JP3163432B2 - 混濁菌の短期簡易判定法 - Google Patents
混濁菌の短期簡易判定法Info
- Publication number
- JP3163432B2 JP3163432B2 JP24621393A JP24621393A JP3163432B2 JP 3163432 B2 JP3163432 B2 JP 3163432B2 JP 24621393 A JP24621393 A JP 24621393A JP 24621393 A JP24621393 A JP 24621393A JP 3163432 B2 JP3163432 B2 JP 3163432B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- beer
- growth
- short
- bacteria
- strains
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Distillation Of Fermentation Liquor, Processing Of Alcohols, Vinegar And Beer (AREA)
Description
物が、ビール等の醸造物で生育する混濁菌かどうかを短
期に判定する方法である。
定する方法として、幾つかの方法がある。現在、これら
の乳酸菌をはじめとする微生物を検出する方法として
は、培地にコロニーを生育させて検出するコロニーカウ
ント法が一般的である。ビール業界で用いられているコ
ロニーカウント法としては国際的な２つの標準法である
ＡＳＢＣ（Analytical Method of American Society of
Brewing Chemists)法とＥＢＣ（European Brewing Con
gres. ANALYTICA MICROBIOLOGICA) 法がある。これらの
特徴としては、操作に当って特別な機器を必要とせず
便利で簡単である、適用範囲が広い、などの長所があ
る反面、コロニーを検出するまでに時間がかかる、
機器のコストはかからないが操作が煩雑である、検出
感度が各種要因に左右されやすい、などの短所をもって
いる。
する出願としては、特公昭63-26870、特開昭59−10726
3、特開昭62−10100 には抗原・抗体反応を用いる乳酸
菌検出法が、また、特開昭61−257200、特開平５−1540
0 には遺伝子配列を利用した乳酸菌検出法が、さらに、
特開昭63−146799、特開平３−91493、特開平３−25909
5、特開平４−20283 には特定の物質を添加することに
よる乳酸菌検出培地が開示されているが、今回の発明の
混濁菌判定法とは技術が異なる。
管理のために乳酸菌などの微生物による製品への混濁を
防止する対策の検討は重要な課題である。しかし、前述
の従来の技術のように乳酸菌をはじめとする微生物の有
無を検出する方法はあったが、それが醸造物で生育し混
濁させるものかどうかを短期的に判定する方法はなかっ
た。
製造において、より確実な品質管理のためには混濁菌の
短期の検出が求められている。そこで本発明は、この課
題を解決するために検討し完成されたもので、醸造物製
造において、特にビールにおいて生育する混濁菌を短期
間でかつ確実に判定できる方法を確立するものである。
4.7〜5.5 に調整、滅菌を行い、試験菌を含む被検物を
添加して嫌気培養を行い、培養期間中の濁度を測定する
ことにより被検物中の混濁菌の有無を判定する混濁菌の
短期簡易判定法である。本発明で用いる醸造物は、品質
管理工程において混濁菌特に乳酸菌の検出を必要とする
ビール、日本酒等で広く一般に製造されているものであ
れば特に限定されないが、ビール醸造において非常に効
果がある。
等を有するものについては、以後の操作性を考慮すると
ガス抜きをあらかじめ行っておくと良い。醸造物のｐＨ
は 4.7〜5.5 の範囲に調整を行う。ｐＨの調整は、一般
的なｐＨ調整に用いられる試薬、例えばNaOH等を用いて
行うことができる。ｐＨの設定範囲は、試験する微生物
によっても異なるが、乳酸菌（Lactobacillus)属の場
合、ｐＨ 4.8〜5.2、好ましくはｐＨ 5.0である。
前、または後に行うことができる。ただし、コンタミネ
ーションを防ぐ点から滅菌はｐＨ調整後に行うのが望ま
しい。被検物は、試験菌または試験菌を含有する醸造物
であることができ、この場合の醸造物は培地として用い
る醸造物と同じであっても、異なっても良い。
造物を予め滅菌した試験管に分注し、被検物である試験
菌液を初発菌濃度を 104〜105cells/ml になるようにこ
れに接種した後、嫌気培養を行い、濁度を測定する。経
時的に濁度を測定することが好ましい。ビールの場合
は、ＯＤ660 で測定すると良い結果が得られ、25℃前後
で約１週間の短期間で判定できる。また、目視で混濁が
判定できる場合は目視によってもよい。
明する。
１、A-２、A-３、A-４、A-５）及び、ビールに生育しな
いラクトバチルス属の乳酸菌５株（B-１、B-２、B-３、
B-４、B-５）を用いた。
ル中、ペプトン10ｇ、ミート抽出物５ｇ、酵母抽出物５
ｇ、グルコース20ｇ、ツイーン80 1ｇ、リン酸水素二カ
リウム２ｇ：クエン酸アンモニウム２ｇ、酢酸ナトリウ
ム５ｇ、硫酸マグネシウム0.1g、硫酸マンガン0.05ｇ）
を用いて３日間、25℃、嫌気ジャーによる嫌気培養を行
った。
ド及びゼットをガス抜きし、５Ｎ NaOH によりｐＨを4.
12〜6.0 に調整（以下、調整した各ビールのｐＨに応じ
て、例えばｐＨ5.0 の場合はＳＤ pH5.0、ＰＧ pH5.0及
びＺ pH5.0と略記) した後、メンブランフィルター（孔
径0.45μm)により濾過滅菌を行い、予め滅菌した試験管
（18mmφ) に10mlづつ分注した。
菌濃度が104 〜105cells/ml となるよう各ｐＨに調整し
たＳＤ、ＰＧ及びＺに接種した後、ＯＤ660 を測定し
た。25℃で７日間、嫌気培養装置にて嫌気培養した後、
再びＯＤ660 を測定してΔＯＤ660 の値を算出した。
ュアゴールド及びゼットの各ｐＨビールのΔＯＤ660 の
値が0.1 以上、あるいはそれ以下であっても目視にて明
らかな濁りが生じた場合に生育したと判定した。 ６．結果 ビール生育株５株及びビール非生育株５株の、各ｐＨに
調整したスーパードライでの生育の有無を表１及び表２
に示した。ビール生育株においては、５株ともｐＨ5.
0、ｐＨ5.5 及びｐＨ6.0 のいずれのｐＨでも生育が認
められた。一方、ｐＨ4.12及びｐＨ4.5 については、A-
4 及びA-5 のみ７日目までに生育が認められたが、A-
１、A-２、A-3 は生育が認められなかった。これに対し
てビール非生育株ビールの場合は、５株ともｐＨ5.0、
ｐＨ4.5 及びｐＨ4.12においては生育が認められなかっ
た。
おいても、ビール生育株の５株ともｐＨ5.0、ｐＨ5.5
及びｐＨ6.0 のいずれのｐＨでも生育が認められた（表
３、表５）。これに対し、ビール非生育株５株ともｐＨ
5.0、ｐＨ4.5 及びｐＨ4.12において生育は認められな
かった（表４、表６) 。これらの結果より、乳酸菌のビ
ール生育の有無について、ｐＨを上げたビールに接種す
ることにより、一週間以内で判定することができる。
〜A-10、そのうちA-１〜A-５は実施例１に使用した菌と
同じ）を用いた。
ガス抜きし、５ＮのNaOHによりｐＨを5.0 に調整（以
下、ＳＤ pH5.0と略記) したあと、メンブランフィルタ
ー（孔径0.45μm)により濾過滅菌を行い、予め滅菌した
試験管（18mmφ)に10mlずつ分注した。
菌濃度が104 〜105cells/ml となるようＳＤ pH5.0及び
比較対照のｐＨを調整していないＳＤ（小瓶）に接種し
た後、ＳＤ pH5.0はＯＤ660 を測定し、25℃で嫌気培養
装置にて嫌気培養を行い、できるだけ毎日ＯＤ660 を測
定してΔＯＤ660 の値を算出した。またＳＤ（小瓶）に
ついては25℃で静置培養し、目視で菌の生育を観察し
た。
0.1 以上、あるいはそれ以下であっても目視にて明らか
な濁りが生じた場合に生育したと判定した。ＳＤ（小
瓶）については、目視観察の結果、明らかにビールが混
濁を生じたときに生育したと判定した。
ける生育日数を表７に示した。その結果、10株ともＳＤ
pH5.0における生育は７日以内であり、そのいずれもが
ＳＤに直接接種した場合よりも生育が早かった。この結
果より、ｐＨを上げたビールに乳酸菌を接種するほう
が、ｐＨを調整しないビールに接種するよりも、乳酸菌
のビール生育の有無の判定を早くすることができる。
調整した培地を用いて濁度により混濁菌を判定するよう
にしたので、短期に簡便な方法で、被検物中の混濁菌の
有無を判定することができる。
Claims (3)
- 【請求項１】ｐＨを 4.7〜5.5 に調整した滅菌醸造物を
培地として、被検物を添加して嫌気培養を行い、濁度を
測定することにより被検物中の混濁菌の有無を判定する
混濁菌の短期簡易判定法。 - 【請求項２】醸造物がビールであることを特徴とする請
求項１に記載の短期簡易判定法。 - 【請求項３】混濁菌が乳酸菌であることを特徴とする請
求項第１項に記載の短期簡易判定法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24621393A JP3163432B2 (ja) | 1993-09-07 | 1993-09-07 | 混濁菌の短期簡易判定法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24621393A JP3163432B2 (ja) | 1993-09-07 | 1993-09-07 | 混濁菌の短期簡易判定法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0775596A JPH0775596A (ja) | 1995-03-20 |
| JP3163432B2 true JP3163432B2 (ja) | 2001-05-08 |
Family
ID=17145206
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP24621393A Expired - Lifetime JP3163432B2 (ja) | 1993-09-07 | 1993-09-07 | 混濁菌の短期簡易判定法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3163432B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP4659293B2 (ja) * | 2001-08-10 | 2011-03-30 | アサヒビール株式会社 | ビールの劣化への振とうの影響を評価する方法 |
| JP2015188412A (ja) * | 2014-03-28 | 2015-11-02 | 味の素ゼネラルフーヅ株式会社 | 乳酸菌の検出方法 |
-
1993
- 1993-09-07 JP JP24621393A patent/JP3163432B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0775596A (ja) | 1995-03-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Cavin et al. | Medium for screening Leuconostoc oenos strains defective in malolactic fermentation | |
| Cogan | The Leuconostocs: milk products | |
| Bousbouras et al. | Effect of pH on malo-lactic fermentation in wine | |
| Aggag et al. | Studies on a gram-positive hydrogen bacterium, Nocardia opaca strain 1b: I. Description and physiological characterization | |
| CN109913523A (zh) | 一种筛选适宜双歧杆菌增殖的氮源的培养基 | |
| Pilone et al. | Characterization of wine lactic acid bacteria: single broth culture for tests of heterofermentation, mannitol from fructose, and ammonia from arginine | |
| Hammond et al. | The control of microbial spoilage of beer | |
| Kelly et al. | Growth of Leuconostoc oenos under anaerobic conditions | |
| Christensen et al. | Factors affecting diacetyl production by lactic acid bacteria | |
| King et al. | Epifluorescent method for detection of nonviable yeast | |
| CN111534565B (zh) | 一种用于检测调味品中难培养菌的培养基和检测方法 | |
| JP3163432B2 (ja) | 混濁菌の短期簡易判定法 | |
| Carr | Tetrad‐forming cocci in ciders | |
| Lund et al. | The effect of oxygen and redox potential on growth of Clostridium botulinum type E from a spore inoculum | |
| Ng et al. | Clostridium rubrum sp. n. and other pectinolytic clostridia from soil | |
| Haikara | Detection of Pectinatus contaminants in beer | |
| Evans | A note on the use of conductimetry in brewery microbiological control | |
| JP2869860B2 (ja) | ビール生育乳酸菌の早期判定方法および判定キット | |
| JP2769168B2 (ja) | ビール有害菌の検出用培地 | |
| JPH10286083A (ja) | グルコン酸および酢酸含有発酵液の製造方法 | |
| Harrison et al. | Recent advances in the rapid detection of brewery micro‐organisms and development of a microcolony method | |
| JPH08140697A (ja) | 耐熱性好酸性菌の検出用選択培地およびその検出法 | |
| Day et al. | Practical experience with rapid methods of detecting yeasts in breweries | |
| CN109371100A (zh) | 一种用于食醋产气菌检测的培养基及其方法 | |
| Haikara et al. | Rapid detection of contaminants in pitching yeast using automated turbidometry |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080302 Year of fee payment: 7 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090302 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090302 Year of fee payment: 8 |
|
| S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090302 Year of fee payment: 8 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090302 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100302 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100302 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100302 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100302 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110302 Year of fee payment: 10 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110302 Year of fee payment: 10 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120302 Year of fee payment: 11 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120302 Year of fee payment: 11 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120302 Year of fee payment: 11 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130302 Year of fee payment: 12 |