Deprecated: The each() function is deprecated. This message will be suppressed on further calls in /home/zhenxiangba/zhenxiangba.com/public_html/phproxy-improved-master/index.php on line 456
RS65443B1 - Inhibitori kalikreina humane plazme - Google Patents
[go: Go Back, main page]

RS65443B1 - Inhibitori kalikreina humane plazme - Google Patents

Inhibitori kalikreina humane plazme

Info

Publication number
RS65443B1
RS65443B1 RS20240467A RSP20240467A RS65443B1 RS 65443 B1 RS65443 B1 RS 65443B1 RS 20240467 A RS20240467 A RS 20240467A RS P20240467 A RSP20240467 A RS P20240467A RS 65443 B1 RS65443 B1 RS 65443B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
alkyl
mmol
fluorophenyl
cyanophenyl
aryl
Prior art date
Application number
RS20240467A
Other languages
English (en)
Inventor
Pravin L Kotian
Yarlagadda S Babu
V Satish Kumar
Weihe Zhang
Lakshminarayana Vogeti
Original Assignee
Biocryst Pharm Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Biocryst Pharm Inc filed Critical Biocryst Pharm Inc
Publication of RS65443B1 publication Critical patent/RS65443B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/10—Anti-acne agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/10—Antioedematous agents; Diuretics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)

Description

Opis
POZADINA PRONALASKA
[0001] Serinske proteaze čine najveću i najintenzivnije proučavanu grupu proteolitičkih enzima. Njihova ključna uloga u fiziološkim procesima proteže se na tako različite oblasti kao što su koagulacija krvi, fibrinoliza, aktivacija komplementa, reprodukcija, varenje, i oslobađanje fiziološki aktivnih peptida. Mnogi od ovih vitalnih procesa počinju isecanjem jedne peptidne veze ili nekoliko peptidnih veza u prekursorskom proteinu ili peptidima. Sekvencijalne ograničene proteolitičke reakcije ili kaskade uključene su u zgrušavanje krvi, fibrinolizu, i aktivaciju komplementa. Biološki signali za pokretanje ovih kaskada mogu se takođe kontrolisati i amplifikovati. Slično, kontrolisana proteoliza može isključiti ili inaktivirati proteine ili peptide putem isecanja jedne veze.
[0002] Kalikreini su podgrupa serinskih proteaza. Kod ljudi, kalikrein plazme (KLKB1) nema poznati homolog, dok kalikreinu-srodne peptidaze (KLK) kodiraju porodicu od petnaest blisko srodnih serinskih proteaza. Kalikrein plazme učestvuje u brojnim putevima koji se odnose na unutrašnji put koagulacije, inflamaciju, i sistem komplementa.
[0003] Koagulacija je proces kojim se stvaraju krvni ugrušci, na primer kako bi se zaustavilo krvarenje. Fiziologija koagulacije je donekle složena utoliko što uključuje dva odvojena inicijalna puta, koji se spajaju u krajnji zajednički put koji vodi do formiranja ugrušaka. U krajnjem zajedničkom putu, protrombin se konvertuje u trombin, koji zauzvrat konvertuje fibrinogen u fibrin, koji je glavni gradivni blok unakrsno povezanih fibrinskih polimera koji formiraju hemostatski čep. Od dva inicijalna puta uzvodno od krajnjeg zajedničkog puta, jedan je poznat kao kontaktna aktivacija ili unutrašnji put, i drugi je poznat kao posredovan tkivnim faktorom ili spoljašnji put.
[0004] Unutrašnji put počinje formiranjem primarnog kompleksa na kolagenu od strane kininogena velike molekulske težine (HMWK), prekalikreina, i FXII (faktor XII; Hagemanov faktor). Prekalikrein se konvertuje u kalikrein, i FXII se aktivira da postane FXIIa. FXIIa zatim konvertuje faktor XI (FXI) u FXIa, i FXIa zauzvrat aktivira faktor IX (FIX), koji sa svojim kofaktorom FVIIIa formira kompleks "tenaze", koji aktivira faktor X (FX) u FXa. FXa je taj koji je odgovoran za konverziju protrombina u trombin unutar krajnjeg zajedničkog puta.
[0005] Prekalikrein, neaktivni prekursor kalikreina plazme, sintetiše se u jetri i cirkuliše u plazmi vezan za HMWK ili kao slobodni zimogen. Prekalikrein se iseca od strane aktiviranog faktora XII (FXIIa) kako bi se oslobodio aktivirani kalikrein plazme (PK). Aktivirani kalikrein plazme pokazuje aktivnost endopeptidaze prema peptidnim vezama posle arginina (poželjno) i lizina. PK zatim generiše dopunski FXIIa u povratnoj petlji koja zauzvrat aktivira faktor XI (FXI) u FXIa kako bi se povezao na zajednički put. Iako je inicijalna aktivacija unutrašnjeg puta preko male količine FXIIa koja aktivira malu količinu PK, naknadna povratna aktivacija FXII od strane PK je ta koja kontroliše stepen aktivacije unutrašnjeg puta, i stoga nizvodnu koagulaciju. Hathaway, W. E., et al. (1965) Blood 26:521-32.
[0006] Aktivirani kalikrein plazme takođe iseca HMWK kako bi oslobodio moćni vazodilatatorni peptid bradikinin. Takođe je u stanju da iseca brojne neaktivne prekursorske proteine kako bi generisao aktivne proizvode, kao što su plazmin (iz plazminogena) i urokinaza (iz prourokinaze). Plazmin, regulator koagulacije, proteolitički iseca fibrin u produkte degradacije fibrina koji inhibiraju prekomerno formiranje fibrina.
[0007] Pacijenti koji su pretrpeli akutni infarkt miokarda (MI) pokazuju kliničke dokaze da su u hiperkoagulabilnom stanju (koje podstiče zgrušavanje). Ova hiperkoagulabilnost je paradoksalno dopunski pogoršana kod onih koji primaju fibrinolitičku terapiju. Povećano generisanje trombina, mereno nivoima trombin-antitrombina III (TAT), uočeno je kod pacijenata koji su podvrgnuti takvom lečenju u poređenju sa već visokim nivoima uočenim kod onih koji primaju samo heparin. Hoffmeister, H. M. et al. (1998) Circulation 98:2527-33. Predloženo je da je povećanje trombina rezultat plazminom posredovane aktivacije unutrašnjeg puta direktnom aktivacijom FXII od strane plazmina.
[0008] Ne samo da fibrinolizom indukovana hiperkoagulabilnost dovodi do povećane stope reokluzije, već je verovatno i odgovorna, barem delimično, za neuspeh u postizanju potpune fibrinolize ugruška (tromba), što je glavni nedostatak fibrinolitičke terapije (Keeley, E. C. et al. (2003) Lancet 361: 13-20). Sledeći problem u fibrinolitičkoj terapiji je prateći povećani rizik od intrakranijalnog krvarenja. Menon, V. et al. (2004) Chest 126:549S-575S; Kolaborativna grupa istraživača fibrinolitičke terapije (1994) Lancet 343:311-22. Stoga bi od velike koristi bila pomoćna antikoagulantna terapija koja ne povećava rizik od krvarenja, ali inhibira formiranje novog trombina.
[0009] Prema tome, postoji potreba da se razviju dodatni inhibitori PK koji mogu da prevagnu u fibrinoliza/tromboza ravnoteži na okluzivnom trombu ka rastvaranju, čime se promoviše reperfuzija i slabi hiperkoagulabilno stanje, čime se sprečava da se tromb ponovo formira i reokludira sud.
SAŽETAK PRONALASKA
[0010] U određenim aspektima, pronalazak obezbeđuje jedinjenja formule (I), i njihove farmaceutski prihvatljive soli:
pri čemu, nezavisno za svako javljanje:
R<1>predstavlja -OH, -OR<c>, -NH2, -NHR<c>, -NR<c>R<d>, (C1-C10)alkil, (C6-C10)aril, (C6-C10)aril(C1-C10)alkil, heteroaril, heteroaril(C1-C10)alkil, halo, halo(C1-C10)alkil, (C3-C12)cikloalkil, ((C3-C12)cikloalkil)(C1-C10)alkil, -C(O)R<c>, -C(O)OH, -C(O)OR<c>, -OC(O)R<c>, -C(O)NH2, -C(O)NHR<c>, -C(O)NR<c>R<d>, -NHC(O)R<c>, ili -NR<c>C(O)R<d>;
W je -C(O)NH-;
R<2>predstavlja opciono supstituisani (C6-C10)aril ili heteroaril;
V predstavlja opciono supstituisani (C6-C10)aril ili heteroaril;
Z je odsutan ili predstavlja jedan ili više supstituenata koji su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od halo, halo(C1-C10)alkila, -NO2, -CN, -C(O)R<c>, -C(O)OH, -C(O)OR<c>, -OC(O)R<c>, -C(O)NH2, -C(O)NHR<c>, -C(O)NR<c>R<d>, -NHC(O)R<c>, -N(R<c>)C(O)R<d>, - OS(O)p(R<c>), -NHS(O)p(R<c>), i -NR<c>S(O)p(R<c>);
X predstavlja -C(NH2)-, -C(NH(R<c>))-, -C(NR<c>R<d>)-, -C(NHS(O)pR<c>)-, -C(NHC(O)R<c>)-, -C(NHC(O)NH2)-, -C(NHC(O)NHR<c>)-, -C(NHC(O)NR<c>R<d>)-, -C(OH)-, -C(O((C1-C10)alkil))-, -C(N3)-, -C(CN)-, -C(NO2)-, -C(S(O)nR<a>)-, -C[-C(=O)R<c>]-, -C[-C(=O)NR<c>R<d>]-, -C[-C(=O)SR<c>]-, -C[-S(O)R<c>]-, -C[-S(O)2R<c>]-, -C[S(O)(OR<c>)]-, -C[S(O)2(OR<c>)]-, -C[-SO2NR<c>R<d>]-, -C(halogen)-, -C((C1-C10)alkil), -C(((C3-C12)cikloalkil)(C1-C10)alkil), -C((C2-C10)alkenil)-, -C((C2-C10)alkinil)-, ili -C((C6-C10)aril(C1-C10)alkil)-;
R<3>predstavlja opciono supstituisani (C6-C10)aril, heteroaril, (C3-C12)cikloalkil, ili heterocikloalkil;
R<3a>je odsutan ili predstavlja jedan ili više supstituenata koji su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od halo, hidroksi, (C1-C10)alkila, -CF3, -OCF3, (C1-C10)alkoksi, (C6-C10)arila, heteroarila, (C6-C10)ariloksi, amino, amino(C1-C10)alkila, -C(O)NH2, cijano, -NHC(O)(C1-C10)alkila, -SO2(C1-C10)alkila, -SO2NH2, (C3-C12)cikloalkila, -(CH2)rOR<a>, -NO2, -(CH2)rNR<a>R<b>, -(CH2)rC(O)R<a>, -NR<a>C(O)R<b>, -C(O)NR<c>R<d>, -NR<a>C(O)NR<c>R<d>, -C(=NR<a>)NR<c>R<d>, -NHC(=NR<a>)NR<c>R<d>, -NR<a>R<b>, -SO2NR<c>R<d>, -NR<a>SO2NR<c>R<d>, -NR<a>SO2(C1-C10)alkila, -NR<a>SO2R<a>, -S(O)pR<a>, -(CF2)rCF3, -NHCH2R<a>, -OCH2R<a>, -SCH2R<a>, -NH(CH2)2(CH2)rR<a>, -O(CH2)2(CH2)rR<a>, ili -S(CH2)2(CH2)rR<a>;
Y predstavlja vezu; ili -Y-R<4>predstavlja opciono supstituisani -(C1-C10)alkilen-R<4>, -CH2C(O)-R<4>, -CH2NH-R<4>, -CH2N((C1-C10)alkil)-R<4>, -CR<a>R<b>-R<4>, -NH-R<4>, -NHCH2-R<4>, -NHC(O)-R<4>, -N((C1-C10)alkil)-R<4>, -N((C1-C10)alkil)CH2-R<4>, -N((CH2)2OH)-R<4>, -N(((C3-C12)cikloalkil)(C1-C10)alkil)R<4>, -heterociklil-R<4>, -OR<4>, -OCH2-R<4>, -OC(O)-R<4>, -OC(O)NR<a>R<b>, -SCH2R<4>, ili -SR<4>;
R<4>predstavlja vodonik, hidroksi, opciono supstituisani (C1-C10)alkil, (C3-C12)cikloalkil, (heterocikloalkil)(C1-C10)alkil, ((C3-C12)cikloalkil)(C1-C10)alkil, -CH2OH, -CH((C1-C10)alkil)OH, -CH(NH2)CH((C1-C10)alkil)2, (C6-C10)aril, (C6-C10)aril(C1-C10)alkil, heteroaril, heteroaril(C1-C10)alkil, -CH2S((C1-C10)alkil), amino, ili cijano; ili -(CR<a>R<b>)r(CR<a>R<b>)p- fuzionisan za poziciju 4 prstena koji nosi Z kako bi se formirao 5- do 7-člani heterociklični prsten sa opcionionim supstituentima; ili,
kada je R<3>fenil, R<4>može predstavljati -NR<a>- fuzionisan za poziciju orto prema X na tom fenilu;
svaki R<a>i R<b>je nezavisno H, (C1-C10)alkil, (C2-C10)alkenil, (C2-C10)alkinil, (C6-C10)aril(C1-C10)alkil, ((C3-C12)cikloalkil)(C1-C10)alkil, -C(=O)R<c>, -C(=O)OR<c>, -C(=O)NR<c>R<d>, -C(=O)SR<c>, -S(O)R<c>, -S(O)2R<c>, -S(O)(OR<c>), ili -SO2NR<c>R<d>;
R<c>i R<d>predstavljaju, nezavisno za svako javljanje, opciono supstituisani (C1-C10)alkil, (C2-C10)alkenil, (C2-C10)alkinil, halo(C1-C10)alkil, (C6-C10)aril, (C6-C10)aril(C1-C10)alkil, heteroaril, heteroaril(C1-C10)alkil, (C3-C12)cikloalkil, ((C3-C12)cikloalkil)(C1-C10)alkil, heterocikloalkil, (heterocikloalkil)(C1-C10)alkil, -C(O)(C1-C10)alkil, ili -S(O)p(alkil); ili R<c>i R<d>mogu biti uzeti zajedno tako da formiraju opciono supstituisani heterociklični prsten;
r je 0, 1, 2, ili 3;
n je ceo broj od 0 do 6; i
p je 0, 1, ili 2;
dodatno pri čemu:
"heteroaril" znači monociklični, biciklični, ili policiklični aromatični prsten koji ima 3-12 ukupnih atoma i najmanje jedan heteroatom koji je odabran iz grupe koja sa sastoji od azota, kiseonika, i sumpora;
"heterociklični", "heterocikloalkil", i "heterociklil" znače monociklični, biciklični, ili triciklični nearomatični prsten koji ima 3-12 ukupnih atoma i najmanje jedan heteroatom koji je odabran iz grupe koja sa sastoji od azota, kiseonika, i sumpora; i
"opciono supstituisano" znači nesupstituisano ili supstituisano sa jednim ili više supstituenata svaki nezavisno odabran iz grupe koja sa sastoji od halogena, azida, (C1-C10)alkila, (C6-C10)aril(C1-C10)alkila, (C2-C10)alkenila, (C2-C10)alkinila, (C3-C12)cikloalkila, hidroksila, (C1-C10)alkoksi, amino (npr. -NH2, -NH((C1-C6)alkil), -N((C1-C6)alkil)2), nitro, sulfhidrila, imino, amido, fosfonata, fosfinata, karbonila, karboksila, silila, etra, (C1-C10)alkiltio, sulfonila, sulfonamido, ketona, aldehida, estra, heterociklila, (C6-C10)arila, heteroarila, fluoro(C1-C10)alkila, cijano, -C(O)O(C1-C6)alkila, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6)alkila, -C(O)N((C1-C6)alkil)2, i (C1-C6)haloalkila.
[0011] U određenim aspektima, pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju, koja sadrži jedinjenje iz pronalaska, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0012] Varijante objave koje ne formiraju deo pronalaska obezbeđuju postupak lečenja ili preveniranja bolesti ili stanja koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme. Postupak sadrži korak primene subjektu kome je to potrebno terapijski efikasne količine jedinjenja iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, čime se leči ili prevenira bolest ili stanje koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme. U određenim aspektima, pronalazak obezbeđuje jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 16, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u lečenju ili prevenciji bolesti ili stanja koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme, pri čemu je bolest ili stanje koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme odabrana iz grupe koja se sastoji od moždanog udara, inflamacije, reperfuzione povrede, akutnog infarkta miokarda, duboke venske tromboze, stanja posle fibrinolitičkog lečenja, angine, edema, angioedema, naslednog angioedema, sepse, artritisa, krvarenja, gubitka krvi tokom kardiopulmonarnog bajpasa, inflamatorne bolesti creva, dijabetes melitusa, retinopatije, dijabetičke retinopatije, dijabetičkog makularnog edema, dijabetičke makularne degeneracije, makularnog edema koji je povezan sa starošću, makularne degeneracije koja je povezana sa starošću, proliferativne retinopatije, neuropatije, hipertenzije, edema mozga, povećanog izlučivanja albumina, makroalbuminurije, i nefropatije.
DETALJAN OPIS
[0013] Saopšteno je da su inhibitori kalikreina plazme korisni u terapijskim postupcima i kompozicijama koje su pogodne za upotrebu u eliminisanju ili redukovanju različitih oblika ishemije, uključujući ali ne ograničavajući se na perioperativni gubitak krvi, cerebralnu ishemiju, početak sistemskog inflamatornog odgovora, i/ili reperfuzionu povredu, npr. reperfuzionu povredu koja je povezana sa cerebralnom ishemijom ili fokalnom ishemijom mozga. Perioperativni gubitak krvi je rezultat invazivnih hirurških procedura koje dovode do kontaktne aktivacije komponenti komplementa i sistema koagulacije/fibrinolize. Inhibitori kalikreina mogu se upotrebljavati da redukuju ili preveniraju perioperativni gubitak krvi i sistemski inflamatorni odgovor kod pacijenata koji su podvrgnuti invazivnim hirurškim procedurama, naročito kardiotorakalnim operacijama. Inhibitori kalikreina se takođe mogu upotrebljavati da redukuju ili preveniraju cerebralnu ishemiju i moždani udar, i/ili reperfuzionu povredu koja je povezana sa cerebralnom ishemijom. Oni takođe mogu prevenirati neurološke i kognitivne deficite koji su povezani sa moždanim udarom, gubitkom krvi, i cerebralnom ishemijom, npr. događaje koji nisu povezani sa hirurškom intervencijom. Dodatni primeri primena inhibitora kalikreina uključuju pedijatrijsku kardiohirurgiju, transplantaciju pluća, potpunu zamenu kuka, i ortotopsku transplantaciju jetre, kako bi se redukovao ili prevenirao moždani udar tokom ovih procedura, kao i kako bi se redukovao ili prevenirao moždani udar tokom aortokoronarnog bajpasa (CABG) i ekstrakorporalne membranske oksigenacije (ECMO).
Definicije
[0014] Neodređeni članovi se ovde upotrebljavaju da označavaju jedan ili više od jednog (tj. najmanje jedan) gramatičkog oblika člana. Na primer, "element" znači jedan element ili više od jednog elementa.
[0015] Termin "heteroatom" je prepoznat u struci i označava atom bilo kog elementa osim ugljenika ili vodonika. Ilustrativni heteroatomi uključuju bor, azot, kiseonik, fosfor, sumpor i selen, i alternativno kiseonik, azot ili sumpor.
[0016] Termin "alkil" kao što se ovde upotrebljava je termin iz struke i označava zasićene alifatičke grupe, uključujući alkil grupe sa ravnim lancem, alkil grupe sa razgranatim lancem, cikloalkil (aliciklične) grupe, alkil supstituisane cikloalkil grupe, i cikloalkil supstituisane alkil grupe. U određenim primerima izvođenja, alkil sa ravnim ili razgranatim lancem ima oko 30 ili manje atoma ugljenika u svojoj okosnici (npr. C1-C30za ravan lanac, C3-C30za razgranati lanac), i alternativno, oko 20 ili manje, ili 10 ili manje. U određenim primerima izvođenja, termin "alkil" označava C1-C10alkil grupu sa ravnim lancem. U određenim primerima izvođenja, termin "alkil" označava C1-C6alkil grupu sa ravnim lancem. U određenim primerima izvođenja, termin "alkil" označava C3-C12alkil grupu sa razgranatim lancem. U određenim primerima izvođenja, termin "alkil" označava C3-C8alkil grupu sa razgranatim lancem. Reprezentativni primeri alkila uključuju, ali nisu ograničeni na, metil, etil, n-propil, izo-propil, n-butil, sek-butil, izobutil, terc-butil, n-pentil, izopentil, neopentil, i n-heksil.
[0017] Termin "cikloalkil" znači mono- ili biciklične ili premoštene zasićene karbociklične prstenove, od kojih svaki ima od 3 do 12 atoma ugljenika. Određeni cikloalkili imaju od 5-12 atoma ugljenika u svojoj strukturi prstena, i mogu imati 6-10 ugljenika u strukturi prstena.
Poželjno, cikloalkil je (C3-C7)cikloalkil, koji predstavlja monociklični zasićeni karbociklični prsten, koji ima od 3 do 7 atoma ugljenika. Primeri monocikličnih cikloalkila uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, ciklopentenil, cikloheksil, cikloheksenil, cikloheptil, i ciklooktil. Biciklični cikloalkilni sistemi prstenova uključuju premoštene monociklične prstenove i fuzionisane biciklične prstenove. Premošteni monociklični prstenovi sadrže monociklični cikloalkilni prsten gde su dva nesusedna atoma ugljenika monocikličnog prstena povezana alkilenskim mostom između jednog i tri dodatna atoma ugljenika (tj. premošćujuća grupa oblika -(CH2)w-, gde je w 1, 2, ili 3). Reprezentativni primeri bicikličnih sistema prstenova uključuju, ali nisu ograničeni na, biciklo[3.1.1]heptan, biciklo[2.2.1]heptan, biciklo[2.2.2]oktan, biciklo[3.2.2]nonan, biciklo[3.3.1]nonan, i biciklo[4.2.1]nonan. Fuzionisani biciklični cikloalkilni sistemi prstenova sadrže monociklični cikloalkilni prsten fuzionisan bilo za fenil, monociklični cikloalkil, monociklični cikloalkenil, monociklični heterociklil, ili monociklični heteroaril. Premošteni ili fuzionisani biciklični cikloalkil je prikačen za roditeljsku molekulsku funkcionalnu grupu preko bilo kog atoma ugljenika koji se nalazi unutar monocikličnog cikloalkilnog prstena. Cikloalkil grupe su opciono supstituisane. U određenim primerima izvođenja, fuzionisani biciklični cikloalkil je 5- ili 6-člani monociklični cikloalkilni prsten fuzionisan bilo za fenilni prsten, 5- ili 6-člani monociklični cikloalkil, 5- ili 6-člani monociklični cikloalkenil, 5- ili 6-člani monociklični heterociklil, ili 5- ili 6-člani monociklični heteroaril, pri čemu je fuzionisani biciklični cikloalkil opciono supstituisan.
[0018] Termin "cikloalkilalkil" kao što se ovde upotrebljava označava alkil grupu supstituisanu sa jednom ili više cikloalkil grupa. Primer cikloalkilalkila je cikloheksilmetil grupa.
[0019] Termin "heterociklil" kao što se ovde upotrebljava označava radikal nearomatičnog sistema prstena, uključujući, ali ne ograničavajući se na, monociklične, biciklične, i triciklične prstenove, koji mogu biti potpuno zasićeni ili koji mogu sadržati jednu ili više jedinica nezasićenosti, kako bi se izbegla sumnja, stepen nezasićenosti ne dovodi do sistema aromatičnog prstena, i ima 3 do 12 atoma uključujući najmanje jedan heteroatom, kao što su azot, kiseonik, ili sumpor. U svrhu ilustracije, koju ne treba tumačiti kao ograničavanje obima ovog pronalaska, sledeći su primeri heterocikličnih prstenova: aziridinil, azirinil, oksiranil, tiiranil, tiirenil, dioksiranil, diazirinil, diazepanil, 1,3-dioksanil, 1,3-dioksolanil, 1,3-ditiolanil, 1,3-ditianil, imidazolidinil, izotiazolinil, izotiazolidinil, izoksazolinil, izoksazolidinil, azetil, oksetanil, oksetil, tietanil, tietil, diazetidinil, dioksetanil, dioksetenil, ditietanil, ditietil, dioksalanil, oksazolil, tiazolil, triazinil, izotiazolil, izoksazolil, azepini, azetidinil, morfolinil, oksadiazolinil, oksadiazolidinil, oksazolinil, oksazolidinil, oksopiperidinil, oksopirolidinil, piperazinil, piperidinil, piranil, pirazolinil, pirazolidinil, pirolinil, pirolidinil, kvinuklidinil, tiomorfolinil, tetrahidropiranil, tetrahidrofuranil, tetrahidrotienil, tiadiazolinil, tiadiazolidinil, tiazolinil, tiazolidinil, tiomorfolinil, 1,1-dioksidotiomorfolinil (tiomorfolin sulfon), tiopiranil, i tritianil. Heterociklil grupa je opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata kao što je opisano u nastavku.
[0020] Termin "heterocikloalkilalkil" kao što se ovde upotrebljava označava alkil grupu supstituisanu sa jednom ili više heterocikloalkil (tj. heterociklil) grupa.
[0021] Termin "alkenil" kao što se ovde upotrebljava znači ugljovodonični radikal sa ravnim ili razgranatim lancem koji sadrži od 2 do 10 ugljenika i koji sadrži najmanje jednu dvostruku vezu ugljenik-ugljenik formiranu uklanjanjem dva vodonika. Reprezentativni primeri alkenila uključuju, ali nisu ograničeni na, etenil, 2-propenil, 2-metil-2-propenil, 3-butenil, 4-pentenil, 5-heksenil, 2-heptenil, 2-metil-1-heptenil, i 3-decenil. Nezasićena(e) veza(e) alkenil grupe mogu biti locirane bilo gde u funkcionalnoj grupi i mogu imati bilo (Z) ili (E) konfiguraciju oko dvostruke(ih) veze(a).
[0022] Termin "alkinil" kao što se ovde upotrebljava znači ugljovodonični radikal sa ravnim ili razgranatim lancem koji sadrži od 2 do 10 atoma ugljenika i koji sadrži najmanje jednu trostruku vezu ugljenik-ugljenik. Reprezentativni primeri alkinila uključuju, ali nisu ograničeni na, acetilenil, 1-propinil, 2-propinil, 3-butinil, 2-pentinil, i 1-butinil.
[0023] Termin "alkilen" je prepoznat u struci, i kao što se ovde upotrebljava, označava diradikal koji je dobijen uklanjanjem dva atoma vodonika alkil grupe, kao što je prethodno definisano. U jednom primeru izvođenja alkilen označava disupstituisani alkan, tj. alkan supstituisan na dve pozicije sa supstituentima kao što su halogen, azid, alkil, aralkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, hidroksil, alkoksil, amino, nitro, sulfhidril, imino, amido, fosfonat, fosfinat, karbonil, karboksil, silil, etar, alkiltio, sulfonil, sulfonamido, keton, aldehid, estar, heterociklil, aromatične ili heteroaromatične funkcionalne grupe, fluoroalkil (kao što je trifluorometil), cijano, i slično. To jest, u jednom primeru izvođenja, "supstituisani alkil" je "alkilen".
[0024] Termin "amino" je termin iz struke i kao što se ovde upotrebljava označava i nesupstituisane i supstituisane amine, npr. funkcionalnu grupu koja može biti predstavljena pomoću opštih formula:
pri čemu Ra, Rb, i Rcsvaki nezavisno predstavljaju vodonik, alkil, alkenil, -(CH2)x-Rd, ili Rai Rb, uzeti zajedno sa atomom N za koji su prikačeni čine heterocikl koji ima od 4 do 8 atoma u strukturi prstena; Rdpredstavlja aril, cikloalkil, cikloalkenil, heterociklil ili policiklil; i x je nula ili ceo broj u opsegu od 1 do 8. U određenim primerima izvođenja, samo jedan od Raili Rbmože biti karbonil, npr. Ra, Rb, i azot zajedno ne formiraju imid. U drugim primerima izvođenja, Rai Rb(i opciono Rc) svaki nezavisno predstavljaju vodonik, alkil, alkenil, ili -(CH2)x-Rd. U određenim primerima izvođenja, termin "amino" označava -NH2.
[0025] Termin "amido", kao što se ovde upotrebljava, znači -NHC(=O)-, pri čemu je amido grupa vezana za roditeljsku molekulsku funkcionalnu grupu preko azota. Primeri amida uključuju alkilamido kao što su CH3C(=O)N(H)- i CH3CH2C(=O)N(H)-.
[0026] Termin "acil" je termin iz struke i kao što se ovde upotrebljava označava bilo koju grupu ili radikal u obliku RCO- gde je R bilo koja organska grupa, npr. alkil, aril, heteroaril, aralkil, i heteroaralkil. Reprezentativne acil grupe uključuju acetil, benzoil, i malonil.
[0027] Termin "aminoalkil" kao što se ovde upotrebljava označava alkil grupu supstituisanu sa jednom ili više amino grupa. U jednom primeru izvođenja, termin "aminoalkil" označava aminometil grupu.
[0028] Termin "aminoacil" je termin iz struke i kao što se ovde upotrebljava označava acil grupu supstituisanu sa jednom ili više amino grupa.
[0029] Termin "aminotionil" kao što se ovde upotrebljava označava analog aminoacila u kome je O iz RC(O)- zamenjen sumporom, pa je stoga u obliku RC(S)-.
[0030] Termin "fosforil" je termin iz struke i kao što se ovde upotrebljava može uopšteno biti predstavljen pomoću formule:
pri čemu Q50 predstavlja S ili O, i R59 predstavlja vodonik, niži alkil ili aril; na primer, -P(O)(OMe)- ili -P(O)(OH)2. Kada se upotrebljava za supstituciju, npr. alkila, fosforil grupa fosforilalkila može biti predstavljena pomoću opštih formula:
pri čemu su Q50 i R59, svaki nezavisno, prethodno definisani, i Q51 predstavlja O, S ili N; na primer, -OP(O)(OH)OMe ili -NH-P(O)(OH)2. Kada je Q50 S, fosforil funkcionalna grupa je "fosforotioat".
[0031] Termin "aminofosforil" kao što se ovde upotrebljava označava fosforil grupu supstituisanu sa najmanje jednom amino grupom, kao što je ovde definisano; na primer, -P(O)(OH)NMe2.
[0032] Termin "azid" ili "azido", kao što se ovde upotrebljava, znači -N3grupu.
[0033] Termin "karbonil" kao što se ovde upotrebljava označava -C(=O)-.
[0034] Termin "tiokarbonil" kao što se ovde upotrebljava označava -C(=S)-.
[0035] Termin "alkilfosforil" kao što se ovde upotrebljava označava fosforil grupu supstituisanu sa najmanje jednom alkil grupom, kao što je ovde definisano; na primer, -P(O)(OH)Me.
[0036] Termin "alkiltio" kao što se ovde upotrebljava označava alkil-S-.
[0037] Termin "karboksi", kao što se ovde upotrebljava, znači -CO2H grupu.
[0038] Termin "aril" je termin iz struke i kao što se ovde upotrebljava označava monociklične, biciklične i policiklične aromatične ugljovodonične grupe, na primer, benzen, naftalen, antracen, i piren. Aromatični prsten može biti supstituisan na jednoj ili više pozicija u prstenu sa jednim ili više supstituenata, kao što su halogen, azid, alkil, aralkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, hidroksil, alkoksil, amino, nitro, sulfhidril, imino, amido, fosfonat, fosfinat, karbonil, karboksil, silil, etar, alkiltio, sulfonil, sulfonamido, keton, aldehid, estar, heterociklil, aromatične ili heteroaromatične funkcionalne grupe, fluoroalkil (kao što je trifluorometil), cijano, ili slično. Termin "aril" takođe uključuje policiklične sisteme prstenova koji imaju dva ili više cikličnih prstenova u kojima su dva ili više ugljenika zajednička za dva susedna prstena (prstenovi su "fuzionisani prstenovi") pri čemu je najmanje jedan od prstenova aromatični ugljovodonik, npr. drugi ciklični prstenovi mogu biti cikloalkili, cikloalkenili, cikloalkinili, arili, heteroarili, i/ili heterociklili. U određenim primerima izvođenja, termin "aril" označava fenil grupu. U određenim primerima izvođenja, "aril" ima od 6 do 10 atoma ugljenika.
[0039] Termin "heteroaril" je termin iz struke i kao što se ovde upotrebljava označava monocikličnu, bicikličnu, i policikličnu aromatičnu grupu koja ima 3 do 12 ukupnih atoma uključujući jedan ili više heteroatoma kao što su azot, kiseonik, ili sumpor u strukturi prstena. Primeri heteroaril grupa uključuju azaindolil, benzo(b)tienil, benzimidazolil, benzofuranil, benzoksazolil, benzotiazolil, benzotiadiazolil, benzotriazolil, benzoksadiazolil, furanil, imidazolil, imidazopiridinil, indolil, indolinil, indazolil, izoindolinil, izoksazolil, izotiazolil, izokvinolinil, oksadiazolil, oksazolil, purinil, piranil, pirazinil, pirazolil, piridinil, pirimidinil, pirolil, pirolo[2,3-d]pirimidinil, pirazolo[3,4-d]pirimidinil, kvinolinil, kvinazolinil, triazolil, tiazolil, tiofenil, tetrahidroindolil, tetrazolil, tiadiazolil, tienil, tiomorfolinil, triazolil ili tropanil, i slično. "Heteroaril" može biti supstituisan na jednoj ili više pozicija u prstenu sa jednim ili više supstituenata kao što su halogen, azid, alkil, aralkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, hidroksil, alkoksil, amino, nitro, sulfhidril, imino, amido, fosfonat, fosfinat, karbonil, karboksil, silil, etar, alkiltio, sulfonil, sulfonamido, keton, aldehid, estar, heterociklil, aromatične ili heteroaromatične funkcionalne grupe, fluoroalkil (kao što je trifluorometil), cijano, ili slično. Termin "heteroaril" takođe uključuje policiklične sisteme prstenova koji imaju dva ili više cikličnih prstenova u kojima su dva ili više ugljenika zajednička za dva susedna prstena (prstenovi su "fuzionisani prstenovi") pri čemu je najmanje jedan od prstenova aromatična grupa koja ima jedan ili više heteroatoma u strukturi prstena, npr. drugi ciklični prstenovi mogu biti cikloalkili, cikloalkenili, cikloalkinili, arili, heteroarili, i/ili heterociklili.
[0040] Termin "aralkil" ili "arilalkil" je termin iz struke i kao što se ovde upotrebljava označava alkil grupu supstituisanu aril grupom, pri čemu je funkcionalna grupa pridružena roditeljskom molekulu preko alkil grupe.
[0041] Termin "heteroaralkil" ili "heteroarilalkil" je termin iz struke i kao što se ovde upotrebljava označava alkil grupu supstituisanu heteroaril grupom, koja je pridružena roditeljskoj molekulskoj funkcionalnoj grupi preko alkil grupe.
[0042] Termin "alkoksi" kao što se ovde upotrebljava znači alkil grupu, kao što je ovde definisano, pridruženu roditeljskoj molekulskoj funkcionalnoj grupi preko atoma kiseonika. Reprezentativni primeri alkoksi uključuju, ali nisu ograničeni na, metoksi, etoksi, propoksi, 2-propoksi, butoksi, terc-butoksi, pentiloksi, i heksiloksi.
[0043] Termin "alkoksikarbonil" znači alkoksi grupu, kao što je ovde definisano, pridruženu roditeljskoj molekulskoj funkcionalnoj grupi preko karbonil grupe, predstavljene sa -C(=O)-, kao što je ovde definisano. Reprezentativni primeri alkoksikarbonila uključuju, ali nisu ograničeni na, metoksikarbonil, etoksikarbonil, i terc-butoksikarbonil.
[0044] Termin "alkilkarbonil", kao što se ovde upotrebljava, znači alkil grupu, kao što je ovde definisano, pridruženu roditeljskoj molekulskoj funkcionalnoj grupi preko karbonil grupe, kao što je ovde definisano. Reprezentativni primeri alkilkarbonila uključuju, ali nisu ograničeni na, acetil, 1-oksopropil, 2,2-dimetil-1-oksopropil, 1-oksobutil, i 1-oksopentil.
[0045] Termin "arilkarbonil", kao što se ovde upotrebljava, znači alkil grupu, kao što je ovde definisano, pridruženu roditeljskoj molekulskoj funkcionalnoj grupi preko karbonil grupe, kao što je ovde definisano. Reprezentativni primeri arilkarbonila uključuju, ali nisu ograničeni na, benzoil i (2-piridinil)karbonil.
[0046] Termini "alkilkarboniloksi" i "arilkarboniloksi", kao što se ovde upotrebljavaju, znače alkilkarbonil ili arilkarbonil grupu, kao što je ovde definisano, pridruženu roditeljskoj molekulskoj funkcionalnoj grupi preko atoma kiseonika. Reprezentativni primeri alkilkarboniloksi uključuju, ali nisu ograničeni na, acetiloksi, etilkarboniloksi, i tercbutilkarboniloksi. Reprezentativni primeri arilkarboniloksi uključuju, ali nisu ograničeni na fenilkarboniloksi.
[0047] Termini "alkenoksi" ili "alkenoksil" znače alkenil grupu, kao što je ovde definisano, pridruženu roditeljskoj molekulskoj funkcionalnoj grupi preko atoma kiseonika. Reprezentativni primeri alkenoksila uključuju, ali nisu ograničeni na, 2-propen-1-oksil (tj. CH2=CH-CH2-O-) i viniloksi (tj. CH2=CH-O-).
[0048] Termin "ariloksi" kao što se ovde upotrebljava znači aril grupu, kao što je ovde definisano, pridruženu roditeljskoj molekulskoj funkcionalnoj grupi preko atoma kiseonika.
[0049] Termin "heteroariloksi" kao što se ovde upotrebljava znači heteroaril grupu, kao što je ovde definisano, pridruženu roditeljskoj molekulskoj funkcionalnoj grupi preko atoma kiseonika.
[0050] Termin "karbociklil" kao što se ovde upotrebljava znači monociklični ili multiciklični (npr. biciklični, triciklični, itd.) ugljovodonični radikal koji sadrži od 3 do 12 atoma ugljenika koji je potpuno zasićen ili ima jednu ili više nezasićenih veza, i radi izbegavanja sumnje, stepen nezasićenosti ne rezultuje aromatičnim sistemom prstena (npr. fenil). Primeri karbociklil grupa uključuju 1-ciklopropil, 1-ciklobutil, 2-ciklopentil, 1-ciklopentenil, 3-cikloheksil, 1-cikloheksenil i 2-ciklopentenilmetil.
[0051] Termin "cijano" je termin iz struke i kao što se ovde upotrebljava označava -CN.
[0052] Termin "halo" je termin iz struke i kao što se ovde upotrebljava označava -F, -Cl, -Br, ili -I.
[0053] Termin "haloalkil" kao što se ovde upotrebljava označava alkil grupu, kao što je ovde definisano, pri čemu su neki ili svi vodonici zamenjeni sa atomima halogena.
[0054] Termin "hidroksi" je termin iz struke i kao što se ovde upotrebljava označava -OH.
[0055] Termin "hidroksialkil", kao što se ovde upotrebljava, znači da je najmanje jedna hidroksi grupa, kao što je ovde definisano, pridružena roditeljskoj molekulskoj funkcionalnoj grupi preko alkil grupe, kao što je ovde definisano. Reprezentativni primeri hidroksialkila uključuju, ali nisu ograničeni na, hidroksimetil, 2-hidroksietil, 3-hidroksipropil, 2,3-dihidroksipentil, i 2-etil-4-hidroksiheptil.
[0056] Termin "silil" kao što se ovde upotrebljava, uključuje hidrokarbil derivate silil (H3Si-) grupe (tj. (hidrokarbil)3Si-), pri čemu su hidrokarbil grupe univalentne grupe formirane uklanjanjem atoma vodonika iz ugljovodonika, npr. etila, fenila. Hidrokarbil grupe mogu biti kombinacije različitih grupa koje se mogu menjati kako bi se obezbedio veliki broj silil grupa, kao što su trimetilsilil (TMS), terc-butildifenilsilil (TBDPS), terc-butildimetilsilil (TBS/TBDMS), triizopropilsilil (TIPS), i [2-(trimetilsilil)etoksi]metil (SEM).
[0057] Termin "sililoksi", kao što se ovde upotrebljava, znači da je silil grupa, kao što je ovde definisano, pridružena roditeljskom molekulu preko atoma kiseonika.
[0058] Određena jedinjenja koja su sadržana u kompozicijama iz predmetnog pronalaska mogu postojati u određenim geometrijskim ili stereoizomernim oblicima. Pored toga, jedinjenja iz predmetnog pronalaska mogu takođe biti optički aktivna. Predmetni pronalazak razmatra sva takva jedinjenja, uključujući cis- i trans-izomere, (R)- i (S)-enantiomere, dijastereoizomere, (D)-izomere, (L)-izomere, njihove racemske smeše, i njihove druge smeše, kao što spada unutar obima pronalaska. Dodatni asimetrični atomi ugljenika mogu biti prisutni u supstituentu kao što je alkil grupa. Svi takvi izomeri, kao i njihove smeše, namenjeni su da budu uključeni u ovaj pronalazak.
[0059] Ukoliko je, na primer, poželjan određeni enantiomer jedinjenja iz predmetnog pronalaska, on se može pripremiti asimetričnom sintezom, ili derivacijom sa hiralnom pomoćnom supstancom, gde se rezultujuća dijastereomerna smeša odvaja, i pomoćna grupa iseca kako bi se obezbedili čisti željeni enantiomeri. Alternativno, tamo gde molekul sadrži baznu funkcionalnu grupu, kao što je amino, ili kiselu funkcionalnu grupu, kao što je karboksil, dijastereomerne soli se formiraju sa odgovarajućom optički aktivnom kiselinom ili bazom, nakon čega je sledilo razdvajanje tako formiranih dijastereomera frakcionom kristalizacijom ili hromatografskim načinima koji su dobro poznati u struci, i naknadno izdvajanje čistih enantiomera.
[0060] Podrazumeva se da "supstitucija" ili "supstituisano sa" uključuje implicitni uslov da je takva supstitucija u skladu sa dozvoljenom valencom supstituisanog atoma i supstituenta, i da supstitucija rezultuje stabilnim jedinjenjem, npr. koje spontano ne podleže transformaciji kao što je rearanžiranje, fragmentacija, dekompozicija, ciklizacija, eliminacija, ili druga reakcija.
[0061] Termin "supstituisano" je takođe zamišljen da uključi sve dozvoljene supstituente organskih jedinjenja. U širem aspektu, dozvoljeni supstituenti uključuju aciklične i ciklične, razgranate i nerazgranate, karbociklične i heterociklične, aromatične i nearomatične supstituente organskih jedinjenja. Ilustrativni supstituenti uključuju, na primer, one koji su prethodno ovde opisani. Dozvoljenih supstituenata može biti jedan ili više i isti su ili različiti za odgovarajuća organska jedinjenja. U svrhu ovog pronalaska, heteroatomi kao što je azot mogu imati supstituente vodonika i/ili bilo koje dozvoljene supstituente organskih jedinjenja koja su ovde opisana koja zadovoljavaju valence heteroatoma. Nije namenjeno da ovaj pronalazak bude ograničen na bilo koji način dozvoljenim supstituentima organskih jedinjenja.
[0062] Fraza "zaštitna grupa", kao što se ovde upotrebljava, znači privremene supstituente koji štite potencijalno reaktivnu funkcionalnu grupu od neželjenih hemijskih transformacija. Primeri takvih zaštitnih grupa uključuju estre karboksilnih kiselina, silil etre alkohola, i acetale i ketale aldehida i ketona, respektivno. Oblast hemije zaštitnih grupa pregledno je prikazana (Greene, T.W.; Wuts, P.G.M. Protective Groups in Organic Synthesis, 2nd ed.; Wiley: New York, 1991). Zaštićeni oblici jedinjenja iz pronalaska uključeni su u obim ovog pronalaska.
[0063] U svrhu pronalaska, hemijski elementi identifikovani su u skladu sa Periodnim sistemom elemenata, CAS verzija, Handbook of Chemistry and Physics, 67th Ed. 1986-87, unutrašnja korica.
[0064] Drugi hemijski termini ovde se upotrebljavaju u skladu sa uobičajenom upotrebom u struci, kao što je pokazano putem primera u The McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (ed. Parker, S., 1985), McGraw-Hill, San Francisco). Osim ukoliko nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni termini koji su ovde upotrebljeni imaju isto značenje koje uobičajeno razume osoba sa prosečnim iskustvom u struci na koju se ovaj pronalazak odnosi.
[0065] Termin "farmaceutski prihvatljiva so" kao što se ovde upotrebljava uključuje soli izvedene iz neorganskih ili organskih kiselina, uključujući, na primer, hlorovodoničnu, bromovodoničnu, sumpornu, azotnu, perhlornu, fosfornu, mravlju, sirćetnu, mlečnu, maleinsku, fumarnu, jantarnu, vinsku, glikolnu, salicilnu, limunsku, metansulfonsku, benzensulfonsku, benzoevu, malonsku, trifluorosirćetnu, trihlorosirćetnu, naftalen-2-sulfonsku, i druge kiseline. Oblici farmaceutski prihvatljivih soli mogu uključivati oblike u kojima odnos molekula koji čine so nije 1:1. Na primer, so može da sadrži više od jednog molekula neorganske ili organske kiseline po molekulu baze, kao što su dva molekula hlorovodonične kiseline po molekulu jedinjenja Formule I. Kao sledeći primer, so može da sadrži manje od jednog molekula neorganske ili organske kiseline po molekulu baze, kao što su dva molekula jedinjenja Formule I po molekulu vinske kiseline.
[0066] Termini "nosač" i "farmaceutski prihvatljiv nosač" kao što se ovde upotrebljavaju označavaju razblaživač, adjuvans, ekscipijens, ili vehikulum sa kojim se jedinjenje primenjuje ili formuliše za primenu. Neograničavajući primeri takvih farmaceutski prihvatljivih nosača uključuju tečnosti, kao što su voda, fiziološki rastvor, i ulja; i čvrste supstance, kao što su guma akacija, želatin, skrobna pasta, talk, keratin, koloidni silicijum dioksid, urea, i slično. Pored toga, mogu se upotrebljavati pomoćna sredstva, agensi za stabilizaciju, zgušnjavanje, lubrikaciju, aromu, i bojenje. Drugi primeri pogodnih farmaceutskih nosača opisani su u Remington's Pharmaceutical Sciences od E.W. Martina, i ovde su uključeni kao referenca u svojoj potpunosti.
[0067] Termin "lečenje" kao što se ovde upotrebljava znači prevenirati, zaustaviti ili usporiti napredovanje, ili eliminisati bolest ili stanje kod subjekta. U jednom primeru izvođenja "lečenje" znači zaustavljanje ili usporavanje napredovanja, ili eliminisanje bolesti ili stanja kod subjekta. U jednom primeru izvođenja, "lečenje" znači smanjenje najmanje jedne objektivne manifestacije bolesti ili stanja kod subjekta.
[0068] Termin "efikasna količina" kao što se ovde upotrebljava označava količinu koja je dovoljna da dovede do željenog biološkog efekta.
[0069] Termin "terapijski efikasna količina" kao što se ovde upotrebljava označava količinu koja je dovoljna da dovede do željenog terapijskog efekta.
[0070] Termin "inhibirati" kao što se ovde upotrebljava znači smanjenje za objektivno merljivu količinu ili obim. U različitim primerima izvođenja "inhibirati" znači smanjenje za najmanje 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, ili 95 procenata u poređenju sa relevantnom kontrolom. U jednom primeru izvođenja "inhibirati" znači smanjenje od 100 procenata, tj. zaustavljanje ili eliminisanje.
[0071] Termin "subjekt" kao što se ovde upotrebljava označava sisara. U različitim primerima izvođenja, subjekt je miš, pacov, zec, mačka, pas, svinja, ovca, konj, krava, ili ne-humani primat. U jednom primeru izvođenja, subjekt je čovek.
Jedinjenja
[0072] Predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenja Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli:
pri čemu, nezavisno za svako javljanje:
R<1>predstavlja -OH, -OR<c>, -NH2, -NHR<c>, -NR<c>R<d>, (C1-C10)alkil, (C6-C10)aril, (C6-C10)aril(C1-C10)alkil, heteroaril, heteroaril(C1-C10)alkil, halo, halo(C1-C10)alkil, (C3-C12)cikloalkil, ((C3-C12)cikloalkil)(C1-C10)alkil, -C(O)R<c>, -C(O)OH, -C(O)OR<c>, -OC(O)R<c>, -C(O)NH2, -C(O)NHR<c>, -C(O)NR<c>R<d>, -NHC(O)R<c>, ili -NR<c>C(O)R<d>;
W je -C(O)NH-;
R<2>predstavlja opciono supstituisani (C6-C10)aril ili heteroaril;
V predstavlja opciono supstituisani (C6-C10)aril ili heteroaril;
Z je odsutan ili predstavlja jedan ili više supstituenata koji su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od halo, halo(C1-C10)alkila, -NO2, -CN, -C(O)R<c>, -C(O)OH, -C(O)OR<c>, -OC(O)R<c>, -C(O)NH2, -C(O)NHR<c>, -C(O)NR<c>R<d>, -NHC(O)R<c>, -N(R<c>)C(O)R<d>, - OS(O)p(R<c>), -NHS(O)p(R<c>), i -NR<c>S(O)p(R<c>);
X predstavlja -C(NH2)-, -C(NH(R<c>))-, -C(NR<c>R<d>)-, -C(NHS(O)pR<c>)-, -C(NHC(O)R<c>)-, -C(NHC(O)NH2)-, -C(NHC(O)NHR<c>)-, -C(NHC(O)NR<c>R<d>)-, -C(OH)-, -C(O((C1-C10)alkil))-, -C(N3)-, -C(CN)-, -C(NO2)-, -C(S(O)nR<a>)-, -C[-C(=O)R<c>]-, -C[-C(=O)NR<c>R<d>]-, -C[-C(=O)SR<c>]-, -C[-S(O)R<c>]-, -C[-S(O)2R<c>]-, -C[S(O)(OR<c>)]-, -C[-S(O)2(OR<c>)]-, -C[-SO2NR<c>R<d>]-, -C(halogen)-, -C((C1-C10)alkil), -C(((C3-C12)cikloalkil)(C1-C10)alkil), -C((C2-C10)alkenil)-, -C((C2-C10)alkinil)-, ili -C((C6-C10)aril(C1-C10)alkil)-;
R<3>predstavlja opciono supstituisani (C6-C10)aril, heteroaril, (C3-C12)cikloalkil, ili heterocikloalkil;
R<3a>je odsutan ili predstavlja jedan ili više supstituenata koji su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od halo, hidroksi, (C1-C10)alkila, -CF3, -OCF3, (C1-C10)alkoksi, (C6-C10)arila, heteroarila, (C6-C10)ariloksi, amino, amino(C1-C10)alkila, -C(O)NH2, cijano, -NHC(O)(C1-C10)alkila, -SO2(C1-C10)alkila, -SO2NH2, (C3-C12)cikloalkila, -(CH2)rOR<a>, -NO2, -(CH2)rNR<a>R<b>, -(CH2)rC(O)R<a>, -NR<a>C(O)R<b>, -C(O)NR<c>R<d>, -NR<a>C(O)NR<c>R<d>, -C(=NR<a>)NR<c>R<d>, -NHC(=NR<a>)NR<c>R<d>, -NR<a>R<b>, -SO2NR<c>R<d>, -NR<a>SO2NR<c>R<d>, -NR<a>SO2(C1-C10)alkila, -NR<a>SO2R<a>, -S(O)pR<a>, -(CF2)rCF3, -NHCH2R<a>, -OCH2R<a>, -SCH2R<a>, -NH(CH2)2(CH2)rR<a>, -O(CH2)2(CH2)rR<a>, ili -S(CH2)2(CH2)rR<a>;
Y predstavlja vezu; ili -Y-R<4>predstavlja opciono supstituisani -(C1-C10)alkilen-R<4>, -CH2C(O)-R<4>, -CH2NH-R<4>, -CH2N((C1-C10)alkil)-R<4>, -CR<a>R<b>-R<4>, -NH-R<4>, -NHCH2-R<4>, -NHC(O)-R<4>, -N((C1-C10)alkil)-R<4>, -N((C1-C10)alkil)CH2-R<4>, -N((CH2)2OH)-R<4>, -N(((C3-C12)cikloalkil)(C1-C10)alkil)R<4>, -heterociklil-R<4>, -OR<4>, -OCH2-R<4>, -OC(O)-R<4>, -OC(O)NR<a>R<b>, -SCH2R<4>, ili -SR<4>;
R<4>predstavlja vodonik, hidroksi, opciono supstituisani (C1-C10)alkil, (C3-C12)cikloalkil, (heterocikloalkil)(C1-C10)alkil, ((C3-C12)cikloalkil)(C1-C10)alkil, -CH2OH, -CH((C1-C10)alkil)OH, -CH(NH2)CH((C1-C10)alkil)2, (C6-C10)aril, (C6-C10)aril(C1-C10)alkil, heteroaril, heteroaril(C1-C10)alkil, -CH2S((C1-C10)alkil), amino, ili cijano; ili -(CR<a>R<b>)r(CR<a>R<b>)p- fuzionisan za poziciju 4 prstena koji nosi Z kako bi se formirao 5- do 7-člani heterociklični prsten sa opcionionim supstituentima; ili,
kada je R<3>fenil, R<4>može predstavljati -NR<a>- fuzionisan za poziciju orto prema X na tom fenilu;
svaki R<a>i R<b>je nezavisno H, (C1-C10)alkil, (C2-C10)alkenil, (C2-C10)alkinil, (C6-C10)aril(C1-C10)alkil, ((C3-C12)cikloalkil)(C1-C10)alkil, -C(=O)R<c>, -C(=O)OR<c>, -C(=O)NR<c>R<d>, -C(=O)SR<c>, -S(O)R<c>, -S(O)2R<c>, -S(O)(OR<c>), ili -SO2NR<c>R<d>;
R<c>i R<d>predstavljaju, nezavisno za svako javljanje, opciono supstituisani (C1-C10)alkil, (C2-C10)alkenil, (C2-C10)alkinil, halo(C1-C10)alkil, (C6-C10)aril, (C6-C10)aril(C1-C10)alkil, heteroaril, heteroaril(C1-C10)alkil, (C3-C12)cikloalkil, ((C3-C12)cikloalkil)(C1-C10)alkil, heterocikloalkil, (heterocikloalkil)(C1-C10)alkil, -C(O)(C1-C10)alkil, ili -S(O)p(alkil); ili R<c>i R<d>mogu biti uzeti zajedno tako da formiraju opciono supstituisani heterociklični prsten;
r je 0, 1, 2, ili 3;
n je ceo broj od 0 do 6; i
p je 0, 1, ili 2;
dodatno pri čemu:
"heteroaril" znači monociklični, biciklični, ili policiklični aromatični prsten koji ima 3-12 ukupnih atoma i najmanje jedan heteroatom koji je odabran iz grupe koja sa sastoji od azota, kiseonika, i sumpora;
"heterociklični", "heterocikloalkil", i "heterociklil" znače monociklični, biciklični, ili triciklični nearomatični prsten koji ima 3-12 ukupnih atoma i najmanje jedan heteroatom koji je odabran iz grupe koja sa sastoji od azota, kiseonika, i sumpora; i
"opciono supstituisano" znači nesupstituisano ili supstituisano sa jednim ili više supstituenata svaki nezavisno odabran iz grupe koja sa sastoji od halogena, azida, (C1-C10)alkila, (C6-C10)aril(C1-C10)alkila, (C2-C10)alkenila, (C2-C10)alkinila, (C3-C12)cikloalkila, hidroksila, (C1-C10)alkoksi, amino (npr. -NH2, -NH((C1-C6)alkil), -N((C1-C6)alkil)2), nitro, sulfhidrila, imino, amido, fosfonata, fosfinata, karbonila, karboksila, silila, etra, (C1-C10)alkiltio, sulfonila, sulfonamido, ketona, aldehida, estra, heterociklila, (C6-C10)arila, heteroarila, fluoro(C1-C10)alkila, cijano, -C(O)O(C1-C6)alkila, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6)alkila, -C(O)N((C1-C6)alkil)2, i (C1-C6)haloalkila.
[0073] U određenim primerima izvođenja, R<1>predstavlja -OH, -OR<c>, -NH2, -NHR<c>, -NR<c>R<d>, (C1-C10)alkil, (C6-C10)aril, heteroaril, halo, halo(C1-C10)alkil, (C3-C12)cikloalkil, -OC(O)R<c>, -NHC(O)R<c>, ili -NR<c>C(O)R<d>.
[0074] U određenim primerima izvođenja, R<1>predstavlja -OH, -OR<c>, -NH2, (C1-C10)alkil, (C6-C10)aril, halo, halo(C1-C10)alkil, (C3-C12)cikloalkil, ili -OC(O)R<c>.
[0075] U određenim primerima izvođenja, n je 1.
[0076] U određenim takvim primerima izvođenja, R<1>predstavlja -OH ili -OR<c>.
[0077] U određenim primerima izvođenja pri čemu je n 1, R<1>predstavlja -OR<c>, na primer R<1>može predstavljati -O((C1-C6)alkil).
[0078] U određenim primerima izvođenja pri čemu je n 1, R<1>predstavlja -OC(O)R<c>, na primer R<1>može predstavljati -OC(O)((C1-C6)alkil).
[0079] U određenim primerima izvođenja, R<1>predstavlja -NH2.
[0080] U određenim primerima izvođenja, R<1>predstavlja (C1-C6)alkil.
[0081] U određenim primerima izvođenja, n je 2.
[0082] U određenim takvim primerima izvođenja, dva javljanja R<1>su geminalna, tj. dva javljanja R<1>su prikačena za isti atom ugljenika.
[0083] U određenim takvim primerima izvođenja, jedno javljanje R<1>predstavlja -OH ili -OR<c>; i drugo javljanje R<1>predstavlja (C6-C10)aril ili heteroaril.
[0084] Alternativno, u drugim određenim takvim primerima izvođenja, jedno javljanje R<1>predstavlja -OH ili -OR<c>; i drugo javljanje R<1>predstavlja halo(C1-C10)alkil.
[0085] U još jednom alternativnom primeru izvođenja, oba od dva geminalna javljanja R<1>su halo.
[0086] U određenim primerima izvođenja, dva geminalna javljanja R<1>uzeta zajedno sa ugljenikom za koji su prikačeni predstavljaju -C(O)-.
[0087] U određenim primerima izvođenja pri čemu je n 2, dva javljanja R<1>su u blizini, tj. dva javljanja R<1>su prikačena za dva susedna atoma ugljenika.
[0088] U određenim takvim primerima izvođenja, dva javljanja u blizini R<1>uzeta zajedno formiraju opciono supstituisani fuzionisani karbociklični prsten.
[0089] U određenim primerima izvođenja, n je 0.
[0090] U određenim primerima izvođenja, W je -C(O)NH- ili -C(O)N(R<c>)-.
[0091] U određenim takvim primerima izvođenja, R<2>predstavlja opciono supstituisani (C6-C10)aril ili heteroaril.
[0092] U određenim primerima izvođenja, R<2>predstavlja (C6-C10)aril ili heteroaril, supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji su odabrani iz grupe koja se sastoji od -OH, halo, -NH2, -NH((C1-C6)alkil), -N((C1-C6)alkil)2, -CN, -NO2, (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, (C1-C6)alkoksi, -C(O)OH, -C(O)O(C1-C6)alkila, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6)alkila, i -C(O)N((C1-C6)alkil)2.
[0093] U određenim primerima izvođenja pri čemu je W -C(O)NH-, R<2>predstavlja (halo)(C6-C10)aril ili (halo)heteroaril.
[0094] U određenim primerima izvođenja, V predstavlja opciono supstituisani (C6-C10)aril.
[0095] U određenim primerima izvođenja, Z predstavlja jedan ili više supstituenata koji su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od halo, halo(C1-C10)alkila, -NO2, i -CN.
[0096] U određenim primerima izvođenja, Z predstavlja jedan primer halo.
[0097] U određenim primerima izvođenja, Z predstavlja jedan primer fluoro.
[0098] U određenim primerima izvođenja, Z je odsutan.
[0099] U određenim primerima izvođenja, X predstavlja -C(NH2)-, -C(NH(R<c>))-, -C(NR<c>R<d>)-, -C(NHS(O)pR<c>)-, -C(NHC(O)R<c>)-, -C(NHC(O)NH2)-, -C(NHC(O)NHR<c>)-, ili -C(NHC(O)NR<c>R<d>)-.
[0100] U određenim primerima izvođenja, X predstavlja -C(NH2)-, -C(NH(R<c>))-, -C(NR<c>R<d>)-, -C(NHS(O)pR<c>)-, -C(NHC(O)R<c>)-, ili -C(NHC(O)NHR<c>)-.
[0101] U određenim primerima izvođenja, X predstavlja -C(NH2)-.
[0102] U određenim primerima izvođenja, X predstavlja -C(NH(R<c>))-.
[0103] U određenim takvim primerima izvođenja, X predstavlja -C(NH((C3-C12)cikloalkil) (C1-C10)alkil)-. U alternativnim takvim primerima izvođenja, X predstavlja -C(NH(C1-C6)alkil)-.
[0104] U određenim primerima izvođenja, X predstavlja -C(NHS(O)pR<c>)-.
[0105] U određenim takvim primerima izvođenja, X predstavlja -C(NHS(O)p(C1-C6)alkil)-, pri čemu je p 1 ili 2.
[0106] U određenim primerima izvođenja, X predstavlja -C(NHC(O)NHR<c>)-.
[0107] U određenim takvim primerima izvođenja, X predstavlja opciono supstituisani -C(NHC(O)NH((C6-C10)aril))- ili C(NHC(O)NH(heteroaril))-.
[0108] U određenim primerima izvođenja, X predstavlja -C(NHC(O)R<c>)-.
[0109] U određenim takvim primerima izvođenja, X predstavlja -C(NHC(O)((C1-C6)alkil))-.
[0110] U određenim primerima izvođenja, R<3>predstavlja opciono supstituisani (C6-C10)aril ili heteroaril.
[0111] U određenim primerima izvođenja, R<3>predstavlja opciono supstituisani heteroaril.
[0112] U određenim takvim primerima izvođenja, R<3>predstavlja piridil.
[0113] U određenim primerima izvođenja, R<3>predstavlja opciono supstituisani (C6-C10)aril.
[0114] U određenim takvim primerima izvođenja, R<3>predstavlja fenil, opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji su odabrani iz grupe koja se sastoji od -CN, halo, -NO2, (C1-C6)alkila, i (C1-C6)haloalkila.
[0115] U određenim primerima izvođenja, R<3a>je odsutan ili predstavlja halo, alkil, -CF3, -OCF3, (C6-C10)aril, heteroaril, -C(O)NH2, cijano, -NHC(O) (C1-C10)alkil, - SO2(C1-C10)alkil, -SO2NH2, -NO2, -NR<a>C(O)R<b>, -C(O)NR<c>R<d>, -NR<a>C(O)NR<c>R<d>, -C(=NR<a>)NR<c>R<d>, -NHC(=NR<a>)NR<c>R<d>, -SO2NR<c>R<d>, -NR<a>SO2NR<c>R<d>, -NR<a>SO2alkil, -NR<a>SO2R<a>, -S(O)pR<a>, ili -(CF2)rCF3.
[0116] U određenim primerima izvođenja, Y predstavlja vezu.
[0117] U određenim primerima izvođenja, R<4>predstavlja H.
[0118] U određenim primerima izvođenja, R<4>predstavlja ((C3-C12)cikloalkil) (C1-C10)alkil. Na primer, R<4>može predstavljati (ciklopropil)(C1-C6)alkil.
[0119] U određenim primerima izvođenja, jedinjenje iz pronalaska odabrano je iz sledeće tabele jedinjenja, ili je njihova farmaceutski prihvatljiva so:
Farmaceutske kompozicije
[0120] Pronalazak obezbeđuje farmaceutske kompozicije, od kojih svaka sadrži jedno ili više jedinjenja iz pronalaska i farmaceutski prihvatljiv nosač. U određenim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija sadrži jedinjenje iz pronalaska i farmaceutski prihvatljiv nosač. U određenim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija sadrži veći broj jedinjenja iz pronalaska i farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0121] U određenim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija je formulisana za parenteralnu primenu.
[0122] U određenim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija je formulisana za oralnu primenu.
[0123] U određenim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija iz pronalaska dodatno sadrži najmanje jedan dopunski farmaceutski aktivan agens osim jedinjenja iz pronalaska. Najmanje jedan dopunski farmaceutski aktivan agens može biti agens koji je koristan u lečenju bolesti ili stanja koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme. Na primer, najmanje jedan dopunski farmaceutski aktivan agens može biti antikoagulantni agens, antiagregacioni agens, ili trombolitički agens.
[0124] Antikoagulantni agensi preveniraju koagulaciju komponenti krvi i stoga preveniraju formiranje ugrušaka, na primer kod atrijalne fibrilacije. Antikoagulansi uključuju, ali nisu ograničeni na, heparin, varfarin, kumadin, dikumarol, fenprokumon, acenokumarol, etil biskumacetat, hirudin, bivalarutin, direktne inhibitore trombina, i derivate indandiona.
[0125] Antiagregacioni agensi inhibiraju agregaciju krvnih pločica i često se upotrebljavaju za prevenciju tromboembolijskog moždanog udara kod pacijenata koji su doživeli prolazni ishemijski napad, moždani udar, ili atrijalnu fibrilaciju. Antiagregacioni agensi uključuju, ali nisu ograničeni na, aspirin, derivate tienopiridina kao što su tiklopodin i klopidogrel, dipiridamol, i sulfinpirazon, kao i mimetike RGD.
[0126] Trombolitički agensi liziraju ugruške koji uzrokuju tromboembolijske pojave kao što su moždani udar, infarkt miokarda, i plućna tromboembolija. Trombolitički agensi uključuju, ali nisu ograničeni na, plazminogen, a2-antiplazmin, streptokinazu, antistreplazu, TNK, tkivni aktivator plazminogena (tPA), i urokinazu. Tkivni aktivator plazminogena uključuje nativni tPA i rekombinantni tPA, kao i modifikovane oblike tPA koji zadržavaju enzimsku ili fibrinolitičku aktivnost nativnog tPA.
[0127] Farmaceutske kompozicije iz pronalaska mogu biti pripremljene kombinovanjem jednog ili više jedinjenja iz pronalaska sa farmaceutski prihvatljivim nosačem i, opciono, jednim ili više dopunskih farmaceutski aktivnih agenasa.
Postupci upotrebe
[0128] Predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenja koja inhibiraju formiranje trombina putem unutrašnjeg puta i stoga redukuju rizik od formiranja novog patogenog tromba (okluzija ili reokluzija sudova) i takođe poboljšavaju fibrinolitički indukovanu reperfuziju kada se daju kao dodatna terapija sa fibrinolitičkim režimom. Bolesti i stanja koja se mogu lečiti upotrebom jedinjenja iz predmetnog pronalaska uključuju, ali nisu ograničena na, moždani udar, inflamaciju, reperfuzionu povredu, akutni infarkt miokarda, duboku vensku trombozu, stanje posle fibrinolitičkog lečenja, anginu, edem, angioedem, nasledni angioedem, sepsu, artritis, krvarenje, gubitak krvi tokom kardiopulmonarnog bajpasa, inflamatornu bolest creva, dijabetes melitus, retinopatiju, dijabetičku retinopatiju, dijabetički makularni edem, dijabetičku makularnu degeneraciju, makularni edem koji je povezan sa starošću, makularnu degeneraciju koja je povezana sa starošću, proliferativnu retinopatiju, neuropatiju, hipertenziju, edem mozga, povećano izlučivanje albumina, makroalbuminuriju, i nefropatiju.
[0129] Na primer, kod pacijenata sa stanjima angioedema, mali polipeptidni PK inhibitor DX-88 (ekalantid) ublažava edem kod pacijenata sa naslednim angioedemom (HAE). Williams, A. et al. (2003) Transfus. Apher. Sci. 29:255-8; Schneider, L. et al. (2007) J Allergy Clin Immunol. 120:416-22; i Levy, J. H. et al. (2006) Expert Opin. Invest. Drugs 15:1077-90. Antagonist B2 receptora za bradikinin, Icatibant, takođe je efikasan u lečenju HAE. Bork, K. et al. (2007) J. Allergy Clin. Immunol. 119:1497-1503. Pošto kalikrein plazme generiše bradikinin, očekuje se da inhibicija kalikreina plazme inhibira proizvodnju bradikinina.
[0130] Na primer, kod koagulacije koja je rezultat fibrinolitičkog lečenja (npr. lečenje tkivnim aktivatorom plazminogena ili streptokinazom), viši nivoi kalikreina plazme pronalaze se kod pacijenata koji su podvrgnuti fibrinolizi. Hoffmeister, H. M. et al. (1998) J. Cardiovasc. Pharmacol. 31:764-72. Pokazano je da se plazminom posredovana aktivacija unutrašnjeg puta javlja u plazmi i krvi i da je značajno oslabljena u plazmi kod pojedinaca kojima nedostaje bilo koja od komponenti unutrašnjeg puta. Ewald, G. A. et al. (1995) Circulation 91:28-36.
[0131] Pronađeno je da pojedinci koji su imali akutni IM imaju povišene nivoe aktiviranog kalikreina plazme i trombina. Hoffmeister, H. M., et al. (1998) Circulation 98:2527-33.
[0132] DX-88 je redukovao edem mozga, zapreminu infarkta, i neurološke deficite u životinjskom modelu ishemijskog moždanog udara. Storini, C. et al. (2006) J. Pharm. Exp. Ther. 318:849-854. C1-inhibitor je redukovao veličinu infarkta u mišjem modelu okluzije srednje cerebralne arterije (MCAO). De Simoni, M. G. et al. (2004) Am. J. Pathol.164:1857-1863; i Akita, N. et al. (2003) Neurosurgery 52:395-400. Pronađeno je da antagonisti B2 receptora redukuju zapreminu infarkta, oticanje mozga, i akumulaciju neutrofila i bili su neuroprotektivni u MCAO životinjskom modelu. Zausinger, S. et al. (2003) Acta Neurochir.
Suppl. 86:205-7; Lumenta, D. B. et al. (2006) Brain Res. 1069:227-34; Ding-Zhou, L. et al. (2003) Br. J Pharmacol.139:1539-47.
[0133] Što se tiče gubitka krvi tokom kardiopulmonarnog bajpasa (CPB), pronađeno je da se kalikrein-kinin (tj. kontaktni) sistem aktivira tokom CABG. Wachtfogel, Y. T. (1989) Blood 73:468. Aktivacija kontaktnog sistema tokom CPB rezultuje sa do 20-strukim povećanjem bradikinina plazme. Cugno, M. et al. (2006) Chest 120:1776-82; i Campbell, D. J. et al. (2001) Am. J. Physiol. Reg. Integr. Comp. Physiol. 281:1059-70.
[0134] Takođe je pronađeno da inhibitori kalikreina plazme P8720 i PKSI-527 redukuju oticanje zglobova u pacovskim modelima artritisa. De La Cadena, R. A. et al. (1995) FASEB J. 9:446-52; Fujimori, Y. (1993) Agents Action 39:42-8. Takođe je pronađeno da je inflamacija u životinjskim modelima artritisa bila praćena aktivacijom kontaktnog sistema. Blais, C. Jr. et al. (1997) Arthritis Rheum. 40:1327-33.
[0135] Pored toga, pronađeno je da inhibitor kalikreina plazme P8720 redukuje inflamaciju u pacovskom modelu akutne i hronične inflamatorne bolesti creva (IBD). Stadnicki, A. et al. (1998) FASEB J. 12:325-33; Stadnicki, A. et al. (1996) Dig. Dis. Sci. 41:912-20; i De La Cadena, R. A., et al. (1995) FASEB J. 9:446-52. Kontaktni sistem se aktivira tokom akutne i hronične inflamacije creva. Sartor, R. B. et al. (1996) Gastroenterology 110:1467-81. Pronađeno je da antagonist B2 receptora, antitelo na kininogen velike molekulske težine, ili redukcija nivoa kininogena redukuje kliničku patologiju u životinjskim modelima IBD. Ibid.; Arai, Y. et al. (1999) Dig. Dis. Sci. 44:845-51; i Keith, J. C. et al. (2005) Arthritis Res. Therapy 7:R769-76.
[0136] Pronađeno je da H-D-Pro-Phe-Arg-hlorometilketon (CMK), inhibitor PK i FXII i fiziološki inhibitor (C1-inhibitor), redukuje vaskularnu permeabilnost u više organa i redukuje lezije kod lipopolisaharidima- (LPS) ili bakterijama-indukovane sepse kod životinja. Liu, D. et al. (2005) Blood 105:2350-5; Persson, K. et al. (2000) J. Exp. Med.192:1415-24. Kliničko poboljšanje je uočeno kod pacijenata sa sepsom koji su lečeni sa C1-inhibitorom. Zeerleder, S. et al. (2003) Clin. Diagnost. Lab. Immunol.10:529-35; Caliezi, C., et al. (2002) Crit. Care Med. 30:1722-8; i Marx, G. et al. (1999) Intensive Care Med. 25:1017-20. Pronađeno je da fatalni slučajevi septikemije imaju veći stepen kontaktne aktivacije. Martinez-Brotons, F. et al. (1987) Thromb. Haemost. 58:709-713; i Kalter, E. S. et al. (1985) J. Infect. Dis.151:1019-27.
[0137] Takođe je pronađeno da su nivoi prePK viši kod dijabetičara, naročito onih sa proliferativnom retinopatijom, i da su u korelaciji sa nivoima fruktozamina. Gao, B.-B., et al. (2007) Nature Med. 13:181-8; i Kedzierska, K. et al. (2005) Archives Med. Res. 36:539-43.
Takođe je pronađeno da je prePK najviši kod onih sa senzorimotornom neuropatijom. Christie, M. et al. (1984) Thromb. Haemostas. (Stuttgart) 52:221-3. Nivoi prePK su povišeni kod dijabetičara i povezani su sa povišenim krvnim pritiskom. Nivoi prePK nezavisno koreliraju sa stopom izlučivanja albumina i povišeni su kod dijabetičara sa makroalbuminurijom, što sugeriše da prePK može biti marker progresivne nefropatije. Jaffa, A. A. et al. (2003) Diabetes 52:1215-21. Pronađeno je da antagonisti B1 receptora smanjuju curenje plazme kod pacova koji su tretirani sa streptozotocinom. Lawson, S. R. et al. (2005) Eur. J. Pharmacol. 514:69-78. Antagonisti B1 receptora takođe mogu prevenirati da streptozotocinom tretirani miševi razviju hiperglikemiju i bubrežnu disfunkciju. Zuccollo, A. et al. (1996) Can. J. Physiol. Pharmacol. 74:586-9.
[0138] U određenim aspektima, pronalazak obezbeđuje jedinjenje iz pronalaska, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu kao medikament.
[0139] Varijante objave koje ne formiraju deo pronalaska obezbeđuju postupke lečenja ili preveniranja bolesti ili stanja koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme. Postupak uključuje korak primene subjektu kome je to potrebno terapijski efikasne količine jedinjenja iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, čime se leči ili prevenira bolest ili stanje koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme. Redukovanjem aktivnosti kalikreina plazme kod subjekta, leči se bolest ili stanje koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme.
[0140] Alternativno, u određenim aspektima, pronalazak obezbeđuje jedinjenje iz pronalaska, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za lečenje bolesti ili stanja koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme.
[0141] Alternativno, u određenim aspektima, pronalazak obezbeđuje upotrebu jedinjenja iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, za proizvodnju medikamenta za upotrebu u lečenju bolesti ili stanja koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme.
[0142] Kao što se ovde upotrebljava, "bolest ili stanje koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme" označava bilo koju bolest ili stanje u kome je poželjno redukovati aktivnost kalikreina plazme. Na primer, može biti poželjno redukovati aktivnost kalikreina plazme u uslovima hiperkoagulabilnog stanja. Kao drugi primer, može biti poželjno redukovati aktivnost kalikreina plazme u uslovima ishemije tkiva koja je povezana sa prisustvom ili formiranjem tromba.
[0143] U određenim primerima izvođenja, bolest ili stanje koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme odabrano je iz grupe koja se sastoji od moždanog udara, inflamacije, reperfuzione povrede, akutnog infarkta miokarda, duboke venske tromboze, stanja posle fibrinolitičkog lečenja, angine, edema, angioedema, naslednog angioedema, sepse, artritisa, krvarenja, gubitka krvi tokom kardiopulmonarnog bajpasa, inflamatorne bolesti creva, dijabetes melitusa, retinopatije, dijabetičke retinopatije, dijabetičkog makularnog edema, dijabetičke makularne degeneracije, makularnog edema koji je povezan sa starošću, makularne degeneracije koja je povezana sa starošću, proliferativne retinopatije, neuropatije, hipertenzije, edema mozga, povećanog izlučivanja albumina, makroalbuminurije, i nefropatije.
[0144] U određenim primerima izvođenja, bolest ili stanje koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme je angioedem.
[0145] U određenim primerima izvođenja, bolest ili stanje koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme je nasledni angioedem (HAE).
[0146] U određenim primerima izvođenja, bolest ili stanje koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme je moždani udar.
[0147] U određenim primerima izvođenja, bolest ili stanje koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme je reperfuziona povreda.
[0148] U određenim primerima izvođenja, bolest ili stanje koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme je akutni infarkt miokarda.
[0149] U određenim primerima izvođenja, bolest ili stanje koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme je krvarenje.
[0150] U određenim primerima izvođenja, bolest ili stanje koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme je gubitak krvi tokom kardiopulmonarnog bajpasa.
[0151] U određenim primerima izvođenja, bolest ili stanje koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme odabrano je iz grupe koja se sastoji od retinopatije, dijabetičke retinopatije, dijabetičkog makularnog edema, dijabetičke makularne degeneracije, makularnog edema koji je povezan sa starošću, makularne degeneracije koja je povezana sa starošću, i proliferativne retinopatije.
Formulacije, putevi primene, i doziranje
[0152] Jedinjenja iz pronalaska mogu se formulisati kao farmaceutske kompozicije i primenjivati domaćinu sisaru, kao što je čovek, u različitim oblicima koji su prilagođeni odabranom putu primene, npr. oralno ili parenteralno, intravenskim, intraperitonealnim, intramuskularnim, topikalnim, ili subkutanim putevima. Pronalaskom su takođe predviđeni dopunski putevi primene.
[0153] Stoga, predmetna jedinjenja mogu se sistemski primenjivati, npr. oralno, u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim nosačem kao što je inertni razblaživač ili jestivi nosač koji se može asimilirati. Mogu biti zatvorena u želatinske kapsule sa tvrdom ili mekom ljuskom, mogu se komprimovati u tablete, ili se mogu inkorporisati direktno u hranu pacijenta. Za oralnu terapijsku primenu, aktivno jedinjenje može se kombinovati sa jednim ili više ekscipijenasa i upotrebljavati u obliku tableta za gutanje, bukalnih tableta, troha, kapsula, eliksira, suspenzija, sirupa, vafla, i slično. Takve kompozicije i preparati treba da sadrže najmanje 0,1% aktivnog jedinjenja. Procenat u kompoziciji i preparatu može, naravno, da varira i može pogodno biti između oko 2% do oko 60% težine datog jediničnog doznog oblika. Količina aktivnog jedinjenja u takvim terapijski korisnim kompozicijama je takva da će se dobiti efikasan nivo doze.
[0154] Tablete, trohe, pilule, kapsule, i slično mogu takođe da sadrže sledeće razblaživače i nosače: bajndere kao što su tragakant guma, akacija, kukuruzni skrob ili želatin; ekscipijense kao što je dikalcijum fosfat; agens za dezintegraciju kao što je kukuruzni skrob, krompirov skrob, alginska kiselina i slično; lubrikant kao što je magnezijum stearat; i može se dodati agens za zaslađivanje kao što je saharoza, fruktoza, laktoza ili aspartam ili agens za aromatizovanje kao što je pepermint, ulje zimzelena, ili aroma trešnje. Kada je jedinični dozni oblik kapsula, ona može da sadrži, pored materijala prethodno navedenog tipa, tečni nosač, kao što je biljno ulje ili polietilen glikol. Različiti drugi materijali mogu biti prisutni kao obloge ili na drugi način modifikovati fizički oblik čvrstog jediničnog doznog oblika. Na primer, tablete, pilule, ili kapsule mogu biti obložene želatinom, voskom, šelakom ili šećerom i slično. Sirup ili eliksir može da sadrži aktivno jedinjenje, saharozu ili fruktozu kao agens za zaslađivanje, metil i propilparabene kao konzervanse, boju i aromu kao što je aroma trešnje ili pomorandže. Naravno, bilo koji materijal koji se upotrebljava u pripremi bilo kog jediničnog doznog oblika treba da bude farmaceutski prihvatljiv i suštinski netoksičan u količinama koje se koriste. Pored toga, aktivno jedinjenje može biti inkorporisano u preparate i uređaje sa neprekidnim oslobađanjem.
[0155] Aktivno jedinjenje se takođe može primeniti intravenski ili intraperitonealno pomoću infuzije ili injekcije. Rastvori aktivnog jedinjenja ili njegovih soli mogu biti pripremljeni u vodi ili fiziološki prihvatljivom vodenom rastvoru, opciono pomešani sa netoksičnim surfaktantom. Disperzije se takođe mogu pripremiti u glicerolu, tečnim polietilen glikolima, triacetinu, i njihovim smešama i u uljima. Pod uobičajenim uslovima skladištenja i upotrebe, ovi preparati sadrže konzervans za sprečavanje rasta mikroorganizama.
[0156] Farmaceutski dozni oblici koji su pogodni za injekciju ili infuziju mogu uključivati sterilne vodene rastvore ili disperzije ili sterilne prahove koji sadrže aktivni sastojak koji su prilagođeni za ex tempore pripremu sterilnih injekcionih ili infuzionih rastvora ili disperzija, opciono inkapsuliranih u lipozome. U svim slučajevima, krajnji dozni oblik treba da bude sterilan, tečan i stabilan u uslovima proizvodnje i skladištenja. Tečni nosač ili vehikulum može biti rastvarač ili tečni disperzioni medijum koji sadrži, na primer, vodu, etanol, poliol (na primer, glicerol, propilen glikol, tečne polietilen glikole, i slično), biljna ulja, netoksične gliceril estre, i njihove pogodne mešavine. Odgovarajuća tečljivost može se održavati, na primer, formiranjem lipozoma, održavanjem potrebne veličine čestica u slučaju disperzija ili upotrebom surfaktanata. Sprečavanje delovanja mikroorganizama može se postići različitim antibakterijskim i antifungalnim agensima, na primer, parabenima, hlorobutanolom, fenolom, sorbinskom kiselinom, timerosalom, i slično. U mnogim slučajevima biće poželjno uključiti izotonične agense, na primer, šećere, pufere ili natrijum hlorid. Produžena apsorpcija injektabilnih kompozicija može se postići upotrebom u kompozicijama agenasa koji odlažu apsorpciju, na primer, aluminijum monostearata i želatina.
[0157] Sterilni injektabilni rastvori pripremaju se inkorporisanjem aktivnog jedinjenja u potrebnoj količini u odgovarajući rastvarač sa raznim drugim sastojcima koji su prethodno nabrojani, prema potrebi, nakon čega sledi filter sterilizacija. U slučaju sterilnih prahova za pripremu sterilnih injektabilnih rastvora, postupci pripreme mogu uključivati sušenje u vakuumu i tehnike sušenja zamrzavanjem, koje daju prah aktivnog sastojka plus bilo koji dopunski željeni sastojak prisutan u prethodno sterilno filtriranim rastvorima.
[0158] Za topikalnu primenu, predmetna jedinjenja mogu se primeniti u čistom obliku, tj. kada su tečnosti. Međutim, generalno će biti poželjno da se primenjuju na kožu kao kompozicije ili formulacije, u kombinaciji sa dermatološki prihvatljivim nosačem, koji može biti čvrsta supstanca ili tečnost.
[0159] Korisni čvrsti nosači uključuju fino usitnjene čvrste supstance kao što su talk, glina, mikrokristalna celuloza, silicijum dioksid, glinica i slično. Korisni tečni nosači uključuju vodu, alkohole ili glikole ili mešavine voda-alkohol/glikol, u kojima se predmetna jedinjenja mogu rastvoriti ili dispergovati u efikasnim nivoima, opciono uz pomoć netoksičnih surfaktanata. Adjuvansi kao što su mirisi i dopunski antimikrobni agensi mogu se dodati kako bi se optimizovala svojstva za datu upotrebu. Rezultujuće tečne kompozicije mogu se primeniti sa upijajućih jastučića, upotrebljavati za impregniranje bandaža i drugih zavoja, ili raspršivati na zahvaćeno područje upotrebom raspršivača tipa pumpi ili aerosola.
[0160] Zgušnjivači kao što su sintetički polimeri, masne kiseline, soli i estri masnih kiselina, masni alkoholi, modifikovane celuloze ili modifikovani mineralni materijali takođe se mogu koristiti sa tečnim nosačima kako bi se formirale razmazljive paste, gelovi, masti, sapuni, i slično, za direktno nanošenje na kožu korisnika.
[0161] Primeri korisnih dermatoloških kompozicija koje se mogu upotrebljavati za isporuku jedinjenja iz pronalaska na kožu poznati su u struci; na primer, videti Jacquet et al. (S.A.D. pat. br. 4,608,392), Geria (S.A.D. pat. br. 4,992,478; koji su inkorporisani ovde putem reference), Smith et al. (S.A.D. pat. br.4,559,157), i Wortzman (S.A.D. pat. br.4,820,508).
[0162] Korisne doze jedinjenja iz pronalaska mogu se odrediti, barem u početku, poređenjem njihove in vitro aktivnosti i in vivo aktivnosti u životinjskim modelima. Postupci za ekstrapolaciju efikasnih doza kod miševa, i drugih životinja, na ljude poznati su u struci; na primer, videti S.A.D. pat. br.4,938,949.
[0163] Količina jedinjenja, ili njegove aktivne soli, potrebna za upotrebu u lečenju variraće ne samo u zavisnosti od određenog jedinjenja ili soli koje su odabrane, već i od puta primene, prirode stanja koje se leči, starosti i stanja pacijenta i biće na kraju određena po nahođenju ordinirajućeg lekara ili lekara specijaliste.
[0164] Generalno, međutim, pogodna doza biće u opsegu od oko 0,5 do oko 100 mg/kg telesne težine primaoca dnevno, npr. od oko 3 do oko 90 mg/kg telesne težine dnevno, od oko 6 do oko 75 mg po kilogramu telesne težine dnevno, od oko 10 do oko 60 mg/kg telesne težine dnevno, ili od oko 15 do oko 50 mg/kg telesne težine dnevno.
[0165] Jedinjenja iz pronalaska mogu se pogodno formulisati u jediničnom doznom obliku; na primer, koji sadrži 5 do 1000 mg, 10 do 750 mg, ili 50 do 500 mg aktivnog sastojka po jediničnom doznom obliku. U jednom primeru izvođenja, pronalazak obezbeđuje kompoziciju koja sadrži jedinjenje iz pronalaska formulisano u takvom jediničnom doznom obliku. Željena doza može pogodno biti predstavljena u jednoj dozi ili kao podeljene doze koje se primenjuju u odgovarajućim intervalima, na primer, kao dve, tri, četiri ili više poddoza dnevno. Sama poddoza se može dodatno podeliti, npr. na više diskretnih, labavo raspoređenih primena.
[0166] Jedinjenja iz pronalaska se takođe mogu primenjivati u kombinaciji sa drugim terapijskim agensima, na primer, drugim agensima koji su korisni za lečenje ili preveniranje ishemije, gubitka krvi, ili reperfuzione povrede.
[0167] Drugi sistemi isporuke mogu uključivati sisteme za isporuku sa vremenskim oslobađanjem, odloženim oslobađanjem, ili sa neprekidnim oslobađanjem, kao što su oni koji su dobro poznati u struci. Takvi sistemi mogu da izbegnu ponovljene primene aktivnog jedinjenja, povećavajući pogodnost za subjekta i lekara. Mnogi tipovi sistema za isporuku dostupni su i poznati osobama sa prosečnim iskustvom u struci. Upotreba implantata sa dugotrajnim neprekidnim oslobađanjem može biti poželjna. Dugotrajno oslobađanje, kao što se ovde upotrebljava, znači da je sistem za isporuku ili implantat konstruisan i uređen da isporučuje terapijske nivoe aktivnog sastojka tokom najmanje 30 dana, i poželjno 60 dana.
[0168] U određenim primerima izvođenja, jedinjenje iz pronalaska formulisano je za intraokularnu primenu, na primer direktnu injekciju ili inserciju unutar ili u vezi sa intraokularnim medicinskim uređajem.
[0169] Jedinjenja iz pronalaska mogu biti formulisana za deponovanje u medicinski uređaj, koji može uključivati bilo koji od različitih konvencionalnih graftova, stentova, uključujući stent graftove, katetere, balone, korpe, ili druge uređaje koji se mogu postaviti ili trajno implantirati unutar lumena tela. Kao poseban primer, bilo bi poželjno imati uređaje i postupke koji mogu da isporuče jedinjenja iz pronalaska u region tela koji se leči intervencionom tehnikom.
[0170] U primeru primera izvođenja, jedinjenje iz pronalaska može biti deponovano unutar medicinskog uređaja, kao što je stent, i isporučeno na mesto lečenja radi lečenja dela tela.
[0171] Stentovi se upotrebljavaju kao vehikulumi za isporuku terapijskih agenasa (tj. lekova). Intravaskularni stentovi se uglavnom trajno implantiraju u koronarne ili periferne sudove. Dizajn stenta uključuje one iz S.A.D. pat. br. 4,733,655 (Palmaz), S.A.D. pat. br. 4,800,882 (Gianturco), ili S.A.D. pat. br. 4,886,062 (Wiktor). Takav dizajn uključuje i metalne i polimerne stentove, kao i stentove koji su samo-šireći i balonom-šireći. Stentovi se takođe mogu upotrebljavati za isporuku leka na mestu kontakta sa vaskulaturom, kao što je objavljeno u S.A.D. pat. br. 5,102,417 (Palmaz), S.A.D. pat. br. 5,419,760 (Narciso, Jr.), S.A.D. pat. br. 5,429,634 (Narciso, Jr.), i u međunarodnoj patentnoj prijavi br. WO 91/12779 (Medtronic, Inc.) i WO 90/13332 (Cedars-Sanai Medical Center), na primer.
[0172] Termin "deponovan" znači da je jedinjenje obloženo, adsorbovano, postavljeno, ili na drugi način inkorporisano u uređaj postupcima koji su poznati u struci. Na primer, jedinjenje može biti ugrađeno i oslobođeno iznutra ("matriks tip") ili okruženo i oslobođeno kroz ("rezervoar tip") polimerne materijale koji oblažu ili prožimaju medicinski uređaj. U poslednjem primeru, jedinjenje može biti zarobljeno unutar polimernih materijala ili spregnuto sa polimernim materijalima upotrebom jedne ili više tehnika za generisanje takvih materijala koje su poznate u struci. U drugim formulacijama, jedinjenje može biti povezano sa površinom medicinskog uređaja bez potrebe za oblogom, na primer pomoću odvojivih veza, i oslobađati se vremenom ili se može ukloniti aktivnim mehaničkim ili hemijskim procesima.
U drugim formulacijama, jedinjenje može biti u trajno imobilizovanom obliku koji predstavlja jedinjenje na mestu implantacije.
[0173] U određenim primerima izvođenja, jedinjenje se može inkorporisati sa polimernim kompozicijama tokom formiranja biokompatibilnih obloga za medicinske uređaje, kao što su stentovi. Obloge koje su proizvedene od ovih komponenti uobičajeno su homogene i korisne su za oblaganje brojnih uređaja koji su dizajnirani za implantaciju.
[0174] Polimer može biti bilo biostabilan ili bioapsorbilan polimer u zavisnosti od željene stope oslobađanja ili željenog stepena stabilnosti polimera, ali često je bioapsorbilan polimer poželjniji za ovaj primer izvođenja pošto, za razliku od biostabilnog polimera, neće biti prisutan dugo posle implantacije da uzrokuje bilo kakav neželjeni, hronični lokalni odgovor. Bioapsorbilni polimeri koji se mogu upotrebljavati uključuju, ali nisu ograničeni na, poli(L-mlečna kiselina), polikaprolakton, poliglikolid (PGA), poli(laktid-ko-glikolid) (PLLA/PGA), poli(hidroksibutirat), poli(hidroksibutirat-ko-valerat), polidioksanon, poliortoestar, polianhidrid, poli(glikolna kiselina), poli(D-mlečna kiselina), poli(L-mlečna kiselina), poli(D, L-mlečna kiselina), poli(D, L-laktid) (PLA), poli(L-laktid) (PLLA), poli(glikolna kiselina-kotrimetilen karbonat) (PGA/PTMC), polietilen oksid (PEO), polidioksanon (PDS), polifosfoestar, polifosfoester uretan, poli(aminokiseline), cijanoakrilate, poli(trimetilen karbonat), poli(iminokarbonat), kopoli(etar-estri) (npr. PEO/PLA), polialkilen oksalate, polifosfazene i biomolekule kao što su fibrin, fibrinogen, celuloza, skrob, kolagen i hijaluronska kiselina, poliepsilon kaprolakton, polihidroksi buterna kiselina, poliortoestri, poliacetali, polidihidropirani, policijanoakrilati, umreženi ili amfipatični blok kopolimeri hidrogelova, i drugi pogodni bioapsorbilni polimeri koji su poznati u struci. Takođe, mogu se upotrebljavati biostabilni polimeri sa relativno niskim hroničnim odgovorom tkiva kao što su poliuretani, silikoni, i poliestri, i mogu se upotrebljavati i drugi polimeri ukoliko se mogu rastvoriti i očvrsnuti ili polimerizovati na medicinskom uređaju kao što su poliolefini, poliizobutilen i etilen-alfaolefin kopolimeri; akrilni polimeri i kopolimeri, vinil halidni polimeri i kopolimeri, kao što je polivinil hlorid; polivinilpirolidon; polivinil etri, kao što je polivinil metil etar; poliviniliden halidi, kao što su poliviniliden fluorid i poliviniliden hlorid; poliakrilonitril, polivinil ketoni; polivinil aromatici, kao što je polistiren, polivinil estri, kao što je polivinil acetat; kopolimeri vinil monomera jedni sa drugima i olefini, kao što su etilenmetil metakrilat kopolimeri, akrilonitril-stiren kopolimeri, ABS smole, i etilen-vinil acetat kopolimeri; piran kopolimer; polihidroksi-propil-metakrilamid-fenol; polihidroksietilaspartamid-fenol; polietilenoksid-polilizin supstituisan sa palmitoil ostacima; poliamidi, kao što su najlon 66 i polikaprolaktam; alkidne smole, polikarbonati; polioksimetileni; poliimidi; polietri; epoksidne smole, poliuretani; rajon; rajon-triacetat; celuloza, celuloza acetat, celuloza butirat; celuloza acetat butirat; celofan; celulozni nitrat; celulozni propionat; etri celuloze; i karboksimetil celuloza.
[0175] Polimeri i polupermeabilni polimerni matriksi mogu se formirati u oblikovane predmete, kao što su zalisci, stentovi, cevi, proteze i slično.
[0176] U određenim primerima izvođenja pronalaska, jedinjenje iz pronalaska spregnuto je sa polimerom ili polupermeabilnim polimernim matriksom koji se formira kao stent ili stentgraft uređaj.
[0177] Tipično, polimeri se nanose na površinu implantabilnog uređaja pomoću oblaganja centrifugiranjem, potapanja, ili raspršivanja. Dopunski postupci koji su poznati u struci takođe se mogu koristiti za ovu svrhu. Postupci raspršivanja uključuju tradicionalne postupke kao i tehnike mikrodeponovanja sa inkjet tipom dispenzera. Pored toga, polimer se može deponovati na implantabilni uređaj upotrebom foto-uzorkovanja kako bi se polimer postavio samo na određene delove uređaja. Ova obloga uređaja obezbeđuje uniforman sloj oko uređaja koji omogućava poboljšanu difuziju različitih analita kroz oblogu uređaja.
[0178] U određenim primerima izvođenja pronalaska, jedinjenje je formulisano za oslobađanje iz polimerne obloge u okolinu u kojoj je medicinski uređaj postavljen. Poželjno, jedinjenje se oslobađa na kontrolisan način tokom produženog vremenskog perioda (npr. meseci) upotrebom najmanje jedne od nekoliko dobro poznatih tehnika koje uključuju polimerne nosače ili slojeve za kontrolu elucije. Neke od ovih tehnika opisane su u S.A.D. patentnoj prijavi 2004/0243225A1.
[0179] Štaviše, kao što je opisano na primer u S.A.D. pat. br. 6,770,729, reagensima i reakcionim uslovima polimernih kompozicija može se manipulisati tako da se oslobađanje jedinjenja iz polimerne obloge može kontrolisati. Na primer, koeficijent difuzije jedne ili više polimernih obloga može se modulisati kako bi se kontrolisalo oslobađanje jedinjenja iz polimerne obloge. U varijaciji na ovu temu, koeficijent difuzije jedne ili više polimernih obloga može se kontrolisati tako da se moduliše sposobnost analita koji je prisutan u okruženju u kojem je medicinski uređaj postavljen (npr. analita koji olakšava razgradnju ili hidrolizu nekog dela polimera) da pristupi jednoj ili više komponenti unutar polimerne kompozicije (i na primer, time moduliše oslobađanje jedinjenja iz polimerne obloge). Još jedan primer izvođenja pronalaska uključuje uređaj koji ima mnoštvo polimernih obloga, od kojih svaka ima mnoštvo koeficijenata difuzije. U takvim primerima izvođenja pronalaska, oslobađanje jedinjenja iz polimerne obloge može biti modulisano pomoću mnoštva polimernih obloga.
[0180] U još jednom primeru izvođenja pronalaska, oslobađanje jedinjenja iz polimerne obloge kontroliše se modulisanjem jednog ili više svojstava polimerne kompozicije, kao što je prisustvo jednog ili više endogenih ili egzogenih jedinjenja, ili alternativno, pH vrednosti polimerne kompozicije. Na primer, određene polimerne kompozicije mogu biti dizajnirane tako da oslobađaju jedinjenje kao odgovor na smanjenje pH polimerne kompozicije.
Kompleti
[0181] Pronalazak takođe obezbeđuje komplet, koji sadrži jedinjenje iz pronalaska, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, najmanje jedan drugi terapijski agens, materijal za pakovanje, i uputstva za primenu jedinjenja iz pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i drugog terapijskog agensa ili agenasa sisaru za lečenje ili prevenciju ishemije, gubitka krvi, ili reperfuzione povrede kod sisara. U jednom primeru izvođenja, sisar je čovek.
PRIMERI
[0182] Premetni pronalazak dodatno je ilustrovan pomoću sledećih primera, koji ni na koji način ne bi trebalo da se tumače tako da ograničavaju obim pronalaska za koji se zahteva zaštita patenta.
Priprema (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(((ciklopropilmetil)amino)(fenil)metil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (1p)
Korak 1: Priprema N-(5-bromo-2-fluorofenil)-1,1,1-trimetil-N-(trimetilsilil)silanamina (1b)
[0183] U mešani rastvor 5-bromo-2-fluoroanilina (1a) (225 g, 1184 mmol) u trietilaminu (3301 ml, 20 ekv.) dodat je trimetilsilil trifluorometansulfonat (481 ml, 2664 mmol) na sobnoj temperaturi [Napomena: tokom dodavanja generisana je toplota ali, nije bilo potrebno hlađenje flaska]. Smeša je zagrevana na refluksu tokom 16 h i ohlađena do sobne temperature.
Dva sloja su odvojena. [Napomena: pokušati da ne izlažete rastvor vazduhu ili vlazi tokom odvajanja]. Taman rastvor sa dna je odbačen, i gornji sloj je koncentrovan u vakuumu kako bi se uklonio višak trietilamina. Uljasti ostatak je prebačen u flask od 1000 ml i destilovan pod jakim vakuumom. Jedinjenje počinje da se destiluje na 100 °C pri 0,5 mm/Hg. Prva frakcija (oko 15 ml) je odbačena, druga frakcija je sakupljana stabilno na 100 °C, 0,5 mm/Hg, kako bi se dobio N-(5-bromo-2-fluorofenil)-1,1,1-trimetil-N-(trimetilsilil)silanamin (1b) (364 g, 1089 mmol, 92% prinos). Ovo je uvek bilo sveže pripremano za sledeći korak;<1>H NMR (300 MHz, Hloroform-d) δ 7,17 - 7,11 (m, 1H), 7,09 (dd, J = 7,5, 2,5 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 0,08 (d, J = 0,6 Hz, 18H).
Korak 2: Priprema (3-(bis(trimetilsilil)amino)-4-fluorofenil)magnezijum bromida (1c)
[0184] Opiljcima magnezijuma (33,1 g, 1361 mmol) u tetrahidrofuranu (15 ml) dodat je jod (1,381 g, 5,44 mmol) nakon čega je sledio N-(5-bromo-2-fluorofenil)-1,1,1-trimetil-N-(trimetilsilil)silanamin (1b) (4g) kako bi se aktivirala reakcija tokom oko 5 minuta (boja joda je obezbojena). U ovom trenutku ostatak rastvora N-(5-bromo-2-fluorofenil)-1,1,1-trimetil-N-(trimetilsilil)silanamina (1b) (364 g, 1089 mmol) u tetrahidrofuranu (1000 ml) dodavan je polako tokom perioda od 3 h (temperatura reakcije je bila oko 60 °C tokom dodavanja). Rezultujući tamnosivi rastvor je mešan preko noći kako bi se dobio (3-(bis(trimetilsilil)amino)-4-fluorofenil)magnezijum bromid (1c) (397 g, 1107 mmol, 102% prinos, približno 1 M rastvor) koji je upotrebljen svež u sledećem koraku.
Korak 3: Priprema (R)-(-)-N-benziliden-2-metilpropan-2-sulfinamida (1d)
[0185] U mešani rastvor benzaldehida (259 ml, 2541 mmol) u tetrahidrofuranu (2500 ml) dodati su (R)-2-metilpropan-2-sulfinamid (280 g, 2310 mmol), tetraizopropoksititanijum (1382 ml, 4620 mmol) i mešano je na sobnoj temperaturi tokom 36 h. Reakciona smeša je razblažena sa 1 l rastvora soli uz snažno mešanje, nakon čega je sledio etil acetat (6 l) i mešana je tokom 4 h. Reakciona smeša je filtrirana i isprana sa etil acetatom (6 x 2 l). Organski slojevi su kombinovani, isprani sa rastvorom natrijum metabisulfita (329 ml, 1733 mmol), vodom (462 ml), osušeni iznad MgSO4, filtrirani, upareni do suva. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 1,5 kg, eluiranje sa 20% etil acetatom u heksanu) kako bi se dobio (R)-(-)-N-benziliden-2-metilpropan-2-sulfinamid (1d) (472,51 g, 2257 mmol, 98% prinos) kao bledožuto ulje;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,57 (s, 1H), 8,03 - 7,89 (m, 2H), 7,70 - 7,48 (m, 3H), 1,19 (s, 9H); MS (ES+) 232,18 (M+Na); Optička rotacija: [α]D= (-) 112,11 [4,155, CHCl3].
Korak 4: Priprema (R)-N-((R)-(3-amino-4-fluorofenil)fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (1e) i (R)-N-((S)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (1f)
[0186] Serija-1 U rastvor (R)-(-)-N-benziliden-2-metilpropan-2-sulfinamida (1d) (475 g, 2269 mmol) u toluenu (4 l) koji je ohlađen na -11 °C dodavan je kap po kap sveže pripremljen Grinjarov (Grignard) reagens (3-(bis(trimetilsilil)amino)-4-fluorofenil)magnezijum bromid (1c) (4,75 l, 3563 mmol) tokom perioda od 70 minuta, održavajući unutrašnju temperaturu između (-11,1 i -10 °C). Reakciona smeša je mešana na istoj temperaturi do završetka (proveriti pomoću TLC da li je reakcija završena). Reakcija je ugašena sa 1 N KHSO4na -10 °C. Reakcija je zagrejana do sobne temperature tokom perioda od 30 minuta i organski sloj je odvojen. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (2 x 2 l). Organski slojevi su kombinovani i isprani vodom (2 x 2 l), rastvorom soli (3,5 l), osušeni, filtrirani i koncentrovani u vakuumu kako bi se dobilo sirovo ulje koje sadrži smešu dijastereoizomera (R)-N-((R)-(3-amino)-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (1e) i (R)-N-((S)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (1f) [(de = 72/28) 727 g, 2269 mmol]. Sirovini u flasku od 22 l dodat je IPA (2000 ml) i zagrevano je na refluksu uz mešanje (30 minuta da se potpuno rastvori). Reakciona smeša je ohlađena na 27 °C tokom perioda od 5 h uz lagano mešanje. Dobijena čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, isprana sa IPA (5 x 100 ml), osušena na vazduhu tokom 24 h kako bi se dobio (R)-N-((R)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (1e) (351 g, 48,3% prinos, de = 94,63%) kao bela kristalna čvrsta supstanca.
[0187] Serija-2 Prethodno navedena procedura ponovljena je upotrebom (R)-(-)-N-benziliden-2-metilpropan-2-sulfinamida (1d) (0,500 kg, 2,389 mol) kako bi se dobio (R)-N-((R)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (1e) (329 g, 43% prinos, de = 93,58%) kao bela kristalna čvrsta supstanca.
[0188] Serija-3 Prethodno navedena procedura ponovljena je upotrebom (R)-(-)-N-benziliden-2-metilpropan-2-sulfinamida (1d) (409 g, 1953 mmol) kako bi se dobio (R)-N-((R)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (1e) (264 g, 42% prinos, de = 94,33%) kao bela kristalna čvrsta supstanca.
[0189] Druga kristalizacija: U prethodno navedene tri serije kombinovane u rotacionom uparivaču sa širokim grlom od 22 l koji je opremljen mehaničkom mešalicom koji sadrži smešu dijastereoizomera (1e) i (1f) (serija-1, 351 g, 48,3% prinos, de = 94,63%), (serija-2, 329 g, 43% prinos, de = 93,58%) i (serija-3, 264 g, 42% prinos, de = 94,33%) dodat je IPA (4000 ml) i zagrevano je na refluksu uz mešanje (50 min dok nije potpuno rastvoreno). Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature preko noći uz lagano mešanje (13 °C). Čvrsta supstanca je kristalizovana posle oko 1 h hlađenja i mešanje je nastavljeno preko noći. Dobijena čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, isprana sa IPA (1 x 100 ml i 2 x 200 ml), osušena u jakom vakuumu tokom 24 h kako bi se dobio (R)-N-((R)-(3-amino-4-fluorofenil) (fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (1e) (872 g, 92% prinos, de = 99,2852%) kao bela kristalna čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,40 - 7,26 (m, 4H), 7,25 - 7,15 (m, 1H), 6,90 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,75 (dd, J = 8,9, 2,2 Hz, 1H), 6,57 (ddd, J = 8,4, 4,4, 2,2 Hz, 1H), 5,77 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 5,33 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 5,11 (s, 2H), 1,13 (s, 9H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO) δ-137,36;<13>C NMR (75 MHz, DMSO) δ 151,32, 148,19, 143,13, 139,74, 139,70, 128,22, 127,63, 126,93, 115,04, 114,98, 114,91, 114,82, 114,60, 114,35, 61,88, 55,42, 22,77; Optička rotacija: [α]D= (-) 70,70 (MeOH, 1,065); Analiza izračunata za C17H21FN2OS: C, 63,72; H, 6,61; N, 8,74; Pronađeno: C, 63,74; H, 6,74; N, 8,74.
[0190] Podaci za (R)-N-((S)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (1f);<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,41 - 7,36 (m, 2H), 7,36 - 7,27 (m, 2H), 7,26 - 7,18 (m, 1H), 6,89 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,71 (dd, J = 8,9, 2,2 Hz, 1H), 6,51 (ddd, J = 8,4, 4,5, 2,2 Hz, 1H), 5,82 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 5,32 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 5,09 (s, 2H, 1H izmenjiv sa D2O), 1,14 (s, 9H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,32; MS (ES+) 321,3 (M+1), 343,3 (M+Na), 663,5 (2M+Na); MS (ES-) 319,3 (M-1), Optička rotacija: [α]D= (-) 73,21 (MeOH, 2,505).
Korak 5: Priprema (+)-5-amino(fenil)metil)-2-fluoroanilina (1g)
[0191] U mehanički mešanu kašu (R)-N-((R)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (1e) (99,13 g, 309 mmol) u MTBE (600 ml) dodata je 4 M HCl (dioksan) (162 ml, 650 mmol) i mešano je na sobnoj temperaturi tokom 11 h. Čvrsta supstanca počinje da se formira čim se započne dodavanje HCl. TLC analiza pokazuje neizreagovani početni materijal, dodato je još 4 M HCl (dioksan) (162 ml, 650 mmol) i mešano je na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Višak metanola je uparen, smeša je zalužena sa 3 N NaOH (455 ml) i jedinjenje je ekstrahovano sa etil acetatom (2 x 750 ml). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovanog MgSO4, filtrirani, upareni do suva. Čvrsta supstanca je triturisana sa heksanima, mešana tokom 1 h i dobijena čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom kako bi se dobio (+)-5-(amino(fenil)metil)-2-fluoroanilin (1g) (38,0 g, 57% prinos) kao bledožuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,39 - 7,33 (m, 2H), 7,27 (ddd, J = 7,6, 6,6, 1,2 Hz, 2H), 7,21 - 7,13 (m, 1H), 6,86 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,77 (dd, J = 9,0, 2,2 Hz, 1H), 6,54 (ddd, J = 8,3, 4,4, 2,2 Hz, 1H), 5,03 (s, 2H, izmenjiv sa D2O), 4,96 (s, 1H), 2,71 (s, 2H, izmenjiv sa D2O);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -138,12; MS (ES+) 217,2 (M+1); 215,1 (M-1); Optička rotacija: [α]D= (+) 1,47 (0,545, MeOH).
Korak 6: Priprema (-)-N-(ciklopropilmetil)-5-((ciklopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilina (1h) i (-)-5-((ciklopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilina (1i)
[0192] U mešani rastvor (+)-5-(amino(fenil)metil)-2-fluoroanilina (1g) (5,312 g, 24,56 mmol) u MeOH (80 ml) dodavan je ciklopropankarboksaldehid (1,944 ml, 25,8 mmol) na 0 °C tokom perioda od 10 min i mešano je tokom 30 min. Ovom je dodat natrijum borohidrid (1,859 g, 49,1 mmol) u više obroka i mešano je tokom 1 h na 0 °C. Višak rastvarača je uparen, i ostatak je tretiran vodom (100 ml) i ekstrahovan sa etil acetatom (2 x 100 ml). Organski slojevi su kombinovani, osušeni iznad anhidrovanog MgSO4, filtrirani i upareni do suva. Ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 80 g, eluiranje sa 0-100% etil acetatom u heksanima) kako bi se dobili
1. (-)-N-(ciklopropilmetil)-5-((ciklopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilin (1h) (0,663 g, 8% prinos) kao žuto ulje;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,44 - 7,35 (m, 2H), 7,30 - 7,21 (m, 2H), 7,19 - 7,08 (m, 1H), 6,96 - 6,75 (m, 2H), 6,55 (ddd, J = 8,3, 4,6, 2,0 Hz, 1H), 5,26 (td, J = 6,0, 2,3 Hz, 1H, izmenjiv sa D2O), 4,71 (s, 1H), 2,93 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 2,27 (d, J = 7,1 Hz, 3H, 1H, izmenjiv sa D2O), 1,09 - 0,84 (m, 2H), 0,39 (m, 4H), 0,25 - 0,15 (m, 2H), 0,09 - -0,02 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,56; MS (ES+) 325,4 (M+1); Optička rotacija: [α]D= (-) 6,67 [0,27, metanol] 2. (-)-5-((ciklopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilin (1i) (4,84 g, 73% prinos) kao žuto ulje;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,42 - 7,34 (m, 2H), 7,32-7,23 (m, 2H), 7,22 - 7,11 (m, 1H), 6,92 - 6,78 (m, 2H), 6,55 (ddd, J = 8,3, 4,5, 2,2 Hz, 1H), 5,04 (s, 2H, izmenjiv sa D2O), 4,67 (s, 1H), 2,25 (td, J = 9,6, 5,3 Hz, 3H; 1H, izmenjiv sa D2O), 1,04 - 0,80 (m, 1H), 0,50 - 0,28 (m, 2H), 0,11 - 0,02 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,92; MS (ES-) 269,3 (M-1); Optička rotacija: [α]D= (-) 12,24 [1,275, CHCl3]; Hiralna čistoća je proverena izvođenjem hiralne HPLC upotrebom hiralne AD-H kolone, 1 ml/min, Rastvarač: 95% heksan, 5% izopropanol, UV = 260 nM, 25 °C (>99,99 ee).
Korak 7: Priprema 5-(amino(fenil)metil)-2-fluoroanilina (1k)
[0193] Jedinjenje (R)-N-((3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (1j) dobijeno je iz matične tečnosti kristalizacijom smeše dijastereoizomera (R)-N-((R)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (1e) i (R)-N-((S)-(3-amino-4-fluorofenil)fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (1f). Jedinjenje 1k je pripremljeno od (R)-N-((3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (1j) (27,8 g, 87 mmol) upotrebom procedure koja je saopštena u koraku 5 Šeme 1 kako bi se dobio 5-(amino(fenil)metil)-2-fluoroanilin (1k) (14 g, 75%) kao svetlobraon čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,40 - 7,32 (m, 2H), 7,27 (ddd, J = 7,6, 6,7, 1,2 Hz, 2H), 7,21 -7,11 (m, 1H), 6,86 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,78 (dd, J = 9,0, 2,2 Hz, 1H), 6,54 (ddd, J = 8,3, 4,5, 2,2 Hz, 1H), 5,00 (s, 2H), 4,93 (s, 1H), 2,13 (s, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO) δ -138,30; MS (ES) 215,1 (M-1).
Korak 8: Priprema N-(ciklopropilmetil)-5-((ciklopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilina (1l) i 5-((ciklopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilina (1m)
[0194] Jedinjenja 1l i 1m pripremljena su od 5-(amino(fenil)metil)-2-fluoroanilina (1k) (1,081 g, 5,00 mmol) u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 6 Šeme 1 kako bi se dobili
1. N-(ciklopropilmetil)-5-((ciklopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilin (1l) (0,194 g, 0,598 mmol, 11,96% prinos) kao bezbojno ulje;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,44 - 7,35 (m, 2H), 7,30 - 7,21 (m, 2H), 7,19 - 7,11 (m, 1H), 6,94-6,79 (m, 2H), 6,56 (ddd, J = 8,2, 4,6, 2,1 Hz, 1H), 5,29 (td, J = 5,9, 2,3 Hz, 1H), 4,72 (s, 1H), 2,94 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 2,38 - 2,20 (m, 3H), 1,10 - 0,97 (m, 1H), 0,91 (m, 1H), 0,40 (m, 4H), 0,21 (m, 2H), 0,03 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO) δ-137,78; MS (ES+) 325,3 (M+1); (ES-) 323,2 (M-1).
2. 5-((ciklopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilin (1m) (0,795 g, 2,94 mmol, 58,8% prinos) kao bezbojno ulje;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,40 - 7,33 (m, 2H), 7,27 (tt, J = 6,6, 0,9 Hz, 2H), 7,20 - 7,12 (m, 1H), 6,90 - 6,78 (m, 2H), 6,54 (ddd, J= 8,3, 4,5, 2,1 Hz, 1H), 5,04 (s, 2H), 4,67 (s, 1H), 2,34 - 2,22 (m, 3H), 0,91 (m, 1H), 0,44 - 0,30 (m, 2H), 0,09 - 0,00 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO) δ-137,95; MS (ES+) 271,2 (M+1).
Korak 9: Priprema (2R,4R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (1o)
[0195] U mešani rastvor cis-hidroksi-D-prolina (1 g, 7,63 mmol) u vodenom rastvoru natrijum bikarbonata (61,0 ml, 30,5 mmol, 0,5 molarni) dodat je 4-hlorofenil izocijanat (1n) (1,952 ml, 15,25 mmol) i zagrevano je na 80 °C tokom 5 h. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i dobijena čvrsta supstanca je filtrirana. Vodeni filtrat je ispran sa etil acetatom, pH je podešena na 1 upotrebom konc. HCl i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 150 ml). Krajnji ekstrahovani organski slojevi su kombinovani, isprani rastvorom soli, osušeni i koncentrovani u vakuumu kako bi se dobila (2R,4R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilna kiselina (10) (1,92 g, 6,74 mmol, 88% prinos) kao bezbojna čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,33 (s, 1H), 8,41 (s, 1H), 7,61 - 7,48 (m, 2H), 7,32 - 7,22 (m, 2H), 5,16 (bs, 1H), 4,32 (m, 2H), 3,65 (dd, J = 10,2, 5,7 Hz, 1H), 3,31 (m, 1H), 2,32 (m, 1H), 1,90 (m, 1H); MS (ES+) 285,2 (M+1), 307,2 (M+Na), (ES-) 283,2 (M-1); Optička rotacija: [α]D= (+) 48,89 [0,27, MeOH].
Korak 10: Priprema (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(((ciklopropilmetil)amino)(fenil)metil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (1p)
[0196] U smešu (2R,4R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (1o) (0,2 g, 0,703 mmol), 5-((ciklopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilina (1m) (0,19 g, 0,703 mmol) u tetrahidrofuranu (5 ml) dodat je etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilat (EEDQ, 0,174 g, 0,703 mmol) i mešano je na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, i ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 24 g, eluiranje sa 0-100% CMA 80 u hloroformu) kako bi se dobio (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((ciklopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (1p) (65 mg, 0,121 mmol, 17,23% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,65 - 9,53 (m, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,05 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,57 - 7,52 (m, 2H), 7,41 - 7,35 (m, 2H), 7,27 (dt, J = 7,6, 3,2 Hz, 4H), 7,20 -7,12 (m, 3H), 5,29 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 4,81 (s, 1H), 4,51 (dd, J = 9,0, 4,6 Hz, 1H), 4,34 (q, J = 4,8 Hz, 1H), 3,69 (dd, J = 10,2, 5,6 Hz, 1H), 3,48 (dd, J = 10,0, 3,9 Hz, 1H), 2,38 (ddd, J = 18,8, 9,2, 4,7 Hz, 2H), 2,27 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 1,96 - 1,85 (m, 1H), 0,98 - 0,85 (m, 1H), 0,36 (dt, J = 8,4, 2,8 Hz, 2H), 0,05 (dd, J = 5,6, 4,0 Hz, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,72 (d, J = 2,9 Hz); MS (ES-) 535,4, 536,3, 537,4 (M, M-1, M-2); HPLC čistoća 93,5%.
Priprema (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (2a)
[0197] U rastvor (2R,4R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (1o) (0,2 g, 0,703 mmol), 2-fluoroanilina (0,078 g, 0,703 mmol) u tetrahidrofuranu (5 ml) dodat je etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilat (0,174 g, 0,703 mmol) i mešano je na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 24 g, eluiranje sa etil acetatom u heksanima 0 do 100%) kako bi se dobio (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (2a) (140 mg, 0,371 mmol, 52,7% prinos) kao bezbojna čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,11 (s, 1H), 8,94 (s, 1H), 8,42 (m, 1H), 8,00 (m, 2H), 7,78 - 7,65 (m, 3H), 7,59 (m, 2H), 5,76 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 5,10 -4,92 (m, 1H), 4,81 (m, 1H), 4,20 - 4,08 (m, 1H), 3,98 (m, 1H), 2,92 - 2,77 (m, 1H), 2,47 -2,24 (m, 1H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ- 126,05; MS (ES+) 400,3 (M+Na), 777,4 (2M+Na), (ES-) 376,3 (M-1); HPLC čistoća 99,51%.
Priprema (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((+)-(ciklopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (3a)
[0198] U smešu (2R,4R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (1o) (0,205 g, 0,721 mmol), (-)-5-((ciklopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilina (1i) (0,195 g, 0,721 mmol) u tetrahidrofuranu (5 ml) dodat je etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilat (0,178 g, 0,721 mmol) i mešano je na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 24 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) kako bi se dobio (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((+)-(ciklopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (3a) (25 mg, 0,047 mmol, 6,45% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,14 -7,98 (m, 1H), 7,59 - 7,51 (m, 2H), 7,38 (m, 2H), 7,32 - 7,23 (m, 4H), 7,21 - 7,09 (m, 3H), 5,30 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,51 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,34 (q, J = 4,8 Hz, 1H), 3,69 (dd, J = 10,0, 5,2 Hz, 1H), 3,48 (dd, J = 10,0, 4,1 Hz, 1H), 2,39 (m, 2H), 2,27 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 1,90 (m, 1H), 0,90 (m, 1H), 0,43 - 0,30 (m, 2H), 0,06 - 0,02 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,88; Masena spek (ES+) 537,4, 539,5 (M,M+2), (ES-) 537,3, 535,4 (M, M-2); HPLC čistoća 96,99%; Optička rotacija: [α]D= (+) 132 [0,2, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (4g)
Korak 1: Priprema 3-(3-ciklopropilakriloil)benzonitrila (4b)
[0199] U mešani rastvor 3-acetilbenzonitrila (4a) (50 g, 344 mmol) u metanolu (800 ml) na 0 °C dodat je ciklopropankarboksaldehid (41 ml, 549 mmol) nakon čega je sledio kalijum hidroksid (1 M vodeni rastvor, 67 ml, 67 mmol). Reakcionoj smeši je omogućeno da dostigne sobnu temperaturu i mešana je tokom 14 h. Reakcija je zakišeljena sa HCl do pH 6 (75 ml, 1 N) i koncentrovana u vakuumu održavajući temperaturu kupatila ispod 35 °C. Ostatak je razblažen sa etil acetatom (1200 ml) i ispran vodom (800 ml). Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (800 ml) i organski slojevi su kombinovani, isprani rastvorom soli, osušeni, filtrirani i koncentrovani u vakuumu kako bi se dobio 3-(3-ciklopropilakriloil)benzonitril (4b) (72,42 g) sirovi kao bezbojna tečnost, koji je kao takav upotrebljen u sledećem koraku;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,19 (dp, J = 7,8, 1,6 Hz, 1H), 8,11 (dddt, J = 6,3, 3,7, 2,6, 1,4 Hz, 1H), 7,80 - 7,65 (m, 2H), 7,32 (dd, J= 15,1, 7,6 Hz, 1H), 6,60 (ddd, J = 15,0, 11,3, 10,4 Hz, 1H), 1,91 - 1,74 (m, 1H), 1,04 (m, 2H), 0,85 - 0,75 (m, 2H).
Korak 2: Priprema 3-(3-ciklopropilpropanoil)benzonitrila (4c)
[0200] U mešani rastvor 3-(3-ciklopropilakriloil)benzonitrila (4b) (65,7 g, 333 mmol) u benzenu (750 ml) dodat je tri-n-butilkalaj hidrid (185 ml, 666 mmol) i zagrevano je na refluksu tokom 14 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel eluiranje sa etil acetatom u heksanima 0 do 100%) kako bi se dobio 3-(3-ciklopropilpropanoil)benzonitril (4c) (23,3, 116,9 mmol, 34% prinos) kao bezbojno ulje;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,41 (td, J = 1,8, 0,6 Hz, 1H), 8,24 (ddd, J = 7,9, 1,8, 1,2 Hz, 1H), 8,09 (dt, J = 7,7, 1,4 Hz, 1H), 7,73 (td, J = 7,8, 0,6 Hz, 1H), 3,15 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,52 (q, J= 7,1 Hz, 2H), 0,81 -0,64 (m, 1H), 0,46 - 0,26 (m, 2H), 0,13 - 0,00 (m, 2H); MS (ES-) 198,2 (M-1).
Korak 3: Priprema (-)-N-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4d)
[0201] Jedinjenje (4d) je pripremljeno od 3-(3-ciklopropilpropanoil)benzonitrila (4c) (22,8 g, 114 mmol) i (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (13,95 g, 114 mmol), upotrebom procedure kao što je saopšteno u koraku 3 Šeme 1 kako bi se dobio (-)-N-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid (4d) (21,8 g, 72,1 mmol, 63% prinos) kao svetložuti sirup;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,29 (s, 1H), 8,21 - 8,12 (m, 1H), 8,01 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,70 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 3,54 - 3,13(m, 2H), 1,44 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 1,23 (s, 9H), 0,82 - 0,65 (m, 1H), 0,44 - 0,29 (m, 2H), 0,11 - 0,00 (m, 2H); MS (ES+) 303,3 (M+1); (ES-) 301,3 (M-1); Optička rotacija: [α]D(-) 66,92 (0,26, MeOH).
Korak 4: Priprema (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4e)
[0202] U mešani rastvor (-)-N-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4d) (17,72 g, 58,6 mmol) u toluenu (350 ml) na - 20 °C dodavan je kap po kap sveže pripremljen rastvor (3-(bis(trimetilsilil)amino)-4-fluorofenil)magnezijum bromida (1c) (160 ml, 120 mmol, 0,75 N) tokom perioda od 30 min. Reakciona smeša je mešana na -20 °C tokom 1 h i ugašena sa 1 N vodenim rastvorom KHSO4(275 ml). Reakciona smeša je mešana tokom 1 h na sobnoj temperaturi, razblažena vodom (100 ml) zalužena sa 2 N NaOH do pH 8 i ekstrahovana sa etil acetatom (600 ml, 300 ml). Organski slojevi su kombinovani, isprani vodom (2 x 300 ml), rastvorom soli (300 ml), osušeni i koncentrovani u vakuumu do suva. Sirovi ostatak je triturisan sa etil acetatom i dobijena čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom kako bi se nakon sušenja pod vakuumom dobio (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (4e) (10,4 g, 42,91% prinos) kao bela čvrsta supstanca. Filtrat je koncentrovan u vakuumu i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa etil acetatom u heksanima 0 do 50%) do (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4e) (4,11 g, 16,95% prinos) kao bele čvrste supstance;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,78 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 7,70 (dt, J = 7,5, 1,4 Hz, 1H), 7,62 (dt, J = 8,1, 1,5 Hz, 1H), 7,50 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,90 (dd, J = 11,3, 8,5 Hz, 1H), 6,72 (dd, J = 8,7, 2,4 Hz, 1H), 6,47 (ddd, J = 8,5, 4,3, 2,4 Hz, 1H), 5,27 (s, 1H), 5,10 (s, 2H), 2,66-2,40 (m, 2H), 1,20-1,03 (m, 1H), 1,12 (s, 9H), 1,01-0,81 (m, 1H), 0,72-0,57 (m, 1H), 0,36 (m, 2H), 0,03-0,15 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,34; MS (ES+): 436,4 (M+Na); IR (KBr) 2235cm<-1>; Optička rotacija: [α]D(-) 107,95 (0,78, MeOH); Analiza izračunata za C23H28FN3OS: C, 66,80; H, 6,82; N, 10,16; Pronađeno: C, 67,06; H, 6,82; N, 10,28.
Korak 5: Priprema (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (4f)
[0203] U smešu (2R,4R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (1o) (0,2 g, 0,703 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4e) (0,291 g, 0,703 mmol) u tetrahidrofuranu (5 ml) dodat je etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilat (0,174 g, 0,703 mmol) i zagrevano je na refluksu tokom 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 24 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) kako bi se dobio (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (4f) (175 mg, 0,257 mmol, 36,6% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,66 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,07 (m, 1H), 7,79 (m, 1H), 7,71 (m, 1H), 7,61 - 7,47 (m, 4H), 7,31 - 7,24 (m, 2H), 7,19 (m, 1H), 7,08 (m, 1H), 5,50 (s, 1H), 5,33 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 4,51 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,34 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 3,68 (dd, J = 10,0, 5,2 Hz, 1H), 3,49 (dd, J = 10,0, 3,9 Hz, 1H), 2,78 - 2,53 (m, 2H), 2,38 (s, 1H), 1,90 (m, 1H), 1,13 (s, 10H), 0,90 (m, 1H), 0,63 (m, 1H), 0,34 (m, 2H), -0,03 - -0,19 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ-128,58; MS (ES+) 680,5 (M+1), 702,5, 704,5 (M+Cl), (ES-) 714,4, 716,5 (M+Cl); IR (KBr) 2231 cm<-1>; Optička rotacija: [α]D= (-) 19,4 [0,175, MeOH].
Korak 6: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (4g)
[0204] U mešani rastvor (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (4f) (160 mg, 0,235 mmol) u etanolu (10 ml) dodata je konc. HCl (0,098 ml, 1,176 mmol) i zagrevano je na refluksu tokom 1 h. Reakcija je koncentrovana u vakuumu i dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa 0-100% CMA 80 u hloroformu) kako bi se dobio (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (4g) (42 mg, 0,073 mmol, 31,0% prinos) kao bezbojna čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,08 - 7,99 (m, 1H), 7,86 (m, 1H), 7,63 (m, 2H), 7,59 - 7,51 (m, 2H), 7,46 (m, 1H), 7,32 - 7,23 (m, 2H), 7,12 (m, 2H), 5,30 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,50 (dd, J = 9,1, 4,7 Hz, 1H), 4,34 (q, J = 4,8 Hz, 1H), 3,68 (dd, J = 10,1, 5,3 Hz, 1H), 3,48 (dd, J = 10,1, 4,0 Hz, 1H), 2,46 - 2,28 (m, 3H), 2,27 - 2,16 (m, 2H), 1,90 (m, 1H), 1,02 (m, 2H), 0,70 - 0,56 (m, 1H), 0,34 (m, 2H), - 0,08 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,29; MS (ES-) 575,3 (M-1); HPLC čistoća 94,3%; Analiza izračunata za C31H31ClFN5O3,0,5H20: C, 63,64; H, 5,51; N, 11,97; Pronađeno: C, 63,68; H, 5,75; N, 11,77; Optička rotacija: [α]D= (+) 93,53 [0,34, MeOH].
Priprema (2S,4R)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (5e)
Korak 1: Priprema (2S,4R)-benzil 1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilata (5b)
[0205] Diizopropiletilamin (1,918 ml, 10,98 mmol) je spušten u suspenziju (2S,4R)-benzil 4-hidroksipirolidin-2-karboksilat 4-metilbenzensulfonata (5a) (4,32 g, 10,98 mmol) u anhidrovanom rastvoru dihlorometana (100 ml) i mešano je na sobnoj temperaturi tokom 10 min nakon čega je sledilo dodavanje 1-hloro-4-izocijanatobenzena (1n) (1,686 g, 10,98 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h i sipana u vodu (50 ml).
Odvojena čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom kako bi se dobio (2S,4R)-benzil 1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilat (5b) kao bela čvrsta supstanca. Filtrat je ekstrahovan sa dihlorometanom (3 x 50 ml), organski slojevi su kombinovani, isprani rastvorom soli (50 ml), osušeni iznad anhidrovanog magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je kombinovan sa filtriranom čvrstom supstancom kako bi se dobio (2S,4R)-benzil 1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilat (5b) (4,7 g, 12,54 mmol) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,54 (s, 1H), 7,61 - 7,45 (m, 2H), 7,37 - 7,31 (m, 5H), 7,31 - 7,25 (m, 2H), 5,21 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 5,19 -5,06 (m, 2H), 4,47 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,37 (m, 1H), 3,63 (dd, J = 10,5, 4,6 Hz, 1H), 3,49 -3,39 (m, 1H), 2,15 (m, 1H), 1,94 (m, 1H); MS (ES+) 375,4 (M+1), 397,4 (M+Na), 749,6 (2M+1), 771,6 (2M+Na), (ES-) 373,3 (M-1), 419,3 (M+Cl); Optička rotacija: [α]D= (-) 70,08 [0,625, MeOH].
Korak 2: Priprema (4R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (5c)
[0206] U mešani rastvor (2S,4R)-benzil 1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilata (5b) (3 g, 8,00 mmol) u metanolu (30 ml) dodat je natrijum hidroksid na sobnoj temperaturi (1,601 g, 40,0 mmol) i mešano je tokom 2 h. Reakcija je koncentrovana u vakuumu kako bi se uklonio metanol. Ostatak je rastvoren u vodi (10 ml) i ispran sa etil acetatom (2 x 20 ml). Vodeni sloj je zakišeljen sa konc. HCl do pH 2, ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 75 ml). Organski slojevi su kombinovani, isprani vodom (2 x 50 ml), rastvorom soli (50 ml), osušeni, filtrirani i koncentrovani u vakuumu kako bi se dobila (4R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilna kiselina (5c) (1 g, 3,51 mmol, 43,9% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,21 (s, 1H), 8,45 (2s, 1H), 7,61 - 7,42 (m, 2H), 7,37 - 7,21 (m, 2H), 5,17 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 4,32 (m, 2H), 3,63 (m, 1H), 3,34 - 3,21 (m, 1H), 2,31 (m, 1H), 2,22 - 2,00 (m, 1H); MS (ES+) 285,2 (M+1), 307,1 (M+Na), (ES-) 283,1 (M-1).
Korak 3: Priprema (2S,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (5d) i (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (4f)
[0207] Reakcija (4R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (5c) (550 mg, 1,932 mmol) sa (R)-N-((-)-1-(3-amino)-4-fluorofenil)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidom (4e) (799 mg, 1,932 mmol) u tetrahidrofuranu (5 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (478 mg, 1,932 mmol) kao što je saopšteno u koraku 5 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 24 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%)
1. (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (4f) (267 mg, 0,393 mmol, 20,32% prinos) kao belu čvrstu supstancu, nakon čega je sledio 2. (2S,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (5d) (203 mg, 0,298 mmol, 15,45% prinos) kao svetlonarandžasta čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,84 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 7,94 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,77 (d, J= 1,9 Hz, 1H), 7,70 (dt, J = 7,3, 1,5 Hz, 1H), 7,52 (m, 4H), 7,31 - 7,23 (m, 2H), 7,19 (m, 1H), 7,09 (m, 1H), 5,49 (s, 1H), 5,18 (d, J= 3,7 Hz, 1H), 4,66 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 4,39 (s, 1H), 3,67 (m, 1H), 3,47 - 3,37 (m, 1H), 2,68 - 2,54 (m, 2H), 2,17 - 2,05 (m, 1H), 2,06 - 1,87 (m, 1H), 1,11 (s, 10H), 0,89 (m, 1H), 0,72 - 0,49 (m, 1H), 0,33 (m, 2H), -0,02 - -0,20 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ-127,00; MS (ES-) 678,4, 679,5 (M-1); Optička rotacija [α]D= (-) 190 [0,08, MeOH].
Korak 4: Priprema (2S,4R)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (5e)
[0208] Reakcija (2S,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (5d) (183 mg, 0,269 mmol) u etanolu (5 ml) upotrebom konc. HCl (0,224 ml, 2,69 mmol) kao što je saopšteno u Šemi 4 korak 6 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa 0 do 30% CMA 80 u hloroformu) (2S,4R)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (5e) (100 mg, 0,174 mmol, 64,5% prinos) kao bezbojnu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,77 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 7,94 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,86 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,66 - 7,58 (m, 2H), 7,57 - 7,51 (m, 2H), 7,45 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,31 - 7,24 (m, 2H), 7,15 - 7,08 (m, 2H), 5,17 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 4,65 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 4,40 (s, 1H), 3,67 (dd, J = 10,3, 4,6 Hz, 1H), 3,43 (m, 1H), 2,30 (m, 2H), 2,25 - 2,07 (m, 3H), 2,03 - 1,89 (m, 1H), 1,09 - 0,93 (m, 2H), 0,62 (m, 1H), 0,38 - 0,28 (m, 2H), -0,04 - -0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,76; MS (ES+) 598,4, 600,4 (M+Na); HPLC: 5,12 min, (93,86%); Optička rotacija [α]D= (-) 96,05 [0,86, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-N1-metilpirolidin-1,2-dikarboksamida (6c) i (2S,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-N1-metilpirolidin-1,2-dikarboksamida (6d)
Korak 1: Priprema (4R)-metil 1-((4-hlorofenil)(metil)karbamoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilata (6a)
[0209] U mešani rastvor (2R,4R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (1o) (0,837 g, 2,94 mmol) u N,N-dimetilformamidu (20 ml) na 0° C dodat je natrijum hidrid (60% disperzija u mineralnom ulju, 0,941 g, 23,52 mmol) i mešano je na 0 °C tokom 1 h. U reakcionu smešu je na 0 °C dodat metil jodid (1,471 ml, 23,52 mmol) i mešano je tokom 2 h. Reakcija je ugašena dodavanjem 1 N vodenog rastvora KHSO4(15 ml), vode (100 ml) i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 100 ml). Organski slojevi su kombinovani, isprani vodom (2 x 50 ml), rastvorom soli (50 ml), osušeni, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni [silika gel 40 g, eluiranje sa (9:1) etil acetatom i metanolom u heksanima 0 do 40%] kako bi se dobio ((4R)-metil 1-((4-hlorofenil)(metil)karbamoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilat (6a) (250 mg, 0,765 mmol, 26,0% prinos) koji je upotrebljen u sledećoj reakciji;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,49 -7,40 (m, 2H), 7,37 - 7,30 (m, 2H), 4,54 - 4,30 (m, 1H), 3,90 - 3,74 (m, 1H), 3,67 (d, J = 4,7 Hz, 3H), 3,29 - 3,18 (m, 1H), 3,11 (2s, 3H), 3,06 (2s, 3H), 2,70 - 2,21 (m, 2H), 1,80 - 1,60 (m, 1H); MS (ES+) 349,3 (M+1).
Korak 2: Priprema ((4R)-1-((4-hlorofenil)(metil)karbamoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (6b)
[0210] U mešani rastvor (4R)-metil 1-((4-hlorofenil)(metil)karbamoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilata (6a) (250 mg, 0,765 mmol) u metanolu (10 ml) dodat je natrijum hidroksid na sobnoj temperaturi (0,765 ml, 3,06 mmol, 4 N vodeni rastvor), mešano je na sobnoj temperaturi preko noći i koncentrovano u vakuumu kako bi se uklonio metanol. Ostatak je rastvoren u vodi (30 ml), zakišeljen sa 1 N KHSO4i ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 50 ml). Organski slojevi su kombinovani, isprani vodom (20 ml), rastvorom soli (20 ml), osušeni, filtrirani i koncentrovani u vakuumu kako bi se dobila ((4R)-1-((4-hlorofenil)(metil)karbamoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilna kiselina (6b) (230 mg, 0,735 mmol, 96% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,64 (s, 1H), 7,47 - 7,31 (m, 4H), 4,40 - 4,24 (m, 1H), 3,90 - 3,73 (m, 1H), 3,33 - 3,16 (m, 1H), 3,11 (2s, 3H), 3,08 (2s, 3H), 2,50 - 2,19 (m, 2H), 1,80 - 1,57 (m, 1H); MS (ES+) 313,3, (ES-) 311,2 (M-1).
Korak 3: Priprema (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-N1-metilpirolidin-1,2dikarboksamida (6c) i (2S,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-N1-metilpirolidin-1,2-dikarboksamida (6d)
[0211] U smešu ((4R)-1-((4-hlorofenil)(metil)karbamoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (6b) (230 mg, 0,735 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4e) (304 mg, 0,735 mmol) u tetrahidrofuranu (5 ml) dodat je etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilat (EEDQ, 182 mg, 0,735 mmol) i zagrevano je na refluksu tokom 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 40 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu, 0 do 100%) da se dobije:
1. (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-N1-metilpirolidin-1,2-dikarboksamid (6c) (279 mg, 0,394 mmol, 53,6% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,89 (s, 1H), 8,02 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,73 (dt, J = 7,4, 1,3 Hz, 1H), 7,66 - 7,58 (m, 1H), 7,54 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,40 (s, 4H), 7,21 (dd, J = 10,5, 8,8 Hz, 1H), 7,17 - 7,05 (m, 1H), 5,55 (s, 1H), 4,75 -4,56 (m, 1H), 3,80 (s, 1H), 3,16 (s, 3H), 3,09 (s, 3H), 3,03 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 2,78 -2,67 (m, 2H), 2,66 - 2,54 (m, 1H), 2,47 - 2,23 (m, 1H), 1,82 - 1,61 (m, 1H), 1,15 (d, J = 1,4 Hz, 9H), 1,14 - 1,00 (m, 1H), 1,04 - 0,76 (m, 1H), 0,66 (m, 1H), 0,36 (m, 2H), 0,08 --0,11 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,84; MS (ES+) 708,6 (M+1), 730,6, 732,6 (M+Cl), (ES-) 706,6, 708,6 (M-1).
2. (2S,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-N1-metilpirolidin-1,2-dikarboksamid (6d) (200 mg, 0,282 mmol, 38,4% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,73 (s, 1H), 7,95 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,81 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,72 (dt, J = 7,4, 1,3 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,40 (s, 4H), 7,22 (dd, J = 10,4, 8,7 Hz, 1H), 7,14 (m, 1H), 5,56 (s, 1H), 4,58 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 3,94 - 3,79 (m, 1H), 3,29 (m, 1H), 3,10 (s, 3H), 3,08 (s, 3H), 2,73 (m, 2H), 2,57 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 1,74 - 1,50 (m, 1H), 1,28 - 1,16 (m, 1H), 1,15 (2s, 9H), 0,99 - 0,78 (m, 1H), 0,66 (m, 1H), 0,37 (m, 2H), 0,10 - -0,11 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,21; MS (ES+) 708,6 (M+1), 730,6, 732,6 (M+Cl), (ES-) 706,6, 708,6 (M-1).
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-metoksi-N1-metilpirolidin-1,2-dikarboksamida (6e)
[0212] Reakcija (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-N1-metilpirolidin-1,2-dikarboksamida (6c) (170 mg, 0,240 mmol) u etanolu (5 ml) upotrebom konc. HCl (0,200 ml, 2,400 mmol) kao što je saopšteno u Šemi 4 korak 6 za pripremu jedinjenja 4g dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa 0 do 30% CMA 80 u hloroformu) (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-metoksi-N1-metilpirolidin-1,2-dikarboksamid (6e) (115 mg, 0,190 mmol, 79% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,65 (s, 1H), 7,94 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,89 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,66 (ddt, J = 10,3, 7,7, 1,4 Hz, 2H), 7,49 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,46 - 7,34 (m, 4H), 7,19 - 7,12 (m, 2H), 4,56 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 3,93 - 3,77 (m, 1H), 3,10 (s, 3H), 3,08 (s, 3H), 2,61 - 2,39 (m, 2H), 2,36 (s, 2H), 2,31 - 2,14 (m, 2H), 1,72 - 1,52 (m, 1H), 1,13 - 0,97 (m, 2H), 0,77 - 0,57 (m, 1H), 0,42 - 0,27 (m, 2H), 3,42 - 3,19 (m, 1H), -0,00 - -0,07 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,01; MS (ES+) 626,4, 628,4 (M+Na); HPLC čistoća 99,04%; Optička rotacija [α]D= (-) 142,49 [1,005, MeOH].
Priprema (2S,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4- metoksi-N1-metilpirolidin-1,2-dikarboksamida (6f)
[0213] Reakcija (2S,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-N1-metilpirolidin-1,2-dikarboksamida (6d) (238 mg, 0,336 mmol) u etanolu (5 ml) upotrebom konc. HCl (0,280 ml, 3,36 mmol) kao što je saopšteno u Šemi 4 korak 6 za pripremu jedinjenja 4g dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa 0 do 30% CMA 80 u hloroformu) (2S,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-metoksi-N1-metilpirolidin-1,2-dikarboksamid (6f) (106 mg, 0,175 mmol, 52,2% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,81 (s, 1H), 7,98 - 7,91 (m, 1H), 7,89 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,70 - 7,62 (m, 2H), 7,48 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 1,5 Hz, 4H), 7,18 - 7,10 (m, 2H), 4,63 (dd, J = 10,3, 7,0 Hz, 1H), 3,80 (t, J = 3,5 Hz, 1H), 3,15 (s, 3H), 3,09 (s, 3H), 3,02 (m, 1H), 2,73 (m, 1H), 2,35 (s, 3H), 2,24 (m, 2H), 1,70 (m, 1H), 1,05 (m, 2H), 0,66 (m, 1H), 0,36 (m, 2H), -0,03 (s, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,42; MS (ES+) 626,4, 627,5 (M+Na), (ES-) 602,5, 603,3 (M-1); HPLC čistoća 91,30%; Optička rotacija [α]D= (+) 189,77 [0,86, MeOH].
Priprema (R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (7c)
Korak 1: Priprema (R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (7a)
[0214] Reakcija D-prolina (1,0 g, 8,69 mmol) u vodenom rastvoru natrijum bikarbonata (69,5 ml, 34,7 mmol, 0,5 M) sa 4-hlorofenil izocijanatom (1n) (2,223 ml, 17,37 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 9 Šeme 1 dala je (R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)pirolidin-2-karboksilnu kiselinu (7a) (1,6 g, 5,95 mmol, 68,6% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,45 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,66 - 7,41 (m, 2H), 7,41 - 7,09 (m, 2H), 4,44 - 4,16 (m, 1H), 3,67 - 3,38 (m, 2H), 2,28 - 2,05 (m, 1H), 1,92 (m, 3H); MS (ES+) 269,1 (M+1), 291,2, 293,2 (M+Na), (ES-) 267,2, 269,1 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 59,33 [0,3, MeOH].
Korak 2: Priprema (R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (7b)
[0215] Reakcija (R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (7a) (0,5 g, 1,861 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-)fluorofenil)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4e) (0,770 g, 1,861 mmol) u tetrahidrofuranu (25 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolina-1(2H)-karboksilata (0,460 g, 1,861 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (7b) (1,08 g, 1,626 mmol, 87% prinos) kao bezbojnu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,84 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 7,92 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,71 (dt, J = 7,3, 1,4 Hz, 1H), 7,65 - 7,44 (m, 4H), 7,32 - 7,24 (m, 2H), 7,19 (dd, J = 10,4, 8,7 Hz, 1H), 7,16 - 7,03 (m, 1H), 5,53 (s, 1H), 4,68 - 4,45 (m, 1H), 3,71 - 3,55 (m, 2H), 3,56 - 3,42 (m, 1H), 2,77 - 2,55 (m, 1H), 2,22 - 2,04 (m, 1H), 1,95 (m, 4H), 1,12 (s, 9H), 1,00 - 0,75 (m, 1H), 0,74 - 0,50 (m, 1H), 0,41 - 0,26 (m, 2H), 0,10 - -0,25 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,07; MS (ES+) 686,5, 688,5 (M+Na); Optička rotacija [α]D= (+) 142,65 [0,415, MeOH].
Korak 3: (R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (7c)
[0216] Reakcija (R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (7b) (0,9 g, 1,355 mmol) u etanolu (20 ml) upotrebom konc. HCl (1,129 ml, 13,55 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 30%) (R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (7c) (200 mg, 0,357 mmol, 26,4% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,76 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 7,94 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,86 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 7,63 (ddt, J = 7,8, 6,1, 1,3 Hz, 2H), 7,59 - 7,51 (m, 2H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,33 - 7,23 (m, 2H), 7,19 - 7,05 (m, 2H), 4,64 - 4,52 (m, 1H), 3,61 (m, 1H), 3,49 (m, 1H), 2,31 (m, 2H), 2,22 (m, 2H), 2,14 (m, 1H), 1,96 (m, 3H), 1,04 (m, 2H), 0,63 (m, 1 H), 0,33 (m, 2H), - 0,07 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,97; MS (ES+) 582,4 (M+Na), (ES-) 558,5 (M-1), 594,3, 596,3 (M+Cl); IR(KBr) 3385, 2229, 1657, 1527, 1494, 1406 cm<-1>; Optička rotacija [α]D= (+) 23,57 [0,28, MeOH].
Priprema (S)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (8c)
Korak 1: Priprema (S)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (8a)
[0217] Reakcija L-prolina (1,0 g, 8,69 mmol) u vodenom rastvoru natrijum bikarbonata (69,5 ml, 34,7 mmol, 0,5 M) sa 4-hlorofenil izocijanatom (1n) (2,223 ml, 17,37 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 9 Šeme 1 dala je (S)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)pirolidin-2-karboksilnu kiselinu (8a) (1,643 g, 6,11 mmol, 70,4% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,45 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,60 - 7,45 (m, 2H), 7,34 - 7,20 (m, 2H), 4,39 - 4,19 (m, 1H), 3,63 - 3,39 (m, 1H), 2,17 (m, 1H), 2,02 - 1,80 (m, 4H); MS (ES+) 269,3 (M+1), 291,3, 293,3 (M+Na); (ES-) 267,2 (M-1); Optička rotacija [α]D= (-) 51,85 [0,27, MeOH].
Korak 2: Priprema (S)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1 -dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (8b)
[0218] Reakcija (S)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (8a) (0,5 g, 1,861 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4e) (0,770 g, 1,861 mmol) u tetrahidrofuranu (25 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (0,46 g, 1,861 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (S)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletil sulfamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (8b) (1,002 g, 1,509 mmol, 81% prinos) kao bezbojnu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,83 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 8,02 - 7,91 (m, 1H), 7,78 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,71 (dt, J = 7,3, 1,5 Hz, 1H), 7,61 -7,45 (m, 4H), 7,32 - 7,25 (m, 2H), 7,20 (dd, J = 10,4, 8,7 Hz, 1H), 7,15 - 7,04 (m, 1H), 5,51 (s, 1H), 4,72 - 4,49 (m, 1H), 3,62 (m, 1H), 3,58 - 3,42 (m, 1H), 2,62 (m, 1H), 2,14 (m, 1H), 2,06 - 1,85 (m, 4H), 1,12 (s, 10H), 0,97 - 0,78 (m, 1H), 0,70 - 0,54 (m, 1H), 0,45 - 0,26 (m, 2H), 0,02 - -0,17 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,28; MS (ES+) 686,5, 688,5 (M+Na); Optička rotacija [α]D= (-) 208,15 [0,27, MeOH].
Korak 3: (S)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (8c)
[0219] Reakcija (S)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (8b) (0,9 g, 1,355 mmol) u etanolu (20 ml) upotrebom konc. HCl (1,129 ml, 13,55 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 30%) (S)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (8c) (300 mg, 0,536 mmol, 39,5% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,76 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 7,96 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,86 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,63 (ddt, J = 7,8, 4,7, 1,3 Hz, 2H), 7,59 - 7,51 (m, 2H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,31 - 7,24 (m, 2H), 7,12 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 4,66 - 4,45 (m, 1H), 3,69 - 3,54 (m, 1H), 3,56 - 3,42 (m, 1H), 2,37 - 2,28 (m, 2H), 2,27 - 2,06 (m, 2H), 2,04 - 1,86 (m, 4H), 1,11 - 0,89 (m, 2H), 0,73 - 0,54 (m, 1H), 0,40 -0,25 (m, 2H), -0,02 - -0,15 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,04; MS (ES+) 582,4; 584,5 (M+Na), (ES-) 558,4 (M-1); IR (KBr) 3386, 2229, 1655, 1594, 1526, 1494, 1405cm<-1>; Optička rotacija [α]D= (-)102,42[1,035, MeOH]; Analiza izračunata za C31H31ClFN5O2; C, 66,48; H, 5,58; N, 12,50; Pronađeno: C, 66,23; H, 5,71; N, 12,24.
Priprema (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (9c)
Korak 1: Priprema (2R,4S)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (9a)
[0220] Reakcija (2S,4S)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (trans-D-4-hidroksiprolin, 1,0 g, 7,63 mmol) u vodenom rastvoru natrijum bikarbonata (61,0 ml, 30,5 mmol, 0,5 M) sa 4-hlorofenil izocijanatom (1n) (1,952 ml, 15,25 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 9 Šeme 1 dala je (2R,4S)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4 hidroksipirolidin-2-karboksilnu kiselinu (9a) (1,643 g, 5,77 mmol, 76% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,43 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 7,57 - 7,48 (m, 2H), 7,31 - 7,22 (m, 2H), 5,16 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 4,34 (m, 2H), 3,60 (dd, J = 10,4, 4,6 Hz, 1H), 3,45 - 3,35 (m, 1H), 2,12 (m, 1H), 1,92 (m, 1H); MS (ES+) 285,3 (M+1), 307,2, 309,3 (M+Na), (ES-) 283,2, 285,3 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+)54,375 [0,32, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4S)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (9b)
[0221] Reakcija (2R,4S)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4 hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (9a) (0,7 g, 2,459 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4e) (1,017 g, 2,459 mmol) u tetrahidrofuranu (25 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (0,608 g, 2,459 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (2R,4S)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (9b) (1,37 g, 2,014 mmol, 82% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,86 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 7,91 (dd, J = 7,5, 2,4 Hz, 1H), 7,78 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,71 (dt, J = 7,4, 1,4 Hz, 1H), 7,63 - 7,45 (m, 4H), 7,31 - 7,23 (m, 2H), 7,19 (dd, J = 10,3, 8,7 Hz, 1H), 7,14 - 7,03 (m, 1H), 5,53 (s, 1H), 5,19 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 4,66 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 4,39 (m, 1H), 3,67 (dd, J = 10,4, 4,6 Hz, 1H), 3,44 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,80 -2,53 (m, 1H), 2,10 (m, 1H), 2,04 - 1,84 (m, 1H), 1,12 (s, 10H), 1,05 (s, 1H), 0,90 (s, 1H), 0,63 (s, 1H), 0,39 - 0,27 (m, 2H), -0,03 - -0,16 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,81; MS (ES+) 702,5, 704,5 (M+Na); Optička rotacija [α]D= (+) 20,71 [0,28, MeOH].
Korak 3: (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (9c)
[0222] Reakcija (2R,4S)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (9b) (0,725 g, 1,066 mmol) u etanolu (20 ml) upotrebom konc. HCl (0,888 ml, 10,66 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 30%) (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (9c) (210 mg, 0,365 mmol, 34,2% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,77 (s, 1H), 8,46 (s, 1H), 7,92 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,86 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,63 (m, 2H), 7,59 - 7,50 (m, 2H), 7,45 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,32 - 7,22 (m, 2H), 7,18 - 7,08 (m, 2H), 5,17 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 4,64 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 4,39 (m, 1H), 3,67 (dd, J = 10,3, 4,6 Hz, 1H), 3,47 - 3,36 (m, 2H), 2,31 (m, 2H), 2,21 (m, 2H), 2,11 (m, 1H), 1,11 - 0,91 (m, 2H), 0,62 (m, 1H), 0,41 - 0,22 (m, 2H), -0,08 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,52; MS (ES+) 598,4, 600,4 (M+Na), (ES-) 610,4, 612,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 132,69 [0,82, MeOH].
Priprema (2S,4S)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (10c)
Korak 1: Priprema (2S,4S)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (10a)
[0223] Reakcija (2S,4S)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (cis-L-4-hidroksiprolin, 1,0 g, 7,63 mmol) u vodenom rastvoru natrijum bikarbonata (61,0 ml, 30,5 mmol, 0,5 M) sa 4-hlorofenil izocijanatom (1n) (1,952 ml, 15,25 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 9 Šeme 1 dala je (2S,4S)-1-(4hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilnu kiselinu (10a) (1,643 g, 5,77 mmol, 76% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,33 (s, 1H), 8,41 (s, 1H), 7,64 - 7,43 (m, 2H), 7,37 - 7,14 (m, 2H), 5,09 (s, 1H), 4,51 - 4,16 (m, 2H), 3,65 (dd, J = 10,3, 5,6 Hz, 1H), 3,32 (m, 1H), 2,32 (m, 1H), 1,97 - 1,78 (m, 1H); MS (ES+) 307,2, 309,2 (M+Na), (ES-) 283,2, 285,2 (M-1); Optička rotacija [α]D= (-) 37,74 [0,265, MeOH].
Korak 2: Priprema (2S,4S)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (10b)
[0224] Reakcija (2S,4S)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (10a) (0,7 g, 2,459 mmol), (R)-N-((-)-1-(3)-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4e) (1,017 g, 2,459 mmol) u tetrahidrofuranu (25 ml) upotreom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (0,608 g, 2,459 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (2S,4S)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (10b) (0,961 g, 1,413 mmol, 57,5% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,66 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,06 (dd, J = 7,6, 2,4 Hz, 1H), 7,79 (m, 1H), 7,71 (m, 1H), 7,62 - 7,45 (m, 4H), 7,34 - 7,24 (m, 2H), 7,20 (dd, J = 10,5, 8,7 Hz, 1H), 7,14 - 7,03 (m, 1H), 5,49 (s, 1H), 5,32 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 4,51 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,39 - 4,25 (m, 1H), 3,68 (dd, J = 10,1, 5,2 Hz, 1H), 3,49 (dd, J = 9,9, 3,9 Hz, 1H), 2,75 - 2,51 (m, 2H), 2,49 - 2,20 (m, 1H), 1,97 - 1,81 (m, 1H), 1,13 (s, 9H), 1,07 (m, 1H), 0,90 (m, 1H), 0,64 (m, 1H), 0,40 - 0,26 (m, 2H), -0,06 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,68; MS (ES+) 702,5, 704,5 (M+Na), (ES-) 678,6, 680,5 (M-1); Optička rotacija [α]D= (-) 153,33 [0,27, MeOH].
Korak 3: Priprema (2S,4S)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (10c)
[0225] Reakcija (2S,4S)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (10b) (0,5 g, 0,735 mmol) u etanolu (20 ml) upotrebom konc. HCl (0,613 ml, 7,35 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 30%) (2S,4S)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (10c) (50 mg, 0,087 mmol, 11,81% prinos) kao bezbojnu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,62 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,05 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,86 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,63 (m, 2H), 7,59 - 7,50 (m, 2H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,34 - 7,24 (m, 2H), 7,19 - 7,04 (m, 2H), 5,30 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 4,51 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,34 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 3,69 (dd, J = 10,1, 5,3 Hz, 1H), 3,54 - 3,43 (m, 1H), 2,40 - 2,08 (m, 5H), 1,90 (m, 1H), 1,02 (m, 2H), 0,63 (m, 1H), 0,34 (m, 2H), -0,07 (s, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,13; MS (ES+) 598,4, 600,4 (M+Na); Optička rotacija [α]D= (-) 51,85 [0,7, MeOH]; Analiza izračunata za C31H31ClFN5O3•0,75H2O: C, 63,15; H, 5,56; N, 11,88; Pronađeno: C, 63,02; H, 5,89; N, 10,83.
Priprema (2S,4S)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (11e)
Korak 1: Priprema hidrohlorida (2S,4S)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (11b)
[0226] U mešani rastvor (2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (11a) (koja je pripremljena u skladu sa procedurom koja je saopštena u Benzimidazoleproline derivatives as orexin receptor antagonists and their preparation; autora Boss, Christoph et al; iz PCT Int. Appl., 2013182972, 12 Dec 2013; 0,25 g, 1,019 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) dodat je 6 N vodeni rastvor HCl (0,680 ml, 4,08 mmol) i mešano je preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je koncentrovana i osušena u vakuumu kako bi se dobio hidrohlorid (2S,4S)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (11b) (0,185 g, 1,019 mmol, 100% prinos) kao bela čvrsta supstanca koja je kao takva upotrebljena u sledećem koraku;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6/D2O) δ 4,42 (t, J = 6,7 Hz, 1H), 4,06 (m, 1H), 3,38 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 3,25 - 3,18 (m, 1H), 3,16 (s, 3H), 2,30 (dd, J = 7,3, 3,2 Hz, 2H).
Korak 2: Priprema (2S,4S)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (11c)
[0227] Reakcija hidrohlorida (2S,4S)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (11b) (182 mg, 1,0 mmol) u vodenom rastvoru natrijum bikarbonata (10 ml, 20 mmol, 0,5 M) sa 4-hlorofenil izocijanatom (1n) (10,256 ml, 2,0 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 9 Šeme 1 dala je (2S,4S)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilnu kiselinu (11c) (133 mg, 0,445 mmol, 44,5% prinos) MS (ES+) 321,3, 323,3 (M+Na), (ES-) 297,3, 299,3 (M-1).
Korak 3: Priprema (2S,4S)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (11d)
[0228] Reakcija (2S,4S)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (11c) (120 mg, 0,402 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4e) (166 mg, 0,402 mmol) u tetrahidrofuranu (20 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (99 mg, 0,402 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (2S,4S)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (11d) (156 mg, 0,225 mmol, 55,9% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,51 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,92 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,71 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,64 - 7,46 (m, 4H), 7,35 - 7,25 (m, 2H), 7,24 - 7,14 (m, 1H), 7,10 (s, 1H), 5,48 (s, 1H), 4,54 (dd, J = 9,2, 3,9 Hz, 1H), 4,07 (m, 1H), 3,72 (dd, J = 10,6, 5,0 Hz, 1H), 3,61 (dd, J = 10,0, 2,4 Hz, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,69 - 2,51 (m, 2H), 2,43 - 2,24 (m, 1H), 2,23 - 2,06 (m, 1H), 1,12 (s, 10H), 0,99 - 0,79 (m, 1H), 0,63 (s, 1H), 0,42 - 0,27 (m, 2H), 0,06 - -0,16 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,19; MS (ES+) 716,6, 718,5 (M+Na).
Korak 4: Priprema (2S,4S)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (11e)
[0229] Reakcija (2S,4S)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (11d) (0,143 g, 0,206 mmol) u etanolu (20 ml) upotrebom konc. HCl (0,172 ml, 2,060 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 30%) (2S,4S)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (11e) (80 mg, 0,136 mmol, 65,8% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,45 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,90 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,86 (m, 1H), 7,63 (m, 2H), 7,58 - 7,52 (m, 2H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,32 - 7,25 (m, 2H), 7,14 (s, 1H), 7,11 (s, 1H), 4,53 (dd, J = 9,1, 3,9 Hz, 1H), 4,07 (m, 1H), 3,73 (dd, J = 10,6, 5,1 Hz, 1H), 3,61 (dd, J = 10,4, 3,3 Hz, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,47 - 1,98 (m, 6H), 1,11 - 0,92 (m, 2H), 0,63 (m, 1H), 0,33 (m, 2H), -0,07 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,86; MS (ES+) 612,4, 614,4 (M+Na); IR (KBr) 2229 cm<-1>; Optička rotacija [α]D= (-)56,57 [0,495, MeOH]
Priprema (R)-benzil 2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilata (12b) Korak 1: Priprema (R)-1-(benziloksikarbonil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (12a)
[0230] U mešani rastvor D-prolina (1,2 g, 10,42 mmol) u 2 N vodenom rastvoru NaOH (20,85 ml, 41,7 mmol) na 0 °C dodat je benzil hloroformat (1,488 ml, 10,42 mmol) i omogućeno je da se zagreje do sobne temperature preko noći. Reakcija je isprana sa MTBE (2 x 25 ml), zakišeljena sa konc. HCl i ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 200 ml). Slojevi etil acetata su kombinovani, isprani vodom (50 ml), rastvorom soli (25 ml) osušeni i koncentrovani u vakuumu kako bi se dobila (R)-1-(benziloksikarbonil)pirolidin-2-karboksilna kiselina (12a) (2,41 g, 9,67 mmol, 93% prinos) koja je kao takva upotrebljena u sledećem koraku;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,66 (s, 1H), 7,42 - 7,25 (m, 5H), 5,14 - 4,97 (m, 2H), 4,20 (ddd, J = 22,7, 8,8, 3,5 Hz, 1H), 3,50 - 3,25 (m, 2H), 2,32 - 2,08 (m, 1H), 1,97 -1,75 (m, 3H); MS (ES+) 250,2 (M+1), 272,2 (M+Na), (ES-) 248,2 (M-1), 284,2 (M+Cl), 497,4 (2M-1).
Korak 2: Priprema (R)-benzil 2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilata (12b)
[0231] Reakcija (R)-1-(benziloksikarbonil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (12a) (1 g, 4,01 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4e) (1,659 g, 4,01 mmol) u tetrahidrofuranu (50 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (0,992 g, 4,01 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (R)-benzil 2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilat (12b) (2,4 g, 3,72 mmol, 93% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,86 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 7,92 (t, J = 9,0 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,65 - 7,56 (m, 1H), 7,51 (m, 1H), 7,37 (m, 2H), 7,29 - 7,06 (m, 5H), 5,52 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,14 - 4,93 (m, 2H), 4,62 - 4,38 (m, 1H), 3,58 - 3,33 (m, 2H), 2,72 - 2,57 (m, 1H), 2,33 - 2,08 (m, 1H), 1,97 - 1,73 (m, 4H), 1,12 (2s, 9H za rotamere), 1,11 - 1,00 (m, 1H), 0,86 (m, 1H), 0,62 (m, 1H), 0,34 (m, 2H), 0,01 - -0,18 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,74; MS (ES+) 645,6 (M+1), 667,6 (M+Na), (ES-) 643,6 (M-1); Optička rotacija [α]D= (-) 21,18 [0,255, MeOH].
Priprema (R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)pirolidin-1,2-dikarboksamida (13e)
Korak 1: Priprema fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamata (13b)
[0232] U rastvor 2-amino-5-hloropiridina (13a) (5 g, 38,9 mmol) u dihlorometanu (100 ml) koji je ohlađen u kupatilu sa ledenom vodom dodati su piridin (4,72 ml, 58,3 mmol) i fenil hloroformat (4,88 ml, 38,9 mmol). Rezultujuća smeša je mešana u kupatilu sa ledenom vodom tokom 2 h, razblažena vodom (100 ml) i dihlorometanom (50 ml). Dobijena čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom i osušena na 50 °C pod vakuumom kako bi se dobio fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamat (13b) (9,519 g, 38,3 mmol, 98% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,97 (s, 1H), 8,38 (dd, J = 2,6, 0,8 Hz, 1H), 7,93 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,84 (dd, J = 8,9, 0,8 Hz, 1H), 7,51 - 7,37 (m, 2H), 7,36 - 7,17 (m, 3H).
Korak 2: Priprema (R)-N-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-2-karboksamida (13c)
[0233] U suspenziju paladijuma na ugljeniku 10% (0,165 g, 0,155 mmol) u etanolu (75 ml) dodat je rastvor (R)-benzil 2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilata (12b) (1 g, 1,551 mmol) u etanolu i hidrogenizovan u Parr šejkeru na 50 psi tokom 5 h. Reakcija je filtrirana kroz malo jastuče celita i koncentrovana kako bi se dobio (R)-N-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-2-karboksamid (13c) (815 mg, 1,596 mmol, 103% prinos) koji je upotrebljen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,13 (s, 1H), 8,29 (dd, J = 7,6, 2,4 Hz, 1H), 7,79 (t, J = 1,8 Hz, 1H), 7,72 (dt, J = 7,4, 1,4 Hz, 1H), 7,60 (dt, J = 8,3, 1,5 Hz, 1H), 7,51 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,22 (m, 1H), 7,06 (m, 1H), 5,46 (s, 1H), 3,74 (dd, J = 9,1, 5,2 Hz, 1H), 3,43 (m, 2H), 2,87 (m, 2H), 2,71 - 2,53 (m, 2H), 2,05 (m, 1H), 1,79 (dq, J = 12,4, 6,5 Hz, 1H), 1,72 - 1,56 (m, 2H), 1,14 (s, 9H), 0,99 - 0,82 (m, 1H), 0,74 - 0,54 (m, 1H), 0,35 (m, 2H), 0,04 - -0,15 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -131,82; MS (ES+) 511,4 (M+1), 533,5 (M+Na), (ES-) 509,4 (M-1).
Korak 3: Priprema (R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (13d)
[0234] U rastvor (R)-N-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-2-karboksamida (13c) (0,763 g, 1,494 mmol) u tetrahidrofuranu (50 ml) dodati su fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamat (13b) (0,446 g, 1,793 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (1,041 ml, 5,98 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do refluksa tokom 16 h. Reakcija je ohlađena do sobne temperature, razblažena sa etil acetatom (100 ml), isprana vodom (2 x 50 ml), rastvorom soli (50 ml), osušena i koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni kako bi se dobio (R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R))-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (13d) (773 mg, 1,162 mmol, 78% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,82 (s, 1H), 9,07 (s, 1H), 8,28 (dd, J = 2,7, 0,8 Hz, 1H), 7,96 - 7,86 (m, 2H), 7,83 - 7,76 (m, 2H), 7,71 (dt, J = 7,4, 1,5 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,50 (m, 1H), 7,27 - 7,05 (m, 2H), 5,52 (s, 1H), 4,62 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 3,78 - 3,62 (m, 1H), 3,62 - 3,46 (m, 1H), 2,73 - 2,40 (m, 2H), 2,26 - 2,10 (m, 1H), 1,93 (m, 3H), 1,12 (s, 10H), 0,85 (m, 1H), 0,72 - 0,54 (m, 1H), 0,33 (m, 2H), 0,00 - -0,16 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,74.
Korak 4: Priprema (R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)pirolidin-1,2-dikarboksamida (13e)
[0235] Reakcija (R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (13d) (554 mg, 0,833 mmol) u etanolu (100 ml) upotrebom konc. HCl (0,694 ml, 8,33 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa 9:1 smešom etil acetata i metanola u heksanima 0 do 60%) (R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)pirolidin-1,2-dikarboksamid (13e) (219 mg, 0,390 mmol, 46,9% prinos) kao bezbojnu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,76 (s, 1H), 9,05 (s, 1H), 8,28 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,96 - 7,88 (m, 2H), 7,86 (m, 1H), 7,79 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,63 (ddt, J = 7,6, 5,9, 1,3 Hz, 2H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 4,61 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 3,66 (m, 1H), 3,56 (m, 1H), 3,33 - 3,27 (m, 1H), 2,40 -2,06 (m, 4H), 1,94 (m, 3H), 1,13 - 0,85 (m, 2H), 0,62 (m, 1H), 0,41 - 0,26 (m, 2H), -0,03 - -0,17 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,82; MS(ES+) 561,4, 562,4 (M+1), 583,4, 585,5 (M+Na); IR (KBr) 2229 cm<-1>; Optička rotacija [α]D= (+) 160,49 [0,82, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-(1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (14h)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (14b)
[0236] U rastvor (2R,4R)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (14a) (10 g, 76 mmol) u THF:H2O (125 ml, 2:1) dodat je 2,5 M vodeni rastvor natrijum hidroksida (42,1 ml, 105 mmol), nakon čega je sledio rastvor di-terc-butil dikarbonata (22,80 g, 104 mmol) u THF:H20 (125 ml, 2:1) i mešano je na sobnoj temperaturi tokom 32 h. Smeša je koncentrovana u vakuumu kako bi se uklonio THF i dodat je vodeni sloj zakišeljen sa 10% vodenim rastvorom kalijum hidrogen sulfata (150 ml). Rezultujuća smeša je ekstrahovana sa etil acetatom, isprana vodom, rastvorom soli, osušena, filtrirana, i uparena do suva. Rezultujuća polučvrsta supstanca je kristalizovana iz vrućeg etil acetata kako bi se dobila (2R,4R)-1-(tercbutoksikarbonil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilna kiselina (14b) (13,58 g, 58,7 mmol, 77% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,41 (s, 1H, izmenjiv sa D2O), 4,95 (s, 1H, izmenjiv sa D2O), 4,20 (q, J = 5,1 Hz, 1H), 4,14 - 4,02 (m, 1H), 3,48 (dt, J = 10,8, 5,4 Hz, 1H), 3,09 (ddd, J = 10,6, 6,2, 4,2 Hz, 1H), 2,41 - 2,20 (m, 1H), 1,81 (dt, J = 12,8, 5,0 Hz, 1H), 1,37 (d, J = 15,9 Hz, 9H);<1>H NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 4,34 (ddd, J = 5,8, 4,0, 1,5 Hz, 1H), 4,30 - 4,22 (m, 1H), 3,61 (dd, J = 11,1, 5,6 Hz, 1H), 3,38 - 3,33 (m, 1H), 2,54 - 2,32 (m, 1H), 2,15 - 1,97 (m, 1H), 1,45 (d, J = 12,0 Hz, 9H); MS (ES+) 254,3 (M+Na); MS (ES-) 230,2 (M-1), 461,5 (2M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 52,96 [1,065, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata (14c)
[0237] Reakcija (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (14b) (0,752 g, 3,25 mmol), (R)-N-((-)-1-(3)-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4e) (1,345 g, 3,25 mmol) u tetrahidrofuranu (50 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (0,804 g, 3,25 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilat (14c) (0,84 g, 1,340 mmol, 41,2% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,79 (s, 1H), 7,78 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,75 - 7,67 (m, 1H), 7,62 (m, 1H), 7,51 (m, 1H), 7,20 (m, 1H), 6,90 (m, 1H), 6,72 (m, 1H), 6,48 (m, 1H), 5,28 (s, 1H), 5,11 (s, 1H), 4,38 - 4,14 (m, 1H), 3,47 (m, 1H), 3,31 - 3,19 (m, 1H), 2,76 - 2,23 (m, 3H), 1,99 (m, 1H), 1,12 (s, 18H), 1,00 - 0,79 (m, 2H), 0,76 - 0,56 (m, 1H), 0,35 (m, 2H), -0,00 - -0,16 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,33; MS (ES+) 649,5 (M+Na), (ES-) 625,5 (M-1).
Korak 3: Priprema (2R,4R)-terc-butil 4-acetoksi-2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilata (14d)
[0238] U rastvor (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata (14c) (0,8 g, 1,276 mmol) u dihlorometanu (30 ml) dodati su DIPEA (0,669 ml, 3,83 mmol), anhidrid sirćetne kiseline (0,145 ml, 1,532 mmol), DMAP (7,80 mg, 0,064 mmol) i mešano je na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je razblažena sa dihlorometanom (100 ml), isprana vodom (2 x 25 ml), rastvorom soli (25 ml), osušena i koncentrovana. Dobijeni sirovi ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa etil acetatom u heksanima 0 do 50%) kako bi se dobio (2R,4R)-terc-butil 4-acetoksi-2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilat (14d) (324 mg, 0,484 mmol, 38,0% prinos) kao bela polučvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,63 (s, 1H), 7,78 (m, 1H), 7,76 - 7,55 (m, 3H), 7,51 (m, 1H), 7,21 (m, 2H), 5,49 (s, 1H), 5,09 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 4,42 (2 kompleta dd, J = 32,7, 7,2 Hz, 1H za rotamere), 3,76 - 3,59 (m, 1H), 3,49 - 3,35 (m, 1H), 2,75 - 2,38 (m, 2H), 2,09 - 1,95 (m, 1H), 1,87 (2S, 3H za rotamere), 1,36 (2s, 9H za rotamere), 1,12 (s, 10H), 1,08 - 1,00 (m, 1H), 1,00 - 0,80 (m, 1H), 0,72 - 0,51 (m, 1H), 0,44 - 0,24 (m, 2H), -0,06 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -125,32; MS (ES+) 691,6 (M+Na), (ES-) 667,6 (M-1); Optička rotacija [α]D= (-) 48,0 [0,125, MeOH].
Korak 4: Priprema (3R,5R)-5-(5-(1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenilkarbamoil)pirolidin-3-il acetata (14e) i (2R,4R)-N-(5-(1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksamida (14f)
[0239] Reakcija (2R,4R)-terc-butil 4-acetoksi-2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilata (14d) (0,32 g, 0,478 mmol) u etanolu (10 ml) upotrebom konc. HCl (0,399 ml, 4,78 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 60%)
1. (3R,5R)-5-(5-(1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenilkarbamoil)pirolidin-3-il acetat (14e) (90 mg, 0,194 mmol, 40,5% prinos);<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,04 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 8,24 - 8,11 (m, 1H), 7,84 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 7,64 (tt, J = 7,6, 1,3 Hz, 2H), 7,47 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,27 - 7,06 (m, 2H), 5,07 (m, 1H), 3,81 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 3,46 (m, 1H), 3,18 (m, 1H), 2,91 (m, 1H), 2,26 (m, 5H), 2,06 (m, 1H), 1,75 (s, 3H), 1,03 (m, 2H), 0,64 (m, 1H), 0,42 - 0,28 (m, 2H), -0,07 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -132,66; MS(ES+) 465,4 (M+1), 487,4 (M+Na), (ES-) 463,4 (M-1), 499,5 (M+Cl).
2. (2R,4R)-N-(5-(1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksamid (14f) (100 mg, 0,237 mmol, 49,5% prinos);<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,19 (s, 1H), 8,42 - 8,22 (m, 1H), 7,86 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,74 - 7,59 (m, 2H), 7,47 (m, 1H), 7,25 - 6,94 (m, 2H), 4,67 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 4,16 (m, 1H), 3,84 - 3,60 (m, 1H), 3,00 (m, 1H), 2,72 (dd, J = 10,6, 3,0 Hz, 1H), 2,43 - 2,03 (m, 6H), 1,83 (dt, J = 13,0, 3,9 Hz, 1H), 1,14 - 0,88 (m, 2H), 0,76 - 0,51 (m, 1H), 0,46 -0,25 (m, 2H), -0,03 - -0,10 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ - 133,44; MS (ES+) 423,4 (M+1), 445,4 (M+Na), (ES-) 457,4 (M+Cl).
Korak 5: Priprema (2R,4R)-N2-(5-(1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (14h)
[0240] Reakcija (2R,4R)-N-(5-(1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksamida (14f) (92 mg, 0,218 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (54,1 mg, 0,218 mmol) kao što je saopšteno u koraku 3 Šeme 13 posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa 10-100% CMA 80 u hloroformu) dala je (2R,4R)-N2-(5-(1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (14h) (34 mg, 0,059 mmol, 27,1% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,67 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,31 - 8,26 (m, 1H), 8,01 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,94 - 7,83 (m, 2H), 7,79 (dd, J = 9,0, 2,7 Hz, 1H), 7,63 (m, 2H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,13 (dd, J = 7,4, 2,0 Hz, 2H), 5,31 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 4,54 (m, 1H), 4,31 (q, J = 4,9 Hz, 1H), 3,73 (m, 1H), 3,51 (dd, J = 10,5, 4,2 Hz, 1H), 2,47 - 2,28 (m, 3H), 2,28 - 2,10 (m, 2H), 1,89 (m, 1H), 1,01 (m, 2H), 0,63 (m, 1H), 0,34 (m, 2H), -0,03 - -0,17 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,70; MS (ES+) 577,5, 579,5 (M+1); IR (KBr) 2229 cm<-1>.
Priprema (3R,5R)-5-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenilkarbamoil)-1-(5-hloropiridin-2-ilkarbamoil)pirolidin-3-il acetata (14g)
[0241] Reakcija (3R,5R)-5-(5-(1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenilkarbamoil)pirolidin-3-il acetata (14e) (81 mg, 0,174 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (43,4 mg, 0,174 mmol) kao što je saopšteno u koraku 3 Šeme 13 posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa 0-100% CMA 80 u hloroformu) dala je (3R,5R)-5-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenilkarbamoil)-1-(5-hloropiridin-2-ilkarbamoil)pirolidin-3-il acetat (14g) (24 mg, 0,039 mmol, 22,23% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,64 (s, 1H), 9,18 (s, 1H), 8,30 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,91 (dd, J = 9,0, 0,8 Hz, 1H), 7,86 - 7,79 (m, 2H), 7,75 (dd, J = 7,6, 2,2 Hz, 1H), 7,63 (m, 2H), 7,46 (m, 1H), 7,23 - 7,10 (m, 2H), 5,19 (q, J = 4,6, 3,7 Hz, 1H), 4,72 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 3,88 (dd, J = 11,7, 5,2 Hz, 1H), 3,75 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 2,48 - 2,40 (m, 1H), 2,32 (m, 2H), 2,22 (m, 3H), 1,87 (s, 3H), 1,12 - 0,91 (m, 2H), 0,72 - 0,50 (m, 1H), 0,42 - 0,28 (m, 2H), -0,03 - -0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,76; MS (ES-) 617,4 (M-1), 653,3, 655,3 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 109,1 [0,165, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-cijanofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (15f)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-1-(benziloksikarbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (15b)
[0242] U kašu natrijum hidrida (60% disperzija u ulju, 2,262 g, 56,5 mmol) u tetrahidrofuranu (30 ml) na -10 °C dodat je rastvor (2R,4R)-1-(benziloksikarbonil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (15a) (2,5 g, 9,42 mmol) u THF (60 ml). Reakcija je mešana tokom 30 min, nakon čega je sledilo dodavanje dimetil sulfata (0,901 ml, 9,42 mmol) i mešano je na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida i koncentrovana u vakuumu kako bi se uklonio THF. Reakciona smeša je zalužena, isprana etrom, zakišeljena i ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 100 ml).
Kombinovani sloj etil acetata je ispran vodom (50 ml), rastvorom soli (50 ml), osušen, filtriran i uparen u vakuumu kako bi se dobila (2R,4R)-1-(benziloksikarbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilna kiselina (15b) (2,138 g, 7,66 mmol, 81% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,56 (s, 1H), 7,55 - 7,12 (m, 5H), 5,23 -4,88 (m, 2H), 4,29 (ddd, J = 21,9, 9,4, 3,0 Hz, 1H), 3,95 (qt, J = 5,3, 2,7 Hz, 1H), 3,61 (ddd, J = 15,6, 11,5, 5,4 Hz, 1H), 3,31 (m, 1H), 3,17 (2s, 3H, za rotamere), 2,42 - 2,24 (m, 1H), 2,17 -2,01 (m, 1H); MS (ES-) 278,2 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 33,81 [0,775, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4R)-benzil 2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (15c)
[0243] Reakcija (2R,4R)-1-(benziloksikarbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (15b) (1,52 g, 5,44 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino)-4-fluorofenil)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4e) (2,251 g, 5,44 mmol) u tetrahidrofuranu (75 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (1,346 g, 5,44 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (2R,4R)-benzil 2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilat (15c) (3,15 g, 4,67 mmol, 86% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,54 (2s, 1H, za rotamere), 7,86 (m, 1H), 7,79 (m, 1H), 7,71 (m, 1H), 7,65 - 7,56 (m, 1H), 7,52 (m, 1H), 7,38 (m, 2H), 7,19 (m, 5H), 5,50 (2s, 1H, za rotamere), 5,18 - 4,93 (m, 2H), 4,54 - 4,33 (m, 1H), 4,05 - 3,93 (m, 2H), 3,75 - 3,59 (m, 1H), 3,49 - 3,39 (m, 1H), 3,19 (2s, 3H, za rotamere), 2,51 (m, 2H), 2,12 - 2,00 (m, 1H), 1,17 - 1,01 (m, 10H), 0,98 - 0,81 (m, 1H), 0,71 - 0,55 (m, 1H), 0,42 - 0,25 (m, 2H), 0,01 - -0,13 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,94, -127,36; MS (ES+) 675,5 (M+1), 697,5, 698,5 (M+Na), (ES-) 673,5 (M-1), 709,4, 710,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 58,2 [0,165, MeOH].
Korak 3: Priprema (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (15d)
[0244] Debenzilacija hidrogenizacijom (2R,4R)-benzil 2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4metoksipirolidin-1-karboksilata (15c) (3,05 g, 4,52 mmol) u etanolu (100 ml), upotrebom paladijuma na ugljeniku 10% (0,265 g, 0,249 mmol) kao katalizatora u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 2 Šeme 13 dala je (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamid (15d) (2,4 g, 4,44 mmol, 98% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,09 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 8,29 (dd, J = 7,7, 2,4 Hz, 1H), 7,80 (t, J = 1,8 Hz, 1H), 7,71 (dt, J = 7,4, 1,3 Hz, 1H), 7,62 (dt, J = 8,3, 1,5 Hz, 1H), 7,51 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,21 (dd, J = 10,8, 8,7 Hz, 1H), 7,10 - 7,01 (m, 1H), 5,47 (s, 1H), 3,95 - 3,81 (m, 1H), 3,74 (dd, J = 8,1, 5,1 Hz, 1H), 3,11 (s, 3H), 3,08 - 2,97 (m, 1H), 2,89 (dd, J = 11,1, 2,4 Hz, 1H), 2,75 - 2,56 (m, 2H), 2,13 - 2,01 (m, 2H), 1,14 (s, 10H), 1,12 - 1,04 (m, 1H), 0,96 - 0,80 (m, 1H), 0,72 - 0,53 (m, 1H), 0,43 - 0,27 (m, 2H), 0,00 - -0,15 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -132,45; MS (ES+) 541,5 (M+1), (ES-) 575,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 67,1 [0,155, MeOH].
Korak 4: Priprema (2R,4R)-N1-(4-cijanofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (15e)
[0245] Reakcija (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (15d) (0,5 g, 0,925 mmol) u tetrahidrofuranu (20 ml), 4-izocijanatobenzonitrila (0,267 g, 1,849 mmol) upotrebom DIPEA (0,646 ml, 3,70 mmol) kao baze upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 9 Šeme 1 dala je (2R,4R)-N1-(4-cijanofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (15e) (514 mg, 0,751 mmol, 81% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,51 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 8,85 (s, 1H), 7,90 -7,84 (m, 1H), 7,78 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 7,77 - 7,66 (m, 5H), 7,62 - 7,57 (m, 1H), 7,50 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,19 (dd, J = 10,3, 8,7 Hz, 1H), 7,14 - 7,06 (m, 1H), 5,50 (s, 1H), 4,57 (dd, J = 9,1, 4,1 Hz, 1H), 4,11 - 4,06 (m, 1H), 3,76 (dd, J = 10,6, 5,2 Hz, 1H), 3,65 (dd, J = 10,2, 2,9 Hz, 2H), 3,23 (s, 3H), 2,76 - 2,53 (m, 1H), 2,48 - 2,31 (m, 1H), 2,18 - 2,05 (m, 1H), 1,13 (s, 9H), 1,11 - 1,01 (m, 1H), 0,98 - 0,80 (m, 1H), 0,72 - 0,55 (m, 1H), 0,41 - 0,26 (m, 2H), -0,02 --0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,51; MS: (ES+) 685,5 (M+1), 707,5, 709,7 (M+Na), (ES-) 719,5, 721,1 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 4,21 [0,19, MeOH].
Korak 5: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-cijanofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (15f)
[0246] Reakcija (2R,4R)-N1-(4-cijanofenil)-N2-(5-((R)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (15e) (445 mg, 0,650 mmol) u etanolu (20 ml) upotrebom konc. HCl (0,542 ml, 6,50 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 60%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-cijanofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (15f) (300 mg, 0,517 mmol, 80% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,46 (s, 1H), 8,83 (s, 1H), 7,89 -7,81 (m, 2H), 7,78 - 7,60 (m, 6H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,18 - 7,07 (m, 2H), 4,56 (dd, J = 9,1, 4,1 Hz, 1H), 4,17 - 3,98 (m, 1H), 3,77 (dd, J = 10,5, 5,2 Hz, 1H), 3,63 (dd, J = 10,4, 3,4 Hz, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,41 - 2,14 (m, 5H), 2,14 - 2,00 (m, 1H), 1,09 - 0,92 (m, 2H), 0,76 -0,49 (m, 1H), 0,41 - 0,27 (m, 2H), - 0,04 - -0,19 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,39; MS (ES+) 603,5, 604,5 (M+Na), (ES-) 615,6, 617,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 108,68 [0,265, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-N1-(4-metoksifenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (16b)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-N1-(4-metoksifenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (16a)
[0247] Reakcija (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (15d) (0,5 g, 0,925 mmol) u tetrahidrofuranu (20 ml), fenil 1-izocijanato-4-metoksibenzena (0,240 ml, 1,849 mmol), DIPEA (0,646 ml, 3,70 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 9 Šeme 1 dala je (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-N1-(4-metoksifenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (16a) (552 mg, 0,800 mmol, 87% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,50 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,00 (dd, J = 7,7, 2,4 Hz, 1H), 7,79 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,71 (m, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,50 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,43 - 7,34 (m, 2H), 7,19 (m, 1H), 6,87 - 6,79 (m, 2H), 5,50 (s, 1H), 4,52 (dd, J = 9,2, 3,7 Hz, 1H), 4,07 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,65 (m, 2H), 3,22 (s, 3H), 2,75 - 2,48 (m, 2H), 2,32 (m, 1H), 2,23 - 2,11 (m, 1H), 1,13 (s, 10H), 1,00 - 0,79 (m, 1H), 0,43 - 0,25 (m, 2H), 0,63 (m, 1H), 0,43-0,25 (m, 2H), -0,01 - -0,15 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,51; MS (ES+) 690,5 (M+1), 712,5, 713,5 (M+Na), (ES-) 724,4, 726,6 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 17,78 [0,36, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-N1-(4-metoksifenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (16b)
[0248] Reakcija (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-N1-(4-metoksifenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (16a) (485 mg, 0,703 mmol) u etanolu (20 ml) upotrebom konc. HCl (0,586 ml, 7,03 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-N1-(4-metoksifenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (16b) (19 mg, 0,032 mmol, 4,61% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,44 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,97 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,86 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,71 - 7,57 (m, 2H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,41 - 7,32 (m, 2H), 7,13 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 6,88 - 6,75 (m, 2H), 4,51 (dd, J= 9,3, 3,7 Hz, 1H), 4,11 - 3,99 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,67 (m, 1H), 3,64 - 3,56 (m, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,38 - 2,11 (m, 6H), 1,11 - 0,94 (m, 2H), 0,73 - 0,55 (m, 1H), 0,40 - 0,24 (m, 2H), -0,01 - -0,21 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,61; MS (ES+) 586,5 (M+1), 608,5, 610,6 (M+Na), (ES-) 620,5, 622,5 (M+Cl); IR (KBr) 2228 cm<-1>; Analiza izračunata za C33H36FN5O4,0,5H2O; C, 66,65; H, 6,27; N, 11,78; Pronađeno; C, 66,83; H, 6,19; N, 11,71; Optička rotacija [α]D= (+) 95,48 [0,155, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-N1-(4-hlorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (17b)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-N1-(4-hlorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (17a)
[0249] Reakcija (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (15d) (0,5 g, 0,925 mmol) u tetrahidrofuranu (20 ml), 4-hlorofenil izocijanata (1n) (0,237 ml, 1,849 mmol), DIPEA (0,646 mmol, 3,70 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 9 Šeme 1 dala je (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-N1-(4-hlorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (17a) (555 mg, 0,799 mmol, 86% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,52 - 9,44 (m, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,96 - 7,88 (m, 1H), 7,79 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,71 (dt, J = 7,5, 1,3 Hz, 1H), 7,63 - 7,46 (m, 4H), 7,33 -7,25 (m, 2H), 7,19 (dd, J = 10,4, 8,8 Hz, 1H), 7,11 (m, 1H), 5,50 (s, 1H), 4,54 (m, 1H), 4,10 - 4,05 (m, 1H), 3,72 (m, 1H), 3,68 - 3,57 (m, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,63 (m, 2H), 2,42 - 2,26 (m, 1H), 2,12 (m, 1H), 1,13 (s, 9H), 1,12 - 1,01 (m, 1H), 0,98 - 0,76 (m, 1H), 0,72 - 0,56 (m, 1H), 0,43 - 0,22 (m, 2H), -0,02 - -0,16 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,06; MS: (ES+) 694,5 (M+H), 716,5, 718,5 (M+Na), (ES-) 728,5, 730,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 17,31 [0,335, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-N1-(4-hlorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (17b)
[0250] Reakcija (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (17a) (478 mg, 0,689 mmol) u etanolu (20 ml) upotrebom konc. HCl (0,574 ml, 6,89 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (17b) (52 mg, 8,3%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,67 (s, 1H), 9,21 (s, 3H), 8,56 (s, 1H), 7,89 (m, 2H), 7,84 (m, 1H), 7,70 - 7,58 (m, 2H), 7,58 - 7,52 (m, 2H), 7,36 (m, 1H), 7,32 - 7,26 (m, 2H), 7,09 (m, 1H), 4,56 (dd, J = 9,2, 4,0 Hz, 1H), 4,13 - 4,04 (m, 1H), 3,74 (dd, J = 10,5, 5,2 Hz, 1H), 3,62 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,60 - 2,53 (m, 1H), 2,47 - 2,32 (m, 1H), 2,08 (m, 1H), 1,15 -0,99 (m, 2H), 0,78 - 0,57 (m, 1H), 0,45 - 0,17 (m, 2H), 0,17 - -0,10 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -125,67; MS (ES+) 612,5, 614,4 (M+Na), (ES-) 624,4, (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 71,88 [0,32, MeOH]; Analiza izračunata za: C32H33ClFN5O3,HCl,2H2O; C, 58,01; H, 5,78; N, 10,57; Pronađeno: C, 58,21; H, 5,41; N, 10,24; IR (KBr) 2233 cm<-1>.
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (18b)
Korak 1: Priprema ((2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (18a)
[0251] Reakcija (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (15d) (0,475 g, 0,879 mmol) u tetrahidrofuranu (20 ml), fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamata (13b) (0,437 g, 1,757 mmol), DIPEA (0,614 ml, 3,51 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 3 Šeme 13 dala je ((2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (18a) (484 mg, 0,696 mmol, 79% prinos) kao beli prah;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,49 (s, 1H), 9,17 (s, 1H), 8,30 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,93 -7,86 (m, 2H), 7,84 - 7,77 (m, 2H), 7,71 (dt, J = 7,5, 1,3 Hz, 1H), 7,59 (dt, J = 8,2, 1,6 Hz, 1H), 7,50 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,19 (dd, J = 10,4, 8,7 Hz, 1H), 7,14 - 7,06 (m, 1H), 5,50 (s, 1H), 4,59 (dd, J = 9,1, 3,9 Hz, 1H), 4,04 (m, 1H), 3,81 - 3,63 (m, 2H), 3,21 (s, 3H), 2,75 -2,52 (m, 2H), 2,48 - 2,29 (m, 1H), 2,11 (m, 1H), 1,13 (s, 10H), 0,97 - 0,80 (m, 1H), 0,72 -0,49 (m, 1H), 0,40 - 0,27 (m, 2H), - 0,01 - -0,15 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,91; MS (ES+) 695,5 (M+1), 717,5, 719,5 (M+Na), (ES-) 729,5, 731,5 (M+Cl); IR (KBr) 2230 cm<-1>; Optička rotacija [α]D= (-) 19,10 [0,335, MeOH]; CHN izračunato za: C35H40ClFN6O4S,0,5H2O; C, 59,69; H, 5,87; N, 11,93; Pronađeno: C, 59,74; H, 5,75; N, 11,79.
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (18b)
[0252] Reakcija ((2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (18a) (406 mg, 0,584 mmol) u etanolu (20 ml) upotrebom konc. HCl (0,487 ml, 5,84 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (18b) (60 mg, 10%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,45 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,30 (dd, J = 2,6, 0,8 Hz, 1H), 7,93 - 7,84 (m, 3H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,7 Hz, 1H), 7,63 (ddt, J = 7,5, 5,7, 1,3 Hz, 2H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,57 (dd, J = 9,2, 3,9 Hz, 1H), 4,10 - 3,97 (m, 1H), 3,82 - 3,62 (m, 2H), 3,21 (s, 3H), 2,41 - 2,18 (m, 5H), 2,17 - 2,00 (m, 1H), 1,08 - 0,94 (m, 2H), 0,72 - 0,53 (m, 1H), 0,42 - 0,25 (m, 2H), -0,03 - 0,16 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,61; MS (ES+) 591,5, 593,4 (M+1), (ES-) 625,3, 627,6 (M+Cl); Analiza izračunata za:
C31H32ClFN6O3,0,25H2O: C, 62,52; H, 5,50; N, 14,11; Pronađeno: C, 62,53; H, 5,52; N, 13,89; Optička rotacija [α]D= (+) 95,38 [0,26, MeOH].
Priprema (2R,4R)-4-amino-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (19c)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-4-azido-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (19a)
[0253] U rastvor (2R,4S)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (9b) (0,502 g, 0,738 mmol) i trifenilfosfina (0,581 g, 2,214 mmol) u tetrahidrofuranu (15 ml) na 0 °C dodavana je smeša difenil fosforazidata (0,477 ml, 2,214 mmol) i diizopropil azodikarboksilata (0,430 ml, 2,214 mmol) u tetrahidrofuranu (5 ml) tokom perioda od 30 min. Reakciji je omogućeno da postigne sobnu temperaturu, mešana je tokom 24 h, razblažena sa etil acetatom (150 ml), isprana vodom (2 x 25 ml), rastvorom soli (25 ml), osušena, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 40 g, eluiranje sa (9:1) etil acetatom i metanolom u heksanima 0 do 100%) kako bi se dobio (2R,4R)-4-azido-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (19a) (88 mg, 0,125 mmol, 16,91% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,97 (s, 1H), 8,78 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,99 (m, 1H), 7,91 (m, 1H), 7,76 (m, 4H), 7,51 (m, 2H), 7,39 (m, 1H), 7,38 - 7,26 (m, 1H), 5,71 (s, 1H), 4,79 (m, 2H), 4,35 - 4,15 (m, 1H), 4,03 (m, 1H), 3,76 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 2,37 - 2,23 (m, 1H), 1,40 - 1,35 (m, 1H), 1,33 (s, 11H), 1,23 - 1,01 (m, 1H), 0,84 (m, 1H), 0,62-0,46 (m, 2H), 0,21 - 0,06 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,67.
Korak 2: Priprema (2R,4R)-4-amino-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (19c)
[0254] Hidrogenizacija (2R,4R)-4-azido-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (19a) (0,08 g, 0,113 mmol) u etanolu (10 ml), upotrebom paladijuma na ugljeniku 10% (0,012 g, 0,011 mmol) kao katalizatora tokom šest sati u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 2 Šeme 13 dala je (2R,4R)-4-amino-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (19c) (60 mg, 0,088 mmol, 78% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,46 (s, 1H), 8,11 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,79 (m, 1H), 7,70 (m, 1H), 7,63 - 7,46 (m, 4H), 7,26 (m, 2H), 7,23 - 7,13 (m, 1H), 7,05 (m, 1H), 5,48 (s, 1H), 4,44 (dd, J = 9,1, 5,1 Hz, 1H), 3,74 - 3,40 (m, 3H), 2,76 - 2,21 (m, 4H), 1,78 (m, 1H), 1,13 (s, 10H), 1,02 - 0,74 (m, 1H), 0,74 - 0,51 (m, 1H), 0,34 (m, 2H), -0,06 (m, 2H); MS (ES+) 679,6 (M+1); 702,5 (M+Na).
Korak 3: Priprema (2R,4R)-4-amino-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (19c)
[0255] Reakcija (2R,4R)-4-amino-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (19c) (0,052 g, 0,077 mmol) u etanolu (5 ml) upotrebom konc. HCl (0,064 ml, 0,766 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (2R,4R)-4-amino-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (19c) (12 mg, 0,021 mmol, 27,3% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,45 (s, 1H), 8,15 - 7,99 (m, 1H), 7,86 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 7,67 - 7,60 (m, 2H), 7,57 - 7,42 (m, 3H), 7,32 - 7,23 (m, 2H), 7,15 - 7,06 (m, 2H), 4,43 (dd, J = 9,0, 5,3 Hz, 1H), 3,64 (dd, J = 9,6, 5,6 Hz, 1H), 3,58 - 3,47 (m, 1H), 2,41 - 2,27 (m, 4H), 2,25 - 2,18 (m, 2H), 1,84 - 1,63 (m, 1H), 1,12 - 0,93 (m, 2H), 0,72 - 0,55 (m, 1H), 0,34 (m, 2H), -0,01 - -0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,51; MS (ES-) 573,5, 575,4 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 85,0 [0,08, MeOH].
Priprema (R)-N2-(5-(1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-oksopirolidin-1,2-dikarboksamida (20b)
Korak 1: Priprema (R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-oksopirolidin-1,2-dikarboksamida (20a)
[0256] U rastvor (2R,4S)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (9b) (50 mg, 0,074 mmol) u dihlorometanu (10 ml) na sobnoj temperaturi dodati su natrijum bikarbonat (24,70 mg, 0,294 mmol), Des-Martinov (Dess-Martin) perjodinan (100 mg, 0,235 mmol) i mešano je tokom 30 min. Reakcija je razblažena sa dihlorometanom (50 ml), isprana vodom (2 x 25 ml), rastvorom soli (25 ml), osušena, filtrirana i koncentrovana u vakuumu do suva. Dobijeni sirovi ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 4 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) kako bi se dobio (R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4oksopirolidin-1,2-dikarboksamid (20a) (40 mg, 0,059 mmol, 80% prinos) kao gotovo bezbojna čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,09 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,08 - 7,98 (m, 1H), 7,94 (m, 1H), 7,85 - 7,66 (m, 2H), 7,61 - 7,45 (m, 3H), 7,31 (m, 2H), 7,26 -7,16 (m, 1H), 7,13 (m, 1H), 5,51 (s, 1H), 5,10 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 4,27 - 4,10 (m, 1H), 3,98 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 3,40 (m, 2H), 2,63 - 2,38 (m, 2H), 1,11 (s, 10H), 0,98 - 0,79 (m, 1H), 0,72 - 0,51 (m, 1H), 0,40 - 0,25 (m, 2H), -0,00--0,21 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,75; MS (ES+) 700,4 (M+23), (ES-) 676,4 (M- 1); 712,4, 714,4 (M+Cl).
Korak 2: Priprema (R)-N2-(5-(1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-oksopirolidin-1,2-dikarboksamida (20b)
[0257] Reakcija (R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-oksopirolidin-1,2-dikarboksamida (20a) (35 mg, 0,052 mmol) u etanolu (5 ml) upotrebom konc. HCl (0,043 ml, 0,516 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (R)-N2-(5-(1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-oksopirolidin-1,2-dikarboksamid (20b) (20 mg, 0,035 mmol, 67,5% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,03 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,04 - 7,96 (m, 1H), 7,86 (t, J = 1,8 Hz, 1H), 7,63 (ddt, J = 7,6, 5,9, 1,4 Hz, 2H), 7,59 - 7,51 (m, 2H), 7,45 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,34 -7,27 (m, 2H), 7,18 - 7,08 (m, 2H), 5,10 (dd, J = 10,0, 2,2 Hz, 1H), 4,19 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 3,98 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 3,11 (m, 1H), 2,61 - 2,51 (m, 1H), 2,36-2,27 (m, 2H), 2,27 - 2,15 (m, 2H), 1,09 - 0,90 (m, 2H), 0,70 - 0,51 (m, 1H), 0,37 - 0,27 (m, 2H), -0,00 - -0,13 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,99; MS (ES+) 596,5 (M+Na), (ES-) 610,4 (M+Cl).
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (21d)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-benzil 2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata (21a)
[0258] Reakcija (2R,4R)-1-(benziloksikarbonil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (15a) (1,5 g, 5,65 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4e) (2,339 g, 5,65 mmol) u tetrahidrofuranu (50 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (1,398 g, 5,65 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (2R,4R)-benzil 2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilat (21a) (2,396 g, 3,63 mmol, 64,1% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,79 (2s, 1H, rotameri), 8,04 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,71 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,51 (m, 1H), 7,37 (m, 2H), 7,26 - 7,04 (m, 5H), 5,50 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 5,29 (s, 1H), 5,14 - 4,89 (m, 2H), 4,53 - 4,34 (m, 1H), 4,27 (s, 1H), 3,71 - 3,47 (m, 2H), 3,47 - 3,24 (m, 1H), 2,77 - 2,26 (m, 2H), 1,88 (m, 1H), 1,16 - 1,01 (m, 10H, rotameri), 0,98 - 0,77 (m, 1H), 0,73 - 0,53 (m, 1H), 0,41 - 0,26 (m, 2H), -0,02 - -0,16 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,76, -127,94; MS (ES+) 683,6 (M+Na), (ES-) 695,6 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 75,0 [0,16, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksamida (21b)
[0259] Debenzilacija hidrogenizacijom (2R,4R)-benzil 2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata (21a) (2,35 g, 3,56 mmol) u etanolu (100 ml), upotrebom paladijuma na ugljeniku 10% (0,378 g, 0,356 mmol) kao katalizatora u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 2 Šeme 13 dala je (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksamid (21b) (1,61 g, 3,06 mmol, 86% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,24 (s, 1H), 8,36 (dd, J = 7,8, 2,4 Hz, 1H), 7,79 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,72 (m, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,51 (m, 1H), 7,21 (dd, J = 10,8, 8,7 Hz, 1H), 7,09 - 6,99 (m, 1H), 5,46 (s, 1H), 4,70 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 4,22 - 4,10 (m, 1H), 3,84 - 3,64 (m, 1H), 3,00 (m, 1H), 2,79 - 2,68 (m, 2H), 2,68 - 2,52 (m, 2H), 2,21 - 2,07 (m, 1H), 1,84 (m, 1H), 1,14 (s, 10H), 1,01 - 0,76 (m, 1H), 0,75 - 0,54 (m, 1H), 0,44 - 0,25 (m, 2H), -0,02 - -0,23 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -132,73; MS (ES+) 527,5 (M+1), 549,5(M+Na), (ES-) 525,5 (M-1), 561,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 0,44 [0,15, MeOH].
Korak 3: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (21c)
[0260] Reakcija (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksamida (21b) (160 mg, 0,304 mmol) i fenil izocijanata (0,040 ml, 0,365 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 9 Šeme 1 dala je (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamid (21c) (176 mg, 0,273 mmol, 90% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,67 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 8,14 - 8,02 (m, 1H), 7,79 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,70 (dt, J = 7,4, 1,3 Hz, 1H), 7,59 (dt, J = 8,1, 1,6 Hz, 1H), 7,55 - 7,44 (m, 3H), 7,29 -7,10 (m, 3H), 7,12 - 7,02 (m, 1H), 6,94 (tt, J = 7,3, 1,2 Hz, 1H), 5,50 (s, 1H), 5,34 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 4,51 (dd, J = 9,1, 4,5 Hz, 1H), 4,42 -4,27 (m, 1H), 3,67 (dd, J = 10,1, 5,1 Hz, 1H), 3,52 (m, 1H), 2,74 - 2,52 (m, 2H), 2,44 - 2,29 (m, 1H), 1,93 (dd, J = 11,0, 6,5 Hz, 1H), 1,13 (s, 10H), 1,00 - 0,79 (m, 1H), 0,71 - 0,55 (m, 1H), 0,42 - 0,26 (m, 2H), 0,02 - -0,15 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,67; MS: (ES+) 646,5 (M+1), 668,5 (M+Na), (ES-) 644,5 (M-1), 680,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 37,42 [0,155, MeOH].
Korak 4: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (21d)
[0261] Reakcija (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (21c) (160 mg, 0,248 mmol) u etanolu (10 ml) upotrebom konc. HCl (0,206 ml, 2,478 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamid (21d) (50 mg, 0,092 mmol, 37,3% prinos) kao bezbojnu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,07 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,86 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,68 - 7,58 (m, 2H), 7,55 - 7,39 (m, 3H), 7,29 - 7,17 (m, 1H), 7,12 (d, J = 9,5 Hz, 2H), 6,99 - 6,85 (m, 1H), 5,30 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 4,50 (dd, J = 9,1, 4,5 Hz, 1H), 4,34 (s, 1H), 3,68 (dd, J = 10,1, 5,1 Hz, 1H), 3,50 (m, 1H), 2,38 - 2,19 (m, 6H), 1,98 - 1,84 (m, 1H), 1,10 - 0,94 (m, 2H), 0,70 - 0,55 (m, 1H), 0,39 - 0,28 (m, 2H), -0,02 - -0,12 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,38; MS (ES+) 564,4 (M+Na); Analiza izračunata za C31H32FN5O3,0,25H2O: C, 67,62; H, 6,04; N, 12,72; Pronađeno: C, 67,72; H, 6,10; N, 12,60; Optička rotacija [α]D= (+) 90,3 [0,32, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-p-tolilpirolidin-1,2-dikarboksamida (22b)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-p-tolilpirolidin-1,2-dikarboksamida (22a)
[0262] Reakcija (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksamida (21b) (160 mg, 0,304 mmol) i p-tolil izocijanata (0,046 ml, 0,365 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 9 Šeme 1 dala je (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-p-tolilpirolidin-1,2-dikarboksamid (22a) (154 mg, 0,233 mmol, 77% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,65 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,10 (dd, J = 7,7, 2,4 Hz, 1H), 7,79 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,70 (dt, J = 7,4, 1,4 Hz, 1H), 7,59 (dt, J = 8,1, 1,6 Hz, 1H), 7,55 - 7,45 (m, 1H), 7,42 - 7,31 (m, 2H), 7,19 (dd, J = 10,6, 8,7 Hz, 1H), 7,10 - 6,98 (m, 3H), 5,51 (s, 1H), 5,32 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 4,50 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 4,41 - 4,27 (m, 1H), 3,63 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 3,55 - 3,46 (m, 1H), 2,64 (m, 1H), 2,61 - 2,51 (m, 1H), 2,42 - 2,28 (m, 1H), 2,22 (m, 3H), 1,92 (m, 1H), 1,14 (d, 9H, rotameri), 1,12 - 1,00 (m, 1H), 0,98 - 0,81 (m, 1H), 0,72 - 0,55 (m, 1H), 0,44 - 0,29 (m, 2H), -0,01 - -0,13 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ - 128,93; MS: (ES+) 682,5 (M+Na), (ES-) 658,6 (M-1), 694,6 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-)14,66 [0,15, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-p-tolilpirolidin-1,2-dikarboksamida (22b)
[0263] Reakcija (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-p-tolilpirolidin-1,2-dikarboksamida (22a) (140 mg, 0,212 mmol) u etanolu (10 ml) upotrebom konc. HCl (0,177 ml, 2,122 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-p-tolilpirolidin-1,2-dikarboksamid (22b) (39 mg, 0,070 mmol, 33,1% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,60 (s, 1H), 8,27 (s, 1H), 8,07 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,87 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,73 - 7,57 (m, 2H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,40 - 7,34 (m, 2H), 7,15 - 7,09 (m, 2H), 7,03 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 5,29 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 4,49 (dd, J = 9,1, 4,5 Hz, 1H), 4,33 (m, 1H), 3,66 (dd, J = 10,1, 5,1 Hz, 1H), 3,48 (dd, J = 10,0, 3,9 Hz, 1H), 2,44 - 2,27 (m, 3H), 2,22 (m, 5H), 1,98 - 1,84 (m, 1H), 1,10 - 0,93 (m, 2H), 0,72 - 0,54 (m, 1H), 0,40 - 0,26 (m, 2H), -0,06 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,66; MS (ES+) 578,5 (M+Na), (ES-) 554,6 (M- 1), 590,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 92,5 [0,24, MeOH]; Analiza izračunata za C32H34FN5O3,0,25H2O: C, 68,61; H, 6,21; N, 12,50; Pronađeno, 68,68; H, 6,26; N, 12,30; Optička rotacija [α]D= (+) 90,0 [0,32, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-bromofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (23b)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-N1-(4-bromofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (23a)
[0264] Reakcija (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksamida (21b) (160 mg, 0,304 mmol) i 4-bromofenil izocijanata (72,2 mg, 0,365 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 9 Šeme 1 dala je (2R,4R)-N1-(4-bromofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (23a) (192 mg, 0,265 mmol, 87% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,66 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,06 (dd, J = 7,4, 2,3 Hz, 1H), 7,79 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 7,71 (dt, J = 7,5, 1,3 Hz, 1H), 7,59 (dt, J = 8,2, 1,6 Hz, 1H), 7,54 - 7,46 (m, 3H), 7,45 - 7,37 (m, 2H), 7,23 - 7,14 (m, 1H), 7,11 - 7,03 (m, 1H), 5,50 (s, 1H), 5,33 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 4,51 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,41 - 4,27 (m, 1H), 3,68 (dd, J = 10,1, 5,2 Hz, 1H), 3,49 (dd, J = 9,9, 3,8 Hz, 1H), 2,77 - 2,60 (m, 1H), 2,64 - 2,51 (m, 1H), 2,47 - 2,24 (m, 1H), 1,97 - 1,78 (m, 1H), 1,13 (s, 10H), 0,98 - 0,77 (m, 1H), 0,63 (m, 1H), 0,41 - 0,22 (m, 2H), - 0,02 - -0,17 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,38; MS: (ES+) 746,5, 748,5 (M+Na), (ES-) 722,5 (M-1), 758,5, 760,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 12,9 [0,155, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-bromofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (23b)
[0265] Reakcija (2R,4R)-N1-(4-bromofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (23a) (180 mg, 0,248 mmol) u etanolu (10 ml) upotrebom konc. HCl (0,207 ml, 2,484 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-bromofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (23b) (41 mg, 0,066 mmol, 26,6% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,04 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,86 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,67 - 7,59 (m, 2H), 7,53 - 7,45 (m, 3H), 7,44 - 7,37 (m, 2H), 7,12 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 5,30 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 4,50 (dd, J = 9,1, 4,8 Hz, 1H), 4,41 - 4,28 (m, 1H), 3,68 (dd, J = 10,2, 5,4 Hz, 1H), 3,47 (dd, J = 9,8, 4,0 Hz, 1H), 2,40 - 2,14 (m, 5H), 2,01 - 1,79 (m, 1H), 1,13 - 0,88 (m, 2H), 0,63 (m, 1H), 0,42 - 0,27 (m, 2H), -0,02 - -0,12 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,26 ; MS (ES+) 642,4, 644,5 (M+Na); IR (KBr) 2229 cm<-1>; Optička rotacija [α]D= (+) 101,54 [0,325, MeOH]; Analiza izračunata za C31H31BrFN5O3,0,5H2O: C, 59,15; H, 5,12; N, 11,12; Pronađeno: C, 59,11; H, 5,18; N, 10,95.
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (24b)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (24a)
[0266] Reakcija (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksamida (21b) (160 mg, 0,304 mmol) i 4-fluorofenil izocijanata (0,041 ml, 0,365 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 9 Šeme 1 dala je (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (24a) (138 mg, 0,208 mmol, 68,4% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,64 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 8,43 (s, 1H), 8,08 (dd, J = 7,6, 2,5 Hz, 1H), 7,91 - 7,75 (m, 1H), 7,71 (dt, J = 7,4, 1,4 Hz, 1H), 7,59 (dt, J = 8,2, 1,6 Hz, 1H), 7,50 (m, 3H), 7,12 - 7,01 (m, 3H), 5,50 (m, 1H), 5,32 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 4,50 (dd, J = 9,1, 4,5 Hz, 1H), 4,41 - 4,28 (m, 1H), 3,66 (dd, J = 10,0, 5,1 Hz, 1H), 3,49 (dd, J = 10,2, 3,8 Hz, 1H), 2,74 - 2,51 (m, 2H), 2,49 - 2,23 (m, 2H), 1,98 - 1,81 (m, 1H), 1,13 (d, J = 2,2 Hz, 10H), 0,98 - 0,76 (m, 1H), 0,70 - 0,52 (m, 1H), 0,38 -0,27 (m, 2H), 0,01 - -0,16 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -121,20, -128,61; MS: (ES+) 664,5 (M+1), 686,5 (M+Na), (ES-) 662,5 (M-1), 698,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 10,52 [0,095, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (24b)
[0267] Reakcija (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (24a) (125 mg, 0,188 mmol) u etanolu (10 ml) upotrebom konc. HCl (0,157 ml, 1,883 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (24b) (35 mg, 0,063 mmol, 33,2% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,60 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,06 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,86 (t, J = 1,8 Hz, 1H), 7,63 (m, 2H), 7,55 - 7,41 (m, 3H), 7,18 - 7,06 (m, 2H), 7,05 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 5,30 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 4,49 (dd, J = 9,1, 4,6 Hz, 1H), 4,43 - 4,22 (m, 1H), 3,67 (dd, J = 10,1, 5,3 Hz, 1H), 3,58 - 3,31 (m, 1H), 2,37 - 2,17 (m, 6H), 1,98 - 1,77 (m, 1H), 1,11 - 0,94 (m, 2H), 0,71 - 0,54 (m, 1H), 0,40 - 0,26 (m, 2H), -0,03 - -0,12 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -121,39, -129,49; MS (ES+) 582,5 (M+Na); Optička rotacija [α]D= (+) 85,93 [0,27, MeOH]
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(4-nitrofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (25b)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(4-nitrofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (25a)
[0268] Reakcija (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksamida (21b) (280 mg, 0,532 mmol) i 4-nitrofenil izocijanata (105 mg, 0,638 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 9 Šeme 1 dala je (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(4-nitrofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (25a) (353 mg, 0,511 mmol, 96% prinos) kao svetložutu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,72 (s, 1H), 9,07 (s, 1H), 8,19 - 8,10 (m, 2H), 8,02 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,85 - 7,75 (m, 3H), 7,70 (m, 1H), 7,62 - 7,55 (m, 1H), 7,50 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,19 (dd, J = 10,5, 8,7 Hz, 1H), 7,15 -7,02 (m, 1H), 5,51 (s, 1H), 5,35 (s, 1H), 4,56 (dd, J = 8,8, 5,1 Hz, 1H), 4,36 (m, 1H), 3,75 (dd, J = 10,1, 5,4 Hz, 1H), 3,52 (dd, J = 9,9, 4,2 Hz, 1H), 3,48 - 3,38 (m, 1H), 2,75 - 2,51 (m, 1H), 2,48 - 2,30 (m, 1H), 1,89 (m, 1H), 1,13 (s, 9H), 1,11 - 1,01 (m, 1H), 0,90 (m, 1H), 0,61 (m, 1H), 0,38 - 0,30 (m, 2H), -0,00 - -0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,81; MS (ES+) 713,5 (M+Na), (ES-) 689,5 (M-1), 725,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 18,66 [0,15, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(4-nitrofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (25b)
[0269] Reakcija (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(4-nitrofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (25a) (100 mg, 0,145 mmol) u etanolu (10 ml) upotrebom konc. HCl (0,121 ml, 1,448 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(4-nitrofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (25b) (61 mg, 0,104 mmol, 71,8% prinos) kao svetložutu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,66 (s, 1H), 9,05 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,15 (ddt, J = 9,3, 4,3, 2,1 Hz, 2H), 7,99 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,89 - 7,75 (m, 3H), 7,69 - 7,56 (m, 2H), 7,47 (ddd, J = 8,0, 3,9, 2,3 Hz, 1H), 7,18 - 7,07 (m, 2H), 5,32 (td, J = 4,9, 4,2, 2,2 Hz, 1H), 4,63 - 4,45 (m, 1H), 4,41 - 4,25 (m, 1H), 3,85 - 3,65 (m, 1H), 3,58 - 3,43 (m, 1H), 2,49 - 2,37 (m, 1H), 2,36 -2,26 (m, 1H), 2,29 - 2,13 (m, 3H), 1,89 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 1,12 - 0,92 (m, 2H), 0,71 - 0,53 (m, 1H), 0,40 - 0,26 (m, 2H), -0,02 - -0,15 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,42; MS (ES+) 609,5 (M+Na), (ES-) 585,5 (M-1), 621,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 124,90 [0,27, MeOH]; Analiza izračunata za C31H31FN6O5,0,5H2O: C, 62,51; H, 5,42; N, 14,11; Pronađeno: C, 62,58; H, 5,43; N, 13,89.
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(naftalen-1-il)pirolidin-1,2-dikarboksamida (26b)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(naftalen-1-il)pirolidin-1,2-dikarboksamida (26a)
[0270] Reakcija (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksamida (21b) (160 mg, 0,304 mmol) i 1-izocijanatonaftalena (61,7 mg, 0,365 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 9 Šeme 1 dala je (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(naftalen-1-il)pirolidin-1,2-dikarboksamid (26a) (196 mg, 0,282 mmol, 93% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,69 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,17 (dd, J = 7,7, 2,4 Hz, 1H), 8,04 - 7,95 (m, 1H), 7,91 (dd, J = 8,2, 1,4 Hz, 1H), 7,79 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,77 - 7,67 (m, 2H), 7,58 (m, 1H), 7,54 - 7,39 (m, 5H), 7,21 (dd, J = 10,6, 8,7 Hz, 1H), 7,07 (m, 1H), 5,47 (s, 1H), 5,38 (s, 1H), 4,56 (dd, J = 9,3, 3,9 Hz, 1H), 4,42 (s, 1H), 3,80 (dd, J = 10,3, 4,9 Hz, 1H), 3,64 (dd, J = 10,0, 3,1 Hz, 1H), 2,75 - 2,51 (m, 2H), 2,42 (m, 1H), 2,09 - 2,00 (m, 1H), 1,12 (s, 10H), 0,99 - 0,79 (m, 1H), 0,70 - 0,54 (m, 1H), 0,41 - 0,26 (m, 2H), -0,02 - -0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,33; MS (ES+) 718,5 (M+Na), (ES-) 694,6 (M-1), 730,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 61,3 [0,075, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(naftalen-1-il)pirolidin-1,2-dikarboksamida (26b)
[0271] Reakcija (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(naftalen-1-il)pirolidin-1,2-dikarboksamida (26a) (160 mg, 0,230 mmol) u etanolu (10 ml) upotrebom konc. HCl (0,192 ml, 2,299 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(naftalen-1-il)pirolidin-1,2-dikarboksamid (26b) (30 mg, 0,051 mmol, 22,05% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,63 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,13 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,91 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,87 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,77 - 7,69 (m, 1H), 7,66 - 7,62 (m, 1H), 7,51 - 7,40 (m, 5H), 7,20 - 7,07 (m, 2H), 5,34 (s, 1H), 4,55 (dd, J = 9,3, 4,0 Hz, 1H), 4,46 - 4,28 (m, 1H), 3,81 (dd, J = 10,3, 5,0 Hz, 1H), 3,68 - 3,55 (m, 1H), 2,48 - 2,35 (m, 2H), 2,30 (s, 2H), 2,22 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 2,08 - 1,96 (m, 1H), 1,12 - 0,94 (m, 2H), 0,71 - 0,55 (m, 1H), 0,39 - 0,28 (m, 2H), -0,03 - -0,15 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,99; MS (ES+) 614,5 (M+Na), (ES-) 590,6 (M-1), 626,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 81,2 [0,165, MeOH]; Analiza izračunata za: C35H34FN5O3,0,5H2O: C, 69,98; H, 5,87; N, 11,66; Pronađeno: C, 70,25; H, 5,99; N, 11,44.
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(4-(trifluorometil)fenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (27b)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(4-(trifluorometil)fenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (27a)
[0272] Reakcija (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksamida (21b) (160 mg, 0,304 mmol) i 1-izocijanato-4-(trifluorometil)benzena (0,043 ml, 0,304 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 9 Šeme 1 dala je (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(4-(trifluorometil)fenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (27a) (161 mg, 0,226 mmol, 74,2% prinos) kao bezbojnu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,69 (s, 1H), 8,76 (s, 1H), 8,04 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,89 - 7,62 (m, 4H), 7,60 (m, 2H), 7,50 (m, 1H), 7,25 - 7,11 (m, 1H), 7,04 (m, 1H), 5,50 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 5,35 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 4,54 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,41 - 4,28 (m, 2H), 3,72 (m, 1H), 3,52 (m, 1H), 2,75 - 2,54 (m, 1H), 2,48 - 2,24 (m, 1H), 1,99 - 1,80 (m, 1H), 1,13 (m, 10H), 1,11 - 1,00 (m, 1H), 0,97 - 0,76 (m, 1H), 0,71 - 0,56 (m, 1H), 0,42 - 0,26 (m, 2H), 0,00 - -0,18 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -59,80, -128,17; MS (ES+) 736,5 (M+Na), (ES-) 712,6 (M- 1), 748,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 14,19 [0,155, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(4-(trifluorometil)fenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (27b)
[0273] Reakcija (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(4-(trifluorometil)fenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (27a) (150 mg, 0,210 mmol) u etanolu (10 ml) upotrebom konc. HCl (0,175 ml, 2,101 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(4-(trifluorometil)fenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (27b) (50 mg, 0,082 mmol, 39,0% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,63 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,02 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,86 (t, J = 1,8 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,61 (m, 4H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 5,31 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 4,53 (dd, J = 9,0, 4,9 Hz, 1H), 4,42 - 4,27 (m, 1H), 3,72 (dd, J = 10,1, 5,3 Hz, 1H), 3,57 - 3,45 (m, 1H), 2,42 - 2,15 (m, 5H), 1,97 - 1,77 (m, 1H), 1,09 - 0,92 (m, 2H), 0,70 - 0,55 (m, 1H), 0,41 - 0,24 (m, 2H), -0,02 --0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -59,77, - 128,84; MS(ES+) 632,5 (M+Na), (ES-) 608,4 (M-1), 644,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 94,00 [0,3, MeOH]; Analiza izračunata za C32H31F4N5O3,0,5H2O: C, 62,13; H, 5,21; N, 11,32; Pronađeno: C, 62,54; H, 5,34; N, 11,15.
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-aminofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (28b)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-N1-(4-aminofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (28a)
[0274] Redukcija nitra u amin hidrogenizacijom (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-N1-(4-nitrofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (25a) (200 mg, 0,290 mmol) u etanolu (20 ml), upotrebom paladijuma na ugljeniku 10% (30,8 mg, 0,029 mmol) kao katalizatora u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 2 Šeme 13 dala je (2R,4R)-N1-(4-aminofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (28a) (160 mg, 0,242 mmol, 84% prinos) kao svetložutu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,62 (s, 1H), 8,32 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 8,15 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,79 (t, J = 1,9 Hz, 1H), 7,70 (dd, J = 7,2, 1,5 Hz, 1H), 7,63 - 7,55 (m, 1H), 7,50 (td, J = 7,8, 2,3 Hz, 1H), 7,19 (ddd, J = 10,6, 8,6, 2,0 Hz, 1H), 7,11 -7,01 (m, 3H), 6,46 (dd, J = 8,8, 2,2 Hz, 2H), 5,48 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 5,29 (dd, J = 4,7, 2,0 Hz, 1H), 4,74 (s, 2H), 4,46 (dd, J = 9,3, 4,0 Hz, 1H), 4,41 - 4,26 (m, 1H), 3,59 (m, 1H), 3,53 -3,41 (m, 1H), 2,75 - 2,50 (m, 1H), 2,41 - 2,22 (m, 1H), 1,94 (d, J = 13,4 Hz, 1H), 1,21 - 1,03 (m, 10H), 0,98 - 0,79 (m, 1H), 0,72 - 0,53 (m, 1H), 0,44 - 0,28 (m, 2H), - 0,03 - -0,11 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,01; MS (ES+) 661,5 (M+1), 683,5 (M+Na), (ES-) 659,5 (M-1), 695,6 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 21,9 [0,155, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-aminofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (28b)
[0275] Reakcija (2R,4R)-N1-(4-aminofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (28a) (0,15 g, 0,227 mmol) u etanolu (10 ml) upotrebom konc. HCl (0,208 ml, 2,497 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-aminofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (28b) (65 mg, 0,117 mmol, 51,4% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,57 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,12 (dd, J = 7,7, 2,1 Hz, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,87 (t, J = 1,8 Hz, 1H), 7,67 - 7,58 (m, 2H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,19 - 7,08 (m, 2H), 7,08 - 7,00 (m, 2H), 6,50 - 6,40 (m, 2H), 5,26 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 4,75 (s, 2H), 4,45 (dd, J = 9,2, 4,1 Hz, 1H), 4,38 - 4,23 (m, 1H), 3,59 (dd, J = 10,1, 4,9 Hz, 1H), 3,45 (dd, J = 10,0, 3,3 Hz, 1H), 2,41 -2,27 (m, 3H), 2,23 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 2,00 - 1,86 (m, 1H), 1,02 (m, 2H), 0,72 - 0,54 (m, 1H), 0,39 - 0,27 (m, 2H), -0,02 - -0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -130,17; MS (ES+) 579,5 (M+Na), (ES-) 555,5 (M-1), 593,6 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 100,8
[0,25, MeOH]; Analiza izračunata za C31H33FN6O3,0,5H2O: C, 65,83; H, 6,06; N, 14,86; Pronađeno: C, 65,67; H, 5,98; N, 14,58.
Priprema (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (29e)
Korak 1: Priprema (R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-oksopirolidin-2-karboksilne kiseline (29a)
[0276] U rastvor (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (14b) (51 g, 221 mmol) u dihlorometanu (2023 ml) na 0 °C koji sadrži trihloroizocijanurnu kiselinu (51,3 g, 221 mmol) dodat je TEMPO (1,723 g, 11,03 mmol), mešano je na 0 °C tokom 30 min i omogućeno je da se zagreje do sobne temperature preko noći. Reakciona smeša je razblažena vodom (100 ml) mešana je tokom 30 min i koncentrovana u vakuumu kako bi se uklonio dihlorometan. Reakciona smeša je razblažena sa 200 ml etil acetata, filtrirana kroz čep od celita. Filtrat je zakišeljen sa 8 ml 1 M HCl. Sloj etil acetata je odvojen ispran vodom (4 x 200 ml), rastvorom soli (100 ml), osušen, filtriran, i koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila (R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-oksopirolidin-2-karboksilna kiselina (29a) (38 g, 166 mmol, 75% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,00 (s, 1H), 4,53 (m, 1H), 3,82 (dd, J = 18,6, 10,6 Hz, 1H), 3,66 (dd, J = 18,4, 4,4 Hz, 1H), 3,44 (s, 1H), 3,12 (m, 1H), 1,40 (s, 9H); MS (ES-) 228,2 (M-1), 457,3 (2M-1).
Korak 2: Priprema (2R,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-2-karboksilne kiseline (29b)
[0277] Rastvor (R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-oksopirolidin-2-karboksilne kiseline (29a) (1,45 g, 6,33 mmol) u THF (20 ml) dodat je kap po kap u 1,0 M rastvor fenilmagnezijum bromida (17,40 ml, 17,40 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 20 min, ugašena zasićenim rastvorom amonijum hlorida (15 ml) i koncentrovana u vakuumu kako bi se uklonili organski rastvarači. Reakciona smeša je podeljena između etil acetata (50 ml) i 1 M HCl (20 ml). Organski sloj je odvojen, ispran rastvorom soli, osušen, filtriran i koncentrovan do zapremine od 25 ml, rastvor je razblažen uz mešanje sa heksanima (70 ml). Dobijena čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, isprana heksanima, osušena u vakuumu kako bi se dobila (2R,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-2-karboksilna kiselina (29b) (900 mg, 2,93 mmol, 46,3% prinos) kao svetlobraon čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,47 (s, 1H), 7,53 (d, J = 7,7 Hz, 2H), 7,41 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,33 (q, J = 7,1, 6,5 Hz, 1H), 5,59 (s, 1H), 4,47 - 4,29 (m, 1H), 3,76 - 3,55 (m, 2H), 2,74 - 2,61 (m, 1H), 2,31 (dd, J = 12,8, 6,7 Hz, 1H), 1,56 - 1,40 (m, 9H); MS (ES+) 330,3 (M+Na), (ES-) 306,3 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 38,43 [0,255, MeOH].
Korak 3: Priprema (2R,4S)-terc-butil 2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilata (29c)
[0278] Reakcija (2R,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-2-karboksilne kiseline (29b) (500 mg, 1,627 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4e) (673 mg, 1,627 mmol) u tetrahidrofuranu (75 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (402 mg, 1,627 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (2R,4S)-terc-butil 2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilat (29c) (345 mg, 0,491 mmol, 30,2% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,78 (2s, 1H, rotameri), 8,40 - 7,98 (2m, 1H, rotameri), 7,77 (m, 1H), 7,72 (m, 1H), 7,64 (m, 1H), 7,58 - 7,46 (m, 3H), 7,37 (m, 2H), 7,33 -6,99 (m, 4H), 6,00 (2s, 1H, rotameri), 5,48 (2s, 1H, rotameri), 4,66 - 4,30 (m, 1H), 3,82 - 3,53 (m, 2H), 2,80 - 2,55 (m, 2H), 2,33 - 2,14 (m, 1H), 1,32 (2s, 9H, rotameri), 1,14 (2s, 10H, rotameri), 1,00 - 0,75 (m, 1H), 0,71 - 0,52 (m, 1H), 0,44 - 0,26 (m, 2H), 0,01 - -0,17 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,69, -129,87; MS (ES+) 725,5 (M+Na), (ES-) 701,6 (M-1), 737,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 71,10 [0,09, MeOH].
Korak 4: Priprema (2R,4S)-N-(5-((-)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-2-karboksamida (29d)
[0279] Reakcija (2R,4S)-terc-butil 2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilata (29c) (335 mg, 0,477 mmol) u metanolnoj HCl (2,383 ml, 7,15 mmol) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4S)-N-(5-((-)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-2-karboksamid (29d) (260 mg, 0,455 mmol, 95% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,56 (s, 1H), 10,26 (s, 1H), 9,45 (s, 3H), 8,78 (s, 1H), 7,90 (m, 2H), 7,86 (m, 1H), 7,72 - 7,63 (m, 2H), 7,57 - 7,51 (m, 2H), 7,49 - 7,24 (m, 5H), 5,88 (s, 1H), 4,72 (m, 1H), 3,60 - 3,41 (m, 3H), 2,79 (t, J= 12,4 Hz, 1H), 1,26 - 1,14 (m, 1H), 1,14 - 1,01 (m, 3H), 0,82 - 0,59 (m, 1H), 0,48 - 0,32 (m, 2H), 0,11 - -0,06 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -123,49; MS (ES+) 521,5 (M+Na), (ES-) 533,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 56,67 [0,18, MeOH].
Korak 5: Priprema (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (29e)
[0280] Reakcija (2R,4S)-N-(5-((-)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-2-karboksamida (29d) (99 mg, 0,173 mmol) u tetrahidrofuranu (20 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (43,1 mg, 0,173 mmol) upotrebom natrijum bikarbonata (3,46 ml, 3,46 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa 0-100% CMA 80 u hloroformu) (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamid (29e) (65 mg, 0,100 mmol, 57,5% prinos) kao prljavobelu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,74 (s, 1H), 9,24 (s, 1H), 8,30 (dd, J = 2,7, 0,8 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,91 (dd, J = 9,1, 0,8 Hz, 1H), 7,87 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,68 - 7,61 (m, 2H), 7,54 (dt, J = 6,6, 1,3 Hz, 2H), 7,47 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,42 - 7,34 (m, 2H), 7,33 - 7,26 (m, 1H), 7,20 - 7,11 (m, 2H), 5,95 (s, 1H), 4,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,02 - 3,96 (m, 1H), 3,90 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 2,68 (dd, J = 13,2, 9,7 Hz, 1H), 2,34 (s, 2H), 2,34 - 2,18 (m, 3H), 1,11 - 0,95 (m, 2H), 0,74 - 0,54 (m, 1H), 0,39 - 0,29 (m, 2H), -0,01 - -0,11 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,26; MS (ES+) 653,5 (M+1) 675,4, 677,5 (M+Na), (ES-) 651,5, 653,7 (M-1), 689,5 (M+Cl); IR (KBr) 2229 cm<-1>; Optička rotacija [α]D= (+) 80 [0,295, MeOH].
Priprema (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (30a) i (2R,4S)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-(4-hlorofenil)ureido)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (30b)
[0281] Reakcija (2R,4S)-N-(5-((-)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-2-karboksamida (29d) (150 mg, 0,262 mmol) u dihlorometanu (10 ml) sa 4-hlorofenil izocijanatom (1n) (0,034 ml, 0,262 mmol) i natrijum bikarbonatom (5,25 ml, 5,25 mmol) u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 9 Šeme 1dala je posle prečišćavanja
1. (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamid (30a) (65 mg, 0,100 mmol, 38,0% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,69 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,14 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,88 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,64 (m, 2H), 7,60 -7,53 (m, 4H), 7,48 (d, J =, 7,8 Hz, 1H), 7,45 - 7,35 (m, 2H), 7,33 - 7,25 (m, 3H), 7,18 7,10 (m, 2H), 5,97 (s, 1H), 4,76 - 4,60 (m, 1H), 3,93 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,83 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 2,72 (dd, J = 13,2, 9,5 Hz, 1H), 2,35 - 2,21 (m, 5H), 1,10 - 0,96 (m, 2H), 0,71 - 0,56 (m, 1H), 0,40 - 0,28 (m, 2H), -0,00 - -0,11 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,82; MS (ES+) 674,5, 677,5 (M+Na), (ES-) 650,5, 652,0 (M-1), 686,5, 688,6 (M+Cl); IR (KBr) 2229cm<-1>; Optička rotacija [α]D= (+) 87,5 [0,32, MeOH]; Analiza izračunata za C37H35ClFN5O3,0,25H2O; C, 67,68; H, 5,45; N, 10,67; Pronađeno: C, 67,73; H, 5,53; N, 10,51.
2. (2R,4S)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-(4-hlorofenil)ureido)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamid (30b) (68 mg, 0,084 mmol, 32,2% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,73 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,20 - 8,10 (m, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,67 (m, 2H), 7,58 - 7,49 (m, 5H), 7,43 - 7,18 (m, 10H), 7,14 (s, 1H), 7,08 (s, 1H), 5,96 (s, 1H), 4,68 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,93 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,83 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 2,80 - 2,61 (m, 3H), 2,30 (d, J = 13,6 Hz, 1H), 1,11 - 0,91 (m, 2H), 0,74 - 0,57 (m, 1H), 0,42 - 0,29 (m, 2H), -0,01 - -0,13 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,16; MS (ES+) 827,5, 828,6 (M+Na), (ES-) 803,5, 805,4 (M-1), 839,5, 840,6 (M+Cl); IR (KBr) 2229 cm<-1>; Optička rotacija [α]D= (+) 52,0 [0,25, MeOH]; Analiza izračunata za C44H39Cl2FN6O4,0,75H2O: C, 64,51; H, 4,98; N, 10,26; Pronađeno: C, 64,49; H, 5,06; N, 9,99.
Priprema (2R,4S)-N2-(5-((-)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (31i)
Korak 1: Priprema (E)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)prop-2-en-1-ona (31b)
[0282] U mešani rastvor 2-acetilpiridina (31a) (53 g, 438 mmol) u metanolu (636 ml) ohlađen na 0 °C dodati su ciklopropankarboksaldehid (52,8 ml, 700 mmol) i vodeni rastvor kalijum hidroksida (1 N rastvor, 88 ml, 88 mmol). Reakciji je omogućeno da se zagreje do sobne temperature preko noći. Reakcija je koncentrovana u vakuumu kako bi se uklonio metanol. Sirovi ostatak je rastvoren u etil acetatu (500 ml), ispran vodom (500 ml), rastvorom soli (200 ml), osušen, filtriran i koncentrovan u vakuumu kako bi se dobio (E)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)prop-2-en-1-on (31b) (80 g, 462 mmol, 106% prinos) koji je kao takav upotrebljen za sledeći korak. Analitički uzorak je pripremljen prečišćavanjem sirovog ostatka pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa etil acetatom u heksanima 0 do 100%);<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,80 - 8,68 (m, 1H), 8,07 - 7,98 (m, 2H), 7,74 - 7,63 (m, 2H), 6,63 (dd, J = 15,5, 10,4 Hz, 1H), 1,93 - 1,76 (m, 1H), 1,08 - 0,98 (m, 2H), 0,84 - 0,71 (m, 2H).
Korak 2: Priprema 3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propan-1-ona (31c)
[0283] U mešani rastvor (E)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)prop-2-en-1-ona (31b) (80 g, 462 mmol) u acetonitrilu (829 ml) dodat je tributilstanan (256 ml, 924 mmol) i zagrevano je na refluksu tokom 9 h. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i slojevi su odvojeni. Sloj acetonitrila je koncentrovan u vakuumu i dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa etil acetatom u heksanima 0 do 100%) kako bi se dobio 3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propan-1-on (31c) (17,2 g, 98 mmol, 21,25% prinos) kao ulje;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,94 (dt, J = 4,7, 1,5 Hz, 1H), 8,19 (m, 2H), 7,87 (m, 1H), 3,46 (td, J = 7,2, 2,0 Hz, 2H), 1,74 (qd, J = 7,2, 2,1 Hz, 2H), 1,03 - 0,87 (m, 1H), 0,59 (m, 2H), 0,30 - 0,20 (m, 2H).
Korak 3: Priprema (+)-N-(3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (31d)
[0284] Reakcija 3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propan-1-ona (31c) (15,2 g, 87 mmol) u tetrahidrofuranu (220 ml) sa (S)-2-metilpropan-2-sulfinamidom (12,62 g, 104 mmol) i tetraizopropoksititanijumom (51,2 ml, 173 mmol) u skladu sa procedurom i napredovanjem koji su saopšteni u koraku 3 Šeme 1 dala je (+)-N-(3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid (31d) (11,65 g, 41,8 mmol, 48,2% prinos) kao žuto ulje;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,70 (dt, J = 4,7, 1,4 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,94 (td, J = 7,6, 1,7 Hz, 1H), 7,56 (ddd, J = 7,5, 4,7, 1,4 Hz, 1H), 3,53 (m, 1H), 3,41 - 3,35 (m, 1H), 1,49 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 1,25 (s, 9H), 0,81 - 0,65 (m, 1H), 0,44 - 0,28 (m, 2H), 0,03 (m, 2H); MS (ES+) 279,3 (M+1), 301,3 (M+Na); Optička rotacija [α]D= (+) 50,8 [2,64, MeOH].
Korak 4: Priprema (S)-N-((+)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (31e) i (S)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (31f)
[0285] Reakcija (+)-N-(3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (31d) (12,665 g, 45,5 mmol) u toluenu (400 ml) sa sveže pripremljenim rastvorom (3-(bis(trimetilsilil)amino)-4-fluorofenil)magnezijum bromida (1c) (142 ml, 114 mmol) u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 4 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 120 g, eluiranje sa etil acetatom u heksanima 0 do 60 do 100%)
1. (S)-N-((+)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (31e) (10 g, 25,7 mmol, 56,4% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,52 (dt, J = 4,6, 1,5 Hz, 1H), 7,73 (td, J = 7,8, 1,9 Hz, 1H), 7,26 (ddd, J = 7,5, 4,8, 1,0 Hz, 1H), 7,07 (dt, J = 8,0, 1,1 Hz, 1H), 6,88 (dd, J = 11,3, 8,5 Hz, 1H), 6,78 (dd, J = 8,8, 2,4 Hz, 1H), 6,43 (ddd, J = 8,6, 4,3, 2,3 Hz, 1H), 6,09 (s, 1H), 5,09 (s, 2H), 2,56 (m, 1H), 2,45 (m,, 1H), 1,29 - 1,15 (m, 1H), 1,10 (s, 9H), 0,63 - 0,42 (m, 2H), 0,35 - 0,23 (m, 2H), -0,07 (m, 1H), -0,20 (m, 1H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,14; MS: (ES+) 412,4 (M+Na), (ES-) 388,4 (M-1), 424,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 136,36 [0,55, MeOH].
2. (S)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (31f) (300 mg, 0,770 mmol, 1,693% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,53 (ddd, J = 4,9, 1,9, 0,9 Hz, 1H), 7,71 (td, J = 7,7, 1,8 Hz, 1H), 7,35 - 7,09 (m, 2H), 6,85 (dd, J = 11,3, 8,5 Hz, 1H), 6,71 (dd, J = 8,8, 2,4 Hz, 1H), 6,41 (ddd, J = 8,5, 4,3, 2,4 Hz, 1H), 5,82 (s, 1H), 5,06 (s, 2H), 2,55 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 1,13 (s, 9H), 1,08 - 0,96 (m, 1H), 0,81 (m, 1H), 0,61 (m, 1H), 0,38 -0,29 (m, 2H), -0,10 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,42; MS (ES+) 390,4 (M+1), 412,4 (M+Na), (ES-) 388,4 (M-1), 424,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 3,28 [0,305, MeOH].
Korak 5: Priprema (2R,4S)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilata (31g)
[0286] Reakcija (2R,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-2-karboksilne kiseline (29b) (158 mg, 0,513 mmol), (S)-N-((+)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (31e) (200 mg, 0,513 mmol) u tetrahidrofuranu (20 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (127 mg, 0,513 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (2R,4S)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilat (31g) (130 mg, 0,191 mmol, 37,3% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,71 (2s, 1H, rotameri), 8,54 (2d, J = 4,8 Hz, 1H, rotameri), 8,37 - 8,04 (m, 1H), 7,75 (m, 1H), 7,59 - 7,44 (m, 2H), 7,37 (m, 2H), 7,33 -7,23 (m, 1H), 7,23 - 6,94 (m, 2H), 6,14 (m, 1H), 5,95 (2s, 1H, rotameri), 4,44 (m, 1H), 3,67 (s, 2H), 2,79 - 2,51 (m, 5H), 2,23 (m, 1H), 1,33 (2s, 9H, rotameri), 1,11 (s, 10H), 0,67 - 0,46 (m, 2H), 0,31 (m, 2H), 0,01 (m, 1H), -0,18 (m, 1H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,48, -129,79; MS (ES+) 679,6 (M+1), 701,6 (M+Na), (ES-) 677,7 (M-1), 713,6 (M+Cl).
Korak 6: Priprema (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-2-karboksamida (31h)
[0287] Reakcija (2R,4S)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilata (31g) (125 mg, 0,184 mmol) u metanolnoj HCl (0,614 ml, 1,841 mmol) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-2-karboksamid (31h) (106 mg, 0,182 mmol, 99% prinos) kao svetlobraon čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,61 (s, 1H), 10,29 (s, 1H), 9,06 (s, 3H), 8,96 - 8,78 (m, 1H), 8,74 (m, 1H), 8,10 - 8,02 (m, 1H), 7,96 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,65 - 7,56 (m, 2H), 7,56 - 7,35 (m, 5H), 7,31 (s, 1H), 4,77 (m, 1H), 3,94 - 3,50 (m, 5H), 2,97 - 2,75 (m, 1H), 1,39 - 1,20 (m, 1H), 1,16 (m, 2H), 1,14 - 1,06 (m, 2H), 0,75 (m, 1H), 0,46 (m, 2H), 0,27 - -0,13 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -123,51; MS (ES+) 475,5 (M+1), 497,5 (M+Na), (ES-) 473,6 (M-1), 509,5 (M+Cl).
Korak 7: Priprema (2R,4S)-N2-(5-((-)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (31i)
[0288] Reakcija (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-2-karboksamida (31h) (50 mg, 0,086 mmol) u dihlorometanu (10 ml) sa 4-hlorofenil izocijanatom (1n) (10,96 μl, 0,086 mmol) i natrijum bikarbonatom u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 9 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu) (2R,4S)-N2-(5-((-)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamid (31i) (36 mg, 0,057 mmol, 66,9% prinos) kao prljavobelu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,64 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,48 (dt, J = 4,5, 1,5 Hz, 1H), 8,18 (dd, J = 7,8, 2,2 Hz, 1H), 7,70 (td, J = 7,7, 1,9 Hz, 1H), 7,60 - 7,51 (m, 5H), 7,39 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,33 - 7,26 (m, 3H), 7,21 - 7,06 (m, 3H), 5,98 (s, 1H), 4,68 (dd, J = 9,6, 2,8 Hz, 1H), 3,93 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,82 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 2,72 (dd, J = 13,1, 9,7 Hz, 1H), 2,40 - 2,21 (m, 5H), 1,04 (m, 2H), 0,70 - 0,55 (m, 1H), 0,40 - 0,26 (m, 2H), -0,01 - -0,12 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -130,30; MS (ES+) 650,5, 651,4 (M+Na), (ES-) 626,5 (M-1), 662,6, 664,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 56,25 [0,16, MeOH].
Priprema (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (32a) i (2R,4S)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-(1-(3-(5-hloropiridin-2-il)ureido)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (32b)
[0289] Reakcija (2R,4S)-N-(5-((-)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-2-karboksamida (31h) (50 mg, 0,086 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (21,29 mg, 0,086 mmol) upotrebom natrijum bikarbonata kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa 0-100% CMA 80 u hloroformu)
1. (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamid (32a) (29 mg, 0,046 mmol, 53,8% prinos) kao prljavobelu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,70 (s, 1H), 9,23 (s, 1H), 8,56 - 8,41 (m, 1H), 8,30 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,21 - 8,07 (m, 1H), 7,92 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,7 Hz, 1H), 7,70 (td, J = 7,7, 1,9 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,8 Hz, 3H), 7,38 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,29 (m, 1H), 7,13 (m, 3H), 5,96 (s, 1H), 4,77 - 4,66 (m, 1H), 4,00 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 3,90 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 2,68 (dd, J = 13,2, 9,6 Hz, 1H), 2,38 - 2,32 (m, 3H), 2,34 - 2,22 (m, 2H), 1,12 - 0,94 (m, 2H), 0,70 - 0,54 (m, 1H), 0,40 - 0,25 (m, 2H), 0,00 - -0,15 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,71; MS (ES+) 629,5 (M+1) 652,5 (M+Na), (ES-) 627,5, 628,5 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 14,81 [0,27, MeOH].
2. (2R,4S)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-(1-(3-(5-hloropiridin-2-il)ureido)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamid (32b) (10 mg, 0,013 mmol, 14,90% prinos) kao prljavobelu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,88 (s, 1H), 9,69 (s, 2H), 9,24 (s, 1H), 8,62 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,34 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,29 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,25 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,85 - 7,67 (m, 3H), 7,53 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,37 (m, 3H), 7,26 (m, 3H), 7,14 (m, 2H), 5,92 (s, 1H), 4,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,00 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 3,90 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 2,76 - 2,64 (m, 1H), 2,67 - 2,54 (m, 2H), 2,40 -2,20 (m, 1H), 1,13 - 0,93 (m, 2H), 0,70 - 0,53 (m, 1H), 0,30 (m, 2H), -0,07 - - 0,26 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,58; MS (ES+) 783,6 (M+1) 805,5, 807,5 (M+Na).
Priprema (2R,4S)-4-amino-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (33d)
Korak 1: Priprema (3R,SR)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-5-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)pirolidin-3-il metansulfonata (33a)
[0290] U ledeno hladan rastvor (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (4f) (110 mg, 0,162 mmol) u dihlorometanu (10 ml) dodati su trietilamin (0,09 ml, 0,647 mmol), metansulfonil hlorid (0,019 ml, 0,243 mmol) i mešano je na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je razblažena sa dihlorometanom (100 ml), isprana vodom (2 x 20 ml), rastvorom soli (2 x 20 ml), osušena, filtrirana i koncentrovana u vakuumu kako bi se dobio (3R,5R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-5-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)pirolidin-3-il metansulfonat (33a) (136 mg, 0,179 mmol, 111% prinos) koji je kao takav upotrebljen za sledeći korak;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,74 (s, 1H), 8,61 (s, 1H), 7,87 - 7,75 (m, 2H), 7,70 (dt, J = 7,4, 1,4 Hz, 1H), 7,64 - 7,44 (m, 4H), 7,40 - 7,25 (m, 2H), 7,24 - 7,10 (m, 2H), 5,46 (s, 1H), 5,36 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 4,01 - 3,91 (m, 1H), 3,86 (m, 1H), 3,35 (m, 2H), 3,18 (s, 3H), 2,75 - 2,55 (m, 1H), 2,44 - 2,24 (m, 2H), 1,13 (s, 10H), 0,98 - 0,80 (m, 1H), 0,63 (s, 1H), 0,39 - 0,30 (m, 2H), 0,01 - -0,14 (m, 2H); MS (ES+) 780,5, 782,4 (M+Na), (ES-) 792,5, 793,4 (M+Cl).
Korak 2: Priprema ((2R,4S)-4-azido-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (33b)
[0291] U mešani rastvor (3R,5R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-5-(5-(1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)pirolidin-3-il metansulfonata (33a) (120 mg, 0,158 mmol) u DMF (10 ml) dodat je natrijum azid (41,1 mg, 0,633 mmol) i zagrevano je na 70 °C tokom 16 h. Reakcija je razblažena sa etil acetatom (100 ml), isprana vodom (2 x 25 ml), rastvorom soli (25 ml), osušena, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Dobijeni sirovi ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) kako bi se dobio ((2R,4S)-4-azido-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (33b) (65 mg, 0,092 mmol, 58,2% prinos) kao bezbojna čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,92 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 7,97 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,74 - 7,67 (m, 1H), 7,62 - 7,44 (m, 3H), 7,31 - 7,25 (m, 2H), 7,24 - 7,16 (m, 1H), 7,12 (m, 1H), 5,51 (s, 1H), 4,70 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 4,45 (m, 1H), 3,77 (dd, J = 11,0, 5,0 Hz, 1H), 3,62 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 2,44 (m, 2H), 2,41 - 2,22 (m, 1H), 2,16 (m, 1H), 1,12 (s, 11H), 0,97 - 0,80 (m, 1H), 0,70 - 0,53 (m, 1H), 0,39 - 0,27 (m, 2H), -0,01 - -0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,00; MS (ES+) 727,5, 729,5 (M+Na), (ES-) 739,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 62,25 [0,71, MeOH].
Korak 3: Priprema (2R,4S)-4-amino-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (33c)
[0292] Hidrogenizacija ((2R,4S)-4-azido-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (33b) (34 mg, 0,050 mmol) u etanolu (10 ml), upotrebom paladijuma na ugljeniku 10% (9,05 mg, 8,51 mmol) kao katalizatora tokom 3 h u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 2 Šeme 13 dala je (2R,4S)-4-amino-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (33c) (34 mg, 0,050 mmol, 58,8% prinos) kao prljavobelu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,81 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 7,91 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,75 - 7,68 (m, 1H), 7,64 - 7,44 (m, 4H), 7,35 - 7,24 (m, 2H), 7,23 - 7,06 (m, 1H), 5,51 (s, 1H), 4,65 (m, 1H), 3,81 - 3,70 (m, 1H), 3,69 - 3,55 (m, 1H), 3,23 - 3,10 (m, 1H), 2,80 - 2,40 (m, 4H), 2,06 - 1,73 (m, 3H), 1,12 (s, 10H), 0,99 - 0,78 (m, 1H), 0,71 - 0,54 (m, 1H), 0,43 - 0,25 (m, 2H), -0,00 - -0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,77; MS (ES+) 701,6, 703,5 (M+Na), (ES-) 713,5, 715,6 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 5,07 [0,355, MeOH].
Korak 4: Priprema (2R,4S)-4-amino-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (33d)
[0293] Reakcija (2R,4S)-4-amino-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (33c) (32 mg, 0,047 mmol) u etanolu (5 ml) upotrebom konc. HCl (0,039 ml, 0,471 mmol) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (2R,4S)-4-amino-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (33d) (10 mg, 0,017 mmol, 36,9% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,76 (s, 1H), 8,44 (s, 1H), 7,92 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,86 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,69 - 7,40 (m, 4H), 7,30 - 7,25 (m, 2H), 7,13 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 4,64 (dd, J = 8,3, 4,4 Hz, 1H), 3,74 (dd, J = 9,4, 6,3 Hz, 1H), 3,62 (p, J = 6,6 Hz, 1H), 3,17 (dd, J = 9,4, 5,8 Hz, 1H), 2,43 - 2,31 (m, 5H), 2,22 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 2,10 - 1,87 (m, 2H), 1,11 - 0,91 (m, 2H), 0,71 - 0,54 (m, 1H), 0,40 - 0,26 (m, 2H), -0,00 - -0,15 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,63; MS (ES+) 597,4, 599,8 (M+Na), (ES-) 609,5, 610,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 136,0 [0,05, MeOH].
Priprema (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (34d)
Korak 1: Priprema (2R,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-2-karboksilne kiseline (34a)
[0294] U suspenziju natrijum hidrida (60% disperzija u ulju) (0,781 g, 19,52 mmol) u tetrahidrofuranu (40 ml) na -10 °C dodata je (2R,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksi-4fenilpirolidin-2-karboksilna kiselina (29b) (1 g, 3,25 mmol), nakon čega posle 30 min sledi dodavanje dimetil sulfata (0,311 ml, 3,25 mmol). Reakcionoj smeši je omogućeno da se zagreje do sobne temperature, mešana je tokom 16 h i ugašena zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida. THF je uklonjen pod vakuumom i dobijeni ostatak je zalužen i ispran sa etrom. Vodeni sloj je zakišeljen i ekstrahovan sa etil acetatom (2 x 100 ml). Kombinovani sloj etil acetata je ispran vodom (50 ml), rastvorom soli (50 ml), osušen, filtriran i koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila (2R,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-2-karboksilna kiselina (34a) (673 mg, 2,094 mmol, 64,4% prinos) kao svetlobraon čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,49 (s, 1H), 7,52 - 7,15 (m, 5H), 4,26 (m, 1H), 3,82 - 3,65 (m, 1H), 3,53 (dd, J = 13,4, 11,3 Hz, 1H), 2,82 (2s, 3H, rotameri), 2,67 - 2,55 (m, 2H), 1,38 (2S, 9H, rotameri); MS (ES+) 344,3 (M+Na), (ES-) 320,3 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 44,0 [0,25, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4S)-terc-butil-2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilata (34b)
[0295] Reakcija (2R,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-2-karboksilne kiseline (34a) (111 mg, 0,347 mmol), (S)-N-((+)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (31e) (86 mg, 0,347 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (127 mg, 0,513 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (2R,4S)-terc-butil-2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilat (34b) (141 mg, 0,203 mmol, 58,7% prinos) kao čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,66 (2s, 1H, rotameri), 8,73 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,36 -8,12 (m, 1H), 7,94 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,60 (m, 4H), 7,52 - 7,19 (m, 4H), 6,34 (s, 1H), 4,57 (m, 1H), 3,96 (s, 2H), 3,02 (2s, 3H, rotameri), 2,95 - 2,73 (m, 3H), 2,74 - 2,53 (m, 2H), 1,52 (2s, 9H, rotameri), 1,31 (s, 9H), 1,24 - 0,94 (m, 1H), 0,88 - 0,66 (m, 2H), 0,57 - 0,43 (m, 2H), 0,30 - -0,06 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,09 , -129,22 (rotameri); MS (ES+) 693,7 (M+1), 715,7 (M+Na), (ES-) 691,7 (M-1), 727,7 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 122,60 [0,075, MeOH].
Korak 3: Priprema (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-2-karboksamida (34c)
[0296] Reakcija (2R,4S)-terc-butil-2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilata (34b) (131 mg, 0,189 mmol) u metanolnoj HCl (1,260 ml, 3,78 mmol) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-2-karboksamid (34c) (125 mg, 0,209 mmol, 111% prinos) kao hidrohloridnu so koja je kao takva direktno upotrebljena u sledećem koraku; MS (ES+) 511,5 (M+Na), (ES-) 523,5 (M+Cl).
Korak 4: Priprema (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (34d)
[0297] Reakcija (2R,4S)-N-(5-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-2-karboksamida (34c) (44 mg, 0,074 mmol) u dihlorometanu (10 ml) sa 4-hlorofenil izocijanatom (1n) (9,42 μl, 0,074 mmol) i natrijum bikarbonatom u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 9 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu) (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamid (34d) (36 mg, 0,056 mmol, 76% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,41 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,47 (m, 1H), 8,00 -7,90 (m, 1H), 7,69 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,62 - 7,50 (m, 3H), 7,45 (d, J = 5,0 Hz, 3H), 7,41 -7,35 (m, 1H), 7,33 - 7,25 (m, 2H), 7,25 - 7,18 (m, 1H), 7,18 - 7,05 (m, 2H), 4,62 (t, J= 6,0 Hz, 1H), 4,11 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,79 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 2,85 (s, 3H), 2,74 - 2,57 (m, 2H), 2,44 - 2,19 (m, 5H), 1,12 - 0,89 (m, 2H), 0,72 - 0,51 (m, 1H), 0,42 - 0,24 (m, 2H), -0,02 --0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,42; MS (ES+) 664,5, 665,6 (M+Na), (ES-) 676,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 89,0 [0,155, MeOH].
Priprema (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida
[0298] Reakcija (2R,4S)-N-(5-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-2-karboksamida (34c) (50 mg, 0,084 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (20,79 mg, 0,084 mmol) upotrebom natrijum bikarbonata kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa 0-100% CMA 80 u hloroformu) (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamid (35a) (36 mg, 0,056 mmol, 66,9% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,41 (s, 1H), 9,21 (s, 1H), 8,47 (dd, J = 4,8, 1,9 Hz, 1H), 8,31 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,92 (m, 2H), 7,82 (dd, J = 9,0, 2,7 Hz, 1H), 7,69 (td, J = 7,7, 1,9 Hz, 1H), 7,54 (dt, J = 8,1, 1,1 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 4,0 Hz, 4H), 7,37 (m, 1H), 7,22 (m, 1H), 7,19 - 7,04 (m, 2H), 4,64 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 4,24 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,89 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 2,84 (s, 3H), 2,61 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 2,43 - 2,24 (m, 4H), 1,12 - 0,95 (m, 2H), 0,68 - 0,53 (m, 1H), 0,38 - 0,26 (m, 2H), -0,02 - -0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,95; MS (ES+) 665,5 (M+Na), (ES-) 641,6, 642,3 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 85,30 [0,075, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (36d)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (36a)
[0299] Reakcija (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (14b) (6 g, 26 mmol) sa NaH (6,24 g, 156 mmol; 60% suspenzija u ulju) u THF (300 ml) i dimetil sulfatom (3,9 g, 31 mmol) u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 1 Šeme 34 dala je (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilnu kiselinu (36a) (5,82 g, 91%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 4,14 (td, J = 8,9, 3,7 Hz, 1H), 3,98 - 3,85 (m, 1H), 3,52 (m, 1H), 3,27 - 3,11 (m, 4H), 2,33 (m, 1H), 2,00 (dt, J = 13,3, 3,8 Hz, 1H), 1,37 (2s, 9H); MS (ES+) 268,4 (M+Na), MS (ES-) 244,3 (M-1), 280,3 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 45,28 [0,265, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4R)-terc-butil 2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-)il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (36b)
[0300] Reakcija (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (36a) (95 mg, 0,388 mmol), (S)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-2il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (31f) (151 mg, 0,388 mmol) u tetrahidrofuranu (25 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (96 mg, 0,388 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (2R,4R)-terc-butil 2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilat (36b) (135 mg, 0,219 mmol, 56,5% prinos) kao bezbojnu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,43 (2s, 1H, rotameri), 8,61 - 8,45 (m, 1H), 7,89 - 7,66 (m, 2H), 7,33 - 7,23 (m, 2H), 7,15 (t, J = 9,6 Hz, 1H), 7,06 (s, 1H), 5,91 (2s, 1H, rotameri), 4,39 - 4,17 (m, 1H), 4,01 - 3,91 (m, 1H), 3,56 (dd, J = 11,0, 5,2 Hz, 1H), 3,21 (2s, 3H, rotameri), 2,70 - 2,52 (m, 2H), 2,50 - 2,37 (m, 1H), 2,16 - 1,86 (m, 1H), 1,34 (2s, 9H, rotameri), 1,14 (s, 10H), 1,11 - 0,94 (m, 1H), 0,97 - 0,79 (m, 1H), 0,71 - 0,54 (m, 1H), 0,42 - 0,26 (m, 2H), -0,01 - -0,16 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,64 , -128,92 rotameri; MS (ES+) 639,5 (M+Na), (ES-) 615,6 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 11,42 [0,07, MeOH].
Korak 3: Priprema (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (36c)
[0301] Reakcija (2R,4R)-terc-butil 2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (36b) (120 mg, 0,195 mmol) u 3 N metanolnoj HCl (0,973 ml, 2,92 mmol) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamid (36c) (100 mg, 0,192 mmol, 98% prinos) hidrohloridnu so koja je kao takva upotrebljena za sledeći korak; MS: (ES+) 413,5 (M+1), 435,5 (M+Na), (ES-) 447,5 (M+Cl).
Korak 4: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (36d)
[0302] Reakcija (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (36c) (95 mg, 0,182 mmol) u tetrahidrofuranu (25 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (40,7 mg, 0,164 mmol) upotrebom natrijum bikarbonata (306 mg, 3,64 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (2R,4R)N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (36d) (30 mg, 0,053 mmol, 29,1% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,42 (s, 1H), 9,14 (s, 1H), 8,53 - 8,42 (m, 1H), 8,30 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,91 (dd, J = 9,8, 2,5 Hz, 2H), 7,81 (dd, J = 9,1, 2,6 Hz, 1H), 7,69 (td, J = 7,7, 1,9 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,17 (m, 2H), 7,08 (m, 1H), 4,57 (dd, J = 9,1, 3,9 Hz, 1H), 4,12 - 3,98 (m, 1H), 3,81 - 3,61 (m, 2H), 3,22 (s, 3H), 2,45 - 2,23 (m, 5H), 2,10 (m, 1H), 1,11 - 0,93 (m, 2H), 0,69 - 0,53 (m, 1H), 0,39 - 0,23 (m, 2H), -0,05 - -0,17 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,86 ; MS (ES+) 567,4, 569,4 (M+1), (ES-) 565,4, 567,4 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 70,7 [0,065, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (37d)
Korak 1: Priprema benzil (2R,4R)-2-((5-((+)-1-(((S)-terc-butilsulfinil)amino)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)karbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (37a)
[0303] Reakcija (2R,4R)-1-(benziloksikarbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (15b) (0,17 g, 0,6 mmol), (S)-N-((+)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (31e) (0,2 g, 0,5 mmol) u tetrahidrofuranu (5 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (0,15 g, 0,6 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni benzil (2R,4R)-2-((5-((+)-1-(((S)-tercbutilsulfinil)amino)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)karbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilat (37a) (0,29 g, 86%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,54 (2s, 1H, rotameri), 8,58 - 8,50 (m, 1H), 7,97 (dd, J = 7,6, 2,3 Hz, 1H), 7,74 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,37 (s, 2H), 7,31 - 6,99 (m, 7H), 6,16 (s, 1H), 5,16 - 4,91 (m, 2H), 4,51 - 4,34 (m, 1H), 4,05 - 3,91 (m, 1H), 3,74 - 3,58 (m, 1H), 3,47 - 3,37 (m, 1H), 3,19 (d, J = 5,3 Hz, 3H), 2,58 (m, 2H), 1,09 (m, 9H, rotameri), 0,64 - 0,47 (m, 3H), 0,38 - 0,24 (m, 2H), -0,10 - -0,25 (m, 2H); MS (ES+) 651,6 (M+1), 673,5 (M+Na), MS (ES-) 685,6 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 131,3 [0,23, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N-(5-(1-(((S)-terc-butilsulfinil)amino)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (37b)
[0304] Debenzilacija hidrogenizacijom benzil (2R,4R)-2-((5-((+)-1-(((S)-tercbutilsulfinil)amino)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il))propil)-2-fluorofenil)karbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (37a) (0,28 g, 0,43 mmol) u etanolu (20 ml), upotrebom paladijuma na ugljeniku 10% kao katalizatora u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 2 Šeme 13 dala je (2R,4R)-N-(5-(1-(((S)-terc-butilsulfinil)amino)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamid (37b) (0,21 g, 95% prinos) kao gumastu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,09 (s, 1H), 8,58 -8,49 (m, 1H), 8,32 (dd, J = 7,8, 2,3 Hz, 1H), 7,74 (td, J = 7,8, 1,8 Hz, 1H), 7,31 - 7,14 (m, 2H), 7,11 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,04 - 6,96 (m, 1H), 6,14 (s, 1H), 3,91 - 3,75 (m, 1H), 3,74 (d, J= 7,2 Hz, 1H), 3,04 - 2,98 (m, 1H), 2,90 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 2,66 - 2,54 (m, 5H), 2,18 -1,95 (m, 2H), 1,08 (s, 9H), 0,68 - 0,46 (m, 3H), 0,31 (m, 2H), -0,10 - -0,25 (m, 2H); MS (ES+) 516,5 (M+1), 539,5 (M+Na), MS (ES-) 515,5 (M-1).
Korak 3: Priprema (2R,4R)-N2-(5-(1-(((S)-terc-butilsulfinil)amino)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (37c)
[0305] Reakcija (2R,4R)-N-(5-(1-(((S)-terc-butilsulfinil)amino)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (37b) (0,1 g, 0,19 mmol) u THF (5 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (0,06 g, 0,23 mmol) upotrebom TEA (50 μl) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (2R,4R)-N2-(5-(1-(((S)-tercbutilsulfinil)amino)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (37c) (0,11 g, 84%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,50 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,53 (dd, J = 4,9, 1,8, Hz, 1H), 8,29 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,96 (dd, J = 7,6, 2,3 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,73 (td, J = 7,8, 1,8 Hz, 1H), 7,26 (m, 1H), 7,22 - 7,07 (m, 2H), 7,10 - 6,99 (m, 1H), 6,14 (s, 1H), 4,58 (dd, J = 9,1, 3,9 Hz, 1H), 4,03 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 3,72 (m, 2H), 3,21 (s, 3H), 2,63 - 2,52 (m, 2H), 2,45 - 2,27 (m, 1H), 2,08 (m, 1H), 1,09 (s, 9H), 0,90 - 0,78 (m, 2H), 0,64 - 0,46 (m, 1H), 0,36 - 0,23 (m, 2H), -0,19 (m, 2H); MS (ES+) 671,5 (M+1), 693,5 (M+Na), MS (ES-) 669,5 (M-1), 705,5 (M+Cl).
Korak 4: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (37d)
[0306] Reakcija (2R,4R)-N2-(5-(1-(((S)-terc-butilsulfinil)amino)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (37c) (0,1 g, 0,15 mmol) u etanolu (5 ml) upotrebom konc. HCl (0,12 ml) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (37d) (50 mg, 60% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,40 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 9,13 (s, 1H), 8,47 (ddd, J = 4,9, 1,8, 0,9 Hz, 1H), 8,30 (dd, J = 2,6, 0,8 Hz, 1H), 7,90 (dd, J = 8,2, 1,5 Hz, 2H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,69 (td, J = 7,7, 1,9 Hz, 1H), 7,53 (dt, J = 8,1, 1,1 Hz, 1H), 7,23 -7,03 (m, 3H), 4,56 (dd, J = 9,2, 3,9 Hz, 1H), 4,11 - 3,96 (m, 1H), 3,81 - 3,64 (m, 2H), 3,21 (s, 3H), 2,43 - 2,20 (m, 4H), 2,09 (m, 1H), 1,02 (m, 2H), 0,71 - 0,54 (m, 1H), 0,40 - 0,30 (m, 2H), -0,08 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,01; MS (ES+) 567,5 (M+1), (ES-) 603,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 70,7 [0,065, MeOH].
Priprema (2R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-etil-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (38d)
Korak 1: Priprema (2R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-etil-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (38a)
[0307] Reakcija (R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-oksopirolidin-2-karboksilne kiseline (29a) (0,502 g, 2,19 mmol) u THF (20 ml) sa 1,0 M rastvorom etilmagnezijumbromida (6,02 ml, 6,02 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 2 Šeme 29 dala je (2R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-etil-4-hidroksipirolidin-2-karboksilnu kiselinu (38a) (330 mg, 1,273 mmol, 58,1% prinos) kao ulje koje je kao takvo upotrebljeno za sledeći korak; MS (ES+) 282,4 (M+Na), 541,6 (2M+Na), (ES-) 258,3 (M-1), 517,6 (2M-1).
Korak 2: Priprema (2R)-terc-butil 2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-etil-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata (38b)
[0308] Reakcija (2R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-etil-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (38a) (300 mg, 1,157 mmol), (S)-N-((+)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (31e) (451 mg, 1,157 mmol) u tetrahidrofuranu (25 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (402 mg, 1,627 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (2R)-terc-butil 2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-((S))-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-etil-4-hidroksipirolidin-1-karboksilat (38b) (97 mg, 0,154 mmol, 13,29% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,68 (2s, 1H, rotameri), 8,69 - 8,46 (m, 1H), 8,11 (2dd, 1H, rotameri), 7,74 (m, 1H), 7,41 - 6,95 (m, 3H), 6,14 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 5,08 (2s, 1H, rotameri), 4,41 - 4,21 (m, 1H), 3,30 - 3,17 (m, 1H), 2,67 - 2,54 (m, 4H), 2,32 -2,11 (m, 1H), 1,98 - 1,80 (m, 1H), 1,52 (m, 2H), 1,31 (2s, 9H, rotameri), 1,10 (s, 9H), 0,88 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,57 (m, 3H), 0,38 - 0,26 (m, 2H), 0,05 - -0,28 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,40 , -129,65 rotameri; MS (ES+) 631,7 (M+1), 653,7 (M+Na), (ES-) 629,7 (M-1), 665,7 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 100,0 [0,07, MeOH].
Korak 3: Priprema (2R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-etil-4-hidroksipirolidin-2-karboksamida (38c)
[0309] Reakcija (2R)-terc-butil 2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-etil-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata (38b) (87 mg, 0,138 mmol) u metanolu (20 ml) upotrebom 3 N metanolne HCl (0,919 ml, 2,76 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-etil-4-hidroksipirolidin-2-karboksamid (38c) (69 mg, 0,138 mmol, 100% prinos) kao hidrohloridnu su, koja je kao takva upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja; MS (ES+) 449,4 (M+Na), (ES-) 461,2 (M+Cl).
Korak 4: Priprema (2R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-etil-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (38d)
[0310] Reakcija (2R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-etil-4-hidroksipirolidin-2-karboksamida (38c) (65 mg, 0,130 mmol) u tetrahidrofuranu (25 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (29,1 mg, 0,117 mmol) upotrebom natrijum bikarbonata kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa 0-100% CMA 80 u hloroformu) (2R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-etil-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (38d) (28 mg, 0,048 mmol, 37,0% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,68 (s, 1H), 9,13 (s, 1H), 8,47 (dd, J = 4,7, 1,9 Hz, 1H), 8,29 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,08 (dd, J = 7,8, 2,3 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,80 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,70 (m, 1H), 7,53 (m, 1H), 7,25 - 7,03 (m, 3H), 5,77 (s, 1H), 5,11 (s, 1H), 4,63 - 4,45 (m, 1H), 3,64 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 3,48 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 2,42 - 2,15 (m, 4H), 2,01 - 1,89 (m, 1H), 1,56 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 1,12 - 0,97 (m, 2H), 0,92 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 0,71 - 0,52 (m, 1H), 0,40 - 0,26 (m, 2H), -0,02 - -0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,61; MS (ES+) 581,4 (M+1), 604,5, 606,4 (M+Na), (ES-) 579,4, 581,5 (M-1), 615,5, 616,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 67,37 [0,19, MeOH].
Priprema (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (39h)
Korak 1: Priprema (E)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)prop-2-en-1-ona (39b)
[0311] Reakcija 1-(piridin-4-il)etanona (39a) (1,516 ml, 13,27 mmol) u metanolu (100 ml) sa ciklopropankarboksaldehidom (1,5 ml, 19,90 mmol) i vodenim rastvorom kalijum hidroksida (1 N, 2,65 ml, 2,65 mmol) upotrebom reakcije i procedure napredovanja kao što je saopšteno u Šemi 31 korak 1 dala je (E)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)prop-2-en-1-on (39b) (479 mg, 20,85%);<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,89 - 8,59 (m, 2H), 7,91 - 7,71 (m, 2H), 7,19 (d, J = 15,1 Hz, 1H), 6,58 (dd, J = 15,1, 10,4 Hz, 1H), 1,88 - 1,71 (m, 1H), 1,10 - 0,96 (m, 2H), 0,87 - 0,72 (m, 2H).
Korak 2: Priprema 3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propan-1-ona (39c)
[0312] Reakcija (E)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)prop-2-en-1-ona (39b) (18,35 g, 106 mmol) u acetonitrilu (180 ml) i tributilstanana (60,0 ml, 216 mmol) upotrebom procedure koja je saopštena u koraku 2 Šeme 31 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa 0-30% etil acetatom u heksanu) 3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propan-1-on (39c) (3,028 g, 15%) kao ulje;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 3,14 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,52 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 0,75 (dddd, J = 12,0, 8,1, 7,0, 2,8 Hz, 1H), 0,47 - 0,28 (m, 2H), 0,14 - 0,02 (m, 2H).
Korak 3: Priprema (-)-N-(3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39d)
[0313] Jedinjenje (39d) je pripremljeno od 3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propan-1-ona (39c) (1,8 g, 10,27 mmol) i (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (1,566 g, 12,84 mmol) upotrebom procedure kao što je saopšteno u koraku 3 Šeme 31 kako bi se dobio (-)-N-(3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid (39d) (1,838 g, 6,57 mmol, 63,9% prinos) kao žuti sirup;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,76 - 8,69 (m, 2H), 7,80 - 7,73 (m, 2H), 3,49 - 3,15 (m, 2H), 1,45 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 1,24 (s, 9H), 0,84 - 0,65 (m, 1H), 0,43 -0,30 (m, 2H), 0,10 - -0,03 (m, 2H); MS (ES+) 301,3, (M+Na); (ES-) 277,3 (M-1); Optička rotacija [α]D= (-) 27,61 [0,355, MeOH].
Korak 4: Priprema (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e)
[0314] Jedinjenje (39e) je pripremljeno od (-)-N-(3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39d) (1,7 g, 6,11 mmol), upotrebom procedure kao što je saopšteno u koraku 4 Šeme 31 kako bi se dobio (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (39e) (1,443 g, 3,7 mmol, 60,7% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,77 - 8,68 (m, 2H), 7,62 - 7,53 (m, 2H), 7,15 (dd, J = 11,3, 8,5 Hz, 1H), 7,00 - 6,94 (m, 1H), 6,77 - 6,70 (m, 1H), 5,50 (s, 1H), 5,35 (s, 2H), 2,90-2,60 (m, 2H), 1,47-1,27 (m, 1H), 1,38 (s, 9H), 1,25-1,05 (m, 1H), 0,97-0,80 (m, 1H), 0,65-0,55 (m, 2H), 0,32-0,10 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) -137,30; MS (ES+): 390,4 (M+1); Hiralna čistoća je proverena izvođenjem hiralne HPLC upotrebom hiralne AD-H kolone, 1 ml/min, rastvarač: 90% heksan, 10% EtOH, 0,1% TEA, UV = 260 nM, 25 °C (>99,99 ee); Optička rotacija [α]D= (-) 78,49 [0,265, MeOH].
Korak 5: Priprema (2R,4S)-terc-butil 2-(5-((-)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilata (39f)
[0315] Jedinjenje 39f je pripremljeno od (2R,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-2-karboksilne kiseline (29b) (225 mg, 0,732 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e) i etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (181 mg, 0,732 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 kako bi se dobio (2R,4S)-terc-butil 2-(5-((-)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilat (39f) (235 mg, 0,346 mmol, 47,3% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,78 (d, J = 93,3 Hz, 1H), 8,59 - 8,47 (m, 2H), 8,32 (s, 1H), 8,29 - 8,06 (m, 1H), 7,51 (dt, J = 6,6, 1,4 Hz, 2H), 7,43 - 7,07 (m, 6H), 5,99 (2s, 1H, rotameri), 5,51 (m, 1H), 4,44 (m, 1H), 3,68 (m, 2H), 2,78 -2,51 (m, 2H), 2,35 - 2,15 (m, 1H), 1,33 (2s, 9H, rotameri), 1,15 (s, 10H), 0,92 (m, 2H), 0,73 -0,57 (m, 1H), 0,42 - 0,30 (m, 2H), 0,00 - -0,13 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,66 , -130,04 (rotameri); MS (ES+) 679,5 (M+1), 701,5 (M+Na), (ES-) 677,5 (M-1), 713,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 55,55 [0,18, MeOH].
Korak 6: Priprema (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-2-karboksamida (39g)
[0316] Reakcija (2R,4S)-terc-butil 2-(5-((-)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilata (39f) (200 mg, 0,295 mmol) u metanolu (10 ml) sa hlorovodoničnom kiselinom (1,964 ml, 5,89 mmol) dala je posle napredovanja i prečišćavanja kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4fenilpirolidin-2-karboksamid (39 g) (169 mg, 0,289 mmol, 98% prinos) kao hidrohloridnu so koja je kao takva upotrebljena za sledeći korak; MS (ES-) 509,4 (M+Cl).
Korak 7: (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamid (39h)
[0317] Reakcija (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-2-karboksamida (39g) (160 mg, 0,274 mmol) u tetrahidrofuranu (25 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (61,3 mg, 0,247 mmol) upotrebom natrijum bikarbonata kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamid (98 mg, 0,156 mmol, 56,9% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,74 (s, 1H), 9,25 (s, 1H), 8,47 - 8,41 (m, 2H), 8,30 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,91 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,81 (dd, J = 8,9, 2,6 Hz, 1H), 7,54 (dt, J = 6,5, 1,3 Hz, 2H), 7,41 - 7,33 (m, 4H), 7,33 - 7,25 (m, 1H), 7,15 (dd, J = 7,3, 1,7 Hz, 2H), 5,95 (s, 1H), 4,80 - 4,65 (m, 1H), 4,00 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 3,90 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 2,68 (dd, J = 13,1, 9,6 Hz, 1H), 2,31 (m, 3H), 2,21 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 1,12 -0,96 (m, 2H), 0,70 - 0,53 (m, 1H), 0,45 - 0,26 (m, 2H), -0,01 - -0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,43; MS (ES+) 629,4 (M+1), 651,4, 653,4 (M+Na), (ES-) 627,4, 629,4 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 7,209 [0,265, MeOH]; Analiza izračunata za C34H34ClFN6O3,0,5H2O; C, 63,99; H, 5,53; N, 13,17; Pronađeno: C, 64,02; H, 5,63; N, 12,86.
Priprema (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (40a)
[0318] Reakcija (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-2-karboksamida (39 g) (250 mg, 0,428 mmol) u dihlorometanu (20 ml) sa 4-hlorofenil izocijanatom (1n) (0,049 ml, 0,385 mmol) i natrijum bikarbonatom (719 mg, 8,56 mmol) u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 9 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu) (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4)-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamid (40a) (134 mg, 0,213 mmol, 49,8% prinos) kao prljavobelu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,69 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,49 - 8,37 (m, 2H), 8,16 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,61 - 7,53 (m, 4H), 7,43 -7,34 (m, 4H), 7,33 - 7,25 (m, 3H), 7,17 (s, 1H), 7,14 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 5,97 (s, 1H), 4,68 (dd, J = 9,7, 2,7 Hz, 1H), 3,93 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,83 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,72 (dd, J = 13,1, 9,8 Hz, 1H), 2,39 - 2,10 (m, 5H), 1,12 - 0,97 (m, 2H), 0,73 - 0,56 (m, 1H), 0,43 - 0,28 (m, 2H), -0,00 - -0,10 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,82; MS (ES-), 626,5, 628,5 (M-1); Analiza izračunata za C35H35ClFN5O3,0,5H2O: C, 65,98; H, 5,70; N, 10,99; Proinađeno: C, 65,94; H, 5,86; N, 10,69; Optička rotacija [α]D= (+) 65,14 [0,175, MeOH].
Priprema (2R,4S)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(metilamino)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (41a)
[0319] U rastvor (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (39h) (100 mg, 0,159 mmol) u metanolu (10 ml) dodati su sirćetna kiselina (1 kap) paraformaldehid (23,86 mg, 0,795 mmol), natrijum borohidrid (30,1 mg, 0,795 mmol) i mešano je na sobnoj temperaturi tokom 8 h. Dopunski paraformaldehid (23,86 mg, 0,795 mmol) i natrijum borohidrid (30,1 mg, 0,795 mmol) dodati su u reakciju i mešano je na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je koncentrovana u vakuumu i dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu) kako bi se dobio ((2R,4S)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(metilamino)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamid (41a) (74 mg, 0,115 mmol, 72,4% prinos) slobodna baza kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,73 (s, 1H), 9,25 (s, 1H), 8,50 - 8,41 (m, 2H), 8,34 - 8,27 (m, 1H), 8,10 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,91 (dd, J = 9,1, 0,8 Hz, 1H), 7,82 (dd, J = 9,0, 2,7 Hz, 1H), 7,59 - 7,48 (m, 2H), 7,43 -7,34 (m, 3H), 7,35 - 7,26 (m, 2H), 7,16 (dd, J = 10,5, 8,8 Hz, 1H), 7,11 - 7,00 (m, 1H), 5,94 (s, 1H), 4,71 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 4,10 - 3,85 (m, 2H), 2,75 - 2,63 (m, 1H), 2,25 (m, 3H), 1,94 (s, 4H, N-Me and NH), 1,05 - 0,74 (m, 2H), 0,70 - 0,56 (m, 1H), 0,40 - 0,24 (m, 2H), -0,06 - -0,18 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,21; MS (ES+) 643,3 (M+1), 665,3, 667,3 (M+Na), (ES-) 641,4, 643,3 (M-1). Slobodna baza jedinjenja 41a (100 mg, 0,159 mmol) konvertovana je u HCl so u metanolu (10 ml) upotrebom konc. HCl (0,101 ml, 0,303 mmol) kako bi se nakon sušenja zamrzavanjem dobio (2R,4S)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(metilamino))-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamid (41a) (64 mg, 0,089 mmol, 88% prinos) kao beli prah;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,31 (s, 2H), 9,96 (s, 1H), 9,29 (s, 1H), 8,80 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 8,31 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 8,17 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,95 - 7,77 (m, 2H), 7,66 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 7,53 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,49 - 7,17 (m, 5H), 4,87 - 4,58 (m, 1H), 4,11 - 3,84 (m, 2H), 2,78 - 2,54 (m, 3H), 2,47 - 2,13 (m, 6H), 1,19 - 0,98 (m, 1H), 0,96 - 0,77 (m, 1H), 0,76 -0,61 (m, 1H), 0,45 - 0,30 (m, 2H), -0,00 - -0,10 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -124,81; MS (ES+) 665,4, 667,4 (M+Na), (ES-) 641,5, 643,5 (M-1), 677,3, 679,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 6,0 [0,19, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-(3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (42l)
Korak 1: Priprema (E)-etil 3-ciklopropilakrilata (42b)
[0320] U rastvor 1-(trifenilfosforaniliden)pentan-2-ona (42a) (994 g, 2853 mmol) u dihlorometanu (3000 ml) dodat je ciklopropankarbaldehid (200 g, 2853 mmol) i mešano je na sobnoj temperaturi tokom 20 h. Reakciona smeša je koncentrovana do 1/3 zapremine razblažena sa heksanom (1000 ml) i koncentrovana u vakuumu kako bi se uklonio dihlorometan. Reakciona smeša je razblažena sa heksanom (3000 ml) i mešano je tokom 10 min. Čvrsta supstanca dobijena od trifenilfosfin oksida uklonjena je filtracijom uz ispiranje heksana (2 x 400 ml). Filtrat je koncentrovan kako bi se dobio (E)-etil 3-ciklopropilakrilat (42b) (410 g, 2925 mmol, 103% prinos) kao bezbojno ulje, koje je kao takvo upotrebljeno za sledeći korak bez prečišćavanja;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 6,38 (dd, J = 15,4, 10,2 Hz, 1H), 5,93 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 4,08 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 1,64 (dtt, J = 10,2, 8,0, 4,6 Hz, 1H), 1,19 (td, J = 7,1, 1,0 Hz, 3H), 0,98 - 0,82 (m, 2H), 0,75 - 0,62 (m, 2H).
Korak 2: Priprema etil 3-ciklopropilpropanoata (42c)
[0321] U rastvor (E)-etil 3-ciklopropilakrilata (42b) (290 g, 2069 mmol) u metanolu (2000 ml) koji je ohlađen na 5 °C dodat je kobalt (II) hlorid heksahidrat (24,61 g, 103 mmol), nakon čega je sledilo dodavanje kap po kap rastvora natrijum tetrahidroborata (157 g, 4138 mmol) u DMF (500 ml) takvom brzinom da unutrašnja temperatura nije smela da poraste iznad 10 °C. Reakciona smeša je mešana tokom 1 h na 5 °C, sipana u vodu (5000 ml) i mešano je tokom 15 min. Rezultujući crni suspendovani rastvor je filtriran preko jastučeta celita, ispran sa dihlorometanom (3 x 800 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan sa dihlorometanom (2 x 600 ml). Slojevi dihlorometana su kombinovani, isprani vodom (2 x 1500 ml), rastvorom soli, osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom sa temperaturom kupatila ispod 40 °C kako bi se dobio etil 3-ciklopropilpropanoat (42c) (260 g, 88% prinos) kao bezbojna tečnost;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 4,03 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,33 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 1,41 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 1,16 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 0,75 - 0,59 (m, 1H), 0,40 - 0,31 (m, 2H), 0,06 - -0,06 (m, 2H).
Korak 3: Priprema 3-ciklopropil-N-metoksi-N-metilpropanamida (42d)
[0322] U rastvor etil 3-ciklopropilpropanoata (42c) (260 g, 1828 mmol) u THF (2000 ml) koji je ohlađen na -10 °C dodat je N,O-dimetilhidroksilamin hidrohlorid (268 g, 2743 mmol), nakon čega je sledilo dodavanje kap po kap izopropil magnezijum hlorida (2743 ml, 5485 mmol, 2 M u THF). Smeša je mešana na -10 °C tokom 2 h, ugašena sa zas. rastvorom NH4Cl (4000 ml) i omogućeno je da se zagreje do sobne temperature. THF sloj je odvojen i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2 x 1000 ml). Organski slojevi su kombinovani, isprani rastvorom soli, osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani u vakuumu kako bi se dobio 3-ciklopropil-N-metoksi-N-metilpropanamid (42d) (240 g, 1527 mmol, 83% prinos) kao narandžasta tečnost;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 3,66 (s, 3H), 3,07 (s, 3H), 2,44 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,39 (q, J = 7,3 Hz, 2H), 0,76 - 0,62 (m, 1H), 0,42 - 0,31 (m, 2H), 0,08 - -0,09 (m, 2H).
Korak 4: Priprema 1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropan-1-ona (42e)
[0323] U rastvor 3-ciklopropil-N-metoksi-N-metilpropanamida (42d) (240 g, 1527 mmol) u THF (2000 ml) koji je ohlađen na 5 °C dodavan je kap po kap sveže pripremljen rastvor (3-(bis(trimetilsilil)amino)-4-fluorofenil)magnezijum bromida (1c) (1908 ml, 1527 mmol, 1 M u THF) održavajući unutrašnju temperaturu oko 5 °C tokom dodavanja. Reakcija je mešana na 5 °C tokom 2 h, ugašena sa 3 N HCl (1000 ml) i mešana tokom 2 h. Smeša je zalužena čvrstim NaHCO3i ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 500 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani rastvorom soli, osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani u vakuumu kako bi se dobio sirovi 42e. Sirovi materijal je rastvoren u izopropanolu (150 ml) i mešano je preko noći. Dobijena čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, isprana izopropanolom i osušena kako bi se dobio 1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropan-1-on (42e) (90 g, 28,46% prva žetva) kao bela čvrsta supstanca. Filtrat je koncentrovan, držan na sobnoj temperaturi tokom 6 h i dobijena čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom kako bi se dobio 1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropan-1-on (42e) (50 g, 15,81%, druga žetva) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,38 (dd, J = 8,9, 2,2 Hz, 1H), 7,18 (ddd, J = 8,4, 4,7, 2,2 Hz, 1H), 7,09 (dd, J = 11,1, 8,4 Hz, 1H), 5,41 (s, 2H), 2,98 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 1,48 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 0,82 - 0,65 (m, 1H), 0,41 - 0,33 (m, 2H), 0,10 - -0,02 (m, 2H); MS (ES+) 208,2 (M+1), (ES-) 206,2 (M-1);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,24;
Korak 5: Priprema 1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropan-1-ola (42f)
[0324] U rastvor 1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropan-1-ona (42e) (13,63 g, 65,8 mmol) u THF (150 ml) i metanolu (300 ml) na 0 °C dodat je natrijum borohidrid (5,08 g, 132 mmol) i mešano je na 0 °C tokom 1 h. Reakcionoj smeši je omogućeno da se zagreje do sobne temperature preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom (800 ml), neutralizovana je sirćetnom kiselinom, isprana vodom (2 x 300 ml), rastvorom soli (300 ml), osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni [silika gel, eluiranje sa heksanima/etil acetatom (1:0 do 4:1)] kako bi se dobio 1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropan-1-ol (42f) (11,47 g, 53,8 mmol, 83% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 6,86 (dd, J = 11,5, 8,2 Hz, 1H), 6,72 (dd, J = 9,1, 2,1 Hz, 1H), 6,42 (ddd, J = 8,3, 4,5, 2,1 Hz, 1H), 5,03 (s, 2H), 4,98 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 4,40 - 4,30 (m, 1H), 1,71 - 1,48 (m, 2H), 1,26 - 1,01 (m, 2H), 0,73 - 0,54 (m, 1H), 0,45 - 0,24 (m, 2H), 0,02 - -0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO) δ -138,16; MS (ES+) 210,1 (M+1); (ES-) 208,1 (M-1).
Korak 6: Priprema (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-hidroksipropil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (42g)
[0325] Jedinjenje 42g je pripremljeno od 1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropan-1-ola (42f) (700 mg, 3,35 mmol), (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (36a) (820 mg, 3,35 mmol) i etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (827 mg, 3,35 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 kako bi se dobio (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-hidroksipropil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilat (42g) (1,273 g, 2,92 mmol, 87% prinos) kao bezbojni sirup;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,42 (2s, 1H, rotameri), 7,87 (dd, J = 35,9, 7,7 Hz, 1H, rotameri), 7,17 (dd, J = 10,8, 8,4 Hz, 1H), 7,06 (s, 1H), 5,19 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 4,49 (q, J = 5,9 Hz, 1H), 4,29 (m, 1H), 3,99 (m, 1H), 3,59 (dd, J = 11,0, 5,5 Hz, 1H), 3,34-3,30 (m, 1H), 3,22 (2s, 3H, rotameri), 2,45 - 2,25 (m, 1H), 2,19 - 1,89 (m, 1H), 1,77 - 1,51 (m, 2H), 1,36 (2s, 9H, rotameri), 1,26 - 1,05 (m, 2H), 0,74 - 0,53 (m, 1H), 0,46 - 0,22 (m, 2H), -0,011- -0,098 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,81, -130,11 rotameri.
Korak 7: Priprema (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(1-bromo-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (42h)
[0326] U rastvor trifenilfosfina (451 mg, 1,718 mmol) u dihlorometanu (15 ml) na 0 °C dodat je brom (70,8 μl, 1,374 mmol) i mešano je tokom 15 min. U reakciju na 0 °C dodat je prethodno pomešani rastvor koji sadrži (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-hidroksipropil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilat (42g) (300 mg, 0,687 mmol) i imidazol (117 mg, 1,718 mmol) u dihlorometanu (15 ml). Reakciji je omogućeno da se zagreje do sobne temperature tokom perioda od 1 h i koncentrovana je u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa etil acetatom u heksanima 20 do 30%) kako bi se dobio (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(1-bromo-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilat (42h) (279 mg, 0,559 mmol, 81% prinos) kao svetlobraon polučvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,56 (2s, 1H, rotameri), 8,05 (2m, 1H, rotameri), 7,37 - 7,04 (m, 2H), 5,30 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 4,32 (m, 1H), 4,07 - 3,90 (m, 1H), 3,59 (dd, J = 11,1, 5,4 Hz, 1H), 3,43 -3,28 (m, 1H), 3,23 (2s, 3H, rotameri), 2,62 - 2,23 (m, 2H), 2,20 - 1,89 (m, 1H), 1,37 (2s, 9H, rotameri), 1,30 - 1,02 (m, 3H), 0,79 - 0,63 (m, 1H), 0,48 - 0,29 (m, 2H), 0,03 --0,049 (m, 2H),<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,1 rotameri.
MS (ES+) 499,46, 501,47 (M+1), 521,45, 523,46 (M+Na), (ES-) 497,41, 499,37 (M-1).
Korak 8: Priprema (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (42j)
[0327] U mešani rastvor piridin-2-ola (42i) (252 mg, 2,65 mmol) u acetonitrilu (25 ml) dodat je kalijum karbonat (381 mg, 2,76 mmol), zagrevano je na refluksu tokom 1 h i ohlađeno na sobnu temperaturu. U reakcionu smešu je dodat rastvor (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(1-bromo-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (42h) (265 mg, 0,531 mmol) u acetonitrilu (15 ml) i zagrevano je na refluksu preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i ostatak je suspendovan u vodi (25 ml), ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 50 ml). Slojevi etil acetata su kombinovani, isprani vodom (2 x 25 ml), rastvorom soli (25 ml), osušeni i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa 9:1 smešom etil acetata i metanola u heksanima 0 do 60%) kako bi se dobio (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilat (42j) (120 mg, 0,234 mmol, 44,0% prinos) kao prljavobela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,55 (2s, 1H, rotameri), 7,79 (s, 1H, rotameri), 7,62 (s, 1H), 7,42 - 7,31 (m, 1H), 7,25 (dd, J = 10,5, 8,6 Hz, 1H), 7,18 (bs, 1H), 6,39 (dd, J = 9,2, 1,4 Hz, 1H), 6,23 (tt, J = 6,7, 1,6 Hz, 1H), 6,06 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 4,27 (m, 1H), 3,97 (m, 1H), 3,58 (m, 1H), 3,45 -3,23 (m, 1H), 3,21 (2s, 3H, rotameri), 2,61 - 2,23 (m, 1H), 2,23 - 2,08 (m, 2H), 2,00 - 1,83 (m, 1H), 1,34 (2s, 9H, rotameri), 1,17 - 0,96 (m, 2H), 0,79 - 0,61 (m, 1H), 0,48 - 0,28 (m, 2H), 0,10 - -0,10 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,20 , -127,58 rotameri; MS (ES+) 514,6 (M+1), 536,6 (M+Na), (ES-) 512,5 (M-1), 548,6 (M+Cl).
Korak 9: Priprema (2R,4R)-N-(5-(3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (42k)
[0328] Jedinjenje 42k je pripremljeno od (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (42j) (110 mg, 0,214) upotrebom 3 N HCl u metanolu (0,714 ml, 2,142 mmol) u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 6 Šeme 4 kako bi se dobio (2R,4R)-N-(5-(3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamid (42k) (96 mg, 0,213 mmol, 100% prinos) hidrohlorid kao svetlobraon čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,46 (s, 1H), 10,08 (s, 1H), 8,79 (s, 1H), 7,89 -7,56 (m, 2H), 7,50 - 7,11 (m, 2H), 6,40 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 6,25 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,07 (s, 1H), 4,49 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 4,09 (s, 1H), 3,39 (s, 1H), 3,35 - 3,21 (m, 1H), 3,19 (2s, 3H dva dijastereomera), 2,64 - 2,51 (m, 1H), 2,31 - 2,15 (m, 4H), 1,25 - 0,93 (m, 2H), 0,79 - 0,61 (m, 1H), 0,49 - 0,28 (m, 2H), 0,07 - -0,10 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -124,71 , -124,73 (dijastereomeri); MS (ES+) 414,5 (M+1), 436,5 (M+Na), (ES-) 4112,5 (M-1), 448,5 (M+Cl).
Korak 10: Priprema (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-(3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (42l)
[0329] Reakcija (2R,4R)-N-(5-(3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (42k) (96 mg, 0,213 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (80 mg, 0,320 mmol) upotrebom 1 N vodenog rastvora natrijum bikarbonata (4,27 ml, 4,27 ml) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-(3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (42i) (113 mg, 0,199 mmol, 93% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,55 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,30 (dd, J = 2,6, 0,7 Hz, 1H), 7,90 (dd, J = 9,1, 0,8 Hz, 1H), 7,87 - 7,77 (m, 2H), 7,65 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 7,35 (ddd, J = 8,8, 6,5, 2,0 Hz, 1H), 7,29 - 7,12 (m, 2H), 6,38 (dd, J = 9,2, 1,3 Hz, 1H), 6,22 (t, J = 6,7 Hz, 1H), 6,05 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,59 (dd, J = 9,2, 3,8 Hz, 1H), 4,08 - 3,97 (m, 1H), 3,82 - 3,60 (m, 2H), 3,22 (2s, 3H, dijastereomeri), 2,42 - 2,32 (m, 1H), 2,29 - 2,04 (m, 3H), 1,18 - 0,93 (m, 2H), 0,78 - 0,62 (m, 1H), 0,44 - 0,29 (m, 2H), 0,04 - -0,11 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,35; MS (ES+) 568,6, 570,6 (M+1), 590,5, 592,5 (M+Na), (ES-) 566,5, 568,5 (M-1); IR (KBr) 3420, 3077, 2998, 2932, 1659, 1520 cm<-1>; Analiza izračunata za C29H31ClFN5O4,0,5H2O: C, 60,36; H, 5,59; N, 12,14; Pronađeno: C, 60,76; H, 5,66; N, 11,82.
Priprema ((2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (43m)
Korak 1: Priprema (S)(+)-N-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (43a)
[0330] Jedinjenje (43a) je pripremljeno od 1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropan-1-ona (42e) (100,865 g, 487 mmol), (S)-2-metilpropan-2-sulfinamida (86 g, 681 mmol) i tetraizopropoksititanijuma (287 ml, 973 mmol) upotrebom procedure kao što je saopšteno u koraku 3 Šeme 31 kako bi se dobio (S)(+)-N-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid (43a) (64 g, 206 mmol, 42,4% prinos) kao svetlobraon čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,33 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 5,39 (s, 2H), 3,33 - 3,05 (m, 2H), 1,54 - 1,37 (m, 2H), 1,21 (s, 9H), 0,85 -0,63 (m, 1H), 0,46 - 0,32 (m, 2H), 0,15 - 0,02 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,79; MS (ES+) 311,4 (M+1), 333,4 (M+Na), (ES-) 309,4 (M-1), 345,3 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 20,0 [0,18, MeOH].
Korak 2: Priprema (S)-N-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (43b)
[0331] U rastvor (S)(+)-N-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (43a) (64 g, 206 mmol) u tetrahidrofuranu (1,5 l) koji je ohlađen na -78 °C dodavan je litijum trietilborohidrid (618 ml, 618 mmol) polako tokom perioda od 2 h održavajući reakcionu temperaturu ispod -75 °C. Reakcija je mešana na -78 °C tokom 3 h i omogućeno je da se zagreje do sobne temperature preko noći. Reakciona smeša je ohlađena na 0 °C, ugašena je sa zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (600 ml). Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (2 x 1000 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 x 1000 ml), rastvorom soli (500 ml), osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani u vakuumu kako bi se dobio (S)-N-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (43b) (127 g, 203 mmol, 99% prinos) koji je upotrebljen bez prečišćavanja u sledećem koraku; MS (ES+) 313,4 (M+1), 335,4 (M+Na), (ES-) 311,4 (M-1), 347,3 (M+Cl).
Korak 3: Priprema metil 5-((+)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamata (43c)
[0332] U dvofazni rastvor (S)-N-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (43b) (127 g, 203 mmol) u etil acetatu (635 ml) i zasićenom vodenom rastvoru NaHCO3(635 ml) dodat je metil hloroformat (23,61 ml, 305 mmol) i snažno je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (2 x 1 l). Kombinovani organski slojevi su isprani rastvorom soli, osušeni, filtrirani, koncentrovani u vakuumu i prečišćeni pomoću hromatografije kako bi se dobio metil 5-((+)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamat (43c) (75,344 g, 203 mmol, 100% prinos) kao gumasta čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,29 (s, 1H), 7,56 (dd, J = 7,9, 2,2 Hz, 1H), 7,15 (dd, J = 10,6, 8,4 Hz, 1H), 7,05 (ddd, J = 8,5, 4,8, 2,2 Hz, 1H), 5,31 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,28 - 4,09 (m, 1H), 3,65 (s, 3H), 2,06 - 1,88 (m, 1H), 1,78 - 1,61 (m, 1H), 1,25 - 1,11 (m, 1H), 1,06 (s, 9H), 1,06 - 0,88 (m, 1H), 0,74 - 0,55 (m, 1H), 0,42 - 0,29 (m, 2H), -0,01 - -0,09 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,77; MS (ES+) 371,5 (M+1), 393,5 (M+Na), (ES-) 369,4 (M-1), 405,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 74,4 [0,18, MeOH].
Korak 4: Priprema (-)-metil 5-(1-amino-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenilkarbamata (43d)
[0333] U rastvor metil 5-((+)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilkarbamata (43c) (75 g, 202 mmol) u metanolu (1000 ml) dodata je 3 M HCl u metanolu (337 ml, 1012 mmol) mešano je tokom 30 min i koncentrovano u vakuumu do suva. Ostatak je rastvoren u vodi (500 ml) zalužen sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 1500 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 x 300 ml), rastvorom soli (500 ml), osušeni, filtrirani i koncentrovani u vakuumu kako bi se dobio (-)-metil 5-(1-amino-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenilkarbamat (43d) (63,5 g, 238 mmol, 118% prinos) kao gusti sirup;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,26 (s, 1H), 7,55 (dd, J = 8,0, 2,0 Hz, 1H), 7,20 - 7,06 (m, 1H), 3,77 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 3,65 (s, 3H), 3,50 - 3,14 (m, 2H), 2,50 - 2,28 (m, 1H), 1,60 (m, 2H), 1,24 - 0,94 (m, 2H), 0,72 - 0,53 (m, 1H), 0,41 - 0,27 (m, 2H), -0,02 - -0,11 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,37; MS (ES+) 267,4 (M+1), (ES-) 265,3 (M-1); Optička rotacija [α]D= (-) 3,0 [0,2, MeOH].
Korak 5: Priprema (+)-metil 5-(3-ciklopropil-1-(2,6-dioksopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenilkarbamata (43f)
[0334] U rastvor (-)-metil 5-(1-amino-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenilkarbamata (43d) (63 g, 237 mmol) u dihlorometanu (1000 ml) dodat je dihidro-2H-piran-2,6(3H)-dion (43e) (29,7 g, 260 mmol) na sobnoj temperaturi i mešano je tokom 30 min. U reakciju je dodat acetil hlorid (336 ml, 4731 mmol) zagrevano je na refluksu 2 h i koncentrovano u vakuumu do suva. Odvojena čvrsta supstanca je (sirova težina 100 g) kristalizovana iz izopropanola (250 ml) kako bi se dobio (+)-metil 5-(3-ciklopropil-1-(2,6-dioksopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenilkarbamat (43f) (51,5 g, 142 mmol, 60,1% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,29 (s, 1H), 7,65 - 7,41 (m, 1H), 7,19 - 6,86 (m, 2H), 5,71 (dd, J = 9,2, 6,5 Hz, 1H), 3,65 (s, 3H), 2,61 (qd, J = 7,6, 7,0, 3,2 Hz, 4H), 2,42 - 2,11 (m, 2H), 1,81 (p, J = 6,5 Hz, 2H), 1,22 - 0,99 (m, 2H), 0,76 - 0,56 (m, 1H), 0,44 - 0,28 (m, 2H), 0,11 - -0,12 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,82; MS (ES+) 363,5 (M+1), 385,5 (M+Na), (ES-) 361,5; Optička rotacija [α]D= (+) 101,9 [0,21, MeOH].
Korak 6: Priprema metil 5-(3-ciklopropil-1-(2-hidroksi-6-oksopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenilkarbamata (43g)
[0335] U rastvor (+)-metil 5-(3-ciklopropil-1-(2,6-dioksopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenilkarbamata (43f) (51 g, 141 mmol) u dihlorometanu (1407 ml) na -78 °C dodat je diizobutilaluminijum hidrid (422 ml, 422 mmol) i mešano je na -78 °C tokom 1 h. Reakcija je ugašena sa metanolom (30 ml), zasićenim vodenim rastvorom natrijum kalijum tartarata (1 l) i omogućeno je da se zagreje do 0 °C. Kaša je mešana tokom 2 h, slojevi su odvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa dihlorometanom (2 x 500 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 x 500 ml), rastvorom soli (200 ml), osušeni, filtrirani i koncentrovani u vakuumu kako bi se dobio metil 5-(3-ciklopropil-1-(2-hidroksi-6-oksopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenilkarbamat (43g) (51,3 g, 141 mmol, 100% prinos) koji je kao takav upotrebljen u sledećem koraku bez prečišćavanja; MS (ES-) 363,5 (M-1).
Korak 7: Priprema (+)-metil 5-(3-ciklopropil-1-(2-okso-3,4-dihidropiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilkarbamata (43h)
[0336] U mešani rastvor metil 5-(3-ciklopropil-1-(2-hidroksi-6-oksopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenilkarbamata (43g) (52 g, 143 mmol) u dihlorometanu (1586 ml) dodat je trietilamin (119 ml, 856 mmol), ohlađeno je na 0 °C i dodat je metansulfonil hlorid (22,24 ml, 285 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, razblažena sa dihlorometanom (100 ml) i vodom (500 ml). Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa dihlorometanom (2 x 500 ml). Organski slojevi su kombinovani, isprani vodom (2 x 250 ml), rastvorom soli (250 ml), osušeni, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa etil acetatom u heksanima 0 do 100%) kako bi se dobio (+)-metil 5-(3-ciklopropil-1-(2-okso-3,4-dihidropiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilkarbamat (43h) (51,6 g, 149 mmol, 104% prinos) kao bezbojni sirup;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,35 (s, 1H), 7,66 - 7,50 (m, 1H), 7,18 (dd, J = 10,7, 8,5 Hz, 1H), 7,06 (m, 1H), 6,15 (dt, J = 7,9, 1,6 Hz, 1H), 5,64 (dd, J = 9,8, 6,3 Hz, 1H), 5,17 (dt, J = 8,2, 4,4 Hz, 1H), 3,66 (s, 4H, Me, NH), 2,50 - 2,36 (m, 2H), 2,26 - 2,14 (m, 1H), 2,06 - 1,87 (m, 1H), 1,43 (m, 1H), 1,28 - 0,99 (m, 2H), 0,72 (m, 1H), 0,44 - 0,30 (m, 2H), 0,11 - -0,13 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ - 126,08; MS (ES+) 369,5 (M+Na), (ES-) 345,4 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 123,9 [0,255, MeOH].
Korak 8: Priprema (+)-metil 5-(3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilkarbamata (43i)
[0337] U mešani rastvor (+)-metil 5-(3-ciklopropil-1-(2-okso-3,4-dihidropiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilkarbamata (43h) (5,95 g, 17,18 mmol) u dihlorometanu (200 ml) dodat je mangan dioksid (7,47 g, 86 mmol) i zagrevano je do refluksa tokom 10 h. Dopunski mangan dioksid (7,47 g, 86 mmol) dodat je u 7 obroka tokom perioda od 72 h. Reakciona smeša je filtrirana, isprana sa dihlorometanom i koncentrovana u vakuumu. Dobijeni sirovi ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa etil acetatom u heksanima 0 do 100%) kako bi se dobio (+)-metil 5-(3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilkarbamat (43i) (2,962 g, 8,60 mmol, 50,1% prinos) kao svetlocrno ulje;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,40 (s, 1H), 7,75 - 7,59 (m, 2H), 7,38 (ddd, J = 8,8, 6,5, 2,0 Hz, 1H), 7,28 - 7,14 (m, 2H), 6,45 - 6,37 (m, 1H), 6,25 (td, J = 6,7, 1,5 Hz, 1H), 6,08 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 3,67 (s, 3H), 2,22 (q, J = 7,7 Hz, 2H), 1,28 - 0,93 (m, 2H), 0,84 - 0,62 (m, 1H), 0,47 - 0,31 (m, 2H), 0,11 - -0,13 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -125,29; MS (ES+) 345,4 (M+1), 367,4 (M+Na), (ES-) 343,4 (M-1), 379,3 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 240,0 [0,05, MeOH].
Korak 9: Priprema (+)-1-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropil)piridin-2(1H)-ona (43j)
[0338] U rastvor (+)-metil 5-(3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilkarbamata (43i) (2,9 g, 8,42 mmol) u metanolu (75 ml) dodat je vodeni rastvor natrijum hidroksida (14,03 ml, 84 mmol, 6 N), zagrevano je do refluksa tokom 10 h i koncentrovano u vakuumu. Ostatak je razblažen vodom (200 ml) ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 200 ml). Organski slojevi su kombinovani, isprani vodom (2 x 100 ml), rastvorom soli (100 ml), osušeni, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa etil acetatom u heksanima 0 do 60 do 100%) kako bi se dobio (+)-1-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropil)piridin-2(1H)-on (43j) (2,173 g, 7,59 mmol, 90% prinos) kao sirup;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,58 (dd, J = 6,9, 2,0 Hz, 1H), 7,35 (ddd, J = 8,8, 6,5, 2,0 Hz, 1H), 6,94 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,75 (dd, J = 8,7, 2,3 Hz, 1H), 6,53 (ddd, J = 8,4, 4,3, 2,3 Hz, 1H), 6,39 (dd, J = 9,1, 1,3 Hz, 1H), 6,21 (td, J = 6,7, 1,5 Hz, 1H), 5,99 (dd, J = 9,1, 7,0 Hz, 1H), 5,19 (s, 2H), 2,23 - 2,03 (m, 2H), 1,11 (m, 1H), 0,99 (m, 1H), 0,79 - 0,62 (m, 1H), 0,46 - 0,28 (m, 2H), 0,08 - -0,12 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -136,31; MS (ES+) 287,4 (M+1), 309,4 (M+Na), 573,7 (2M+1), 595,7 (2M+Na), (ES-) 285,3 (M-1), 321,3 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 296,25 [0,16, MeOH].
Korak 10: Priprema (2R,4R)-terc-butil 2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (43k)
[0339] Reakcija (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (36a) (158 mg, 0,513 mmol), (+)-1-(1-(3-amino-4)-fluorofenil)-3-ciklopropilpropil)piridin-2(1H)-ona (43j) (286 mg, 1,0 mmol) u tetrahidrofuranu (20 ml) sa etil 2-etoksikvinolin-(2H)-karboksilatom (247 mg, 1,0 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa etil acetatom u heksanima 0 do 100%) (2R,4R)-terc-butil 2 -(5-((+)-3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilat (43k) (462 mg, 0,900 mmol, 90% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,51 (2s, 1H, rotameri), 7,87 (m, 1H), 7,71 -7,56 (m, 1H), 7,36 (ddd, J = 8,8, 6,5, 2,0 Hz, 1H), 7,25 (dd, J = 10,5, 8,5 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,39 (dd, J = 9,1, 1,4 Hz, 1H), 6,23 (td, J = 6,7, 1,4 Hz, 1H), 6,07 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,42 - 4,21 (m, 1H), 4,00 - 3,92 (m, 1H), 3,59 (dd, J = 11,1, 5,5 Hz, 1H), 3,35 - 3,26 (m, 1H), 3,21 (2s, 3H, rotameri), 2,51 - 2,28 (m, 1H), 2,20 (m, 2H), 2,11 - 1,85 (m, 1H), 1,34 (2s, 9H, rotameri), 1,26 - 0,93 (m, 2H), 0,72 (m, 1H), 0,37 (m, 2H), 0,10 - -0,10 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -125,99 , -127,39; MS (ES+) 514,6 (M+1), 536,6 (M+Na), (ES-) 512,6 (M-1), 548,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 248 [0,115, MeOH].
Korak 11: Priprema (2R,4R)-N-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (43l)
[0340] Jedinjenje 43l je pripremljeno od (2R,4R)-terc-butil 2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (43k) (450 mg, 0,876 mmol) upotrebom 3 N HCl u metanolu (2,92 ml, 8,76 mmol) u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 6 Šeme 4 kako bi se dobila (2R,4R)-N-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamid (43l) (394 mg, 0,876 mmol, 100% prinos) hidrohloridna so kao svetlobraon sirup;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,45 (s, 1H), 10,17 - 9,94 (m, 1H), 8,95 - 8,64 (m, 2H), 7,73 (ddd, J = 32,9, 7,3, 2,1 Hz, 2H), 7,37 (ddd, J = 8,8, 6,5, 2,0 Hz, 1H), 7,33 - 7,25 (m, 2H), 6,40 (dd, J = 9,1, 1,3 Hz, 1H), 6,24 (td, J = 6,8, 1,5 Hz, 1H), 6,07 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 4,63 - 4,35 (m, 1H), 4,09 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 3,50 - 3,21 (m, 1H), 3,19 (s, 3H), 2,63 - 2,52 (m, 1H), 2,22 (m, 3H), 1,11 (m, 2H), 0,71 (m, 1H), 0,38 (m, 2H), 0,06 - -0,11 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -124,56; MS (ES+) 414,5 (M+1), 436,5 (M+Na), 827,8 (2M+1), (ES-) 412,5 (M-1), 448,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 170,9 [0,055, MeOH].
Korak 12: Priprema ((2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (43m)
[0341] Reakcija (2R,4R)-N-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (43l) (394 mg, 0,876 mmol) u tetrahidrofuranu (50 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (327 mg, 1,314 mmol) upotrebom 1 N vodenog rastvora natrijum bikarbonata (17,52 ml, 17,52 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni ((2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil)-1-(2-oksopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (43m) (245 mg, 0,431 mmol, 49,2% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,55 (s, 1H), 9,17 (s, 1H), 8,30 (dd, J = 2,7, 0,7 Hz, 1H), 7,90 (dd, J = 9,0, 0,8 Hz, 1H), 7,88 - 7,78 (m, 2H), 7,65 (dd, J = 7,0, 2,0 Hz, 1H), 7,35 (ddd, J = 8,9, 6,5, 2,0 Hz, 1H), 7,24 (dd, J = 10,5, 8,6 Hz, 1H), 7,19-7,12 (m, 1H), 6,38 (dd, J = 9,2, 1,4 Hz, 1H), 6,22 (td, J = 6,7, 1,5 Hz, 1H), 6,05 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,59 (dd, J = 9,2, 4,0 Hz, 1H), 4,12 - 3,96 (m, 1H), 3,83 - 3,62 (m, 2H), 3,22 (s, 3H), 2,44 - 2,30 (m, 1H), 2,29 - 2,04 (m, 3H), 1,24 - 0,91 (m, 2H), 0,79 - 0,61 (m, 1H), 0,45 - 0,29 (m, 2H), 0,04 - -0,09 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,21; MS (ES+) 568,5, 570,6 (M+1), 590,5, 592 (M+Na), (ES-) 566,5, 568,5 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 229,54 [0,325, MeOH]; Analiza izračunata za C29H31ClFN5O4: C, 61,32; H, 5,50; Cl, 6,24; N, 12,33; Pronađeno: C, 61,06; H, 5,53; Cl, 6,02; N, 12,27.
Priprema (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(2-oksopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (44e)
Korak 1: Priprema (+)-1-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropil)-3,4-dihidropiridin-2(1H)-ona (44a)
[0342] Jedinjenje (44a) je pripremljeno od (+)-metil 5-(3-ciklopropil-1-(2-okso-3,4-dihidropiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilkarbamata (43h) (4 g, 11,55 mmol) i vodenog rastvora NaOH (19,25 ml, 115 mmol, 6 N) upotrebom procedure kao što je saopšteno u koraku 9 Šeme 43 kako bi se dobio (+)-1-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropil)-3,4-dihidropiridin-2(1H)-on (44a) (3,22 g, 11,17 mmol, 97% prinos) kao sirup;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 6,91 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,69 (dd, J = 8,8, 2,3 Hz, 1H), 6,44 (ddd, J = 8,5, 4,4, 2,3 Hz, 1H), 6,09 (dt, J = 7,7, 1,6 Hz, 1H), 5,56 (dd, J = 10,1, 5,9 Hz, 1H), 5,21 -5,04 (m, 3H), 2,48 - 2,36 (m, 2H), 2,27 - 2,12 (m, 2H), 1,98 - 1,80 (m, 2H), 1,21 - 0,94 (m, 2H), 0,81 - 0,61 (m, 1H), 0,45 - 0,28 (m, 2H), 0,07 - 0,01 (m, 1H), -0,01 - -0,08 (m, 1H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -136,82; MS (ES+) 289,4 (M+1), 311,4 (M+Na), (ES-) 287,4 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 144,4 [0,205, MeOH].
Korak 2: Priprema (+)-1-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropil)piperidin-2-ona (44b)
[0343] Jedinjenje 44b je pripremljeno redukcijom (+)-1-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropil)-3,4-dihidropiridin-2(1H)-ona (44a) (3,2 g, 11,10 mmol) tokom 1 h u skladu sa reakcijom i procedurom napredovanja koja je saopštena u koraku 2 Šeme 13 upotrebom paladijum hidroksida (0,779 g, 1,11 mmol) u etil acetatu (50 ml) kako bi se dobio (+)-1-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropil)piperidin-2-on (44b) (2,846 g, 9,80 mmol, 88% prinos) kao svetložuto ulje;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 6,91 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,70 (dd, J = 8,9, 2,2 Hz, 1H), 6,42 (ddd, J = 8,4, 4,3, 2,2 Hz, 1H), 5,68 (dd, J = 9,3, 6,7 Hz, 1H), 5,11 (s, 2H), 3,12 - 2,93 (m, 1H), 2,82 - 2,63 (m, 1H), 2,28 (m, 2H), 1,95 - 1,75 (m, 2H), 1,75 - 1,42 (m, 4H), 1,25 - 0,95 (m, 2H), 0,82 - 0,67 (m, 1H), 0,42 - 0,35 (m, 2H), 0,11 - -0,05 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,07; MS (ES+) 291,4, 313,4 (M+Na), ES-) 289,4 (M-1), 325,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 164,0 [0,15, MeOH].
Korak 3: Priprema metil (2R,4R)-terc-butil 2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(2-oksopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (44c)
[0344] Reakcija (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (36a) (245 mg, 1 mmol), (+)-1-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropilpropil)piperidin-2-ona (44b) (290 mg, 1,0 mmol) u tetrahidrofuranu (20 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (247 mg, 1,0 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa etil acetatom u heksanima 0 do 100%) metil (2R,4R)-tercbutil 2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(2-oksopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilat (44c) (453 mg, 0,875 mmol, 88% prinos) kao bezbojni sirup;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,50 (2s, 1H, rotameri), 8,04 - 7,66 (m, 1H), 7,22 (dd, J = 10,8, 8,5 Hz, 1H), 7,10 - 6,99 (m, 1H), 5,78 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,48 - 4,20 (m, 1H), 4,06 -3,91 (m, 1H), 3,59 (dd, J = 11,1, 5,6 Hz, 1H), 3,41 (s, 1H), 3,22 (2s, 3H, rotameri), 3,14 - 3,01 (m, 1H), 2,82 - 2,67 (m, 1H), 2,50 - 2,04 (m, 2H), 2,01 - 1,79 (m, 4H), 1,77 - 1,56 (m, 3H), 1,60 - 1,46 (m, 1H), 1,36 (2s, 9H, rotameri), 1,29 - 0,98 (m, 2H), 0,85 - 0,64 (m, 1H), 0,47 -0,30 (m, 2H), 0,14 - -0,08 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,42 , - 128,68 rotameri; MS (ES+) 518,6 (M+1), 540,6 (M+Na), (ES-) 516,5 (M-1), 552,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+)126,6 [0,15, MeOH].
Korak 4: Priprema (2R,4R)-N-(5-(3-ciklopropil-1-(2-oksopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (44d)
[0345] Jedinjenje 44d je pripremljeno od metil (2R,4R)-terc-butil 2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(2-oksopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (44c) (400 mg, 0,773 mmol) upotrebom 3 N HCl u metanolu (2,58 ml, 7,73 mmol) u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 6 Šeme 4 kako bi se dobio (2R,4R)-N-(5-(3-ciklopropil-1-(2-oksopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamid (44d) (351 mg, 0,773 mmol, 100% prinos) kao svetlobraon sirup;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,51 (s, 1H), 10,37 (s, 1H), 8,78 (s, 1H), 7,73 (dd, J = 7,6, 2,2 Hz, 1H), 7,27 (dd, J = 10,6, 8,5 Hz, 1H), 7,14 (ddd, J = 8,1, 4,8, 2,2 Hz, 1H), 5,79 (dd, J = 9,5, 6,5 Hz, 1H), 4,71 - 4,35 (m, 1H), 4,22 - 4,02 (m, 1H), 3,47 - 3,35 (m, 1H), 3,36 - 3,20 (m, 1H), 3,20 (s, 3H), 3,14 - 3,04 (m, 1H), 2,82 - 2,67 (m, 1H), 2,65 - 2,52 (m, 1H), 2,39 - 2,18 (m, 3H), 2,06 -1,85 (m, 2H), 1,79 - 1,44 (m, 4H), 1,31 - 0,98 (m, 2H), 0,84 - 0,64 (m, 1H), 0,48 - 0,31 (m, 2H), 0,12 - -0,07 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -125,55; MS (ES+) 418,6 (M+1), 440,5 (M+Na), (ES-) 416,5 (M-1), 452,5 (M+Cl).
Korak 5: Priprema (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(2-oksopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (44e)
[0346] Reakcija (2R,4R)-N-(5-(3-ciklopropil-1-(2-oksopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (44d) (340 mg, 0,749 mmol) u tetrahidrofuranu (50 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (280 mg, 1,125 mmol) upotrebom 1 N vodenog rastvora natrijum bikarbonata (15 ml, 15,00 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0-100%) čist (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(2-oksopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (44e) (210 mg, 0,367 mmol, 48,9% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,53 (s, 1H), 9,18 (s, 1H), 8,30 (dd, J = 2,6, 0,8 Hz, 1H), 7,91 (dd, J = 9,0, 0,8 Hz, 1H), 7,87 - 7,73 (m, 2H), 7,21 (dd, J = 10,7, 8,5 Hz, 1H), 7,10 - 6,99 (m, 1H), 5,85 - 5,68 (m, 1H), 4,60 (dd, J = 9,1, 3,9 Hz, 1H), 4,12 - 3,98 (m, 2H), 3,83 - 3,65 (m, 2H), 3,24 (s, 3H), 3,14 - 3,00 (m, 1H), 2,83 - 2,64 (m, 1H), 2,47 -2,32 (m, 1H), 2,35 - 2,20 (m, 1H), 2,18 - 2,03 (m, 1H), 2,01 - 1,81 (m, 2H), 1,75 - 1,56 (m, 3H), 1,61 - 1,44 (m, 1H), 1,27 - 0,97 (m, 2H), 0,83 - 0,64 (m, 1H), 0,47 - 0,30 (m, 2H), 0,10 --0,07 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,47; MS (ES+) 572,6 (M+1), 594,5, 596,5 (M+Na), (ES-) 570,5, 572,5 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 174,3 [0,21, MeOH].
Priprema (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (45c)
Korak 1: Priprema (2R,4S)-terc-butil 2-(5-((-)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilata (45a)
[0347] Reakcija (2R,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-2-karboksilne kiseline (34a) (160 mg, 0,498 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e) (194 mg, 0,498 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (123 mg, 0,498 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 25 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (2R,4S)-terc-butil 2-(5-((-)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilat (45a) (287 mg, 0,414 mmol, 83% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,49 (2s, 1H, rotameri), 8,77 - 8,28 (m, 2H), 8,04 (m, 1H), 7,53 - 7,08 (m, 8H), 5,48 (m, 1H), 4,35 (m, 1H), 3,77 (s, 1H), 3,41 (s, 2H), 2,85 (2s, 3H, rotameri), 2,78 - 2,35 (m, 3H), 1,33 (2s, 9H, rotameri), 1,15 (m, 10H), 1,02 - 0,82 (m, 2H), 0,64 (m, 1H), 0,36 (m, 2H), 0,04 - -0,15 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,09, -129,50 rotameri; MS (ES+) 693,7 (M+1), 715,7 (M+Na), (ES-) 691,7 (M-1), 727,7 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 8,0 [0,075, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-2-karboksamida (45b)
[0348] Reakcija (2R,4S)-terc-butil 2-(5-((-)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilata (45a) (280 mg, 0,404 mmol) u metanolnoj HCl (2,694 ml, 8,08 mmol) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-2-karboksamid (45b) (227 mg, 0,404 mmol, 100% prinos) hidrohloridnu so koja je kao takva upotrebljena za sledeći korak; MS (ES+) 489,5 (M+1), (ES-) 487,4 (M-1), 523,5 (M+Cl).
Korak 3: Priprema (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (45c)
[0349] Reakcija (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-2-karboksamida (45b) (111 mg, 0,444 mmol) u tetrahidrofuranu (50 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (227 mg, 0,404 mmol) upotrebom 1 N vodenog rastvora natrijum bikarbonata (8,08 ml, 8,08 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0-100%) (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksi-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamid (45c) (50 mg, 0,078 mmol, 19,24% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,46 (s, 1H), 9,23 (s, 1H), 8,59 - 8,36 (m, 2H), 8,31 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,97 - 7,88 (m, 2H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 4,2 Hz, 4H), 7,40 - 7,32 (m, 3H), 7,21 - 7,09 (m, 2H), 4,65 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 4,23 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,90 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 2,84 (s, 3H), 2,62 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 2,40 - 2,25 (m, 2H), 2,26 - 2,12 (m, 2H), 1,12 - 0,94 (m, 2H), 0,73 - 0,54 (m, 1H), 0,43 - 0,27 (m, 2H), 0,01 - -0,17 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,48; MS (ES+) 643,6, 645,7 (M+1), (ES-) 641,6, 643,6 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 99,23 [0,26, MeOH].
Priprema ((2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (46k)
Korak 1: Priprema 2-metil-izonikotinske kiseline (46b)
[0350] U rastvor 2,4-dimetil-piridina (46a) (100 g, 933,245 mmol) u vodi (1000 ml) dodavan je kalijum permanganat (294,97 g, 1866,489 mmol) u obrocima tokom perioda od 2 h. Rezultujuća reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 12 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana kroz jastuče celita i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom do zapremine od 250 ml na 50 °C. Dobijeni rastvor je ohlađen na 0 °C i pH je podešena na 3 upotrebom 1 N HCl (temperatura između 0 °C do 5 °C). Dobijena čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, isprana ohlađenom vodom i osušena kako bi se dobila 2-metilizonikotinska kiselina (46b) (22,3 g, prinos: 17,42%);<1>H NMR (D2O) δ 8,52 (s, 1H), 7,94-7,90 (m, 2H), 2,69 (s, 3H); MS (+) 138,1 (M+1).
Korak 2: Priprema N-metoksi-N,2-dimetilizonikotinamida (46c)
[0351] U mešani rastvor 2-metilizonikotinske kiseline (46b) (17,8 g, 129,798 mmol) u N,N-dimetilformamidu (180 ml) dodati su N,N-diizopropiletilamin (67,105 g, 519,192 mmol) i 1etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorid (EDCI, 40,299 g, 259,596 mmol) i hidroksibenzotriazol (HOBt, 39,753 g, 259,596 mmol) na sobnoj temperaturi. Rezultujuća reakciona smeša je mešana tokom 0,5 h na sobnoj temperaturi nakon čega je sledilo dodavanje N,O dimetil hidroksil amin hidrohlorida (13,8 g, 141,479 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 h, ugašena vodom (500 ml), ekstrahovana sa etil acetatom (5 x 500 ml). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni kako bi se dobio N-metoksi-N,2-dimetilizonikotinamid (46c) (23 g, 98,4% prinos) kao crvenkasta gusta čvrsta supstanca;<1>H NMR (CDCl3) δ 8,29-8,27 (s, 1H), 7,08-7,01 (m, 2H), 3,27 (s, 3H), 3,07 (s, 3H), 2,32 (s, 3H); MS (ES+) 181,1 (M+1).
Korak 3: Priprema 1-(2-metilpiridin-4-il)etanona (46d)
[0352] U mešani rastvor N-metoksi-N,2-dimetilizonikotinamida (46c) (26 g, 144,281 mmol) u THF (520 ml) dodat je MeLi (6,342 g, 288,562 mmol, 1 M rastvor u THF) pod atmosferom azota na -78 °C. Reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature tokom perioda od 1 h, ugašena sa zasićenim rastvorom NH4Cl na 0 °C. Rezultujuća reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i organski sloj je ispran vodom i rastvorom soli, osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni kako bi se dobio 1-(2-metilpiridin-4-il)etanon (46d) (11 g, 56,4% prinos) kao crvenkasta gusta tečnost;<1>H NMR (CDCl3) δ 8,61-8,59 (d, 1H), 7,51-7,45 (d, 1H), 7,45-7,44 (m, 1H), 4,05-4,02 (s, 3H); MS (ES+) 136,1(M+1).
Korak 4: Priprema 3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)prop-2-en-1-ona (46e)
[0353] Jedinjenje 46e koje je pripremljeno od 1-(2-metilpiridin-4-il)etanona (46d) (11 g, 81,383 mmol) u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 1 Šeme 31 dalo je posle prečišćavanja pomoću hromatografije na koloni 3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)prop-2-en-1-on (46e) (4,5 g, 29,5% prinos) kao crvenkastu tečnost; MS (ES+) 188,1 (M+1).
Korak 5: Priprema 3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propan-1-ona (46f)
[0354] Jedinjenje 46f koje je pripremljeno od 3-ciklopropil-1-piridin-4-il-propenona (46e) (8 g, 42,726 mmol) u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 2 Šeme 31 dalo je posle prečišćavanja pomoću hromatografije na koloni 3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propan-1-on (46f) (5,5 g, 68,1% prinos) kao žutu tečnost;<1>H NMR (CDCl3) δ 8,61-8,59 (d, 1H), 7,53-7,48 (m, 1H), 7,46-7,20 (m, 1H), 3,02-2,97 (m, 2H), 2,58 (s, 3H), 1,60-1,53 (m, 2H), 0,85-0,71 (m, 1H), 0,71-0,67 (m, 2H), 0,42-0,37 (m, 2H); MS (ES+) 190,2 (M+1).
Korak 6: Priprema (R)-N-(3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (46g)
[0355] Jedinjenje 46g koje je pripremljeno od 3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propan-1-ona (46f) (5,5 g, 29,062 mmol) i R-2-metil propan-2-sulfinamida (4,209 g, 34,729 mmol) u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 31 dalo je posle prečišćavanja pomoću hromatografije na koloni (R)-N-(3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid (46g) (7 g, 82,44% prinos) kao žutu tečnost;<1>H NMR (CDCl3) δ 8,59-8,49 (m, 1H), 7,51-7,33 (m, 2H), 3,32-2,98 (m, 2H), 2,54 (s, 3H), 1,54-1,49 (m, 2H), 1,,42-1,13 (m, 9H), 0,85-0,71(m, 1H), 0,71-0,67 (m, 2H), 0,42-0,37 (m, 2H); MS (ES+) 293,2 (M+1).
Korak 7: Priprema (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (46h)
[0356] Jedinjenje 46h koje je pripremljeno od (R)-N-(3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (46g) (5,5 g, 29,062 mmol) i R-2-metil propan-2-sulfinamida (2 g, 6,839 mmol) i sveže pripremljenog (3-(bis(trimetilsilil)amino)-4-fluorofenil)magnezijum bromida (1c) (19,10 ml, 15,28 mmol) u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 4 Šeme 31 dalo je posle prečišćavanja pomoću hromatografije na koloni (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (46h) (0,8 g, 29,0% prinos) kao crvenkastu gustu tečnost;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 8,36-8,34 (d, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,12-7,10 (d, 1H), 6,95-6,88 (m, 1H), 6,76-6,73 (m, 1H), 5,38-5,32 (s, 1H), 5,17-5,11 (s, 2H), 2,58-2,45 (s, 3H), 2,05-2,01 (m, 2H), 1,55-1,51 (m, 2H), 1,28-1,10 (m, 9H), 0,67-0,45 (m, 1H), 0,39-0,37 (m, 2H), 0,03-0,00 (m, 2H); MS (ES+) 404,3 (M+1); Optička rotacija [α]D= (-) 55,0 [0,28, MeOH].
Korak 8: Priprema (2R,4R)-terc-butil 2-(5-((-)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (46i)
[0357] Reakcija (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (36a) (245 mg, 1,0 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (46h) (404 mg, 1,0 mmol) u tetrahidrofuranu (50 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (247 mg, 1,0 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću hromatografije na koloni (2R,4R)-terc-butil 2-(5-((-)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilat (46i) (485 mg, 0,769 mmol, 77% prinos) kao bezbojnu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,47 (2s, 1H, rotameri), 8,33 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,09 - 7,77 (m, 1H), 7,26 - 7,15 (m, 3H), 7,08 (dd, J = 5,3, 1,7 Hz, 1H), 5,41 (2s, 1H, rotameri), 4,46 - 4,16 (m, 1H), 3,97 (dd, J = 9,1, 4,1 Hz, 1H), 3,57 (dd, J = 11,0, 5,4 Hz, 1H), 3,36 - 3,24 (m, 1H), 3,21 (m, 3H), 2,65 - 2,53 (m, 1H), 2,45 - 2,39 (m, 4H), 2,01 - 1,84 (m, 1H), 1,33 (2s, 9H, rotameri), 1,14 (m, 10H), 0,90 (m, 2H), 0,71 - 0,54 (m, 1H), 0,42 - 0,32 (m, 2H), -0,00 - -0,17 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,87 (q, J = 8,1, 7,2 Hz), -128,88 rotameri; MS (ES+) 631,7 (M+1), 653,7 (M+Na), (ES-) 629,6 (M-1); Optička rotacija [α]D= (-) 50,2 [0,175, MeOH].
Korak 9: Priprema (2R,4R)-N-(5-(-1-amino-3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (46j)
[0358] Reakcija (2R,4R)-terc-butil 2-(5-((-)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (46i) (475 mg, 0,753 mmol) u 3 N metanolnoj HCl (5,020 ml, 15,06 mmol) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-N-(5-(-1-amino-3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamid (46j) (376 mg, 0,753 mmol, 100% prinos) hidrohloridnu so kao prljavobelu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,69 (s, 1H), 10,40 (s, 1H), 9,76 (s, 3H), 9,55 (bs, 1H), 8,90 - 8,67 (m, 2H), 7,89 - 7,76 (m, 2H), 7,76 - 7,62 (m, 1H), 7,53 - 7,28 (m, 2H), 4,61 - 4,43 (m, 1H), 4,22 - 3,98 (m, 1H), 3,49 - 3,33 (m, 1H), 3,33 - 3,22 (m, 1H), 3,17 (s, 3H), 2,69 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 2,66 - 2,50 (m, 1H), 2,50 - 2,39 (m, 1H), 2,31 - 2,12 (m, 1H), 1,34 - 1,15 (m, 1H), 1,16 - 0,94 (m, 1H), 0,79 - 0,60 (m, 1H), 0,46 - 0,33 (m, 2H), 0,10 - 0,00 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -122,19; MS (ES+) 427,5 (M+1), (ES-) 425,5 (M-1), 461,4 (M+Cl).
Korak 10: Priprema ((2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (46k)
[0359] Reakcija (2R,4R)-N-(5-(-1-amino-3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (46j) (370 mg, 0,741 mmol) u tetrahidrofuranu (55 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (203 mg, 0,815 mmol) upotrebom natrijum bikarbonata (14,82 ml, 14,82 mmol, 1 N vodeni) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni ((2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (46k) (190 mg, 0,327 mmol, 44,1% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,45 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,33 - 8,24 (m, 2H), 7,95 - 7,82 (m, 2H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,16 - 7,09 (m, 3H), 4,57 (dd, J = 9,2, 3,9 Hz, 1H), 4,11 -3,97 (m, 1H), 3,85 - 3,63 (m, 2H), 3,20 (s, 3H), 2,48 - 2,38 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,35 - 2,21 (m, 2H), 2,24 - 2,03 (m, 3H), 1,11 - 0,93 (m, 2H), 0,73 - 0,51 (m, 1H), 0,41 - 0,25 (m, 2H), -0,02 - -0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,45; MS (ES+) 581,6, 583,6 (M+1), 603,6 (M+Na), 579,5 (M-1), 615,5, 617,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 92,12 [0,33, MeOH]; Analza izračunata za C30H34ClFN6O3,0,75H2O: C, 60,60; H, 6,02; N, 14,13; Pronađeno: C, 60,90; H, 6,00; N, 14,17.
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (47d)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-fenilpirolidin-1-karboksilata (47b)
[0360] Reakcija (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-fenilpirolidin-2-karboksilne kiseline (47a) (230 mg, 0,789 mmol), (R)-N-((-)-1-(3)-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e) (308 mg, 0,789 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (195 mg, 0,789 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-fenilpirolidin-1-karboksilat (47b) (255 mg, 0,385 mmol, 48,7% prinos) kao bistro ulje. MS (ES+) 663,7 (M+1).
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-fenilpirolidin-2-karboksamida (47c)
[0361] Reakcija (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-fenilpirolidin-1-karboksilata (47b) (255 mg, 0,385 mmol) u metanolu (10 ml) upotrebom 4 N HCl u dioksanu (1,282 ml, 3,85 mmol) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-fenilpirolidin-2-karboksamid (47c) (95 mg, 0,207 mmol, 53,9% prinos) kao bistro ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 10,26 (s, 1H), 8,65 - 8,57 (m, 1H), 8,54 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 7,41 -7,30 (m, 4H), 7,30 - 7,21 (m, 3H), 7,12 - 6,95 (m, 2H), 4,15 (dd, J = 9,8, 2,8 Hz, 1H), 3,56 -3,44 (m, 1H), 3,42 - 3,25 (m, 1H), 3,17 (t, J = 9,3 Hz, 1H), 2,67 - 2,52 (m, 4H), 2,42 - 2,30 (m, 3H), 1,29 - 1,03 (m, 2H), 0,80 - 0,59 (m, 1H), 0,53 - 0,34 (m, 2H), - 0,00 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -132,94; MS (ES+) 459,4 (M+1).
Korak 3: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamida (47d)
[0362] Reakcija (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-fenilpirolidin-2-karboksamida (47c) (95 mg, 0,207 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (46,4 mg, 0,186 mmol) upotrebom kalijum karbonata (71,6 mg, 0,518 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0-50%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-fenilpirolidin-1,2-dikarboksamid (47d) (68 mg, 0,111 mmol, 53,5% prinos) slobodnu bazu kao belu čvrstu supstancu, koja je konvertovana u hidrohloridnu so (72 mg, 0,105 mmol, 50,7% prinos) sa HCl (3 N u MeOH, 3 ml).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,23 - 10,13 (m, 1H), 9,79 (s, 3H), 9,26 (s, 1H), 9,01 - 8,88 (m, 2H), 8,30 (dd, J = 2,6, 0,8 Hz, 1H), 8,10 (dd, J = 7,2, 2,5 Hz, 1H), 7,97 - 7,77 (m, 4H), 7,46 - 7,19 (m, 7H), 4,95 - 4,76 (m, 1H), 4,28 - 4,02 (m, 1H), 3,63 - 3,58 (m, 1H), 2,62 -2,53 (m, 2H), 2,32 (td, J = 15,7, 12,5, 6,1 Hz, 3H), 1,31 - 1,00 (m, 2H), 0,69 (m, 1H), 0,48 -0,31 (m, 2H), 0,09 - 0,01 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO) δ -123,88; MS (ES+) 613,5 (M+1); Optička rotacija [α]D= (+) 101,4 [0,28, MeOH].
Priprema (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metilpirolidin-1,2-dikarboksamida (48d)
Korak 1: Priprema (2R,4S)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metilpirolidin-1-karboksilata (48b)
[0363] Reakcija (2R,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (48a) (145 mg, 0,632 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e) (246 mg, 0,632 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (156 mg, 0,632 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa 0-60% EtOAc u heksanu) (2R,4S)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metilpirolidin-1-karboksilat (48b) (248 mg, 0,413 mmol, 65,3% prinos) kao bistro ulje. MS (ES+) 601,7 (M+1).
Korak 2: Priprema (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metilpirolidin-2-karboksamida (48c)
[0364] Reakcija (2R,4S)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metilpirolidin-1-karboksilata (48b) (246 mg, 0,409 mmol) u metanolu (10 ml) upotrebom 4 N HCl u dioksanu (1,365 ml, 4,09 mmol) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metilpirolidin-2-karboksamid (48c) (100 mg, 0,252 mmol, 61,6% prinos) kao bistro ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 10,22 (s, 1H), 8,61 - 8,44 (m, 3H), 7,43 - 7,25 (m, 3H), 7,13 - 6,91 (m, 2H), 4,13 - 4,01 (m, 1H), 3,31 - 3,13 (m, 1H), 2,79 - 2,67 (m, 1H), 2,44 - 2,32 (m, 3H), 2,32 - 2,17 (m, 2H), 1,96 - 1,76 (m, 1H), 1,27 - 0,95 (m, 6H), 0,80 - 0,71 (m, 1H), 0,71 - 0,60 (m, 1H), 0,54 - 0,31 (m, 2H), 0,00 (s, 2H);<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -132,78; MS (ES+) 551,5 (M+1).
Korak 3: Priprema (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metilpirolidin-1,2-dikarboksamida (48d)
[0365] Reakcija (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metilpirolidin-2-karboksamida (48c) (95 mg, 0,207 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (46,4 mg, 0,186 mmol) upotrebom kalijum karbonata (71,6 mg, 0,518 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0-50%) (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metilpirolidin-1,2-dikarboksamid (48d) (68 mg, 0,111 mmol, 53,5% prinos) slobodnu bazu kao belu čvrstu supstancu, koja je konvertovana u hidrohloridnu so (72 mg, 0,105 mmol, 50,7% prinos) sa HCl (3 N u MeOH, 3 ml).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,23 - 10,13 (m, 1H), 9,79 (s, 3H), 9,26 (s, 1H), 9,01 - 8,88 (m, 2H), 8,30 (dd, J = 2,6, 0,8 Hz, 1H), 8,10 (dd, J = 7,2, 2,5 Hz, 1H), 7,97 - 7,77 (m, 4H), 7,46 - 7,19 (m, 7H), 4,95 - 4,76 (m, 1H), 4,28 - 4,02 (m, 1H), 3,63 - 3,58 (m, 1H), 2,62 -2,53 (m, 2H), 2,32 (td, J = 15,7, 12,5, 6,1 Hz, 3H), 1,31 - 1,00 (m, 2H), 0,69 (m, 1H), 0,48 -0,31 (m, 2H), 0,09 - 0,01 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -123,88; MS (ES+) 613,5 (M+1); Optička rotacija [α]D= (+) 144,4 [0,29, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metilpirolidin-1,2-dikarboksamida (49d)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metilpirolidin-1-karboksilata (49b)
[0366] Reakcija (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (49a) (90 mg, 0,393 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e) (153 mg, 0,393 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (97 mg, 0,393 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je (2R,4R)-tercbutil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metilpirolidin-1-karboksilat (49b) sirov (160 mg, 67,8%), koji je kao takav upotrebljen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. MS (ES+) 601,7 (M+1).
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metilpirolidin-2-karboksamida (49c)
[0367] Reakcija (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metilpirolidin-1-karboksilata (49b) (160 mg, 0,266 mmol) u metanolu (10 ml) upotrebom 4 N HCl u dioksanu (0,888 ml, 2,66 mmol) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metilpirolidin-2-karboksamid (49c) sirov (66 mg, 62,5% prinos), koji je kao takav upotrebljen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. MS (ES+) 419,4 (M+Na).
Korak 3: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metilpirolidin-1,2-dikarboksamida (49d)
[0368] Reakcija (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metilpirolidin-2-karboksamida (49c) (66 mg, 0,166 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (37,3 mg, 0,150 mmol) upotrebom kalijum karbonata (57,5 mg, 0,416 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0-50%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metilpirolidin-1,2-dikarboksamid (49d) slobodnu bazu kao belu čvrstu supstancu, koja je konvertovana u hidrohloridnu so (12 mg, 0,019 mmol, 11,55% prinos) sa HCl (3 N u MeOH, 3 ml);<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,99 (s, 1H), 9,38 (s, 3H), 9,14 (s, 1H), 8,75 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 8,28 (dd, J = 2,6, 0,9 Hz, 1H), 8,03 (dd, J = 7,3, 2,5 Hz, 1H), 7,87 - 7,68 (m, 2H), 7,51 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 7,38 (dd, J = 10,5, 8,8 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,60 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 3,90 - 3,74 (m, 1H), 3,10 (t, J = 9,9 Hz, 1H), 2,67 - 2,20 (m, 4H), 1,44 (m, 1H), 1,30 - 1,08 (m, 2H), 1,03 (d, J = 6,3 Hz, 3H), 0,68 (m, 1H), 0,37 (m, 2H), 0,01 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO) δ -124,26; MS (ES+) 551,5 (M+1); Optička rotacija [α]D= (+) 130,9 [0,055, MeOH].
Priprema (2R,4R)-benzil 2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-etoksipirolidin-1-karboksilata (50d)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-1-(benziloksikarbonil)-4-etoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (50b)
[0369] U rastvor (2R,4R)-1-(benziloksikarbonil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (15a) (1,14 g, 4,30 mmol) u THF (20 ml) dodat je rastvor etil 4-metilbenzensulfonata (50a) (1,721 g, 8,60 mmol) u THF (2 ml) nakon čega slede NaOH (0,688 g, 17,19 mmol) i voda (5 ml). Rezultujuća smeša je zagrevana na 55 °C preko noći i koncentrovana u vakuumu do suva. Ostatak je rastvoren u vodi (10 ml), ispran sa dihlorometanom (3 x 25 ml) i zakišeljen do pH 2 sa HCl (1,5 N). Reakciona smeša je ekstrahovana sa dihlorometanom (3 x 25 ml) i organski slojevi su kombinovani, osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije (silika gel, eluiranje sa 0-20% MeOH u hloroformu) kako bi se dobila (2R,4R)-1-(benziloksikarbonil)-4-etoksipirolidin-2-karboksilna kiselina (50b) (301 mg, 1,026 mmol, 23,88% prinos) kao bistro ulje. MS (ES+) 316,3 (M+Na).
Korak 2: Priprema (2R,4R)-benzil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-etoksipirolidin-1-karboksilata (50c)
[0370] Reakcija (2R,4R)-1-(benziloksikarbonil)-4-etoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (50b) (300 mg, 1,023 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino)-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e) (398 mg, 1,023 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (253 mg, 1,023 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je (2R,4R)-benzil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-etoksipirolidin-1-karboksilat (50c) (240 mg, 0,361 mmol, 35,3% prinos) kao bistro ulje.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,51 (d, J = 24,2 Hz, 1H), 8,49 (d, J = 4,4 Hz, 2H), 7,87 (s, 1H), 7,45 - 7,27 (m, 5H), 7,27 - 7,07 (m, 5H), 5,52 (d, J = 12,7 Hz, 1H), 5,06 (dd, J = 21,2, 3,4 Hz, 2H), 4,45 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 4,07 (s, 1H), 3,67 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 3,38 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 2,05 (s, 1H), 1,13 (s, 11H), 1,04 - 0,94 (m, 3H), 0,83 (m, 2H), 0,62 (s, 1H), 0,34 (s, 2H), -0,08 (s, 2H); MS (ES+) 665,5 (M+1).
Korak 3: (2R,4R)-benzil 2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-etoksipirolidin-1-karboksilat (50d)
[0371] Reakcija (2R,4R)-benzil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-etoksipirolidin-1-karboksilata (50c) (50 mg, 0,075 mmol) u metanolu (5 ml) upotrebom 3 N HCl u metanolu (0,15 ml, 0,451 mmol) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-benzil 2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-etoksipirolidin-1-karboksilat (50d) (24 mg, 0,043 mmol, 56,9% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,73 (d, J = 17,2 Hz, 1H), 9,64 - 9,53 (m, 6H), 8,82 (d, J= 5,4 Hz, 2H), 7,99 - 7,82 (m, 1H), 7,65 (m, 3H), 7,42 -7,32 (m, 3H), 7,29 - 7,12 (m, 3H), 5,15 - 4,97 (m, 2H), 4,47 (m, 1H), 4,09 (s, 1H), 3,71 (s, 1H), 3,39 (q, J = 7,0 Hz, 3H), 2,01 (m, 1H), 1,27 - 1,04 (m, 2H), 1,00 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 0,69 (m, 1H), 0,39 (m, 2H), 0,08 - -0,00 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -124,55; MS (ES+) 561,5 (M+1); 559,5 (M-1); Analiza izračunata za C32H37FN4O4,2HCl,2H2O: C, 57,40; H, 6,47; N, 8,37; Pronađeno: C, 57,37; H, 6,25; N, 8,32; Optička rotacija [α]D= (+) 43,6 [0,165, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-etoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (51b)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-etoksipirolidin-2-karboksamida (51a)
[0372] Debenzilacija hidrogenizacijom (2R,4R)-benzil 2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-etoksipirolidin-1-karboksilata (50d) (190 mg, 0,286 mmol) u metanolu (5 ml), upotrebom paladijuma na ugljeniku 10% (15,21 mg, 0,086 mmol) kao katalizatora u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 2 Šeme 13 dala je (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-etoksipirolidin-2-karboksamid (51a) (105 mg, 0,198 mmol, 69,2% prinos), koji je kao takav upotrebljen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. MS (ES+) 531,4 (M+1).
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-etoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (51b)
[0373] Reakcija (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-etoksipirolidin-2-karboksamida (51a) (105 mg, 0,198 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (49,2 mg, 0,198 mmol) upotrebom kalijum karbonata (68,4 mg, 0,495 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0-50%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-etoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (51b) slobodnu bazu kao belu čvrstu supstancu, koja je konvertovana u hidrohloridnu so (60 mg, 0,092 mmol, 46,4% prinos) sa HCl (3 N u MeOH, 3 ml);<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,74 (s, 4H), 9,71 - 9,68 (m, 1H), 9,28 (s, 1H), 8,97 - 8,86 (m, 2H), 8,30 (dd, J = 2,5, 0,9 Hz, 1H), 7,96 (dd, J = 7,3, 2,5 Hz, 1H), 7,90 - 7,80 (m, 4H), 7,39 (dd, J = 10,4, 8,7 Hz, 1H), 7,26 (ddd, J = 8,7, 4,4, 2,4 Hz, 1H), 4,61 (dd, J = 8,9, 4,4 Hz, 1H), 4,13 (p, J = 4,9 Hz, 1H), 3,79 (dd, J = 10,7, 5,3 Hz, 1H), 3,64 (dd, J = 10,7, 3,8 Hz, 1H), 3,46 -3,35 (m, 2H), 2,65 - 2,48 (m, 2H), 2,40 (ddd, J = 14,0, 9,0, 5,1 Hz, 1H), 2,07 - 1,98 (m, 1H), 1,34 - 1,15 (m, 1H), 1,14 - 1,02 (m, 1H), 1,01 (t, J= 7,0 Hz, 3H), 0,76 - 0,59 (m, 1H), 0,45 -0,31 (m, 2H), 0,07 - 0,00 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ - 124,72; Optička rotacija [α]D= (+) 7,209 [0,54, MeOH]; Analiza izračunata za C30H34ClFN6O3,3HCl,1,5H2O: C, 50,22; H, 5,62; Cl, 19,77; N, 11,71; Pronađeno: C, 50,55; H, 5,63; Cl, 19,51; N, 11,49.
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-propoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (52d)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-propoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (52a)
[0374] Alkilacija (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (14b) (30,5 g, 132 mmol) sa diizopropil sulfatom (33,4 ml, 203 mmol) upotrebom NaH (60% disperzija u ulju) (32,5 g, 813 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u Šemi 15 korak 1 dala je (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-propoksipirolidin-2-karboksilnu kiselinu (52a) (23 g, 84 mmol, 63,7% prinos) kao bistro ulje, koje je kao takvo upotrebljeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,41 (s, 1H), 4,23 - 4,04 (m, 1H), 4,05 - 3,93 (m, 1H), 3,62 - 3,44 (m, 1H), 3,37 - 3,22 (m, 2H), 3,23 -3,11 (m, 1H), 2,43 - 2,21 (m, 1H), 2,04 - 1,91 (m, 1H), 1,56 - 1,23 (m, 11H), 0,82 (t, J = 7,4 Hz, 3H); MS (ES-) 272,3 (M-1).
Korak 2: Priprema (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-propoksipirolidin-1-karboksilata (52b)
[0375] Reakcija (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-propoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (52a) (20 g, 73,0 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e) (26,5 g, 68,1 mmol) u tetrahidrofuranu (300 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (18,09 g, 73,2 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-propoksipirolidin-1-karboksilat (52b) (43 g, 66,7 mmol, 98% prinos), koji je kao takav upotrebljen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. MS (ES+) 667,7 (M+Na).
Korak 3: Priprema (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metilpirolidin-2-karboksamida (52c)
[0376] Reakcija (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-propoksipirolidin-1-karboksilata (52b) (43 g, 66,7 mmol) u metanolu (600 ml) upotrebom 4 N HCl u dioksanu (133 ml, 533 mmol) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metilpirolidin-2-karboksamid (52c) (24,5 g, 55,6 mmol, 83% prinos) kao žuto ulje, koje je kao takvo upotrebljeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. MS (ES+) 441,6 (M+1).
Korak 4: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-propoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (52d)
[0377] Reakcija (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metilpirolidin-2-karboksamida (52c) (24,5 g, 55,6 mmol) u tetrahidrofuranu (550 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (12,45 g, 50,1 mmol) upotrebom natrijum bikarbonata (28,0 g, 334 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa etil acetatom/MeOH (9:1) u heksanu 0-50%) nakon čega je sledila hromatografija na koloni reverzne faze (eluiranje sa metanolom u vodi 0-100%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-propoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (52d) kao slobodnu bazu, koja je konvertovana u HCl so sa 3 N HCl u MeOH (30 ml) kako bi se dobilo jedinjenje 52d (13,2 g, 39,5% prinos) hidrohloridna so kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,89 (s, 2H), 9,73 (s, 1H), 9,37 (s, 1H), 8,97 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 8,31 (dd, J = 2,5, 0,8 Hz, 1H), 8,05 - 7,91 (m, 3H), 7,90 - 7,80 (m, 2H), 7,46 - 7,22 (m, 2H), 4,68 - 4,57 (m, 1H), 4,18 - 4,06 (m, 1H), 3,81 (dd, J = 10,6, 5,4 Hz, 1H), 3,64 (dd, J = 10,5, 3,5 Hz, 1H), 3,32 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 2,65 - 2,52 (m, 2H), 2,49 -2,33 (m, 1H), 2,12 - 1,99 (m, 1H), 1,41 (q, J= 6,8 Hz, 2H), 1,30 - 1,02 (m, 2H), 0,77 (t, J= 7,4 Hz, 3H), 0,76 - 0,60 (m, 1H), 0,43 - 0,30 (m, 2H), 0,09 - -0,02 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -124,57; MS (ES+) 595,6 (M+1); Optička rotacija [α]D= (+) 87,31 [0,52, MeOH]; Analiza izračunata za C31H36ClFN6O3,2HCl,3H2O: C, 51,56; H, 6,14; Cl, 14,73; N, 11,64; Pronađeno: C, 51,25; H, 5,82; Cl, 14,94; N, 11,53.
Priprema (R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4,4-difluoropirolidin-1,2-dikarboksamida (53d)
Korak 1: Priprema (R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4,4-difluoropirolidin-1-karboksilata (53b)
[0378] Reakcija (R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4,4-difluoropirolidin-2-karboksilne kiseline (53a) (225 mg, 0,896 mmol), (R)-N-((-)-1-(3 -amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e) (349 mg, 0,896 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (221 mg, 0,896 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je (R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2fluorofenilkarbamoil)-4,4-difluoropirolidin-1-karboksilat (53b) koji je kao takav upotrebljen za sledeći korak; MS (ES+) 623,6 (M+1).
Korak 2: Priprema (R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4,4-difluoropirolidin-2-karboksamida (53c)
[0379] Reakcija (R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4,4-difluoropirolidin-1-karboksilata (53b) (243 mg, 0,39 mmol) u metanolu (10 ml) upotrebom 4 N HCl u dioksanu (1,301 ml, 3,9 mmol) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4,4-difluoropirolidin-2-karboksamid (53c) koji je kao takav upotrebljen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. MS (ES+) 441,4 (M+Na).
Korak 3: Priprema (R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4,4-difluoropirolidin-1,2-dikarboksamida (53d)
[0380] Reakcija (R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4,4-difluoropirolidin-2-karboksamida (53c) (90 mg, 0,215 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (48,1 mg, 0,194 mmol) upotrebom kalijum karbonata (74,3 mg, 0,538 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0-50%) (R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1 -(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4,4-difluoropirolidin-1,2-dikarboksamid (53d) slobodnu bazu kao belu čvrstu supstancu, koja je konvertovana u hidrohloridnu so upotrebom HCl (3 N u MeOH, 3 ml) kako bi se dobilo jedinjenje 53d (16 mg, 0,025 mmol, 11,52% prinos) hidrohloridna so kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,24 - 10,15 (m, 1H), 9,61 (s, 3H), 9,51 (s, 1H), 8,84 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 8,32 (dd, J = 2,1, 1,3 Hz, 1H), 8,01 (dd, J = 7,3, 2,5 Hz, 1H), 7,84 (dd, J = 1,7, 1,1 Hz, 2H), 7,70 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 7,40 (dd, J = 10,4, 8,8 Hz, 1H), 7,22 (q, J = 5,4, 4,6 Hz, 1H), 4,92 (dd, J = 9,0, 5,1 Hz, 1H), 4,11 (dq, J = 26,3, 12,5 Hz, 2H), 3,05 - 2,78 (m, 1H), 2,59 - 2,54 (m, 2H), 2,46 - 2,41 (m, 1H), 1,14 (m, 2H), 0,81 - 0,55 (m, 1H), 0,47 - 0,31 (m, 2H), 0,02 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -97,03, -123,95; MS (ES+) 573,4 (M+1); Optička rotacija [α]D= (+) 72,3 [0,155, MeOH]; Analiza izračunata za C28H28ClF3N6O2,4HCl,2H2O: C, 44,55; H, 4,81; N, 11,13; Pronađeno: C, 44,49; H, 4,92; N, 11,07.
Priprema (2R,4R)-N2-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksi-4-(trifluorometil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (54g)
Korak 1: Priprema (R)-1-terc-butil 2-metil 4-oksopirolidin-1,2-dikarboksilata (54b)
[0381] Oksidacija (2R,4R)-1-terc-butil 2-metil 4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksilata (54a) (9,5 g, 38,7 mmol) u anhidrovanom DCM (50 ml) upotrebom trihloroizocijanurne kiseline (9,45 g, 40,7 mmol) i TEMPO (0,303 g, 1,937 mmol) u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 1 Šeme 29 dala je (A)-1-terc-butil 2-metil 4-oksopirolidin-1,2-dikarboksilat (54b) (9,197 g, 98% prinos) kao žuto ulje.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 4,70 - 4,56 (m, 1H), 3,91 - 3,75 (m, 1H), 3,68 (m, 4H), 3,19 - 3,01 (m, 1H), 2,67 - 2,50 (m, 1H), 1,39 (2s, 9H, rotameri).
Korak 2: Priprema (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (54c)
[0382] U rastvor (R)-1-terc-butil 2-metil 4-oksopirolidin-1,2-dikarboksilata (54b) (3,5 g, 14,39 mmol) u THF (100 ml) koji je ohlađen na 0 °C dodati su trimetil(trifluorometil)silan (2,189 g, 15,40 mmol), TBAF (0,113 g, 0,432 mmol) i mešano je na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena sa zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (75 ml), mešana tokom 20 min, dodat je tetrabutilamonijum fluorid (6,02 g, 23,02 mmol) i mešano je na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Organski sloj je odvojen i vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 100 ml). Kombinovane organske faze su isprane vodom, rastvorom soli, osušene iznad anhidrovanog MgSO4, filtrirane i koncentrovane u vakuumu do suva. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije (silika gel, eluiranje sa 0-40% etil acetatom u heksanima) kako bi se dobio (2R,4R)-1-terc-butil 2-metil 4-hidroksi-4-(trifluorometil)pirolidin-1,2-dikarboksilat (54c) (2,818 g, 9,0 mmol, 62,5% prinos) kao bistro ulje.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 6,59 (s, 1H), 4,70 - 4,38 (m, 1H), 3,76 - 3,61 (m, 3H, rotameri), 3,63 - 3,47 (m, 2H), 2,66 - 2,53 (m, 1H), 2,11 (dd, J = 13,2, 5,4 Hz, 1H), 1,47 -1,27 (m, 9H, rotameri); MS (ES+) 336,3 (M+Na).
Korak 3: Priprema (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (54d)
[0383] U rastvor (2R,4R)-1-terc-butil 2-metil 4-hidroksi-4-(trifluorometil)pirolidin-1,2-dikarboksilata (54c) (850 mg, 2,71 mmol) u THF/H2O (1:1, 20 ml) dodat je litijum hidroksid (325 mg, 13,57 mmol) i zagrevano je na refluksu tokom 1 h. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana u vakuumu kako bi se dobila (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-karboksilna kiselina (54d) (842 mg, 2,81 mmol, 104% prinos), koja je kao takva upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. MS (ES-), 298,3 (M-1).
Korak 4: Priprema (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksi-4-(trifluorometil)pirolidin-1-karboksilata (54e)
[0384] Reakcija (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (54d) (842 mg, 2,82 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e) (850 mg, 2,71 mmol) u tetrahidrofuranu (20 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (695 mg, 2,82 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksi-4-(trifluorometil)pirolidin-1-karboksilat (54e) (420 mg, 23,08% prinos); MS (E+), 693,4 (M+23).
Korak 5: Priprema (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-karboksamida (54f)
[0385] Reakcija (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksi-4-(trifluorometil)pirolidin-1-karboksilata (54e) (420 mg, 0,626 mmol) u etanolu (20 ml) upotrebom 4 N HCl u dioksanu (1,565 ml, 6,26 mmol) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-karboksamid (54f) (113 mg, 38,7% prinos). MS (E+), 467,4 (M+1).
Korak 6: Priprema (2R,4R)-N2-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksi-4-(trifluorometil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (54g)
[0386] Reakcija (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-karboksamida (54f) (113 mg, 242 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (60,2 mg, 242 mmol) upotrebom kalijum karbonata (100 mg, 727 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0-50%), nakon čega je sledila hromatografija na koloni reverzne faze (C-18 kolona, eluiranje sa 0-100% MeOH u vodi) (2R,4R)-N2-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksi-4-(trifluorometil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (54g) kao slobodnu bazu, koja je konvertovana u HCl so upotrebom HCl (3 N u MeOH, 2 ml) kako bi se dobilo jedinjenje 54g hidrohloridna so (42 mg, 28% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,00 (s, 1H), 9,69 (s, 3H), 9,46 (s, 1H), 9,00 - 8,79 (m, 2H), 8,31 (dd, J = 2,4, 1,0 Hz, 1H), 8,06 (dd, J = 7,2, 2,5 Hz, 1H), 7,92 - 7,74 (m, 4H), 7,39 (dd, J = 10,1, 8,5 Hz, 1H), 7,29 - 7,04 (m, 2H), 4,84 (dd, J = 9,1, 4,6 Hz, 1H), 4,05 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,77 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 2,65 (m, 1H), 2,51 (m, 2H), 2,26 - 2,14 (m, 1H), 1,23 (m, 1H), 1,08 (m, 1H), 0,67 (m, 1H), 0,36 (m, 2H), 0,02 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO) δ -75,03, -80,20, - 124,32, MS (ES+): 521,3 (M+1); 519,3 (M-1).
Priprema (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(metilsulfonamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-etoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (55a)
[0387] U rastvor (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-etoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (51b) (240 mg, 0,413 mmol) na 0 °C u dihlorometanu (10 ml) dodati su piridin (163 mg, 2,065 mmol), anhidrid metansulfonske kiseline (144 mg, 0,826 mmol) i mešano je na sobnoj temperaturi preko noći. Dodati su dopunski piridin (98 mg, 1,239 mmol) i anhidrid metansulfonske kiseline (71,9 mg, 0,413 mmol) i smeša je mešana tokom 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena vodom (10 ml) i ekstrahovana sa DCM (3 x 20 ml). Organski slojevi su kombinovani, osušeni, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa 0-40% CMA 80 u CHCl3) kako bi se dobio (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(metilsulfonamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-etoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (55a) (158 mg, 0,240 mmol, 58,0% prinos) slobodna baza kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,52 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,51 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 8,29 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,92 - 7,78 (m, 4H), 7,30 - 7,18 (m, 3H), 7,14 - 7,03 (m, 1H), 4,59 (dd, J = 9,0, 3,8 Hz, 1H), 4,12 (s, 1H), 3,76 (dd, J = 10,8, 5,1 Hz, 1H), 3,65 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 3,40 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,40 - 2,35 (m, 1H), 2,27 (s, 3H), 2,19 - 2,06 (m, 1H), 1,34 - 1,20 (m, 2H), 0,99 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 0,91 - 0,78 (m, 2H), 0,63 - 0,44 (m, 1H), 0,37 - 0,21 (m, 2H), -0,09 - -0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,31; MS (ES+): 659,3 (M+1).
Slobodna baza (132 mg, 0,20 mmol) je konvertovana u hidrohloridnu so u MeOH (10 ml) upotrebom HCl (3 N u MeOH) (0,03 ml, 1,001 mmol) kako bi se dobila (136 mg, 0,196 mmol, 98% prinos) hidrohloridna so jedinjenja 55a kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,62 (s, 1H), 8,87 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 8,30 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,96 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 7,93 - 7,79 (m, 2H), 7,34 - 7,21 (m, 1H), 7,16 - 7,05 (m, 1H), 4,61 (dd, J = 8,9, 3,9 Hz, 1H), 4,19 - 4,06 (m, 2H), 3,84 - 3,72 (m, 2H), 3,66 (dd, J = 10,7, 3,2 Hz, 2H), 3,41 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,77 - 2,62 (m, 1H), 2,46 - 2,29 (m, 5H), 2,16 - 1,99 (m, 1H), 1,00 (t, J = 7,0 Hz, 4H), 0,88 - 0,69 (m, 1H), 0,64 - 0,50 (m, 1H), 0,32 (d, J = 7,9 Hz, 2H), -0,01 - -0,15 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO) δ -125,42; MS (ES+): 659,3 (M+1); Optička rotacija [α]D= (+) 76,47 [0,17, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-acetamido-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-etoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (56a)
[0388] Reakcija (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-etoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (51b) (200 mg, 0,344 mmol) na 0 °C u dihlorometanu upotrebom piridina i anhidrida sirćetne kiseline kao što je saopšteno u Šemi 55 dala je (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-acetamido-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-etoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (56a) (156 mg, 72,7% prinos) slobodnu bazu kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,45 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,47 - 8,40 (m, 2H), 8,32 - 8,24 (m, 2H), 7,94 - 7,82 (m, 2H), 7,80 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,29 - 7,22 (m, 2H), 7,20 - 7,06 (m, 2H), 4,58 (dd, J = 9,0, 3,9 Hz, 1H), 4,17 - 4,06 (m, 1H), 3,82 - 3,70 (m, 1H), 3,70 - 3,60 (m, 1H), 3,49 - 3,30 (m, 2H), 2,60 - 2,50 (m, 1H), 2,42 - 2,26 (m, 1H), 2,17 - 2,03 (m, 1H), 1,90 (s, 3H), 1,30 - 1,20 (m, 2H), 1,03 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 0,91 - 0,78 (m, 1H), 0,70 - 0,52 (m, 1H), 0,38 - 0,27 (m, 2H), -0,04 - -0,18 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,98; Optička rotacija [α]D= (+) 70,59 [0,255, MeOH]. Slobodna baza je konvertovana u hidrohloridnu so u metanolu (10 ml) upotrebom HCl (3 N u MeOH) (2,5 ml, 82 mmol) kako bi se dobila hidrohloridna so jedinjenja 56a (148 mg, 0,224 mmol, 98% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,58 (s, 1H), 9,28 (s, 1H), 8,83 - 8,69 (m, 3H), 8,30 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,95 (m, 3H), 7,92 - 7,79 (m, 2H), 7,33 - 7,17 (m, 2H), 4,60 (dd, J = 9,0, 4,3 Hz, 1H), 4,18 -4,08 (m, 2H), 3,84 - 3,72 (m, 1H), 3,66 (dd, J = 10,7, 3,2 Hz, 1H), 3,42 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,53 (m, 2H), 2,45 - 2,31 (m, 1H), 2,11 - 2,01 (m, 1H), 1,94 (s, 3H), 1,03 (t, J = 7,0 Hz, 5H), 0,71 - 0,57 (m, 1H), 0,40 - 0,30 (m, 2H), -0,03 - -0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,67; MS (ES+): 623,3 (M+1); (ES-) 621,3 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 70,59 [0,255, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksi-4-(trifluorometil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (57d)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metoksi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (57a)
[0389] Alkilacija (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (54d) (2,26 g, 7,55 mmol) u THF (50 ml) sa dimetil sulfatom (1,905 g, 15,10 mmol) upotrebom natrijum hidrida (60% disperzija u mineralnom ulju, 1,812 g, 45,3 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u Šemi 15 korak 1 dala je (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metoksi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-karboksilnu kiselinu (57a) (1,6 g, 5,11 mmol, 67,6% prinos) kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,84 (s, 1H), 4,35 (t, J = 9,3 Hz, 1H), 3,73 - 3,53 (m, 2H), 3,36 (s, 3H), 2,71 - 2,51 (m, 1H), 2,38 - 2,24 (m, 1H), 1,39 (2s, 9H, rotameri).
Korak 2: Priprema (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksi-4-(trifluorometil)pirolidin-1-karboksilata (57b)
[0390] Reakcija (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metoksi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (57a) (400 mg, 1,277 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e) (497 mg, 1,277 mmol) u tetrahidrofuranu (20 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (316 mg, 1,277 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksi-4-(trifluorometil)pirolidin-1-karboksilat (57b) (640 mg, 0,935 mmol, 73,2% prinos) kao prljavobelu čvrstu supstancu.
Korak 3: Priprema (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-karboksamida (57c)
[0391] Reakcija (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksi-4-(trifluorometil)pirolidin-1-karboksilata (57b) (640 mg, 0,935 mmol) u etanolu (200 ml) upotrebom 3 N HCl u metanolu (16 ml) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-karboksamid (57c) (340 mg, 0,708 mmol, 76% prinos) kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,92 (s, 1H), 8,47 - 8,38 (m, 2H), 8,20 - 8,11 (m, 1H), 7,39 - 7,31 (m, 2H), 7,20 - 7,11 (m, 2H), 3,93 (q, J = 6,9 Hz, 1H), 3,70 - 3,56 (m, 1H), 3,24 (s, 4H), 3,23 - 3,09 (m, 1H), 2,36 - 2,25 (m, 4H), 2,25 - 2,16 (m, 2H), 1,11 - 1,02 (m, 2H), 0,69 - 0,57 (m, 1H), 0,39 - 0,30 (m, 2H), -0,01 - - 0,12 (m, 2H).
Korak 4: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksi-4-(trifluorometil)pirolidin-1,2-dikarboksamida (57d)
[0392] Reakcija (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-karboksamida (57c) (340 mg, 0,708 mmol) u tetrahidrofuranu/vodi (60 ml, 5:1) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (167 mg, 0,672 mmol) upotrebom kalijum karbonata (489 mg, 3,54 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0-25%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksi-4-(trifluorometil)pirolidin-1,2-dikarboksamid (57d) (35 mg, 0,055 mmol, 8,85% prinos) kao slobodnu bazu, koja je konvertovana u hidrohloridnu so u MeOH (10 ml) upotrebom HCl (3 N u MeOH) (0,367 ml, 1,102 mmol) kako bi se dobila hidrohloridna so jedinjenja 57d (34 mg, 87% prinos) kao čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,00 (s, 1H), 9,67 (s, 3H), 9,45 (s, 1H), 8,84 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 8,37 - 8,21 (m, 1H), 7,92 -7,79 (m, 3H), 7,71 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 7,43 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,41 - 7,35 (m, 1H), 7,34 -7,23 (m, 1H), 4,85 (dd, J = 9,2, 3,8 Hz, 1H), 4,02 (q, J = 12,1 Hz, 2H), 3,31 (s, 3H), 2,75 -2,55 (m, 1H), 2,51 (m, 2H), 2,47 - 2,30 (m, 1H), 1,30 - 0,99 (m, 2H), 0,68 (m, 1H), 0,43 -0,29 (m, 2H), 0,10 - -0,05 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -75,82, -123,56; Optička rotacija [α]D= (+) 56,0 [0,05, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-(3-cijanofenil)(ciklopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenil)-4-etoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (58j)
Korak 1: Priprema (-)-N-(3-cijanobenziliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (58a)
[0393] U mešani rastvor 3-formilbenzonitrila (45,4 g, 347 mmol) u tetrahidrofuranu (460 ml) dodati su (R)-2,4,6-triizopropilbenzensulfinamid (35 g, 289 mmol), tetraizopropoksititanijum (173 ml, 578 mmol) i zagrevano je na refluksu tokom 10 h. Napredovanje je izvedeno kao što je saopšteno u koraku 1 Šeme 1 kako bi se dobio posle hromatografije na koloni (silika gel 1,5 kg, eluiranje sa 20% etil acetatom u heksanu) (-)-N-(3-cijanobenziliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid (58a) (37,4 g, 160 mmol, 55,3% prinos) kao bezbojna čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,63 (s, 1H), 8,42 (dd, J = 1,9, 1,3 Hz, 1H), 8,28 (dt, J = 7,9, 1,4 Hz, 1H), 8,07 (dt, J = 7,7, 1,4 Hz, 1H), 7,76 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 1,21 (s, 9H); MS (ES+) 257,2 (M+Na); Optička rotacija [α]D= (-) 83,21 [2,55, CHCl3].
Korak 2: Priprema (R)-N-((3-amino-4-fluorofenil)(3-cijanofenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (58b)
[0394] Jedinjenje 58b je pripremljeno od (-)-N-(3-cijanobenziliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (58a) (72 g, 307 mmol) i 3-(bis(trimetilsilil)amino)-4-fluorofenil)magnezijum bromida (1c) (430 ml, 430 mmol) kao što je opisano u koraku 4 Šeme 1 kako bi se dobio (R)-N-((3-amino-4-fluorofenil)(3-cijanofenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (58b) (47,32 g, 137 mmol, 44,6% prinos) kao gusto žuto ulje.
Korak 3: Priprema 3-(amino(3-amino-4-fluorofenil)metil)benzonitrila (58c)
[0395] U mešani rastvor (R)-N-((3-amino-4-fluorofenil)(3-cijanofenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (58b) (238,82 g, 691 mmol, odnos dijastereoizomera 55/45) u MTBE (1200 ml) dodat je hlorovodonik u 1,4-dioksanu (363 ml, 1452 mmol) i mešano je na sobnoj temperaturi tokom 7 h. Dodat je dopunski hlorovodonik u dioksanu (346 ml, 1383 mmol) i mešano je dok sav početni materijal nije nestao (24 h). Dobijena čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, isprana sa MTBE (2 x 250 ml), osušena na vazduhu kako bi se dobio 3-(amino(3-amino-4-fluorofenil)metil)benzonitril (58c) kao HCl so (blago higroskopna);<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,39 - 9,10 (m, 3H), 7,57 - 7,49 (m, 2H), 7,45 - 7,34 (m, 3H), 7,26 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,15 (dd, J = 8,0, 2,0 Hz, 1H), 5,58 (d, J= 5,5 Hz, 1H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO) δ -129,75; MS (ES-) 240,2 (M-1). Prethodno navedena čvrsta supstanca je rastvorena u vodi (500 ml), zalužena dodavanjem NaOH (3 N, 922 ml, 2765 mmol). Smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 1000 ml). Organski slojevi su kombinovani, isprani rastvorom soli, osušeni, filtrirani i koncentrovani u vakuumu kako bi se dobio racemski 3-(amino(3-amino-4-fluorofenil)metil)benzonitril (58c) (194 g, 804 mmol, 116% prinos) slobodna baza kao braon ulje;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,38 - 7,35 (m, 2H), 7,30 -7,24 (m, 2H), 6,86 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,79 (dd, J = 9,0, 2,2 Hz, 1H), 6,55 (ddd, J = 8,3, 4,5, 2,2 Hz, 1H), 5,03 (s, 2H), 4,94 (s, 1H), 2,13 (s, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO) δ -138,23.
Korak 4: Priprema (+)-3-(amino(3-amino-4-fluorofenil)metil)benzonitrila (58d)
[0396] U rastvor racemskog 3-(amino(3-amino-4-fluorofenil)metil)benzonitrila (58c) (odnos 55/45 za dva dijastereomera, 141,38 g, 586 mmol) u 85% terc-butanolu (5600 ml, napravljen od terc-butanola i vode) dodata je D (-)-vinska kiselina (88 g, 586 mmol) i zagrejano je do 80 °C. Bistrom rastvoru je omogućeno da se ohladi na 29,8 °C (8 h). U ovom trenutku dobijeni kristali su sakupljeni filtracijom, isprani sa 200 ml 85% terc-butanola, osušeni u vakuumu kako bi se dobio (+)-3-(amino(3-amino-4-fluorofenil)metil)benzonitril (58d) (36,4 g, 93 mmol, 15,87% sveukupni prinos) kao 2,3-dihidroksisukcinatna so; MS (ES+) 225,2 (M+1); Hiralna HPLC čistoća 96,077% ee. (+)-3-(amino(3-amino-4-fluorofenil)metil)benzonitril (58d) 2,3-dihidroksisukcinatna so (18 g, 46,0 mmol) u 85% terc-butanolu (388 ml) je zagrejana do 80 °C (unutrašnja temperatura) dok nije postala homogena. Smeši je omogućeno da dođe do sobne temperature i formirani beli kristali su sakupljeni filtracijom i osušeni na vazduhu kako bi se dobio čist (+)-3-(amino(3-amino-4-fluorofenil)metil)benzonitril (58d) (16,7 g, 42,7 mmol, 93% prinos) 2,3-dihidroksisukcinatna so kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,90 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 7,78 (dt, J = 7,6, 1,4 Hz, 1H), 7,72 (dt, J = 8,0, 1,4 Hz, 1H), 7,59 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,99 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,74 (dd, J = 8,7, 2,3 Hz, 1H), 6,59 (ddd, J = 8,4, 4,4, 2,3 Hz, 1H), 5,34 (s, 1H), 5,24 (s, 2H), 4,02 (s, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -135,95; MS (ES-) 240,2 (M-1); Hiralna HPLC čistoća >99,99%; Optička rotacija [α]D= (+) 0,59 [1,025, MeOH].
Korak 5: Priprema (+)-3-((ciklopropilmetilamino)(3-(ciklopropilmetilamino)-4-fluorofenil)metil)benzonitrila (58e) i (+)-3-((3-amino-4-fluorofenil)(ciklopropilmetilamino)metil)benzonitrila (58f)
[0397] U mešani rastvor (+)-3-(amino(3-amino-4-fluorofenil)metil)benzonitrila (58d) (8,321 g, 34,5 mmol, koji je konvertovan u slobodnu bazu upotrebom vodenog rastvora NaOH i ekstrahovanjem sa etil acetatom) u MeOH (20 ml) dodat je ciklopropankarboksaldehid (3,25 ml, 43,1 mmol) na 0 °C i mešano je tokom 30 min. Ovom je dodat natrijum borohidrid (2,61 g, 69,0 mmol) i mešano je na 0 °C tokom 1 h. Reakcija je koncentrovana u vakuumu kako bi se uklonio metanol i ostatak je rastvoren u etil acetatu (200 ml), ispran vodom (2 x 50 ml), rastvorom soli (50 ml), osušen i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 120 g, eluiranje sa etil acetatom u heksanima 0-100%) kako bi se dobio (+)-3-((ciklopropilmetilamino)(3-(ciklopropilmetilamino)-4-fluorofenil)metil)benzonitril (58e) (1,087 g, 3,11 mmol, 9,02% prinos) kao bezbojni sirup;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,88 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,75 (dt, J = 7,9, 1,5 Hz, 1H), 7,64 (dt, J = 7,7, 1,4 Hz, 1H), 7,48 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 6,90 (dd, J = 11,9, 8,2 Hz, 1H), 6,84 (dd, J = 8,9, 2,1 Hz, 1H), 6,57 (ddd, J = 8,2, 4,5, 2,0 Hz, 1H), 5,34 (td, J = 6,0, 2,4 Hz, 1H), 4,81 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 2,96 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 2,59 (m, 1H), 2,27 (m, 2H), 1,03 (m, 1H), 0,98 - 0,84 (m, 1H), 0,40 (m, 4H), 0,26 - 0,17 (m, 2H), 0,05 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,04; MS (ES-) 348,4 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 17,96 [0,245, MeOH]. Nakon toga sledi (+)-3-((3-amino-4-fluorofenil)(ciklopropilmetilamino)metil)benzonitril (58f) (7,891 g, 26,7 mmol, 77% prinos) kao bezbojni sirup;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,84 (t, J= 1,6 Hz, 1H), 7,71 (dt, J = 7,9, 1,5 Hz, 1H), 7,68 - 7,63 (m, 1H), 7,49 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 6,88 (dd, J= 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,81 (dd, J = 9,0, 2,2 Hz, 1H), 6,56 (ddd, J = 8,3, 4,5, 2,1 Hz, 1H), 5,08 (s, 2H), 4,76 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 2,48 (m, 1H), 2,26 (m, 2H), 0,91 (m, 1H), 0,42 - 0,34 (m, 2H), 0,09 - 0,01 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,18; MS (ES+) 296,3 (M+1), (ES-) 294,3 (M- 1); Optička rotacija [α]D= (+) 22,05 [0,88, CHCl3].
Korak 6: Priprema (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-etoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (58g)
[0398] Alkilacija (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (14b) (26 g, 112 mmol) u THF (600 ml) sa dietil sulfatom (34,7 g, 225 mmol) upotrebom natrijum hidrida (60% disperzija u mineralnom ulju, 27,0 g, 675 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u Šemi 15 korak 1 dala je (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-etoksipirolidin-2-karboksilnu kiselinu (58g) (21,98 g, 85 mmol, 75% prinos) kao belu polučvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,45 (s, 1H), 4,20 - 4,05 (m, 1H), 4,00 (m, 1H), 3,61 - 3,47 (m, 1H), 3,47 - 3,27 (m, 1H), 3,23 - 3,10 (m, 1H), 2,44 - 2,21 (m, 1H), 2,02 - 1,85 (m, 2H), 1,39, 1,34 (2s, 9H, rotameri), 1,14 - 0,93 (m, 3H); MS (ES+) 282,3 (M+Na); 258,3 (M-1).
Korak 7: Priprema (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-cijanofenil)(ciklopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-etoksipirolidin-1-karboksilata (58h)
[0399] Reakcija (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-etoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (58g) (676 mg, 2,61 mmol), (+)-3-((3-amino-4-fluorofenil) (ciklopropilmetilamino)metil)benzonitrila (58f) (770 mg, 2,61 mmol) u tetrahidrofuranu (20 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (645 mg, 2,61 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je (2R,4R)-tercbutil 2-(5-(3-cijanofenil)(ciklopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-etoksipirolidin-1-karboksilat (58h) (1,21 g, 86% prinos) kao belu čvrstu supstancu, koja je kao takva upotrebljena za sledeći korak.
Korak 8: Priprema (2R,4R)-N-(5-(3-cijanofenil)(ciklopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenil)-4-etoksipirolidin-2-karboksamida (58i)
[0400] Reakcija (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-cijanofenil)(ciklopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-etoksipirolidin-1-karboksilata (58h) (590 mg, 1,099 mmol) u metanolu (20 ml) upotrebom 3 N HCl u metanolu (1,832 ml, 5,50 mmol) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-N-(5-(3-cijanofenil)(ciklopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenil)-4-etoksipirolidin-2-karboksamid (58i) (220 mg, 45,8% prinos) kao bistro ulje.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,09 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 8,34 - 8,21 (m, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,77 - 7,67 (m, 1H), 7,66 (m, 1H), 7,49 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,23 - 7,09 (m, 2H), 4,90 (s, 1H), 3,99 - 3,87 (m, 1H), 3,73 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 3,29 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 3,02 (dd, J = 10,5, 4,0 Hz, 1H), 2,86 (dd, J = 11,0, 2,0 Hz, 1H), 2,62 (s, 1H), 2,26 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 2,13 - 2,01 (m, 3H), 0,88 (m, 4H), 0,43 - 0,28 (m, 2H), 0,12 - -0,00 (m, 2H); MS (E+) 437,3 (M+1).
Korak 9: Priprema (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-(3-cijanofenil)(ciklopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenil)-4-etoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (58j)
[0401] Reakcija (2R,4R)-N-(5-(3-cijanofenil)(ciklopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenil)-4-etoksipirolidin-2-karboksamida (58i) (183 mg, 0,419 mmol) u tetrahidrofuranu/vodi (10 ml, 5:1) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (94 mg, 0,377 mmol) upotrebom natrijum bikarbonata (264 mg, 3,14 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0-40%) (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+) -(3-cijanofenil)(ciklopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenil)-4-etoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (58j) (95 mg, 0,161 mmol, 43,6% prinos) slobodnu bazu kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,45 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,30 (dd, J = 2,6, 0,7 Hz, 1H), 7,93 - 7,84 (m, 3H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,75 - 7,68 (m, 1H), 7,66 (dt, J = 7,6, 1,3 Hz, 1H), 7,49 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,26 - 7,12 (m, 2H), 4,89 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 4,58 (dd, J = 9,0, 4,0 Hz, 1H), 4,17 - 4,06 (m, 1H), 3,81 - 3,71 (m, 1H), 3,71 - 3,59 (m, 1H), 3,41 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,66 - 2,57 (m, 1H), 2,25 (m, 2H), 2,16 - 2,04 (m, 1H), 1,04 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 0,95 - 0,82 (m, 1H), 0,41 - 0,32 (m, 2H), 0,07 - 0,01 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO) δ -127,31; MS (ES+) 591,3 (M+1). Slobodna baza jedinjenja 58j (83 mg, 0,140 mmol) konvertovana je u hidrohloridnu so u MeOH (5 ml) upotrebom HCl (3 N u MeOH) (0,234 ml, 0,14 mmol) kako bi se dobila hidrohloridna so jedinjenja 58j (80 mg, 91% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,42 (2s, 2H), 9,70 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,30 (d, J = 11,8 Hz, 2H), 8,18 - 7,99 (m, 2H), 7,99 - 7,81 (m, 3H), 7,65 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,39 (t, J = 9,4 Hz, 1H), 6,68 (s, 2H), 5,77 (s, 1H), 4,70 - 4,55 (m, 1H), 4,15 (s, 1H), 3,90 - 3,75 (m, 1H), 3,71 - 3,55 (m, 1H), 3,42 (q, J = 6,5 Hz, 2H), 2,71 (d, J = 4,1 Hz, 2H), 2,47 - 2,35 (m, 1H), 2,06 (m, 1H), 1,28 - 1,10 (m, 1H), 1,03 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 0,62-0,50 (m, 2H), 0,36-0,25 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO) δ -124,07; MS (ES+) 591,3 (M+1); Analiza izračunata za C31H32ClFN6O3,1,7HCl,2H2O: C, 54,03; H, 5,51; Cl, 13,89; N, 12,20; Pronađeno: C, 53,71; H, 5,64; Cl, 13,58; N, 11,88; Optička rotacija [α]D= (+) 73,14 [0,175, MeOH].
Priprema (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-ciklopropil-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (59d)
Korak 1: Priprema (R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-oksopirolidin-1-karboksilata (59a)
[0402] Reakcija (R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-oksopirolidin-2-karboksilne kiseline (29a) (1,5 g, 6,54 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino)-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e) (2,55 g, 6,54 mmol) u tetrahidrofuranu (50 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (1,651 g, 6,54 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je (R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-oksopirolidin-1-karboksilat (59a) (1,215 g, 2,022 mmol, 30,9% prinos) kao jedinjenje svetlokrem boje;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,08 (s, 1H), 8,57 - 8,45 (m, 2H), 8,05 -7,86 (m, 1H), 7,35 - 7,13 (m, 4H), 5,52 (s, 1H), 5,01 - 4,78 (m, 1H), 3,88 - 3,71 (m, 2H), 3,17 - 2,99 (m, 1H), 2,68 - 2,55 (m, 2H), 2,49 - 2,39 (m, 1H), 1,38 (2s, 9H, rotameri), 1,29 - 1,17 (m, 1H), 1,14 (s, 9H), 1,00 - 0,80 (m, 1H), 0,72 - 0,56 (m, 1H), 0,42 - 0,28 (m, 2H), -0,03 - -0,09 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ - 126,64, -126,84 (rotameri).
Korak 2: Priprema (2R,4S)-terc-butil 4-ciklopropil-2-(5-((S)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata (59b)
[0403] U suspenziju cerijum (III) hlorida (2,462 g, 9,99 mmol) u tetrahidrofuranu (40 ml) koja je ohlađena na -78 °C dodavan je kap po kap ciklopropilmagnezijum bromid (0,5 M rastvor u THF, 18,64 ml, 9,32 mmol) održavajući unutrašnju temperaturu ispod -70 °C. Reakcija je mešana na -78 °C tokom 30 min, nakon čega je sledilo dodavanje kap po kap rastvora (R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-oksopirolidin-1-karboksilata (59a) (1 g, 1,665 mmol) u THF održavajući unutrašnju temperaturu ispod -70 °C tokom dodavanja. Reakciona smeša je zagrevana do 0 °C tokom 2 h, razblažena sa etil acetatom (50 ml) i filtrirana kako bi se uklonio nesolubilni materijal. Filtrat je razblažen vodom i organski sloj je odvojen, ispran rastvorom soli, osušen, filtriran i koncentrovan u vakuumu kako bi se dobio (2R,4S)-terc-butil 4-ciklopropil-2-(5-((S)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilat (59b) koji je kao takav upotrebljen u sledećem koraku bez prečišćavanja.
Korak 3: Priprema (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-ciklopropil-4-hidroksipirolidin-2-karboksamida (59c)
[0404] Reakcija sirovog (2R,4S)-terc-butil 4-ciklopropil-2-(5-((S)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata (59b) koji je dobijen iz prethodno navedenog koraka 2 u metanolu (10 ml) upotrebom 3 N HCl u metanolu (15 ml) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa 0-60% CMA 80 u CHCl3) (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-ciklopropil-4-hidroksipirolidin-2-karboksamid (59c) (163 mg, 22,33% prinos za dva koraka), MS (439,5, M+1).
Korak 4: Priprema (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-ciklopropil-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (59d)
[0405] Reakcija (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-ciklopropil-4-hidroksipirolidin-2-karboksamida (59c) (160 mg, 0,365 mmol) u tetrahidrofuranu/vodi (10 ml, 5:1) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (82 mg, 0,328 mmol) upotrebom natrijum hidrogenkarbonata (184 mg, 2,189 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa 9:1 etil acetatom/metanolom u heksanu 0-50%) (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-ciklopropil-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (59d) kao slobodnu bazu koja je konvertovana u hidrohloridnu so (3 N HCl u MeOH) kako bi se dobilo jedinjenje 59d (25 mg, 0,042 mmol, 12,84% prinos) hidrohloridna so kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,94 (s, 1H), 9,83 (s, 2H), 9,31 (s, 1H), 8,96 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 8,31 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,99 - 7,88 (m, 2H), 7,88 - 7,76 (m, 2H), 7,46 - 7,32 (m, 1H), 4,68 - 4,60 (m, 3H), 3,63 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 3,50 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 2,57 (m, 2H), 2,28 (m, 1H), 1,95 (m, 1H), 1,32 - 1,19 (m, 1H), 1,15 - 0,94 (m, 2H), 0,82 - 0,61 (m, 1H), 0,47 - 0,20 (m, 5H), 0,13 - -0,02 (m, 4H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO) δ -124,96; MS (ES+): 593,6 (M+1); Optička rotacija [α]D= (+) 102,6 [0,15, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((R)-(3-cijanofenil)(ciklopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (60a)
[0406] Reakcija (2R,4R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (1o) (0,14 g, 0,5 mmol), (+)-3-((3-amino-4-fluorofenil)(ciklopropilmetilamino)metil) benzonitrila (58f) (0,15 g, 0,5 mmol) u tetrahidrofuranu (5 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (0,12 g, 0,5 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije (silika gel 24 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 30%) (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((R)-(3-cijanofenil)(ciklopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (60a) (96 mg, 34% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,65 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,69 (m 2H), 7,58 - 7,45 (m, 2H), 7,30 - 7,24 (m, 2H), 7,20 (m, 3H), 5,31 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,91 (s, 1H), 4,51 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,34 (q, J = 4,8 Hz, 1H), 3,69 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 2,44 - 2,32 (m, 1H), 2,27 (s, 2H), 1,90 (m, 1H), 1,03 - 0,78 (m, 1H), 0,49 - 0,29 (m, 2H), 0,10 -0,02 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,01; MS (ES+) 562,4 (M+1), 584,4 (M+Na), (ES-) 596,5, 598,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 83,49 [0,355, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (61b)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (61a)
[0407] Reakcija (2R,4R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (1o) (0,28 g, 1,0 mmol), (S)-N-((+)-1-(3)-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (31e) (0,39 g, 1,0 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (0,25 g, 1,0 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije (silika gel 24 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 30%) (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (61a) (0,43 g, 65%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,83 (s, 1H), 8,78 - 8,64 (m, 2H), 8,41 - 8,27 (m, 1H), 7,99 - 7,86 (m, 1H), 7,80 - 7,67 (m, 2H), 7,52 - 7,41 (m, 3H), 7,41 - 7,31 (m, 1H), 7,28 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,22 (m, 1H), 6,35 (s, 1H), 5,49 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 4,70 (dd, J = 9,0, 4,6 Hz, 1H), 4,54 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 3,87 (dd, J = 10,1, 5,2 Hz, 1H), 3,73 - 3,60 (m, 1H), 2,76 (m, 2H), 2,62 - 2,47 (m, 1H), 2,16 - 2,01 (m, 1H), 1,29 (s, 9H), 1,04 (m, 2H), 0,75 (m, 1H), 0,49 (m, 2H), 0,01 (m, 2H); MS (ES+) 656,5 (M+1), 678,5 (M+Na).
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (61b)
[0408] Reakcija sirovog (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (61a) (0,13 g, 0,2 mmol) u etanolu (5 ml) upotrebom konc. HCl (0,12 ml) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 24 g, eluiranje sa 0-30% CMA 80 u hloroformu) (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-((S)1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (61b) (95 mg, 86% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,56 (s, 1H), 8,55 - 8,42 (m, 2H), 8,07 (dd, J = 7,9, 2,2 Hz, 1H), 7,69 (td, J = 7,7, 1,9 Hz, 1H), 7,62 - 7,47 (m, 3H), 7,32 - 7,22 (m, 2H), 7,22 - 7,12 (m, 2H), 7,08 (dd, J = 10,5, 8,7 Hz, 1H), 5,30 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 4,49 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,33 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 3,68 (dd, J = 10,1, 5,2 Hz, 1H), 3,50 - 3,42 (m, 1H), 2,40 - 2,21 (m, 5H), 1,89 (m, 1H), 1,03 (m, 2H), 0,60 (m, 1H), 0,39 - 0,27 (m, 2H), -0,03 - -0,13 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,58; MS (ES+) 552,5 (M+), MS (ES-) 586,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 91,1 [0,18, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (62c)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata (62a)
[0409] Reakcija (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (14b) (0,15 g, 0,65 mmol), (S)-N-((+)-1-(3)-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (31e) (0,25 g, 0,65 mmol) u tetrahidrofuranu (50 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (0,175 g, 0,71 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je (2R,4R)-terc-butil 2(5-(3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilat (62a) (0,24 g, 61%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,71 (s, 1H), 8,57 - 8,48 (m, 1H), 7,97 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,80 - 7,66 (m, 1H), 7,33 - 6,97 (m, 4H), 6,14 (s, 1H), 5,33 - 5,15 (m, 1H), 4,23 (m, 2H), 3,55 - 3,41 (m, 1H), 3,27 - 3,14 (m, 1H), 2,65 - 2,53 (m, 2H), 2,41 - 2,29 (m, 1H), 1,78 (m, 1H), 1,44 - 1,13 (m, 11H), 1,09 (s, 9H), 0,65 - 0,44 (m, 1H), 0,38 - 0,23 (m, 2H), -0,13 - -0,27 (m, 2H); MS (ES+) 603,6 (M+1), MS (ES-) 601,6 (M-1).
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksamida (62b)
[0410] Reakcija (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata (62a) (0,24 g, 0,4 mmol) u metanolu (5 ml) upotrebom konc. HCl nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksamid (62b) kao žuto ulje, koje je kao takvo upotrebljeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 3: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (62c)
[0411] Reakcija (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksamida (62b) koji je dobijen u prethodno navedenom koraku 2 u tetrahidrofuranu/vodi (20 ml/1 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (0,09 g, 0,35 mmol) upotrebom natrijum bikarbonata (0,33 g, 4 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0-30%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (62c) (0,11 g, 50%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,63 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,50 - 8,43 (m, 1H), 8,32 - 8,26 (m, 1H), 8,08 - 8,00 (m, 1H), 7,88 (dd, J = 9,0, 0,8 Hz, 1H), 7,79 (dd, J = 9,0, 2,7 Hz, 1H), 7,74 - 7,64 (m, 1H), 7,52 (dt, J= 8,0, 1,0 Hz, 1H), 7,22 - 7,02 (m, 2H), 5,30 (d, J= 5,0 Hz, 1H), 4,60 -4,47 (m, 1H), 4,36 - 4,23 (m, 1H), 3,78 - 3,64 (m, 1H), 3,58 - 3,42 (m, 2H), 2,40 - 2,19 (m, 5H), 1,88 (m, 1H), 1,10 - 0,92 (m, 2H), 0,70 - 0,51 (m, 1H), 0,40 - 0,25 (m, 2H), -0,04 - -0,17 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,34; MS (ES+) 553,4 (M+1), MS (ES-) 551,3 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 74,44 [0,36, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(4-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (63g)
Korak: 1 Priprema (E)-4-(3-ciklopropilakriloil)benzonitrila (63b)
[0412] U mešani rastvor 4-acetilbenzonitrila (63a) (5 g, 34,4 mmol) u etanolu (100 ml) na 0 °C dodat je ciklopropankarboksaldehid (4,15 ml, 55,1 mmol), nakon čega je sledio kalijum hidroksid (2 M vodeni rastvor 3,44 ml, 6,89 mmol). Reakcionoj smeši je omogućeno da dostigne sobnu temperaturu i mešana je tokom 24 h. Reakcija je zakišeljena sa HCl do pH 6 i koncentrovana u vakuumu održavajući temperaturu kupatila ispod 35 °C. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa etil acetatom u heksanima 0 do 20%) kako bi se dobio (E)-4-(3-ciklopropilakriloil)benzonitril (63b) (512 mg, 2,60 mmol, 7,54% prinos) kao bezbojna tečnost;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,12 -8,08 (m, 2H), 8,02 - 7,99 (m, 2H), 7,25 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 6,57 (dd, J = 15,1, 10,4 Hz, 1H), 1,80 (dddd, J = 12,4, 10,4, 7,9, 4,5 Hz, 1H), 1,08 - 0,99 (m, 2H), 0,79 (tt, J = 4,8, 2,4 Hz, 2H); MS (ES-) 196,1 (M-1).
Korak 2: Priprema 4-(3-ciklopropilpropanoil)benzonitrila (63c)
[0413] U mešani rastvor (E)-4-(3-ciklopropilakriloil)benzonitrila (63b) (1,1 g, 5,58 mmol) u acetonitrilu (10 ml) dodat je tri-n-butilkalaj hidrid (1,489 ml, 5,58 mmol) i zagrevano je na refluksu tokom 6 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana je u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa etil acetatom u heksanima 0 do 100%) kako bi se dobio 4-(3-ciklopropilpropanoil)benzonitril (63c) (457 mg, 2,294 mmol, 41,1% prinos) kao bezbojno ulje;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,08 - 8,03 (m, 2H), 7,98 - 7,91 (m, 2H), 3,09 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,46 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 0,77 - 0,59 (m, 1H), 0,38 - 0,26 (m, 2H), 0,06 - -0,04 (m, 2H); MS (ES-) 198,2 (M-1).
Korak 3: Priprema (+)-N-(1-(4-cijanofenil)-3-ciklopropilpropiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (63d)
[0414] Jedinjenje (63d) je pripremljeno od 4-(3-ciklopropilpropanoil)benzonitrila (63e) (0,814 g, 4,08 mmol) i (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (0,45 g, 3,71 mmol), upotrebom procedure kao što je saopšteno u koraku 3 Šeme 31 kako bi se dobio (+)-N-(1-(4-cijanofenil)-3-ciklopropilpropiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid (63d) (720 mg, 2,38 mmol, 64,1% prinos) kao svetložuti sirup;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,11 - 7,93 (m, 4H), 3,34 (m, 2H), 1,44 (m, 1H), 1,24 (s, 10H), 0,73 (m, 1H), 0,45 - 0,29 (m, 2H), 0,03 (m, 2H); Optička rotacija [α]D= (+) 16,55 [0,29, MeOH].
Korak 4: Priprema (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(4-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (63e)
[0415] Jedinjenje (63e) je pripremljeno od (+)-N-(1-(4-cijanofenil)-3-ciklopropilpropiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (63d) (0,5 g, 1,653 mmol), upotrebom procedure kao što je saopšteno u koraku 4 Šeme 31 kako bi se dobio (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(4-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (63e) (538 mg, 1,301 mmol, 79% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,83 - 7,66 (m, 2H), 7,61 - 7,44 (m, 2H), 6,90 (dd, J = 11,3, 8,5 Hz, 1H), 6,70 (dd, J = 8,7, 2,4 Hz, 1H), 6,47 (ddd, J = 8,6, 4,3, 2,4 Hz, 1H), 5,27 (s, 1H), 5,11 (s, 2H), 2,62 - 2,55 (m, 1H), 2,46 - 2,39 (m, 1H), 1,12 (s, 9H), 1,06 (s, 1H), 0,99 - 0,80 (m, 1H), 0,64 (s, 1H), 0,36 (m, 2H), -0,02 - -0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,54; MS (ES+) 414,396 (M+1); Optička rotacija [α]D= (-) 83,24 [0,185, MeOH].
Korak 5: Priprema (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(1-(4-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (63f)
[0416] Reakcija (2R,4R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (1o) (0,14 g, 0,5 mmol), (R)-N-((-)-1-(3)-amino-4-fluorofenil)-1-(4-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (63e) (0,2 g, 0,5 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (0,12 g, 0,5 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije (silika gel 24 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 30%) (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(1-(4-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (63f) (0,13 g, 38%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,85 (s, 1H), 8,71 (s, 1H), 8,28 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,80 - 7,64 (m, 4H), 7,48 (dd, J = 8,9, 2,3 Hz, 2H), 7,38 (t, J = 9,8 Hz, 1H), 7,28 (s, 1H), 5,68 (s, 1H), 5,52 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 4,71 (dd, J = 9,2, 4,6 Hz, 1H), 4,54 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 3,88 (dd, J = 9,9, 5,2 Hz, 1H), 3,70 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,79 (m, 1H), 2,61 (m, 1H), 1,42 (m, 2H), 1,33 (s, 9H), 1,14 - 0,98 (m, 2H), 0,83 (m, 1H), 0,54 (m, 2H), 0,17 - 0,04 (m, 2H); MS (ES+) 680,5 (M+1), 702,5 (M+Na), MS (ES-) 678,6 (M-1), 714,5 (M+Cl).
Korak 6: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(4-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (63g)
[0417] Reakcija (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(1-(4-cijanofenil)-3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (63f) (0,13 g, 0,2 mmol) u etanolu (5 ml) upotrebom konc. HCl (0,12 ml) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 24 g, eluiranje sa 0-30% CMA 80 u hloroformu) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(4-cijanofenil)-3-ciklopropilpropil)-2fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (63g) (70 mg, 61% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,60 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,10 - 7,96 (m, 1H), 7,78 - 7,67 (m, 2H), 7,61 - 7,52 (m, 4H), 7,30 - 7,24 (m, 2H), 7,14 -7,08 (m, 2H), 5,30 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 4,48 (td, J = 9,2, 4,0 Hz, 1H), 4,33 (q, J = 4,8 Hz, 1H), 3,68 (dd, J = 10,0, 5,4 Hz, 1H), 3,50 - 3,41 (m, 1H), 2,23 (m, 5H), 1,95 - 1,83 (m, 1H), 1,13 -0,91 (m, 2H), 0,80 - 0,53 (m, 1H), 0,40 - 0,27 (m, 2H), -0,04 - -0,13 (m, 2H),<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,19; MS (ES+) 598,5 (M+Na),(ES-) 574,4 (M-1), 610,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 81,7 [0,225, CH3OH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-3-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (64g)
Korak 1: Priprema (E)-3-ciklopropil-1-(piridin-3-il)prop-2-en-1-ona (64b)
[0418] U mešani rastvor 3-acetilpiridina (64a) (9,07 ml, 83 mmol) u metanolu (200 ml) koji je ohlađen na 0 °C dodati su ciklopropankarboksaldehid (9,95 ml, 132 mmol) i vodeni rastvor kalijum hidroksida (1 N rastvor, 16,51 ml, 16,51 mmol). Reakciji je omogućeno da se zagreje do sobne temperature preko noći. Reakcija je zakišeljena sa 1 N hlorovodoničnom kiselinom i koncentrovana u vakuumu kako bi se uklonio metanol. Sirovi ostatak je rastvoren u etil acetatu (300 ml), ispran sa rastvorom natrijum karbonata, vodom (2 x 100 ml), rastvorom soli (50 ml), osušen, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 80 g, eluiranje sa etil acetatom u heksanima 0 do 100%) kako bi se dobio (E)-3-ciklopropil-1-(piridin-3-il)prop-2-en-1-on (64b) (5,99 g, 41,9%);<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,14 (td, J = 2,7, 0,9 Hz, 1H), 8,80 (ddd, J = 4,9, 3,3, 1,7 Hz, 1H), 8,36 - 8,27 (m, 1H), 7,57 (ddt, J = 8,0, 4,8, 1,2 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 15,1 Hz, 1H), 6,58 (dd, J = 15,1, 10,3 Hz, 1H), 1,80 (dddd, J = 12,5, 10,4, 7,8, 4,5 Hz, 1H), 1,08 - 0,99 (m, 2H), 0,85 - 0,76 (m, 2H); MS (ES+) 196,1 (M+Na).
Korak 2: Priprema 3-ciklopropil-1-(piridin-3-il)propan-1-ona (64c)
[0419] U mešani rastvor (E)-3-ciklopropil-1-(piridin-3-il)prop-2-en-1-ona (64b) (5,93 g, 34,2 mmol) u benzenu (150 ml) dodat je tributilstanan (18,42 ml, 68,5 mmol) i zagrejano je do refluksa. Reakcija je mešana na refluksu tokom 5 h i ohlađena do sobne temperature. Benzen je uparen i ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 80 g, eluiranje sa etil acetatom u heksanima 0 do 100%) kako bi se dobio 3-ciklopropil-1-(piridin-3-il)propan-1-on (64e) (5,29 g, 88%);<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,07 (dd, J = 2,3, 0,9 Hz, 1H), 8,72 (dd, J = 4,8, 1,7 Hz, 1H), 8,24 (ddd, J = 8,0, 2,4, 1,8 Hz, 1H), 7,50 (ddd, J = 8,0, 4,9, 0,9 Hz, 1H), 3,09 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,47 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 0,70 (dddd, J = 12,0, 8,1, 5,1, 2,2 Hz, 1H), 0,40 - 0,21 (m, 2H), 0,06 - -0,05 (m, 2H).
Korak 3: Priprema (-)-N-(3-ciklopropil-1-(piridin-3-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (64d)
[0420] Jedinjenje (64d) je pripremljeno od 3-ciklopropil-1-(piridin-3-il)propan-1-ona (64c) (3,98 g, 22,69 mmol) i (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (2,5 g, 20,63 mmol) upotrebom procedure kao što je saopšteno u koraku 3 Šeme 31 kako bi se dobio (-)-N-(3-ciklopropil-1-(piridin-3-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid (64d) (2,5 g, 8,98 mmol, 43,5% prinos) kao žuti sirup;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,04 (s, 1H), 8,72 (dd, J = 4,8, 1,6 Hz, 1H), 8,24 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,53 (dd, J = 8,1, 4,8 Hz, 1H), 3,40 (m, 1H), 3,30 (m, 1H), 1,47 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 1,24 (s, 9H), 0,82 - 0,66 (m, 1H), 0,44 - 0,29 (m, 2H), 0,12 - 0,01 (m, 2H); Optička rotacija [α]D= (-) 17,29 [0,59, MeOH].
Korak 4: Priprema (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-3-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (64e)
[0421] U mešani rastvor (-)-N-(3-ciklopropil-1-(piridin-3-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (64d) (82 g, 295 mmol) u toluenu (1700 ml) na -20 °C dodavan je kap po kap sveže pripremljen rastvor (3-(bis(trimetilsilil)amino)-4-fluorofenil)magnezijum bromida (1c) (920 ml, 736 mmol) tokom perioda od 120 min. Reakciona smeša je mešana na -20 °C tokom 1 h i ugašena sa 1 N vodenim rastvorom KHSO4(1600 ml). Reakciona smeša je mešana tokom 1 h na sobnoj temperaturi, zalužena sa 2 N NaOH do pH ~8 i ekstrahovana sa etil acetatom (1500, 700 ml). Organski slojevi su kombinovani, isprani vodom (2 x 700 ml), rastvorom soli (700 ml), osušeni i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa (9:1) etil acetatom/metanolom u heksanima 0 do 50%) kako bi se dobio (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-3-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (64e) (54,155 g, 139 mmol, 47,2% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,53 - 8,48 (m, 1H), 8,39 (dd, J = 4,7, 1,5 Hz, 1H), 7,70 (dt, J = 8,1, 2,0 Hz, 1H), 7,32 (dd, J = 8,0, 4,7 Hz, 1H), 6,90 (dd, J = 11,2, 8,5 Hz, 1H), 6,73 (dd, J = 8,8, 2,4 Hz, 1H), 6,56 - 6,45 (m, 1H), 5,26 (s, 1H), 5,10 (s, 2H), 2,67 - 2,54 (m, 2H), 1,28 - 1,11 (m, 1H), 1,12 (s, 9H), 0,91 (m, 1H), 0,64 (m, 1H), 0,40 -0,30 (m, 2H), -0,02 - -0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO d6) δ -137,67; MS (ES+) 390,4 (M+1); (ES-) 388,4 (M-1); Optička rotacija [α]D= (-) 105,71 [0,28, MeOH].
Korak 5: Priprema (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-3-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (64f)
[0422] Reakcija (2R,4R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (1o) (0,14 g, 0,5 mmol), (R)-N-((-)-1-(3)-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-3-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (64e) (0,2 g, 0,5 mmol) u tetrahidrofuranu (5 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (0,12 g, 0,5 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije (silika gel 24 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 30%) (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-3-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (64f) (0,09 g, 27%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,97 (s, 1H), 8,83 (d, J = 2,5 Hz, 2H), 8,72 (dd, J = 4,5, 2,8 Hz, 1H), 8,40 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,92 - 7,81 (m, 2H), 7,70 - 7,56 (m, 3H), 7,54 - 7,38 (m, 2H), 5,81 (s, 1H), 5,64 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 4,82 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 4,66 (m, 1H), 3,99 (m, 1H), 3,82 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 2,42 - 2,32 (m, 3H), 2,23 (m, 1H), 1,45 (m, 10H), 1,31 - 1,10 (m, 1H), 0,96 (s, 1H), 0,65 (s, 2H), 0,33 - 0,24 (m, 2H); MS (ES+) 656,5 (M+1), 678,5 (M+Na), MS (ES-) 654,4 (M-1), 690,5 (M+Cl).
Korak 6: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-3-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (64g)
[0423] Reakcija (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-3-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (64f) (0,08 g, 0,12 mmol) u etanolu (4 ml) upotrebom konc. HCl (0,12 ml) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 24 g, eluiranje sa 0-30% CMA 80 u hloroformu) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-3-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (64g) (35 mg, 50% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s, 1H), 8,58 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,35 (dd, J = 4,7, 1,5 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,73 (dt, J = 8,1, 2,0 Hz, 1H), 7,58 - 7,49 (m, 2H), 7,32 - 7,23 (m, 3H), 7,18 - 7,09 (m, 2H), 5,30 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 4,50 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,33 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 3,68 (dd, J = 10,0, 5,3 Hz, 1H), 3,49 (s, 1H), 2,38 (m, 3H), 2,23 (m, 1H), 1,03 (m, 2H), 0,64 (m, 1H), 0,41 -0,27 (m, 2H), -0,03 - -0,13 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,28; MS (ES+) 552,5 (M+1), 574,5, 576,5 (M+Na), (ES-) 550,5, 552,4 (M-1), 586,5, 588,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 68,0 [0,25, CH3OH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (65b)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (65a)
[0424] Reakcija (2R,4R)-N-(5-(3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (37b) (0,1 g, 0,19 mmol), 4-hlorofenil izocijanata (0,045 g, 0,3 mmol) upotrebom TEA (80 μl) kao baze u THF (5 ml) u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 9 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (65a) (0,105 g, 80%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,48 (s, 1H), 8,57 - 8,47 (m, 2H), 8,04 - 7,94 (m, 1H), 7,73 (td, J = 7,7, 1,7 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,27 (dd, J = 10,5, 7,5 Hz, 3H), 7,23 - 7,05 (m, 2H), 6,14 (s, 1H), 4,53 (dd, J = 9,2, 3,9 Hz, 1H), 4,06 (s, 1H), 3,78 - 3,55 (m, 2H), 3,21 (s, 3H), 2,68 - 2,52 (m, 2H), 2,42 - 2,24 (m, 1H), 2,15 - 2,02 (m, 1H), 1,21 (m, 1H), 1,09 (s, 9H), 0,91 - 0,65 (m, 2H), 0,62 - 0,47 (m, 1H), 0,29 (m, 2H), -0,16 - -0,21 (m, 2H); MS (ES+) 670,5 (M+1), 692,5 (M+Na), MS (ES-) 668,5 (M-1), 704,5 (M+Cl).
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (65b)
[0425] Reakcija (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(3-ciklopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (65a) (0,1 g, 0,43 mmol) u etanolu (5 ml) upotrebom konc. HCl (0,12 ml) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 30%) (2R,4R)-N2-(5-((+))-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (65b) (65 mg, 65% prinos) hidrohloridnu so kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 9,65 (s, 1H), 8,90 (s, 3H), 8,69 - 8,64 (m, 1H), 8,57 (s, 1H), 7,99 (dd, J = 7,4, 2,5 Hz, 1H), 7,87 (td, J = 7,8, 1,8 Hz, 1H), 7,61 - 7,52 (m, 2H), 7,47 - 7,41 (m, 1H), 7,38 - 7,25 (m, 4H), 7,17 - 7,08 (m, 1H), 4,55 (dd, J = 9,2, 4,2 Hz, 1H), 4,15 - 4,04 (m, 1H), 3,75 (dd, J = 10,5, 5,3 Hz, 1H), 3,61 (dd, J = 10,4, 3,5 Hz, 1H), 3,23 (s, 3H), 2,52 - 2,33 (m, 3H), 2,14 - 2,00 (m, 1H), 1,10 (m, 2H), 0,67 (m, 1H), 0,45 - 0,34 (m, 2H), -0,01 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -125,63; MS (ES+) 566,5 (M+1), (ES-) 600,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 94,4 [0,25, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (66c)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-benzil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (66a)
[0426] Reakcija (2R,4R)-1-(benziloksikarbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (15b) (2 g, 7,16 mmol), (R)-N-((-)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (1e) (2,41 g, 7,52 mmol) u tetrahidrofuranu (50 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (1,86 g, 7,52 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 40 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 100%) (2R,4R)-benzil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilat (66a) (3,11 g, 75%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,54 (2s, 1H, rotameri), 7,81 (m, 1H), 7,45 -7,09 (m, 12H), 6,00 (s, 1H), 5,47 (s, 1H), 5,17 - 4,93 (m, 2H), 4,44 (m, 1H), 3,99 (m, 1H), 3,69 (m, 1H), 3,50 - 3,36 (m, 1H), 3,18 (m, 3H), 2,11 - 1,98 (m, 2H), 1,13 (s, 9H); MS (ES+) 582,5 (M+1).
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (66b)
[0427] Debenzilacija hidrogenizacijom (2R,4R)-benzil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (66a) (3,0 g, 5,15 mmol) u etanolu (50 ml), upotrebom paladijuma na ugljeniku 10% (0,3 g) kao katalizatora u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 2 Šeme 13 dala je (2R,4R)-N-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamid (66b) (1,45 g, 63% prinos) kao belu čvrstu supstancu; MS (ES+) 448,4 (M+1), (ES-) 446,3 (M-1).
Korak 3: Priprema (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (66c)
[0428] Reakcija (2R,4R)-N-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (66b) (0,18 g, 0,4 mmol) u tetrahidrofuranu (20 ml), fenil (5-hloropiridin-2-il)karbamata (13b) (0,13 g, 0,52 mmol), upotrebom trietilamina (0,08 g, 0,8 mmol) kao baze upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 3 Šeme 13 dala je (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (66c) (0,12 g, 52% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,78 (s, 1H), 9,45 (s, 1H), 8,60 (m, 1H), 8,25 - 8,03 (m, 3H), 7,72 - 7,43 (m, 7H), 6,29 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 5,77 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 4,88 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,34 (m, 1H), 4,02 (m, 2H), 3,50 (s, 3H), 2,75 - 2,59 (m, 1H), 2,39 (m, 1H), 1,42 (s, 9H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,17; MS (ES+) 624,5, 626,4 (M+Na), (ES-) 601,5,5, 602,5 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 22,22 [0,135, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(etilamino)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (67b)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-N2-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (67a)
[0429] Reakcija (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (66c) (0,8 g, 1,3 mmol) u etanolu (50 ml) upotrebom konc. HCl (1 ml) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 40%) (2R,4R)-N2-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (67a) (0,32 g, 49%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,44 (s, 1H), 9,13 (s, 1H), 8,36 - 8,24 (m, 1H), 7,96 - 7,74 (m, 3H), 7,43 - 7,32 (m, 2H), 7,32 - 7,21 (m, 2H), 7,21 - 7,10 (m, 3H), 5,06 (s, 1H), 4,57 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,04 (s, 1H), 3,73 (m, 2H), 3,21 (m, 3H), 2,45 - 2,28 (m, 3H), 2,09 (m, 1H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,12; MS(ES+) 498,4 (M+1); MS (ES-) 532,4 (M+Cl).
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(etilamino)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (67b)
[0430] Reduktivna aminacija (2R,4R)-N2-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (67a) (0,075 g, 0,15 mmol) u MeOH (3 ml) upotrebom acetaldehida (0,02 g, 0,45 mmol) i natrijum borohidrida (0,017 g, 0,45 mmol) u skladu sa procedurom koja je saopštena u Šemi 41 dala je posle napredovanja i prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa metanolom u hloroformu 0 do 10%) (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(etilamino)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (67b) (0,055 g, 69% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,51 - 9,42 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,30 (dd, J= 2,7, 0,8 Hz, 1H), 7,94 - 7,85 (m, 2H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 7,27 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,22 -7,09 (m, 4H), 4,76 (s, 1H), 4,58 (dd, J = 9,2, 4,0 Hz, 1H), 4,09 - 3,97 (m, 2H), 3,84 - 3,63 (m, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,46 - 2,27 (m, 3H), 2,09 (m, 1H), 1,03 (t, J= 6,9 Hz, 3H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,09; MS(ES+) 526,4 (M+1), 548,4 (M+Na) MS (ES-) 524,4 (M-1), 560,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 72,31 [0,26, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (68a)
[0431] Reakcija (2R,4R)-1-(4-hlorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (0,095 g, 0,03 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e) (0,13 g, 0,3 mmol) u tetrahidrofuranu (5 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (0,085 g, 0,3 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (68a) (0,04 g, 21%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,67 (s, 1H), 8,56 - 8,44 (m, 3H), 8,09 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,61 - 7,48 (m, 2H), 7,34 - 7,24 (m, 4H), 7,24 - 7,14 (m, 1H), 7,10 (m, 1H), 5,51 (s, 1H), 5,33 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 4,51 (dd, J = 9,1, 4,7 Hz, 1H), 4,34 (m, 1H), 3,68 (m, 1H), 3,54 - 3,45 (m, 1H), 2,42 - 2,27 (m, 3H), 1,25 - 1,16 (m, 1H), 1,14 (s, 9H), 0,89 (m, 1H), 0,63 (m, 1H), 0,34 (m, 2H), -0,07 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,49; MS (ES+) 656,5 (M+1), 678,5, 680,5 (M+Na) (ES-) 654,5, 655,5 (M-1), 690,5, 692,6 (M+Cl).
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (69a)
[0432] Reakcija (2R,4R)-N1-(4-hlorofenil)-N2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (68a) (0,17 g, 0,26 mmol) u metanolu (5 ml) upotrebom 3 M HCl u metanolu kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0 do 40%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamid (69a) (0,1 g, 70%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,47 - 8,40 (m, 2H), 8,05 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,59 - 7,49 (m, 2H), 7,38 - 7,31 (m, 2H), 7,31 - 7,23 (m, 2H), 7,13 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 5,30 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,50 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,40 - 4,26 (m, 1H), 3,68 (dd, J = 10,0, 5,3 Hz, 1H), 3,51 - 3,41 (m, 1H), 2,39 - 2,12 (m, 5H), 1,96 - 1,81 (m, 1H), 1,12 - 0,92 (m, 2H), 0,72 - 0,54 (m, 1H), 0,41 - 0,26 (m, 2H), -0,02 - -0,15 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,12 (q, J = 7,7 Hz); MS (ES+) 552,5 (M+1), 554,5 (M+2); Optička rotacija [α]D= (+) 76,66 [0,06, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (70c)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-terc-butil 2-(5-((-)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (70a)
[0433] Jedinjenje 70a je pripremljeno od (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (36a) (22 g, 90 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e) (34,2 g, 88 mmol) i etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (24,2 g, 98 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 kako bi se dobio posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa 0-100% 9:1 etil acetatom/metanolom u heksanima) (2R,4R)-terc-butil 2-(5-((-)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilat (70a) (38,8 g, 70%) kao bezbojna pena;<1>H NMR podaci su pokazali proizvode kao rotamere;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,52 (s, 1H), 8,54 - 8,45 (m, 2H), 7,89 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,36 - 7,27 (m, 2H), 7,20 (d, J = 10,3 Hz, 2H), 5,47 (s, 1H), 4,39 - 4,21 (m, 1H), 4,01 - 3,89 (m, 1H), 3,63 - 3,50 (m, 1H), 3,27 - 3,12 (m, 3H), 2,64 - 2,53 (m, 4H), 1,94 - 1,83 (m, 1H), 1,47 - 1,06 (m, 19H), 1,00 - 0,79 (m, 1H), 0,73 - 0,55 (m, 1H), 0,42 - 0,26 (m, 2H), -0,02 - -0,16 (m, 2H); MS (ES+) 617,7 (M+1), MS(ES-) 615,6 (M-1), 651,6 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (-) 48,2 [0,17, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (70b)
[0434] Reakcija (2R,4R)-terc-butil 2-(5-((-)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (70a) (30 g, 48,7 mmol) u metanolu (300 ml) sa 3 N HCl u metanolu (130 ml, 400 mmol) dala je posle napredovanja i prečišćavanja kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamid (70b) (25 g, 100% prinos) kao hidrohloridnu so koja je bila dovoljno čista da se kao takva upotrebi u sledećem koraku.
Korak 3: (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (70c)
[0435] Reakcija (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (70b) (25,9 g, 48,7 mmol) u tetrahidrofuranu/vodi (600/40 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (10,8 g, 43,8 mmol) upotrebom natrijum bikarbonata (33 g, 400 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje upotrebom 0-100% CMA 80 u hloroformu) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (70c) (14 g, 47%) slobodnu bazu kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,45 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,48 - 8,40 (m, 2H), 8,30 (dd, J = 2,6, 0,8 Hz, 1H), 7,95 - 7,85 (m, 2H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,38 - 7,30 (m, 2H), 7,19 -7,10 (m, 2H), 4,57 (dd, J = 9,2, 4,0 Hz, 1H), 4,03 (m, 1H), 3,72 (qd, J = 10,8, 4,3 Hz, 2H), 3,20 (s, 3H), 2,40 - 2,24 (m, 2H), 2,19 (t, J= 8,0 Hz, 2H), 2,09 (m, 1H), 1,03 (m, 2H), 0,62 (m, 1H), 0,40 - 0,28 (m, 2H), -0,07 (s, 2H). Slobodna baza (8,5 g, 15 mmol) je konvertovana u hidrohloridnu so upotrebom konc. HCl (2,87 ml) u etanolu (30 ml) kako bi se dobilo jedinjenje 70c (9,3 g) hidrohlorid kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,76 - 9,69 (m, 1H), 9,63 (s, 4H), 9,23 (s, 1H), 8,85 (s, 2H), 8,31 (dd, J = 2,6, 0,8 Hz, 1H), 8,01 - 7,92 (m, 1H), 7,85 (qd, J = 9,0, 1,7 Hz, 2H), 7,72 (brs, 2H), 7,38 (dd, J = 10,4, 8,8 Hz, 1H), 7,23 (s, 1H), 4,61 (dd, J = 9,2, 4,2 Hz, 1H), 4,05 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 3,78 (dd, J = 10,9, 5,2 Hz, 1H), 3,73 - 3,62 (m, 1H), 3,21 (s, 3H), 2,41 (m, 2H), 2,06 (m, 1H), 1,14 (m, 2H), 0,68 (m, 1H), 0,43 - 0,29 (m, 2H), 0,03 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ- 125,00; MS (ES+) 567,3 (M+1), 569,3 (M+2), MS (ES-) 601,2 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 96,4 [0,5, MeOH]; Analiza izračunata za C29H32ClFN6O3,2,25HCl,2,0H2O: C, 50,84; H, 5,63; Cl, 16,82; N, 12,27; Pronađeno: C, 50,98; H, 5,67; Cl, 16,72; N, 12,12.
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (71a)
[0436] Reakcija (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (70b) (0,5 g, 0,97 mmol) u tetrahidrofuranu/vodi (20/2 ml) sa 4-hlorofenil izocijanatom (1n) (0,13 g, 0,87 mmol) upotrebom natrijum bikarbonata (0,33 g, 0,4 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 9 Šeme 1 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje upotrebom 0-30% CMA 80 u hloroformu) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-hlorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (71a) (0,1 g, 18% prinos) kao bezbojnu penu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,60 (s, 1H), 8,62 - 8,50 (m, 3H), 7,94 (dd, J = 7,4, 2,4 Hz, 1H), 7,61 - 7,49 (m, 2H), 7,38 - 7,22 (m, 5H), 7,16 - 7,06 (m, 1H), 4,55 (dd, J = 9,2, 4,1 Hz, 1H), 4,07 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 3,79 - 3,69 (m, 1H), 3,61 (dd, J = 10,3, 3,4 Hz, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,48 - 2,23 (m, 3H), 2,14 - 2,02 (m, 1H), 1,08 (m, 2H), 0,67 (m, 1H), 0,44 - 0,30 (m, 2H), -0,03 (m, 2H); HPLC: 6,602 (98%); MS (ES+) 565,4 (M+), 567,4 (M+2), MS (ES-) 564,5 (M+), 600,5 (M+Cl); Analiza izračunata za C30H33ClFN5O3,3H2O: C, 58,11; H, 6,34; N, 11,29; Pronađeno: C, 58,01; H, 5,98; N, 10,96.
[0437] Slobodna baza jedinjenja 71a konvertovana je u hidrohloridnu so upotrebom konc. HCl u etanolu kako bi se dobilo jedinjenje 71a hidrohloridna so kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,71 (s, 1H), 9,55 (s, 3H), 8,81 (d, J = 5,1 Hz, 2H), 8,59 (s, 1H), 7,98 (dd, J = 7,3, 2,5 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,60 - 7,50 (m, 2H), 7,38 (dd, J = 10,5, 8,8 Hz, 1H), 7,32 - 7,25 (m, 2H), 7,21 (s, 1H), 4,57 (dd, J = 9,2, 4,2 Hz, 1H), 4,07 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 3,81 - 3,69 (m, 1H), 3,62 (dd, J = 10,3, 3,4 Hz, 1H), 3,23 (s, 3H), 2,45 - 2,35 (m, 3H), 2,14 - 2,00 (m, 1H), 1,30 - 0,98 (m, 2H), 0,69 (m, 1H), 0,38 (m, 2H), 0,07 - 0,01 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -125,33; MS (ES+) 565,4 (M+1), 567,4 (M+2), 588,4, 590,4 (M+Na), MS (ES-) 564,5 (M-1), 600,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 67,9 [0,28, MeOH]; Analiza izračunata za C30H33ClFN5O3,2HCl,2,75H2O: C, 52,33; H, 5,93; Cl, 15,45; N, 10,17; Pronađeno: C, 52,68; H, 5,94; Cl, 15,30; N, 9,89.
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (72c)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata (72a)
[0438] Reakcija (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (14b) (0,16 g, 0,69 mmol), (R)-N-((-)-1-(3)-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e) (0,27 g, 0,69 mmol) u tetrahidrofuranu (5 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (0,17 g, 0,7 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilat (72a) (0,17 g, 40%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,80 (s, 1H), 8,48 (dt, J = 6,1, 2,3 Hz, 2H), 7,98 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,35 - 7,26 (m, 2H), 7,20 (d, J = 11,7 Hz, 2H), 5,49 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 5,36 - 5,17 (m, 1H), 4,35 - 4,15 (m, 2H), 3,57 - 3,42 (m, 1H), 3,29 - 3,16 (m, 1H), 2,44 - 2,30 (m, 1H), 1,89 - 1,73 (m, 1H), 1,46 - 1,01 (m, 19 H), 0,97 - 0,79 (m, 1H), 0,70 - 0,50 (m, 1H), 0,43 - 0,27 (m, 2H), -0,03 - -0,15 (m, 2H); MS (ES+) 603,5 (M+1), 625,5 (M+Na), MS (ES-) 601,5 (M-1).
Korak 2: Priprema (2R,4R)-N-(5-((S)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksamida (72b)
[0439] Reakcija (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata (72a) (0,17 g, 0,27 mmol) u metanolu (10 ml) upotrebom 3 N HCl u metanolu (1 ml) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (2R,4R)-N-(5-((S)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksamid (72b) kao žuto ulje, koje je kao takvo upotrebljeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 3: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksamida (72c)
[0440] Reakcija (2R,4R)-N-(5-((S)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroksipirolidin-2-karboksamida (72b) koji je dobijen u prethodno navedenom koraku 2 u tetrahidrofuranu/vodi (8 ml/1 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (0,06 g, 0,25 mmol) upotrebom natrijum bikarbonata (0,23 g, 2,7 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 24 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0-30%) (0,1 g, 74% prinos) slobodnu bazu kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,67 (s, 1H), 9,17 (s, 1H), 8,47 - 8,38 (m, 2H), 8,32 (s, 1H), 8,29 (dd, J = 2,6, 0,8 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,88 (dd, J = 9,1, 0,8 Hz, 1H), 7,79 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,39 -7,30 (m, 2H), 7,13 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 5,31 (s, 1H), 4,54 (dd, J = 9,0, 4,8 Hz, 1H), 4,30 (s, 1H), 3,72 (dd, J = 10,4, 5,3 Hz, 1H), 3,50 (q, J = 5,0, 4,1 Hz, 1H), 2,45 - 2,09 (m, 5H), 1,96 - 1,80 (m, 1H), 1,10 - 0,90 (m, 2H), 0,70 - 0,53 (m, 1H), 0,41 - 0,22 (m, 2H), -0,02 - -0,16 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -125,05; MS (ES+) 553,5 (M+1), 555,4 (M+2), 575,4, 577,4 (M+Na), MS (ES-) 587,4 (M+Cl). Slobodna baza je konvertovana u HCl so upotrebom konc. HCl u etanolu (5 ml) kako bi se dobilo jedinjenje 72c HCl so kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,93 (s, 1H), 9,70 (s, 3H), 9,27 (s, 1H), 8,95 - 8,86 (m, 2H), 8,30 (dd, J = 2,5, 0,9 Hz, 1H), 8,10 (dd, J = 7,2, 2,5 Hz, 1H), 7,90 - 7,76 (m, 4H), 7,39 (dd, J = 10,5, 8,8 Hz, 1H), 7,23 (dd, J = 7,3, 4,5 Hz, 1H), 4,57 (dd, J = 8,9, 5,1 Hz, 1H), 4,33 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 3,75 (dd, J = 10,4, 5,4 Hz, 1H), 3,56 - 3,45 (m, 1H), 2,60 - 2,53 (m, 2H), 2,47 -2,33 (m, 2H), 1,87 (m, 1H), 1,30 - 0,96 (m, 2H), 0,69 (m, 1H), 0,37 (m, 2H), 0,08 - 0,01 (m, 2H),<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -125,05; MS (ES+) 553,5 (M+1), 555,4 (M+2), 575,4, 577,4 (M+Na), MS (ES-) 587,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 82,96 [0,27, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-acetamido-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (73a)
[0441] Reakcija (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (70c) (113 mg, 0,2 mmol) na 0 °C u dihlorometanu (3 ml) upotrebom piridina (126 mg, 1,6 mmol) i anhidrida sirćetne kiseline (81 mg, 0,8 mmol) kao što je saopšteno u Šemi 55 dala je (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-acetamido-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (73a) (91 mg, 75%) slobodnu bazu kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,49 (s, 1H), 9,17 (s, 1H), 8,45 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 8,30 (dd, J = 2,7, 0,8 Hz, 2H), 7,94 - 7,76 (m, 3H), 7,30 - 7,23 (m, 2H), 7,22 - 7,05 (m, 2H), 4,58 (dd, J = 9,2, 4,0 Hz, 1H), 4,04 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 3,73 (td, J = 11,3, 6,2 Hz, 3H), 3,21 (s, 3H), 2,43 - 2,23 (m, 2H), 2,10 (m, 1H), 1,90 (s, 3H), 0,91 (m, 2H), 0,62 (m, 1H), 0,38 - 0,33 (m, 2H), -0,13 - -0,13 (m, 2H),<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,00; MS (ES+) 609,4 (M+1), 631,4 (M+Na), MS (ES-) 607,4 (M-), 643,4 (M+Cl); Slobodna baza je konvertovana u HCl so kako bi se dobilo jedinjenje 73a HCl so kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,60 (s, 1H), 9,22 (s, 1H), 8,75 (d, J = 6,2 Hz, 2H), 8,69 (s, 1H), 8,30 (dd, J = 2,6, 0,9 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 7,94 - 7,88 (m, 3H), 7,86 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,31 - 7,18 (m, 2H), 4,59 (dd, J = 9,2, 4,1 Hz, 1H), 4,10 - 4,00 (m, 1H), 3,73 (qd, J = 10,8, 4,3 Hz, 2H), 3,22 (s, 3H), 2,78 - 2,53 (m, 2H), 2,47 -2,32 (m, 1H), 2,15 - 2,00 (m, 1H), 1,94 (s, 3H), 1,09 - 0,93 (m, 2H), 0,74 - 0,57 (m, 1H), 0,34 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 0,04 - -0,14 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,10; MS (ES+) 609,3 (M+1) 631,3 (M+Na); MS (ES-) 643,3 (M+Cl); HPLC čistoća (87,9048%); Optička rotacija [α]D= (+) 105,84 [0,565, MeOH]; Analiza izračunata za C31H34ClFN6O4l,75HCl,2H2O: C, 52,52; H, 5,65; Cl, 13,75; N, 11,85; Pronađeno: C, 52,28; H, 5,81; Cl, 13,92; N, 11,67.
Priprema (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(metilsulfonamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (74a)
[0442] Reakcija (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (70a) (57 mg, 0,1 mmol) na 0 °C u dihlorometanu (3 ml) upotrebom piridina (78 mg, 1 mmol) i anhidrida metansulfonske kiseline (68 mg, 0,4 mmol) u skladu sa procedurom koja je saopštena u Šemi 55 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa MeOH u hloroformu 0 do 10%) (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(metilsulfonamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (74a) (25 mg, 40% prinos) slobodnu bazu kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,58 (s, 1H), 9,18 (s, 1H), 8,42 - 8,25 (m, 2H), 8,01 - 7,75 (m, 5H), 7,33 - 7,17 (m, 1H), 7,08 (s, 1H), 4,68 - 4,53 (m, 1H), 4,04 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 3,89 - 3,61 (m, 2H), 3,19 (s, 3H), 2,61 - 2,31 (m, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,10 (m, 1H), 1,14 - 0,96 (m, 1H), 0,86 (m, 1H), 0,65 - 0,49 (m, 1H), 0,43 - 0,22 (m, 2H), -0,01 - -0,23 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,45; MS (ES+) 645,3 (M+1), 667,3 (M+Na), (ES-) 643,4 (M-1). Slobodna baza je konvertovana u HCl so kako bi se dobilo jedinjenje 74a hidrohlorid kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,63 (s, 1H), 9,19 (s, 1H), 8,81 (d, J = 6,2 Hz, 2H), 8,30 (d, J = 2,6, Hz, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,97 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,88 (q, J = 4,1, 2,8 Hz, 3H), 7,82 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,29 (dd, J = 10,3, 8,8 Hz, 1H), 7,11 (m, 1H), 4,61 (dd, J = 9,2, 4,1 Hz, 1H), 4,05 (t, J = 4,4 Hz, 1H), 3,78 (m, 1H), 3,21 (s, 3H), 2,78 - 2,59 (m, 1H), 2,42 (s, 3H), 2,40 - 2,34 (m, 1H), 2,17 - 2,02 (m, 1H), 1,37 - 0,95 (m, 2H), 0,91 - 0,70 (m, 2H), 0,60 (m, 1H), 0,33 (m, 2H), -0,03 - -0,13 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ-125,93; MS (ES+) 645,3 (M+1), 667,3 (M+Na), MS (ES-) 679,4 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 82,96 [0,27, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(3-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (75e)
Korak 1: Priprema (R)-N-((-)-1-(3-aminofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (75b)
[0443] Jedinjenje (75b) je pripremljeno od (-)-N-(3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39d) (4,3 g, 15,5 mmol) i (3-(bis(trimetilsilil)amino)fenil)magnezijum bromida (34 ml, 34 mmol, 1 M rastvor u THF) upotrebom procedure kao što je saopšteno u koraku 4 Šeme 31 kako bi se dobio (R)-N-((-)-1-(3-aminofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (75b) (1,9 g, 33%) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,51 - 8,42 (m, 2H), 7,37 7,29 (m, 2H), 6,94 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,52 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 6,47 (dd, J = 7,8, 1,4 Hz, 1H), 6,42 - 6,34 (m, 1H), 5,15 (s, 1H), 5,05 (s, 2H), 1,14 (s, 10H), 1,05 - 0,75 (m, 1H), 2,73 - 2,33 (m, 2H), 0,75 - 0,53 (m, 1H), 0,43 - 0,27 (m, 2H), -0,00 - -0,21 (m, 2H); Optička rotacija [α]D= (-) 90,34 [0,23, MeOH].
Korak 2: Priprema (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (75c)
[0444] Jedinjenje 75c je pripremljeno od (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (36a) (245 mg, 1 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-aminofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (75b) (0,37 g, 1 mmol) i etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (250 mg, 1 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 kako bi se dobio (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R))-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilat (75c) (0,44 g, 73% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,76 (2s, 1H, rotameri), 8,54 - 8,43 (m, 2H), 7,65 - 7,38 (m, 2H), 7,37 - 7,18 (m, 3H), 7,06 (2 dd, 1H, rotameri), 5,39 (2s, 1H, rotameri), 4,19 (m, 1H), 3,97 (m, 1H), 3,64 (dd, J = 10,6, 6,1 Hz, 1H), 3,20 (2s, 3H, rotameri), 2,44 (m, 3 H), 1,94 - 1,76 (m, 1H), 1,23 (2s, 9H, rotameri), 1,19 - 1,04 (m, 10H), 0,99 - 0,79 (m, 2H), 0,73 - 0,54 (m, 1H), 0,42 - 0,28 (m, 2H), 2,75 - 2,37 (m, 3H), -0,03 - -0,18 (m, 2H).
Korak 3: Priprema (2R,4R)-N-(3-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (75d)
[0445] Reakcija (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1-karboksilata (75c) (0,44 g, 0,73 mmol) u metanolu (10 ml) sa 3 N HCl u MeOH (1 ml) dala je posle napredovanja i prečišćavanja kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 (2R,4R)-N-(3-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamid (75d) kao hidrohloridnu so koja je kao takva upotrebljena za sledeći korak.
Korak 4: (2R,4R)-N2-(3-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-N1-(5-hloropiridin-2 -il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (75e)
[0446] Reakcija (2R,4R)-N-(3-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (75d) (0,37 g, 0,73 mmol) u tetrahidrofuranu/vodi (25 ml/1 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (0,173 g, 0,7 mmol) upotrebom natrijum bikarbonata (0,47 g, 5,6 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 24 g, CMA 80 u hloroformu 0 do 30%) (2R,4R)-N2-(3-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (75e) (0,31 g, 80%) slobodnu bazu kao belu čvrsta supstancu, koja je konvertovana u hidrohloridnu so kako bi se dobilo jedinjenje 75c HCl so kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,99 (s, 1H), 9,41 (s, 3H), 9,18 (s, 1H), 8,80 (s, 2H), 8,30 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,92 - 7,75 (m, 2H), 7,71 - 7,54 (m, 4H), 7,39 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,08 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,50 (m, 1H), 4,04 (t, J = 5,2 Hz, 1H), 3,85 (dd, J = 10,7, 5,8 Hz, 1H), 3,58 (dd, J = 10,6, 4,4 Hz, 1H), 3,20 (s, 3H), 2,44 (m, 3H), 1,97 (m, 1H), 1,12 (m, 2H), 0,70 (m, 1H), 0,38 (m, 2H), 0,00 (m, 2H); MS (ES+) 562,4 (M+Na), 549,6 (M+), (ES-) 583,5, (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 95,32 [0,235, MeOH]; Analiza izračunata za C29H33ClN6O3,2,5HCl,3,25H2O: C, 49,85; H, 6,06; Cl, 17,76; N, 12,03; Pronađeno: C, 49,73; H, 5,89; Cl, 17,83; N, 11,88.
Priprema (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(2-(4-hlorofenil)acetil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (76e)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (76a)
[0447] Jedinjenje 76a je pripremljeno hidrolizom Boc zaštitne grupe na (2R,4R)-1-(tercbutoksikarbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilnoj kiselini (36a) (0,49 g, 2 mmol) u metanolu (3 ml) sa 3 N HCl u MeOH (3 ml) kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4. Ovo je posle napredovanja dalo (2R,4R)-4-metoksipirolidin-2-karboksilnu kiselinu (76a) hidrohloridnu so kao prljavobelu čvrstu supstancu, koja je upotrebljena bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 2: Priprema (2R,4R)-1-(2-(4-hlorofenil)acetil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (76c)
[0448] U rastvor (2R,4R)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (76a) (2 mmol, koja je dobijena u koraku 1) u dihlorometanu (20 ml) dodati su piridin (1 g, 12,5 mmol), 4-hloro fenil acetil hlorid (76b) (0,38 g, 2 mmol) i mešano je na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je razblažena sa dihlorometanom (20 ml), zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(40 ml) i mešano je nekoliko minuta. Vodeni sloj je odvojen, zakišeljen sa 1 N HCl (5 ml), i ekstrahovan sa etil acetatom (2 x 30 ml). Slojevi etil acetata su kombinovani, isprani rastvorom soli, osušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani kako bi se dobila (2R,4R)-1-(2-(4-hlorofenil)acetil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilna kiselina (76c) (0,25 g, 42% prinos) kao gumasta čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,38 (s, 1H), 7,43 - 7,17 (m, 4H), 4,34 (m, 1H), 4,05 - 3,95 (m, 1H), 3,87 - 3,77 (m, 2H), 3,68 (s, 2H), 3,52 - 3,42 (m, 2H), 3,17 (2s, 3H); MS (ES+) 320,2 (M+Na); (ES-) 296,2 (M-1), 332,2 (M+Cl).
Korak 3: Priprema (2R,4R)-1-(2-(4-hlorofenil)acetil)-N-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (76d)
[0449] Jedinjenje 76d je pripremljeno od (2R,4R)-1-(2-(4-hlorofenil)acetil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (76c) (80 mg, 0,27 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e) (0,1 g, 0,27 mmol) i etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (100 mg, 0,27 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 kako bi se dobio posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 24 g, CMA 80 u hloroformu 0 do 30%) (2R,4R)-1-(2-(4-hlorofenil)acetil)-N-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2karboksamid (76d) (0,135 g, 75%) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,42 (s, 1H), 8,55 - 8,44 (m, 2H), 7,89 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 7,41 - 7,05 (m, 8H), 5,54 (s, 1H), 4,57 - 4,42 (m, 1H), 4,07 - 3,77 (m, 3H), 3,78 - 3,68 (m, 2H), 3,65 - 3,55 (m, 1H), 3,18 (s, 3H), 2,61 (m, 3H), 2,40 - 2,22 (m, 2H), 1,18 - 1,08 (m, 10H), 1,01 - 0,81 (m, 1H), 0,70 - 0,54 (m, 1H), 0,42 - 0,29 (m, 2H), -0,02 - -0,14 (m, 2H); MS (ES+) 669,5 (M+), 691,5 (M+Na), MS (ES-) 667,5 (M-1).
Korak 4: Priprema (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(2-(4-hlorofenil)acetil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (76e)
[0450] Reakcija (2R,4R)-1-(2-(4-hlorofenil)acetil)-N-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (76d) (0,13 g, 0,19 mmol) u etanolu (10 ml) sa konc. HCl (0,2 ml) dala je posle napredovanja i prečišćavanja kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(2-(4-hlorofenil)acetil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamid (76e) (0,09 g, 86% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6, pri 350 Kelvina) δ 9,07 (s, 1H), 8,49 - 8,40 (m, 2H), 7,92 (s, 1H), 7,40 - 7,22 (m, 6H), 7,20 - 7,05 (m, 3H), 4,58 (m, 1H), 4,04 (m, 1H), 3,90 - 3,46 (m, 4H), 3,23 (s, 3H), 2,42 - 2,10 (m, 5H), 1,21 - 1,01 (m, 2H), 0,77 - 0,55 (m, 1H), 0,43 - 0,24 (m, 2H), 0,01 - -0,16 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,37; MS (ES+) 565,4, 567,3 MS (ES-) 563,4, 599,3; Optička rotacija [α]D= (+) 60,3 [0,335, MeOH]; Analiza izračunata za C31H34ClFN4O3,0,25H20: C; 65,37, H; 6,11, N; 9,84; Pronađeno: C; 65,18, H; 6,09, N; 9,63.
Priprema (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(etilamino)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (77a)
[0451] Reduktivna aminacija (2R,4R)-N2-(5-((S)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (70c) (0,1 g, 0,17 mmol) u MeOH (3 ml) upotrebom acetaldehida (0,1 ml, 1,7 mmol) i natrijum borohidrida (0,02 g, 0,53 mmol) u skladu sa procedurom koja je saopštena u Šemi 41 dala je posle napredovanja i prečišćavanja (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(etilamino)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (77a) (55 mg, 52,4% prinos) slobodnu bazu kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,46 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,44 (d, J= 6,0 Hz, 2H), 8,30 (dd, J = 2,6, 0,8 Hz, 1H), 7,95 - 7,74 (m, 3H), 7,31 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 7,17 - 7,05 (m, 2H), 4,58 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 4,09 - 3,97 (m, 1H), 3,81 - 3,63 (m, 2H), 3,20 (s, 3H), 2,44 - 2,31 (m, 4H), 2,23 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 2,16 - 2,03 (m, 2H), 0,99 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 0,94 - 0,77 (m, 2H), 0,69 - 0,53 (m, 1H), 0,39 - 0,27 (m, 2H), -0,09 - -0,19 (m, 2H); Slobodna baza je konvertovana u HCl so upotrebom konc. HCl u etanolu kako bi se dobilo jedinjenje 77a hidrohlorid kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,99 (s, 1H), 9,74 (s, 1H), 9,24 (s, 1H), 8,81 (s, 3H), 8,31 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,92 - 7,79 (m, 2H), 7,79 - 7,63 (m, 1H), 7,49 - 7,33 (m, 1H), 7,33 - 7,19 (m, 1H), 4,61 (dd, J = 8,8, 4,0 Hz, 1H), 4,13 - 3,98 (m, 1H), 3,87 - 3,61 (m, 2H), 3,21 (s, 3H), 2,96 - 2,73 (m, 1H), 2,70 -2,54 (m, 4H), 2,46 - 2,30 (m, 2H), 2,17 - 1,97 (m, 1H), 1,22 (t, J = 6,6 Hz, 3H), 1,10 - 0,77 (m, 2H), 0,73 - 0,54 (m, 1H), 0,46 - 0,26 (m, 2H), 0,02 - -0,15 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -124,33; MS (ES+) 595,3 (M+1), 617,3 (M+Na), (ES-) 593,3 (M-1), 529,3 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 77,78 [0,27, MeOH]; Analiza izračunata za C31H36ClFN6O3,2,25HCl,2,5H2O: C, 51,56; H, 6,04; Cl, 15,95; N, 11,64; Pronađeno: C, 51,48; H, 5,89; Cl, 16,23; N, 11,43.
Priprema (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(etilamino)-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (78a)
[0452] Reduktivna aminacija (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (46k) (0,68 g, 1,169 mmol) u THF/MeOH (25 ml, 4:1) upotrebom acetaldehida (6,8 ml), sirćetne kiseline (1 ml) i natrijum borohidrida (0,619 g, 16,366 mmol) u skladu sa procedurom koja je saopštena u Šemi 41 dala je posle napredovanja i prečišćavanja (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(etilamino)-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (78a) (120 mg, 16,79%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,45 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,42 - 8,09 (m, 2H), 7,98 - 7,64 (m, 3H), 7,34 - 6,98 (m, 4H), 4,68 - 4,47 (m, 1H), 4,13 - 3,90 (m, 1H), 3,84 - 3,60 (m, 2H), 3,21 (s, 3H), 2,49 (s, 2H), 2,41 (s, 3H), 2,27 - 2,17 (m, 2H), 2,14 - 2,01 (m, 3H), 0,99 (t, J = 6,5 Hz, 3H), 0,93 - 0,78 (m, 2H), 0,70 - 0,50 (m, 1H), 0,42 - 0,18 (m, 2H), -0,04 - -0,24 (m, 2H); MS (ES+) 609,5, 610,5, 611,5 (M+1); Optička rotacija [α]D= (+) 74,87 [0,195, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciklopropil-1-(metilamino)-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (79a)
[0453] Reduktivna aminacija (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (46k) (0,3 g, 0,516 mmol) u THF/MeOH (20 ml, 4:1) upotrebom paraformaldehida (0,465 g, 5,16 mmol), sirćetne kiseline (0,5 ml) i natrijum borohidrida (0,195 g, 0,516 mmol) u skladu sa procedurom koja je saopštena u Šemi 41 dala je posle napredovanja i prečišćavanja (2R,4R)-N1-(5-hloropiridin-2-il)-N2-(5-((S)-3-ciklopropil-1-(metilamino)-1-(2-metilpiridin4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (79a) (80 mg, 25,97%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,45 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,37 -8,20 (m, 2H), 7,96 - 7,74 (m, 3H), 7,30 - 6,97 (m, 4H), 4,58 (dd, J = 9,1, 3,9 Hz, 1H), 4,07 -3,98 (m, 1H), 3,82 - 3,60 (m, 2H), 3,20 (s, 3H), 2,43 - 2,38 (m, 2H), 2,40 (s, 3H), 2,20 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 2,13-2,06 (m, 1H), 1,92 (s, 3H), 0,93 - 0,75 (m, 2H), 0,68 - 0,52 (m, 1H), 0,39 -0,29 (m, 2H), -0,05 - -0,21 (m, 2H); MS (ES-) 593,5, 595,5 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 29,19 [0,185, MeOH].
Priprema (1R,3R,5R)-N3-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N2-(5-hloropiridin-2-il)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2,3-dikarboksamida (80d)
Korak 1: Priprema (1R,3R,5R)-terc-butil 3-(5-(3-ciklopropil-1-((-)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksilata (80b)
[0454] Reakcija (1R,3R,5R)-2-(terc-butoksikarbonil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilne kiseline (80a) (98 mg, 0,431 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e) (168 mg, 0,431 mmol) u tetrahidrofuranu (15 ml) upotrebom etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (107 mg, 0,431 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 dala je (1R,3R,5R)-terc-butil 3-(5-(3-ciklopropil-1-((-)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksilat (80b) (132 mg, 51% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,80 (s, 1H), 8,49 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 7,99 - 7,82 (m, 1H), 7,32 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 7,24 - 7,03 (m, 2H), 5,51 (s, 1H), 4,80 - 4,61 (m, 1H), 1,97 - 1,79 (m, 1H), 1,55 - 1,47 (m, 1H), 1,44 - 1,37 (m, 3H), 1,26 (s, 9H), 1,13 (s, 9H), 1,03 - 0,84 (m, 4H), 0,70 - 0,56 (m, 2H), 0,41 - 0,29 (m, 2H), -0,02 - -0,12 (m, 2H); MS (ES+) 599,7 (M+1), 621,7 (M+Na); Optička rotacija [α]D= (-) 30,0 [0,08, MeOH].
Korak 2: Priprema (1R,3R,5R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksamida (80c)
[0455] Reakcija (1R,3R,5R)-terc-butil 3-(5-(3-ciklopropil-1-((-)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksilata (80b) (132 mg, 0,220 mmol) u etanolu (10 ml) upotrebom konc. HCl u metanolu (0,033 ml, 1,102 mmol) nakon čega je sledilo napredovanje i prečišćavanje kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 dala je (1R,3R,5R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksamid (80c) (111 mg, 0,224 mmol, 100% prinos) hidrohloridnu so kao žutu čvrstu supstancu, koja je upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,63 (s, 2H), 9,74 (s, 2H), 9,02 - 8,76 (m, 3H), 7,81 - 7,68 (m, 3H), 7,48 - 7,30 (m, 2H), 4,78 (s, 1H), 3,37 (s, 2H), 2,75 -2,55 (m, 2H), 2,18 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 1,84 - 1,72 (m, 1H), 1,22 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 0,87 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 0,73 (d, J = 20,9 Hz, 2H), 0,39 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 0,04 (s, 2H); 19F NMR (282 MHz, DMSO) δ -122,43; MS (ES+) 395,5 (M+1); Optička rotacija [α]D= (+) 6,67 [0,09, MeOH].
Korak 3: Priprema (1R,3R,5R)-N3-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N2-(5-hloropiridin-2-il)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2,3-dikarboksamida (80d)
[0456] Reakcija (1R,3R,5R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksamida (80c) koji je dobijen u prethodno navedenom koraku 2 (49,3 mg, 0,198 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) sa fenil 5-hloropiridin-2-ilkarbamatom (13b) (49,3 mg, 0,198 mmol) upotrebom kalijuma karbonata (76 mg, 0,551 mmol) kao baze u skladu sa procedurom koja je saopštena u koraku 3 Šeme 13 dala je posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 24 g, eluiranje sa CMA 80 u hloroformu 0-40%) (1R,3R,5R)-N3-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N2-(5-hloropiridin-2-il)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2,3dikarboksamid (80d) (52 mg, 0,095 mmol, 47,8% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,77 (s, 1H), 9,23 (s, 1H), 8,52 - 8,34 (m, 2H), 8,29 (s, 1H), 7,98 -7,72 (m, 3H), 7,44 - 7,21 (m, 2H), 7,13 (d, J= 7,3 Hz, 2H), 4,93 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,83 (s, 1H), 2,68 - 2,55 (m, 1H), 2,45 - 2,30 (m, 1H), 2,27 - 2,07 (m, 2H), 1,95 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 1,76 - 1,55 (m, 1H), 1,24 (s, 1H), 1,16 - 0,95 (m, 2H), 0,91 - 0,76 (m, 1H), 0,75 - 0,53 (m, 2H), 0,43 - 0,22 (m, 2H), -0,04 - -0,24 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO) δ -122,43;<19>F NMR (282 MHz, DMSO) δ -127,55; MS (ES+) 549,6 (M+1); Optička rotacija [α]D= (+) 68,46 [0,26, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hlorotiofen-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (81h)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-1-terc-butil 2-metil 4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksilata (81a)
[0457] U rastvor (2R,4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (36a) (2,45 g, 9,99 mmol) u DMF (30 ml) dodati su K2CO3(1,381 g, 9,99 mmol), CH3I (1,249 ml, 19,98 mmol), mešano je na sobnoj temperaturi tokom 48 h, razblaženo je vodom (200 ml) i EtOAc (100 ml). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (100 ml) i kombinovani organski slojevi su isprani vodom (100 ml), rastvorom soli, osušeni (MgSO4), filtrirani, koncentrovani u vakuumu kako bi se dobio (2R,4R)-1-terc-butil 2-metil 4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksilat (81a) (2,5 g, 9,64 mmol, 97%) kao gusti sirup svetlonarandžaste boje;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 4,34 - 4,17 (m, 1H), 3,99 - 3,84 (m, 1H), 3,67 - 3,57 (m, 3H), 3,56 - 3,45 (m, 1H), 3,29 - 3,19 (m, 1H), 3,19 - 3,10 (2s, 3H, rotameri), 2,45 - 2,23 (m, 1H), 2,08 - 1,94 (m, 1H), 1,45 - 1,28 (2s, 9H, rotameri).
Korak 2: Priprema (2R,4R)-metil 4-metoksipirolidin-2-karboksilata (81b)
[0458] Reakcija (2R,4R)-1-terc-butil 2-metil 4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksilata (81a) (2,4 g, 9,26 mmol) u metanolu (40 ml) sa 3 N HCl u metanolu (9,26 ml, 27,8 mmol) dala je posle napredovanja kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 (2R,4R)-metil 4-metoksipirolidin-2-karboksilat (81b) (1,75 g, 8,94 mmol, 97% prinos) kao prljavobelu čvrstu supstancu; MS (ES+) 160,2 (M+1).
Korak 3: Priprema 5-hlorotiofen-2-karbonil azida (81d)
[0459] U rastvor 5-hlorotiofen-2-karboksilne kiseline (81c) (0,5 g, 3,08 mmol) u acetonu (20 ml) koji je ohlađen na 0 °C dodati su trietilamin (0,471 ml, 3,38 mmol), etil hloroformat (0,325 ml, 3,38 mmol) i mešano je na 0 °C tokom 1 h. U reakcionu smešu je dodat natrijum azid (0,360 g, 5,54 mmol) i nastavljeno je mešanje na 0 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je sipana u 50 ml ledene vode i ekstrahovana sa CH2Cl2(2 x 40). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 x 30) i rastvorom soli, osušeni, filtrirani i koncentrovani u vakuumu kako bi se dobio 5-hlorotiofen-2-karbonil azid (81d) (0,35 g, 1,866 mmol, 60,7% prinos) kao bela polučvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7,67 (d, 1H), 6,99 (d, 1H).
Korak 4: Priprema (2R,4R)-metil 1-(5-hlorotiofen-2-ilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilata (81e)
[0460] Rastvor 5-hlorotiofen-2-karbonil azida (81d) (0,35 g, 1,866 mmol) u toluenu zagrevan je na 100 °C tokom 2 h, ohlađen je na sobnu temperaturu i dodati su rastvor (2R,4R)-metil 4 -metoksipirolidin-2-karboksilat hidrohlorida (0,365 g, 1,866 mmol) u dihlorometanu (15 ml) i piridin (0,754 ml, 9,33 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h sipana u vodu (50 ml) i odvojeni vodeni sloj je ekstrahovan sa dihlorometanom (2 x 30 ml).
Slojevi dihlorometana su kombinovani, isprani rastvorom soli, osušeni, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije [silika gel 24 g, eluiranje sa MeOH-EtOAc (9:1) u heksanu 0 do 100%] kako bi se dobio (2R,4R)-metil 1-(5-hlorotiofen-2-ilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilat (81e) kao svetloružičasta pena (0,24 g, 0,753 mmol, 40,4% prinos);<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,78 (s, 1H), 6,77 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 6,39 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 4,52 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,01 (s, 1H), 3,61 (s, 4H), 3,49 - 3,38 (m, 1H), 3,17 (s, 3H), 2,35 - 2,11 (m, 2H); MS (ES+) 341,2 (M+Na), MS (ES-) 317,3 (M-1).
Korak 5: Priprema (2R,4R)-1-(5-hlorotiofen-2-ilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (81f)
[0461] Jedinjenje (81f) je pripremljeno hidrolizom (2R,4R)-metil 1-(5-hlorotiofen-2-ilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilata (81e) (0,24 g, 0,753 mmol) u THF (5 ml) upotrebom LiOH (0,018 g, 0,753 mmol) u vodi (3 ml) na sobnoj temperaturi u skladu sa procedurom koja je saopštena u Šemi 54 korak 3 kako bi se posle napredovanja dobila (2R,4R)-1-(5-hlorotiofen-2-ilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilna kiselina (81f) (0,205 g, 0,673 mmol, 89% prinos) kao ljubičasta pena; MS(ES+) 305,4 (M+1), 327,4 (M+Na), MS(ES-) 303,3 (M-1).
Korak 6: Priprema (2R,4R)-N1-(5-hlorotiofen-2-il)-N2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (81g)
[0462] Jedinjenje 81g je pripremljeno od (2R,4R)-1-(5-hlorotiofen-2-ilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksilne kiseline (81f) (0,1 g, 0,328 mmol), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e) (0,128 g, 0,328 mmol) i etil 2-etoksikvinolin-1(2H)-karboksilata (0,089 g, 0,361 mmol) upotrebom uslova reakcije i napredovanja kao što je saopšteno u koraku 10 Šeme 1 kako bi se dobio posle prečišćavanja pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa 0-100% 9:1 etil acetatom/metanolom u heksanima) (2R,4R)-N1-(5-hlorotiofen-2-il)-N2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (81 g) (0,037 g, 0,055 mmol, 16,67% prinos) kao prljavobela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,88 (s, 1H), 9,51 (s, 1H), 8,56 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 7,88 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 7,19 (q, J = 10,8, 9,8 Hz, 2H), 6,78 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 6,44 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 5,62 (s, 1H), 4,57 - 4,46 (m, 1H), 4,15 - 4,01 (m, 1H), 3,75 - 3,62 (m, 1H), 3,62 - 3,48 (m, 1H), 3,21 (s, 3H), 2,66 - 2,53 (m, 3H), 2,16 - 2,04 (m, 1H), 1,14 (s, 9H), 1,01 - 0,78 (m, 2H), 0,72 - 0,56 (m, 1H), 0,41 -0,28 (m, 2H), - 0,04 - -0,14 (m, 2H); MS (ES+) 676,6 (M+1), 698,6 (M+Na).
Korak 7: Priprema (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hlorotiofen-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (81h)
[0463] Reakcija (2R,4R)-N1-(5-hlorotiofen-2-il)-N2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamida (81g) (0,03 g, 0,044 mmol) u metanolu (3 ml) sa 3 N HCl u metanolu (0,074 ml, 0,222 mmol) dala je posle napredovanja i prečišćavanja kao što je saopšteno u koraku 6 Šeme 4 (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-hlorotiofen-2-il)-4-metoksipirolidin-1,2-dikarboksamid (81h) (0,015 g, 0,026 mmol, 59,1% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,86 (s, 1H), 9,46 (s, 1H), 8,44 (d, J = 4,9 Hz, 2H), 7,85 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,39 - 7,31 (m, 2H), 7,23 -7,10 (m, 2H), 6,78 (dd, J = 4,1, 1,3 Hz, 1H), 6,44 (dd, J = 4,2, 1,3 Hz, 1H), 4,51 (dd, J = 9,2, 3,7 Hz, 1H), 4,06 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 3,69 (dd, J = 10,5, 5,4 Hz, 1H), 3,53 (s, 1H), 3,20 (s, 3H), 2,25 (m, 6H), 1,17 - 0,92 (m, 2H), 0,72 - 0,56 (m, 1H), 0,41 - 0,30 (m, 2H), - 0,04 - -0,10 (m, 2H); MS 572,6 (M+1); 570,5 (M-1); Optička rotacija [α]D= (-) 27,42 [0,175, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N-(5-(-(+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(1H-indol-6-karbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (82a)
[0464] U rastvor (2R,4R)-N-(3-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (75d) (0,2 g, 0,41 mmol) u DMF (3,0 ml) dodati su DIPEA (0,3 ml); HATU (0,15 g, 0,41 mmol) i 1H-indol-6-karboksilna kiselina (0,72 g, 0,37 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, ugašena vodom (40 ml) i ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 40 ml). Organski slojevi su kombinovani, isprani rastvorom soli, osušeni, filtrirani i koncentrovani u vakuumu do suva. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel 12 g, eluiranje sa 0-10% metanolom u etil acetatu) kako bi se dobio (2R,4R)-N-(5-(+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(1H-indol-6-karbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamid (82a) (0,02 g, 10% prinos) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11,32 (s, 1H), 9,64 (s, 1H), 8,50 - 8,36 (m, 2H), 7,96 (s, 1H), 7,71 - 7,41 (m, 3H), 7,41 - 7,29 (m, 2H), 7,19 (m, 3H), 6,48 (s, 1H), 4,84 - 4,66 (m, 1H), 4,09 - 3,88 (m, 1H), 3,88 - 3,68 (m, 1H), 3,68 - 3,50 (m, 1H), 3,20 (s, 3H), 2,37 - 2,06 (m, 4H), 2,06 - 1,85 (m, 1H), 1,02 (m, 2H), 0,64 (m, 1H), 0,34 (m, 2H), -0,03 - -0,14 (m, 2H); MS (ES+) 556,7 (M+1), 578,6 (M+Na), MS (ES-) 554,6 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 54,19 [0,155, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(3-hloro-1H-indol-6-karbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (83a)
[0465] Reakcija (2R,4R)-N-(3-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (75d) (0,2 g, 0,41 mmol) u DMF (3,0 ml) upotrebom DIPEA (0,3 ml); HATU (0,15 g, 0,41 mmol) i 3-hloro-1H-indol-6-karboksilne kiseline (0,72 g, 0,37 mmol) u skladu sa procedurom kao što je saopšteno u Šemi 82 dala je (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(3-hloro-1H-indol-6-karbonil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamid (83a) (0,05 g, 28% prinos) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11,61 (s, 1H), 9,66 (s, 1H), 8,44 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 7,97 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 7,54 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,37 (m, 3H), 7,16 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 4,75 (t, J = 6,9 Hz, 1H), 3,99 (m, 2H), 3,76 (m, 1H), 3,65 - 3,49 (m, 1H), 3,19 (s, 3H), 2,32 - 2,09 (m, 4H), 2,06 - 1,87 (m, 1H), 1,13 - 0,92 (m, 2H), 0,71 - 0,56 (m, 1H), 0,42 - 0,25 (m, 2H), -0,02 - -0,13 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,16; MS (ES+) 590,7 (M+1), 612,6 (M+Na), MS(ES-) 588,6 (M-1); Optička rotacija [α]D= (+) 51,43 [0,21, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(3-amino-4-hlorobenzoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (84a)
[0466] Reakcija (2R,4R)-N-(3-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (75d) (0,44 g, 0,852 mmol) u DMF (5,0 ml) upotrebom DIPEA (0,7 ml, 3,99 mmol); EDCI (0,197 g, 1,275 mmol), HOBt (0,195 g, 1,275 mmol) i 3-amino-4-hlorobenzoeve kiseline (0,184 g, 1,064 mmol) u skladu sa procedurom kao što je saopšteno u Šemi 82 dala je (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(3-amino-4-hlorobenzoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamid (84a) (0,06 g, 12% prinos) kao prljavobelu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,64 (s, 1H), 8,53 - 8,37 (m, 2H), 7,97 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,42 - 7,32 (m, 2H), 7,25 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 6,98 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,72 (dd, J = 8,2, 1,9 Hz, 1H), 5,57 (s, 2H), 4,69 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 4,05 - 3,90 (m, 1H), 3,80 - 3,65 (m, 1H), 3,54 - 3,41 (m, 1H), 3,20 (s, 3H), 2,35 - 2,10 (m, 5H), 2,00 - 1,84 (m, 1H), 1,12 - 0,89 (m, 2H), 0,72 - 0,52 (m, 1H), 0,34 (d, J = 7,6 Hz, 2H), -0,07 (s, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,56; MS (ES+) 589,8 (M+Na), MS (ES-) 601,7 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 57,23 [0,325, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(3-amino-4-fluorobenzoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (85a)
[0467] Reakcija (2R,4R)-N-(3-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (75d) (0,44 g, 0,852 mmol) u DMF (5,0 ml) upotrebom DIPEA (0,7 ml, 3,99 mmol); EDCI (0,198 g, 1,276 mmol), HOBt (0,195 g, 1,276 mmol) i 3-amino-4-fluorobenzoeve kiseline (0,165 g, 1,064 mmol) u skladu sa procedurom kao što je saopšteno u Šemi 82 dala je (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(3-amino-4-fluorobenzoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamid (85a) (0,05 g, 10,7% prinos) kao prljavobelu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s, 1H), 8,52 - 8,38 (m, 2H), 7,98 (s, 1H), 7,48 - 7,29 (m, 2H), 7,23 - 6,92 (m, 4H), 6,73 (s, 1H), 5,30 (s, 2H), 4,76 - 4,60 (m, 1H), 4,06 - 3,87 (m, 1H), 3,80 - 3,64 (m, 1H), 3,58 - 3,34 (m, 1H), 3,20 (s, 3H), 2,37 - 2,10 (m, 5H), 2,03 - 1,82 (m, 1H), 1,11 - 0,90 (m, 2H), 0,73 - 0,53 (m, 1H), 0,42 - 0,25 (m, 2H), -0,03 - -0,16 (m, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,63, -132,44; MS (ES+) 550,7 (M+1), 572,7 (M+Na), MS (ES-) 548,6 (M-1), 584,5 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 55,43 [0,35, MeOH].
Priprema (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(3-cijanobenzoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (86a)
[0468] Reakcija (2R,4R)-N-(3-(1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (75d) (0,7 g, 1,355 mmol) u DMF (10,0 ml) upotrebom DIPEA (0,7 ml, 3,99 mmol); HATU (0,772 g, 2,032 mmol) i 3-cijanobenzoeve kiseline (0,25 g, 1,693 mmol) u skladu sa procedurom kao što je saopšteno u Šemi 82 dala je (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciklopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(3-cijanobenzoil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamid (86a) (0,07 g, 22,4% prinos) kao prljavobelu čvrstu supstancu;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,62 (s, 1H), 8,44 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 8,08 (s, 1H), 7,98 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,94 - 7,80 (m, 3H), 7,69 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,40 - 7,29 (m, 2H), 7,17 (d, J = 9,3 Hz, 2H), 4,82 - 4,65 (m, 1H), 3,99 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 3,69 (dd, J = 10,5, 5,9 Hz, 1H), 3,55 (dd, J = 10,3, 5,6 Hz, 1H), 3,19 (d, J = 1,1 Hz, 3H), 2,33 - 1,90 (m, 5H), 1,13 - 0,93 (m, 2H), 0,64 (s, 1H), 0,34 (d, J = 7,5 Hz, 2H), -0,07 (s, 2H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,51; MS (ES+) 542,7 (M+1), MS (ES-) 540,7 (M-1), 576,6 (M+Cl); Optička rotacija [α]D= (+) 49,70 [0,33, MeOH].
Priprema (2R,4R)-1-(6-hloronaftalen-2-ilsulfonil)-N-(5-((S)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (87b)
Korak 1: Priprema (2R,4R)-N-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (87a)
[0469] U mešani rastvor (2R,4R)-terc-butil 2-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilkarbamoil)-4-metoksipirolidin-1karboksilata (75c) (1 g, 1,623 mmol) u DCM (20 ml) dodat je TFA (3 ml) mešano je na sobnoj temperaturi tokom 3 h i koncentrovano pod vakuumom kako bi se dobio (2R,4R)-N-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamid (87a) 1,3 g TFA so kao prljavobela čvrsta supstanca, koja je kao takva upotrebljena u sledećem koraku; MS (ES+) 517,3 (M+l), MS (ES-) 515,2 (M-1).
Korak 2: Priprema (2R,4R)-1-(5-hloronaftalen-1-ilsulfonil)-N-(5-((+)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (87b)
[0470] U mešani rastvor (2R,4R)-N-(5-(3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamida (87a) (0,7 g, 1,355 mmol) u DCM (20 ml) dodat je N,N-diizopropiletilamin (1,2 ml, 6,775 mmol) nakon čega je sledio 5-hloronaftalen-1-sulfonil hlorid (0,354 g, 1,355 mmol) pod azotom. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h i koncentrovana u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, eluiranje sa 0-2% metanolom u etil acetatu) kako bi se dobio (2R,4R)-1-(6-hloronaftalen-2-ilsulfonil)-N-(5-((S)-3-ciklopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoksipirolidin-2-karboksamid (87b) (0,06 g, 6,96%) kao prljavobela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,44 - 9,29 (m, 1H), 8,64 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 8,49 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 8,32 - 8,21 (m, 2H), 8,17 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,07 -7,95 (m, 2H), 7,73 (dd, J = 8,8, 2,2 Hz, 1H), 7,45 -7,33 (m, 2H), 7,25 - 7,11 (m, 2H), 4,39 (dd, J = 9,6, 2,9 Hz, 1H), 3,87 -3,72 (m, 1H), 3,58 (dd, J = 10,5, 2,1 Hz, 1H), 3,11 (s, 3H), 2,34 - 2,07 (m, 3H), 1,97 - 1,77 (m, 1H), 1,36 - 1,14 (m, 9H), 1,10 - 1,03 (m, 3H), 0,93 - 0,59 (m, 2H), 0,49 - 0,26 (m, 2H), -0,01 - -0,10 (m, 2H),<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -130,08; MS (ES+): 637,7 (M+1, gubitak sulfinamin grupe); (ES-) 635,7 (M-1, gubitak sulfinamin grupe), 671,6 (M+Cl, gubitak sulfinamin grupe); Optička rotacija [α]D= (+) 83,28 [0,305, MeOH].
Primer 88
[0471] Test aktivnosti kalikreina plazme. Efekat jedinjenja iz pronalaska na aktivnost kalikreina humane plazme određen je upotrebom hromogenih supstrata (DiaPharma Group, Inc., West Chester, OH, SAD). U ovim eksperimentima, 2 nM kalikrein (Enzyme Research Laboratories, South Bend, IN, SAD) inkubiran je sa 80 μM S2302 (H-D-Pro-Phe-Arg-pnitroanilin) u odsustvu ili prisustvu rastućih koncentracija jedinjenja iz pronalaska u krajnjoj zapremini od 200 μl Tris-HCl pufera (200 mM NaCl; 2,5 mM CaCl2; 50 mM Tris-HCl, pH 7,8).
[0472] Posle inkubacije na 30 °C, aktivnost kalikreina izmerena je kao promena apsorbance na OD 405 nm upotrebom BioTek PowerWave X340 čitača mikroploča (Winooski, VT, SAD). Podaci su analizirani upotrebom SigmaPlot softvera (Systat Software, Inc., San Jose, CA, SAD) (četvoro-parametarska logistička kriva). Ki vrednosti za inhibitore određene su upotrebom Čeng-Prusof (Cheng-Prusoff) jednačine (Biochem. Pharmacol. 1973, 22, 3099).
[0473] Jedinjenja koja su objavljena u ovoj prijavi imaju Ki vrednosti manje od 1 mikromolarne (μM) za enzim kalikrein plazme. Videti Tabelu 1.

Claims (20)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje koje je predstavljeno pomoću Formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so:
    naznačeno time što, nezavisno za svako javljanje: R<1>predstavlja -OH, -OR<c>, -NH2, -NHR<c>, -NR<c>R<d>, (C1-C10)alkil, (C6-C10)aril, (C6-C10)aril(C1-C10)alkil, heteroaril, heteroaril(C1-C10)alkil, halo, halo(C1-C10)alkil, (C3-C12)cikloalkil, ((C3-C12)cikloalkil)(C1-C10)alkil, -C(O)R<c>, -C(O)OH, -C(O)OR<c>, -OC(O)R<c>, -C(O)NH2, -C(O)NHR<c>, -C(O)NR<c>R<d>, -NHC(O)R<c>, ili -NR<c>C(O)R<d>; W je -C(O)NH-; R<2>predstavlja opciono supstituisani (C6-C10)aril ili heteroaril; V predstavlja opciono supstituisani (C6-C10)aril ili heteroaril; Z je odsutan ili predstavlja jedan ili više supstituenata koji su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od halo, halo(C1-C10)alkila, -NO2, -CN, -C(O)R<c>, -C(O)OH, -C(O)OR<c>, -OC(O)R<c>, -C(O)NH2, -C(O)NHR<c>, -C(O)NR<c>R<d>, -NHC(O)R<c>, -N(R<c>)C(O)R<d>, - OS(O)p(R<c>), -NHS(O)p(R<c>), i -NR<c>S(O)p(R<c>); X predstavlja -C(NH2)-, -C(NH(R<c>))-, -C(NR<c>R<d>)-, -C(NHS(O)pR<c>)-, -C(NHC(O)R<c>)-, -C(NHC(O)NH2)-, -C(NHC(O)NHR<c>)-, -C(NHC(O)NR<c>R<d>)-, -C(OH)-, -C(O((C1-C10)alkil))-, -C(N3)-, -C(CN)-, -C(NO2)-, -C(S(O)nR<a>)-, -C[-C(=O)R<c>]-, -C[-C(=O)NR<c>R<d>]-, -C[-C(=O)SR<c>]-, -C[-S(O)R<c>]-, -C[-S(O)2R<c>]-, -C[S(O)(OR<c>)]-, -C[-S(O)2(OR<c>)]-, -C[-SO2NR<c>R<d>]-, -C(halogen)-, -C((C1-C10)alkil), -C(((C3-C12)cikloalkil)(C1-C10)alkil), -C((C2-C10)alkenil)-, -C((C2-C10)alkinil)-, ili -C((C6-C10)aril(C1-C10)alkil)-; R<3>predstavlja opciono supstituisani (C6-C10)aril, heteroaril, (C3-C12)cikloalkil, ili heterocikloalkil; R<3a>je odsutan ili predstavlja jedan ili više supstituenata koji su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od halo, hidroksi, (C1-C10)alkila, -CF3, -OCF3, (C1-C10)alkoksi, (C6-C10)arila, heteroarila, (C6-C10)ariloksi, amino, amino(C1-C10)alkila, -C(O)NH2, cijano, -NHC(O)(C1-C10)alkila, -SO2(C1-C10)alkila, -SO2NH2, (C3-C12)cikloalkila, -(CH2)rOR<a>, -NO2, -(CH2)rNR<a>R<b>, -(CH2)rC(O)R<a>, -NR<a>C(O)R<b>, -C(O)NR<c>R<d>, -NR<a>C(O)NR<c>R<d>, -C(=NR<a>)NR<c>R<d>, -NHC(=NR<a>)NR<c>R<d>, -NR<a>R<b>, -SO2NR<c>R<d>, -NR<a>SO2NR<c>R<d>, -NR<a>SO2(C1-C10)alkila, -NR<a>SO2R<a>, -S(O)pR<a>, -(CF2)rCF3, -NHCH2R<a>, -OCH2R<a>, -SCH2R<a>, -NH(CH2)2(CH2)rR<a>, -O(CH2)2(CH2)rR<a>, ili -S(CH2)2(CH2)rR<a>; Y predstavlja vezu; ili -Y-R<4>predstavlja opciono supstituisani -(C1-C10)alkilen-R<4>, -CH2C(O)-R<4>, -CH2NH-R<4>, -CH2N((C1-C10)alkil)-R<4>, -CR<a>R<b>-R<4>, -NH-R<4>, -NHCH2-R<4>, -NHC(O)-R<4>, -N((C1-C10)alkil)-R<4>, -N((C1-C10)alkil)CH2-R<4>, -N((CH2)2OH)-R<4>, -N(((C3-C12)cikloalkil)(C1-C10)alkil)R<4>, -heterociklil-R<4>, -OR<4>, -OCH2-R<4>, -OC(O)-R<4>, -OC(O)NR<a>R<b>, -SCH2R<4>, ili -SR<4>; R<4>predstavlja vodonik, hidroksi, opciono supstituisani (C1-C10)alkil, (C3-C12)cikloalkil, (heterocikloalkil)(C1-C10)alkil, ((C3-C12)cikloalkil)(C1-C10)alkil, -CH2OH, -CH((C1-C10)alkil)OH, -CH(NH2)CH((C1-C10)alkil)2, (C6-C10)aril, (C6-C10)aril(C1-C10)alkil, heteroaril, heteroaril(C1-C10)alkil, -CH2S((C1-C10)alkil), amino, ili cijano; ili -(CR<a>R<b>)r(CR<a>R<b>)p- fuzionisan za poziciju 4 prstena koji nosi Z kako bi se formirao 5- do 7-člani heterociklični prsten sa opcionionim supstituentima; ili, kada je R<3>fenil, R<4>može predstavljati -NR<a>- fuzionisan za poziciju orto prema X na tom fenilu; svaki R<a>i R<b>je nezavisno H, (C1-C10)alkil, (C2-C10)alkenil, (C2-C10)alkinil, (C6-C10)aril(C1-C10)alkil, ((C3-C12)cikloalkil)(C1-C10)alkil, -C(=O)R<c>, -C(=O)OR<c>, -C(=O)NR<c>R<d>, -C(=O)SR<c>, -S(O)R<c>, -S(O)2R<c>, -S(O)(OR<c>), ili -SO2NR<c>R<d>; R<c>i R<d>predstavljaju, nezavisno za svako javljanje, opciono supstituisani (C1-C10)alkil, (C2-C10)alkenil, (C2-C10)alkinil, halo(C1-C10)alkil, (C6-C10)aril, (C6-C10)aril(C1-C10)alkil, heteroaril, heteroaril(C1-C10)alkil, (C3-C12)cikloalkil, ((C3-C12)cikloalkil)(C1-C10)alkil, heterocikloalkil, (heterocikloalkil)(C1-C10)alkil, -C(O)(C1-C10)alkil, ili -S(O)p((C1-C10)alkil); ili R<c>i R<d>mogu biti uzeti zajedno tako da formiraju opciono supstituisani heterociklični prsten; r je 0, 1, 2, ili 3; n je ceo broj od 0 do 6; i p je 0, 1, ili 2; dodatno pri čemu: "heteroaril" znači monociklični, biciklični, ili policiklični aromatični prsten koji ima 3-12 ukupnih atoma i najmanje jedan heteroatom koji je odabran iz grupe koja sa sastoji od azota, kiseonika, i sumpora; "heterociklični", "heterocikloalkil", i "heterociklil" znače monociklični, biciklični, ili triciklični nearomatični prsten koji ima 3-12 ukupnih atoma i najmanje jedan heteroatom koji je odabran iz grupe koja sa sastoji od azota, kiseonika, i sumpora; i "opciono supstituisano" znači nesupstituisano ili supstituisano sa jednim ili više supstituenata svaki nezavisno odabran iz grupe koja sa sastoji od halogena, azida, (C1-C10)alkila, (C6-C10)aril(C1-C10)alkila, (C2-C10)alkenila, (C2-C10)alkinila, (C3-C12)cikloalkila, hidroksila, (C1-C10)alkoksi, amino (npr. -NH2, -NH((C1-C6)alkil), -N((C1-C6)alkil)2), nitro, sulfhidrila, imino, amido, fosfonata, fosfinata, karbonila, karboksila, silila, etra, (C1-C10)alkiltio, sulfonila, sulfonamido, ketona, aldehida, estra, heterociklila, (C6-C10)arila, heteroarila, fluoro(C1-C10)alkila, cijano, -C(O)O(C1-C6)alkila, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6)alkila, -C(O)N((C1-C6)alkil)2, i (C1-C6)haloalkila.
  2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što R<1>predstavlja -OH, -OR<c>, -NH2, -NHR<c>, -NR<c>R<d>, (C1-C10)alkil, (C6-C10)aril, heteroaril, halo, halo(C1-C10)alkil, (C3-C12)cikloalkil, -OC(O)R<c>, -NHC(O)R<c>, ili -NR<c>C(O)R<d>.
  3. 3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 2, naznačeno time što R<1>predstavlja -OH, -OR<c>, -NH2, (C1-C10)alkil, (C6-C10)aril, halo, halo(C1-C10)alkil, (C3-C12)cikloalkil, ili -OC(O)R<c>; i pri čemu je n 1 ili je n 2.
  4. 4. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 3, naznačeno time što je n 1; i pri čemu R<1>predstavlja -OH, -O((C1-C6)alkil), -OC(O)((C1-C6)alkil), -NH2, ili (C1-C6)alkil.
  5. 5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 3, naznačeno time što je n 2; i pri čemu su dva javljanja R<1>geminalna.
  6. 6. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 5, naznačeno time što: (a) jedno javljanje R<1>predstavlja -OH ili -OR<c>; i drugo javljanje R<1>predstavlja (C6-C10)aril ili heteroaril; (b) jedno javljanje R<1>predstavlja -OH ili -OR<c>; i drugo javljanje R<1>predstavlja halo(C1-C10)alkil; ili (c) oba javljanja R<1>su halo.
  7. 7. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što R<2>predstavlja (C6-C10)aril ili heteroaril, supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji su odabrani iz grupe koja se sastoji od -OH, halo, -NH2, -NH((C1-C6)alkil), -N((C1-C6)alkil)2, -CN, -NO2, (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, (C1-C6)alkoksi, -C(O)OH, -C(O)O(C1-C6)alkila, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6)alkila, i -C(O)N((C1-C6)alkil)2; poželjno pri čemu R<2>predstavlja (halo)(C6-C10)aril ili (halo)heteroaril.
  8. 8. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-7, naznačeno time što V predstavlja opciono supstituisani (C6-C10)aril.
  9. 9. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-8, naznačeno time što je Z odsutan, ili pri čemu Z predstavlja jedan ili više supstituenata koji su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od halo, halo(C1-C10)alkila, -NO2, i -CN.
  10. 10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 9, naznačeno time što Z predstavlja jedan primer halo; ili pri čemu Z predstavlja jedan primer fluoro.
  11. 11. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-10, naznačeno time što X predstavlja -C(NH2)-, -C(NH(R<c>))-, -C(NR<c>R<d>)-, -C(NHS(O)pR<c>)-, -C(NHC(O)R<c>)-, -C(NHC(O)NH2)-, -C(NHC(O)NHR<c>)-, ili -C(NHC(O)NR<c>R<d>)-.
  12. 12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 11 naznačeno time što X predstavlja -C(NH2)-; -C(NH((C3-C12)cikloalkil) (C1-C10)alkil)-; -C(NH(C1-C6)alkil)-; -C(NHS(O)p(C1-C6)alkil)-, pri čemu je p 1 ili 2; opciono supstituisan -C(NHC(O)NH((C6-C10)aril))-; opciono supstituisan C(NHC(O)NH(heteroaril))-; ili -C(NHC(O)((C1-C6)alkil))-.
  13. 13. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12, naznačeno time što R<3>predstavlja opciono supstituisani (C6-C10)aril ili opciono supstituisani heteroaril, poželjno pri čemu R<3>predstavlja fenil, opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji su odabrani iz grupe koja se sastoji od -CN, halo, -NO2, (C1-C6)alkila, i (C1-C6)haloalkila; ili pri čemu R<3>predstavlja piridil.
  14. 14. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-13, naznačeno time što je R<3a>odsutan ili predstavlja halo, (C1-C10)alkil, -CF3, -OCF3, (C6-C10)aril, heteroaril, -C(O)NH2, cijano, -NHC(O)(C1-C10)alkil, -SO2(C1-C10)alkil, -SO2NH2, -NO2, -NR<a>C(O)R<b>, -C(O)NR<c>R<d>, -NR<a>C(O)NR<c>R<d>, -C(=NR<a>)NR<c>R<d>, -NHC(=NR<a>)NR<c>R<d>, -SO2NR<c>R<d>, -NR<a>SO2NR<c>R<d>, -NR<a>SO2(C1-C10)alkil, -NR<a>SO2R<a>, -S(O)pR<a>, ili -(CF2)rCF3.
  15. 15. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-14, naznačeno time što Y predstavlja vezu i/ili pri čemu R<4>predstavlja H, ((C3-C12)cikloalkil) (C1-C10)alkil, ili (ciklopropil)(C1-C6)alkil.
  16. 16. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, koje je odabrano iz sledeće tabele:
  17. 17. Farmaceutska kompozicija, naznačena time što sadrži jedinjenje prema bilo kom od patentih zahteva 1-16, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i farmaceutski prihvatljiv nosač, opciono pri čemu je farmaceutska kompozicija formulisana za parenteralnu primenu ili oralnu primenu.
  18. 18. Jedinjenje prema bilo kom od patentih zahteva 1-16, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u lečenju ili prevenciji bolesti ili stanja koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme; pri čemu je bolest ili stanje koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme odabrano iz grupe koja se sastoji od moždanog udara, inflamacije, reperfuzione povrede, akutnog infarkta miokarda, duboke venske tromboze, stanja posle fibrinolitičkog lečenja, angine, edema, angioedema, naslednog angioedema, sepse, artritisa, krvarenja, gubitka krvi tokom kardiopulmonarnog bajpasa, inflamatorne bolesti creva, dijabetes melitusa, retinopatije, dijabetičke retinopatije, dijabetičkog makularnog edema, dijabetičke makularne degeneracije, makularnog edema koji je povezan sa starošću, makularne degeneracije koja je povezana sa starošću, proliferativne retinopatije, neuropatije, hipertenzije, edema mozga, povećanog izlučivanja albumina, makroalbuminurije, i nefropatije.
  19. 19. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 18, naznačeno time što je bolest ili stanje koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme angioedem.
  20. 20. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 18, naznačeno time što je bolest ili stanje koje karakteriše neželjena aktivnost kalikreina plazme nasledni angioedem. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Kneginje Ljubice 5, 11000 Beograd 249
RS20240467A 2015-10-01 2016-09-30 Inhibitori kalikreina humane plazme RS65443B1 (sr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562235754P 2015-10-01 2015-10-01
EP21205884.6A EP4019022B1 (en) 2015-10-01 2016-09-30 Human plasma kallikrein inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS65443B1 true RS65443B1 (sr) 2024-05-31

Family

ID=58424336

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20240467A RS65443B1 (sr) 2015-10-01 2016-09-30 Inhibitori kalikreina humane plazme
RS20220035A RS62807B1 (sr) 2015-10-01 2016-09-30 Inhibitori humanog kalikreina plazme

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20220035A RS62807B1 (sr) 2015-10-01 2016-09-30 Inhibitori humanog kalikreina plazme

Country Status (31)

Country Link
US (3) US10562850B2 (sr)
EP (2) EP4019022B1 (sr)
JP (2) JP6916171B2 (sr)
KR (1) KR102696432B1 (sr)
CN (2) CN108289893B (sr)
AR (1) AR106241A1 (sr)
AU (2) AU2016330926B2 (sr)
CA (1) CA2999164A1 (sr)
CO (1) CO2018004572A2 (sr)
CY (1) CY1124907T1 (sr)
DK (2) DK4019022T3 (sr)
EA (2) EA202191548A1 (sr)
ES (2) ES2905401T3 (sr)
FI (1) FI4019022T3 (sr)
HR (2) HRP20220059T1 (sr)
HU (2) HUE057106T2 (sr)
IL (3) IL291268B2 (sr)
LT (2) LT4019022T (sr)
MA (1) MA43052B1 (sr)
MD (1) MD3355890T2 (sr)
MX (2) MX385687B (sr)
MY (1) MY198346A (sr)
PH (2) PH12022550143A1 (sr)
PL (2) PL3355890T3 (sr)
PT (2) PT3355890T (sr)
RS (2) RS65443B1 (sr)
SG (1) SG10202003705WA (sr)
SI (2) SI4019022T1 (sr)
SM (2) SMT202400111T1 (sr)
TW (2) TWI734702B (sr)
WO (1) WO2017059178A1 (sr)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK4019022T3 (en) * 2015-10-01 2024-02-19 Biocryst Pharm Inc Human plasma kallikrein inhibitors
WO2019028362A1 (en) * 2017-08-04 2019-02-07 Dyax Corp. INHIBITORS OF PLASMATIC KALLIKREIN AND USES THEREOF
US20230022157A1 (en) 2018-08-20 2023-01-26 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compounds for the treatment of complement factor d medical disorders
JP7443375B2 (ja) 2018-09-06 2024-03-05 アキリオン ファーマシューティカルズ， インコーポレーテッド 医学的障害の治療のための大環状化合物
UY38438A (es) 2018-11-02 2020-05-29 Biocryst Pharm Inc Sales cristalinas de un inhibidor de calicreína plasmática
CN110938077B (zh) * 2019-12-25 2021-04-27 武汉九州钰民医药科技有限公司 合成Avapritinib的方法
TW202144331A (zh) * 2020-02-13 2021-12-01 德商百靈佳殷格翰國際股份有限公司 作為血漿激肽釋放酶抑制劑之雜芳族甲醯胺衍生物
CN115362162A (zh) 2020-02-20 2022-11-18 艾其林医药公司 用于治疗补体因子d介导的障碍的杂芳基化合物
CN116444485B (zh) * 2023-03-30 2024-01-23 广西中医药大学 吡啶基取代不对称脲的非金属催化、免柱层析合成方法

Family Cites Families (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4559157A (en) 1983-04-21 1985-12-17 Creative Products Resource Associates, Ltd. Cosmetic applicator useful for skin moisturizing
LU84979A1 (fr) 1983-08-30 1985-04-24 Oreal Composition cosmetique ou pharmaceutique sous forme aqueuse ou anhydre dont la phase grasse contient un polyether oligomere et polyethers oligomeres nouveaux
LU86084A1 (fr) 1985-09-20 1987-04-02 Faco Sa Apparei de massage electrique
US5102417A (en) 1985-11-07 1992-04-07 Expandable Grafts Partnership Expandable intraluminal graft, and method and apparatus for implanting an expandable intraluminal graft
US4800882A (en) 1987-03-13 1989-01-31 Cook Incorporated Endovascular stent and delivery system
US4820508A (en) 1987-06-23 1989-04-11 Neutrogena Corporation Skin protective composition
US4886062A (en) 1987-10-19 1989-12-12 Medtronic, Inc. Intravascular radially expandable stent and method of implant
US4992478A (en) 1988-04-04 1991-02-12 Warner-Lambert Company Antiinflammatory skin moisturizing composition and method of preparing same
US4938949A (en) 1988-09-12 1990-07-03 University Of New York Treatment of damaged bone marrow and dosage units therefor
WO1990013332A1 (en) 1989-05-11 1990-11-15 Cedars-Sinai Medical Center Stent with sustained drug delivery
DE69110787T2 (de) 1990-02-28 1996-04-04 Medtronic, Inc., Minneapolis, Minn. Intraluminale prothese mit wirkstoffeluierung.
US5429634A (en) 1993-09-09 1995-07-04 Pdt Systems Biogenic implant for drug delivery and method
US5419760A (en) 1993-01-08 1995-05-30 Pdt Systems, Inc. Medicament dispensing stent for prevention of restenosis of a blood vessel
CA2170030A1 (en) * 1993-09-14 1995-03-23 Robert A. Lazarus Pharmaceutical compositions containing ecotin and homologs thereof
US6774278B1 (en) 1995-06-07 2004-08-10 Cook Incorporated Coated implantable medical device
DE69718194T2 (de) * 1996-08-16 2003-10-16 Bristol-Myers Squibb Pharma Co., Wilmington Amidinophenyl-pyrrolidine, -pyrroline und -isoxazolidine und ihre derivate
EP1217000A1 (en) 2000-12-23 2002-06-26 Aventis Pharma Deutschland GmbH Inhibitors of factor Xa and factor VIIa
CN104744461A (zh) 2001-09-21 2015-07-01 百时美施贵宝公司 含有内酰胺的化合物及其衍生物作为Xa因子的抑制剂
US7030141B2 (en) * 2001-11-29 2006-04-18 Christopher Franklin Bigge Inhibitors of factor Xa and other serine proteases involved in the coagulation cascade
US6770729B2 (en) 2002-09-30 2004-08-03 Medtronic Minimed, Inc. Polymer compositions containing bioactive agents and methods for their use
DE10301300B4 (de) * 2003-01-15 2009-07-16 Curacyte Chemistry Gmbh Verwendung von acylierten 4-Amidino- und 4-Guanidinobenzylaminen zur Inhibierung von Plasmakallikrein
US7122557B2 (en) 2003-03-18 2006-10-17 Bristol-Myers Squibb Company Sulfonyl-amidino-containing and tetrahydropyrimidino-containing compounds as factor Xa inhibitors
DE10315377A1 (de) * 2003-04-03 2004-10-14 Merck Patent Gmbh Carbonylverbindungen
PL377633A1 (pl) * 2003-04-03 2006-02-06 Merck Patent Gmbh Związki karbonylowe
US7199149B2 (en) 2003-10-01 2007-04-03 Bristol Myers Squibb Company Monocyclic and bicyclic lactams as factor Xa inhibitors
DE102004014945A1 (de) * 2004-03-26 2005-10-13 Merck Patent Gmbh Prolinylderivate
TW201311689A (zh) 2011-08-05 2013-03-16 必治妥美雅史谷比公司 作為因子ｘｉａ抑制劑之新穎巨環化合物
US20140378474A1 (en) 2012-01-27 2014-12-25 Novartis Ag 5-membered heteroarylcarboxamide derivatives as plasma kallikrein inhibitors
EP2807156A1 (en) 2012-01-27 2014-12-03 Novartis AG Aminopyridine derivatives as plasma kallikrein inhibitors
ES2617863T3 (es) 2012-06-04 2017-06-20 Actelion Pharmaceuticals Ltd. Derivados de bencimidazol-prolina
GB201300304D0 (en) 2013-01-08 2013-02-20 Kalvista Pharmaceuticals Ltd Benzylamine derivatives
CA2939326A1 (en) 2014-01-14 2015-07-23 Sumitomo Dainippon Pharma Co., Ltd. Condensed 5-oxazolidinone derivative
KR102736869B1 (ko) * 2014-03-07 2024-12-02 바이오크리스트파마슈티컬즈,인코포레이티드 인간 혈장 칼리크레인 저해제
GB201421083D0 (en) 2014-11-27 2015-01-14 Kalvista Pharmaceuticals Ltd Enzyme inhibitors
RU2017131562A (ru) 2015-02-27 2019-03-27 Версеон Корпорейшн Замещенные пиразольные соединения как ингибиторы сериновых протеаз
DK4019022T3 (en) 2015-10-01 2024-02-19 Biocryst Pharm Inc Human plasma kallikrein inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
HUE057106T2 (hu) 2022-04-28
PL4019022T3 (pl) 2024-06-24
AU2016330926A1 (en) 2018-04-26
DK3355890T3 (da) 2022-01-03
EP4019022A1 (en) 2022-06-29
BR112018005843A2 (pt) 2018-10-16
MY198346A (en) 2023-08-28
IL258104B (en) 2021-03-25
EP3355890A4 (en) 2019-04-24
LT4019022T (lt) 2024-03-25
TWI734702B (zh) 2021-08-01
HUE066999T2 (hu) 2024-10-28
JP6916171B2 (ja) 2021-08-11
EA201890862A1 (ru) 2018-10-31
MX2021010297A (es) 2021-10-22
US20200361867A1 (en) 2020-11-19
JP2021169505A (ja) 2021-10-28
ES2985200T3 (es) 2024-11-04
SMT202400111T1 (it) 2024-05-14
CN108289893B (zh) 2022-04-12
IL291268B1 (en) 2023-08-01
KR102696432B1 (ko) 2024-08-16
KR20180058815A (ko) 2018-06-01
IL258104A (en) 2018-05-31
IL291268B2 (en) 2023-12-01
PT4019022T (pt) 2024-03-11
US11807605B2 (en) 2023-11-07
PL3355890T3 (pl) 2022-02-21
MX385687B (es) 2025-03-18
JP7431778B2 (ja) 2024-02-15
IL291268A (en) 2022-05-01
HRP20240557T1 (hr) 2024-07-05
CN108289893A (zh) 2018-07-17
HRP20240557T8 (hr) 2024-09-27
NZ741030A (en) 2024-12-20
ES2905401T3 (es) 2022-04-08
AU2016330926B2 (en) 2021-04-29
TW202136212A (zh) 2021-10-01
MD3355890T2 (ro) 2022-03-31
SI3355890T1 (sl) 2022-04-29
JP2018529721A (ja) 2018-10-11
TWI796714B (zh) 2023-03-21
CO2018004572A2 (es) 2018-10-31
DK4019022T3 (en) 2024-02-19
HRP20220059T1 (hr) 2022-04-15
US20180362458A1 (en) 2018-12-20
RS62807B1 (sr) 2022-02-28
EP3355890A1 (en) 2018-08-08
FI4019022T3 (fi) 2024-04-19
CN114591212B (zh) 2025-01-28
SMT202200075T1 (it) 2022-03-21
IL281066A (en) 2021-04-29
PT3355890T (pt) 2022-01-19
LT3355890T (lt) 2021-12-27
IL281066B (en) 2022-04-01
WO2017059178A1 (en) 2017-04-06
CY1124907T1 (el) 2023-01-05
HK1254865A1 (en) 2019-07-26
US20220098151A1 (en) 2022-03-31
CA2999164A1 (en) 2017-04-06
MA43052B1 (fr) 2021-11-30
EA038492B1 (ru) 2021-09-07
PH12018500678A1 (en) 2018-10-01
US11066360B2 (en) 2021-07-20
TW201716381A (zh) 2017-05-16
AU2021201924A1 (en) 2021-04-29
AU2021201924B2 (en) 2022-10-13
AR106241A1 (es) 2017-12-27
EA202191548A1 (ru) 2021-09-02
SG10202003705WA (en) 2020-06-29
PH12022550143A1 (en) 2022-11-21
EP4019022B1 (en) 2024-01-31
MA43052A (fr) 2021-05-12
MX2018003930A (es) 2018-09-18
SI4019022T1 (sl) 2024-06-28
CN114591212A (zh) 2022-06-07
US10562850B2 (en) 2020-02-18
EP3355890B1 (en) 2021-11-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2021201924B2 (en) Human plasma kallikrein inhibitors
JP6915003B2 (ja) ヒト血漿カリクレイン阻害剤
HK40075971B (en) Human plasma kallikrein inhibitors
HK40075971A (en) Human plasma kallikrein inhibitors
EA048195B1 (ru) Ингибиторы плазменного калликреина человека
BR112018005843B1 (pt) Compostos inibidores de calicreína de plasma humano
HK1254865B (en) Human plasma kallikrein inhibitors