPL (SEC de IDENT. NO: 182); FHWPWLF (SEC de IDENT. NO: 183); TAQDSTG (SEC de IDENT. NO: 184); FHWWWQP (SEC de IDENT. NO: 185); FHWWDWW (SEC de IDENT. NO: 186); EPFFRMQ (SEC de IDENT. NO: 187); TWWLNYR (SEC de IDENT. NO: 188); FHWWWQP (SEC de IDENT. NO: 189); QPSHL W (SEC de IDENT. NO: 190); SPASPVY (SEC de IDENT. NO: 191); FHWWWQP (SEC de IDENT. NO: 192); HPSNQAS (SEC de IDENT. NO: 193); NSAPRPV (SEC de IDENT. NO: 194); QLWSIYP (SEC de IDENT. NO: 195); SWPFFDL (SEC de IDENT. NO: 196); DTT PLH (SEC de IDENT. NO: 197); WHWQMLW (SEC de IDENT. NO: 198); DSFRTPV (SEC de IDENT. NO: 199); TSPLSLL (SEC de IDENT. NO: 200); AY YVSD (SEC de IDENT. NO: 201); RPLHDPM (SEC de IDENT. NO: 202); WPSTTLF (SEC de IDENT. NO: 203); ATLEPVR (SEC de IDENT. NO: 204); SMTVLRP (SEC de IDENT. NO: 205); QIGAPSW (SEC de IDENT. NO: 206); APDLYVP (SEC de IDENT. NO: 207); RMPPLLP (SEC de IDENT. NO: 208); AKATPEH (SEC de IDENT. NO: 209); TPPLRIN (SEC de IDENT. NO: 210); LPEEÍAPH (SEC de IDENT. NO: 211); DLNAYTH (SEC de IDENT. NO: 212); VTLPNFH (SEC de IDENT. NO: 213); NSRLPTL (SEC de IDENT. NO: 214); YPHPSRS (SEC de IDENT. NO: 215); GTAHFMY (SEC de IDENT. NO: 216); YSLLPTR (SEC de IDENT. NO: 217); LPRRTLL (SEC de IDENT. NO: 218); TSTLLWK (SEC de IDENT. NO: 219); TSDMKPH (SEC de IDENT. NO: 220); TSSYLAL (SEC de IDENT. NO: 221); LYGPHD (SEC de IDENT. NO: 222); LETYTAS (SEC de IDENT. NO: 223); AY SLTQ (SEC de IDENT. NO: 224); STSVYSS (SEC de IDENT. NO: 225); EGPLRSP (SEC de IDENT. NO: 226); TTYHALG(SEC de IDENT. NO: 227); VSIGHPS (SEC de IDENT. NO: 228); THSHRPS (SEC de IDENT. NO: 229); IT PLTT (SEC de IDENT. NO: 230); SIQAHHS (SEC de IDENT. NO: 231); LNWPRVL (SEC de IDENT. NO: 232); YYYAPPP (SEC de IDENT. NO: 233); SLWTKLP (SEC de IDENT. NO: 234); NVYHSSL (SEC de IDENT. NO: 235); NSPHPPT (SEC de IDENT. NO: 236); VPAKPPvH (SEC de IDENT. NO: 237); H LHPNR (SEC de IDENT. NO: 238); YTTHRWL (SEC de IDENT. NO: 239); AVTAATV (SEC de IDENT. NO: 240); TLMH RV (SEC de IDENT. NO: 241); TPL VPY (SEC de IDENT. NO: 242); FTNQQYH (SEC de IDENT. NO: 243); SHVPSMA (SEC de IDENT. NO: 244); HTTVYGA (SEC de IDENT. NO: 245); TETPYPT (SEC de IDENT. NO: 246); LTTPFSS (SEC de IDENT. NO: 247); GVPLTMD (SEC de IDENT. NO: 248); KLPTVLR (SEC de IDENT. NO: 249); CRFHGNR (SEC de IDENT. NO: 250); YTRDFEA (SEC de IDENT. NO: 251); SSAAGPR (SEC de IDENT. NO: 252); SLIQYSR (SEC de IDENT. NO: 253); DALMWP Xaa (SEC de IDENT. NO: 254); SS Xaa SLYI (SEC de IDENT. NO: 255); FNTSTRT (SEC de IDENT. NO: 256); TVQHVAF (SEC de IDENT. NO: 257); DYSFPPL (SEC de IDENT. NO: 258); VGSMESL (SEC de IDENT. NO: 259); F Xaa PMI Xaa S (SEC de IDENT. NO: 260); APPR.VTM (SEC de IDENT. NO: 261); IATK PK (SEC de IDENT. NO: 262); KPPLFQI (SEC de IDENT. NO: 263); YHTAHNM (SEC de IDENT. NO: 264); SYIQATH (SEC de IDENT. NO: 265); SSFATFL (SEC de IDENT. NO: 266); TTPPNFA (SEC de IDENT. NO: 267); ISLDPRM (SEC de IDENT. NO: 268); SLPLFGA (SEC de IDENT. NO: 269); NLL TTL (SEC de IDENT. NO: 270); DQNLPRR (SEC de IDENT. NO: 271); SHFEQLL (SEC de IDENT. NO: 272); TPQLHHG (SEC de IDENT. NO: 273); APLDRIT (SEC de IDENT. NO: 274); FAPLIAH (SEC de IDENT. NO: 275); SWIQTFM (SEC de IDENT. NO: 276); NTWPHMY (SEC de IDENT. NO: 277); EPLPTTL (SEC de IDENT. NO: 278); HGPHLFN (SEC de IDENT. NO: 279); YLNSTLA (SEC de IDENT. NO: 280); HLHSPSG (SEC de IDENT. NO: 281); TLPH LN (SEC de IDENT. NO: 282); SSPREVH (SEC de IDENT. NO: 283); NQVDTA (SEC de IDENT. NO: 284); YPTPLLT (SEC de IDENT. NO: 285); HPAAFPW (SEC de IDENT. NO: 286); LLPHSSA (SEC de IDENT. NO: 287); LETYTAS (SEC de IDENT. NO: 288); YVPLPP (SEC de IDENT. NO: 289); APLALHA (SEC de IDENT. NO: 290); YESLLT (SEC de IDENT. NO: 291); SHAASGT (SEC de IDENT. NO: 292); GLATV S (SEC de IDENT. NO: 293); GATSFGL (SEC de IDENT. NO: 294); PPGPVS (SEC de IDENT. NO: 295); TLYVSGN (SEC de IDENT. NO: 296); HAFFKSQ (SEC de IDENT. NO: 297); VAFT LP (SEC de IDENT. NO: 298); LPTRTPA (SEC de IDENT. NO: 299); ASFDLLI .(SEC de IDENT. NO: 300); RMNTEPP (SEC de IDENT. NO: 301); MTPLTT (SEC de IDENT. NO: 302); ANATPLL (SEC de IDENT. NO: 303); TIWPPPV (SEC de IDENT. NO: 304); QTKVMTT (SEC de IDENT. NO: 305); NHAVFAS (SEC de IDENT. NO: 306); LHAA Xaa TS (SEC de IDENT. NO: 307); TWQPYFH (SEC de IDENT. NO: 308); APLALHA (SEC de IDENT. NO: 309); TAHDLTV (SEC de IDENT. NO: 310); NMTNMLT (SEC de IDENT. NO: 311); GSGLSQD (SEC de IDENT. NO: 312); ?????G?" (SEC de IDENT. NO: 313); SHLYRSS (SEC de IDENT. NO: 314); HGQA QF (SEC de IDENT. NO: 315); y FHW W (SEC de IDENT. NO: 317); Los dominios de unión de proteína de choque térmico antes mencionados son simplemente ejemplares de varios péptidos, entre moléculas de unión de proteína de choque térmico peptídicas o no peptídicas, que pueden utilizarse en la práctica de la presente invención. En otras modalidades, el dominio de unión de proteína de choque térmico puede dirigirse para unirse a una diferente parte de la proteína de choque térmico de mamífero que aquellos antes mencionados, y los dominios de unión de proteína de choque térmico de la invención no se limitan a la unión a cualquier porción particular de la molécula de la proteína de choque térmico. En un ejemplo no limitante, el pép ido IFAGIKKKAERADLIAYLKQATAK (Greene et al., 1995, J. Biol . Chem. 270:2967-2973; SEC. DE IDENT. NO. : 331) o un fragmento de unión de proteína de choque térmico de este péptido, se utiliza en cualquiera de los conjugados de la invención para facilitar la unión de una molécula pre-seleccionada a una proteína de choque térmico. Además de los péptidos antes mencionados que se unen a las proteínas de choque térmico, la unión puede lograrse a través del uso de una molécula orgánica o compuesto con la actividad de unión de proteína de choque térmico. Por ejemplo, las moléculas adecuadas incluyen miembros de los antibióticos de ansamicina de benzoquinona tales como herbimicina A, geldanamicina, macmimicina I, mimosamicina, y kuwaitimicina (Omura et al., 1979, J. Antibiotics 32:255-261; véase también W09922761, incorporada para referencia en la presente en su totalidad) , o compuestos estructuralmente relacionados, y análogos o derivados de los mismos. Estas moléculas pueden conjugarse a través de medios químicos establecidos a los dominios antigénicos de la invención, a través del enlazador péptido, para producir antígenos híbridos capaces de unirse a una proteína de choque térmico in vitro o in vivo y de producir una respuesta inmune al antígeno presente que la contiene . Como se describe en la solicitud co-pendiente y comúnmente poseída no. de serie 10/776,521, presentada el 12 de febrero del 2004, incorporada en la presente para referencia en su totalidad, se ha encontrado que la incorporación de un residuo de triptofano (Trp, o un código W de aminoácido sencillo) en el término C de los dominios de unión de la proteína de choque térmico tal como, pero sin limitarse a aquellos identificados como se describen anteriormente, mejora la unión a las proteína de choque térmico. La unión incrementada a proteínas de choque térmico se ha encontrado que incrementan la capacidad de antígenos híbridos para inducir una respuesta inmune al dominio antigenico del antigeno híbrido, ya sea si se administra en un compuesto con una proteína de choque térmico o cuando se administra sola. La repuesta inmune incrementada se correlaciona con la eficacia incrementada para tratar la enfermedad. Otros ejemplos de métodos para determinar la afinidad se describen en la PCT/US96/13363 (WO9706821) , que se incorpora en la presente para referencia en su totalidad. Entre la selección anterior de los dominios de unión de proteina de choque térmico, aquellos preferidos en la presente invención como parte de un antígeno híbrido comprenden un dominio antigénico y un enlazador peptídico de la invención entre ellos incluye los siguientes dominios de unión de proteína de choque térmico. Gly Lys Trp Val Tyr lie Gly Trp (SEC de IDENT. NO: ); Ala Lys Arg Glu Thr Lys Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Lys Trp Val His Leu Phe Gly Trp(SEC de IDENT. NO: ); Arg Leu Val Leu Val Leu Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Trp Lys Trp Gly He Tyr Gly Trp (SEC de IDENT. NO: ); Ser Ser His Ala Ser Ala Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Trp Gly Pro Trp Ser Phe Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Ala De Pro Gly Lys Val Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Arg Val His Asp Pro Ala Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Arg Ser Val Ser Ser Phe Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Leu Gly Thr Arg Lys Gly Gly Trp (SEC de IDENT. NO: j; Lys Asp Pro Leu Phe Asn Gly Trp (SEC de IDENT. NO: ); Leu Ser Gla His Thr Asn Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Asn Arg Leu Leu Leu Thr Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Tyr Pro Leu Trp Val lie Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Leu Leu lie lie Asp Arg Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Arg Val He Ser Leu Gln Gly Trp (SEC de IDENT. NO: ); Glu Val Ser Arg Glu Asp Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Ser lie Leu Arg Ser Thr Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Pro Gly Leu Val Trp Leu Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Val Lys Lys Leu Tyr lie Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Asn Asn Arg Leu Leu Asp Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Ser Lys Gly Arg Trp Gly Gly Trp (SEC de IDENT. NO: ); He Arg Pro Ser Gly De Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Ala Ser Leu Cys Pro Thr Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Asp Val Pro Gly Leu Arg Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Arg His Arg Glu Val Gln Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Leu Ala Arg Lys Arg Ser Gly Trp (SEC de IDENT. NO: ); Ser Val Leu Asp His Val Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Asn Leu Leu Arg Arg Ala Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Ser Gly lie Ser Ala Trp Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Phe Tyr Phe Trp Val Arg Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Lys Leu Phe Leu Pro Leu Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Thr Pro Thr Leu Ser Asp Gly Trp (SEC de IDENT. NO: ); Thr His Ser Leu Be Leu Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Leu Leu Leu Leu Ser Arg Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Leu Leu Arg Val Arg Ser Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Glu Arg Arg ser Arg Gly Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Arg Met Leu Gln Leu Ala Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Age Gly Trp Ala Asn Ser Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Arg Pro Phe Tyr Ser Tyr Gly Trp (SEC de IDENT. NO: ); Ser Ser Ser Trp Asn Ala Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Leu Gly His Leu Glu Glu Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Ser Ala Val Thr Asn Thr Gly Trp (SEC de IDENT. NO:); Phe Tyr Gln Leu Ala Leu Thr (SEC de IDENT. NO:); Phe Tyr Gln Leu Ala Leu Thr Trp (SEC de IDENT. NO: ); Arg Lys Leu Phe Phe Asn Leu Arg (SEC de IDENT. NO:); Arg Lys Leu Phe Phe Asn Leu Arg Trp (SEC de IDENT. NO:); Lys Phe Glu Arg Gln (SEC de IDENT. NO:); Asn lie Val Arg Lys Lys Lys (SEC de IDENT. NO:); y Arg Gly Tyr Val Tyr Gln Gly Leu (SEC de IDENT. NO:).

Otros ejemplos no limitantes de tales dominios de unión de proteína de choque térmico con un residuo Trp terminal útil para los diversos aspectos de la presente invención incluyen: Asn Leu Leu Arg Leu Thr Gly Trp (SEC de IDENT. NO : 350) ; Phe Tyr Gln Leu Ala Leu Tyr Trp (SEC de IDENT ÑO: 351); Arg Lys Leu Phe Phe Asn Leu Arg Trp (SEC de IDENT. NO: 352); Gly Lys Trp Val Tyr He Gly Trp (SEC de ÍDÉNT. NO: 295); Ala Lys Arg Glu Thr Lys Gly Trp (SEC de ÍDÉNT. ÑO: 296); Lys Trp Val His Leu Phe Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 297); Arg Leu Val Leu Val Leu Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 298); Trp Lys Trp Gly He Tyr Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 299); Ser Ser His Ala Ser Ala Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 300); Trp Gly Pro Trp Ser Phe Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 301); Ala lie Pro Gly Lys Val Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 302); Arg Val His Asp Pro Ala Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 303); Arg Ser Val Ser Ser Phe Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 304); Leu Gly Thr Arg Lys Gly Gly Trp(SEC de IDENT. NO: 305); Lys Asp Pro Leu Phe Asn Gly Trp(SEC de IDENT. ÑO: 306); Leu Ser Gln His Thr Asn Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 307); Asn Arg Leu Leu Leu Thr Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 308); Tyr Pro Leu Trp Val He Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 309); Leu Leu De He Asp Arg Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 310); Arg Val lie Ser Leu Gln Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 311); Glu Val Ser Arg Glu Asp Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 312); Ser He Leu Arg Ser Thr Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 313); Pro Gly Leu Val Trp Leu Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 314); Val Lys Lys Leu Tyr lie Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 3 5); Asn Asn Arg Leu Leu Asp Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 316); Ser Lys Gly Arg Trp Gly Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 317); He Arg Pro Ser Gly He Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 318); Ala Ser Leu Cys Pro Thr Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 319); Asp Val Pro Gly Leu Arg Gly Trp (SEC de ÍDÉNT. "ÑO: 320); Arg His Arg Glu Val Gln Gly Ttp (SEC de IDENT. NO: 321); Leu Ala Arg Lys Arg Ser Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 322); Ser Val Leu Asp His Val Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 323); Asn Leu Leu Arg Arg Ala Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 324); Ser Gly He Ser Ala Trp Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 325); Phe Tyr Phe Trp Val Arg Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 326); Lys Leu Phe Leu Pro Leu Gly Trp (SEC de IDENT. NO:327); Thr Pro Thr Leu Ser Asp Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 328); Thr His Ser Leu lie Leu Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 329); Leu Leu Leu Leu Ser Arg Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 330); Leu Leu Arg Val Arg Ser Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 331); Glu Arg Arg ser Arg Gly Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 332); Arg Met Leu Gln Leu Ala Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 333); Age Gly Trp Ala Asn Ser Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 334); Arg Pro Phe Tyr Ser Tyr Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 335); Ser Ser Ser Trp Asn Ala Gly Trp (SEC de IDENT. ÑO: 336); Leu Gly Hia Leu Glu Glu Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 337); Ser Ala Val ThrAsn Thr Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 338); Leu Arg Arg Ala Ser Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 339); Leu Arg Arg Trp Ser Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 340); Lys Trp Val His Leu Phe Trp (SÉC de IDENT. NO: 341); Asn Arg Leu Leu Leu Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 342); Ala Arg Leu Leu Leu Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 343); Asn Ala Leu Leu Leu Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 344); Asn Arg Leu Ala Leu Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 345); Asn Leu Leu Arg Leu Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 346); Asn Arg Leu Trp Leu Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 347); y Asn Arg Leu Leu Leu Ala Trp (SEC de IDENT. NO: 348); Otros dominios de unión de proteína de choque térmico útiles en la práctica de la presente invención incluyen Phe Tyr Glu Leu Ala Leu Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 501),Phe Tyr Gln Leu Ala Leu Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 502), Arg Lys Leu Phe Phe Asn Leu Arg Trp (SEC de IDENT. NO: 503), Arg Lys Leu Phe Phe Asn Leu Arg Trp (SEC de IDENT. NO: 504),Lys Phe Glu Arg Gln Trp (SEC de IDENT. NO: 505), Asn He Val Arg Lys Lys Lys Trp (SEC de IDENT. NO: 506), . y Arg Gly Tyr Val Tyr Gln Gly Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 507).

Además, otros dominios de unión de proteína de choque térmico incluyen aquellos descritos en la WO 9922761, y pueden tener un residuo Trp agregado para lograr los propósitos de la presente invención, Xaa representa cualquier aminoácido .

Tyr Thr Leu Val Gln Pro Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 1149); Thr Pro Asp He Thr Pro Lys Trp (SEC de IDENT. NO: 1150); Thr Tyr Pro Asp Leu Arg Tyr Trp (SEC de IDENT. NO: 1151); Asp Arg Thr His Ala Thr Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1152); Met Ser Thr Thr Phe Tyr Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1153); Tyr Gln His Ala Val Gln Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 1154); Phe Pro Phe Ser Ala Ser Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 155); Ser Ser Phe Pro Pro Leu Asp Trp(SEC de IDENT. NO: 1156); Met Ala Pro Ser Pro Pro His Trp (SEC de IDENT. NO: 1157); Ser Ser Phe Pro Asp Leu Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 1158); His Ser Tyr Asrt Arg Leu Pro Trp (SEC de IDENT. NO: 1159); His Leu Tbr His Ser Gln Arg Trp (SEC de IDENT. NO: 1160); Gln Ala Ala Gln Ser Arg Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1161); Phe Ala Thr His His lie Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 1162); Ser Met Pro Glu Pro Leu lie Trp (SEC de IDENT. NO: 1163); He Pro Arg Tyr His Leu lie Trp (SEC de IDENT. NO: 1164); Ser Ala Pro His Met Thr Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1 65); Lys Ala Pro Val Trp Ala Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1166); Leu Pro His Trp Leu Leu lie Trp (SEC de IDENT. NO: 1167); Ala Ser Ala Gly Tyr Gln lie Trp (SEC de IDENT. NO: 1168); Val Thr Pro Lys Thr Gly Ser Trp(SEC de IDENT. NO: 1169); Glu His Pro Met Pro Val Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 1170); Val Ser Ser Phe Val Thr Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1 71); Ser Thr His Phe Thr Trp Pro Trp (SEC de IDENT. NO: 1172); Gly Gln Trp Trp Ser Pro Asp Trp (SÉC de IDENT. NO: 173); Gly Pro Pro His Gln Asp Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1174); Asn Thr Leu Pro Ser Thr lie Trp (SEC de IDENT. NO: 1175); His Gln Pro Ser Arg Trp Val Trp (SEC de IDENT. NO: 1176); Tyr Gly Asn Pro Leu Gln Pro Trp (SEC de IDENT. NO: 1177); Phe His Trp Trp Trp Gln Pro Trp (SEC dé ÍDÉNT. ÑO: 1178); De Thr Leu Lys Tyr Pro Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 1179); Phe His Trp Pro Trp Leu Phe Trp (SEC de IDENT. NO: 1180); Thr Ala Gln Asp Ser Thr Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 1181); Phe His Trp Trp Trp Gln Pro Trp (SEC de IDENT. NO: 1182); Phe His Trp Trp Asp Trp Trp Trp (SEC de IDENT. NO: 1 83); Glu Pro PhePtos Arg Met Gln Trp (SEC de IDENT. NO: 1184); Thr Trp Trp Leu Asn Tyr Arg Trp (SEC de IDENT. NO: 1185); Phe His Trp Trp Trp GIrt Pro Trp (SEC de IDENT. NO: 1186); Gln Pro Ser His Leu Arg Trp Trp (SEC de IDENT. NO: 1187); Ser Pro Ala Ser Pro Val Tyr Trp (SEC de IDENT. NO: 1188); Phe His Trp Trp Trp Gln Pro Trp (SEC de IDENT. NO: 1189); His Pro Ser Asn Gln Ala Ser Trp (SEC de IDENT. ÑO: 1190); Asn Sei Ala Pro Arg Pro Val Trp (SEC de IDENT. NO: 1191); Gln Leu Trp Ser He Tyr Pío Trp (SEC de IDENT. NO: 1192); Ser Trp Pro Phe Phe Asp Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 1193); Asp Thr Thr Leu Pro Leu His Trp (SEC de IDENT. NO: 1194); Trp His Trp Gln Met Leu Trp Trp (SEC de IDENT. NÓ: 1195); Asp Ser Phe Arg Thr Pro Val Trp (SEC de IDENT. NO: 1196); Thr Ser Pro Leu Ser Leu Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 1197); Ala Tyr Asn Tyr Val Ser Asp Trp (SEC de IDENT. NO: 1198); Arg Pro Leu Hís Asp Pro Met Trp (SEC de IDENT. NO: 1199); Trp Pro Ser Thr Thr Leu Phe Trp (SEC de IDENT. NO: 1200); Ala Thr Leu Glu Pro Val Arg Trp (SEC de IDENT. NO: 1201); Ser Met Thr Val Leu Arg Pro Trp (SEC de IDENT. NO: 1202); Gln He Gly Ala Pro Ser Trp Trp (SEC de IDENT. NO: 1203); Ala Pro Asp Leu Tyr Val Pro Trp (SEC de IDENT. NÓ: 1204); ATg etPro Pro Leu Leu Pro Trp (SEC de IDENT. NO: 1205); Ala Lys Ala Thr Pro Glu His Trp (SEC de IDENT.' ÑO: 1206); Thr Pro Pro Leu Arg He Asn Trp (SEC de IDENT. NO: 1207); Leu Pro lie His Ala Pro His Trp (SEC de IDENT. NO: 1208); Asp Leu Asn Ala Tyr Thr His Trp (SEC de IDENT. NO: 1209); Val Thr Leu Pro Asn Phe His Trp (SEC de IDENT. NO: 1210); Asn Ser Arg Leu Pro Thr Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 1211); Tyr Pro His Pro Ser Arg Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1212); Gly Thr Ala His Phe Met Tyr Trp (SEC de IDENT. NO: 1213); Tyr Ser Leu Leu Pro Thr Arg Trp (SEC de IDENT. NO: 1214); Leu Pro Arg Arg Thr Leu Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 1215); T r Ser Thr Leu Leu Trp Lys Trp (SEC de IDENT. NO: 1216); Thr Ser Asp Met Lys Pro His Trp (SEC de IDENT. NO: 1217); Thr Ser Ser Tyr Leu Ala Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 1218); Asn Leu Tyr Gly Pro His Asp Trp (SEC de IDENT. NO: 1219); Leu Glu Thr Tyr Thr Ala Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1220); Ala Tyr Lys Ser Leu Thr Gln Trp (SEC de IDENT. NO: 1221); Ser Thr Ser Val Tyr Ser Ser Trp (SEC de IDENT. NO:1222); Glu Gly Pro Leu Arg Ser Pro Trp (SEC de IDENT. NO: 1223); Thr Thr Tyr His Ala Leu Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 1224); Val Ser He Gly His Pro Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1225); Thr His Ser His Arg Pro Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1226); He Thr Asn Pro Leu Thr Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 1227); Ser lie Gln Ala His His Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1228); Leu Asn Trp Pro Arg Val Leu Trp (SEC de IDENT. NO:1229); Tyr Tyr Tyr Ala Pro Pro Pro Trp (SEC de IDENT. NO: 1230); Ser Leu Trp Thr Arg Leu Pro Trp (SEC de IDENT. NO;1231); Asn Val Tyr His Ser Ser Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 1232); Asn Ser Pro His Pro Pro Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 1233); Val Pro Ala Lys Pro Arg His Trp (SEC de IDENT. NO: 1234); His Asn Leu His Pro Asn Arg Trp (SEC de IDENT. NO:1235); Tyr Thr Thr His Arg Trp Leu Trp i(SEC de IDENT. NO:1236); Ala Val Thr Ala Ala lie Val Trp (SEC de IDENT. NO: 1237); Thr Leu Met His Asp Arg Val Trp (SEC de IDENT. NO: 1238); Thr Pro Leu Lys Val Pro Tyr Trp (SEC de IDENT. NO: 1239); Phe Thr Asn Gln Gln Tyr His Trp (SEC de IDENT. NO: 1240); Ser His Val Pro Ser Met Ala Trp (SEC de IDENT. NO: 1241); His Thr Thr Val Tyr Gly Ala Trp (SEC de IDENT. NO: 1242); Thr Glu Thr Pro Tyr Pro Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 1243); Leu Thr Thr Pro Phe Ser Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1244); Gly Val Pro Leu Thr Met Asp Trp (SEC de IDENT. NO: 1245); Lys Leu Pro Thr Val Leu Arg Trp (SEC de IDENT. NO: 1246); Cys Arg Phe His Gly Asn Arg Trp (SEC de IDENT. NO: 1247); Tyr Thr Arg Asp Phe Glu Ala Trp (SEC de IDENT. NO: 1248); Ser Ser Ala Ala Gly Pro Arg Trp (SEC de IDENT. NO: 1249); Ser Leu He GIn Tyr Ser Arg Trp (SEC de IDENT. NO: 1250); Asp Ala Leu Met Trp Pro XAA Trp (SEC de IDENT. NO: 1251); Ser Ser XAA Ser Leu Tyr lie Trp (SEC de IDENT. NO: 1252); Phe Asn Thr Ser Thr Arg Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 1253); Thr Val Gln His Val Ala Phe Trp (SEC de IDENT. NO: 1254); Asp Tyr Ser Phe Pro Pro Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 1255); Val Gly Ser Met Glu Ser Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 1256); Phe XAA Pro Met De XAA Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1257); Ala Pro Pro Arg Val Thr Met Trp (SEC de IDENT. NO: 1258); le Ala Thr Lys Thr Pro Lys Trp (SEC de IDENT. NO: 1259); Lys Pro Pro Leu Phe Gln He Trp (SEC de IDENT. NO: 1260); Tyr His Thr Ala His Asn Met Trp (SEC de IDENT. NO: 1261); Ser Tyr De Gln Ala Thr His Trp (SEC de IDENT. NO: 1262); Ser Ser Phe Ala Thr Phe Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 1263); Thr Thr Pro Pro Asn Phe Ala Trp (SEC de IDENT. NO: 1264); Ee Ser Leu Asp Pro Arg Met Trp (SEC de IDENT. NO: 1265); Ser Leu Pro Leu Phe Gly Ala Trp (SEC de IDENT. NO: 1266); Asn Leu Leu Lys Thr Thr Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 1267); Asp Gln Asn Leu Pro Aig Arg Trp (SEC de IDENT. NO: 1268); Ser His Phe Glu Gln Leu Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 1269); Thr Pro Gln Leu His His Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 1270); Ala Pro Leu Asp Arg lie Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 1271); Phe Ala Pro Leu lie Ala His Trp (SEC de IDENT. NO: 1272); Ser Trp lie Gln Thr Phe Met Trp (SEC de IDENT. NO: 1273); Asn Thr Trp Pro His Met Tyr Trp (SEC de IDENT. NO: 1274); Glu Pro Leu Pro Thr Thr Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 1275); His Gly Pro His Leu Phe Asn Trp (SEC de IDENT. NO: 1276); Tyr Leu Asn Ser Thr Leu Ala Trp (SEC de IDENT. NO: 1277); His Leu His Ser Pro Ser Gly Trp (SEC de IDENT. NO: 1278); Thr Leu Pro His Arg Leu Asn Trp (SEC de IDENT. NO: 1279); Ser Ser Pro Arg Glu Val His Trp (SEC de IDENT. NO: 1280); Asn Gln Val Asp Thr Ala Arg Trp (SEC de IDENT. NO: 1281); Tyr Pro Thr Pro Leu Leu Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 1282); His Pro Ala Ala Phe Pro Tip Trp (SEC de IDENT. NO: 1283); Leu Leu Pro His Ser Ser Ala Trp (SEC de IDENT. NO: 1284); Leu Glu Thr Tyr Thr Ala Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1285); Lys Tyr Val Pro Leu Pro Pro Trp (SEC de IDENT. NO: 1286); Ala Pro Leu Ala Leu His Ala Trp (SEC de IDENT. NO: 1287); Tyr Glu Ser Leu Leu Thr Lys Trp (SEC de IDENT. NO: 1288); Ser His Ala Ala Ser Gly Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 1289); Gly Leu Ala Thr Val Lys Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1290); Gly Ala Thr Ser Phe Gly Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 1291); Lys Pro Pro Gly Pro Val Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1292); Thr Leu Tyr Val Ser Gly Asn Trp (SEC de IDENT. NO: 1293); His Ala Pro Phe Lys Ser Gln Trp (SEC de IDENT. NO: 1294); Val Ala Phe Thr Arg Leu Pro Trp (SEC de IDENT. NO: 1295); Leu Pro Thr Arg Thr Pro Ala Trp (SEC de IDENT. NO: 1296); Ala Ser Phe Asp Leu Leu He Trp (SEC de IDENT. NO: 1297); Arg Met Asn Thr Glu Pro Pro Trp (SEC de IDENT. NO: 1298); Lys Met Thr Pro Leu Thr Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 1299); Ala Asn Ala Thr Pro Leu Leu Trp (SEC de IDENT. NO: 1300); Thr lie Trp Pro Pro Pro Val Trp (SEC de IDENT. NO: 1301); Gln Thr Lys Val Met Thr Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 1302); Asn His Ala Val Phe Ala Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1303); Leu His Ala Ala Xaa Thr Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1304); Thr Trp Gln Pro Tyr Phe His Trp (SEC de IDENT. NO: 1305); Ala Pro Leu Ala Leu His Ala Trp (SEC de IDENT. NO: 1306); Thr Ala His Asp Leu Thr Val Trp (SEC de IDENT. NO: 1307); Asn Met Thr Asn Met Leu Thr Trp (SEC de IDENT. NO: 1308); Gly Ser Gly Leu Ser Gln Asp Trp (SEC de IDENT. Ñó: 1309); Thr Pro Be Lys Thr lie Tyr Trp (SEC de IDENT. NO: 1310); Ser His Leu Tyr Arg Ser Ser Trp (SEC de IDENT. NO: 1311); y His Gly Gln Ala Trp Gln Pbs Trp (SEC de IDENT. NO: 1312); Entre todos los péptidos de unión de la proteína de choque térmico anteriores, los dominios de unión de la protelna de choque térmico Afn Leu Leu Arg Leu Thr Gly Trp (SEC. DE IDENT. NO. : 350) es el más preferido en los antígenos híbridos de la invención. Sin embargo, los dominios de unión de la proteína de choque térmico antes mencionados son simplemente ejemplares de varias porciones, entre las moléculas de unión de la proteína de choque térmico peptídicas y no peptídicas, que pueden utilizarse en la práctica de la presente invención. El antígeno híbrido de la invención incorpora al menos un dominio antigénico (inmunogénico) y al menos un dominio de unión de la proteína de choque térmico, separado por al menos un enlazador peptídico como se describe en la presente . El antígeno híbrido de la invención puede sintetizarse utilizando métodos de síntesis del péptido químico o puede sintetizarse por la expresión de una construcción de ácido nucleico que contiene secuencias enlazadas que codifican los dominios de unión de la proteína de choque térmico y los antigénicos . Una técnica adecuada utiliza las reacciones de amplificación de PCR separadas iniciales para producir segmentos de ADN separados que codifican los dos dominios, cada uno con un segmento enlazador unido con un extremo, seguido por la fusión de los dos productos amplificados en una etapa de PCR adicional. Esta técnica se refiere como la terminación del enlazador. Los sitios de restricción adecuados pueden también diseñarse en regiones de interés, después de lo cual la digestión de restricción y la ligación se utilizan para producir la secuencia que codifica el antígeno híbrido deseado. Como se observa en la presente, el ácido nucleico que codifica un antígeno híbrido de la invención es adecuado también para uso terapéutico por la administración al sujeto, en donde la expresión in vivo produce el antígeno híbrido con la capacidad de inducir una respuesta inmune .

Proteínas de Choque Térmico El término "proteína de choque térmico", como se utiliza en la presente, se refiere a cualquier proteína la cual exhibe expresión incrementada en una célula cuando la célula se somete a una tensión. En las modalidades no limitantes preferidas, la proteína de choque térmico se deriva originalmente de una célula eucariótica; en modalidades más preferidas, la proteína de choque térmico se deriva originalmente de una célula de mamífero. Por ejemplo, pero no a modo de limitación, las proteínas de choque térmico las cuales pueden utilizarse de acuerdo con la invención incluyen BiP (también referido como grp 78), hsp70, hsc70, gp96 (grp94) , hsp60, hsp40 y hsp90 y miembros de las familias de los mismos. Las proteínas de choque térmico especialmente preferidas son BiP, gp96, y hsp70, como se ejemplifica posteriormente. Más preferido es un miembro de la familia hsp70. Los mutantes recombinantemente derivados o de origen natural de las proteínas de choque térmico pueden también utilizarse de acuerdo a la invención. Por ejemplo, pero no a modo de limitación, la presente invención se proporciona por el uso de la proteína de choque térmico mutada de manera que facilita su secreción a partir de la célula (por ejemplo obteniendo mutación o eliminación de un elemento el cual facilita la recaptura de retículo endoplásmico, tal como KDEL o sus homólogos; tales mutantes se describen en la Solicitud PCT No. PCT/US96-13233 (WO 97/06685) , la cual se · incorpora en la presente para referencia) . Para modalidades de la invención en donde la proteína de choque térmico y el antígeno híbrido se administran directamente al sujeto en la forma de un compuesto de proteína/péptido, la proteína de choque térmico puede prepararse, utilizando técnicas estándares, a partir de fuentes naturales, por ejemplo como se describe en Flynn et al., Science 245:385-390 (1989), o utilizando técnicas recombinantes tales como expresión de un vector que codifica el choque térmico en una célula huésped adecuada tal como una bacteria, una levadura o una célula de mamífero. Si la pre-carga de la proteína de choque térmico con peptidos a partir del organismo huésped es una preocupación, la proteína de choque térmico puede incubarse con ATP y luego volverse a purificar. Ejemplos no limitantes de métodos para preparar proteínas de choque térmico recombinantes se establecen posteriormente . Un ácido nucleico que codifica una proteína de choque térmico puede enlazarse operativamente a elementos necesarios o deseables para la expresión y luego utilizarse para expresar la proteína de choque térmico deseada ya sea como un medio para producir una proteína de choque térmico para uso en una vacuna de proteína o, alternativamente, en una vacuna de ácido nucleico. Elementos necesarios o deseables para la expresión incluyen, pero no se limitan a, elementos promotores/mej oradores, secuencias de inicio de detención transcripcional , señales de poliadenilación, secuencias de inicio y detención traslacional , sitios de unión de ribosoma, secuencias de señales similares. Por ejemplo, pero no a modo de limitación, los genes para varias proteínas de choque térmico han sido clonados y secuenciados, incluyendo, pero sin limitarse a, gp96 (humano: No. de Acceso Genbank X15187; Maki et al., Proc. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 87:5658-5552 (1990); ratón; No. de Acceso Genebank M16370; Srivastava et al., Proc. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 84:3807-3811 (1987)), BiP (ratón: No. de Acceso Genebank U16277; Haas et al., Proc. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 85:2250-2254 (1988) ; humano; No. de Acceso Genebank 19645; Ting et al., DNA 7:275-286 (1988), hsp70 (ratón: No. de Acceso Genebank M35021; Hunt et al., Gene 87:199-204 (1990); humano: No. de Acceso Genebank M24743; Hunt et al, Proc. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 82:6455-6489 (1995)), y hsp40 (humano: No. de Acceso Genebank D49547; Ohtsuka K. , Biochem. Biophys . Res. Con un.197 :235-240 (1993)).

MÉTODOS DE ADMINISTRACIÓN Los antígenos híbridos de la invención o compuestos de antígenos híbridos y proteínas de choque térmico pueden administrarse a un sujeto utilizando ya sea una vacuna de ácido nucleico basada en proteína o basada en péptido, de manera que produce en el sujeto, una cantidad del compuesto que es efectiva para inducir una respuesta inmune terapéutica en el sujeto. El suj eto puede ser un suj eto o humano o no humano . El término "respuesta inmune terapéutica", como se utiliza en la presente, se refiere a un incremento de la inmunidad celular humoral y/o celular, como se mide por técnicas estándares, que se dirigen hacia el antígeno híbrido. De preferencia, pero no a modo de limitación, el nivel inducido de inmunidad humoral dirigido hacia el antígeno híbrido es al menos cuatro veces, y de preferencia al menos 16 veces mayor que los niveles de la inmunidad humoral dirigida hacia la técnica anterior a la administración de las composiciones de la invención al sujeto. La respuesta inmune puede medirse también cualitativamente, por medio de un ensayo in vitro o in vivo adecuado, en donde una detención en el progreso o una remisión de una enfermedad neoplásica o infecciosa en el sujeto se considera para indicar la inducción de una respuesta inmune terapéutica. Cantidades específicas de la proteína de choque térmico/antígeno híbrido administrado, pueden depender de numerosos factores incluyendo la inmunógenoicidad de la composición de vacuna particular, la inmunocompetencia del sujeto, el tamaño del sujeto y la ruta de administración. Determinar una cantidad adecuada de cualquier composición dada para la administración es una materia de clasificación de rutin . Además, la eficacia inmunológica significativa se identificó en estudios en donde el antígeno híbrido se administró solo, es decir sin proteína de choque térmico. Aunque los Solicitantes no tienen ninguna obligación para describir la teoría por la cual la invención opera, y no se unen a la misma, los resultados de estos estudios sugieren que los antígenos híbridos, en la inyección en el sujeto, se unen a la proteína de choque térmico endógena, y de este modo no requieren la administración concomitante de la proteína de choque térmico para efectividad. La presente invención se extiende a tales utilidades de los antígenos híbridos de la invención, y además, a terapias concomitantes o tratamientos que incrementan los niveles de proteína de choque térmico endógeno sistémicamente o al sitio pretendido de administración de los antígenos híbridos de la invención. Tales terapias concomitantes o tratamientos incluyen, pero no se limitan a la aplicación local de agentes farmacéuticos sistémicos o locales o térmicos que incrementan la expresión de proteína de choque térmico en el tejido local. Tales agentes y métodos se conocen en la técnica. Antígenos híbridos que son administrados en la ausencia de co-administración de una proteína de choque térmico (por ejemplo, administrada no en un compuesto con una proteína de choque térmico) que comprende al menos un dominio de antígeno y al menos un dominio de unión de proteína de choque térmico que comprende uno de los enlazadores de péptido antes mencionado.

En las modalidades no limitantes específicas de la invención, puede ser deseable incluir más de una especie de proteína de choque térmico, y/o más de un antxgeno híbrido, para optimizar la respuesta inmune. Tal método puede ser particularmente ventajoso en el tratamiento de cáncer o en el tratamiento de infecciones caracterizadas por el rápido desarrollo de mutaciones que resulta en la evasión de la respuesta inmune. Además, un antxgeno híbrido de la invención puede incluir más de un dominio inmunogénico o más de un epxtope. Las composiciones que comprenden la proteína de choque térmico/antígeno híbrido o el antxgeno híbrido solo como se establece anteriormente se refieren en la presente como "vacuna" . El término vacuna se utiliza para indicar que las composiciones de la invención pueden utilizarse para inducir una respuesta inmune terapéutica o profiláctica. Una vacuna de la invención puede comprender un antxgeno híbrido con un sólo dominio antigénico o epxtope, o un antxgeno híbrido con una pluralidad de dominios antigénicos o epítopes . Además, una vacuna puede comprender una mezcla de antígenos híbridos con únicas o pluralidades de dominios antigénicos o epítopes, o cualquier combinación de lo anterior. Como se observa anteriormente, los antígenos híbridos o mezclas de los mismos pueden combinarse con una o más proteínas de choque térmico antes de la administración, o pueden administrarse sin la proteína de choque térmico. Una composición de vacuna que comprende uno o más antígenos híbridos combinados opcionalmente a una o más proteínas de choque térmico de acuerdo con la invención pueden administrarse cutánea, subcutánea, intradérmica, intravenosa, intramuscular, parenteral, intrapulmonar, intravaginal, intrarrectal , nasal o tópicamente. La composición de vacuna puede suministrarse por inyección, bombardeo de partículas, oralmente o por aerosol. La incubación de las proteínas de choque térmico en solución con el antígeno híbrido es suficiente para lograr la carga del antígeno sobre la protexna de choque térmico en la mayoría de los casos . Puede ser deseable en algunos casos , sin embargo, agregar agentes que pueden ayudar en la carga del antígeno. La incubación con calor de la proteína de choque térmico con el antígeno híbrido conducirá en general a la carga del antígeno sobre la proteína de choque térmico. En algunos casos, sin embargo, puede ser deseable agregar agentes adicionales para ayudar en la carga. Por ejemplo, hsp40 puede facilitar la carga de péptidos sobre hsp70. Minami et al, J. Biol. Chem. 271:19617-19624 (1996) . Los desnaturantes tales como HCl de guanidinio o urea pueden emplearse para desestabilizar parcial y reversiblemente la proteína de choque térmico para realizar la cavidad de unión de péptido más accesible al antígeno. En particular, una vacuna de la invención que comprende una proteina de choque térmico incluye también de preferencia difosfato de adenosina (ADP) , para promover la asociación entre la proteína de choque térmico y el dominio de unión de la proteína de choque térmico antes de que el compuesto alcance su destino. Otros compuestos con capacidades similares pueden utilizarse, solos o en combinación con ADP. Las composiciones de vacuna de acuerdo con la invención pueden incluir además varios materiales adicionales, tales como un portador f rmacéuticamente aceptable . Tales portadores incluyen cualquiera de los portadores farmacéuticamente aceptados estándares, tales como solución salina de tampón de fosfato, agua, emulsiones tales como emulsión de aceite/agua o una emulsión de triglicéridos , varios tipos de agentes humectantes, tabletas, tabletas recubiertas y cápsulas. Un ejemplo de una emulsión de triglicéridos aceptable útil en la administración intravenosa e intraperitoneal de los compuestos es la emulsión de triglicéridos comercialmente conocida como Intralipid®. Normalmente, tales portadores contienen excipientes tales como almidón, leche, azúcar, ciertos tipos de arcilla, gelatina, ácido esteárico, talco, grasas o aceites vegetales, gomas, glicoles, u otros excipientes conocidos. Tales portadores pueden incluir también aditivos de sabor y color u otros ingredientes . La composición de vacuna de la invención puede incluir también diluyentes adecuados, conservadores, solubilizadores , emulsificadores , adyuvantes y/o portadores. Tales composiciones pueden estar en la forma de formulaciones liquidas o liofilizadas o de otra manera secas y pueden incluir diluyentes del contenido de varios tampones (por ejemplo, Tris-HCl, acetato, fosfato), pH y resistencia iónica, aditivos tales como albúmina o gelatina para evitar la absorción a superficies, detergentes (por ejemplo, T een 20, Tween 80, Pluronic F68, sales del ácido biliar), agentes solubilizantes (por ejemplo glicerol, polietilenglicerol) , anti-oxidantes (por ejemplo ácido ascórbico, metabisulfito de sodio) , conservadores (por ejemplo Timerosal, alcohol bencílico, parabenos) , sustancias a granel o modificadores de tonicidad (por ejemplo lactosa, manitol) , la unión covalente de polímeros tales como polietilenglicol a la protelna, combinando con iones metálicos, una incorporación del material dentro o sobre las preparaciones particuladas de los compuestos poliméricos tales como ácido poliláctico, ácido poliglicólico, hidrogeles, etc, o sobre liposomas, mieroemulsiones , micelas, vesículas unilamelares o multilamelares, falsas imágenes de eritrocitos, o esferoplastos . Tales composiciones influirán en el estado físico, la solubilidad, la estabilidad, la velocidad de liberación in vivo, la velocidad de depuración in vivo. La elección de las composiciones dependerá de las propiedades físicas y químicas de la vacuna. Por ejemplo, un producto derivado de una forma unida a la membrana de una proteína puede requerir un detergente que contiene una formulación. Las composiciones de liberación controlada sostenida incluyen una formulación en depósitos lipofílicos (por ejemplo ácidos grasos, ceras, aceites) . También comprendidas por la invención son composiciones particuladas recubiertas con polímeros (por ejemplo, poloxámeros o poloxaminas) y acoplados a los anticuerpos dirigidos contra receptores específicos de tejido, ligandos o antígenos o acoplados a ligandos de receptores específicos de tejido. Otras modalidades de las composiciones de la invención incorporan recubrimientos protectores de formas particulares, inhibidores de proteasa o mej oradores de permeación para varias rutas de administración, incluyendo intramuscular, parenteral, pulmonar, nasal y oral. Como una alternativa para dirigir la administración del antígeno híbrido opcionalmente combinado con la proteína de choque térmico, pueden administrarse una o más construcciones de polinucleótido las cuales codifican el antígeno híbrido, opcionalmente con la proteína de choque térmico, en forma expresable. Las construcciones de polinucleótido expresables se introducen en las células en el sujeto utilizando métodos ex vivo o in vivo. Los métodos adecuados incluyen la inyección directamente en el tejido y los tumores, la transfeccion utilizando liposomas (Fraley et al., Nature 370:111-117 (1980)), endocitosis mediada por el receptor (Zatloukal et al., Ann. NY Acad. Sci. 660:136-153 (1992)), transferencia de gen mediada por bombardeo de partícula (Eisenbraun et al., DNA & Cell Biol . 12:792-797 (1993)) y la transfeccion utilizando bacteriófago de presentación de péptido (Barry et al., Nature Medicine 2:299-305 (1996) ) . La vacuna de polinucleótido puede también introducirse en células adecuadas ín vitro que se introducen entonces en el sujeto. Para construir un polinucleótido expresable, una región que codifica a la proteína de choque térmico y/o el antígeno híbrido se prepara como se discute anteriormente y se inserta en un vector de expresión de mamífero operativamente unido a un promotor adecuado tal como el productor SV40, el promotor del citomegalovirus (C V) o el promotor del virus de sarcoma Rous (RSV) . La construcción resultante puede utilizarse entonces como una vacuna para inmunización genética. El o los polímeros de ácido nucleico podrían también clonarse dentro de un vector viral . Los vectores adecuados incluyen, pero no se limitan a vectores retrovirales, vectores de adenovirus, vectores de virus de vacuna, vectores de virus pox y vectores asociados con adenovirus. Los vectores específicos que son adecuados para uso en la presente invención son pCDNA3 (In Vitrogen) , en plásmido AH5 (el cual contiene el origen SV40 y el mayor promotor tardío de adenovirus) , pRC-CMV (In Vitrogen) , pCMU II (Paabo et al., EMBO J. 5:1921-1927 (1986)), pZip-Neo SV (Cepko et al., Cell 37:1053-1067 (1984)) y pSRcc (DNAX, Palo Alto, CA) . Varios métodos para la preparación de proteínas de choque térmico y antígenos híbridos se describen en la WO9706821 y WO 9922761, que se incorporan en la presente para referencia en sus totalidades . En los siguientes ejemplos, y a través de toda la solicitud, los aminoácidos pueden representarse utilizando sus códigos de una sola letra, como sigue: A alanina C cisterna D ácido aspártico E ácido glutámico F fenilalaniña G glicina H histidina I isoleucina K licina L leucina M metionina N asparginina P prolina Q glutamina R arginina S serina T treonina V valina W triptofano ? tirosina La presente invención puede entenderse mejor por referencia a los siguientes Ejemplos no limitantes, los cuales se proporcionan como ejemplares de la invención. Los siguientes ejemplos se presentan para ilustrar más completamente las modalidades preferidas de la invención. Estos no deben interpretarse de ninguna manera, sin embargo, como limitando el alcance amplio de la invención.

EJEMPLO 1 Se prepararon una variedad de antígenos híbridos, cada uno comprendiendo un dominio de unión de proteína de choque térmico y un epítope de antígeno de cáncer o el epítope de modelo Cías IH2-KB a partir de la ovalbúmina, SINFE L. Un enlazador peptídico se incluyó entre los dos dominios . Los dominios de unión de proteína de choque térmico utilizados en estos experimentos estuvieron entre los siguientes: HWDFAWPW, NLLRLTGW, FYQLALT y RKLFFNLRW. Los enlazadores estuvieron entre aquellos descritos anteriormente. El cáncer y los epítopes modelo estuvieron entre los siguientes: Utilizar la síntesis de péptido de fase sólida que utiliza la química F-moc, los antígenos híbridos que comprenden un dominio de unión de proteína de choque térmico, un epítope de cáncer, y un enlazador entre ellos, se sintetizaron en varias orientaciones.

EJEMPLO 2 Las afinidades de unión entre la proteina 70 de choque térmico humano o murino recombinante (hsp70) y los diversos dominios de unión de la proteína de choque térmico y los péptidos antigénicos mencionados anteriormente, así como entre los antígenos híbridos que comprenden un péptido antigénico y un dominio de unión de proteína de choque térmico descrito anteriormente, se determinaron por ensayos de inhibición de unión (Diagramas Hill) relativos a la afinidad de unión de una referencia, del antígeno híbrido etiquetado (ALFDIESKVGSGHWDFAWPW tritiado o fluoresceinado) a hsp70 como se determina por el análisis Scatchard (Kds de 22.64 µ? y 10.75 µ?, respectivamente) . Los estudios de unión se realizaron en 39% de PBS; 20 mM de ????, pH 8; 37 mM de NaCl, 5 mM de MgCl2; y 1 mM de ADP.

EJEMPLO 3 Para estudios inmunológicos en ratones, se utilizaron un epítope de murino MHC H2-K(b) de ovalbúmina, SIINFEKL (aminoácidos 257-264) , y un péptido H2-K(b) a partir de la nucíeoproteí a de virus de estomatitis vesicular (VSV) , RGYVYQGL (aminoácidos 52-59) para la preparación de antígenos híbridos. La siguiente tabla establece las secuencias y las afinidades para hsp70 de los epítopes solos y en antígenos híbridos.

Epítope Solo Antígeno híbrido que comprende el epítope Epítope de Secuencia Afinidad Afinidad Ratón epítope para Secuencia de antígeno híbrido para hsp70 hsp70 (µ?) (µ?) NLLRLTGWGSGSIINFEKL 1.6 Ovalbúmina: aminoácidos SHNFEKL 235 NLL LTGWFFRKSE FEKL 2.2 257-264 NLLRLTG R SG E L 0.8 MLLRLTGWGSGRGYVYQGL Proteína 1.4 núcleo VSV: LLRLTGWFRKRGYVYQGL aminoácidos RGYVYQGL 82 1.0 52-59 NLLRLTGWRKRGYVYQGL 0.6 EJEMPLO 4 Se inmunizaron ratones s.c, en la base de la cola con hsp70 solo, hsp70 se combinó con SIINFEKL, y el péptido SIINFEKL híbrido con o sin HSP70. Las dosis se ajustaron de manera que cada inmunización contuvo la misma cantidad de SIINFEKL, excepto para hsp70 solo. Siete días después, los bazos se cosecharon y enriquecieron para células CD8+T, que se colocaron sobre un ensayo IFN-y-ELISPOT ex vivo. Las respuestas después de la pulsación con SIINFEKL ("SIINFEKL") se registraron en la siguiente tabla, que incluye las dosis, y el número de manchas (error estándar + promedio) por 4 x 105 de células CD8 T, de > cuatro experimentos con al menos tres ratones por grupo. Los controles incluyeron un medio solo ("un medio de control") células T no pulsadas ("control no pulsado")/ las células T se pulsaron con péptido no inmunizado derivadas de VSV, RGYVYQGL ("control VSV" ) , y se expusieron a concavalina A como un control positivo ("Con un control positivo A" ) . En el mismo experimento, un ensayo de liberación 51Cr como se describe anteriormente se hizo utilizando células objetivo de pulso SIINFEKL. En un ejecutador a la relación de célula objetivo de 200:1, los resultados de por ciento de eliminación obtenidos se muestran en la columna extrema derecha de la siguiente tabla. (200-10) EJEMPLO 5 Se llevó a cabo un experimento similar a aquel descrito anteriormente, el cual incluyó también antígeno híbrido sin hsp70.

EJEMPLO 6 Se llevó a cabo un experimento adicional similar a aquel descrito anteriormente .

EJEMPLO 7 Como en los experimentos in vivo anteriores, se inmunizaron ratones B6 s.c. para evaluar compuestos de hsp70 con antígenos híbridos hechos utilizando otros enlazadores peptídicos, incluyendo FFRK, RK, A VL, QLK y FR (utilizando códigos de aminoácidos de una letra) , y en dosis diferenciadas. Un ensayo IFN-y-ELISPOT ex vivo se realizó como se describe anteriormente. Los resultados que incluyen los valores control son como sigue . (200-13) 200-21 Número de manchas por 400,000 células Inmunógeno SÜNFEKL Control Control Control VSV medio sin pulso ^gHsp70+2. g 124 ±8.8 0.33 ±0.41 0.57*0.82 2.67 ±2.68 NLLRLTG FF KSII FE L .4µgHs?70+2.4 g 95 ±12 1.33 ±0.82 1.0 ±1.2 0.67 ±0.41 NLLRLTGWAKVLSIINFEKL 200-23 EJEMPLO 8 Estudios in vivo similares en ratones B6 como aquellos descritos anteriormente, se realizaron utilizando formulaciones sin hsp70 agregado. Los resultados son como sigue. (200-17) EJEMPLO 9 Estudios in vivo similares en ratones B6 como aquellos descritos anteriormente se realizaron utilizando formulaciones con o sin hsp70. Además, se llevó a cabo un estudio en el cual el antígeno híbrido se co-administró con el péptido de dominio de unión de protelna de choque térmico libre (NLL LTGW) . Los resultados son como sigue.

EJEMPLO 10 El epítope VSV utilizado como un control en muchos de los experimentos anteriores, RGYVYQGL, se utilizó como el epítope para preparar antígenos híbridos adicionales de la invención, y evaluados para la inducción de una respuesta inmune en experimentos similares como se describe anteriormente .

(VSV-72-02) EJEMPLO 11 Para evaluar la eficacia de los antígenos híbridos y compuestos antes mencionados con hsp70 en el tratamiento de la enfermedad, se utilizó un modelo en donde 20,000 células tumorales E7 modificadas para expresar ovalbúmina (designada E.G7) se implantaron subcutáneamente en ratones B6. Los ratones se utilizaron por grupo de tratamiento. Este modelo se describe por ejemplo, en Moroi et al., 2000, Proc. Nat. Acad. Sci. USA 97:3485-3490. Los resultados en número de ratones con tumores con el tiempo se muestran en la Figura 1. Después de 31 días, ninguno de los ratones inmunizados con hsp70 :NLLRLTG FFRKSIINFEKL desarrollaron tumores, ni se inmunizaron ratones con SIINFEKL emulsificado en adyuvante Titermax. Tres de 10 ratones vacunados con NLLRLTGWFFRKSIINFEKL solo (sin hsp70) tuvieron tumores. Cinco de 10 ratones vacunados con hsp70: SIINFEKL tuvieron tumores, y 9 de 10 ratones inmunizados con Titermax y tampón solo tuvieron tumores .

EJEMPLO 12 El ensayo de presentación de antígeno in-vitro descrito anteriormente se utilizó ademas para evaluar las formulaciones de la invención. Para demostrar el requerimiento de los antígenos híbridos de la invención para hsp70, si se suministra en la formulación o endógenamente disponible, para la entrada del antígeno híbrido y más específicamente su antígeno dentro de la trayectoria de presentación antigénica, el ensayo se realizó con las siguientes formulaciones, con los resultados indicados. (200-MF-41) EJEMPLO 13 El modelo de ratón HHD II que soporta un compuesto HLA-A2 humano compuesto descrito por Firat et al., 1999, " ratones transgénicos HLA-A2.1 inconscientes, clase I H-2: un modelo animal versátil para evaluación pre-clínica de estrategias inmunoterapéuticas anti-tumor", Eur J Immunol 29:3112-21, se utilizó en los siguientes experimentos para evaluar epitopes HLA-A2 humanos en antígenos híbridos de la invención. El epítope de péptido "IMD" IMDQVPFSV a partir del antígeno gplOO de melanoma humano se evaluó en un antígeno híbrido de la invención a dosis baja y elevada en el modelo HHD II. Métodos similares a aquellos descritos anteriormente se utilizaron para el ensayo ELISPOT, con péptidos de prueba que son el péptido IMD y, como un control, un péptido del antígeno tirosinasa de melanoma, YMDGTMSQV ("YMD") . Los resultados se muestran en la tabla siguiente . (HHDH200-72-02) Se llevó a cabo un experimento similar en ratones HHD II utilizando YMD como el epítope en el antígeno híbrido, en un compuesto con hsp70, como sigue. (200-72-01) EJEMPLO 14 Un epítope a partir del virus Sendai (SdV) , FAPG YPAL, se evaluó en antigenos híbridos de la invención en ratones B6, similares a los anteriores. Los resultados son como sigue. (200-18) EJEMPLO 15 Se realizaron experimentos in vivo en la co-administración de dos antígenos híbridos de la invención con hsp70 a ratones B6. Los antígenos híbridos que contienen SIINFEKL a partir de ovalbúmina y RGYVYQGL de VSV se mezclaron e inmunizaron con hsp70. Los resultados son como sigue . (OVA-VSV-72-01) EJEMPLO 16 Como se observa anteriormente, en un aspecto de la invención, las formulaciones que contienen una pluralidad de antígenos híbridos que comprenden diferentes epítopes antigénicos pueden formularse con una o más proteínas de choque térmico para la inmunización en seres humanos para producir una respuesta inmune efectiva para tratar o evitar una enfermedad. Por ejemplo, para tratar melanoma humano, una formulación que comprende 8 diferentes epítopes de melanoma pueden prepararse como antígenos híbridos, y formularse, por ejemplo, con hsp70. En esta formulación particular, NLLRLTGW del dominio de unión de proteína de choque térmico en el término N se utiliza para todos los epítopes, enlazados al epítope en el término C utilizando el enlazador FFRK peptídico. Otros dominios de unión y enlazadores se adoptan en la presente. Esta formulación particular es útil para tratar pacientes con el haplotipo HLA-A2. Una formulación comprende los siguientes antígenos híbridos con hsp70 : En una modalidad, cantidades aproximadamente iguales de los 8 antígenos híbridos anteriores pueden combinarse con hsp70, y administrarse en solución salina. En otra modalidad, una formulación comprende los primeros cinco antígenos híbridos listados. Las formulaciones antes mencionadas que contienen proteína de choque térmico en solución salina pueden contener opcionalmente ADP para estabilizar los compuestos, así como otros componentes, tales como excipientes, diluyentes y portadores, como se menciona anteriormente. En otra modalidad, una mezcla de los 8 antígenos híbridos anteriores, de los primeros 5 listados, se formula en solución salina para la administración sin una proteína de choque térmico.

EJEMPLO 17 Se evaluaron los protocolos de estímulo de cebadura en este experimento. Utilizar el antígeno híbrido NLLRLTGWFFRKSIINFEKL, o sin el hsp70 co-administrado, los siguientes 5 protocolos fueron seguidos: 1) administrar en el día 0, analizar en el día 7, 2) administrar en los días 0 y 7, analizar en el día 21; 3) administrar en el día 0, analizar en el día 21; 4) administrar en los días 0 y 14, analizar en el día 28; y 5) administrar en el día 0 y analizar en el día 28. Los resultados en números de manchas por 400,000 células fueron como sigue. (200-28-72-01a, -01b, -01c) Día(s) de protocolo inmunizado 0 0,7 0 0,14 0 Día de protocolo analizado 7 21 21 28 28 SIINFEKL 3.0 ±2.0 2.0 ±1.0 0.0 ± 1.0 1.0 ±1.0 1.0 ±1.0 2(ig hsp70, 4 SIINFEKL 3.0 ±1.0 6.0 ±1.0 22 ±8.0 3.0 ±2.0 20 ±5.0 2jig 72 ±5.0 24 ±6.0 42 ±7.0 25 ± 9.0 82±ll NLLRLTGWFFRKSn FE L 2µ% hsp70 y 4 d 99 ±12 98±ll 141 ±14 398±18 27 ±2.0 NLLRLTGWFFRKSnNFEKL 2\ig hsp70 5.0 ±6.0 3.0 ±2.0 3.0 ±0.0 1.0 ± 1.0 4.0 ±3.0 EJEMPLO 18 Se realizaron experimentos adicionales con mezclas de antigenos híbridos para demostrar la producción de una respuesta inmune a los antígenos componentes, como en lo anterior. En este experimento, los antígenos híbridos que contienen SIINFEKL y el peptido RGYVYQGL VSV se utilizaron.

(VSV/OVA-72-02) Número de manchas por30Q,000 células Inmunógeno SÜNFE L Control Control vsv medio sin (RGYVYQGL) pulso 3.7 hsp70 238 ±27 0.0 ±0.0 1.0 ± 1.0 5.0 ±2.0 NLLRLTGWFFRKSIINFEKL 11.2pghsp70 330 ±45 1.0 ± 1.0 0.0 ± 0.0 4.0 ± 1.0 NLLRLTGWFF KSIINFE L 3.7 hsp70 1.0 ± 1.0 1.0 ± 1.0 0.0 ±0.0 61 ±11 NLLRLTG FFRKRGYWOGL 2.0 ±2.0 2.0 ± 1.0 2.0 ±0.0 147 ±20 6µe NLLRLTGWFFRKRGYVYQGL 3^ghs 70 179 ±4.0 2.0 ± 2.0 1.0± 1.0 165 ± 11 2p NLLRLTGWFFRKSIINFEKL 2^ NLLRLTGWFFRKRGYVYQGL U.2ngbsp70 310 ±13 1.0 ± 1.0 I.0± 1.0 242 ± 52 6ftg NLLRLTGWFFRKSIINFEKL 6 g NLLRLTGWFFRKRGYVYQGL EJEMPLO 19 La afinidad de unión para antigenos híbridos que comprenden NLLRLTGW de dominio de unión de proteína de choque térmico, SIINFEKL de dominio antigénico (de ovalbúmina) o RGYVYQGL (de la proteína VSV) y varios enlazadores establecidos en el Ejemplo 32 se llevaron a cabo como se describe en el Ejemplo 17. Los dominios antigénicos solos tuvieron un Kd para la unión de hsp70 de 235 µ? y 82 µ? respectivamente. Los resultados se muestran posteriormente.

Antígeno híbrido Kd para unión a HSP70 NLLRLTGWGSGSENFEKL 1.6 µ? LL LTGWFIT ISIENIFE L 2.2 µ? NLLRLTGWRKSn E L 0.8 µ? NLLRLTGWA VLSÜNFE L 2.0 µ? NLLRLTGWQLKSnNFE L 0.4 µ? NLLRLTGWFRSÜ FE L 1.5 JIM NLLRLTGWGSGRGYVYQGL 1.4 NLL LTGWFFRIRGYVYQGL 1.0 ¡M KLLRLTGWRKRGYVYQGL 0.6 µ? EJEMPLO 20 Se llevaron a cabo estudios adicionales para evaluar la inmunógenoicidad de antigenos híbridos cuando se administran solos a ratones B6, sin la co-administración de hsp70. Los métodos para la evaluación utilizan IFN-y-ELISPOT como se describe anteriormente.

(Control 200-24 y 200-30) NT sin probar EJEMPLO 21 Se prepararon antígenos híbridos que comprenden dos antígenos, separados por un enlazador como se describe anteriormente, de manera que el antígeno híbrido tiene la siguiente estructura general : (dominio de unión de proteína de choque térmico) (enlazador) - (Antígeno 1) - (enlazador) - (Antígeno 2) Aunque en este ejemplo, el dominio de unión de proteína de choque térmico está en la porción N-terminal del antígeno híbrido, esto no es necesariamente el caso y los antígenos híbridos con el dominio de unión de proteína de choque térmico en el término C, o entre los dos dominios antigénicos, se adopta por la presente invención. Además, aunque en los ejemplos posteriores, el mismo péptido enlazador se utiliza entre los dominios antigénicos y entre el dominio antigénico próximo al dominio de unión de proteína de choque térmico, este no es necesariamente el caso y diferentes péptidos enlazadores pueden utilizarse. Además, la presencia del enlazador en una o ambas posiciones es opcional. Y además, tres o más péptidos antigénicos pueden utilizarse. Para simplicidad, tales antígenos híbridos con dos o más dominios antigénicos se llaman un antígeno híbrido de tándem. Tales composiciones de antígeno híbrido en tándem, compuestos de uno o más antígenos híbridos en tándem y una proteína de choque térmico y métodos para producir una respuesta inmune o para prevenir o para tratar una enfermedad administrando uno o más antígenos híbridos en tándem o compuestos de al menos una proteína de choque térmico y al menos un antígeno híbrido en tándem se adoptan totalmente en la presente. Los siguientes experimentos comparan la inmunógenoicidad de la mezcla de dos antxgenos híbridos y un antígeno híbrido en tándem que comprende los mismos antígenos, y un estudio de respuesta de dosis. En un experimento, un péptido que comprende dos enlazadores y epítopes, pero no el dominio de unión de proteína de choque térmico se incluyó .

(Control-200 -72-01) (S200-72-02) (S200-72-12) En este y otros experimentos, el epítope próximo al dominio de unión de proteína de choque térmico exhibe la respuesta inmune más fuerte, y de este modo la colocación de los epítopes seleccionados para las ormulaciones de vacuna de la invención, pueden colocarse para contribuir en grado máximo a la inmunogenoicidad total de la formulación, ya sea administrada en la ausencia de las proteínas de choque térmico o administradas como compuestos con proteínas de choque térmico.

EJEMPLO 22 En los siguientes experimentos, las mezclas de antígenos híbridos en tándem se evaluaron para inmunogenoicidad. Además de los péptidos de Clase I H2-Kb a partir de ovalbúmina (SIINFEKL) y desde VSV (RGYVYQGL) , el péptido IAYFYPEL de ß-caseína H2-Kb y el péptido FAPGNYPAL de virus Sendai se utilizaron también. En otro experimento, dos antígenos híbridos en tándem con los mismos péptidos antigénicos en configuraciones alternativas se mezclaron. Se produjeron respuestas inmunes fuertes a cuatro epítopes. Todas las formulaciones en la presente incluyeron 1 ni de ADP. En un experimento descrito posteriormente, ADP se omitió. (200-72-04) S200-72-13 S200-72-13 Número de manchas por 300,000 células Inmunógeno SHNFEKL RGYVYQGL IAYFYPEL Medio 9.6 K 450 ±10 273±1Z 3.0 ±1.4 0.33 ± 0.41 NLLRLTOWFFRKSHNFEKLFFRKRGYVYQGL 9.6 d 82±4 445 ±30 13 ±0.41 0± 0 NLLRLTO FFRKRGYVYQOLFFRESnNFBKL 9.6 d NLL LTGWFFRKSIINFEKLFFE GYVYQGL más 202 ± 7.6 18S±24 1.0 ±0.7 0.67 ±0.41 9-6 US NLLKLTGWFFRKRGYVYQGLFFRKSIINFEKL S20Q-72-13, no ??? EJEMPLO 23 En el siguiente experimento, hasta cinco péptido antigénicos se suministran e inducen inmunógenoicidad sin HSP70 co-administrado, cuando se administra como una mezcla de dos antigenos híbridos en tándem y un antígeno híbrido sencillo a ratones B6. Los antígenos híbridos en tándem incluyeron VSV y péptidos de ovalbúmina en uno, y los péptidos de ß-caseína y el virus Sendai en el otro. El antígeno híbrido sencillo contuvo el péptido de la influenza NS2-114 (RTFSFQLI) .

S200-72-15 EJEMPLO 24 La inraunógenoicidad de los antígenos híbridos sencillos anteriores administrada sin proteina de choque térmico se evaluaron en combinación con los epítopes de la célula T auxiliar presentes en un antígeno híbrido. En la mayoría de los experimentos, se utilizó un epítope de Clase II H2-K de ovalbúmina, aminoácidos 323-339, TEWTSS VMEERKI V (es decir, el antígeno híbrido tuvo una secuencia de NLLRLTGWFFRKTEWTSS VMEERKIKV) . La inclusión del antígeno híbrido que contiene el péptido de Clase II incrementa la respuesta al epítope de la Clase I en el promedio de aproximadamente siete veces. (250-72-08) EJEMPLO 25 Se evaluó el efecto en la inmunógenoicidad de los antígenos híbridos co-administrados con varios antígenos híbridos que contienen péptidos de la Clase II H2-Kb, en la ausencia de la proteína de choque térmico. Los péptidos de la Clase I fueron ya sea SSWDFITV o DAPIYTNV; los péptidos de la Clase II incluyeron el péptido de ovalbúmina mencionado anteriormente, un péptido de Clase II a partir de la anatoxina de tétanos NNFTVSF LRVPKVSASHL (es decir, el antígeno híbrido tiene una secuencia de NLLRLTGWFFR NFTVSFWLRVPKVSASHL) , o un péptido HBVc (aminoácidos 128-140), TPPAYRPPNAPIL. 250-72-13 De este modo, un epítope de célula T auxiliar puede incluirse en un antígeno híbrido como el único epítope, y administrarse como una mezcla con otros antígenos híbridos, que contienen el o los epítopes de Clase I, o el epítope de célula T auxiliar pueden incluirse en un antígeno híbrido en tándem como uno de los epítopes . Estos son simplemente ejemplares de las numerosas variaciones en las composiciones de antígeno híbrido de la invención.

EJEMPLO 26 En una forma similar al ejemplo previo, la inmunógenoicidad de un antígeno híbrido en tándem se evaluó con o sin la co-administración de un antigeno híbrido que contiene el péptido de Clase II de ovalbúmina. S2S0-72-12 250-72-15 EJEMPLO 27 Se llevaron a cabo también experimentos similares con los antígenos híbridos que comprenden un epítope de célula T auxiliar se co-administra con al menos un antigeno híbrido en tándem, en la ausencia de la co-administración de una proteína de choque térmico . 250-72-12 EJEMPLO 28 Se realizó un estudio de inmunización utilizando antígenos híbridos que contienen epítopes de Clase I humanos (HLA-A2) en ratones HHD II como se describe anteriormente. Se inmunizaron a los animales con un compuesto hecho de 5 g de hsp70 y 33 µ-q de NLLRLTGWFFRKYMDGTMSQV. Los resultados de ELISPO en células por 300,000 fueron: Medio, 1.33 ± 0.58; esplenocitos 1 + 0; esplenocitos más YMDGTMS QV 123 + 13; y esplenocitos más IMDQVPFSV 4 ± 1.

EJEMPLO 29 En otro experimento utilizando ratones HHDII, se utilizó un epitope HLA-A2 inmunogénico de Trp-2 (SVYDFFVWL) . Debido a que este epitope es también un epitope H2- b, y los ratones HHDII están en un contexto de ratón B6 (H2-Kb) , una respuesta inmune inducida contra el peptido Trp-2 representa una ruptura de tolerancia a un auto-epítope en el modelo de ratón. Los resultados de este experimento demostraron que la tolerancia a este auto-epítope se rompió, y la presente invención se dirigió además a métodos para romper la tolerancia administrando los antígenos híbridos y compuestos de la invención.

HHDll-200-72-03 Numera de manchas por 300,000 células Inmunógeno Medio SVYDFFVWL DMDQVPFSV YMDGTMSQY 4.33 " NLLRLTGWFFR -SVYDFFVWt, más 0.5 ± 0.71 166 ±25 2.0 ± 1.4 3.5 ± 0.71 25 m hsp70 8.66 µ NLL LTG FFR SVYDFFV I, más 3.5 ±0.71 114±11 7.7 ± 2.1 H ±3.1 25 ¡ig ¾sp70 4.1 NLLRLTGWFFRKVMDGTMSQV más 3.0 1.0 2.0 ± 1.4 74 ±2.8 25 \ig 4.1 ¡ig NLLRLTGWFF KIMDQVPQV más 1.0 ± 1.4 2.0 ± 2.0 984 ±26 23 ±1.5 25 µ5 hsp70 EJEMPLO 30 Se utilizaron ratones HHDII para evaluar la inmunógenoicidad de compuestos de hsp70 y tres antígenos híbridos que comprenden ciertos epltopes del componente viral VIH establecido en el Ejemplo 27.

HHDI1-200-72-07 NT= sin probar EJEMPLO 31 Las mezclas de antigenos híbridos que contienen epítopes H2- b combinadas con hsp70 se evaluaron para la inmunógenoicidad en ratones B6 como se describe anteriormente .

OBS-72-01 EJEMPLO 32 La inmunógenoicidad de los antígenos híbridos en tándem combinados con hsp70 se estudiaron en ratones B6.

S200-72-01 La presente invención no se limita en el alcance por las. modalidades específicas descritas en la presente. Más bien, varias modificaciones de la invención además de aquellas descritas en la presente serán aparentes para aquellos expertos en la técnica a partir de la descripción anterior y las figuras anexas. Tales modificaciones se pretenden para caer dentro del alcance de las reivindicaciones anexas . Varias publicaciones se citan en la presente, los contenidos de las cuales se incorporan en la presente para referencia en sus totalidades.

Claims

REIVINDICACIONES 1. Un antlgeno híbrido que comprende al menos un dominio antigénico de un agente infeccioso o un antígeno tumoral , al menos un dominio de unión que no se une covalentemente a una proteína de choque térmico, y al menos un enlazador peptídico entre ellos seleccionado a partir del grupo que consiste de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC. DE IDENT. NO.: 1000); Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FRKN, SEC . DE IDENT. NO.: 1002); Arg Lys Asn (R N) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC . DE IDENT. NO.: 1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO. : 1001) ; Lys Asn (KN) ; Arg Lys (RK) ; y AA1-AA2-AA3-leucina, en donde ??1 es A, S, V, E, G, L o K, AA2 es K, V o E; y AA3 es V, S, F, K, A, E o T.
2. Una composición para inducir una respuesta inmune a un agente infeccioso o antígeno tumoral que comprende al menos un antígeno híbrido de la reivindicación 1.
3. Una composición para inducir una respuesta inmune a un agente infeccioso o antígeno tumoral, que comprende un compuesto de al menos una proteína de choque térmico y al menos un antígeno híbrido de la reivindicación 1.
4. La composición de la reivindicación 3, en donde la proteína de choque térmico es un hsp70.
5. Un método para inducir una respuesta inmune a un agente infeccioso o un antígeno tumoral, que comprende administrar a un sujeto al menos un antígeno híbrido de la reivindicación 1.
6. Un método para inducir una respuesta inmune a un agente infeccioso o antígeno tumoral, que comprende administrar a un sujeto un compuesto de: (a) un antígeno híbrido de la reivindicación 1; y (b) una proteína de choque térmico; en donde el antígeno híbrido y la proteína de choque térmico no se unen covalentemente .
7. El método de la reivindicación 6, en donde la proteína de choque térmico es un hsp70.
8. Un método para tratar una enfermedad infecciosa o cáncer, que comprende administrar a un sujeto al menos un antígeno híbrido de la reivindicación 1, en donde al menos un dominio antigénico es a partir la enfermedad infecciosa o cáncer.
9. Un método para tratar una enfermedad infecciosa o cáncer, que comprende administrar a un sujeto un compuesto de : (a) un antígeno híbrido de la reivindicación 1, en donde al menos un dominio antigénico es a partir de la enfermedad infecciosa o cáncer; y (b) una proteína de choque térmico; en donde el antígeno híbrido y la proteína de choque térmico no se unen covalentemente.
10. El método de la reivindicación 9, en donde la proteína de choque térmico es un hsp70.
11. Un antígeno híbrido que consiste esencialmente de al menos un dominio antigénico de un agente infeccioso o un antígeno tumoral, al menos un dominio de unión que no se une covalentemente a una proteína de choque térmico, y al menos un enlazador peptídico entre ellos seleccionado a partir del grupo que consiste de Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC . DE IDENT. NO.: 1000); Phe Arg Lys (FR ) ; Phe Arg Lys Asn (F K , SEC. DE IDENT. NO.: 1002); Arg Lys Asn (RKN) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFRKN, SEC. DE IDENT. NO.: 1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (A VL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001); Lys Asn ( N) ; Arg Lys (RK) ; y ??1-AA2-AA3-leucina, en donde AA1 es A, S, V, E, G, L o K, AA2 es , V o E; y AA3 es V, S, F, K, A, E o T.
12. Una composición para inducir una respuesta inmune a un agente infeccioso o antígeno tumoral que comprende al menos un antígeno híbrido de la reivindicación 11.
13. Una composición para inducir una respuesta inmune a un agente infeccioso o antígeno tumoral, que comprende un grupo de al menos una proteína de choque térmico y al menos un antígeno híbrido de la reivindicación 11.
14. La composición de la reivindicación 13, en donde la proteína de choque térmico es un hsp70.
15. Un método para inducir una respuesta inmune a un agente infeccioso o un antígeno tumoral, que comprende administrar a un sujeto al menos un antígeno híbrido de la reivindicación 11.
16. Un método para inducir una respuesta inmune a un agente infeccioso o antígeno tumoral, que comprende administrar a un sujeto un compuesto de: (a) un antígeno híbrido de la reivindicación 11; y (b) una proteína de choque térmico; en donde el antígeno híbrido y la proteina de choque térmico no se unen covalen emente .
17. El método de la reivindicación 16, en donde la proteína de choque térmico es un hsp70.
18. Un método para tratar una enfermedad infecciosa o cáncer, que comprende administrar a un sujeto al menos un antígeno híbrido de la reivindicación 11, en donde al menos un dominio antigénico es a partir la enfermedad infecciosa o cáncer .
19. Un método para tratar una enfermedad infecciosa o cáncer, que comprende administrar a un sujeto un compuesto de : (a) un antígeno híbrido de la reivindicación 1, en donde al menos un dominio antigénico es a partir de la enfermedad infecciosa o cáncer; y (b) una proteína de choque térmico; en donde el antígeno híbrido y la proteína de choque térmico no se unen covalentemente .
20. El método de la reivindicación 19, en donde la proteína de choque térmico es un hsp70.
21. Un péptido que es Phe Phe Arg Lys (FFRK; SEC . DE IDENT. NO.: 1000), Phe Arg Lys (FRK) ; Phe Arg Lys Asn (FR N, SEC. DE IDENT. NO.: 1002); Arg Lys Asn (RKN) ; Phe Phe Arg Lys Asn (FFR N, SEC. DE IDENT. NO.: 1003); Phe Arg (FR) , Gln Leu Lys (QLK) , Gln Leu Glu (QLE) , Ala Lys Val Leu (AKVL; SEC. DE IDENT. NO.: 1001); Lys Asn (KN) ; Arg Lys (R ) ; y AA1-AA2-AA3-leucina, en donde AA1 es A, S, V, E, G, L o K, AA2 es K, V O E; y AA3 es V, S, F, K, A, E O T.