JP2765155B2 - ピリジニウムナイトレート - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は医薬として有用なピリジニウム誘導体に関す
る。さらに詳しくは本発明は血小板活性化因子（PAF）
拮抗剤として有用な式 で表わされる化合物（３−ブロモ−５−［Ｎ−フェニル
−Ｎ−［２−［［２−（1,2,3,4−テトラハイドロ−２
−イソキノリルカルボニルオキシ）エチル］カルバモイ
ル］エチル］カルバモイル］−１−プロピルピリジニウ
ム ナイトレート）に関する。

（従来の技術および発明が解決しようとする課題） PAFはリン脂質構造を有し、生体内に存在する化学伝
達物質である。PAFは生体内においてアレルギー，アナ
フィラキシー，炎症などに密接に関与していることが明
らかにされており、また強力な血圧降下作用および血小
板凝集作用を有することが知られている。PAFを動物に
投与した場合には、動物はショック症状を呈し死に至る
こともある。PAFによるショック症状はエンドトキシン
によるショック症状に非常に似ており、またエンドトキ
シンショックにPAFが関与していることが明らかにされ
ている。

一方、PAF拮抗作用を有する化合物は種々知られてい
るものの、生体内におけるPAF拮抗作用において満足で
きる化合物は非常に少ない。また、生体内におけるPAF
拮抗作用が満足できても、投与方法に制限がある化合物
が多く、さらに医薬として安定性に問題がある化合物が
多い。

（課題を解決するための手段） 本発明は前記式（Ｉ）で表わされるピリジニウムナイ
トレート［化合物（Ｉ）］を提供するものである。

本発明のピリジニウムナイトレートはたとえば以下に
示す方法により合成することができる。

（Ａ） 式 で表わされる化合物に式 CH₃−CH₂−CH₂−Q¹ （III） ［式中、Q¹は窒素原子と容易に置換する基（例、クロ
ロ，ブロモ，ヨードなどのハロゲノ基，トルエンスルホ
ニルオキシ基，メタンスルホニルオキシ基など）を示
す］で表わされる化合物を反応させ、たとえばイオン交
換樹脂を使い、NO₃ イオンに交換する。

（Ｂ） 式 で表わされる化合物と式 で表わされる化合物を脱水縮合反応に付す。

（Ｃ） 式 で表わされる化合物と で表わされる化合物を脱水縮合反応に付す。

（Ｄ） 式 で表わされる化合物に ［式中、Ｇはクロロなどのハロゲノ基またはフェノキシ
基を示す］で表わされる化合物を反応させる。

（Ｅ） 式 ［式中、Ｇはクロロなどのハロゲノ基またはフェノキシ
基を示す］で表わされる化合物に で表わされる化合物を反応させる。

Ａ法における化合物（II）と（III）の反応は、化合
物（II）に対して化合物（III）を１当量ないし大過剰
使用し０゜〜＋200℃で溶媒の存在下もしくは無溶媒下
に行うことができる。溶媒としてはトルエン，ベンゼ
ン，エーテル，ジオキサン，テトラヒドロフランなどが
あげられ、また化合物（III）自体を溶媒として用いる
こともできる。加熱下においては封管中で反応を行って
もよい。

Ｂ法における化合物（IV）と（Ｖ）,C法における化合
物（VI）と（VII）の脱水縮合反応としては、たとえば
通常のアミド結合形成反応によって行うことができる。
すなわち１−エトキシカルボニル−２−エトキシ−1,2
−ジヒドロキノリン，ジシクロヘキシルカルボジイミ
ド,1−シクロヘキシル−３−（２−モルホリノエチル）
カルボジイミド メソ−ｐ−トルエンスルホネート,N,
N′−カルボニルジイミダゾール，ジフェニルリン酸ア
ミド，シアノリン酸ジエチル,1−エチル−３−（３−ジ
エチルアミノプロピル）カルボジイミド ハイドロクロ
ライドなどのアミド形成試薬を単独で用いるか、もしく
は化合物（Ｖ）または（VII）をたとえば2,4,5−トリク
ロロフェノール，ペンタクロロフェノール，ペンタフル
オロフェノール,2−ニトロフェノールまたは４−ニトロ
フェノールなどのフェノール類またはＮ−ヒドロキシス
クシンイミド,1−ヒドロキシベンズトリアゾール,N−ヒ
ドロキシピペリジン,N−ヒドロキシ−５−ノルボルネン
−2,3−ジカルボジイミドなどのＮ−ヒドロキシ化合物
とジシクロヘキシルカルボジイミドなどの触媒の存在下
に縮合させ活性なエステル体に変換した後、化合物（I
V）または（VI）と反応させるか、もしくは化合物
（Ｖ）または（VII）をクロル炭酸エチル，クロル炭酸
イソブチル，クロル炭酸ベンジルなどの酸塩化物と反応
させ混合酸無水物に変換した後化合物（IV）または（V
I）と反応させることによって行うことができる。ま
た、化合物（Ｖ）または（VII）をたとえばオキシ塩化
リン，五塩化リン，チオニルクロライド，チオニルブロ
マイド等と反応させて酸ハライドとして活性化して用い
てもよい。本アミド結合反応は、化合物（Ｖ）または
（VII）をそのままあるいは化合物（Ｖ）または（VII）
の活性なエステル体，酸ハライド体もしくは混合酸無水
物に変換した後化合物（IV）または（VI）と反応させる
いずれの場合も、好ましくは有機塩基たとえば三級アミ
ン類（例、トリエチルアミン，ピリジン，ジメチルピリ
ジン,N−メチルピペリジン）の添加によって促進させる
ことができる。本反応は−30゜〜＋50℃で、溶媒（例、
エーテル，トルエン，ベンゼン，クロロホルム，ジクロ
ロメタン，ジオキサン，テトラヒドロフラン）の存在下
もしくは無溶媒下に行われる。

Ｄ法およびＥ法における化合物（VIII）と（IX）およ
び（Ｘ）と（XI）の反応は無溶媒下もしくは溶媒存在下
（例、エーテル，トルエン，ベンゼン，クロロホルム，
ジクロロメタン，ジオキサン，テトラヒドロフラン，ジ
メチルホルムアミド）、−10゜〜＋150℃にて行われ
る。反応を促進させるため、三級アミン類（例、トリエ
チルアミン，ピリジン，ジメチルアミノピリジン,N−メ
チルピペリジン）を加えてもよい。

化合物（II）はたとえば（ｉ）化合物（IV）と式 で表わされる化合物を脱水縮合反応に付すことにより、
（ii）化合物（VI）と式 で表わされる化合物を脱水縮合反応させることにより、
（iii）式 で表わされる化合物と化合物（IX）を反応させることに
より、または（iv）式 ［式中、Ｇは前記と同意義］で表わされる化合物と化合
物（XI）を反応させることにより製造することができ
る。

化合物（IV）と（XIII）の反応および化合物（VI）と
（XV）の反応は化合物（IV）と（Ｖ）の反応と同様にし
て行われる。化合物（XVI）と（IX）の反応および化合
物（XVII）と（XI）の反応は化合物（VIII）と（IX）の
反応と同様にして行われる。

化合物（VI）はたとえば以下に示す方法により得るこ
とができる。

［式中、T²は保護基（例、ベンジルオキシカルボニル,t
ert−ブチルオキシカルボニル，トリフルオロアセチ
ル，トリチル，ベンジルなどのアミノ基の保護基）を示
し、Ｇはクロロ，ブロモなどのハロゲノ基またはフェノ
キシ基を示す］ 化合物（XVIII）と（IX）の反応，化合物（XX）と（X
I）の反応は前記Ｄ法における化合物（VIII）と（IX）
との反応条件と同様な条件下で行われる。

化合物（IV）はたとえば以下に示す方法により得るこ
とができる。

［式中、T¹は保護基（ベンジルオキシカルボニル,tert
−ブチルオキシカルボニル，トリフルオロアセチル，ト
リチル，ベンジルなどのアミノ基の保護基）を示し、Ｇ
は前記と同意義］ 化合物（VI）と（XXII）の反応は前記Ｄ法における化
合物（VIII）と（IX）の反応条件と同様な条件下に行わ
れる。

化合物（VIII）および（XVI）はたとえば以下に示す
方法により得ることができる。

［式中、T³は保護基（例、ジフェニルメチル，トリフル
オロアセチル,2−テトラヒドロピラニル，トリチル，ベ
ンジルなどのヒドロキシ基の保護基）を示し、Ｇは前記
と同意義］ 化合物（XXIV）と（XXV）との反応は前記Ｄ法におけ
る化合物（VIII）と（IX）との反応条件と同様な条件下
で行われ、化合物（XXVI）と（III）との反応は前記Ａ
法における化合物（II）と（III）との反応条件と同様
な条件下で行われる。

化合物（Ｘ）および（XVII）はたとえば以下に示す方
法により得ることができる。

［式中、Q⁵′は保護されたヒドロキシ基（例、ジフェニ
ルメチルオキシ，トリフルオロアセトキシ,2−テトラヒ
ドロピラニルオキシ，トリチルオキシ，ベンジルオキ
シ）を示す］ 化合物（XXVIII）と（III）との反応は前記Ａ法にお
ける化合物（II）と（III）との反応条件と同様な条件
下で行われる。

Q⁵′→Q⁵の反応は保護基を除去した後、以下に示す方
法により行われる。

の場合、保護基を除去した後、Q⁵′が−OHである化合物
（XXVIII）または（XXIX）とホスゲンなどのカルボニル
ハライドを反応させる。

それらの反応は、自体すべて公知の反応であり、それ
らの条件に準じておこなうことができる。

前記保護基の除去反応は、自体公知の方法でおこなう
ことができる。すなわち、ベンジル基，ジフェニルメチ
ル基は触媒（パラジウムカーボン，酸化白金など）の存
在下、溶媒中（例、アルコール，酢酸，水，テトラヒド
ロフランおよびこれらの混合溶媒など），接触還元反応
（反応温度，室温から＋100℃）で除去できる。

トリチル基,2−テトラヒドロピラニル基の場合、溶媒
中（例、水，アルコール，テトラヒドロフラン，ジオキ
サンなど），酸（例、塩酸，リン酸，硫酸などの鉱酸
や、トルエンスルホン酸，メタンスルホン酸，酢酸など
の有機酸）の存在下、０゜から＋150℃で除去できる。
トリフルオロアセチル基は、アルカリ（例、水酸化ナト
リウム，炭酸水素ナトリウム水溶液）で処理することに
より、容易に除去できる。

反応混合物からの化合物（Ｉ）の分離精製は通常の分
離精製手段（例、抽出，濃縮，ろ過，再結晶，カラムク
ロマトグラフィー，薄層クロマトグラフィー）に従い行
われる。

（作用） 化合物（Ｉ）は優れたPAF拮抗作用を示し、PAFに起因
する循環障害疾患、たとえば血栓症，脳卒中（例、脳出
血，脳血栓），心筋梗塞，狭心症，血栓性静脈炎，腎炎
（例、糸球体腎炎），糖尿病性腎症，ショック（例、重
症感染症または術後にみられるエンドトキシンショッ
ク，エンドトキシンにより生ずる血管内血液凝固症候
群，アナフィラキシーショック，出血性ショック）;PAF
に起因する消化器系疾患（例、胃潰瘍）；アレルギーお
よび炎症に関連する疾病（例、気管支喘息，乾癬）；肺
炎；臓器移植時のPAF産生量増加に伴う拒絶反応；臓器
（例、心臓，肝臓，腎臓）手術時の臓器不全等の予防・
治療剤として有用である。また、細胞分裂及び／又は子
宮への着床を抑制することにより、雌の哺乳動物の受胎
を抑制する目的に用いることもできる。一方、エンドセ
リン［Nature,332,411（1988）］は強力な血管平滑筋お
よび気管の収縮作用を有し、高血圧症や気道狭窄を惹起
するとともに、より高濃度（血液100mlあたり0.1〜5nmo
l程度では虚血性脳および心疾患（例、脳卒中，狭心
症，心筋梗塞，心不全，不整脈）、腎障害（例、腎
炎）、諸臓器（例、肝，肺，腸）の循環不全、喘息など
の疾病を併発させ、動物個体を死に至らしめることもあ
ることが知られているが、化合物（Ｉ）はエンドセリン
の分泌過多により誘発される上記の疾病（高エンドセリ
ン症）の効果的な予防・治療剤として投与することがで
きる。

化合物（Ｉ）は毒性が低いので、そのまま粉末剤とし
て、又は適当な剤形の医薬組成物として、哺乳動物
（例、ヒト，ウサギ，イヌ，ネコ，ラット，マウス，モ
ルモット）に対して経口的又は非経口的に投与すること
ができる。投与量は投与対象，対象疾患，症状，投与ル
ートなどによっても異なるが、例えば成人のショックの
予防・治療のために使用する場合には、化合物（Ｉ）を
１回量として通常0.001〜1.0mg/kg体重程度、好ましく
は0.01〜0.1mg/kg体重程度を、１日１〜５回程度、好ま
しくは１日１〜３回程度、静脈注射により投与するのが
好都合である。また、化合物（Ｉ）を１回あたり0.01〜
0.1mg/kg体重/min.程度を約１時間程度、１日１〜５回
程度、好ましくは１日１〜３回程度点滴注射により投与
することもできる。他の非経口投与および経口投与の場
合もこれに準ずる量を投与することができる。ショック
症状が特に思い場合にはその症状に応じて増量してもよ
い。

また、たとえば成人の血栓症，喘息，腎炎などの疾病
の予防・治療のために経口投与する場合、化合物（Ｉ）
を１回量として通常0.1〜30mg/kg体重程度、好ましくは
１〜10mg/kg体重程度を、１日１〜５回程度、好ましく
は１日１〜３回程度投与するのが好都合である。他の非
経口投与の場合もこれに準ずる量を投与することができ
る。

投与に用いられる医薬組成物は、有効量の化合物
（Ｉ）と薬理学的に許容されうる担体もしくは賦形剤と
を含むものであり、該組成物は経口または非経口投与に
適する剤形として提供される。

経口投与のための組成物としてはたとえば、固体また
は液体の剤形、具体的には錠剤（糖衣錠，フィルムコー
ティング錠を含む），丸剤，顆粒剤，散剤，カプセル剤
（ソフトカプセル剤を含む），シロップ剤，乳剤，懸濁
剤などがあげられる。かかる組成物は自体公知の方法に
よって製造され、製剤分野において通常用いられる担体
もしくは賦形剤を含有するものである。たとえば錠剤用
の担体，賦形剤として乳糖，でんぷん，ショ糖，ステア
リン酸マグネシウムなどがあげられる。非経口投与のた
めの組成物としては、たとえば注射型，坐剤，軟膏剤，
湿布剤，塗布剤などがあげられ、注射剤としてはたとえ
ば静脈注射剤，皮下注射剤，皮内注射剤，筋肉内注射
剤，点滴注射剤などの剤形があげられる。かかる注射剤
は自体公知の方法、たとえば化号物（Ｉ）を通常注射剤
に用いられる無菌の水性もしくは油性液に溶解、懸濁ま
たは乳化することによって調製される。注射用の水溶液
としては生理食塩水，ブドウ糖やその他の補助薬を含む
等張液などがあげられ、適当な溶解補助剤，たとえばア
ルコール（例、エタノール），ポリアルコール（例、プ
ロピレングリコール，ポリエチレングリコール），非イ
オン性界面活性剤［例、ポリソルベート80,HCO−50（po
lyoxyethylene（50mol）adduct of hydrogenated casto
r oil）］などと併用してもよい。油性液としてはゴマ
油，大豆油などがあげられ、溶解補助剤として安息香酸
ベンジル，ベンジルアルコールなどを併用してもよい。
調製された注射液は通常適当なアンプルに充填され、注
射剤として提供される。直腸投与に用いられる坐剤は自
体公知の方法、たとえば化合物（Ｉ）を通常の坐薬用基
剤に混合し、成型することによって調製される。

なお、上記各組成物は化合物（Ｉ）との配合により好
ましくない相互作用を生じない限り、他の活性成分を含
有していてもよい。たとえば、感染症に罹患した哺乳動
物に対しては、エンドトキシンショックを防止するた
め、抗生剤とともに化合物（Ｉ）を投与することもでき
る。

発明の効果 本発明のピリジニウムナイトレート（Ｉ）は経口投与
においても優れたPAF拮抗作用を示す。したがってピリ
ジニウムナイトレート（Ｉ）は注射による投与などの非
経口投与の他、経口投与することもできる。また本発明
のピリジニウムナイトレート（Ｉ）は、対応するクロラ
イドなどに比べ安定であり、医薬品として有利に用いら
れる。

以下に実験例を示して本発明の効果をより詳細に説明
する。

実験例１ 血小板凝集抑制作用 ［試験方法］ 雄性ウサギより血液凝固防止剤として、3.15％クエン
酸（血液９に対して１の割合）を含む注射筒を用いて、
心臓穿刺により直接採血した。次いで室温下、800rpmで
10分間遠心分離することにより多血小板血漿（PRP:plat
elet rich plasma）を得た。残りの血液をさらに3000rp
mで10分間遠心して上清液として乏血小板血漿（PPP:pla
telet poor plasma）を分離した。PPPでPRPを希釈して
血小板数を約50万個／μに調製した。このPRP250μ
を37℃で２分間攪拌後、非験薬物［製造例１で得た化合
物（６）］を加えさらに２分間攪拌後に所定濃度のPAF
を加えた。血小板凝集は血小板凝集計（理化電機製）で
測定した。被験薬物の凝集抑制活性は対照PRPにおけるP
AFによる最大の光透過度（最大凝集率）に対する抑制率
から求めた。

［結果］ 表１に示す。

実験例２ ラットにおけるPAF降圧に対する抑制作用 ［試験方法］ 体重約250gの雄性Sprague−Dawleyラットを用いた。
血圧測定のために一側股動脈および薬液投与のために一
側股静脈内にカニューレを挿入固定した。血圧は圧トラ
ンスジューサーを介して測定し、ポリグラフに記録し
た。先ずPAF １μg/kgを静脈内（i.v.）投与して血圧
下降度をしらべた後、被験薬物［製造例１で得た化合物
（６）］を静脈内又は経口投与し、静脈内投与の場合は
その５分,1,2,4,6,8時間後におよび経口投与の場合は1,
2,4,6,8時間後にPAFを１μg/kg静脈内投与して血圧下降
度をしらべた。

［結果］ PAF降圧に対する抑制作用は、被験薬物投与前のPAFに
よる降圧度（△mmHg）に対する薬物投与後のPAFによる
降圧度（△mmHg）の比率として表示（％抑制）した。結
果を表２および表３に示す。

実験例３ ラット逆受身アルサス反応 ［試験方法］ エーテル軽麻酔下で雄性Sprague−Dawleyラット（７
週令，体重約250g）の背部を除毛し、被験薬物［製造例
１で得た化合物（６）］の生理食塩水溶液を体重100g当
り0.2mlを尾静脈内投与した。直ちに抗原エッグアルブ
ミン0.5％生理食塩水溶液1mlを尾静脈より投与した。そ
の直後に、ラット背部左右両側に家兎抗エッグアルブミ
ン血清（6mgプロテインアンティボディ/mlを含む）0.1m
lを一点ずつ皮内投与した。３時間後に、１％エバンス
ブルー生理食塩水溶液1mlを静脈内投与し、30分後に
皮膚を剥離し、青色班の面積（mm²）を測定し、薬物を
投与しない群と比較し、阻止率を求めた。

［結果］ 本試験において製造例１で製造された化合物（６）
は、静脈内投与では抑制作用を示し、そのID₅₀値は1.2
μg/kgであった。

実験例４ 気道狭窄におけるPAF抑制作用 体重400g前後の雌雄のHartley系モルモットを使用し
た。ウレタン（1.5g/kg,腹腔内）麻酔下に背位固定し、
気管にカニューレ（４脚）の一脚を挿入し、他の３脚の
うち２脚を人工呼吸器（Harvard apparatus rodent res
pirator）に連結した。残りの一脚（側枝）をbronchosp
asm transducer7020（Ugobasile）に連結した。１回送
気量５〜7ml,送気回数70回/min,肺への負荷圧10cm H₂O
とし、over flowする空気量をtransducerを介してRecti
graph（Rectigraph−8S,三栄測器）上に記録した。ガラ
ミン トリエトダイド（Gallamine triethodide）（1mg
/kg,静脈内）処置後ヒスタミン２塩酸塩（10μg/kg）を
静脈内投与し、動物の反応性を調べた。PAF（0.3μg/k
g）静脈内投与すると30秒後に最大気道狭窄反応がみら
れた。この条件下において被検体［製造例１で得た化合
物（６）］の抑制作用を調べた。被検体は生理食塩水に
溶解し、PAF投与２分前に静脈内投与した。その結果、
製造例１の化合物（６）は0.03mg/kg静脈内投与によりP
AF惹起気道狭窄反応を91.3％抑制した。

実験例５ 急性毒性 雄性Jcl−ICRマウス（５例）（５週令）を用いた。製
造例１で得た化合物（６）を実験動物を1000mg/kg経口
投与または10mg/kg静脈内投与して観察したが、いずれ
の場合も１週間後までに死亡例は認められなかった。

実験例６ 安定性試験 得られた化合物について、粉末状態での安定性試験を
行った。

検 体：製造例１（化合物６）。

対照化合物としては参考例１（化合物７）を用いた。

方 法：各検体約100mgをガラスビンに採り、密栓し
て、室温（20±２℃）および40℃（対照化合物を除く）
で、30日間保存した。

含量の測定：一定量の検体を採り、高速液体クロマトグ
ラフィー（HPLC）の移動相［アセトニトリル：メタノー
ル:0.1％リン酸＝900:240:2100］で溶解し、HPLCで含量
を測定した。

HPLCの測定条件：カラムYMC ODS A302 4.6×150mm 流速 0.7ml/分 検出 UV 254nm 結 果:30日間保存後の各検体の残存率を表４に示す。

実験例７ エンドトキシンショックに対する作用 （１）ラットにおけるエンドトキシン（ET）による降圧
に対する抑制作用 ［試験方法］ 雄性SDラットをペントバルビタールナトリウムで麻酔
し、右側股動脈および左側股静脈に、それぞれ血圧測定
用および製造例１で合成した化合物（６）の投与用とし
てカニューレを挿入固定した。化合物（６）は、ET（15
mg/kg）投与の８分後に投与した。

［結果］ ETは血圧を徐々に降下させ、投与後８分で最低血圧と
なり、その後血圧はゆっくりと回復した。化合物（６）
は、ETによる降圧を強力かつ急速に抑制し、そのED₅₀値
は1.2μg/kgであった。

（２）ラットにおけるエンドトキシン（ET）によるショ
ック死に対する保護作用 ［試験方法］ 雄性SDラットに、15mg/kgのET（E.coli,0111,B4）を
静脈内投与し、１週間生存率を観察した。製造例１で合
成した化合物（６）は、ET注入５分前に静脈内投与し
た。

［結果］ 化合物（６）は、100μg/kgの静脈内投与でほぼ１週
間ラットの生存率を有意に改善した（表５参照）。

実験例８ ラットにおける実験的DIC（disseminated intravascula
r coagulation）の抑制作用 ［試験方法］ 雄性SDラットをペントバルビタールナトリウムで麻酔
した。エンドトキシン（ET;E.coli,0111,B4）を右側股
静脈に250μg/kg/hrの割合で４時間注入した。製造例１
で合成した化合物（６）（被検薬物）を、ETの投与５分
前に200μg/kg静脈内投与し、その後200μg/kg/hrの割
合で左側股静脈から４時間注入した。

［結果］ ETの注入によりDIC症状［血小板数の減少，凝固・線
溶に対する指標（prothrombin time（PT）;activated p
artial thromboplastin time（APTT）；およびfibrinog
en level（フィブリノーゲン）の有意な変化，およびフ
ィブリンとフィブリノーゲンの分解産物（FDP leve
l）］が誘発された（表６参照）。化合物（６）は、こ
れらのDICの指標の変化を有意に抑制した。

実験例９ マウスにおけるアラフィラキシーショック死に対する保
護作用 ［試験方法］ 雄性ICRマウスを牛血清アルブミン（BSA）および不活
化百日せき毒素感受性とし、２〜３週間後に、マウスに
BSA（1mg/kg,i.v.）を再投与した。BSAの投与60分後に
生存率を観察した。製造例１で合成した化合物（６）
は、BSA投与５分前に静脈内投与した。

［結果］ 製造例１で合成した化合物（６）の前処理によりマウ
スのアラフィラキシーショック死が防止され、そのED₅₀
値は、2.6μg/kgであった。

実験例10 急性腎不全モデルでの腎機能改善作用 ［試験方法］ ５週令の雄性SD（Jcl）ラットをペントバルビタール
ナトリウム（50mg/kg,i.p.）の麻酔下に、両側腎動脈を
結さつした。45分後にクリップをはずして血液を再潅流
し急性腎不全モデルとした。再潅流の20時間後に麻酔下
に腹部大動脈により採血した血液の尿素窒素（BUN）を
測定した。

［結果］ 再潅流20時間後にBUNが著名に上昇したが、製造例１
で合成した化合物（６）を腎動脈結さつの１時間前に30
mg/kg経口投与するとBUNの上昇が有意に抑制された（表
７）。

製剤例１ ３−ブロモ−５−［Ｎ−フェニル−Ｎ−［２−［［２
−（1,2,3,4−テトラハイドロ−２−イソキノリルカル
ボニルオキシ）エチル］カルバモイル］エチル］カルバ
モイル］−１−プロピルピリジニウム ナイトレートの
10gを蒸留水1.0に溶解し、無菌ろ過後、無菌条件下に
1mlずつ1000本のバイアルに分注し、凍結乾燥を行い、
乾燥後密栓する。

一方、マンニトール100gを含有する２の注射用蒸留
水を無菌的に2mlずつ注射用アンプルに分注後、熔閉
し、1000本に調製する。

用時、注射用マンニトール液に前者１バイアル分の粉
末を溶解して用いる。

製造例２ ３−ブロモ−５−［Ｎ−フェニル−Ｎ−［２−［［２
−（1,2,3,4−テトラハイドロ−２−イソキノリルカル
ボニルオキシ）エチル］カルバモイル］エチル］カルバ
モイル］−１−プロピルピリジニウム ナイトレート10
g,乳糖90gおよびトウモロコシ澱粉17gを混和し、トウモ
ロコシ澱粉7gから作ったペーストとともに顆粒化し、こ
の顆粒にトウモロコシ澱粉5gとステアリン酸マグネシウ
ム1gを加えて混合した後、圧縮錠剤機で圧縮して錠剤10
00個を製造する。

製造例１ ３−ブロモ−５−［Ｎ−フェニル−Ｎ−［２−［［２−
（1,2,3,4−テトラハイドロ−２−イソキノリルカルボ
ニルオキシ）エチル］カルバモイル］エチル］カルバモ
イル］−１−プロピルピリジニウム ナイトレイト
（６） ｉ） １−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−（1,2,
3,4−テトラハイドロ−２−イソキノリルカルボニルオ
キシ）エタン（１）の合成 モノエタノールアミン1.222g（20ミリモル）を塩化メ
チレン40mlに溶解し、氷冷下ジｔブチル ジカーボネー
ト4.365g（20ミリモル）を加え、室温にて２時間攪拌し
た。

上記反応液にピリジン3.235ml（40ミリモル）を加
え、更に氷冷下クロロ炭酸フェニル2.51ml（20ミリモ
ル）を加えた後、室温にて10分間攪拌した。反応液を５
％炭酸水素ナトリウム水溶液にて洗浄し、有機層を無水
硫酸ナトリウムにて乾燥後溶媒を減圧留去して、粗カー
ボネート体を得た。

この粗カーボネート体に1,2,3,4−テトラハイドロイ
ソキノリン2.75ml（22ミリモル）を加え、90℃にて１時
間加熱した。冷後、得られた粗生成物をカラムクロマト
グラフィー（シリカゲル:200g;溶出液：ヘキサン／酢酸
エチル＝2/1〜1/1）にて精製し、目的物（１）5.757g
（89.7％，白色固体）を得た。

TLC（Silica Gel;n−hexane/AcOEt＝1/1）:Rf＝0.22NMR
（90MHz,CDCl₃）δ 1.43（9H,s）,2.83（2H,t）,3.40
（2H,q）,3.67（2H,t）,4.18（2H,t）,4.60（2H,s）,5.
00（1H,br）,7.14（4H,s）． IR（KBr）cm^-1:3340,2970,1710,1670,1520,1478,1430,1
365,1290,1230. ii） ２−（1,2,3,4−テトラハイドロ−２−イソキノ
リルカルボニルオキシ）エチルアミン（２）の合成 ｉ）で合成した化合物（１）5.435g（16.9ミリモル）
をクロロホルム15mlに溶解し、塩酸飽和メタノール10ml
を加え、室温にて２時間攪拌した。反応液を減圧濃縮
し、得られた粗生成物に1N水酸化ナトリウム水溶液50ml
を加えクロロホルム抽出した。有機層を無水炭酸カリウ
ムにて乾燥し、溶媒を減圧留去し、目的物（２）3.72g
（100％，無色油状物質）を得た。

TLC（Silica Gel;MeOH/conc.NH₄OH＝50/1）:Rf＝0.37 NMR（90MHz,CDCl₃）δ 1.36（2H,s）,2.84（2H,t）,2.9
5（2H,t）,3.69（2H,t）,4.16（2H,t）,4.63（2H,s）,
7.17（4H,s）． IR（Neat）cm^-1:3360,2940,1690,1580,1430,1295,1230,
1120. iii） Ｎ−［２−（1,2,3,4−テトラハイドロ−２−イ
ソキノリルカルボニルオキシ）エチル］−３−［（Ｎ′
−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ′−フェニル）アミノ］
プロパンアミド（３）の合成 ３−（Ｎ−ｔブトキシカルボニル−Ｎ−フェニル）ア
ミノプロピオン酸3.714g（14.0ミリモル）及びジシクロ
ヘキシルカルボジイミド3.177g（15.4ミリモル）を塩化
メチレン50mlに溶解し、氷冷下ii）で合成した化合物
（２）3.084g（14.0ミリモル）を加えた後、室温にて４
時間攪拌した。沈澱物を濾過した後、母液を1N NaOH水
溶液にて洗浄し有機層を無水炭酸カリウムにて乾燥後、
溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をカラムクロマ
トグラフィー（シリカゲル:200g;溶出液：ヘキサン／酢
酸エチル＝3/7）にて精製し、目的物（３）5.00g（76.4
％，無色飴状物質）を得た。

TLC（Silica Gel;hexane/AcOEt＝1/2）:Rf＝0.24 NMR（90MHz,CDCl₃）δ 1.39（9H,s）,2.47（2H,t）,2.8
4（2H,t）,3.49（2H,q）,3.69（2H,t）,3.93（2H.t）,
4.20（2H,t）,4.62（2H,s）,6.59（1H,br）,7.0〜7.5
（9H,m） IR（Neat）cm^-1:3320,2980,2930,1710〜1650,1598,154
0,1498,1455,1430,1390,1364,1300,1230,1160. iv） Ｎ−［２−（1,2,3,4−テトラハイドロ−２−イ
ソキノリルカルボニルオキシ）エチル］−３−アニリノ
プロパンアミド（４）の合成 iii）で合成した化合物（３）4.675g（10.0ミリモ
ル）をクロロホルム10ml及びメタノール10mlに溶解し、
塩酸飽和メタノール20mlを加えた後、室温にて３時間攪
拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた粗生成物に1N水
酸化ナトリウム水溶液50mlを加えクロロホルム抽出し
た。有機層を無水炭酸カリウムにて乾燥した後溶媒を減
圧留去し、得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィ
ー（シリカゲル:80g;溶出液：ヘキサン／酢酸エチル＝1
/6〜1/8）にて精製し、目的物（４）3.158g（85.9％，
白色固体）を得た。

TLC（Silica Gel;hexane/AcOEt＝1/6）:Rf＝0.28 NMR（90MHz,CDCl₃）δ 2.45（2H,t）,2.80（2H,t）,3.3
〜3.8（6H,m）,4.22（2H.t）,4.56（2H,s）,6.43,（1H,
br）,6.66（3H,m）,6.9〜7.3（6H,s）． IR（KBr）cm^-1:3310,1690,1660,1560,1460,1443,1430,1
299,1282,1240,1230,1130,1115,1095. ｖ） ３−ブロモ−５−［Ｎ−フェニル−Ｎ−［２−
［［２−（1,2,3,4−テトラハイドロ−２−イソキノリ
ルカルボニルオキシ）エチル］カルバモイル］エチル］
カルバモイル］ピリジン（５）の合成 vi）で合成した化合物（４）735mg（２ミリモル）及
びトリエチルアミン1.394ml（10ミリモル）をクロロホ
ルム15mlに溶解し、氷冷下５−ブロモニコチン酸クロラ
イド．塩酸塩617mg（2.4ミリモル）を加えた後、室温に
て1.5時間攪拌した。反応液に1N NaOH水溶液を加えて
クロロホルム抽出し、有機層を無水炭酸カリウムにて乾
燥後溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をカラムク
ロマトグラフィー（シリカゲル:30g;溶出液：酢酸エチ
ル）にて精製し、目的物（５）1.083g（98.2％，白色粉
末）を得た。

TLC（Silica Gel;AcOET）:Rf＝0.26 NMR（90MHz,CDCl₃）δ 2.58（2H,t）,2.81（2H,t）,3.5
1（2H,q）,3.65（2H,t）,4.20（4H,m）4.58（2H,s）,6.
79（1H,br t）,6.9〜7.4（9H,m）,7.77（1H,t）,8.29
（1H,br s）,8.47（1H,br s）． IR（Neat）cm^-1:3320,1710〜1620,1595,1540,1490,144
0,1390,1340,1295,1230,1120,1095. vi） ３−ブロモ−５−［Ｎ−フェニル−Ｎ−［２−
［［２−（1,2,3,4−テトラハイドロ−２−イソキノリ
ルカルボニルオキシ）エチル］カルバモイル］エチル］
カルバモイル］１−プロピルピリジニウム ナイトレー
ト（６）の合成 ｖ）で合成した化合物（５）1.53g（2.77ミルモル）
に１−ヨードプロパン50mlを加え、窒素気流中遮光して
４時間加熱還流した。冷後反応液を減圧濃縮し、得られ
た粗生成物を70％メタノール／水70mlに溶解し、IRA−4
10（NO₃ ^-）［70ml］にて処理し、更にカラムクロマトグ
ラフィー（シリカゲル；溶出液：クロロホルム／メタノ
ール＝5/1）にて精製し、目的物（６）1.34g（73.6％，
淡黄色粉末）を得た。

NMR（200MHz,CDCl₃）δ 0.76（3H,t,J＝7Hz）,1.82（2
H,m）,2.67（2H,m）,2.83（2H,t,J＝6Hz）,3.45（2H,q,
J＝5Hz）,3.66（2H,t,J＝6Hz）,4.15（2H,t,J＝6Hz）,
4.18（2H,t,J＝6Hz）,4.00（2H,s）,4.65（2H,t,J＝7H
z）,6.90−7.40（9H,m）,7.72（1H,m）,8.24（1H,br
s）,9.03（1h,br s）,9.32（1H,br s）． IR（KBr）cm^-1:3420,3050,1680,1660,1590. 参考例１ ３−ブロモ−５−［Ｎ−フェニル−Ｎ−［２−［［２−
（1,2,3,4−テトラハイドロ−２−イソキノリルカルボ
ニルオキシ）エチル］カルバモイル］エチル］カルバモ
イル−１−プロピルピリジニウムクロライド（７） 製造例１−ｖ）で合成した化合物（５）827mg（1.50
ミリモル）に１−ヨードプロパン25mlを加え、窒素気流
中遮光して68時間加熱還流した。冷後反応液を減圧濃縮
し、得られた粗生成物を70％メタノール／水70mlに溶解
し、IRA−410（Cl^-）［70ml］にて処理し、更にカラム
クロマトグラフィー（シリカゲル:35g;溶出液：クロロ
ホルム／メタノール＝6/1）にて精製し、目的物（７）6
91mg（73.1％，淡黄色粉末）を得た。

TLC（Silica Gel;CHCl₃/MeOH＝6/1）:Rf＝0.30 NMR（90MHz,CDCl₃）δ 0.76（3H,t）,1.85（2H,m）,2.8
1（4H,m）,3.43（2H,m）,3.65（2H,t）,4.15（4H,m）,
4.58（2H,s）,4.85（2H,m）,7.0〜7.5（9H,m）,8.09（1
H,m）,8.35（1H,br s）,9.60（2H,br s）． IR（KBr）cm^-1:3380,3200,2960,1690,1658,1595,1550,1
495,1430,1298,1228,1120,745.

フロントページの続き (56)参考文献 特開 平２−76854（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁶，ＤＢ名) C07D 401/12,213 ＣＡ，ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)

Claims (1)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】式 で表わされる化合物。