JP2633609B2

JP2633609B2 - 虚血性疾患治療剤

Info

Publication number: JP2633609B2
Application number: JP63058803A
Authority: JP
Inventors: 晟八木; 聰竹尾
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1988-03-11
Filing date: 1988-03-11
Publication date: 1997-07-23
Anticipated expiration: 2012-07-23
Also published as: JPH01233215A

Description

【発明の詳細な説明】【産業上の利用分野】

本発明は、漢薬「丹参」中のジテルペン成分タンシノ
ンVI（Tanshinone VI）を有効成分とする虚血性疾患治
療剤に関する。

【従来の技術】

（背景）狭心症や心筋梗塞のような虚血性疾患は、主として冠
状動脈の狭窄による心筋への血行障害により起こり、
癌、心不全と共に致死的成人病中重要な位置を占めてい
る。しかしこれまで本症の治療に用いられてきた薬剤
は、コレステロール低下剤や血管拡張剤が主流であっ
て、心筋細胞膜障害の抑制や虚血時における心筋保護を
意図した薬剤は開発されていない。近年に至り、古来の和漢薬の効果が見直され、植物由
来の漢薬の中、狭心痛の緩解及び冠状動脈の拡張に基づ
く心機能の回復や自覚症状（目まい、立ちくらみ、手足
の冷感）の改善効果を奏するとされるものも多数報告さ
れているが、それらの病態生理学的・薬理学的評価は乏
しく、とりわけそれらに含まれる心筋梗塞、狭心症等の
虚血性疾患に対する活性物質に関する研究は皆無に均し
い。ところで、漢薬「丹参」（又は紫参）はシソ科（Labi
atae）の植物Salvia miltiorrhiza Bge.の根の乾燥物で
あって、従来から漢方における理血薬（血行改善剤）と
して狭心症、心筋梗塞の治療に利用されてきたが、その
有効成分に関してはこれまで知られていなかった。そこ
で本発明者らは研究の結果、先に特願昭62−102583号の
発明をし、丹参中から単離されたフェナントレンキン化
合物、タンシノンＩ（Tanshinone I）（下式）が、虚血性心疾患病態モデルによる検索の結果、再正常化時
の心筋収縮力回復の促進、冠状動脈血管の拡張及びATP
代謝産物の遊離抑制等の有意義な対虚血性疾患的薬理作
用を有すること、並びにその他の単離成分は、無効であ
るか又は冠状動脈の収縮など、却って毒性作用を有する
事実を見出した。

【発明が解決しようとする課題】しかるにその後の研究の結果、丹参の酢酸エチル抽出
エキスをシリカゲルクロマトグラフィーに付すことによ
って、新規な対虚血性疾患的薬理作用を有する新規なフ
ェナントレン化合物、タンシノンＶ（Tanshinone V）及
びタンシノンVI（Tanshinone VI）（下式）が取得さ
れ、かつ特に後者のタンシノンVIが顕著対虚血性作用を
有する事実を知得した。

【発明が解決しようとする課題】

従って、本発明は、丹参中の有効成分タンシノンVIを
利用して、虚血性疾患の救急、治療及び予防のため有効
な手段を開発するのを目的とする。

【課題を解決するための手段】

以上の目的を達成するため、本発明の要旨は、タンシ
ノンVI（Tanshinone VI）を有効成分とする虚血性疾患
治療剤に在する。以下、発明に関連する重要な事項に付
き記述する。［タンシノンVIの単離］タンシノンVIは、市販の丹参（Salvia miltiorrhiza
Bge.の根の乾燥物）を原料として、例えばこれをヘキサ
ンで前抽出して不純物を除去した後、酢酸エチルで抽出
し、次いでシリカゲルクロマトグラフィー等の慣用の精
製手段を用いて精製することにより得られる（第１図参
照）。目的のタンシノンVIの他、類似構造を有するタン
シノンＶが夫々単離・同定された。 §２［タンシノンＶ及びVIの構造、物理・化学的性状］（Ａ）使用試薬及び機器 TLC−１（クロロホルム）、TLC−２（ヘキサン：酢酸エ
チル＝8:2）、TLC−３（クロロホルム：メタノール＝1:
1;セファデックス LH20（Pharmacia）．シリカゲル：キーゼルゲル60（70−230メッシュ）メル
ク；融点測定：柳本融点測定器、¹HNMR JEOL PMX60;MS
測定：島津質量分析計GOKS−6020、IR測定:Shimadzu IR
−420、UV測定:Shimadzu分光光度計UV−260。（Ｂ）化学構造上式の通り、両者共にフェナントレン環のＣ環にキノ
ン態酸素が結合した化合物であって、タンシノンVIの正
式の化学名は、１−ヒドロキシ−２−（α−ヒドロキシ
メチルエチル）−８−メチルフェナントレン−3,4−ジ
オンである。（Ｃ）物理・化学的性状タンシノンＶ性状：橙赤色粉末状旋光度：▲［α］³⁰ _D▼＋5.0゜マススペクトル:m/z:314（M⁺）核磁気共鳴スペクトル:¹⁺HNMR（CDCl₃）δ:1.25（6H,ge
m,CH₃）,1.64（3H,d,J＝6,CH−CH₃）,3.19（2H.m,CH₂O
H）,3.87（1H,m,CH−CH₃）,7.60（1H,d,J＝8,C₉H）,7.9
0（1H,d,J＝8,C₁₀H）¹³C−NMRδ:65.3（CH₂OH）,142.4
（−Ｃ−OH）。タンシノンVI 性状：橙赤色針状晶融点:206〜208℃ 旋光度：▲［α］³⁰ _D▼＋47.0゜マススペクトル:m/z:296（M⁺）核磁気共鳴スペクトル:¹⁺HNMR（CDCl₃）δ:1.50（3H,d,
J＝6,CH−CH₃）,2.75（3H,s,C₈−CH₃）,3.20（2H.m,CH₂
OH）,3.80（1H,m,CH−CH₃,7.02−7.20（3H,m,C₆,₇,
₉H）,8.20（1H,d,J＝8,C₁₀H）,9.20（1H,d,J＝8,C₅H）.
¹³C−NMRδ:63.7（CH₂OH）,146.9（−Ｃ−OH）。 §３［低酸素化心筋モデルに対するタンシノンＶ及びVI
の作用］（１）実験方法実験には、ラット（ウィスター系、♂、体重150〜200
g）の摘出心臓を用い、ランゲンドルフ（Langendorff）
法により潅流し、搏動状態を維持させた。潅流液にはク
レブス−ヘンセライト（Krebs−Henseueit）液（1.20mM
KH₂PO₄,1.25mM CaCl₂,1.20mM MgSO₄,4.80mM KCl,120mM
NaCl,25mM NaHCO₃）に、11mMのグルコースを添加し、95
％酸素及び５％二酸化炭素を、又は11mMのマンニトール
を添加し、95％窒素及び５％二酸化炭素を夫々飽和させ
たものを使用した。予備潅流及び再酸素化には前者の液
を、低酸素負荷には後者の液を、夫々使用した。摘出心
臓は7ml/分の条件で潅流し、270心拍／分の割合で駆動
させた。心収縮力、潅流圧等のパラメータは、日本光電
製ポリグラフにより記録した。被検薬剤の投与法：各薬剤（1.80×10⁴M〜10³M）を
10〜10⁶倍に希釈し、これらの希釈液を30〜100μづつ
潅流液中に投与した。なお、薬剤は10〜50％のプロピレ
ングリコールに溶かし、これを更に水で希釈した。投与
にはインヒュージョンポンプ（テルモ製モデルSTC521）
を用い、0,1ml/分の割合で潅流液中へ投与した。低酸素負荷及び再酸素化法：摘出心臓への低酸素負
荷は、上記マンニトール加、95％窒素及び５％二酸化炭
素飽和クレブス−ヘンゼライト液を15分間潅流して行っ
た。また再酸素化による心機能回復操作は45分間実施し
た。モニタリング：低酸素負荷及び再酸素化時には、心
臓の収縮力、静止張力及び冠潅流圧を連続記録した。ま
た、心筋細胞膜透過性亢進の指標として、心筋組織から
のクレアチンキナーゼ酵素の遊離及びATP代謝産物の遊
離を把握した。このため、心臓からの流出液を経時的に
採取し、潅流液のクレアチンキナーゼ活性及び250nmに
おける吸光度を分光光度計を用いて測定した。（２）タンシノンＶ及VIの薬理作用（Ａ）摘出潅流心臓への薬剤の直接作用タンシノンＶ及びタンシノンVI共に10ナノモルの濃度
で若干の心収縮力抑制、潅流圧上昇（共に10％以内）が
認められた。100ナノモルでは20％の潅流圧低下及び強
い心収縮力抑制（35〜50％）が観察された。一般に、多
少の心収縮抑制は虚血性心疾患の治療に好ましいと云え
るが、抑制の程度が強すぎると治療上好ましくない。故
に臨床的には、両者は10ナノモル以下の濃度で使用する
のが適用であると思われる。（Ｂ）低酸素負荷心臓に対する薬理作用摘出潅流心臓に低酸素負荷をかけると、負荷をかけた
直後より心収縮力が速やかに減少すると同時に、静止張
力が上昇し始め、その後に心収縮力の消失後、静止張力
及び潅流圧の急激な上昇が観察された。再酸素化により
潅流圧は低酸素負荷前のレベルに戻る傾向があるが、心
収縮力及び静止張力は再酸素化45分後でも殆ど回復せ
ず、心機能は停止したままとなる。この病態モデルで
は、再酸素化45分後の心収縮力は、初期値の21％、潅流
圧は、同じく106％、静止張力は、同じく150.0％であっ
た。また、低酸素負荷及び再酸素化期間中における心筋
組織からの紫外線吸収物質の量は著しく増加した。この
増加は、ATP代謝産物の遊離に因るものであることがと
確認されている（S.Takeo et al.,J.Pharm.Exp.Ther.24
3,1131,1987）。ところが、タンシノンVIを低酸素化と同時に潅流液中
に添加すると、その後の再潅流時に心筋収縮力の有意な
回復が見られる。これは本薬剤の低酸素負荷時における
心筋保護作用を示すものと解される。即ち、タンシノンVIは、300ピコモル／分の低酸素負
荷期間中の連続注入により、再酸素化後の心収縮力を48
％回復させ（第２図）、かつ潅流液中へのATP代謝物遊
離を無投与の場合に比較して有意に抑制した（第３
図）。但し、静止張力上昇抑制は認められなかった（第
４図）。潅流圧は、低酸素負荷時にはタンシノンVIの投与によ
り影響を受けなかったが、再酸素化期には明らかに元の
レベルの回復を促進する傾向が見られた（第５図）。さ
らに細胞膜透過性亢進の指標とされるアクエチンキナー
ゼの心筋からの遊離量は、低酸素負荷20分目で17％、再
酸素化45分目で12％の抑制を示した。再酸素化開始後45分経過後における高エネルギーリン
酸化合物（ATP及びクレアチンホスフェート）の含量
は、タンシノンVIの投与により有意に回復した（第６
図）。低酸素負荷による心筋細胞障害の大きさは、潅流液中
にATP代謝産物の量により推測されることが竹尾らによ
り報告されている（S.Takeo and M,Sakanishi,J.Mol.Ce
ll Cardiol.15,577−594,1083及びTakeo et al.Can.J.C
ardiol.1988,印刷中）。）。恐らく、タンシノンVIは、
低酸素負荷時に細胞膜に直接作用することにより、膜透
過性亢進が起こるのを防ぎ、ATP再生に必要な基質の遊
離を抑制し、これにより再酸素化時における心筋のエネ
ルギー産生を促進する作用を奏するのであろう。（Ｃ）結論以上の実験事実から、本発明の薬剤は、冠動脈血管の
慢性的な狭窄又は急激な攣縮による虚血状態に対し、予
防、治療乃至救急的効果を奏する薬剤として効果が期待
される。投与方法としては、動脈内への注射乃至静脈へ
の点滴が適当である。

【実施例】

日本薬局方製剤総則注射剤の項（Ａ−107）に準じ
て、２％のタンシノンVIを含む10ml入り注射用及び20ml
入り点滴用各薬剤を調製した。以上の薬剤は、通常、注射用の場合は虚血性疾患に対
し一回筒を静脈内に、点滴用の場合は１〜２筒を輪液中
に混ぜて投与する。

【発明の効果】

以上説明したように、本発明は、これまで漢方におけ
る理血薬（血行改善剤）として、伝統的に狂心症、心筋
梗塞の治療に利用されて来たとは言いながら、その薬理
的評価が不明であった丹参の有効成分を解明し、かつそ
の有毒成分を除いた薬効成分のみの臨床的応用を可能な
らしめたことにより、人類の健康維持乃至増進に寄与し
うる。

【図面の簡単な説明】

第１図は、タンシノンＶ及びタンシノンVIの製造工程の
一例を示す工程図、第２図は、タンシノンVIによる心筋
収縮力の回復を示すグラフ、第３図は、タンシノンVIに
よる心臓潅流液の紫外線吸収量抑制を示すグラフ、第４
図は、タンシノンVIの心臓静止張力への影響を示すグラ
フ、第５図は、タンシノンVIの心臓潅流圧回復作用を示
すグラフ、第６図は、乾燥心筋中の高エネルギーリン酸
化合物含量に対するタンシノンVIの影響を示すグラフで
ある。

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】タンシノンVI（Tanshinone VI）を有効成
分とする虚血性疾患治療剤。