JP3233286B2 - 環状オリゴマーの酵素加水分解 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 技術分野 本発明はポリ（エチレンテレフタレート）の環状オリ
ゴマーの酵素加水分解方法であって、該環状オリゴマー
を１または複数のカルボン酸エステル加水分解酵素の作
用にかけることを含んで成る方法に関する。

背景技術 ポリ（エチレンテレフタレート）繊維は、繊維工業に
より用いられるポリエステルの主部分を占める。該繊維
は例えばテレフタル酸とエチレングリコールの重縮合
と、溶融液からの繊維の延伸によって製造される。それ
らの工程中、高温では、繊維の中や上に環状オリゴマ
ー、特に環状トリ（エチレンテレフタレート）が形成さ
れる。

環状オリゴマーは、ある含量のポリ（エチレンテレフ
タレート）繊維を有する織物を灰色がかった外観にする
傾向がある。これは織物表面に環状オリゴマーが付着す
るためであり、特にHT（高温）染色のような高温湿式法
の後に表出する。環状オリゴマーは除去するのが困難で
あり、アルカリ後処理に対して耐性であることすらある
〔G.Valk他,Melliand Textilberichte 1970,５,504−50
8参照〕。従って、効果的にするために、アルカリ処理
は苛酷でなければならないが、それは繊維材料の有意な
損失を引き起こす。また、環状オリゴマーの有機抽出も
技術的には可能性があるが、しかし工業的に適さない。

発明の概要 本発明の目的は、ポリ（エチレンテレフトレート）の
環状オリゴマー、特に環状トリ（エチレンテレフタレー
ト）の酵素的除去方法を提供することであり、該方法に
よると前記環状オリゴマーを直鎖状断片に酵素的に加水
分解し、次いでその断片を穏和な条件下で除去すること
ができまたはそのまま残すことも可能である。かくして
本発明の方法は有害な化学薬品または有機抽出の必要性
を回避する。

従って、本発明は、ポリ（エチレンテレフトレート）
の環状オリゴマーの酵素加水分解方法であって、該環状
オリゴマーを１または複数のカルボン酸エステル加水分
解酵素の作用にかけることを含んで成る方法を提供す
る。

発明の具体的開示 本発明は、ポリ（エチレンテレフタレート）の環状オ
リゴマーの酵素加水分解方法に関する。より具体的に
は、本発明はポリ（エチレンテレフタレート）の環状オ
リゴマーの酵素加水分解方法であって、前記環状オリゴ
マーを１または複数のカルボン酸エステル加水分解酵
素、特に脂肪分解酵素および／またはバイオポリエステ
ル加水分解酵素の作用にかけることを含んで成る方法を
提供する。

本発明の方法は特に、ある含量のポリ（エチレンテレ
フタレート）繊維を有する糸または織物に適用すること
ができ、当該方法の間に繊維の合成および加工中に副産
物として形成された環状オリゴマーの含量が除去される
かまたは少なくとも有意に減少されたものになる。

ポリエステル織物 ホリ（エチレンテレフタレート）は縮合により合成さ
れ、溶融液から繊維に延伸され、多分ステープルに切断
され、多分別の繊維種と混合され、そして糸に紡績され
る。糸が染色された後で織物に編まれるかまたはカーペ
ットになり、あるいは糸が織物に織られた後に染色され
る。それらの工程後に仕上げ（後処理）工程を行うこと
ができる。

合成および延伸中に、ポリ（エチレンテレフタレー
ト）の環状オリゴマーが繊維の上や中に形成される。そ
れらの環状オリゴマーは一部が機械の上に付着し、一部
が繊維の上／中にとどまって最終の織物またはカーペッ
トに望ましくない灰色がかった外観を与える。

環状オリゴマーは有機抽出により除去することが可能
であるが、そのような方法は、費用のため並びに取扱い
上および大量の有機溶媒の再生上の問題のために工業上
適していない。環状オリゴマーはアルカリ後精錬工程に
よって除去することも可能であるが、効果的であるため
には、アルカリ処理は苛酷でなければならず、これは繊
維材料の有意な損失も引き起こす。

本発明によれば、１または複数の加水分解酵素を使っ
た加水分解により、環状オリゴマー、特に環状トリマー
の除去を達成することができる。前記酵素はエステル結
合を加水分解することにより環状オリゴマーの環構造を
破壊する。その結果得られる生成物はあまり問題を引き
起こさない。というのは、それは穏やかな条件下で除去
できるかまたは製品中に残存してもよいからである。

酵素処理は有機抽出やアルカリ後精錬に認められる欠
点を持たず、特に多量の有機溶媒を必要とすることがな
く、且つ繊維材料の有意な損失が全くない。

本発明の方法は、現存する湿式加工機械、例えばビー
ム染色機、パッドロール、ジッガー／ウインス、Ｊ−ボ
ックス、またはパッドスチーム型の機械を使って実施で
きるので繊維工業において容易に適用可能である。本発
明の方法は好ましくは仕上げ（後処理）段階の間に行わ
れる。

好ましい態様では、本発明の方法は、ポリ（エチレン
テレフタレート）繊維の上および／または中またはポリ
（エチレンテレフタレート）繊維から製造された（また
は部分的に製造された）糸もしくは織物の中に存在する
ポリ（エチレンテレフタレート）の環状オリゴマーに対
して実施することができる。ポリエステル糸または織物
は、純粋なポリ（エチレンテレフタレート）から作られ
るか、またはポリ（エチレンテレフタレート）繊維と製
糸または製織に汎用される任意の多の材料との混紡から
作られる、どんな糸もしくは織物であってもよい。

よって、好ましい態様では、本発明はポリエステル系
繊維の酵素処理方法であって、前記ポリエステル糸繊維
または織物を１または複数のカルボン酸エステル加水分
解酵素、特に脂肪分解酵素および／またはバイオポリエ
ステル加水分解酵素の作用にかけることを含んで成る方
法を提供する。

ポリエステル織物はポリエステルを含む任意の織物ま
たは混紡織物であることができる。好ましくは、前記織
物は50％（w/w）より多く、特に75％（w/w）より多く、
90％（w/w）より多く、または95％（w/w）より多くポリ
エステルを含んで成る。最も好ましい態様では、本発明
の方法はポリ（エチレンテレフタレート）がポリエステ
ル材料から本質的に成る、即ち純粋なポリ（エチレンテ
レフタレート）ポリエステル材料から成る、織物または
布または糸に適用される。

加水分解酵素 本発明の酵素仕上げ方法は、任意のカルボン酸エステ
ル加水分解酵素、特に脂肪分解酵素および／またはバイ
オポリエステル加水分解酵素を使って行うことができ
る。そのような酵素は公知であり、文献中に明記されて
いる。例えば、Borgstrm B.＆ Brockman H.L.編、Lip
ases,Elsevier Science Publishers B.V.,1984;およびK
olattukudy P.E.,The Biochemistry of Plants,Academi
c Press Inc.,1980,4:624−631を参照のこと。

本発明においては、脂肪分解酵素は真正リパーゼ、エ
ステラーゼ、ホスホリパーゼおよびリゾホスホリパーゼ
を包含する。より具体的には、脂肪分解酵素はEC 3.1.
1.3、EC 3.1.1.23および／またはEC 3.1.1.26に分類さ
れるようなリパーゼ、EC 3.1.1.1、EC 3.1.1.2、EC 3.
1.1.6、EC 3.1.1.7および／またはEC 3.1.1.8に分類さ
れるようなエステラーゼ、EC 3.1.1.4および／またはEC
3.1.1.32に分類されるようなホスホリパーゼ、並びにE
C 3.1.1.5に分類されるようなリゾホスホリパーゼであ
ることができる。

脂肪分解酵素は好ましくは微生物由来、特に細菌、真
菌または酵母由来のものである。

特定の態様では、使用される脂肪分解酵素は、アブシ
ディア（Absidia）、特にアブシディア・ブラケスレー
ナ（Absidia blakesleena）おびアブシディア・コリム
ビフェラ（Absidia corymbifera）の菌株、アクロモバ
クター（Achromobacter）、特にアクロモバクター・イ
オファグス（Achromobacter iophagus）の菌株、エロモ
ナス（Aeromonas）の菌株、アルテルナリア（Alternari
a）、特にアルテルナリア・ブラシッシオラ（Alternari
a brassiciola）の菌株、アスペルギルス（Aspergillu
s）、特にアスペルギルス・ニガー（Aspergillus nige
r）およびアスペルギルス・フラブス（Aspergillus fla
vus）の菌株、アクロモバクター（Achromobacter）、特
にアクロモバクター・イオファグス（Achromobacter io
phagus）の菌株、アウレオバシディウム（Aureobasidiu
m）、特にアウレオバシディウム・プルランス（Aureoba
sidium pullulans）の菌株、バシラス（Bacillus）、特
にバシラス・ピュミルス（Bacillus pumilus）、バシラ
ス・ステアロサーモフィラス（Bacillus stearothermop
hilus）およびバシラス・サチリス（Bacillus subtili
s）の菌株、ボーベリア（Beauveria）の菌株、ブロコス
リックス（Brochothtix）、特にブロコスリックス・テ
ルモスファクタ（Brochothtix thermosphacta）の菌
株、カンジダ（Candida）、特にカンジダ・シリンドラ
セア（Candida cylindracea）〔カンジダ・ルゴサ（Can
dida rugosa）〕、カンジダ・パラリポリティカ（Candi
da paralipolytica）およびカンジダ・アンタークティ
カ（Candida antarctica）の菌株、クロモバクター（Ch
romobacter）、特にクロモバクター・ビスコサム（Chro
mobacter viscosum）の菌株、コプリヌス（Coprinu
s）、特にコプリヌス・シネリウス（Coprinus cineriu
s）の菌株、フザリウム（Fusarium）、特にフザリウム
・オキシスポラム（Fusarium oxysporum）、フザリウム
・ソラニ（Fusarium solani）、フザリウム・ソラニ・
ピシィ（Fusarium solani pisi）およびフザリウム・ロ
セウム・クルモルム（Fusarium roseum culmorum）の菌
株、ゲオトリクム（Geotricum）、特にゲオトリクム・
ペニシラタム（Geotricum penicillatum）の菌株、ハン
ゼヌラ（Hansenula）、特にハンゼヌラ・アノーマラ（H
ansenula anomala）の菌株、フミコラ（Humicola）、特
にフミコラ・ブレビスポラ（Humicola brevispora）、
フミコラ・ブレビス変種テルモイデ（Himicola brevis
var.thermoidea）およびフミコラ・インソレンス（Humi
cola insolens）の菌株、ハイフォザイマ（Hyphozyma）
の菌株、ラクトバシラス（Lactobacillus）、特にラク
トバシラス・クルバタス（Lactobacillus curbatus）の
菌株、メタリジウム（Metarhizium）の菌株、ムーコル
（Mucor）の菌株、ペシロマイセス（Paecilomyces）の
菌株、ペニシリウム（Penicillium）、特にペニシリウ
ム・シクロピウム（Penicillium cyclopium）、ペニシ
リウム・クルストサム（Penicillium crustosum）およ
びペニシリウム・エクスパンサム（Penicillium expans
um）の菌株、シュードモナス（Pseudomonas）、特にシ
ュードモナス・エルジノーサ（Pseudomonas aeruginos
a）、シュードモナス・アルカリゲネス（Pseudomonas a
lcaligenes）、シュードモナス・セパシア（Pseudomona
s cepacia）〔同義ブルコルデリア・セパシア（Burkold
eria cepacia）〕、シュードモナス・フルオレッセンス
（Pseudomonas fluorescens）、シュードモナス・フラ
ギ（Pseudomonas fragi）、シュドモナス・マルトフィ
リア（Pseudomonas maltophilia）、シュードモナス・
メンドシナ（Pseudomonas mendocina）、シュードモナ
ス・メフィチカ・リポリティカ（Pseudomonas mephitic
a lipolytica）、シュードモナス・アルカリゲネス（Ps
eudomonas alcaligenes）、シュードモナス・プランタ
リイ（Pseudomonas plantari）、シュードモナス・シュ
ードアルカリゲネス（Pseudomonas pseudoalcaligene
s）、シュードモナス・プチダ（Pseudomonas putid
a）、シュードモナス・スタッツェリ（Pseudomonas stu
tzeri）およびシュードモナス・ウィスコンシネンシス
（Pseudomonas wisconsinensis）の菌株、リゾクトニア
（Rhizoctonia）、特にリゾクトニア・ソラニ（Rhizoct
onia solani）の菌株、リゾムーコル（Rhizomucor）、
特にリゾムーコル・ミーヘイ（Rhizomucor miehei）の
菌株、リゾプス（Rhizopus）、特にリゾプス・ジャポニ
カス（Rhizopus japonicus）、リゾプス・ミクロスポル
ス（Rhizopus microsporus）およびリゾプス・ノドサス
（Rhizopus nodosus）の菌株、ロドスポリジウム（Rhod
osporidium）、特にロドスポリジウム・トルロイデス
（Rhodosporidium toruloides）の菌株、ロドトルラ（R
hodotorula）、特にロドトルラ・グルチニス（Rhodotor
ula glutinis）の菌株、スポロボロマイセス（Sporobol
omyces）、特にスポロボロマイセス・シバタナス（Spor
obolomyces shibatanus）の菌株、テルモマイセス（The
rmomyces）、特にテルモマイセス・ラヌジノサス（Ther
momyces lanuginosus）〔正式にはフミコラ・ラヌジノ
ーサ（Humicola lanuginosa）〕の菌株、チアロスポレ
ラ（Thiarosporella）、特にチアロスポレラ・ファセオ
リナ（Thiarosporella phaseolina）の菌株、トリコデ
ルマ（Trichoderma）、特にトリコデルマ・ハージアナ
ム（Trichoderma harzianum）およびトリコデルマ・リ
ーセイ（Trichoderma reesei）の菌株、および／または
ベルティシリウム（Verticillium）の菌株から得ること
ができる。

より好ましい態様では、本発明に従って使われる脂肪
分解酵素は、アスペルギルス（Aspergillus）の菌株、
アクロモバクター（Achromobacter）の菌株、バシラス
（Bacillus）の菌株、カンジダ（Candida）の菌株、ク
ロモバクター（Chromobacter）の菌株、フザリウム（Fu
sarium）の菌株、フミコラ（Humicola）の菌株、ハイフ
ォザイマ（Hyphozyma）の菌株、シュードモナス（Pseud
omonas）の菌株、リゾムーコル（Rhizomucor）の菌株、
リゾプス（Rhizopus）の菌株、またはテルモマイセス
（Thermomyces）の菌株から得られる。

より好ましい態様では、本発明に従って使われる脂質
分解酵素は、バシラス・ピュミルス（Bacillus pumilu
s）の菌株、バシラス・ステアロサーモフィラス（Bacil
lus stearothermophilus）の菌株、カンジダ・シリンド
ラセア（Candida cylindracea）の菌株、カンジダ・ア
ンタークティカ（Candida antarctica）の菌株、特にカ
ンジダ・アンタークティカのリパーゼＢ（WO 88/02775
に記載のようにして得られる）、フミコラ・インソレン
ス（Humicola insolens）の菌株、ハイフォザイマ（Hyp
hozyma）の菌株、シュードモナス・セパシア（Pseudomo
nas cepacia）の菌株、またはテルモマイセス・ラヌジ
ノサス（Thermomyces lanuginosus）の菌株から得られ
る。

本発明においては、バイオポリエステル加水分解酵素
はエステラーゼおよびポリヒドロキシアルカノエート解
重合酵素、特にポリ−３−ヒドロキシアルカノエート解
重合酵素を包含する。実際、エステラーゼは脂肪分解酵
素でもあり且つバイオポリエステル加水分解酵素でもあ
る。

より好ましい態様では、エステラーゼがクチナーゼま
たはスベリナーゼである。また本発明においては、クチ
ナーゼはクチンを分解することができる酵素であり〔例
えば、Lin T.S.＆ Kolattukudy P.E.,J.Bacteriol.197
8,133（２）:942−951参照〕、スベリナーゼはスベリン
を分解することができる酵素であり〔例えば、Kolattuk
udy P.E.,Science 1980,208:990−1000;Lin T.S.＆ Kol
attukudy P.E.Physiol.Plant Pathol.1980,17:1−15;お
よびThe Biochemistry of Plants,Academic Press,198
0,Vol.4:624−634参照〕、そしてポリ−３−ヒドロキシ
アルカノエート解重合酵素はポリ−３−ヒドロキシアル
カノエートを分解することができる酵素である〔例えば
Foster他,FEMS Microbiol.Lett.1994,118:279−282参
照〕。クチナーゼは、例えば、トリブチリン基質の臨界
ミセル濃度（CMC）付近で測定可能な活性化が全く観察
されないという点で、典型的なリパーゼと異なる。ま
た、クチナーゼはセリンエステラーゼの部類に属すると
も考えられる。

バイオポリエステル加水分解酵素は、好ましくは微生
物由来、特に細菌、真菌または酵母由来のものである。

好ましい態様では、バイオポリエステル加水分解酵素
はアスペルギルス（Aspergillus）、特にアスペルギル
ス・オリゼ（Aspergillus oryzae）の菌株、アルテルナ
リア（Alternaria）、特にアルテルナリア・ブラシッシ
オラ（Alternaria brassiciola）の菌株、フザリウム
（Fusarium）、特にフザリウム・ソラニ（Fusarium sol
ani）、フザリウム・ソラニ・ピシィ（Fusarium solani
pisi）、フザリウム・ロセウム・クルモルム（Fusariu
m roseum culmorum）またはフザリウム・ロセウム・サ
ンブシウム（Fusarium roseum sambusium）の菌株、ヘ
ルミントスポルム（Helminthosporum）、特にヘルミン
トスポルム・サティブム（Helminthosporum sativum）
の菌株、フミコラ（Humicola）、特にフミコラ・インソ
レンス（Humicola insolens）の菌株、シュードモナス
（Pseudomonas）、特にシュードモナス・メンドシナ（P
seudomonas mendocina）またはシュードモナス・プチダ
（Pseudomonas putida）の菌株、リゾクトニア（Rhizoc
tonia）、特にリゾクトニア・ソラニ（Rhizoctonia sol
ani）の菌株、ストレプトマイセス（Streptomyces）、
特にストレプトマイセス・スカビイス（Streptomyces s
cabies）の菌株、またはウロクラジウム（Ulocladiu
m）、特にウロクラジウム・コンソルティアレ（Uloclad
ium consortiale）の菌株から得られる。最も好ましい
態様では、バイオポリエステル加水分解酵素はフミコラ
・インソレンスの菌株、特にフミコラ・インソレンスDS
M 1800菌株から得られるクチナーゼである。

別の好ましい態様では、ポリ−３−ヒドロキシアルカ
ノエート解重合酵素は、アルカリゲネス（Alcaligene
s）、特にアルカリゲネス・フェカリス（Alcaligenes f
aecalis）の菌株、バシラス（Bacillus）、特にバシラ
ス・メガテリウム（Bacillus megaterium）の菌株、カ
モモナス（Camomonas）、特にカモモナス・テストステ
ロニ（Camomonas testosteroni）の菌株、ペニシリウム
（Penicillium）、特にペニシリウム・フニクロサム（P
enicillium funiculosum）の菌株、シュードモナス（Ps
eudomonas）、特にシュードモナス・フルオレッセンス
（Pseudomonas fluorescens）、シュードモナス・レモ
イグネイ（Pseudomonas lemoignei）およびシュードモ
ナス・オレオボランス（Pseudomonas oleovorans）の菌
株、またはロドスピリルム（Rhodospirillum）、特にロ
ドスピリルム・ルブルム（Rhodospirillum rubrum）の
菌株に由来する。

作業条件 本発明に従った酵素処理は湿式法として実施される。
現在のところ適当な浴比（処理液と織物との重量比）は
約20:1〜約1:1の範囲、好ましくは約15:1〜約5:1の範囲
であろうと思われる。

酵素量は使われる１または複数の酵素並びに与えられ
る反応時間および反応条件の関数であるに違いない。現
在のところ１または複数の酵素は糸または織物1kgあた
り酵素約0.001g〜約5g、好ましくは約0.001g/kg〜約0.5
g/kgの総量で添加されると思われる。

酵素加水分解は約30℃〜約100℃の温度範囲、好まし
くは約50℃〜約100℃の温度範囲で実施することができ
る。pH範囲は使用する１または複数の酵素に依存し、約
pH4〜pH11であることができる。現在のところ適当な反
応時間は約15分間〜約３時間の範囲内であると思われ
る。

本発明の方法は、酵素−基質相互作用を改善すること
ができる（基質の接近容易性を高めそして／または反応
生成物を溶解させるため）１または複数の化学物質の添
加を更に含んでもよく、前記化学物質は酵素処理の前に
または酵素処理と同時に添加することができる。そのよ
うな化学物質は特に、界面活性剤、湿潤剤および分散
剤、またはそれらの混合物であることができる。

本発明の方法は、場合により、加水分解された環状オ
リゴマーを洗浄、特に希アルカリでの洗浄にかけるとい
う洗浄段階を含んでもよい。希アルカリは環状オリゴマ
ーの直鎖状断片を溶解し、そしてそれらの直鎖状断片を
更に幾らか加水分解することができる。

本発明においては、希アルカリは約pH7〜約pH11の範
囲、より好ましくは約pH7〜約pH10、最も好ましくは約p
H7〜約pH9の範囲のpHを有する水性溶液を含んで成る。
媒質に緩衝剤を添加してもよい。

実施例 本発明を下記の実施例において更に説明するが、この
実施例は決して本発明の請求の範囲に限定を加えるもの
ではない。

実施例１ この実施例では、脂肪分解活性および／またはバイオ
ポリエステル加水分解活性を有する11種の異なる酵素
を、ポリ（エチレンテレフタレート）の環状オリゴマー
に対するそれらの活性について調べる。環状オリゴマー
は、ポリエステル織物から1,4−ジオキサンでのソック
スレー抽出により得られる。

本例において試験する11種の酵素は次のものである： バシラス・ピュミラス リパーゼ（国際公開第WO 91/
16422号明細書に記載の通りに得られる）； バシラス・ステアロサーモフィラス リパーゼ（昭和
64年特許第744992号明細書に記載の通りに得られる）； カンジダ・アンタークティカ リパーゼＢ（国際公開
第WO 88/02775号明細書に記載の通りに得られる）； カンジダ・シリンドラセア（＝カンジダ・ルゴサ）リ
バーゼ（日本油脂株式会社から得られる）； シュードモナス・セパシア リパーゼ（欧州特許第33
1,376号明細書に記載の通りに得られる）； グルコサミン付加リポラーゼ（商標）（国際公開第WO
95/09909号明細書に記載の通りに得られる）； テルモマイセス・ラヌジノサス（正式にはフミコラ・
ラヌギノーサ）リパーゼ（欧州特許第305,216号明細書
に記載の通りに得られる）； 組換え生産されたモルモットリパーゼ（rGPL）（国際
公開第WO 93/00426号明細書に記載の通りに得られ
る）； フミコラ・インソレンス クチナーゼ（米国特許第4,
810,414号明細書の実施例２に記載のようにフミコラ・
インソレンスDSM 1800株から得られた、実際にクチナー
ゼ活性も有するリパーゼ）； アスペルギルス・アクレータス ペクチンメチルエス
テラーゼ（PME;国際公開第WO 94/25575号明細書に記載
の通りに得られる）；および アスペルギルス・アクレータス アセチルエステラー
ゼ（AE;国際公開第WO 95/02689号明細書に記載の通りに
得られる）。

基質溶液を、フェノールレッドを含む寒天ゲル中で加
水分解酵素製剤と共にインキュベートする。17gのアガ
ロース２型培地EEO（Sigma,A−6877）、3gのNaNO₃、1g
のK₂HPO₄、0.5gのKCl、1mlの１％（w/v）FeSO₄および50
mlの0.4g/フェノールレッド溶液から1000mlの寒天ゲ
ルを調製し、pHを8.0〜8.5に調整する。

基質溶液、15μトリブチリンまたは環状オリゴマー
を寒天中の差込み穴の中に注ぎ、そして水性酵素溶液を
前記基質溶液の中に混合する。酵素が基質を加水分解す
ることができるならば、酸が作られてゲル中に拡散し、
pH指示薬であるフェノールレッドが赤から黄色に変わ
る。

実施例２ この実施例では、脂質分解酵素およびバイオポリエス
テル加水分解酵素（WO 96/13580に記載のようなフミコ
ラ・インソレンスDSM1800株から得られるフミコラ・イ
ンソレンスのクチナーゼ）を、環状トリ（エチレンテレ
フタレート）に対する活性について調べる。1,4−ジオ
キサンでのソックスレー抽出によりポリエステル織物か
ら環状トリマーを得、エタノールおよび1,4−ジオキサ
ン洗浄により更に精製する。

下記組成の混合物を30℃で16時間インキュベートす
る： グリシルグリシン緩衝剤0.2M、pH8.5 0.25ml 脱イオン水 2.50ml 環状トリマー、1.4−ジオキサン中5.0mM 0.25ml 酵素 62.5μｇ 5.0mlの1,4−ジオキサンを添加することにより反応を
停止させ、混合物を逆相HPLC用ODS（オクタデシルシリ
ケート）カラム上でアセトニトリルとpH3.0のリン酸緩
衝液を用いた溶出により分析する。反応生成物の検出
は、テレフタル酸とテレフタル酸誘導体の吸収波長であ
る240nmでの分光光度分析により行う。

この実施例では、与えられた条件下で環状トリ（エチ
レンテレフタレート）の56％がフミコラ・インソレンス
からのクチナーゼにより分解され、４つの検出可能な分
解生成物を与えた。

この実験の後で、それらの生成物のうちの３つがエチ
レンビス（テレフタル酸）エステル（MW＝342）、テレ
フタル酸モノ（２−ヒドロキシエチル）エステル（MW＝
210）およびテレフタル酸（MW＝166）であると同定され
た。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ペダーセン，ラルス サーベイ デンマーク国，デーコー―2880 バグス バエルト，ノボ アレ，ノボ ノルディ スク アクティーゼルスカブ (72)発明者 ルンド，ヘンリク デンマーク国，デーコー―2880 バグス バエルト，ノボ アレ，ノボ ノルディ スク アクティーゼルスカブ (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C12P 1/00 - 7/62 C08G 63/90 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)

Claims (19)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】トリ（エチレンテレフタレート）の環状オ
   リゴマーの酵素加水分解方法であって、前記環状オリゴ
   マーを１または複数のカルボン酸エステル加水分解酵素
   の作用にかけることを含んで成る方法。
2. 【請求項２】前記環状オリゴマーを１または複数の脂肪
   分解酵素および／またはバイオポリエステル加水分解酵
   素の作用にかけることを含んで成る、請求項１に記載の
   方法。
3. 【請求項３】前記脂肪分解酵素がリパーゼ、エステラー
   ゼ、ホスホリパーゼおよび／またはリゾホスホリパーゼ
   である、請求項２に記載の方法。
4. 【請求項４】前記脂肪分解酵素が、アスペルギルスの菌
   株、バシラスの菌株、カンジダの菌株、クロモバクター
   の菌株、フザリウムの菌株、フミコラの菌株、ハイフォ
   ザイマの菌株、シュードモナスの菌株、リゾムーコルの
   菌株、リゾプスの菌株またはテルモマイセスの菌株に由
   来するリパーゼである、請求項３に記載の方法。
5. 【請求項５】前記脂肪分解酵素が、バシラス・ピュミル
   スの菌株、バシラス・ステアロサーモフィラスの菌株、
   カンジダ・シリンドラセアの菌株、カンジダ・アンター
   クティカの菌株、フミコラ・インソレンスの菌株、ハイ
   フォザイマの菌株、シュードモナス・セパシアの菌株ま
   たはテルモマイセス・ラヌジノサスの菌株に由来する、
   請求項４に記載の方法。
6. 【請求項６】前記脂肪分解酵素が、アクロモバクターの
   菌株、カンジダの菌株またはシュードモナスの菌株に由
   来するホスホリパーゼもしくはリゾホスホリパーゼであ
   る、請求項２に記載の方法。
7. 【請求項７】前記脂肪分解酵素が、アクロモバクター・
   イオファグスの菌株、カンジダ・パラリポリティカの菌
   株またはシュードモナス・メフィチカ・リポリティカの
   菌株に由来するホスホリパーゼもしくはリゾホスホリパ
   ーゼである、請求項６に記載の方法。
8. 【請求項８】前記バイオポリエステル加水分解酵素がエ
   ステラーゼおよび／またはポリヒドロキシアルカノエー
   ト解重合酵素である、請求項２に記載の方法。
9. 【請求項９】前記エステラーゼがクチナーゼまたはスベ
   リナーゼである、請求項８に記載の方法。
10. 【請求項１０】前記エステラーゼが、アスペルギルスの
    菌株、アルテルナリアの菌株、フザリウムの菌株、ヘル
    ミントスポリウムの菌株、フミコラの菌株、シュードモ
    ナスの菌株、リゾクトニアの菌株、ストレプトマイセス
    の菌株またはウロクラジウムの菌株に由来する、請求項
    ８に記載の方法。
11. 【請求項１１】前記エステラーゼが、アスペルギルス・
    オリゼの菌株、アルテルナリア・ブラシッシオラの菌
    株、フザリウム・ソラニ、フザリウム・ソラニ・ピシ
    ィ、フザリウム・ロセウム・クルモルムもしくはフザリ
    ウム・ロセウム・サンブシウムの菌株、ヘルミントスポ
    リウム・サティブムの菌株、フミコラ・インソレンスの
    菌株、シュードモナス・メンドシナもしくはシュードモ
    ナス・プチダの菌株、リゾクトニア・ソラニの菌株、ス
    トレプトマイセス・スカビイスの菌株またはウロクラジ
    ウム・コンソルティアレの菌株に由来する、請求項10に
    記載の方法。
12. 【請求項１２】前記エステラーゼがフミコラ・インソレ
    ンスの菌株に由来するクチナーゼである、請求項11に記
    載の方法。
13. 【請求項１３】前記エステラーゼがフミコラ・インソレ
    ンスDMS 1800菌株に由来するクチナーゼである、請求項
    12に記載の方法。
14. 【請求項１４】前記ポリヒドロキシアルカノエート解重
    合酵素が、アルカリゲネスの菌株、バシラスの菌株、カ
    モモナスの菌株、ペニシリウムの菌株、シュードモナス
    の菌株またはロドスピリルムの菌株に由来する、請求項
    ８に記載の方法。
15. 【請求項１５】前記ポリヒドロキシアルカノエート解重
    合酵素が、アルカリゲネス・フェカリスの菌株、バシラ
    ス・メガテリウムの菌株、カモモナス・テストステロニ
    の菌株、ペリシリウム・フニクロサムの菌株、シュード
    モナス・フルオレッセンス、シュードモナス・レモイグ
    ネイもしくはシュードモナス・オレオボランスの菌株ま
    たはロドスピリルムの菌株に由来する、請求項14に記載
    の方法。
16. 【請求項１６】酵素−基質相互作用を高める１または複
    数の化学物質の添加を更に含んで成る、請求項１〜15の
    いずれか一項に記載の方法。
17. 【請求項１７】前記酵素−基質相互作用を高める１また
    は複数の化学物質が界面活性剤、湿潤剤および／または
    分散剤である、請求項16に記載の方法。
18. 【請求項１８】前記酵素作用の後に、加水分解された環
    状オリゴマーをアルカリ溶液での処置にかける洗浄段階
    が行われる、請求項１〜17のいずれか一項に記載の方
    法。
19. 【請求項１９】前記環状オリゴマーがポリエステル含有
    織物または糸の繊維の中および上に存在する、請求項１
    〜18のいずれか一項に記載の方法。