RS51354B - Oksa-i tijadijazoli i njihova upotreba kao inhibitora metalo proteinaze - Google Patents

Description

Ovaj pronalazak se odnosi na terapijski aktivne derivate hidroksiaminske i karboksilne kiseline, na procese njihove pripreme, na farmaceutske sastave koji ih sadrže, kao i na upotrebu takvih jedinjenja u medicini. Preciznije, ta jedinjenja su inhibitori matričnih metaloproteinaza.

Istorijat pronalaska

Matrične metaloproteinaze (MMP) predstavljaju porodicu endopeptidaza, koje sadrže cink, koje mogu da cepaju velike biomolekule kao što su kolageni, proteoglikani i želatini. Disbalans između aktivnih MMP i endogenih inhibitora, dovodi do prekomerne disrupcije tkiva. Tri osnovne grupe MMP su kolagenaze, želatinaze i stromelizini. Kolagenaze uključuju fibroblastnu kolagenazu (MMP-1), neutrofilnu kolagenazu (MMP-8), i kolagenazu 3 (MMP-13). Želatinaze obuhvataju želatinazu 72 kDa (želatinazu A; MMP-2) i želatinazu 92 kDa (želatinazu B; MMP-9). Stromelizini obuhvataju stromelizin 1 (MMP-3), stromelizin 2 (MMP-10) i matrilizin (MMP-7). Međutim, postoje MMP koji se ne uklapaju u potpunosti u gore navedene grupe, na primer metaloelastaza (MMP-12), MMP membranskog tipa (MT-MMP ili MMP-14) i stromelizin 3 (MMP-11).

Prekomerna ekspresija i aktivacija MMP povezana je sa širokim spektrom bolesti kao što su karcinom; reumatoidni artritis; osteoartritis; hronični inflamatorni poremećaji, kao što su astma, bronhitis i emfizem;

kardiovaskularni poremećaji, kao što su ateroskleroza; ulceracija kornee;

zubne bolesti kao što su gingivitis i periodontalna bolest; neurološki poremećaji, kao što su multipla skleroza i restenoza. Na primer, MMP-12 je potreban za razvoj emfizema izazvanog dimom cigareta kod miševa, Science, 277, 2002 (1997). Inhibicija MMP stoga predstavlja strategiju za lečenje

takvih bolesnih stanja. Međutim, postoje dokazi da neselektivna inhibicija aktivnosti matrične metaloproteinaze može da utiče na normalni fiziološki proces i dovede do nuz pojava koje ograničavaju dozu. Selektivna inhibicija MMP-12 i/ili MMP-9 je kako se smatra, posebno relevantna strategija za intervenciju kod inflamatornih stanja.

MMP mogu da hidrolizuju prekursori proinflamatornog citokinskog faktora tumorske nekroze koji je vezan za membranu (TNF-a). Ovo cepanje daje zeli rastvorljivi TNF-a a inhibitori MMP mogu da blokiraju proizvodnju TNF-a kako in vitro tako i in vivo. Ovo farmakološko dejstvo verovatno doprinosi anti-inflammatornom delovanju ove klase jedinjenja.

Radi najnovijeg pregleda inhibicije MMP inhibicija koja je korišćena u patentnoj literaturi videti Dohertv et. Al. Therapeutic Developments in Matrix Metalloproteinase Inhibition; Expert Opinions on Therapeutic Patents, 2002, 12, 665-707.

Kratak opis pronalaska

Ovaj pronalazak obezbeđuje jednu klasu jedinjenja koja su inhibitori MMP . Ta klasa obuhvata jedinjenja koja su selektivni inhibitori MMP-12 u zavisnosti od kolagenaze i stromelizina. Osim toga, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da ispolje selektivnu aktivnost prema MMP-9. Jedinjenja iz ovog pronalaska su stoga indikovana za lečenje bolesti primarno posredovane MMP-9 i/ili MMP-12, posebno inflamatornih stanja kao što su multipla skleroza i fibroza.

Detaljni opis<p>ronalaska

Prema ovom pronalasku data je formula jedinjenja (IA ili (IB))

naznačena time da

W predstavlja HO(C=0)-, HONH(C=0)- ili H(C=0)N(OH)-;

X predstavlja -O- ili -S-;

Ripredstavlja

vodonik;

-OH ili -SH; fluoro ili hloro; -CF3; (CrC6)alkil; (CrC6)alkoksi; (C2-C6)alkenil; fenil ili supstitucionisani fenil; fenil (C1-C6)alkil ili supstitucionisani fenil(CrC6)alkil; fenil (C2-C6)alkenil ili supstitucionisani fenil(C2-C6)alkenil heterociklil ili supstitucionisani heterociklil; heterociklil(CrC6)alkil ili supstitucionisani heterociklil(Ci-C6)alkil; grupa BSOnA- naznačena time da je n jednako 0, 1 ili 2 a B je vodonik ili (Ci-Ce) alkil, fenil, supstitucionisani fenil, heterociklil supstitucionisani heterociklil, (Ci-C6)acil, fenacil ili supstitucionisana fenacil- grupa, dok A predstavlja (Ci-Ce) alkilen; -NH2) (CrC6)alkilamino ili di(CrC6)alkilamino;

amino(Ci-Ce)alkil, (CrC6)alkilamino(Ci-C6)alkil, di(Cr C6)alkilamino(Ci-C6)alkil, hidroksi(CrC6)alkil, perkapto(Ci-C6)alkil ili karboksi(CrC6) alkil što je naznačeno time da su amino-, hidroksi-, merkapto- ili karboksilna grupa opciono zaštićene ili je karboksilna grupa amidirana; ili

je cikloalkilni, cikloalkenilni ili nearomatični heterociklični prsten koji sadrži najviše 3 heteroatoma, od kojih bilo koji može biti (i) supstitucionisan jednom ili više supstituenata odabranih između CrC6alkil, C2-C6alkenil, halo, cijano (-CN), -C02H, -C02R, - CONH2, -CONHR, -CON(R)2, -OH, -OR, okso-, -SH, -SR, - NHCOR, i -NHC02R što je naznačeno time da R predstavlja Ci-Cealkil ili benzil i/ili (ii) fuzionisan za cikloalkilni ili heterociklični nrRtP»rv

R2predstavlja grupu Ri0-(X)n-(ALK)m- što je naznačeno time da

R10predstavlja vodonik, ili a CrC6 alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, cikloalkil, aril, ili heterociklilnu grupu, gde bilo koji od njih može biti nesupstitucionisan ili supstitucionisani sa (CrC^Jalkil, (CrCi2)alkoksi, hidroksi, merkapto, (CrCi2)alkiltio, amino, halo (uključujući fluoro, hloro, bromo i jodo), trifluorometil, cijano, nitro, okso, -COOH, -CONH2, -COORA, -NHCOR<A>, -CONHR<A>, - NHR<A>, -NR<A>R<B>, ili -CONR<A>R<B>što je naznačeno time da suR<A>i R<B>nezavisno jedna (Ci-C6)alkilna grupa a

ALK predstavlja prav ili razgranat divalentni C1-C6alkilen, C2-C6alkenilen, ili C2-C6alkinilen radikal i on može biti prekinut jednom ili više -NH-, -O- ili -S- veza koje nisu susedne.

X predstavlja -NH-, -O-, -S-, -NR<C>ili -NCOR<c>što je naznačeno time da R<c>predstavlja (Ci-Ci2)alkilnu grupu a

m i n su nezavisno 0 ili 1;

R3predstavlja bočni lanac prirodne ili neprirodne alfa amino kiseline;

R4predstavlja opciono supstitucionisani

CrC6 alkil,

C2-C6alkenil,

C2-C6alkinil,

C1-C3perfluoroalkil,

cikloalkil,

cikloalkil(Ci-C6alkil)-,

cikloalkenil,

cikloalkenil(CrC6alkil)-,

fenil,

fenil(CrC6 alkil)-,

naftil,

ne-aril heterociklil,

ne-aril heterociklil(d-C6alkil)-,

heteroaril; ili

heteroaril(Ci-C6alkil)-;

i njihove farmaceutski prihvatljive soli hidrate i solvate.

U smislu u kom je ovde korišćen termin "(CrC6)alkil" označava ravan ili razgranat lanac alkilne grupe koji ima od 1 do 6 atoma ugljenika, uključujući na primer, metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izobutil, sec-butil, t-butil, n-pentil i n-heksil.

U smislu u kom je ovde korišćen termin "divalentni (Ci-C6)alkilen radikal" označava jedan zasićeni lanac ugljovodonika koji ima 1 do 6 atoma ugljenika i dve nezasićene valence.

U smislu u kom je ovde korišćen termin "(C2-C6)alkenil" označava ravan ili razgranat lanac alkenilne grupe koji ima od 2 do 6 atoma ugljenika i najmanje jednu dvostruku vezu E ili Z stereohemije gde je to relevantno. Ovaj termin uključuje, na primer, vinil, alil, 1- i 2-butenil i 2-metil-2-propenil.

U smislu u kom je ovde korišćen termin "divalentni (C2-Ce)alkenilen radikal" označava jedan lanac ugljovodonika koji ima od 2 do 6 atoma ugljenika, najmanje jednu dvostruku vezu, i dve nezasićene valence.

U smislu u kome je ovde korišćen termin "C2-C6alkinil" se odnosi na ravan lanac ili razgranati lanac ugljovodoničnih grupa koje imaju od dva do šest atoma ugljenika koji osim toga ima i jednu trostruku vezu. Ovaj termin bi uključivao na primer, etinil, 1-propinil, 1- i 2-butinil, 2-metil-2-propinil, 2-pentinil, 3-pentinil, 4-pentinil, 2-heksinil, 3-heksinil, 4-heksinil i 5-heksinil.

U smislu u kom je ovde korišćen termin "divalentni (C2-C6)alkinilen radikal" označava jedan lanac ugljovodonika koji ima od 2 do 6 atoma ugljenika, najmanje jednu trostruku vezu i dve nezasićene valence.

U smislu u kom je ovde korišćen termin "cikloalkil" označava jednu zasićenu alicikličnu grupu koja ima od 3-8 atoma ugljenika i uključuje , na primer, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil i ciklooktil.

U smislu u kom je ovde korišćen termin "cikloalkenil" označava jednu nezasićenu alicikličnu grupu koja ima od 3-8 atoma ugljenika i uključuje, na primer, ciklopropenil, ciklobutenil, ciklopentenil, cikloheksenil, cikloheptenil i ciklooktenil. U slučaju cikloalkenilnih prstenova sa 5-8 atoma ugljenika, taj prsten može da sadrži više od jedne dvostruke veze.

U smislu u kom je ovde korišćen termin "aril" se odnosi na mono-, bi- ili tri-cikličnu karbocikličnu aromatičnu grupu, i grupe koje se sastoje od dve kovalentno povezane monociklične karbociklične aromatične grupe. Ilustraciju za takve grupe predstavljaju fenil, bifenil i nafti!.

U smislu u kom je ovde korišćen nekvalifikovani termin "heterociklil" ili "heterocikličan" uključuje "heteroaril" kako je dole definisan, a posebno označava aromatičan ili ne-aromatičan heterocikličan prsten sa 5-8 članova koji sadrži jedan ili više heteroatoma odabranih među S, N i O, i opciono fuzionisanih za benzil ili drugi heterocikličan prsten, a taj termin uključuje, na primer, pirolil, furil, tienil, piperidinil, imidazolil, oksazolil, tiazolil, tiadiazolil, tiazepinil, pirazolil, piridinil, pirolidinil, pirimidinil, morfolinil, piperazinil, indolil, i prstenove benzimidazolila.

U smislu u kom je ovde korišćen termin "heteroaril" se odnosi na aromatičan prsten sa 5- ili 6- članova koji sadrži jedan ili više heteroatoma, i opciono je fuzionisan za prsten benzila ili piridila; i za grupe koje se sastoje od dva kovalentno povezana aromatična prstena sa 5- ili 6- članova od kojih svaki sadrži jedan ili više heteroatoma; i za grupe koje se sastoje od jedne monociklične karbociklične aromatične grupe kovalentno povezane sa 5- ili 6-članim aromatičnim prstenovima koji sadrži jedan ili više heteroatoma. Takve grupe ilustruju tienil, furil, pirolil, imidazolil, benzimidazolil, tiazolil, pirazolil, izoksazolil, izotiazolil, triazolil, tiadiazolil, oksadiazolil, piridinil, piridazinil, pirimidinil, pirazinil, triazinil, 4-([1,2,3]-tiadiazoli-4-il)fenil i 5-izoksazol-3-iltienil.

U smislu u kom je ovde korišćen nekvalifikovani termin "karbociklil" ili "karbocikličan" se odnosi na 5-8 člani prsten kod koga svi atomi u prstenu predstavljaju ugljenik.

Ukoliko nije drugačije definisano u kontekstu u kome se pojavljuje, termin "supstitucionisani" koji se odnosi na bilo koju grupu koja se ovde pominje označava supstituciju sa najviše četiri supstituenta, od kojih svaki nezavisno može biti(CrC6)alkil, fenil, benzil, (Ci-C6)alkoksi, fenoksi, hidroksi, merkapto, (CrC6)alkiltio, amino, halo (uključujući fluoro, hloro, bromo ijodo), trifluorometil, cijano, nitro, okso, -COOH, -CONH2,-COR<A>, -COOR<A>, - NHCOR<A>, -CONHR<A>, -NHR<A>, -NR<A>R<B>, ili -CONR<A>R<B>što je naznačeno time da su R<A>i R<B>nezavisno (CrC6)alkilna grupa. U slučaju gde "supstitucionisani" označava supstituciju benzilom, taj fenilni prsten može sam da bude supstitucionisan bilo čime od gore navedenog, osim fenila ili benzila.

U smislu u kome su ovde korišćeni termini "bočni lanac prirodne alfa-amino kiseline" i "bočni lanac neprirodne alfa-amino kiseline" označava grupu R<x>u odgovarajućoj prirodnoj i neprirodnoj amino kiselini čija je formula NH2-CH(R<x>)-COOH.

Primeri za bočne lance prirodnih alfa amino kiselina uključuju one kod alanina, arginina, asparagina, asparaginske kiseline, cisteina, čistina, glutaminske kiseline , histidina, 5-hidroksilizina, 4-hidroksiprolina, izoleukina, leukina, lizina, metionina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, triptofana, tirozina, valina, a-aminoadipinske kiseline, a -amino-n-butirične kiseline, 3,4-dihidroksifenilalanina, homoserina, a -metilserina, ornitina, pipekolinske kiseline i tiroksina.

Kod prirodnih alfa-amino kiselina bočni lanci koji sadrže funkcionalne supstituente, na primer amino, karboksilne, hidroksilne, merkapto, gvanidil, imidazolil, ili indolil grupe kao što je to slučaj kod arginina, lizina, glutaminske kiseline, asparaginske kiseline, triptofana, histidina, serina, treonina, tirozina, i cisteina, takve funkcionalne supstituente mogu opciono biti zaštićene.

Isto tako, kod bočnih lanaca neprirodnih alfa amino kiselina koji sadrže funkcionalne supstituente, na primer amino, karboksil, hidroksi, merkapto, gvanidil, imidazolil, ili indolil grupe, takve funkcionalne supstituente mogu opciono biti zaštićene.

Termin "zaštićena" kada se koristi u vezi sa funkcionalnim substituentima u bočnom lancu prirodne ili neprirodne alfa-amino kiseline označava derivat takvog supstituenta koji supstancijalno nije funkcionalan. Široko korišćen udžbenik koji su napisali T. W. Greene i P. G. Wuts "Zaštitne grupe kod organske sinteze" drugo izdanje, Wiley, New York, 1991 razmatra ovu temu. Na primer, karboksilne grupe se mogu esterifikovati (na primer u vidu CrC6alkil estra), amino grupe se mogu pretvoriti u amid (na primer kao NHCOCr C6alkil amid) ili karbamat (na primer kao NHC(=0)OCi-C6alkil ili NHC(=0)OCH2Ph karbamat), hidroksilne grupe se mogu pretvoriti u etre (na primer OC1-C6alkil ili 0(Ci-C6alkil)fenil etar) ili estre (na primer OC(=0)Ci-C6alkil ester) a tiolne grupe se mogu konvertovati u tioetre (na primer tert-butil ili benzil tioetar) ili tioestre (na primer SC(=0)CrC6 alkil tioester).

Postoje najmanje dva aktuelna ili potencijalna hiralnog centra u ovim jedinjenjima prema ovom pronalasku zbog prisustva asimetričnih atoma ugljenika. Prisustvo nekoliko asimetričnih atoma ugljenika dovodi do nastanka jednog broja dijastereoizomera sa R ili S stereohemijom u svakom hiralnog centru. Ovaj pronalazak obuhvata sve takve dijastereoizomere i njihove mešavine. Trenutno je preferentna stereo konfiguracija atoma ugljenika koji nosi R2grupu R; ona koja pripada atomu ugljenika koji nosi R1grupu (kada su asimetrični) je R; dok je ona koja pripada atomu ugljenika koji nosi R3grupu (kada su asimetričnih) S.

Grupa Ri

Rimože biti, na primer,

vodonik, hidroksi, metil, metoksi, trifluorometil, etil, n-propil, alil fenilpropil, ciklopropilmetil, fenilprop-2-enil, tienilsulfanilmetil, tienilsulfinilmetil, ili tienilsulfonilmetil; ili

C1-C4alkil, npr. metil, etil n-propil ili n-butil, supstitucionisan sa ftalimido, 1,2-dimetil-3,5-diokso-1,2,4-triazolidin-4-il, 3-metil-2,5-diokso-1-imidazolidinil, 3,4,4-trimetil-2,5-diokso-1-imidazolidinil, 2-metil-3,5-diokso-1,2,4-oksadiazol-4-il, 3-metil-2,4,5-triokso-1-imidazolidinil, 2,5-diokso-3-fenil-1-imidazolidinil, 2-okso-1-pirolidinil, 2,5-diokso-1-pirolidinil ili 2,6-dioksopiperidinil, 5,5-dimetil-2,4-diokso-3-oksazolidinil, heksahidro-1,3-dioksopirazolo[1,2,a][1,2,4]-triazol-2-il, ili nafttalimido (tj.1,3-dihidro-1,3-diokso-2H-benz[f]izoindol-2-il), 1,3-dihidro-1-okso-2H-benz[f]izoindol-2-il, 1,3-dihidro-1,3-diokso-2H-pirolo[3,4-b]hinolin-2-il, ili 2,3-dihidro-1,3-diokso-1H-benz[d,e]izohinolin-2-il grupom; ili

cikloheksil, ciklooktil, cikloheptil, ciklopentil, ciklobutil, ciklopropil, tetrahidropiranil ili morfolinil.

Trenutno preferentneRigrupe obuhvataju vodonik, hidroksi, metoksi, ciklopentil, n-propil, i alil. Od njih su, vodonik, hidroksi, metoksi i alil trenutno preferentniji.

Grupa R?

R2može na primer da bude

C1-C12alkil, C3-C6alkenil ili C3-C6alkinil;

cikloalkil(Ci-C6alkil)-;

fenil(Ci-C6alkil)-, fenil(C3-C6alkenil)- ili fenil(C3-C6alkinil)- opciono supstitucionisani u fenilnom prstenu;

heteroaril(Ci-C6alkil)-, heteroaril(C3-C6alkenil)- ili heteroaril(C3-C6alkinil)- opciono supstitucionisani u heteroarilnom prstenu;

4-fenilfenil(CrC6alkil)-, 4-fenilfenil(C3-C6alkenil)-, 4-fenilfenil(C3-C6alkinil)-, 4-heteroarilfenil(CrC6alkil)-, 4-heteroarilfenil(C3-C6alkenil)-, 4-heteroarilfenil(C3-C6alkinil)-, opciono supstitucionisani u terminalnom fenilnom ili heteroarilnom prstenu;

fenoksi(Ci-C6alkil)- ili heteroariloksi(Ci-C6alkil)- opciono supstitucionisani u fenilnom ili heteroarilnom prstenu;

Specifični primeri takvih grupa uključuju metil, etil, n- ili izo-propil, n-, izo- ili tert-butil, n-pentil, n-heksil, n-heptil, n-nonil, n-decil, prop-2-in-1-il, cikloheksiletil, ciklopentilmetil, 3-fenilprop-2-in-1-il, 3-(2-hlorofenil)prop-2-in-1-il, benzil fenilpropil, 4-hlorofenilpropil, 4-metilfenilpropil, 4-metoksifenilpropil, fenoksibutil, 3-(4-piridilfenil)propil-, 3-(4-(4-piridil)fenil)prop-2-in-1-il, 3-(4-fenilfenil)propil-, 3-(4-fenil)fenil)prop-2-in-1-il i 3-[(4-hlorofenil)fenil]propil-.

Trenutno preferentneR2grupe uključuju benzil, n-butil, izo-butil, n-heksil, etoksifenilpropil, preferentno 4-etoksifenilpropil i ciklopentilmetil. Od njih su, izobutil i etoksifenilpropil, posebno 4-etoksifenilpropil, trenutno preferentniji.

Grupa R3

R3može na primer da bude C1-C6alkil, fenil, 2,- 3-, ili 4-piridil, 2- ili 3-tienil,

2,- 3-, ili 4-hidroksifenil, 2,- 3-, ili 4-metoksifenil, 2,- 3-, ili 4-piridilmetil, benzil, 2,- 3-, ili 4-hidroksibenzil, 2,- 3-, ili 4-benziloksibenzil, 2,- 3-, ili 4-Ci-C6 alkoksibenzil, ili benziloksi(Ci-C6alkil)-.; ili

karakteristična grupa prirodne a~-amino kiseline, kod koje se svaka funkcionalna grupa može zaštititi, svaka amino grupa može acilirati a svaka karboksilna grupa koja je prisutna može amidirati; ili

grupa -[Alk]nR6gde je Alk (Ci-C6)alkil ili (C2-C6)alkenil grupa opciono prekinuta jednim ili više -O-, ili -S- atoma ili -N(R7)- grupa [gde je R7atom vodonika ili (Ci-C6)alkilna grupa], n je 0 ili 1, aR6je jedna opciono supstitucionisana cikloalkilna ili cikloalkenilna grupa; ili

benzilna grupa supstitucionisana u fenilnom prstenu grupom čija je formula

-OCH2COR8gde je R8hidroksil, amino, (Ci-C6)alkoksi, fenil(Cr C6)alkoksi, (Ci-C6)alkilamino, di((Ci-C6)alkil)amino, fenil(d-C6)alkilamino, ostatak amino kiseline ili kiseli halid, ester ili njihov amidni derivat a pomenuti ostatak je povezan preko jedne amidne veze, pomenuta amino kiselina je odabrana između glicina, □ ili □ alanina, valina, leukina, izoleukina, fenilalanina, tirozina, triptofana, serina, treonina, cisteina, metionina, asparagina, glutamina, lizina, histidina, arginina, glutaminske kiseline i asparaginske kiseline; ili

heterociklična (CrC6)alkilna grupa, koja je nesupstitucionisana ili mono- ili di-supstitucionisana u heterocikličnom prsten sa halo, nitro, karboksi, (Ci-C6)alkoksi, cijano, (d-C6)alkanoil, trifluorometil (Ci-C6)alkil, hidroksi, formil, amino, (Ci-C6)alkilamino, di-(Ci-C6)alkilamino, perkapto, (Ci-C6)alkiltio, hidroksi(Ci-C6)alkil, perkapto(C-i-C6)alki! ili (Ci-C6)alkilfenilmetilom; ili

grupa -CRaRbRckod koje je:

svaki od Ra, Rbi Rcnezavisno vodonik, (Ci-C6)alkil, (C2-C6)alkenil, (C2-C6)alkinil, fenil(Ci-C6)alkil, (C3-C8)cikloalkil; ili

Rcje vodonik a Rai Rbsu nezavisno fenil ili heteroaril kao što je piridil; ili

Rcje vodonik, (Ci-C6)alkil, (C2-C6)alkenil, (C2-C6)alkinil, fenil(d-C6)alkil, ili (C3-C8)cikloalkil, a Rai Rbzajedno sa atomom ugljenika sa kojim su spojeni formiraju cikloalkil sa 3 do 8 članova ili heterocikličan prsten sa 5- do 6-članova; ili

Ra, Rbi Rczajedno sa atomom ugljenika sa kojim su spojeni formiraju tricikličan prsten (na primer adamantil); ili

Rai Rbsu svaki ponaosob nezavisno (Ci-C6)alkil, (C2-C6)alkenil, (C2-C6)alkinil, fenil(CrC6)alkil, ili grupa kako je definisano za Rcdole izuzimajući vodonik, ili Rai Rbzajedno sa atomom ugljenika sa kojim su spojeni formiraju cikloalkilni ili heterocikličan prsten, a Rc je vodonik, -OH, -SH, halogen, -CN, -C02H, (d-C4)perfluoroalkil, -CH2OH, -C02(C1-C6)alkil, -©(d-CeJalkil, - 0(C2-C6)alkenil, -S(Ci-C6)alkil, -SO(C1-C6)alkil, -S02(d-C6) alkil, -S(C2-C6)alkenil, -SO(C2-C6)alkenil, -S02(C2-C6)alkenil ili grupa -Q-W što je naznačeno time da Q predstavlja vezu ili -O-, -S-, -SO- ili -S02- a W predstavlja fenilnu, fenilalkilnu, (C3-C8)cikloalkilnu, (C3-C8)cikloalkilalkilnu, (C4-C8)cikloalkenilnu, (C4-C8)cikloalkenilalkilnu, heteroarilnu ili heteroarilalkilnu grupu, gde grupa VV može opciono biti supstitucionisana jednim ili više supstituenata nezavisno odabranih od sledećih: hidroksil, halogen, -CN, -C02H, -C02(d-C6)alkil, -CONH2, -CONH(d-C6)alkil, -CONH(C1-C6alkil)2, -CHO, -CH2OH, (d-C4)perfluoroalkil, -0(Ci-C6)alkil, -S(Ci-C6)alkil, -SO(Ci-C6)alkil, - S02(Ci-C6)alkil, -N02, -NH2, -NH(CrC6)alkil, -N((Ci-C6)alkil)2, - NHCO(CrC6)alkil, (Ci-C6)alkil, (C2-C6)alkenil, (C2-C6)alkinil, (C3-C8)cikloalkil, (C4-C8)cikloalkenil, fenil ili benzil.

Primeri određene R3grupe uključuju benzil, fenil, cikloheksilmetil, piridin-3-ilmetil, tert-butoksimetil, izo-propil, izo-butil, sec-butil, tert-butil, 1-benziltio-1-metiletil, 1 -metiltio-1 -metiletil, i 1-perkapto-1-metiletil.

Trenutno preferentne R3grupe uključuju fenil, benzil, tert-butoksimetil, izo-propil, tert-butil i izo-butil. Od njih, tert-butil i benzil su trenutno preferentniji.

Grupa Ra

Ramože biti, na primer, (d-C6)alkil kao što su metil, etil, n- ili izo-propil, prop-2-il, i tert-butil; (C3-C8)cikloalkil kao što su ciklopropil ili ciklopentil; fenil; fenil(d-C6alkil)- kao što su benzil; heteroaril(d-C6alkil)- kao što su tienilmetil; monocikličan heterocikličan kao što su morfolino; ili monocikličan heteroaril kao što su tienil ili furanil. Bilo koji od gore navedenih se može opciono supstitucionisati, na primer sa metil, trifluorometil, hidroksi, perkapto, amino ili karboksi.

Kako je gore pomenuto, ova jedinjenja su korisna u humanoj ili veterinarskoj medicini obzirom da su ona aktivna kao inhibitori MMP . Shodno tome, drugi aspekt ovog pronalaska se odnosi na: (i) metodu za zbrinjavanje (pod čime se podrazumeva lečenje ili profilaksa) bolesti ili stanja koja su posredovana sa MMP kod sisara, posebno kod ljudi, a ta metoda podrazumeva primenu efektivne doze jedinjenja koje je član grupe koja je gore definisana, ili neke njegove farmaceutski prihvatljive soli i (ii) jedinjenje koje je član grupe koja je gore definisana, za upotrebu u humanoj ili veterinarskoj medicini, posebno u zbrinjavanju (pod čime se podrazumeva lečenje ili profilaksa) bolesti ili stanja koja su posredovana sa MMP; i (iii) upotrebu jedinjenja koje je član grupe koja je gore definisana u pripremi agensa za zbrinjavanje (pod čime se podrazumeva lečenje ili profilaksa) bolesti ili stanja koja su posredovana sa MMP .

Bolesti ili stanja koja su posredovana sa MMP uključuju one koji podrazumevaju dezintegraciju tkiva kao što su resorpcija kosti, inflamatorne bolesti, dermatološka stanja i tumorski rast ili invaziju sekundarnim metastazama; posebno reumatoidni artritis, osteoartritis, periodontitis, gingivitis, kornealnu ulceraciju, neuroinflamatorne poremećaje, uključujući one koji podrazumevaju degradaciju mijelina, kao što su na primer multipla skleroza; restenoza, emfizem, bronhitis i astma.

U daljem razmatranju ovog pronalaska dat je farmaceutski ili veterinarski sastav koji čini jedinjenje koje je član grupe koja je gore definisana zajedno sa farmaceutski ili veterinarski prihvatljivim ekscipijentom ili nosačem.

Treba shvatiti da će specifični nivo doze za svakog pacijenta zavisiti od različitih faktora uključujući aktivnost specifičnog jedinjenja koje je korišćeno, starosti, težine, opšteg zdravstvenog stanja, pola, ishrane, vremena primene, načina primene, kombinacije lekova i težine određene bolesti koja se leči.. Optimalni nivoi doza i učestalost doziranja će se odrediti na osnovu kliničke studije.

Jedinjenja kojima se bavi ovaj pronalazak se mogu pripremiti za administraciju bilo kojim putem koji je u skladu sa njihovim farmakokinetičkim svojstvima. Formulacije koje se mogu davati oralnim putem mogu biti u obliku

tableta, kapsula, praška, granula, dražeja, preparata u vidu tečnosti ili gela,

kao što su oralni, lokalni ili sterilni parenteralni rastvori ili suspenzije. Tablete i kapsule za oralnu administraciju mogu biti u formulacijama pakovanim u vidu jediničnih doza i one mogu da sadrže uobičajene ekscipijente kao što su agensi za vezivanje, na primer sirup, akacija, želatin, sorbitol, tragakant, ili polivinil-pirolidon; punjače na primer laktozu, šećer, kukuruzni škrob, kalcijum fosfat, sorbitol ili glicin; lubrikant za tabletiranje, na primer magnezijum stearat, talk, polietilen glikol ili silicijum; dezintegrante na primer krompirov škrob ili prihvatljive agense za vlaženje kao što su natrijum lauril sulfat.

Tableta može biti obmotana prema metodama koje su dobro poznate u normalnoj farmaceutskoj praksi. Oralni tečni preparati mogu biti u obliku, na primer, vodenih ili uljanih suspenzija, rastvora, emulzija, sirupa ili eliksira, ili mogu biti pakovani u vodu suvih proizvoda za rekonstituciju sa vodom ili drugim pogodnim nosačem pre upotrebe. Takvi tečni preparati mogu da sadrže uobičajene aditive kao što su agensi za suspenziju, na primer sorbitol, sirup, metil celuloza, glukozni sirup, želatin, hidrogenizovane jestive masti; emulgatori, na primer lecitin, sorbitan monooleat ili akacija; ne-vodene nosače (koji mogu da uključuju jestiva ulja), na primer bademovo ulje, frakcionisano kokosovo ulje, uljane estre kao što su glicerin, propilen glicol ili etil alkohol;

konzervanse, na primer metil ili propil p-hidroksibenzoat ili sorbinsku kiselinu a ukoliko je poželjno uobičajene agense za aromu i boju. Za lokalnu primenu na koži, lek može biti napravljen u vidu kreme, losiona ili masti. Formulacije u vidu kreme ili masti koje se mogu koristiti kod ovog leka su uobičajene formulacije koje su dobro poznate u ovoj stručnoj oblasti, na primer kako je opisano u standardnim farmaceutskim udžbenicima kao što je Britanska Farmakopeja.

Za lokalnu primenu na oko, ovaj lek može biti napravljen u vidu rastvora ili suspenzije u pogodnom vodenom ili ne-vodenom ekscipijentu. Aditivi, na primer puferi kao što u natrijum metabisulfit ili dinatrijum edeat; konzervansi uključujući baktericidne i fungicidne agense kao što su fenil merkuriacetat ili nitrat, benzalkonium hlorid ili hlorheksidin i agensi za zgušnjavanje kao što su hipromeloza takođe mogu da budu uključeni.

Aktivni sastojak se takođe može davati parenteralno u sterilnom medijumu. U zavisnosti od nosača i korišćene koncentracija, ovaj lek se može suspendovati ili razblažiti u nosaču. Pogodno je to što se adjuvanti kao što su lokalni anestetici, konzervansi i puferi mogu rastvoriti u nosaču.

Jedinjenje prema ovom pronalasku u kojima je W hidroksaminska kiselina grupe HONH(C=0)- može se pripremiti od odgovarajućih jedinjenja iz ovog pronalaska kod kojih je W karboksilna grupa -COOH ili od odgovarajućih derivata zaštićene hidroksaminske kiseline. Taj proces, koji predstavlja još jedan aspekt ovog pronalaska podrazumeva dobijanje kiseline čija je opšta formula (IIA) ili (IIB) ili nekog njenog aktiviranog derivata koji će stupati u reakciju sa hidroksilaminom, O-zaštićenim hidroksilaminom, ili N,0-dizaštićenim hidroksilaminom ili njihovim solima X, R-i, R2lR3, i R4kako je definisano u opštoj formuli (IA) ili (IB) osim što bilo koji od supstituenata u R1fR2, R3, i R4koji su potencijalno reaktivni sa hidroksilaminom, O-zaštićenim hidroksilaminom, N,0-dizaštićenim hidroksilaminom ili njihovim solima mogu sami biti zaštićeni od takve reakcije, a tada se uklanja svaka zaštitna grupa sa dobijene hidroksaminske kiseline kao i sa svih zaštićenih supstituenata u Ri, R2, R3, i R4.

Konverzija (IIA) ili (IIB) u aktivirane derivate kao što su pentafluorofenil, hidroksisukcinil ili hidroksibenzotriazolil ester može se postići reakcijom sa odgovarajućim alkoholom u prisustvu agenasa za dehidraciju kao što su dicikloheksil dikarbodiimid (DCC), N,N-dimetilaminopropil-N-etil karbodiimid (EDC), ili 2-etoksi-1-etoksikarbonil-1,2-dihidrohinolin (EEDQ).

Zaštitne grupe koje su gore pomenute su same po sebi dobro poznate, na primer iz tehnika hernije peptida. Amino grupe se često mogu zaštititi benziloksikarbonilom, t-butoksikarbonilom ili acetilnim grupama ili u vidu ftalimido- grupa. Hidroksi grupe se često mogu zaštititi u vidu etara koji se lako cepaju kao što su t-butil ili benzil etar ili u vidu estra koji se lako čepa kao što je acetat. Karboksi grupe se često mogu zaštititi ko estri koji se lako cepaju, kao što su the t-butil ili benzil ester.

Primeri O-zaštićenih hidroksilamina za upotrebu u metodi (a) gore uključuju O-benzilhidroksilamin, O-4-metoksibenzilhidroksilamin, O-trimetilsililhidroksilamin, i O-tert-butoksikarbonilhidroksilamin.

Primeri 0,N-dizaštićenih hidroksilamina za upotrebu u metodi (a) gore uključuju NtO-bis(benzil)hidroksilamin, N,0-bis(4-metoksibenzil) hidroksilamin, N-tert-butoksikarbonil-O-tert-butildimetilsililhidroksilamin, N-tert-butoksikarbonil-O-tetrahidropiranilhidroksilamin, i N,0-bis(tert-butoksikarbonil)hidroksilamin.

Jedinjenja iz ovog pronalaska što je naznačeno time da je W predstavlja jedna N-formilhidroksilamino grupa H(C=0)NH(OH)- mogu se pripremiti N-formilacijom odgovarajućeg O-zaštićenog jedinjenja kod koga je W-NH(OH),

i potom uklanjanjem O-zaštitne grupe.

Jedinjenja prema ovom pronalasku kod kojih je W karboksilna kiselina grupe - COOH, tj. jedinjenja formule (IIA) ili (IIB) gore, mogu se pripremiti uz pomoć procesa koji obuhvata: sparivanje kiseline formule (III) ili nekog njenog aktiviranog derivata

sa aminom čija je formula (IVA) ili (IVB)

što je naznačeno time da se X, RiR2, R3, i R4u skladu sa onim kako je definisano u opštoj formuli (IA) i (IB) osim što svaki supstituent u Ri, R2, R3, i

Pmkoji su potencijalno reaktivni u reakciji sparivanja mogu sami da budu zaštićeni od takve reakcije a Rn predstavlja hidroksi-zaštitnu grupu, uz naknadno uklanjanje zaštitne grupe Rni bilo koje zaštitne grupe od Ri R2, R3, i R4.

Aktivni derivati kiselina(lll) uključuju aktivirane estre kao što su pentafluorofenil ester, kiseli anhidridi i kiseli halidi, npr. hloridi. Pogodna hidroksi-zaštitna grupa može biti odabrana među onima koje su poznate u ovoj stručnoj oblasti.

Jedinjenja formule (IVA) i (IVB) mogu se pripremiti metodama koje su analogne opštim metodama za formiranje prstena oksadiazola koje su ilustrovane u Shemama 1 i 2 u Primerima 1 i 2 dole.

Naredni preparativni Primeri opisuju pripremu jedinjenja koje je korisno u skladu sa ovim pronalaskom.

U primerima su korišćene sledeće skraćenice

DCM - Dihlorometan

DMF - N,N-Dimetilformamid

HOBT - 1-Hidroksibenzotriazole

Pfp - Pentafluorofenol

WSCDI - N-(3-Dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid

HCI - Hlorovodonična kiselina

THF - Tetrahidrofuran

TFA - Trifluorosirćetna kiselina

P(0-Tol)3- Tri-O-tolilfosfin

AcOEt - Etil acetate

CH3CN - Acetonitril

Primer 1 3R-[2,2-Dimetil-1S-(5-fenil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-propilkarbamoil]-2S-hidroksi-5-metil-heksanohidroksaminska kiselina.

Reagents and conditions. A. HOBT, WSC, NH3, DMF. B. POCI3, pvridine. C. Aq.NH2OH,ethanol, 70°C.

D. RCOCI, DMAP, pyridine, DMF, 100°C. E. HBr/acetic acid. F. chiral succinate, DMF.

G. Aq.NH2OH, methanol. H. Pfp, WSC, DMF. I. 1M HCI, THF.

Primer 1 je pripremljena kako je prikazano u shemi 1 uz pomoć postupaka koji su dole opisani.

Korak A. (1S-karbamoil-2,2-dimetil-propil)-benzil estar karbaminske kiseline

N-benziloksikarbonil-L-fe/t-butilglicin (50g, 189mmol) je rastvoren u DMF (500mL) i ohlađen u ledeno hladnom vodenom kupatilu pre dodavanja HOBT (28.05g, 208mmol) i VVSCDI (39.8g, 208mmol). Reakcija je mešana na 0°C tokom 1 sata pre dodavanja 0.880 rastvora amonijaka (21 ml, 377mmol). Reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je tokom 18 sati. DMF je uklonjen pod smanjenim pritiskom a ostatak je podeljen na etil acetat i 1M HCI. Organski sloj je odvojen i ispran sa 1M HCI, zasićenim vodenim rastvorom naterijum bikarbonata i slanim rastvorom pre sušenja preko magnezijum sulfata, filtriranja i koncentrisanja pod smanjenim pritiskom kako bi se dobio benzil ester (1S-karbamolil-2,2-dimetil-propil)-karbaminske kiseline u vidu bele solidne materije (44.1g, 89%). 1H-NMR; delta (CDCI3), 7.32 (5H, m), 6.05 (1H, bs), 5.71 (1H, bs), 5.60 (1H, d, J = 6.5Hz), 5.08 (2H, s), 4.01 (1H, d, J = 6.5Hz) i 1.00 (9H, s).

LRMS; +ve jon 265 (M+H), 287 (M+Na).

Korak B. (1S-cijano-2,2-dimetil-propil)- benzil ester karbaminske kiseline

(1S-karbamolil-2,2-dimetil-propil)-benzil estar karbaminske kiseline (44.1g, 167mmol) je rastvoren u bezvodnom piridinu (203ml, 2.5mol) u inertnoj atmosferi i ohlađen u ledeno hladnom vodenom kupatilu . Fosfor oksihlorid (21.8ml, 234mmol) je lagano dodavan tokom 15 minuta a reakcija je ostavljena da se izmeša u ledeno-hladnom vodenom kupatilu tokom 2 sata pre zagrevanja do sobne temperature i mešana je tokom 12 sati. Reakciona mešavina je tretirana ledenom vodom(400ml) i ekstrahovana etil acetatom (2 x 300ml). Organski sloj je odvojen i ispran sa 1M HCI, zasićenim vodenim rastvorom naterijum bikarbonata i slanim rastvorom pre sušenja preko magnezijum sulfata, filtriranja i koncentrisanja pod smanjenim pritiskom . Hromatografija sa kolonom na silikagelu uz korišćenje etil acetata/heksana

kao eluenta dovodi do izolacije željenog proizvoda u vidu narandžastog ulja (36.72g, 89%).

1H-NMR; delta (CDCI3), 7.42 (5H, m), 5.28 (2H, m), 4.55 (2H, d, J = 6.5Hz) i 1.11 (9H, s),

LRMS; +ve jon 269 (M+Na), 247.2 (M+H),

Korak C. [1S-(N-hidroksikarbamimidoil)-2,2-dimetil-propil]- benzil ester karbaminske kiseline

(1S-cijano-2,2-dimetil-propil)- benzil ester karbaminske kiseline (37.60g, 153mmol) je rastvoren u etanolu (300ml) i tretiran kap po kap sa 50% vodenim hidroksilaminom (51ml, 764mmol). Reakcija je zagrevana do refluksa i mešana tokom 3 sata. Reakcija je potom ohlađena i koncentrisana pod smanjenim pritiskom kako bi se dobio željeni proizvod u vidu bele pene/gume (41.5g, 97%).

1H-NMR; delta (CDCI3), 7.32 (5H, m), 6.21 (1H, bs), 5.95 (1H, bs), 5.81 (1H, d, J = 6.4Hz), 5.08 (2H, m), 4.79 (1H, bs), 4.05 (1H, d, J = 6.5Hz) i 0.95 (9H, s).

LRMS; +ve jon 279.8 (M+H).

Korak D. [2,2-dimetil-1S-(5-fenil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-propil]-benzil estar karbaminske kiseline

[1S-(N-hidroksikarbamimidoil)-2,2-dimetil-propil]- benzil ester karbaminske kiseline (0.21 g, 0.75mmol) je rastvoren u DMF (5mL) i tretiran piridinom (0.1 ml, 1.28mmol), benzoil hloridom (0.13ml, 1.1mmol) i DMAP (katalitički). Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata pre zagrevanja na 100°C i mešana 16 sati. Reakcija je ponovo ohlađena do sobne temperature i koncentrisana pod smanjenim pritiskom . Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa 1M HCI, zasićenim vodenim rastvorom naterijum bikarbonata i slanim rastvorom pre sušenja preko magnezijum

sulfata, filtriranja i koncentrisanja pod smanjenim pritiskom . Željeni proizvod je izolovan u vidu narandžastog ulja (0.22g, 78%).

1H-NMR; delta (CDCI3), 8.12 (2H, m), 7.55 (3H, m), 7.32 (5H, m), 5.55 (1H, d, J = 6.4Hz), 5.12 (2H, m), 4.95 (1H, d, J = 6.5Hz) i 1.10 (9H, s).

LRMS; +vejon 366.2 (M+H), 388.2 (M+Na).

Korak E. 2,2-dimetil-1S-(5-fenil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-propilamin

[2,2-dimetil-1 S-(5-fenil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-propil]-benzil estar karbaminske kiseline (0.2g, 0.5mmol) je tretiran 48% bromovodoničnoj kiselini u sirćetnoj kiselini (10ml). Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata. Reakcija je koncentrisana pod smanjenim pritiskom i podeljena na

etil acetat i 1M Na2C03. Organski sloj je dalje ispiran sa 1M Na2C03i slanim rastvorom pre sušenja preko magnezijum sulfata, filtriranja i koncentrisanja pod smanjenim pritiskom . Proizvod je izolovan u vidu žutog ulja (0.13g, 98%).

LRMS; +vejon 232 (M+H).

Korak F. 2R-(2,2-Dimetil-5-okso-[1,3]dioksolan-4S-il)-4-metil-valerijanska kiselina [2,2-dimetil-1S-(5-fenil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-propil]-amid

2,2-dimetil-1S-(5-fenil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-propilamin (0.13g, 0.6mmol) je rastvoren u DMF (5ml) i ohlađen u ledeno hladnom vodenom kupatilu pre dodavanja 2R-(2,2-Dimetil-5S-okso-[1,3]dioksolan-4-il)-4-metil-pentafluorofenil ester valerijanske kiseline (0.22g, 0.6mmol). Reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je tokom 15 sati. DMF je uklonjen pod smanjenim pritiskom i reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa 1M HCI, zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i slanim rastvorom pre sušenja preko magnezijum sulfata, filtriranja i koncentrisanja pod smanjenim pritiskom . Hromatografija sa kolonom na silikagelu uz korišćenje etil acetata i heksana (1:1) dovodi do izolacije željenog proizvoda u vidu bele solidne materije (0.16g, 64%).

1H-NMR; delta (CDCI3), 8.12 (2H, m), 7.55 (3H, m), 6.65 (1H, d, J = 6.4Hz), 5.25 (1H, d, J = 6.5Hz), 4.55 (1H, d, J = 5.9Hz), 2.75 (1H, m), 1.64 (3H, s), 1.55 (3H, s), 1.04 (9H, s) i 0.88 (6H, m).

LRMS; +ve jon 444 (M+H).

Korak G. 3R-[2,2-Dimetil-1 S-(5-fenil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-propilkarbamoil]-2S-hidroksi-5-metil-heksanohidroksaminska kiselina

2R-(2,2-Dimetil-5S-okso-[1,3]dioksolan-4-il)-4-metil-valerijanske kiselina [2,2-dimetil-1S-(5-fenil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-propil]-amid (0.05g, 0.11mmol) je rastvoren u metanolu (2ml) i tretiran sa 50% vodenim hidroksilaminom (0.04ml, 0.5mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata pre uparavanja pod smanjenim pritiskom . Proizvod reakcije je odvojen preparativnom hromatografijom obrnute faze kako bi se dobio potreban proizvod u vidu bele solidne materije (0.02g, 44%).

1H-NMR; delta (CH30D), 8.13 (2H, m), 7.65 (1H, m), 7.58 (2H, m), 5.14 (1H, s), 4.01 (1H,d, J=7.1Hz), 2.94 (1H, m), 1.60 (1H, m), 1.45 (1H, m), 1.16 (1H, m), 1.07 (9H, s), 0.89 (3H, d, J = 6.5Hz) i 0.86 (3H, d, J = 6.6Hz). 13 C-NMR; delta (CH30D), 177.1, 176.3, 172.0, 171.6, 134.6, 130.8, 129.4, 125.7, 73.7, 55.8, 49.6, 39.7, 36.2, 27.4, 27.2, 24.2 i 22.5.

LRMS; +ve jon 419 (M+H); -ve jon 417 (M-H).

Korak H. 2R-(2,2-Dimetil-5-okso-[1,3]dioksolan-4S-il)-4-metil-valerijanska kiselina pentafluorofenil ester

2R-(2,2-Dimetil-5-okso-[1,3]dioksolan-4S-il)-4-metil-valerijanske kiselina (pripremljena prema WO 94/02447) (30g, 130mmol) je rastvoren u etil acetate (300ml) i tretiran sa pentafluorofenolom (28.8g, 156mmol) i VVSCDI (30g, 156mmol). Reakcija je zagrevana do refluksa tokom 2 sata i ostavljena da se izmeša na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Reakciona je isprana sa 1M Na2C03i slanim rastvorom pre sušenja preko magnezijum sulfata, filtriranja i koncentrisanja pod smanjenim pritiskom . Proizvod je

rekristalizovan iz etil acetata/heksana kako bi se dobio željeni proizvod kao pojedinačni dijastereomer (21.2g, 42%).

1H-NMR; delta (CDCI3), 4.55 (1H, d, J = 6.7Hz), 3.31 (1H, m), 1.85 (3H, bm), 1.65 (3H, s), 1.58 (3H, s), 1.05 (3H, d, J = 6.5Hz) i 0.99 (3H, d, J = 6.5Hz).

Takođe pripremljen, dijastereomer 3R-[2,2-dimetil-1S-(5-fenil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-propilkarbamoil]-2R-hidroksi-5-metil-heksanohidroksaminska kiselina.

M+H = 420.0, M+Na = 441.5, M-H = 417.5.

Odgovarajuća karboksilna kiselina je pripremljena kako je prikazano na Shemi 1 i donjem postupku.

Korak I. 3R-[1 S-(5-Furan-2-il-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propilkarbamoil]-2S-hidroksi-5-metil-kapronska kiselina

2R-(2,2-Dimetil-5S-okso-[1,3]dioksolan-4-il)-4-metil-valerijanske kiselina [2,2-dimetil-1S-(5- Furan-2-il-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-propil]-amid (0.05g, 0.12mmol) je rastvoren u tetrahidrofuranu (5ml) i ohlađen na 4 °C tokom dodavanja 1M hlorovodonične kiseline (5ml). Rastvor je ostavljen da se zagreje do sobne temperature i potom je mešan tokom 18 sati. Rasut rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom pre sušenja pod visokim vakumom u belu penu (0.045g, ca. quant).

1H-NMR; delta (CH30D), 7.88 (1H, s), 7.45 (1H, d, J = 3.6Hz), 6.74 (1H, m), 5.15 (1H, s), 4.18 (2H, d, J = 6.4Hz), 2.91 (1H, m), 1.65 (1H, m), 1.50 (1H, m), 1.31 (1H, m), 1.06(9H, s), 0.88 (3H, d, J = 6.4Hz) i 0.82 (3H, d, J = 6.5Hz). LRMS; -vejon 392.2 (M-H).

Primer 2

3R-[2,2-Dimetil-1S-(3-fenil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-propilkarbamoil]-2S-hidroksi-5-metil-heksanohidroksaminska kiselina

Reagentsand conditions. A. HOBT, WSCDI, DMF. B. Toluene, 100°C. C. Aq.NH2OH, ethanol, 70°C.

D. TFA, DCM. E. HOBT, WSCDI, DMF. F. Aq.NH2OH, methanol.

Primer 2 je pripremljena kako je prikazano u Shemi 2 uz pomoć postupaka koji su dole opisani.

Korak A. 2S-tert-Butoksikarbonilamino-3,3-dimetil-butirične kiseline benzotriazol-1-il ester

Rastvor N-terf-Butoksikarbonil-L-et/t-butil glicina (5g, 21.6mmol) u etil acetatu (80mL) je ohlađen u ledeno hladnom vodenom kupatilu. HOBT (3.22g, 23.8mmol) i VVSCDI (4.56g, 23.8mmol) su dodati i reakcija je ostavljena da se izmeša na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Reakciona mešavina je isprana sa 1M Na2C03i slanim rastvorom, pre sušenja preko magnezijum sulfata, filtriranja i koncentrisanja u belu penu (5.74g, 76%).

1H-NMR; delta (CDCI3), 8.05 (1H, m), 7.65 (2H, m), 7.41 (1H, m), 5.10 (1H, d, J = 6.7Hz), 4.45 (1H, d, J = 6.5Hz), 1.55 (9H, s) i 1.21 (9H, s).

LRMS; +ve jon 349 (M+H).

Korak B. [2,2-Dimetil-1S-(3-fenil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-propil]-karbaminska kiselina če/t-butil ester

2S-terf-Butoksikarbonilamino-3,3-dimetil-butirične kiseline benzotriazol-1-il ester (3.71g, 10.7mmol) je rastvoren u toluenu (80mL) i tretiran sa N-hidroksi-benzamidinom (2.9g, 21.3mmol). Reakciona mešavina je mešana na 110°C tokom 18 sati. Rastvor je koncentrisan pod smanjenim pritiskom i podeljen na etil acetate i 1M Na2C03. Organski sloj je dalje ispiran sa 1M Na2C03i slanim rastvorom pre sušenja preko magnezijum sulfata, filtriranja i koncentrisanja pod smanjenim pritiskom . Hromatografija sa kolonom na silikagelu uz korišćenje etil acetate i heksana (1:4) dovodi do izolacije željenog proizvoda (2.58g, 73%).

1H-NMR; delta (CDCI3), 8.10 (2H, m), 7.50 (3H, m), 5.30 (1H, bd), 4.95 (1H, d, J = 6.5Hz), 1.44 (9H, s) i 1.03 (9H, s).

LRMS; +vejon 354.2 (M+Na).

Korak C. N-hidroksi-benzamidin

Benzonitril (5g, 48mmol) je rastvoren u etanolu (100ml) i tretiran sa 50% vodenim hidroksilaminom (16ml, 242mmol). Reakcija je zagrevana do refluksa tokom 3 sata pre koncentrisanja pod smanjenim pritiskom kako bi dala bistru penu (4.5g, 68%).

LRMS; +vejon 137 (M+H).

Korak D. 2,2-Dimetil-1 S-(3-fenil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-propilamin

[2,2-Dimetil-1 S-(3-fenil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-propil]-karbaminska kiselinatert-butil ester (1g, 3.0mmol) je rastvoren u DCM (5ml) i tretiran sa TFA (5ml). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata. Reakcija je koncentrisana pod smanjenim pritiskom i podeljena na etil acetat i 1M Na2C03. Organski sloj je dalje ispiran sa 1M Na2C03i slanim rastvorom pre sušenja preko magnezijum sulfata, filtriranja i koncentrisanja pod smanjenim pritiskom kako bi dala željeni proizvod (0.65g, 93%).

1H-NMR; delta (CH30D), 8.10 (2H, m), 7.55 (3H, m), 4.81 (1H, s) i 1.19 (9H, s).

LRMS; +ve jon 232 (M+H).

Korak E. 2R-(2,2-Dimetil-5-okso-[1,3]dioksolan-4S-il)-4-metil-valerijanska kiselina-[2,2-dimetil-1S-(3-fenil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-propil]-amid

2R-(2,2-Dimetil-5-okso-[1,3]dioksolan-4S-il)-4-metil-valerijanske kiselina (0.27g, 1.17mmol) je rastvoren u DMF (5ml) i ohlađen u ledeno hladnom vodenom kupatilu pre dodavanja HOBT (0.17g, 1.29mmol) i VVSCDI (0.25g, 1.29mmol). Reakcija je mešana na 0°C tokom 1 sata pre dodavanja 2,2-Dimetil-1 S-(3-fenil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-propilamin (0.3g, 1.29mmol). Reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je tokom 18 sati. DMF je uklonjen pod smanjenim pritiskom a ostatak je podeljen na etil acetata i 1M HCI. Organski sloj je odvojeni ispran sa 1M HCI, zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i slanim rastvorom pre sušenja preko magnezijum sulfata, filtriranja i koncentrisanja pod smanjenim

pritiskom . Hromatografija sa kolonom na silikagelu uz korišćenje etil acetate i heksana (1:4) dovodi do izolacije željenog proizvoda (0.26g, 46%). 1H-NMR; delta (CDCI3), 8.10 (2H, m), 7.50 (3H, m), 6.80 (1H, d, J = 9.3Hz), 5.24 (1H, d, J = 9.3Hz), 4.55 (1H, d, J = 5.1Hz), 2.81 (1H, m), 1.63 (3H, s), 1.55 (3H, s), 0.92 (3H, d, J = 6.1Hz) i 0.89 (3H, d, J = 6.2Hz).

LRMS; +ve jon 444 (M+H).

Korak F. 3R-[2,2-Dimetil-1S-(3-fenil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-propilkarbamoil]-2S-hidroksi-5-metil-heksanohidroksaminska kiselina

2R-(2,2-Dimetil-5-okso-[1,3]dioksolan-4S-il)-4-metil-valerijanske kiselina [2,2-dimetil-1S-(3-fenil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-propil]-amid (0.26g, 0.6mmol) je rastvoren u metanolu (5ml) i tretiran sa 50% vodenim hidroksilamin (0.2ml, 2.95mmol). Reakcija mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata pre koncentrisanja pod smanjenim pritiskom. Proizvod je rekristalizovan iz etil acetata/heksana kako bi se dobio željeni proizvod (0.11g, 41%).

1H-NMR; delta(CH30D), 8.06 (2H, m), 7.53 (3H, m), 5.21 (1H, s), 4.01 (1H, d, J=7.5Hz), 2.99 (1H, m), 1.60 (1H, m), 1.50 (1H, m), 1.15 (1H, m), 1.10 (9H, s), 0.92 (3H, d, J = 6.6Hz) i 0.81 (3H, d, J = 6.5Hz). 13 C-NMR; delta (CH30D), 180.3, 176.7, 172.0, 169.7, 132.9, 130.5, 128.8, 128.4, 73.7, 57.1, 49.5, 39.5, 36.5, 27.3, 24.3 i 22.5.

LRMS; +vejon 419 (M+H); -ve jon 417 (M-1).

Primer 3: 2R-[3-(4-Etoksi-efnil)-propilJ-N^ dimetil-propil]-3S,N4-dihidroksi-sukcinamid

Reagents and conditions. A: LiHMDS, AIIBr, THF, -78 to RT; B: 4-OEt-phenylBr, P(o-Tol)3, Pd(OAc)2, NEt3, CH3CN; C: 10%Pd/C, H2, MeOH; D: LiOH, MeOH, H20; E: CuCI2, dimethoxyacetone, acetone;

F: pentafluorophenol, WSC, HOAt, CH2CI2; G: Amine (as detailed in Step E, Scheme 1), DMF; H: aq.NH2OH, iPrOH

Primer 3 je pripremljen kako je prikazano u Shemi 3 uz pomoć postupaka koji su dole opisani.

Korak A: 2R-alil-3S-hidroksi-sukcinična kiselina diizopropilester.

U hladan (-78C) rastvor diizopropil estra 2S-Hidroksi-sukcinične kiselina (19.70 ml, 95 mmol) u THF (35 ml) dodat je LiHMDS (200 ml, 0.2 mol, 2.1 eq.) kap po kap. Reakciona mešavina je mešana na -78C tokom dva sata i potom na -30C tokom 30 min. Reakciona mešavina je potom ohlađena na -78C i alil bromid (12.36 ml, 0.14 mol, 1.5 eq.) je dodat kap po kap. Reakciona mešavina je ostavljena da se zagreje na sobnoj temperaturi tokom noći. Ona je sipana u zasićeni rastvor NH4CI/led (200 ml). Posle ekstrakcije sa AcOEt (3 X 200 ml) sledilo je ispiranje vodom (50 ml) i slanim rastvorom (50 ml) kada je dobijeno žuto ulje posle uklanjanja rastvarača pod vakumom. Purifikacija uz pomoć fleš hromatografije dala je diizopropilester 2R-alil-3S-hidroksi-sukcinične kiseline u vidu bezbojnog ulja (7.76 g, de = 80%, 40% prinos).

1H-NMR; delta (CDCI3), 5.77-5.88 (1H, m), 4.98-5.21 (4H, m), 4.22 (1H, brs), 3.18 (1H, bs), 2.87-2.94 (1H, m), 2.56-2.65 (1H, m), 2.40-2.48 (1H, m), 1.29 (6H, d, J = 6.3 Hz) i 1.22 (6H, d, J = 6.3 Hz).

LRMS: +ve jon 281 (M+Na).

Korak B: diizopropil ester 2R-[3-(4-etoksi-fenil)-alil]-3S-hidroksi-sukcinična kiselina.

U rastvor diizopropilestra 2R-alil-3S-hidroksi-sukcinične kiseline (4.79 g, 18.5 mmol), 4-bromo fenetola (3.19 ml, 22.2 mmol, 1.2 eq.) i NEt3(6.22 ml, 44.6 mmol, 2.4 eq.) in CH3CN (40 ml), dodata je sonicirana (za 2 min) suspenzija P(0-Tol)3(0.57 g, 2.22 mmol, 0.1 eq.) i Pd(OAc)2(209 mg, 5%) u CH3CN (5 ml). Reakciona mešavina je zagrevana do refluksa tokom 2 sata. CH3CN je uklonjen pod vakumom. Sirovina je ekstrahovana sa AcOEt (3 X 200 ml), isprana je vodom (50 ml) i slanim rastvorom (50 ml). Purifikacija fleš hromatografijom dala je željeni 2R-[3-(4-etoksi-fenil)-alil]-3S-hidroksi-diizopropil ester sukcinične kiseline (5.92 g, 84% prinos).

1H-NMR; delta (CDCI3), 7.28 (2H, d, J = 8.8Hz), 6.83 (2H, d, J = 8.8Hz), 6.46 (1H, d, J = 15.7Hz), 6.02-6.12 (1H, m), 4.98-5.13 (2H, m), 4.26 (1H, dd, J = 7.1, 3.0Hz), 4.02 (2H, q, J = 7.0Hz), 3.23 (1H, d, J = 7.1Hz), 2.92-2.97 (1H, m), 2.68-2.79 (1H, m), 2.49-2.62 (1H, m), 1.41 (3H, t, J=7.0Hz) i 1.19-1.30 (12H, m).

LRMS: +ve jon 400 (M+Na).

Korak C: 2R-[3-(4-etoksi-fenil)-propil]-3S-hidroksi-sukcinična kiselina diizopropil ester.

U rastvor diizopropil estra 2R-[3-(4-etoksi-fenil)-alil]-3S-hidroksi-sukcinične kiseline (129 mg, 0.34 mmol) u MeOH (10 ml) u inertnoj atmosferi, dodato je 10% Pd/C (13 mg). H2je podvrgnut pravljenju mehurova kroz dobijenu suspenziju tokom 30 min. Reakciona mešavina je tada mešana pod 1 atmosferom H2tokom 16 sati. Pd/C je profiltriran a rastvarač uklonjen pod smanjenim pritiskom kako bi se dobio 2R-[3-(4-etoksi-fenil)-propil]-3S-hidroksi-sukcinična kiselina diizopropil ester (115 mg, 88% prinos).

1H-NMR; delta (CDCI3), 7.08 (2H, d, J = 8.6Hz), 6.81 (2H, d, J = 8.6Hz), 4.97-5.14 (2H, m), 4.20 (1H, dd, J = 7.3, 3.5Hz), 4.01 (2H, q, J = 7.0Hz), 3.18 (1H, d, J = 7.3Hz), 2.77-2.83 (1H, m), 2.55-2.62 (2H, m), 1.45-1.94 (4H, m), 1.40 (3H, t, J = 7.0Hz) i 1.12-1.30 (12H, m).

LRMS: +ve jon 402.0 (M+Na).

Korak D: 2R-[3-(4-etoksi-fenil)-propil]-3S-hidroksi-sukcinična kiselina.

U rastvor diizopropil estra 2R-[3-(4-etoksi-fenil)-propil]-3S-hidroksi-sukcinične kiseline (4.78 g, 12.6 mmol) u THF/voda (3:1, 120 ml) dodata je NaOH (1.66 g, 41.5 mmol, 5.5 eq.). Reakciona mešavina je tada mešana tokom 16 sati na ST. Mešavina je koncentrisana pod smanjenim pritiskom i acidifikovana do pH = 3 dodavanjem HCI 1N. Hidroksi dikiselina je ekstrahovana sa AcOEt. Organski sloj je osušen na MgS04a rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom kako bi se dobila željena 2R-[3-(4-etoksi-fenil)-propil]-3S-hidroksi-sukcinična kiselina (3.66 g, 85% prinos).

1H-NMR; delta (CH30D), 7.07 (2H, d, J = 8.6Hz), 6.79 (2H, d, J=8.6Hz), 4.23 (1H, d, J=5.8 Hz), 3.98 (2H, q, J = 7.0Hz), 2.76-2.81 (1H, m), 2.53-2.59 (2H, m), 1.55-1.72 (4H, m), 1.35 (3H, t, J=7.0Hz).

LRMS: +ve jon 319 (M+Na); -ve jon 295 (M-H).

Korak E: 2R-(2,2-dimetil-5-okso-[1,3]dioksolan-4S-il)-5-(4-etoksi-fenil)-valerijanske kiselina.

U rastvor 2R-[3-(4-etoksi-fenil)-propil]-3S-hidroksi-sukcinične kiseline (3.66 g, 12.3 mmol) u acetonu (50 ml) u inertnoj atmosferi dodati su dimetoksi propan (2.58 ml, 21 mmol, 1.7 eq.) i bakar hlorid (165 mg, 1.2 mmol, 0.1 eq.). Reakciona mešavina je mešana na ST tokom 16 sati. Rastvarač je tada uklonjen pod vakumom kako bi se dobila 2R-(2,2-dimetil-5-okso-[1,3]dioksolan-4S-il)-5-(4-etoksi-fenil)-valerijanska kiselina (4.03 g, 97% prinos).

<1>H-NMR; delta (CDCI3), 7.08 (2H, d, J = 8.5Hz), 6.82 (2H, d, J = 8.5Hz), 4.48 (1H, d, J = 4.8Hz), 4.01 (2H, q, J = 7.0Hz), 2.91-2.98 (1H, m), 2.54-2.64 (3H, m), 1.23-2.20 (4H, m), 1.58 (3H, s), 1.53 (3H, s) i 1.40 (3H, t, J = 7.0Hz). LRMS: +ve jon 359 (M+Na); -vejon 335 (M-H).

Korak F. 2R-(2,2-dimetil-5-okso-[1,3]dioksolan-4S-il)-5-(4-etoksi-fenil)-valerijanske kiselina pentafluorofenil ester.

U hladan (0°C) rastvor 2R-(2,2-dimetil-5-okso-[1,3]dioksolan-4S-il)-5-(4-etoksi-fenil)-valerijanske kiselina (4.03g, 12 mmol) i pentafluoro fenola (2.43 g, 13.2 mmol, 1.1 eq.) u CH2CI2 (50 ml) dodat je WSC (2.54 g, 13.2 mmol, 1.1 eq.). Reakciona mešavina je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu tokom noći. CH2CI2je uklonjen pod vakumom i dobijena sirova reakciona mešavina je rastvorena u AcOEt (200 ml). Organski sloj je ispran vodom (50 ml), NaHC03sat(20 ml) i na kraju slanim rastvorom (20 ml). Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom kako bi se dobilo ulje koje je purifikovano fleš hromatografijom kako bi se dobio očekivani pentafluorofenil estar 2R-

(2,2-dimetil-5-okso-[1,3]dioksolan-4S-il)-5-(4-etoksi-fenil)-valerijanske kiselina (3.94 g, 65% prinos).

1H-NMR; delta (CDCI3), 7.09 (2H, d, J = 8.4Hz), 6.83 (2H, d, J = 8.4Hz), 4.56 (1H, d, J = 6.0Hz), 4.01 (2H, q, J = 7.0Hz), 3.20-3.28 (1H, m), 2.64 (2H, t, J = 7.6Hz), 1.98-2.08 (2H, m), 1.70-1.86 (2H, m), 1.62 (3H, s), 1.57 (3H, s) i 1.40 (3H, t, J = 7.0Hz).

Korak G. 2R-[3-(4-Etoksi-fenil)-propil]-Ni-[1S-(5-tiofen-2-il)-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propil]-[1,3]dioksolan-4S-one

U rastvor pentafluorofenil estra 2R-(2,2-dimetil-5-okso-[1,3]dioksolan-4S-il)-5-(4-etoksi-fenil)-valerijanske kiseline (150 mg, 0.30 mmol) u CH2CI2(10 ml) dodato je 2,2-dimetil-1S-(5-tiofen-2-il)-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-propilamina (100mg, 0.42 mmol, 1.4 eq.). Reakciona mešavina je mešana tokom 16 sati i rastvarač je uklonjen pod vakumom. Sirovina je uneta u AcOEt (70 ml) i isprana vodom(10 ml), zatim sa Na2CO3(10 ml) i na kraju slanim rastvorom (10 ml). Rastvarač je osušen na MgS04i uklonjen pod smanjenim pritiskom kako bi se dobio željeni 2R-[3-(4-Etoksi-fenil)-propil]-N1-[1S-(5-tiofen-2-il)-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propil]-[1,3]dioksolan-4S-jedan (82 mg, 33% sirov).

1H-NMR; delta (CDCI3), 7.88 (1H, m), 7.62 (1H, m), 7.20 (1H, m), 6.95 (2H, d, J = 8.4Hz), 6.71 (2H, d, J = 8.4Hz), 6.55 (1H, d, J = 9.7Hz), 5.19 (1H, d, J = 9.7Hz), 4.56 (1H, d, J = 6.4Hz), 3.95 (2H, q, J = 7.0Hz), 2.64 (3H, bm), 1.84 (2H, m), 1.70 (2H, m), 1.62 (3H, s), 1.54 (3H, s), 1.38 (3H, t, J = 6.9Hz) i 1.02 (9H, s).

LRMS: +ve jon 556.0 (M+H).

Korak H. 2R-[3-(4-Etoksi-fenil)-propil]-Ni-[1S-(5-tiofen-2-il)-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propil]-3S,N4-dihidroksi-sukcinamid

U rastvor 2R-[3-(4-Etoksi-fenil)-propil]-Nr[1 S-(5-tiofen-2-il)-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propil]-[1,3]dioksolan-4S-one (82 mg, 0.15 mmol) in/-PrOH (5 ml), dodat je vodeni rastvor hidroksilamina (50%, 48 u.l, 0.7 mmol, 5 eq.). Reakciona mešavina je ostavljena da se izmeša na ST tokom 16 sati. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom kako bi se dobilo ulje koje je purifikovano preparativnom hromatografijom obrnute faze kako bi se dobio potreban proizvod (25.3mg, 32%).

1H-NMR; delta(CH30D), 1H-NMR; delta(CH30D), 7.86 (2H, m), 7.25 (1H, dd, J=3.8Hz), 6.83 (2H, d, J=8.6Hz), 6.54 (2H, d, J=8.6Hz), 5.14 (1H, s), 4.03 (1H, d, J=7.6Hz), 3.87 (2H, q, J=6.96), 2.88 (1H, m), 2.45 (2H, bm), 1.53 (4H, bm), 1.33 (3H, t, J=7.0Hz) i 1.06 (9H, s).

LRMS: +ve jon 553.2 (M+Na); -ve jon 529.2 (M-H)

Jedinjenja iz primera 4-17 pripremljena su uz pomoć metode iz primera 1 paralelnom sintezom, uz korišćenje odgovarajućeg kiselog hlorida u Koraku D. Proizvodi purifikovani preparativnom HPLC: Primer 4 2S-Hidroksi-3R-[1S-(5-izopropil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propilkarbamoil]-5-metil heksanohidroksaminska kiselina

LRMS; +ve jon 407 (M+Na); -ve jon 383 (M-H)

Primer 5

2S-Hidroksi-3R-[1S-(5-furan-2-il-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propilkarbamoil]-5-metil heksanohidroksaminska kiselina

LRMS; +vejon 431 (M+Na), -ve jon 407 (M-H).

Primer 6

2S-Hidroksi-3R-[1S-(5-ciklopentilmetil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propilkarbamoil]-5-metil heksanohidroksaminska kiselina

LRMS; +ve jon 425 (M+H), -ve jon 423 (M-H).

Primer 7

2S-Hidroksi-3R-[1S-(5-tiopen-2-ilmetil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propilkarbamoil]-5-metil heksanohidroksaminska kiselina

LRMS; +ve jon 461 (M+Na), -ve jon 437 (M-H).

Primer 8

2S-Hidroksi-3R-[1S-(5-etil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propilkarbamoil]-5-metil heksanohidroksaminska kiselina

LRMS; +vejon 393 (M+Na), -vejon 369 (M-H).

Primer 9

2S-Hidroksi-3R-[1S-(5-ciklopentil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propilkarbamoil]-5-metil heksanohidroksaminska kiselina

LRMS; +ve jon 411 (M+H), -ve jon 409 (M-H).

Primer 10

2S-Hidroksi-3R-[1S-(5-benzil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propilkarbamoil]-5-metil heksanohidroksaminska kiselina

LRMS; +ve jon 433 (M+H), -ve jon 431 (M-H).

Primer 11

2S-Hidroksi-3R-[1S-(5-izobutil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propilkarbamoil]-5-metil heksanohidroksaminska kiselina

LRMS; +ve jon 421 (M+Na), -ve jon 397 (M-H).

Primer 12

2S-Hidroksi-3R-[1S-(5-fe/if-butil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propilkarbamoil]-5-metil heksanohidroksaminska kiselina

LRMS; +ve jon 421 (M+Na), -ve jon 397 (M-H).

Primer 13

2S-Hidroksi-3R-[1S-(5-tiofen-2-il-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propilkarbamoil]-5-metil heksanohidroksaminska kiselina

LRMS; +ve jon 425 (M+H), -ve jon 423 (M-H).

Takođe pripremljen, diastereomer 2R-hidroksi-3R-[1S-(5-tiofen-2-il-[1,2,4]oksadiazol-3-ii)-2,2-dimetil-propilkarbamoil]-5-metil heksanohidroksaminske kiseline

M+H = 425.1, M+Na = 447.1, M-H = 423.0.

Primer 14

2S-Hidroksi-3R-[1S-(5-(2,2-dimetil-propil)-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propilkarbamoil]-5-metil heksanohidroksaminske kiseline

LRMS; +ve jon 435 (M+Na), -ve jon 411 (M-H).

Primer 15

2S-Hidroksi-3R-[1S-(5-p-tolil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propilkarbamoil]-5-metil heksanohidroksaminska kiselina

LRMS; +vejon 433 (M+H), -ve jon 431 (M-H).

Primer 16

2S-Hidroksi-3R-[1S-(5-ciklopropil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propilkarbamoil]-5-metil heksanohidroksaminska kiselina

LRMS; +ve jon 405 (M+Na), -ve jon 381 (M-H).

Primer 17

2S-Hidroksi-3R-[1S-(5-metil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propilkarbamoil]-5-metil heksanohidroksaminska kiselina

1H-NMR; delta(CH30D), 8.26 (1H, d, J=9.4Hz), 5.02 (1H, d, J=9.5Hz), 4.02 (1H, d, J=6.4Hz), 2.89 (1H, m), 2.57 (3H, s), 1.61 (1H, m), 1.44 (1H, m), 1.22 (1H, m), 1.00 (9H, s) 13 C-NMR; delta (CH30D), 178.6, 176.1, 171.9, 170.7, 73.5, 55.6, 49.5, 39.9, 36.2, 27.6, 26.6, 24.2, 22.7 i 12.4.

LRMS; +ve jon 379 (M+Na), -ve jon 355 (M-H).

Jedinjenja iz primera 18-19 pripremljena su uz pomoć metode iz primera 2, korišćenjem odgovarajućeg nitrila u Koraku C i/ili ostatka odgovarajuće amino kiseline u Koraku A: Primer 18 2S-Hidroksi-3R-[1S-(3-izopropil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propilkarbamoil]-5-metil heksanohidroksaminska kiselina 1H-NMR; delta(CH30D), 5.12 (1H, s), 3.98 (1H, d, J = 7.5Hz), 3.06 (1H, m), 2.92 (1H, m), 1.61 (1H, m), 1.43 (1H, m), 1.31 (6H, d, J = 6.9Hz), 1.14 (1H, m), 1.03 (9H, s), 0.89(3H, d, J = 6.7Hz), 0.81(3H, d, J = 6.8Hz). 13 C-NMR; delta (CH30D), 179.7, 176.6, 176.5, 172.0, 73.7, 56.9, 49.2, 39.5, 36.5, 28.3, 27.3, 24.5, 22.3, 21.2 i 21.1.

LRMS; +ve jon 385 (M+H), -ve jon 383 (M-H).

Primer 19

2S,NrDihidroksi-3R-izobutil-N4-[2-metil-1S-(3-fenil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-propil]-sukcinamid

1H-NMR; delta(CH30D), 8.05 (2H, m), 7.52 (3H, m), 5.14 (1H, d, J = 7.2Hz), 4.00 (1H, d, J = 7.7Hz), 2.91 (1H, m), 2.36 (1H, m), 1.63 (1H, m), 1.54 (1H, m), 1.16 (1H,m), 1.09 (3H, d, J = 6.8Hz), 1.00 (3H, d, J = 6.8Hz), 0.95(3H, d, J = 6.3Hz), 0.84(3H, d, J = 6.3Hz). 13 C-NMR; delta (CH30D), 181.0, 176.8, 172.0, 169.9, 132.9, 130.5, 128.7, 128.4, 73.7, 54.3, 49.6, 39.5, 33.3, 27.2, 24.4, 22.5, 19.8 i 19.4.

LRMS; +ve jon 427 (M+Na), -ve jon 403 (M-H).

Jedinjenja iz primera 20-23 pripremljena su uz pomoć metode iz primera 2, korišćenjem odgovarajućeg nitrila u Koraku C i/ili ostatka odgovarajuće amino kiseline u Koraku A. Sinteza do odgovarajućeg hiralnog sukcinata u Koraku E je detaljno opisana u WO 94/21625.

Primer 20

2S-Alil-5-metil-3R-[2-fenil-1S-(3-fenil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-etilkarbamoil]-heksanohidroksaminska kiselina

1H-NMR; delta (CH30D), 9.13 (1H, d, J = 8.26Hz), 8.05 (2H, m), 7.55 (3H, m), 7.25 (5H,m), 5.66 (1H,m), 5.45 (1H,m), 4.90 (2H, m), 4.50 (1H,s) 3.51 (1H, dd, J = 13.92, 4.84Hz), 3.17 (1H, dd, J = 13.92, 10.90Hz), 2.50 (1H, m), 2.0 (2H, m), 1.50 (3H, m), 1.0 (3H, d, J = 6.5Hz), 0.96 (3H, d, J = 6.6Hz). 13C-NMR; delta (CH30D), 181.0, 177.0, 172.7, 138.0, 136.5, 133., 130.8, 130.6, 130.5, 130.1, 128.7, 128.7, 117.7, 48.4, 48.3, 42.1, 39.5, 36.2, 27.1, 24.9 i 22.0. Primer 21 2S-Alil-5-metil-3R-[2-fenil-1S-(3-izopropil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-etilkarbamoil]-heksanohidroksaminska kiselina 1H-NMR; delta (DMSO), 10.28 (1H,s), 8.64 (1H, d, J=6.2Hz), 8.64 (1H, br s), 7.25 (5H,m), 5.45 (2H, m), 4.51 (1H, m), 4.30 (2H, m), 3.15 (1H, m), 2.85 (2H,m), 2.20 (1H, dt, J=10.6, 3.12Hz), 1.70 (2H, m), 1.25 (6H,d, J=6.91Hz), 0.70 (1H,m), 0.52 (3H, d, J=6.4Hz), 0.48(3H, d, J=6.4Hz). 13C-NMR; delta (MEOD), 179.0, 175.6, 175.5, 171.3, 136.6, 135.0, 129.2, 128.6, 127.3, 116.4, 48.7, 46.9, 40.6, 38.1, 34.8, 26.9, 25.6, 23.5, 20.7 i 19.9. Primer 22 2S-Alil-5-metil-3R-[2-fenil-1S-(3-metil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-etilkarbamoil]-heksanohidroksaminska kiselina 1H-NMR; delta (CH30D), 8.98 (1H, d, J=8.41Hz), 7.27 (5H, m), 5.51 (2H, m), 4.85 (2H,m), 3.41 (1H, dd, J=14.0, 5.0Hz), 3.14 (1H, dd, J=14.0, 10.97Hz), 2.47(1H,dt,J=11.0, 3.25Hz), 2.16 (3H,s), 2.00 (1H, dt, J=11.40, 3.30Hz), 1.80 (1H, m), 1.15 (1H, m), 0.98 (3H, d, J=6.6Hz), 0.92 (3H, d, J=6.6Hz). 13C-NMR; delta (CH30D), 172.62, 168.27, 133.59, 132.07, 126.34, 125.66, 124.28, 113.36, 45.19, 44.04, 43.95, 37.61, 35.15, 31.75, 22.72, 20.44, 17.59 i 7.36. Primer 23 2S-Alil-3R-[2,2-dimetil-1S-(3-metil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-propilkarbamoil]-5-metil-heksanohidroksaminska kiselina 1H-NMR; delta (CH30D), 8.81 (1H, d, J=8.59Hz), 7.65 (1H, m), 5.70 (1H, m), 5.15 (1H, d, J=8.62Hz), 4.95 (2H, m), 2.60 (1H, dt, J=11.10, 3.16Hz), 2.39 (3H,s), 1.38(1 H, dt, J=13.10, 3.33Hz), 1.31 (1H,m), 0.98 (1H,m), 0.98 (9H,s), 0.86(3H, d, J=6.6Hz), 0.84(3H, d, J=6.6Hz). Jedinjenje iz primera 24 je pripremljena uz pomoć metode iz primera 2. Sinteza do odgovarajućeg hiralnog sukcinata u Koraku E je detaljno opisana uWO 95/19956 Primer 24 3R-[2,2-Dimetil-1S-(3-fenil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-propilkarbamoil]-5-metil-heksanohidroksaminska kiselina

LRMS; +ve jon 403.5 (M+H), -ve jon 401.3 (M-H).

Jedinjenje iz primera 25 je pripremljeno uz pomoć metode iz primera 2, korišćenjem odgovarajućeg nitrila u Koraku C i/ili ostatka odgovarajuće amino kiseline u Koraku A. Sinteza do odgovarajućeg hiralnog sukcinata u Koraku E je detaljno opisana u WO 97/02239.

Primer 25

2S-Metoksi-5-metil-3R-[1S-(3-metil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-2-fenil-etilkarbamoilj-heksanohidroksaminska kiselina

1H-NMR; delta (CH30D), 7.14 (5H,m), 5.34 (1H,m), 3.38 (1H,d, J=9.68Hz), 3.20 (2H,m), 3.02 (3H, s), 2.65 (1H,m), 2.22 (3H, s), 1.35 (2H, m), 0.90 (1H,m), 0.73 (3H, d, J=6.55Hz), i 0.70 (3H, d, J=6.57Hz). Jedinjenja iz Primera 26 i 27 pripremljena su uz pomoć metode iz Primera 2. Sinteza do odgovarajućeg hiralnog sukcinata u Koraku E je detaljno opisana u WO 92/13831 korišćenjem metoda koje su analogne onima opisanim u WO 95/32944. Primer 26 3R-[2,2-Dimetil-1S-(3-fenil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-propilkarbamoil]-heptadekanska kiselina

1H-NMR; delta(CH30D), 8.05 (2H, m), 7.49 (3H, m), 5.22 (1H, s), 2.93 (1H, m), 2.65 (1H, dd, J=9.8,16.7Hz), 2.38 (1H, dd, J=4.6,16.6Hz), 1.52 (1H, m), 1.43 (1H, m), 1.26 (24H, m), 1.10 (9H, s) i 0.89 (3H, m).

LRMS; +vejon 528.4 (M+H).

Primer 27

3R-[2,2-Dimetil-1S-(3-fenil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-propilkarbamoil]-nonadekanska kiselina

LRMS; +vejon 556.2 (M+H).

Jedinjenje iz primera 28 je pripremljeno uz pomoć metode iz primera 1. Sinteza do odgovarajućeg hiralnog sukcinata u Koraku H je detaljno opisana u WO 92/13831 korišćenjem metoda koje su analogne onima opisanim u WO 95/32944.

Primer 28

6-(4-Hloro-fenil)-3R-[2,2-dimetil-1S-(5-fenil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-propilkarbamoil]-kapronska kiselina

1H-NMR; delta(CH30D), 8.07 (2H, m), 7.61 (3H, m), 6.93 (4H, m), 5.15 (1H, s), 2.94 (1H, m), 2.5 (4H, m), 1.5 (4H, m) i 1.07 (9H, s). 13 C-NMR; delta (CH30D), 178.0, 177.1, 142.6, 134.6, 132.7, 131.0, 130.8, 129.5, 129.4, 125.7, 55.7, 43.8, 39.0, 36.3, 36.1, 34.1, 30.3 i 27.4.

LRMS; +vejon 506.2 (M+Na), -ve jon 482.4 (M-H).

Takođe pripremljen, diastereomer 6-(4-Hloro-fenil)-3R-[2,2-dimetil-1R-(5-fenil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-propilkarbamoil]-kapronska kiselina

M+H = 485, M+Na = 507.2, M-H = 482.6.

Jedinjenja iz primera 29 i 30 pripremljena su uz pomoć metode iz primera 1.

Primer 29

3R-[2,2-Dimetil-1S-(5-tiofen-2-il-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-propilkarbamoil]-2S-hidroksi-5-metil-kapronska kiselina

1H-NMR; delta (CH30D), 7.95 (1H, m), 7.87 (1H, d, J = 5.0Hz), 7.28 (1H, m), 5.15 (1H, s), 4.18 (2H, d, J = 6.4Hz), 2.94 (1H, m), 1.68 (1H, m), 1.48 (1H, m), 1.31 (1H, m), 1.06 (9H, s), 0.88 (3H, d, J = 6.4Hz) i 0.82 (3H, d, J = 6.5Hz). LRMS; -vejon 408.2 (M-H). Primer 30 3R-[1S-(5-Furan-2-il-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propilkarbamoil]-2S-hidroksi-5-metil-kapronska kiselina

1H-NMR; delta (CH30D), 7.88 (1H, s), 7.45 (1H, d, J = 3.6Hz), 6.74 (1H, m), 5.15 (1H, s), 4.18 (2H, d, J = 6.4Hz), 2.91 (1H, m), 1.65 (1H, m), 1.50 (1H, m), 1.31 (1H, m), 1.06 (9H, s), 0.88 (3H, d, J = 6.4Hz) i 0.82 (3H, d, J = 6.5Hz). LRMS; -ve jon 392.2 (M-H).

Jedinjenja iz Primera 31 i 32 pripremljena su uz pomoć metode iz Primera 2. Sinteza do odgovarajućeg hiralnog sukcinata u Koraku E je detaljno opisana u VVO 94/02446 uz pomoć odgovarajućeg cinamil bromida ili ciklopentilmetil jodida umesto metalil jodida kako je detaljno opisano u gore pomenutom patentu.

Primer 31

N4-[2,2-Dimetil-1S-(3-feniK1,2,4]oksadiazol-5-il)-propil]-2S,Ni-dihidroksi-3R-(3-fenil-alil)-sukcinamid

1H-NMR; delta(CH30D), 7.95 (2H, d, J=7.2Hz), 7.53 (1H, m), 7.48 (2H, m), 7.09 (2H, d, J=6.4Hz), 6.91 (3H, m), 6.31 (1H, d, J=15.8Hz), 6.04 (1H, m), 5.26 (1H, s), 4.14 (1H, d, J=7.6Hz), 3.02 (1H, m), 2.46 (1H, m), 2.37 (1H, m) i 1.07 (9H, s). 13 C-NMR; delta (CH30D), 179.8, 175.9, 172.0, 169.6, 138.8, 134.0, 132.8, 130.4, 129.7, 128.9, 128.4, 128.4, 127.3, 73.2, 56.5, 51.3, 36.8 i 34.0.

LRMS; +ve jon 501.2 (M+Na), -ve jon 477.4 (M-H).

Primer 32

2R-Ciklopentilmetil-3S,N4-dihidroksi-Nr[1S-(3-izopropil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-2,2-dimetil-propil]-sukcinamid

1H-NMR; delta(CH30D), 5.13 (1H, s), 3.99 (1H, d, J=7.7Hz), 3.06 (1H, m), 2.87 (1H, m), 1.83 (1H, m), 1.72 (1H, m), 1.63-1.39 (6H, bm), 1.31 (6H, d, J=6.9Hz), 1.27 (1H, m), 1.03 (9H, s) i 1.02 (2H, m). 13 C-NMR; delta (CH30D), 179.6, 176.6, 176.5, 172.0, 73.6, 56.8, 50.8, 39.6, 36.7, 36.5, 34.7, 33.6, 28.3, 27.2, 26.5 i 21.2.

LRMS; +ve jon 411.2 (M+H), -ve jon 409.6 (M-H).

Jedinjenja iz Primera 33 - 35 pripremljena su uz pomoć metode iz Primera 3 uz pomoć odgovarajućeg aril bromida u Koraku B.

Primer 33

2R-[3-(3,5-Bis-trifluorometil-fenil)-propil]-N1-[2,2-dimetil-1S-(5-tiofen-2-il-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-propil]-3S,N4-dihidroksi-sukcinamid

1H-NMR; delta(CH30D), 8.38 (1H, d, J=9.4Hz), 7.86 (1H, s), 7.75 (3H, bs), 7.4 (1H, d, J=3.5Hz), 6.7 (1H, m), 5.12 (1H, d, J=9.4Hz), 4.26 (1H, d, J=4.0Hz), 2.8 (3H, bm), 1.8 (4H, bm) i 1.0 (9H, s).

LRMS; +vejon 623.2 (M+H), -ve jon 621.0 (M-H).

Primer 34

2R-[3-(3,5-Bis-trifluorometil-fenil)-propil]-N1-[1S-(5-furan-2-il-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propil]-3S,N4-dihidroksi-sukcinamid

1H-NMR; delta(CH30D), 8.38 (1H, d, J=9.4Hz), 7.86 (1H, s), 7.75 (3H, bs), 7.4 (1H, d, J=3.5Hz), 6.7 (1H, m), 5.12 (1H, d, J=9.4Hz), 4.26 (1H, d, J=4.0Hz), 2.8 (3H, bm), 1.8 (4H, bm) i 1.0 (9H, s).

LRMS; +ve jon 629.4 (M+Na), -ve jon 605.4 (M-H).

Primer 35

2R-[3-(4-Etoksi-fenil)-propil]-N1-[1S-(5-furan-2-il-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-2,2-dimetil-propil]-3S,N4-dihidroksi-sukcinamid

1H-NMR; delta(CH30D), 7.86 (2H, m), 7.25 (1H, dd, J=3.8Hz), 6.83 (2H, d, J=8.6Hz), 6.54 (2H, d, J=8.6Hz), 5.14 (1H, s), 4.03 (1H, d, J=7.6Hz), 3.87 (2H, q, J=6.96,14.0Hz), 2.88 (1H, m), 2.45 (2H, bm), 1.53 (4H, bm), 1.33 (3H, t, J=7.0Hz)i 1.06 (9H, s).

LRMS; +ve jon 515.2 (M+H), -vejon 513.2 (M-H).

Jedinjenje iz Primera 36 je pripremljeno uz pomoć metode iz Primera 2. Sinteza do odgovarajućeg hiralnog sukcinata u Koraku E je detaljno opisana u WO 01/10834.

Primer 36

3-Ciklopentil-N-[2,2-dimetil-1S-(3-fenil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-propil]-2R-[(formil-hidroksi-amino)-metil]-propionamid

1H-NMR; delta(CH30D), 8.26 ( 03 H, s), 8.05 (2H, d, J=6.9Hz), 7.84 (0.7H, s), 7.52 (3H, m), 5.20 (1H, m), 3.75 (1H, m), 3.63 (0.3H, dd, J=13.9, 5.5Hz), 3.43 (0.7H, dd, J=14.2, 4.6Hz), 3.18 (0.7H, m), 3.00 (0.3H, m), 1.92 (1H, m), 1.47 (8H, m), 1.10 (3H, s), 1.08 (6H, s) i 0.98 (2H, m). 13 C-NMR; delta (CH30D), 179.9, 176.9, 176.6, 169.3, 163.8, 159.2, 132.5, 130.0, 129.6, 128.9, 128.3, 127.9, 56.8, 56.7, 53.9, 50.3, 44.8, 44.6, 39.1, 38.9, 37.9, 37.7, 35.9, 35.8, 34.1, 33.4, 33.3, 26.9, 26.1 i 25.9.

LRMS; +vejon 451 (M+Na), -ve jon 427 (M-H).

Jedinjenje iz Primera 37 je pripremljeno uz pomoć metode iz Primera 1. Sinteza do odgovarajućeg hiralnog sukcinata u Koraku E je detaljno opisana u WO 01/10834.

Primer 37

3-Ciklopentil-N-[2,2-dimetil-1S-(5-fenil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-propil]-2R-[(formil-hidroksi-amino)-metil]-propionamid

1H-NMR; delta(CH30D), 8.49 (0.6H, d, J=8.7Hz), 8.37 (0.4H, d, J=8.1Hz), 8.28 (0.4H, s), 8.14 (2H, m), 7.85 (0.6H, s), 7.65 (1H, m), 7.59 (2H, m), 4.81 (1H, s), 3.79 (1H, m), 3.63 (0.4H, m), 3.43 (0.6H, m), 3.13 (0.6H, m), 2.97 (0.4H, m), 1.55 (9H, m), 1.08 (3H, s), 1.07 (6H, s) i 1.04 (2H, m). 13 C-NMR; delta (CH30D), 176.6, 171.6, 164.2, 159.7, 134.6, 132.8, 130.8, 130.3, 129.4, 125.7, 69.5, 56.0, 54.3, 50.8, 45.4, 45.3, 40.6, 39.5, 38.3, 38.2, 35.9, 34.5, 33.8, 33.7, 32.0, 27.5, 26.4 i 26.3. LRMS; +vejon 429 (M+H).

Biološki rezultati

A. Eseji za inhibiciju enzima

Jedinjenja iz ovog pronalaska su ispitivana kako bi se procenila njihova aktivnost kao inhibitora MMP9 i MMP12.

Protokol MMP9 eseia

Jedinjenja su ispitivana po pitanju inhibitorne aktivnosti protiv 92kDa želatinaze (MMP9) u jednom eseju uz korišćenje supstrata peptida obeleženog kumarinom, (7-metoksikumarin-4-il)acetil-Pro-Leu-Gly-Leu-(3-[2,4-dinitrofenil]-L-2,3-diaminopropionil)-Ala-Arg-NH2(McaPLGLDpaAR)

(Knightetal, FEBS Lett. 1992; 263-266).

Osnovni rastvori su napravljeni na sledeći način:

Pufer za esej:100mM Tris-HCI pH 7.6 koji sadrži 100mM NaCI, 10mM CaCI2) i 0.05% Brij 35

Supstrat: 0.4mM McaPLGLDpaAR (iz Bahema) (0.437mg/ml) osnovni rastvor u 100%

DMSO (čuvan na -20°C). Razblažiti do 8(iM u puferu za esej. Enzim: Rekombinantna humana 92kDa želatinaza (MMP-9; APMA (4-aminofenil

živin acetat) -aktiviran ukoliko je neophodno) adekvatno razblažen u puferu za esej.

Test jedinjenja pripremljena su inicijalno kao 10mM rastvora jedinjenja u 100% DMSO, koji je razblažen do 1mM u 100% DMSO, a potom serijski trostruko razblažen u 100% DMSO duž kolona 1-10 na pločicama mikrotitra sa 96 udubljenja Opseg koncentracija eseja, IOOjjM (kolona 1) na 5.1 nM

(kolona 10)

Ovaj esej je urađen na ukupnoj zapremini od 100^1 po udubljenju na mikrotitarnim pločicama sa 96 udubljenja. Aktivirani enzim (20ul) je dodat u udubljenja a zatim 20ul pufera za esej. Odgovarajuće koncentracije

ispitivanog jedinjenja razblažene u 10ul DMSO su tada dodate a zatim 50ul McaPLGLDpaAR (8uM, pripremljen razblaživanjem DMSO sirovine u puferu za esej). Za svaki esej je ispitivano deset koncentracija ispitivanog jedinjenja u duplikatu. U kontrolnim udubljenjima nije bilo ni enzima ni ispitivanog jedinjenja. Reakcije su inkubirane na 37°C tokom 2 sata. Fluorescentnost na 405nm je odmah merena uz pomoć SLT Fluostar fluorometra (SLT Labinstruments GmbH, Grodig, Austria) uz korišćenje ekscitacije na320nm, bez zaustavljanja reakcije.

Efekat ispitivanog jedinjenja je određivan na osnovu krive reakcije za dozu koja je napravljena uz pomoć 10 duplih koncentracija inhibitora. IC50(koncentracija jedinjenja potrebna da se dobije 50% smanjenje enzimske aktivnosti) dobijena je unošenjem podataka u jednačinu, Y = a + ((b - a) / (1 +

(c/X)<d>)). (Y = inhibicija postignuta za određenu dozu; X = doza u nM; a = minimalna inhibicija y ili nula %; b = maksimum y ili 100% inhibicija; c = je IC50; d = je kosa).Rezultat je zaokružen na jednu značajnu brojku.

Protokol eseja MMP12

Jedinjenja su ispitivana po pitanju inhibitorne aktivnosti protiv metaloelastaze (MMP12) u jednom eseju uz korišćenje jednog supstrata peptida obeleženog kumarinom, (7-metoksikumarin-4-il)acetil-Pro-Leu-Gly-Leu-(3-[2,4-dinitrofenil]-L-2,3-diaminopropionil)-Ala-Arg-NH2(McaPLGLDpaAR) (Knight et al, FEBS Lett. 1992; 263-266). Protokol za ovaj esej je opisan kod eseja MMP9 gore.

Protokol eseja MMP1

Jedinjenja su ispitivana po pitanju inhibitorne aktivnosti protiv kolagenaze (MMP1) u jednom eseju uz korišćenje jednog supstrata peptida obeleženog kumarinom, (7-metoksikumarin-4-il)acetil-Pro-Leu-Gly-Leu-(3-[2,4-dinitrofenil]-L-2,3-diaminopropionil)-Ala-Arg-NH2(McaPLGLDpaAR)

(Knight et al, FEBS Lett. 1992; 263-266). Protokol za ovaj esej je opisan kod eseja MMP9 gore.

Rezultati:

Ključ za biološke podatke

Ovi rezultati pokazuju da su generalno testirana jedinjenja bila aktivna kao inhibitori MMP12, a određeni Primeri pokazuju selektivnu inhibiciju MMP-9 i 12 u odnosu na MMP-1.

B. Model fibroze jetre izazvansaCCI4

Ugljentetrahlorid (CCI4) izaziva fibrozu jetre kada se primenjuje intraperitonealno. (Bulbena O, Culat J, Bravo ML., Inflammation 1997 Oct; 21(5):475-88). Jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu proceniti po pitanju njihove sposobnosti da sprečavaju formiranje fibroznog tkiva izazvano sa CCI4.

Životinje

Mužjaci Sprague-Dawley pacova, stari 7 nedelja, teški približno 300 g dobijeni od Charles River/lffa-Credo, St-Germain/l'Arbresle, Francuska

Pacovi su aklimatizovani tokom 5 dana pre početka eksperimenata, u klimatizovanim prostorijama, 2 životinje po kavezu, Temperatura: 22°C ± 2, Relativna vlažnost: 55% ±10 svetlost: ciklus od 12 sati (7-19), Kavez: Makrolon<®>kavez 42.5x26.6x15 sa pokrivenom hranilicom od nerđajućeg čelika koja je montirana na svakom od njih.

Studija je uključivala sledeće grupe of po 8 životinja koje su dole navedene.

Grupa 1:"Lažne" životinje primile su CCI4nosač (i.p.) i jednom dnevno, nosač ispitivane supstance(s.a)

Grupa 2:Pozitivna kontrolna grupa primila je CCI4(i.p.), i jednom dnevno, nosač ispitivane supstance (s.c.)

Grupa 3:Eksperimentalna grupa primila je CCI4(i.p.), i jednom dnevno, 2 mg/kg s.c. jedinjenja iz primera 13.

Grupa 4:Eksperimentalna grupa primila je CCI4(i.p.), i jednom dnevno,

10 mg/kg s.c. jedinjenja iz primera 13.

Grupa 5:Eksperimentalna grupa primila je CCI4(i.p.) i jednom dnevno,

20 mg/kg s.c. jedinjenja iz primera 13.

Pacovi su bili obeleženi na repovima. Oznake su proveravane i obnavljane ukoliko je bilo potrebno posle svake injekcije CCI4.

Postupak

CCU (Prolabo) u maslinovom ulju je primenjivan svaka 3 dana tokom tri nedelje putem intraperitonealnih injekcija (0,25 ml CCI4/kg telesne težine, razblažen u ulju 1:1 vol:vol do totalne zapremine od 0.5 ml/kg). Životinje su svakodnevno merene. Ukoliko se telesna težina smanjila za više od 10% u odnosu na inicijalnu težinu, životinje su isključene iz studije.

Nosači i jedinjenja su korišćeni na sledeći način:

• CCI4je primenjivan u maslinovom ulju (prolabo) u razblaženju 1:1; • Jedinjenje iz primera 13 je suspendovano u 0.25 % Tween-80 i 0.25% karboksimetilceluloze u sterilnoj 0.9% NaCI. Rastvor je čuvan na 4 °C tokom celog eksperimenta i korišćen je svakodnevno za pripremanje suspenzije.

Jedinjenje iz primera 13 je primenjivano svakodnevno putem subkutane (s.c.) injekcije u zapremini za administraciju od 5 ml/kg. Grupe 1 i 2 su dobijale s.c. doze nosača od 5 ml/kg. Sveže pripremljeni rastvori su korišćeni svakoga dana eksperimenta. Administracija je vršena svakoga dana u isto vreme.

Tretman grupe iz ove studije je počinjan za svaku životinju momentom prve administracije CCI4i trajao je tokom 21 uzastopnog dana. Poslednja administracija ispitivane supstance ili nosača izvršena je jedan dan pre žrtvovanja životinja.

Rezultati

Smrt je nastupila kod 16 životinja. Datum i pretpostavljeni uzrok su zabeleženi u Tabeli 1.

Nivoi enzima u serumu

Životinje su ubijene 21 dan posle prve administracije CCI4inhalacijom izofurana. Krv je uzimana individualno u vreme žrtvovanja, tj jedan dan posle poslednje administracije ispitivane supstance ili nosača. Krv je centrifugirana na 4°C. Plazma je pažljivo prikupljana i alikvotirana na 3 frakcije. Nivoi aspartat aminotransferaze (ASAT) i alanin amino transferaze (ALAT) u plazmi su mereni kako bi se procenila nekroza jetre. Povišeni nivoi ASAT i ALAT u serumu bili su udruženi sa oštećenjem jetre. Prosečni nivoi ASAT i ALAT kod kontrolnih životinja i onih tretiranih jedinjenjem iz primera 13 u tri različite doze prikazani su na Slici 1 (Y-osa predstavlja jedinice enzimske aktivnosti po litru krvi, IU/L). Subkutani tretman jedinjenjem iz primera 13 jasno smanjuje nivoe ASAT i ALAT u odnosu na životinje tretirane nosačem. Ovo pokazuje da jedinjenje iz primera 13 ima zaštitni efekat na jetru.

Histološka procena fibroze jetre

Fibroza jetre je procenjivana merenjem površine jetre zahvaćene fibrozom uz korišćenje mikrohotomije. Rezultati su prikazani u vidu procenta površine koja je zahvaćena fibrozom.

Jetra je uklonjena, izvršena je disekcija tri lobusa a uzroci su uklonjeni fiksirani u 10% formaldehidu ili zamrznuti na -80 °C.

Isečci jetre su ukalupljeni u parafinu. Urađena je sekcija i prebojavanje Sirius crvenom. Kvantifikacija fibroze jetre je izvršena na najmanje tri isečka uzeta sa različitih mesta u jetri. Kvantitativna analiza je urađena uz pomoć analizatora slike (Imstar) i Morfostar softvera.

Izračunat je prosečan procenat površine zahvaćene fibrozom u jetrama životinja iz različitih grupa a rezultati su prikazani na Slici 2.

B. Peritonealno prikupljanje limfocita izazvano sa IL-2

Intraperitonealna administracija IL2 izaziva migraciju limfocita u intraperitonealnu šupljinu. Ovo je model migracije ćelija koji se javlja tokom inflamacije.

Jedinjenja iz ovog pronalaska inhibiraju prikupljanje limfocita izazvano sa IL2.

Protokol

C3H/HEN miševi (Elevage Janvier, France) su dobili intraperitonealne injekcije IL2 (Serono Institut za farmaceutska istraživanja, 20 ug/kg, u slanom rastvoru).

Jedinjenja iz ovog pronalaska su suspendovana u 0.5% karboksimetilcelulozi (CMC)/0.25% tween-20 i datisc ili poputem (10 ml/kg) 15 min pre administracije IL2.

Dvadeset četiri sata posle administracije IL2, peritonealni leukociti su prikupljeni tokom 3 uzastopna ispiranja peritonealne šupljine sa 5 ml fiziološkog rastvora sa fosfatnim puferom (PBS)-1mM EDTA (+4°C). Suspenzija je centrifugirana (1700g x 10 min at +4°C). Dobijena peleta je suspendovana u 1 ml PBS-1mM EDTA.

Limfociti su identifikovani i prebrajani uz korišćenje a Beckman/Coulter brojača.

Plan eksperimenta

The životinje su podeljene na 5 grupa (6 miševa u svakoj grupi):

Grupa 1:(bazalna) primile su 0.5% CMC/0.25% tween-20 (nosač jedinjenja iz ovog pronalaska ) i fiziološki rastvor (nosač IL2);

Grupa 2:(kontrolna IL2) primile su 0.5% CMC/0.25% tween-20 i injekciju IL2;Grupa 3:Eksperimentalna grupa (Jedinjenje iz ovog pronalaska Doza 1) primile su jedinjenje iz ovog pronalaska i injekciju IL2;

Grupa 4:Eksperimentalna grupa (Jedinjenje iz ovog pronalaska Doza 2) primile su jedinjenje iz ovog pronalaska i injekciju IL2;

Grupa 5:Eksperimentalna grupa (Jedinjenje iz ovog pronalaska Doza 3) primile su jedinjenje iz ovog pronalaska i injekciju IL2;

Grupa 6:Referentna grupa primila je referentno jedinjenje deksametazon i injekciju IL2

Izračunavanje

Inhibicija prikupljanja limfocita izračunata je na sledeći način:

Naznačeno time da je Ly 1= Broj limfocita u grupi 1 (E3/ul), Ly 2= Broj limfocita u grupi 2 (E3/ul), Ly X= Broj limfocita u grupi X (3-5) (E3/ul)

Doza jedinjenja iz ovog pronalaska potrebna za inhibiciju nakupljanja limfocita za 50% (ID50) izračunata je rutinskim pravljenjem krive, navedeni u Tabeli 1.

Claims (38)

1.Jedinjenje formule (IA ili (IB) Naznačeno time da W predstavlja HO(C=0)-, HONH(C=0)- ili H(C=0)N(OH)-; X predstavlja -0- ili -S-; Ripredstavlja vodonik; -OH ili -SH; fluoro ili hloro; -CF3; (C1-C6)alkil; (CrC6)alkoksi; (C2-C6)alkenil; fenil ili supstituisani fenil; fenil (C^Ce) alkil ili supstituisani feniKd-CeJalkil; fenil (C2-C6) alkenil ili supstituisani fenil(C2-C6) alkenil heterociklil ili supstituisani heterociklil; heterociklil (CrC6)alkil ili supstituisani heterociklil(CrC5)alkil; grupu BSOnA- naznačeno time da n bude 0, 1 ili 2, a B bude vodonik ili jedan ( Ci- Cs) alkil, fenil, supstituisani fenil, heterociklil supstituisani heterociklil, (C1-C6)acil, fenacil ili supstituisani fenacil grupa, a A predstavlja (C1-C6)alkilen; -NH2, (CrC6)alkilamino ili di(CrC6)alkilamino; aminoCd-Cejalkil, (Ci-C6)alkilamino(Ci-C6)alkil, di(Cr C6) alkilamino(C1-C6)alkil, hidroksi(CrC6)alkil, merkapto(C1-C6)alkil ili karboksi(CrC6) alkil naznačeno time da amino-, hidroksi-, merkapto- ili karboksil-grupa bude opciono zaštićena, ili karboksil- grupa amidirana; ili jedan cikloalkil, cikloalkenil ili ne-aromatični heterociklični prsten sa sadržajem do 3 heteroatoma, od kojih svaki može da bude (i) supstituisani jednim ili više supstituenata odabranim između sledećih: CrC6alkil, C2-C6alkenil, halo, cijano (-CN), C02H, -C02R,-CONH2, -CONHR, -CON(R)2, -OH, -OR, okso-, -SH. -SR.-NHCOR, i -NHC02R naznačeno time da R bude d-C6alkil ili benzil i/ili (ii) fuziran za cikloalkil ili heterociklični prsten; R2 predstavlja grupu R10-(KS)n-(ALK)m- naznačeno time da R10predstavlja vodonik, ili jedanCi- C6alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, cikloalkil, aril, ili heterociklil grupu, od kojih svaka može da bude nesupstituisana ili supstituisana sledećim: (CrCi2)alkil, (Cr C12)alkoksi, hidroksi, merkapto, (CrCi2) alkiltio, amino, halo (uključujući i fluoro, hloro, bromo i jodo), trifluorometil, cijano, nitro, okso, -COOH, -CONH2, -COOR<A>, -NHCOR<A>, -CONHR<A>, -NFIRA-NR R6, ili - CONRAR<B>naznačeno time da su R<A>and R<B>nezavisno jedna (O^C^Jalkil grupa i da ALK predstavlja pravi ili razgranati divalentni Ci-Cealkilen, C2-Csalkenilen, ili C2-C6alkinilen radikal, i da može da bude prekinut jednom ili više -NH-, -O- ili -S-veza, X predstavlja -NH-, -O- ili -S-, -NRc ili -NCORc naznačeno time da Rc bude jedna (d-C12)alkil grrupa, a da su m i n nezavisno 0 ili 1; R3 predstavlja bočni lanac prirodne ili neprirodne alfa amino kiseline; R4predstavlja opciono supstituisani d-C6 alkil, C2-C6 alkenil, C2-Cs alkinil, d-C3penfluoroalkil, cikloalkil, cikloalkil(d-C6 alkil)-, cikloalkenil, cikloalkeniKd-Cg alkil)-, fenil, fenil(d-C6 alkil)-, naftil, ne-arilni heterociklil, ne-arilni heterociklil(d-C6alkil)-, heteroaril; ili heteroaril(Ci-C6alkil)-; ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, hidrat ili solvat.

2.Jedinjenje navedeno u zahtevu 1, naznačeno time da to jedinjenje ima formulu (IA).

3. Jedinjenje navedeno u zahtevu 1, naznačeno time da to jedinjenje ima formulu (IB).

4.Jedinjenje navedeno u ma kom od prethodnih zahteva, naznačeno time da W bude HONH(C=0)-.

5. Jedinjenje navedeno u ma kom od prethodnih zahteva, naznačeno time da X bude -0-.

6. Jedinjenje navedeno u ma kom od prethodnih zahteva, naznačeno time daR-\bude vodonik, hidroksi, fluoro, hloro, metil, metoksi, trifluorometil, etil, n-propil, alil, fenilpropil, ciklopropil-, metil, fenilprop-2-enil, tienilsulfanilmetil, tienilsulfinilmetil, ili tienilsulfonilmetil; ili C1-O4alkil, npr. metil, etil n-propil ili n-butil, supstituisani sledećim: ftalimido, 1,2-dimetil-3,5-diokso-1,2,4-triazolidin-4-il, 3-metil-2,5-diokso-1-imidazolidinil, 3,4,4-trimetil-2,5-diokso-1-imidazolidinil, 2-metil-3,5-diokso-1,2,4-oksadiazol-4-il, 3-metil-2,4,5-triokso-1-imidazolidinil, 2,5-diokso-3-fenil-1-imidazolidinil, 2-okso-1 -pirolidinil, 2,5-diokso-1 -pirolidinil ili 2,6-dioksopiperidinil, 5,5-dimetil-2,4-diokso-3- oksazolidinil, heksahidro-1,3-dioksopirazolo [1,2,a][1,2,4]-triazol-2-il, ili naftalimido (t.j. 1,3-dihidro-1,3-diokso-2H-benz[f]isoindol-2-il). 1,3-dihidro-1-okso-2H-benz[f]lsoindol-2-il, 1,3-dihidro-1,3-diokso-2H-pirolo[3,4-b]guinolin-2-il, ili 2,3-dihidro-1.3-diokso-1H-benz[d,e]lsokvinolin-2-il grupom; ili cikloheksil, ciklooktil, cikloheptil, ciklopentil, ciklobutil, ciklopropil, tetrahidropiranil ili morfolinil.

7. Jedinjenje navedeno u zahtevima od 1 do 5, naznačeno time da Ribude vodonik, hidroksi, C2-04alkenil ili d-C4 alkoksi.

8.Jedinjenje navedeno u zahtevima od 1 do 5, naznačeno time da R-ibude vodonik, hidroksi, fluoro, metoksi, ciklopentil, n-propil, ili alil.

9.Jedinjenje navedeno u zahtevima od 1 do 8, naznačeno time da R2 bude d-d2 alkil, C3-08alkenil ili C3-C6alkinil; cikloalkil(d-C6 alkil)-; fenil(d-C8 alkil)-, fenil(C3-C6alkenil)- ili fenil(C3-C6alkinil)-opciono supstituisani u fenilni prsten; heteroaril(d-C6alkil)-, heteroaril(C3-C6alkenil)- ili heteroaril(C3-d alkinil)- opciono supstituisani u heteroarilni prsten; 4-fenilfen<y>1(d-C6alkil)-, 4-fenilfenil(C3-C6alkenil)-, 4-fenilfenil(C3-C6alkinil)-, 4-heteroarilfenil (d-C6alkil)-. 4-heteroarilfenil(C3-C6alkenil)-, 4-heteroarilfenil(C3-C6alkinil)-, opciono supstituisani u terminalni fenilni ili heteroarilni prsten; ili fenoksi(d-C6alkil)- ili heteroariloksi(d-C6alkil)- opciono supstituisani fenilni ili heteroarilni prsten.

10.Jedinjenje navedeno u zahtevima od 1 do 8, naznačeno time da R2 bude metil, etil, n- ili izo-propil, n-, izo- ili tercijarni-butil, n-pentil, n-heksil, n-heptil, n-nonil, n-decil, prop-2-in-1-il, cikloheksiletil, ciklopentilmetil, 3-fenilprop-2-in-1-il, 3-(2-hlorofenil)prop-2-in-1-il, benzil fenilpropil, 4-hlorofenilpropil, 4-metilfenilpropil, 4-metoksifenilpropil, fenoksibutil, 3-(4-piridilfenil)propil-, 3-(4-(4-piridil)fenil)prop-2-in-1 -il, 3-(4-fenilfe-nil)propil-, 3-(4-fenii)fenil)prop-2-in-1-il ili 3-[(4-hlorofenil)fenil]propik

11. Jedinjenje navedeno u zahtevima od 1 do 8, naznačeno time da R2 bude Ci-C4alkil, 3-8-ćlani cikloalkil-CrC4alkil- koji opciono sadrži 1-3 heteroatoma u prstenu koji se odabira iz N, 0 i S, ili aril-CrC4alkil.

12. Jedinjenje navedeno u zahtevima od 1 do 8, naznačeno time da R2 bude benzil, n-butil, iso-butil, n-heksil, ciklopentilmetil, 4-etoksifenilpropil ili fenilpropil.

13. Jedinjenje navedeno u ma kom od prethodnih zahteva, naznačeno time da R3 bude Ci-C6alkil, fenil, 2,- 3-, ili 4-piridil, 2- ili 3-tienil, 2,- 3-, ili 4-hidroksifenil, 2,- 3-, ili 4-metoksifenil, 2,- 3-, ili 4-piridilmetil, benzil, 2,- 3-, ili 4-hidroksibenzil, 2,- 3-, ili 4-benziloksibenzil, 2,- 3-, ili 4-CrC6alkoksi-benzil, ili benziloksi (d-Cealkil)-; ili karakterišuća grupa prirodne alfa amino kiseline, kojoj se može zaštiti svaka funkcionalna grupa, svaka amino grupa može biti acilirana, a svaka prisutna karboksilna grupa može da bude amidirana; ili grupa -[Alk]r,R6 gde je Alk jedna (CrC6)alkil ili (C2-C6)alkenil grupa opciono prekinuta jednim ili više -0-, ili -S- atoma ili -N(R7)-grupa [gde je R7 vodonikov atom ili (d-C6)alkil grupa], n je 0 ili 1, a R6 je opciono supstituisana cikloalkil ili cikloalkenil grupa; ili benzil grupa supstituisana u fenilnom prstenu grupom formule - OCH2COR6gde je R6 hidroksil, amino, (CrC6)alkoksi, fenil(d-C6)alkoksi, (CrC5) alkilamino, di((C1-C6)alkil)amino, fenil(Cj-C6)alkilamino, ostatak amino kiseline ili njihovog kiselog halida, estera ili amidnog derivata, gde je taj ostatak povezan preko amidne veze, a pomenuta amino kiselina je odabrana iz sledećih: glicin, alfa ili beta alanin, valin, leucin, isoleucin, fenilalanin, tirozin, triptofan, serin, treonin, cistein, metionin, asparagin, glutamin, lizin, histidin, arginin, glutamična kiselina i aspartična kiselina, ili heterocikclična(Ci-C6)alkil grupa, bilo nesupstituisana ili mono- ili di-supstituisana u heterocikličnom prstenu sa sledećim: halo, nitro, karboksi, (d-C6)alkoksi, cijano, (d-C6)alkanoil, trifluorometil (d-C6) alkil, hidroksi, formil, amino,(C1-C6)alkilamino, di-(Ci-C6)alkilamino, mercapto, (d-C6)a!kiltio, hidroksi (d-C6) alkil, mercapto (d-C6)alkil ili (d-C6)alkilfenilmetil; ili grupa -CRaRbR, u kojoj: svaki od Ra, Rbi R, je nezavisno vodonik, (d-C6)alkil, (C2-C6)alkenil, (C2-C6)alkinil, fenil(d-Cs) alkil, (C3-C8) cikloalkil; ili Rcje vodonik, a Rai Rbsu nezavisno fenil ili heteroaril kao što je piridil; ili Rcis vodonik, (d-C6)alkil, (C2-C6)alkenil, (C2-C6)alkinil, fenil(d-C6)alkil, ili (C3-C6)cikloalkil, a Rai Rb zajedno sa ugljenikovim atomom za koji su spojeni čine 3- do 8-člani cikloalkil ili jedan 5- do 6-člani heterociklični prsten, ili Ra, Rband Rczajedno sa ugljenikovim atomom za koji su spojeni čine triciklični prsten (na primer adamantil); ili Rai Rbsu svaki nezavisno (d-C6)alkil, (C2-C6)alkenil, (C2-C6)alkinil, fenil{d-C6)alkil, ili grupa kao što je definisano za Rc dole izuzimajući vodonik, ili Rai Rb zajedno sa ugljenikovim atomom za koji su spojeni čine jedan cikloalkilni ili heterociklični prsten, a Rcje vodonik, -OH, -SH, halogen, -CN, - C02H, (d-C4) perfluoroalkil, -CH2OH, -C02(d-C6)alkil, -0{CrC6)alkil, -0(C2-C6)alkenil, -S{d-Cs)alkil, - SO(d-C6)alkil, - S02(d-C6) alkil, -S(C2-C6)alkenil, -SO(C2-C6)alkenil, -S02(C2-C6)alkenil ili grupa -Q-W naznačeno ime da Q predstavlja jednu vezu ili -O-, -S-, -SO- ili -S02- dok W predstavlja fenil, fenilalkil, (C3-C8)cikloalkil, (C3-C6) cikloalkilalkil, (C4-C8)cikloalkenil, (C4-C8)cikloalkenilalkil, heteroaril ili heteroarilalkil grupu, gde grupa W može opciono da bude supstituisana jednim ili više supstituenata nezavisno izabranim iz sledećih: hidroksil, halogen, - CN, -C02H, -C02(d-C6)alkil, -CONH2l- CONH(d-C5)alkil, - CONH(d-C6alky1)2, -CHO, -CH2OH, (d-C4) perfiuoroalkil, - 0(d-C6)alkil, -S(d-C6)alkil, -SO(d-C6)alkil, -502(d-C6)alkil,- N02, -NH2, -NH(d-C6) alkil, -N(C,-C6)alky1)2, -NHCO(d-C6)alkil, (d-C6)alkil, (C2-C6)alkenil, (C2-C5)alkinil, (C3-C8)cikloalkil, (C4-C8)cikloalkenil, fenil ili benzil.

14. Jedinjenje navedeno u zahtevima od 1 do 12, naznačeno time da R3 bude benzil benzil, fenil, cikloheksilmetil, piridin-3-imetil, tercijarni-butoksimetil, izo-propil, izo-butil, sec-butil, tercijarni-butil, 1-benziltio-1-metiletil, 1 -metiltio-1 -metiletil, ili 1-mercapto-1-metiletfiil. is.

Jedinjenje navedeno u zahtevima od 1 do 12, naznačeno time da R3 bude (d-C4)alkil ili aril.

16. Jedinjenje navedeno u zahtevima od 1 do 12, naznačeno time da R3 bude benzil, tercijarni-butoksimetil, izo-propil, tercijarni-butil, ili izo-butil.

17. Jedinjenje navedeno u ma kom od prethodnih zahteva, naznačeno time da R4bude opciono supstituisani (Ci-C6)alkil; (C3-C8) cikloalkil; fenil; monociklični heterociklični; ili monociklični heteroaril.

18. Jedinjenje navedeno u zahtevima od 1 do 16, naznačeno time da R4 bude d-C4 alkil, aril, heteroaril, 3-8-člani cikloalkil koji opciono sadrži1-3 heteroatoma u pristenu koji se odabira iz sledećih: N, O i S, aril-CrC4alkil ili heteroaril-d-d alkil.

19. Jedinjenje navedeno u zahtevima od 1 do 16, naznačeno time da R4 bude opciono supstituisani metil, etil, n- ili izo-propil, prop-2-il, tercijarni-butil, ciklopropil, ciklopentil; fenil; morfolino; tienil ili furanil.

20. Jedinjenje navedeno u zahtevu 2 naznačeno time da Rtbude -OH; W bude - C(=0)NHOH, X bude -0- i R3bude tercijarni-butil.

21. Jedinjenje navedeno u zahtevu 2 naznačeno time da Ribude -OH; W bude - C(=0)NHOH, X bude -0-, R3 bude tercijarni-butil, i R2 bude C1-C12 alkil, ili fenil(d-C12 alkil)- ili heteroaril(d-C6)alkil)- koji su opciono supstituisani u fenil ili heteroaril prsten.

22. Jedinjenje navedeno u zahtevu 2 naznačeno time da Rtbude -OH; W bude - C(=0)NHOH, X bude -0-, R3 bude tercijarni-butil, i R2 bude fenilpropil- ili etoksifenilpropil.

23. Jedinjenje navedeno u zahtevu 2 naznačeno time da Ribude -OH; W bude - C(=0)NHOH, X bude -0-, R3je tercijarni-butil, i R4 je razgranati d-C12 alkil, cikloalkil, fenil, heteroaril, fenil(CrC8alkil)- ili heteroaril(d-C6)alkil)-.

24. Jedinjenje navedeno u zahtevu 2 naznačeno time da Ribude -OH; W bude - C(=0)NHOH, X je - O-, R3 je tercijarni-butil, R2 is etoksifenilpropil i R4 je fenil ili heteroaril.

25. Jedinjenje navedeno u zahtevu 3 naznačeno time W bude -C(=0)NHOH i X bude -0-.

26. Jedinjenje navedeno u zahtevu 3 naznačeno time W bude -C(=0)NHOH, X je - O-, i R3 je tercijarni-butil.

27. Jedinjenje navedeno u zahtevu 3 naznačeno time W bude -C(=0)NHOH, X je - O-, i Rije -OH, d-C6alkoksi, ili C2-C6alkenil.

28. 2S-Hidroksi-3R-HS-(5-tiofen-2-041, 2, 4]oksadiazol-3-il)-2.2-dimetil-propilkarbamoil]-5-metil heksanohidroksamična kiselina; i 2S-Hidroksi-3R-0 S-(5-furan-2-il-[1, 2, 4]oksadiazol-3-y1]-2,2-dimetil-propilkarbamoil1-5-metil heksanohidroksamična kiselina i njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati i solvati.

29. Jedinjenje navedeno u ma kom od prethodnih zahteva, od 1 do 28 za upotrebu u humanoj ili veterinarskoj medicini.

30. Farmaceutski ili veterinarski proizvod koji uključuje jedinjenje opisano u ma kom od prethodnih zahteva.

31. Upotreba jedinjenja navedenog u ma kom od prethodnih zahteva , od 1 do 29 za pripremu medikalmenta za lečenje ili profilaksu bolesti posredovanih preko MMP-a.

32. Upotreba u skladu sa zahtevom 31, naznačeno ime da je taj medikament za upotrebu kod sisara.

33. Upotreba u skladu sa zahtevima 31 ili 32, naznačeno time da je ta bolest resorpcija kosti, rast tumora ili invazija sekundarnim metastazama, reumatoidni artritis, septični artritis, osteoartritis, peridontitis, gingivitis, kornealna ulceracija, neuroinflamatorni poremećaji, npr. multipla skleroza, restenoza, emfizem, fibrotična bolest, npr. fibroza jetre i cistična fibroza, hronična opstruktivna plućna bolest, bronhitis; astma; autoimune bolesti, odbacivanje transplantata (npr. bolest kačlem protiv domaćina), cistična fibroza, psorijaza, psorijatični artritis; degenerativno propadanje hrskavice, inflamatorna gastrična stanja, npr. Kronova bolest, zapaljenska bolest creva i ulcerozni kolitis, atopijski dermatitis, epi-dermolysis bullosa; ulceracija epiderma, neuropatija ili nefropatija, npr. intersticijalni nefritis, glomerulonefritis i bubrežna insuficijencija; upala oka, ciroza jetre, Sjoegrenov sindrom ; ili zapaljensko stanje nervnog sistgema.

34. Upotreba u skladu sa zahtevima 31 ili 32, naznačeno time da je ta bolest multipla skleroza, emfizem, ciroza jetre, cistična fibroza, hronična opstruktivna plućna bolest, Kronova bolest, ili skleroza jetre.

35. Upotreba u skladu sa zahtevom 32, naznačeno time da je ta bolest hepatitis.

36. Proces za pripremu jedinjenja navedenog u zahtevu 1 u kome je W hidroksamična kisela grupa HONH (C=0)-, gde taj proces generiše kiselinu opšte formule (IIA) ili (IIB) Ili njihovi aktivirani derivati koji ulaze u reakciju sa sledećim: hidroksilamine, O-zaštićeni hidroksilamin, ili N,0-diprotektovani hidroksilamin, ili njihova so, pri čemu X, Ri, R2, R3, i R4ostaju kako su definisani u zahtevu 1 osim što su svi supstituenti u R,, R2, R3, i R4 koji su potencijalno reaktivni sa hidroksilaminom, O-protektovanim hidroksilaminom, N.O-diprotektovanim hidroksilaminom ili njihovim solima opciono i sami zaštićeni od takve reakcije, potom uklanjajući sve zaštitne grupe iz rezultujućeg hidroksiamičnog sastava i iz svih zaštićenih supstituenata u R^ R2, R3, i R4.

37. Proces za pripremu jedinjenja navedenog u zahtevu 1 naglašeno time da W bude jedna N-formilhidroksilamino grupa H(C=0)NH(OH)- gde taj proces uključuje N-formulaciju odgovarajućeg jedinjenja u kome W biva -NH(OP), naznačeno time da P bude jedna O-protektivna grupa, i potom uklanjajući O-protektivnu grupu P.

38. Proces za pripremu jedinjenja navedenog u zahtevu 1 naglašeno time da W bude jedna karboksilna kisela grupa -COOH, gde taj proces uključuje: kupliranje kiseline iz formule (III) ili njenog aktiviranog derivata aminom iz formule (IVA) ili (IVB) naznačeno time da X, R, R2, R3, i R4 budu kako je to definisano u zahtevu 1 osim što svi supstituenti u Rl R2, R3, i R4 koji su potencijalno reaktivni u reakciji kupliranja mogu i sami da budu zaštićeni od takve reakcije, a Rnpredstavlja jednu hidroksi protektivnu grupu, i potom uklanjanje protektivne grupe Rni svih protektivnih grupa sa RiR2, R3, i R4.