JP4889068B2

JP4889068B2 - Histamine release inhibitor, cyclic AMP phosphodiesterase inhibitor, active oxygen scavenger and radical scavenger

Info

Publication number: JP4889068B2
Application number: JP2001103829A
Authority: JP
Inventors: 芳彦石田; 了士高柿; 艶陽周; 直子岸田
Original assignee: Maruzen Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Maruzen Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2001-04-02
Filing date: 2001-04-02
Publication date: 2012-02-29
Anticipated expiration: 2021-04-02
Also published as: JP2002302452A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ヒスタミン遊離抑制作用、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害作用、活性酸素消去作用またはラジカル消去作用を有し、アレルギー性疾患や炎症性疾患等の予防・治療、皮膚の老化（例えば、皮膚のしわ形成や弾力性低下等）の予防・治療などに有用な植物抽出物を含有する各種薬剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、花粉症、アレルギー性鼻炎、気管支喘息、アトピー性皮膚炎など、アレルギー反応を通じて発症するアレルギー性疾患は、子供から成人にまで及ぶ広い年代層において見られる現代病の一つとなっている。その原因となるアレルギー反応はＩ型からＩＶ型に分けられる。例えば、アレルギー性鼻炎や気管支喘息に代表されるＩ型アレルギー（即時型アレルギー）においては、肥満細胞や好塩基球からヒスタミン、ロイコトリエン、プロスタグランジン等のケミカルメディエーターが放出され、これらケミカルメディエーターが鼻炎や喘息などの症状を伴う炎症反応を引き起こす。また、アレルギー性接触性皮膚炎に代表されるＩＶ型アレルギー（遅延型アレルギー）においては、Ｔ細胞が放出するサイトカインが好酸球やマクロファージを活性化し集積させ、炎症反応を引き起こす。
【０００３】
このようなアレルギー反応やそれに伴う炎症反応は、体内におけるヒスタミン遊離、血小板凝集、活性酸素やラジカルの発生などが原因となって生じる。
【０００４】
ヒスタミン遊離は、肥満細胞内のヒスタミンが細胞外に遊離する現象で、遊離されたヒスタミンが炎症反応を引き起こす。このため、ヒスタミン遊離を阻害・抑制する物質によりアレルギー性疾患や炎症性疾患を予防・治療する試みがなされており、そのようなヒスタミン遊離抑制剤として、トラニラスト、クロモグリク酸ナトリウム、バイカリン、バイカレイン、塩酸プロメタジン等が用いられてきた。しかしながら、これらの物質はいずれも副作用があり、安全性の点で問題となっていた。
【０００５】
血小板凝集は、アラキドン酸カスケードのホスホリパーゼＡ_２の活性化を招き、それにより放出されたロイコトリエンＢ_４やプロスタグランジンＥ_２等が炎症反応を引き起こす。このため、血小板の凝集を阻害・抑制する物質によりアレルギー性疾患や炎症性疾患を予防・治療する試みがなされており、そのような血小板凝集阻害物質として、アスピリン、チクロピジン、スルフィピラゾン等が用いられてきた。しかしながら、これらの物質はいずれも副作用があり、安全性の点で問題となっていた。
一方、血小板の凝集は血小板中のサイクリックＡＭＰの濃度と関係があり、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼによってサイクリックＡＭＰが分解されてサイクリックＡＭＰの濃度が低下すると、血小板は凝集しやすくなる。従って、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼの作用を抑制してサイクリックＡＭＰ濃度の低下を防止すれば、血小板凝集を防止できるものと考えられる。
【０００６】
活性酸素やラジカルは、体内で過剰に産生されたり、スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）による消去が不十分であったりして、体内における濃度が高くなると、アレルギー性炎症を生じさせるだけでなく、様々な組織障害の原因となる。特に、皮膚は紫外線など環境因子の刺激を直接受けるため活性酸素やラジカルが発生しやすい器官であり、活性酸素やラジカルは、コラーゲン等の生体組織を分解、変性あるいは架橋したり、油脂類を酸化して細胞に障害を与える過酸化脂質を生成したりして、皮膚のしわ形成や弾力性低下等の皮膚の老化を引き起こす。このため、活性酸素消去物質やラジカル消去物質を安全性の点で有利な天然物から得る試みがなされており、ウワミズザクラのプルヌソールＡ、ユーカリ等のエラグ酸、大麦、黒米、黒インゲン等の穀類のフラボノイド類、茶のカテキン、ゴマのセサミン類、セージ、ローズマリー等のハーブ類に含まれるカルノソールやロズマノール等の有効性が確認されている。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
アレルギー反応やそれに伴う炎症反応を阻害・抑制し、アレルギー性疾患や炎症性疾患を予防・治療するには、その原因となるヒスタミン遊離、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼによるサイクリックＡＭＰの分解、活性酸素や生体内ラジカルの発生等を阻害・抑制することが有用であると考えられる。また、活性酸素や生体内ラジカルの発生の阻害・抑制により、過酸化脂質の生成の抑制等を通じて皮膚のしわ形成や弾力性低下等の皮膚の老化を予防・治療できるものと考えられる。
【０００８】
そこで、本発明は、第一に、天然物の中からヒスタミン遊離抑制作用を有するものを見出し、それを有効成分としたヒスタミン遊離抑制剤を提供することを目的とする。
また、本発明は、第二に、天然物の中からサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害作用を有するものを見出し、それを有効成分としたサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害剤を提供することを目的とする。
さらに、本発明は、第三に、天然物の中から活性酸素消去作用を有するものを見出し、それを有効成分とした活性酸素消去剤を提供することを目的とする。
さらに、本発明は、第四に、天然物の中からラジカル消去作用を有するものを見出し、それを有効成分としたラジカル消去剤を提供することを目的とする。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
上記目的を達成するために、本発明により提供されるヒスタミン遊離抑制剤、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害剤、活性酸素消去剤またはラジカル消去剤は、五斂子（Averrhoa carambola L.）の葉部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。
【００１０】
【発明の実施の形態】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明のヒスタミン遊離抑制剤、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害剤、活性酸素消去剤またはラジカル消去剤の有効成分である「五斂子の葉部からの抽出物」には、抽出処理によって五斂子の葉部から得られる抽出液、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、またはこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００１１】
抽出処理の際に抽出原料として使用するものは、五斂子（学名：Averrhoa carambola L.；生薬名：陽桃）の葉部である。葉部には、完全葉の他、葉の一部（例えば葉身、葉柄、托葉など）が含まれる。また、五斂子の茎部も抽出原料として使用することができるので、茎部を葉部とともに抽出原料とすることや、茎部のみを抽出原料とすることも可能である。
【００１２】
五斂子はカタバミ科に属し、新鮮な果実は食用される。五斂子は、中国では紀元前から文献に記載され、その果実は断面が星形のことからスターフルーツとも呼ばれている。五斂子は沖縄、中国東南部や雲南その他熱帯各地で栽培されており、これらの地域から容易に入手することができる。
【００１３】
抽出原料として使用する五斂子の葉部は、採取後ただちに乾燥し、中切または細切したもの、あるいは粉砕したものが適当である。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥器を用いて行ってもよい。五斂子の葉部は、ヘキサン、ベンゼン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行なうことにより、五斂子の葉部の極性溶媒による抽出処理を効率よく行なうことができる。
【００１４】
抽出処理の際には、抽出溶媒として極性溶媒を使用するのが好ましい。五斂子の葉部に含まれるヒスタミン遊離抑制作用、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害作用、活性酸素消去作用またはラジカル消去作用を示す成分は、極性溶媒を抽出溶媒とする抽出処理によって容易に抽出することができる。
【００１５】
好適な抽出溶媒の具体例としては、水、低級脂肪族アルコール、含水の低級脂肪族アルコール等を例示でき、これらを単独で、またはこれら２種以上の混合物として使用することができる。好適な低級脂肪族アルコールの具体例としては、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、1,3−ブチレングリコール、エチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、イソプレングリコール等を例示することができる。これらの抽出溶媒は取り扱いが容易であり、抽出作業を比較的容易に行なうことができる。
【００１６】
抽出溶媒として使用し得る水には、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等の他、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、滅菌、ろ過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等が含まれる。従って、本発明において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００１７】
２種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を使用する場合には、水と低級脂肪族アルコールとの混合比を７：３〜２：８（重量比）とすることができる。
【００１８】
抽出処理は、五斂子の葉部に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定されず、常法に従って行なうことができる。抽出処理の際には、特殊な抽出方法を採用する必要はなく、室温ないし還流加熱下において任意の装置を使用することができる。
【００１９】
例えば、抽出溶媒を満たした処理槽に抽出原料を投入し、ときどき攪拌しながら可溶性成分を溶出させる。この際、抽出条件は抽出原料等に応じて適宜調整し得るが、抽出溶媒量は通常、抽出原料の５〜１５倍量（重量比）あり、抽出時間は通常１〜３時間であり、抽出温度は通常、常温〜９５℃である。
【００２０】
抽出処理により可溶性成分を溶出させた後、ろ過して抽出残渣を除くことによって、抽出液を得ることができる。得られた抽出液は、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、またはこれらの粗精製物若しくは精製物を得るために、常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。例えば、抽出液を遠心分離などにより固液分離して目的となる抽出物を得ることができる。
【００２１】
得られた抽出液はそのままでもヒスタミン遊離抑制剤、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害剤、活性酸素消去剤またはラジカル消去剤として使用することができるが、活性が低い場合もあるため、濃縮液またはその乾燥物としたものの方が利用しやすい。例えば、適当に濃縮したエキス状物や、スプレードライ等の方法を用いてさらに乾固させた乾燥エキスとして使用することができる。抽出液の乾燥物を得るにあたっては、吸湿性を改善するためにデキストリン、シクロデキストリン等のキャリアーを添加してもよい。
【００２２】
また、五斂子の葉部は特有の匂いと味を有しているため、その生理活性の低下を招かない範囲で脱色、脱臭等を目的とする精製を行なうことも可能であるが、化粧料や飲食品に添加する場合には大量に使用するものではないから、未精製のままでも実用上支障はない。
精製は、具体的には活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理等によって行なうことができる。
【００２３】
以上のようにして得られる五斂子の葉部からの抽出物は、ヒスタミン遊離抑制作用、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害作用、活性酸素消去作用またはラジカル消去作用を有する。
【００２４】
五斂子の葉部からの抽出物は、そのままでもヒスタミン遊離抑制剤、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害剤、活性酸素消去剤またはラジカル消去剤として使用することができるが、常法に従って製剤化して使用することもできる。製剤化する場合、保存や取り扱いを容易にするために、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容され得るキャリアーその他任意の助剤を添加することができる。五斂子の葉部からの抽出物は、製剤化により錠剤、カプセル剤、散剤、液剤等、任意の剤形とすることができ、外皮用剤、内服液剤、内服固形剤注射剤、座剤等として使用することができる。また、五斂子の葉部からの抽出物は、飲食品、皮膚外用剤、化粧料、医薬部外品、医薬品等の構成成分として広く利用することができる。
【００２５】
本発明のヒスタミン遊離抑制剤、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害剤、活性酸素消去剤またはラジカル消去剤の投与量は、用法、患者の年齢、性別、疾患の程度等により適宜決定することができる。
【００２６】
本発明のヒスタミン遊離抑制剤は、ヒスタミンの遊離を抑制することができる。本発明のヒスタミン遊離抑制剤によれば、Ｉ型アレルギー反応に伴う肥満細胞からのヒスタミンの遊離を抑制することができ、これによりヒスタミンによって引き起こされる炎症反応を抑制することができる。したがって、本発明のヒスタミン遊離抑制剤によれば、ヒスタミン遊離が関与するアレルギー性疾患や炎症性疾患を予防・治療することができる。
【００２７】
本発明のサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害剤は、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼの活性を阻害することができる。血小板の凝集は血小板中のサイクリックＡＭＰの濃度と関係があり、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼによってサイクリックＡＭＰが分解されてサイクリックＡＭＰの濃度が低下すると、血小板は凝集しやすくなる。そして、血小板凝集は、アラキドン酸カスケードのホスホリパーゼＡ_２の活性化を招き、それにより放出されたロイコトリエンＢ_４やプロスタグランジンＥ_２等が炎症反応を引き起こす。したがって、本発明のサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害剤によれば、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼの作用を抑制して血小板凝集を防止でき、これにより血小板凝集が関与する炎症反応を抑制することができる。また、本発明のサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害剤によれば、血小板凝集が関与するアレルギー性疾患や炎症性疾患を予防・治療することができる。
【００２８】
本発明の活性酸素消去剤は、活性酸素を消去することができる。ここで、「活性酸素」には、スーパーオキサイド、過酸化水素、ヒドロキシラジカル、一重項酸素等が含まれる。本発明の活性酸素消去剤は、これらの活性酸素種のうち特に過酸化水素を消去するために好適に使用することができる。活性酸素は、アレルギー性炎症を生じさせるだけでなく、生体内の膜や組織を構成する生体内分子を攻撃し、種々の炎症性疾患を誘発する。したがって、本発明の活性酸素消去剤によれば、活性酸素が関与するアレルギー性疾患や炎症性疾患を予防・治療することができる。また、活性酸素は、コラーゲン等の生体組織を分解、変性あるいは架橋したり、油脂類を酸化して細胞に障害を与える過酸化脂質を生成したりして、皮膚のしわ形成や弾力性低下等の皮膚の老化を引き起こす。したがって、本発明の活性酸素消去剤によれば、過酸化脂質の生成の抑制等を通じて、皮膚のしわ形成や弾力性低下等の皮膚の老化を防止することができる。
【００２９】
本発明のラジカル消去剤は、ラジカルを消去することができる。ここで、「ラジカル」とは、不対電子を１つまたはそれ以上有する分子または原子を意味する。本発明のラジカル消去剤が消去し得るラジカルは特に限定されないが、本発明のラジカル消去剤は、スーパーオキサイド、ヒドロキシラジカル、ＤＰＰＨ等のラジカルを消去するために好適に使用することができる。スーパーオキサイド、ヒドロキシラジカル等の生体内ラジカルは、アレルギー性炎症を生じさせるだけでなく、生体内の膜や組織を構成する生体内分子を攻撃し、種々の炎症性疾患を誘発する。したがって、本発明のラジカル消去剤によれば、生体内ラジカルが関与するアレルギー性疾患や炎症性疾患を予防・治療することができる。また、生体内ラジカルは、皮膚の老化に関与する過酸化脂質を生成する根源であり、特に、ヒドロキシラジカルは、生体内に存在する脂質、蛋白質、核酸または糖質等と直ちに化学反応し、細胞膜の脂質の過酸化を引き起こす。したがって、本発明のラジカル消去剤によれば、生体内ラジカルによる過酸化脂質の生成の抑制等を通じて、皮膚のしわ形成や弾力性低下等の皮膚の老化を防止することができる。
【００３０】
本発明のヒスタミン遊離抑制剤、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害剤、活性酸素消去剤またはラジカル消去剤は、患者に直接投与（例えば経口投与）してもよいが、皮膚外用剤、飲食品等に配合して使用することが好ましい。
【００３１】
ここで、「皮膚外用剤」とは、皮膚に適用される各種薬剤を意味し、例えば、化粧料、医薬部外品、医薬品、浴用剤等が含まれる。皮膚外用剤の具体例としては、肌に対するものとして、軟膏、パップ、クリーム、乳液、ローション、パック、ゼリー等を例示でき、頭皮に対するものとして、トニック、リンス、シャンプー、アストリンゼント等を例示することができる。
【００３２】
また、飲食品の具体例としては、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料等の飲料（これら飲料の濃縮液および調製用粉末を含む）；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の氷菓；そば、うどん、はるさめ、ぎょうざの皮、シュウマイの皮、中華麺、即席麺等の麺類；飴、キャンディー、ガム、チョコレート、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子等の菓子類；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳等の乳製品；サラダ油、天ぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂および油脂加工食品；ソース、たれ等の調味料；錠剤状、顆粒状等の種々の形態の健康・栄養補助食品類；その他スープ、シチュー、サラダ、惣菜、漬物、等を例示することができる。
【００３３】
皮膚外用剤への配合量は、五斂子の葉部からの抽出物の活性の強さや、当該抽出物を配合する皮膚外用剤の種類によって適宜調整し得るが、通常０．００１〜１．０重量％である。また、飲食物への配合量は、五斂子の葉部からの抽出物の摂取量が１日あたり１〜１０００ｍｇとなるように調整することが好ましい。
【００３４】
以上に説明したヒスタミン遊離抑制剤、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害剤、活性酸素消去剤またはラジカル消去剤は、ヒトに対して好適に適用するものであるが、ヒト以外の動物に対して適用することもできる。
【００３５】
【実施例】
以下、本発明に係る実施例を示し、本発明について更に詳細に説明する。
【００３６】
〔製造例１〕
五斂子（学名：Averrhoa carambola L.）の葉部の粗粉砕物300gを抽出溶媒2000mlに投入し、穏やかに攪拌しながら３時間、70℃に保った。その後ろ過し、ろ液を40℃で減圧下にて濃縮し、さらに減圧乾燥機で乾燥して五斂子の葉部からの抽出物を得た。４種類の抽出溶媒を用いて上記抽出処理を行ったところ、抽出物の収率は表１のとおりであった。なお、抽出溶媒が混合物の場合、以下に示す混合比は重量基準によるものである。
【００３７】

【００３８】
〔試験例１〕過酸化水素消去作用（ＳＯＤ様活性）の試験
製造例１で得られた水抽出物（試料１）、50％エタノール抽出物（試料２）、エタノール抽出物（試料３）および50％プロパノール抽出物（試料４）について、以下の方法で過酸化水素消去作用を試験した。
【００３９】
（１）過酸化水素の標準溶液（濃度1.5mM）10μLに、試料１〜４をそれぞれ含有する試料溶液10μLを加え、37℃で20分間インキュベートした後、発色試薬［DA-64（和光純薬）を10mMおよびトライトンX-100を0.5％含む0.1M PIPES緩衝液（pH 7.0）に、ペルオキシダーゼ溶液（100unit/mL，和光純薬）1mLを加え、全量を100mLに調整したもの］2.98mLを添加し、37℃で５分間インキュベートした後、波長727nmにおける吸光度を測定した。以下、この吸光度を「過酸化水素標準溶液添加、試料溶液添加時の吸光度」という。
【００４０】
（２）上記（１）において、過酸化水素の標準溶液を添加しない場合についても同様にして吸光度を測定した。以下、この吸光度を「過酸化水素標準溶液無添加、試料溶液添加時の吸光度」という。
【００４１】
（３）上記（１）および（２）において、試料溶液を添加せずに蒸留水を添加した場合についても同様にして吸光度を測定した。以下、これらの吸光度をそれぞれ「過酸化水素標準溶液添加、試料溶液無添加時の吸光度」および「過酸化水素標準溶液無添加、試料溶液無添加時の吸光度」という。
【００４２】
（４）次式に基づいて、試料１〜４の過酸化水素消去率（％）を求めた。
【００４３】
【式１】
過酸化水素消去率（％）＝〔１−(C−D)/(A−B)〕×100
【００４４】
なお、式中、「Ａ」は過酸化水素標準溶液添加、試料溶液無添加時の吸光度を、「Ｂ」は過酸化水素標準溶液無添加、試料溶液無添加時の吸光度を、「Ｃ」は過酸化水素標準溶液添加、試料溶液添加時の吸光度を、「Ｄ」は過酸化水素標準溶液無添加、試料溶液添加時の吸光度を表す。
【００４５】
試料溶液の終濃度を段階的に変化させて過酸化水素消去率（％）の測定を行ない、過酸化水素消去率が50％になる試料濃度(ppm；μg/mL)を内挿法により求めた。
試料１〜３の過酸化水素50％消去濃度は以下の表２に示すとおりであった。
【００４６】

【００４７】
表２に示す結果から、五斂子の葉部からの水抽出物（試料１）、50％エタノール抽出物（試料２）、エタノール抽出物（試料３）および50％プロパノール抽出物（試料４）はいずれも過酸化水素消去作用（ＳＯＤ様活性）を有することが示された。また、これらの抽出物の中でも特に50％エタノール抽出物（試料２）が優れた過酸化水素消去作用（ＳＯＤ様活性）を有することが示された。また、抽出物の濃度を変化させることにより、過酸化水素消去作用（ＳＯＤ様活性）の強さを変化させることができることが示された。
【００４８】
〔試験例２〕ラジカル消去作用
製造例１で得られた水抽出物（試料１）、50％エタノール抽出物（試料２）、エタノール抽出物（試料３）および50％プロパノール抽出物（試料４）について、非常に安定なラジカルであるDPPH（1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl）を使用して以下の方法によりラジカル消去作用を試験した。
【００４９】
（１）1.5×10^-4M DPPH（1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl）エタノール溶液３mLに、試料１〜４をそれぞれ含有する試料溶液３mLを加え、直ちに容器を密栓して振り混ぜた後、30分間静置した。その後、520nmにおける吸光度を測定した。以下、この吸光度を「試料溶液添加時の吸光度」という。
【００５０】
（２）コントロールとして、試料溶液の代わりに試料を溶解した溶媒を用いた場合についても同様にして520nmにおける吸光度を測定した。以下、この吸光度を「コントロールの吸光度」という。
【００５１】
（３）ブランクとして、エタノール３mLに試料溶液３mLを加えた後、直ちに520nmにおける吸光度を測定した。以下、この吸光度を「ブランクの吸光度」という。
【００５２】
（４）次式に基づいて、試料１〜４のラジカル消去率（％）を求めた。
【００５３】
【式２】
ラジカル消去率（％）＝〔１−(B−C)/A〕×100
【００５４】
なお、式中、「Ａ」はコントロールの吸光度を、「Ｂ」は試料溶液添加時の吸光度を、「Ｃ」はブランクの吸光度を表す。
【００５５】
試料濃度の試料濃度を段階的に変化させてラジカル消去率（％）を測定し、ラジカル消去率が50％になる試料濃度（ppm；μg/mL）を内挿法により求めた。
試料１〜４のラジカル50％消去濃度は以下の表３に示すとおりであった。
【００５６】

【００５７】
表３に示す結果から、五斂子の葉部からの水抽出物（試料１）、50％エタノール抽出物（試料２）、エタノール抽出物（試料３）および50％プロパノール抽出物（試料４）はいずれもラジカル消去作用を有することが示された。また、これらの抽出物の中でも特に50％エタノール抽出物（試料２）が優れたラジカル消去作用を有することが示された。また、抽出物の濃度を変化させることにより、ラジカル消去作用の強さを変化させることができることが示された。
【００５８】
〔試験例３〕ヒスタミン遊離抑制作用の試験
製造例１で得られた水抽出物（試料１）、50％エタノール抽出物（試料２）、エタノール抽出物（試料３）および50％プロパノール抽出物（試料４）について、以下の方法でヒスタミン遊離抑制作用を試験した。なお、以下の方法は、細胞内のヒスタミンが遊離されると同時にヘキソサミニダーゼも遊離されることから、ヘキソサミニダーゼ遊離を指標にヒスタミン遊離抑制作用を評価する方法である。
【００５９】
（１）25mLの培養フラスコに入れた培地（15％FBS添加S-MEM培地；以下同じ）にRBL-2H3細胞 1.0×10⁶個を播種し、37℃、5％CO₂-95％airの下で４日間培養した。次いで、トリプシン処理し、遠心分離（800rpmで４分間）して細胞を集めた。得られた細胞を4.0×10⁵cell/mLで培地に懸濁し、そこにマウスモノクローナル抗ジニトロフェニル基IgE（DNP-Specific IgE）を0.5μg/mLの濃度で添加した。この細胞浮遊液を96ウェルプレートの各ウェルに100μLずつ播種し、37℃、5％CO₂-95％airの下で24時間培養した。培養終了後、各ウェル中の培地を除去し、シラガニアン緩衝液で２回洗浄した。次いで、上記緩衝液30μLと試料１〜４をそれぞれ含有する試料溶液10μLとを加え、37℃で10分間インキュベートした後、ジニトロフェニル化ウシ血清アルブミン（DNP-BSA）10μLを加え、さらに37℃で15分間インキュベートした。その後、氷冷下で上清10μLを新たな96ウェルプレートに移し替え、これに１mmol/L p-ニトロフェニル-N-アセチル-β-D-グルコサミド溶液10μLを加え、37℃で１時間インキュベートした。反応終了後、0.1mol/L Na₂CO₃−NaHCO₃溶液250μLを加え、マイクロプレートリーダーにて650nmを対照に415nmにおける吸光度を測定した（以下、この吸光度を「吸光度Ａ」という）。
【００６０】
（２）試料溶液の代わりにシラガニアン緩衝液を添加した細胞上清についても同様の処理と吸光度の測定を行なった（以下、この吸光度を「吸光度Ｂ」という）。
【００６１】
（３）細胞上清と0.1mol/L Na₂CO₃−NaHCO₃溶液を同様の処理で反応させたものについても吸光度の測定を行なった（以下、この吸光度を「吸光度Ｃ」という）。
【００６２】
（４）DNP-BSAの代わりにシラガニアン緩衝液を加えたものについても同様の処理と吸光度の測定を行なった（以下、この吸光度を「吸光度Ｄ」という）。
【００６３】
（５）次式に基づいて、試料１〜４のヘキソサミニダーゼ遊離抑制率（％）を求めた。
【００６４】
【式３】
ヘキソサミニダーゼ遊離抑制率（％）＝｛１−〔(A−C−D)/(B−D)〕｝×100
【００６５】
なお、式中、「Ａ」は吸光度Ａを、「Ｂ」は吸光度Ｂを、「Ｃ」は吸光度Ｃを、「Ｄ」は吸光度Ｄを表す。
【００６６】
試料溶液の試料濃度を段階的に変化させてヘキソサミニダーゼ遊離抑制率（％）を測定し、ヘキソサミニダーゼの遊離を50％阻害する試料濃度ＩＣ_５０(ppm；μg/mL)を内挿法により求めた。
試料１〜４のＩＣ_５０は以下の表４に示すとおりであった。
【００６７】

【００６８】
表４に示す結果から、五斂子の葉部からの水抽出物（試料１）、50％エタノール抽出物（試料２）、エタノール抽出物（試料３）および50％プロパノール抽出物（試料４）はいずれもヒスタミン遊離抑制作用を有することが示された。また、これらの抽出物の中でも特に50％エタノール抽出物（試料２）が優れたヒスタミン遊離抑制作用を有することが示された。また、抽出物の濃度を変化させることにより、ヒスタミン遊離抑制作用の強さを変化させることができることが示された。
【００６９】
〔試験例４〕サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害作用の試験
製造例１で得られた水抽出物（試料１）、50％エタノール抽出物（試料２）、エタノール抽出物（試料３）および50％プロパノール抽出物（試料４）について、以下の方法でサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害作用を試験した。
【００７０】
（１）５mM塩化マグネシウムを含有する50mMトリス塩酸緩衝液（pH7.5）0.2mLにウシ胎児血清アルブミン溶液（2.5mg/mL）0.1mLおよびサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ溶液（0.1mg/mL）0.1mLを加え、さらに試料１〜４をそれぞれ含有する試料溶液0.05mLを加え、37℃で５分間インキュベートした。次いで、サイクリックＡＭＰ溶液（0.5mg/mL）0.05mLを加え、37℃で60分間反応させた。反応後、沸騰水上で３分間煮沸して反応を停止させ、４℃で遠心分離し、上清中の反応基質（サイクリックＡＭＰ）を高速液体クロマトグラフィーにより定量した。
【００７１】
（２）試料溶液を加えずに同様の酵素反応と反応基質の定量を行ない、試料無添加時の反応基質量に対する試料添加時の反応基質量の比率より、試料１〜４のサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害率（％）を求めた。
【００７２】
（３）試料溶液の試料濃度を段階的に変化させてサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害率（％）を測定し、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼの活性を50％阻害する試料濃度ＩＣ_５０（ppm；μg/mL）を内挿法により求めた。
試料１〜４のＩＣ_５０（ppm）は以下の表５に示すとおりであった。
【００７３】

【００７４】
表５に示す結果から、五斂子の葉部からの水抽出物（試料１）、50％エタノール抽出物（試料２）、エタノール抽出物（試料３）および50％プロパノール抽出物（試料４）はいずれもサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害作用を有することが示された。また、これらの抽出物の中でも特に50％エタノール抽出物（試料２）が優れたサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害作用を有することが示された。また、抽出物の濃度を変化させることにより、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害作用の強さを変化させることができることが示された。
【００７５】
〔試験例５〕肌荒れ改善作用（皮膚の老化防止・改善作用）の試験
製造例１で得られた五斂子の葉部からの５０％エタノール抽出物（試料２）を配合した乳液（以下「実施例乳液」という。）を常法に従って調製した。実施例乳液の組成を以下に示す。
【００７６】
五斂子葉部抽出物（製造例１の試料２）０．１ｇ
セチルアルコール０．５ｇ
ミツロウ２．０ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（10E.0）１．０ｇ
モノステアリン酸グリセリル１．０ｇ
ヒアルロン酸０．１ｇ
プロピレングリコール５．０ｇ
エタノール３．０ｇ
パラオキシ安息香酸メチル０．３ｇ
香料０．０３ｇ
精製水残部（全量を１００mlとする）
【００７７】
実施例乳液と、五斂子の葉部からの抽出物を含まないほかは実施例乳液と同じ組成からなる比較例乳液とについて、下記の評価試験を行った。
被験者：２２〜４３歳の女性多数の中から、皮溝・皮丘が消え、広範囲の角質がめくれている（表６に示す評価が１）、または皮溝・皮丘が不鮮明で、角質が部分的にめくれている（表６に示す評価が２）、肌荒れと判定された２０名を選抜して被験者とした。
塗布試験：各被験者に、顔の右半分には実施例乳液を、左半分には比較例乳液を、朝夕各１回、３０日間塗布させた。
【００７８】

【００７９】
[判定１：肌荒れ改善効果]
塗布試験終了後、シルフロ（FLEXICL DEVELOPMENTS LTD製）によるレプリカ法を用いて顔のレプリカをとり、５０倍の顕微鏡で皮紋の状態および角質剥離の状態を観察し、表６に示す評価基準で肌の状態を判定した。判定結果を表７に示す。
【００８０】

【００８１】
表７に示されるように、実施例乳液を塗布した領域は、比較例乳液を塗布した領域に比べて顕著に肌荒れ（皮膚の老化）が改善された。
【００８２】
[判定２・官能評価]
使用感と肌への効果について、実施例乳液と比較例乳液とを比較した場合の優劣を被験者全員に質問した。回答の集計結果を表８に示す。
【００８３】

【００８４】
表８に示される結果より、官能評価によっても、上記判定１と同様の効果と、優れた使用感とが確認された。
【００８５】
判定１および２の結果より五斂子の葉部からの抽出物を配合した皮膚化粧料が皮膚の老化防止・改善作用（肌荒れ改善作用）を有するとともに、皮膚に適用した場合の使用感と安全性に優れていることが確認された。
【００８６】
〔配合例〕
製造例１で得られた五斂子の葉部からの抽出物を用いて以下の化粧料、食品および薬剤を製造したところ、いずれの場合においても、良好な化粧料、食品および薬剤を得ることができた。
【００８７】
（配合例１乳液）
下記の組成の乳液を常法により製造した。
ホホバオイル４ｇ
オリーブオイル２ｇ
スクワラン２ｇ
セタノール２ｇ
モノステアリン酸グリセリル２ｇ
ポリオキシエチレンセチルエーテル（20E.0）２．５ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.0) ２ｇ
１，３−ブチレングリコール３ｇ
アスコルビン酸リン酸マグネシウム０．１ｇ
カミツレ抽出物０．１ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム０．１ｇ
黄杞抽出物０．１ｇ
シャクヤク抽出物０．１ｇ
パラオキシ安息香酸メチル０．１５ｇ
香料０．０５ｇ
五斂子葉部抽出物（製造例１の試料１）１ｇ
精製水残部（全量を１００ｇとする）
【００８８】
（配合例２化粧水）
下記の組成の化粧水を常法により製造した。
グリセリン３ｇ
１，３−ブチレングリコール３ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.0) ０．５ｇ
パラオキシ安息香酸メチル０．１５ｇ
クエン酸０．１ｇ
クエン酸ソーダ０．１ｇ
油溶性甘草抽出物０．０５g
酢酸トコフェロール０．０５ｇ
アロエ抽出物０．１ｇ
マロニエエキス０．１ｇ
クジン抽出物０．１ｇ
シラカバ抽出物０．１ｇ
香料０．０５ｇ
五斂子葉部抽出物（製造例１の試料２）０．５ｇ
精製水残部（全量を１００ｇとする）
【００８９】
（配合例３クリーム）
下記の組成のクリームを常法により製造した。
流動パラフィン５ｇ
サラシミツロウ４ｇ
セタノール３ｇ
スクワラン１０ｇ
ラノリン２ｇ
ステアリン酸１ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.0) １．５ｇ
モノステアリン酸グリセリル３ｇ
１，３−ブチレングリコール６ｇ
パラオキシ安息香酸メチル１．５ｇ
コンキオリン加水分解物０．１ｇ
ニンジンエキス０．１ｇ
香料０．１ｇ
五斂子葉部抽出物（製造例１の試料３）２ｇ
精製水残部（全量を１００ｇとする）
【００９０】
（配合例４パック）
下記の組成のパックを常法により製造した。
ポリビニルアルコール１５ｇ
ポリエチレングリコール３ｇ
プロピレングリコール７ｇ
エタノール１０ｇ
パラオキシ安息香酸エチル０．０５ｇ
チンピ抽出液０．１ｇ
ローヤルゼリー抽出液０．１ｇ
ソウハクヒエキス０．１ｇ
コメヌカ抽出液０．１ｇ
香料０．０５ｇ
五斂子葉部抽出物（製造例１の試料４）５ｇ
精製水残部（全量を１００ｇとする）
【００９１】
（配合例５健康・栄養補助食品）
下記の混合物を打錠して、錠剤状健康・栄養補助食品を製造した。
五斂子葉部抽出物（製造例１の試料１）１００重量部
コラーゲン３０重量部
ムコ多糖・タンパク(コンドロイチン) １０重量部
ヒアルロン酸１重量部
ハス胚芽抽出物２０重量部
月桃葉茎抽出物２０重量部
黒米抽出物２０重量部
甘草抽出物(グリチルリチンを含む) １０重量部
ミルク蛋白加水分解物(アミノ酸、低分子ペプチドを含む)１０重量部
ビタミンＢ群混合粉末(全ビタミンＢ群を含む) ４重量部
ビタミンＣ１０重量部
粉糖（ショ糖）５３重量部
グリセリン脂肪酸エステル１２重量部
【００９２】
（配合例６健康・栄養補助食品）
下記の混合物を顆粒状に形成して健康・栄養補助食品を製造した。
五斂子葉部抽出物（製造例１の試料２）２００重量部
ハス胚芽抽出物５０重量部
真珠蛋白加水分解(各種アミノ酸、ペプチドを含む) １５重量部
シルク蛋白加水分解物（各種アミノ酸、ペプチドを含む）１５重量部
大豆イソフラボン１０重量部
紫米抽出物５０重量部
赤ワインエキスパウダー(プロシアニジンを含む) ３０重量部
酵母エキス１０重量部
(グルタチオン、核酸、アミノ酸、ビタミンを含む)
ザクロ種子抽出物１０重量部
小麦胚芽抽出物１０重量部
(ビタミン、クロム、セレン、モリブデンを含む)
ＤＮＡ３０重量部
ビートオリゴ糖１０６０重量部
ステビア抽出物１０重量部
【００９３】
（配合例７健康・栄養補助食品）
下記の混合物をゼラチンカプセル化して、錠剤状健康・栄養補助食品を製造した。
五斂子葉部抽出物（製造例１の試料１）５０重量部
ハス胚芽抽出物１５重量部
セラミド３０重量部
リン脂質(レシチン) １０重量部
ビタミンＥ(トコフェロール) １７重量部
マルチカロチン(αおよびβカロチン、ルテイン、リコペン)１０重量部
赤米抽出物（シクロアルテノールエステルを含む）１５重量部
オクタコサノール１重量部
植物ステロール５重量部
シソの実油(αリノレン酸を含む) ２０重量部
精製魚油(ＤＨＡ、ＥＰＡを含む) ２０重量部
ごま油(リグナン化合物を含む) ２０重量部
オリーブ油１０重量部
大豆、菜種混合油６５重量部
グリセリン脂肪酸エステル１２重量部
【００９４】
（配合例８清涼飲料水）
下記の混合物を常法に従い混合し清涼飲料水を製造した。
五斂子葉部抽出物（製造例１の試料１）１重量部
ハス胚芽抽出物１重量部
ローヤルゼリー３重量部
水溶性コラーゲン８重量部
ハトムギエキス１重量部
高麗ニンジンエキス１重量部
プラセンタ(胎盤)エキス１重量部
プエラリアエキス１重量部
パープルヤムエキス１重量部
オリゴ糖５重量部
ショ糖１０重量部
プルーン果汁２重量部
ザクロ果汁５重量部
グレープフルーツ果汁１０重量部
ビタミンＣ１重量部
グレープフルーツフレーバー０．７重量部
水残部（全量を１００重量部とする）
【００９５】
（配合例９キャンディー）
下記の混合物を常法に従い混合しキャンディーを製造した。
五斂子葉部抽出物（製造例１の試料２）２重量部
ハス胚芽抽出物１重量部
水あめ３０重量部
甘草エキス３重量部
甜茶エキス１重量部
ブルーベリーエキス１重量部
ストロベリー１／５濃縮果汁１重量部
赤キャベツ色素０．０５重量部
レモン果汁０．５重量部
水５重量部
【００９６】
(配合例１０錠剤)
下記成分分量に基づき、錠剤製造の常法により処理して錠剤を製造した。
【００９７】
五斂子葉部抽出物（製造例１の試料２）０．２重量部
乳糖９５．０重量部
ステアリン酸マグネシウム０．０１重量部
着色料微量
香料適量
【００９８】
【発明の効果】
本発明によれば、ヒスタミン遊離抑制剤、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害剤、活性酸素消去剤またはラジカル消去剤が提供される。本発明のヒスタミン遊離抑制剤、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害剤、活性酸素消去剤またはラジカル消去剤は、アレルギー性疾患や炎症性疾患等の予防・治療、皮膚の老化（例えば、皮膚のしわ形成や弾力性低下等）の予防・治療などに有用である。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention has a histamine release inhibitory action, a cyclic AMP phosphodiesterase inhibitory action, an active oxygen scavenging action or a radical scavenging action, and prevention / treatment of allergic diseases and inflammatory diseases, skin aging (for example, skin wrinkles) The present invention relates to various drugs containing plant extracts useful for the prevention and treatment of formation and reduced elasticity.
[0002]
[Prior art]
In recent years, allergic diseases that develop through allergic reactions such as hay fever, allergic rhinitis, bronchial asthma, and atopic dermatitis have become one of the modern diseases seen in a wide range of ages from children to adults. The allergic reaction that causes it is divided into type I to type IV. For example, in type I allergy (immediate type allergy) represented by allergic rhinitis and bronchial asthma, chemical mediators such as histamine, leukotriene, prostaglandin are released from mast cells and basophils, and these chemical mediators are treated with rhinitis. Causes an inflammatory response with symptoms such as asthma. Further, in type IV allergy (delayed type allergy) typified by allergic contact dermatitis, cytokines released by T cells activate and accumulate eosinophils and macrophages to cause an inflammatory reaction.
[0003]
Such allergic reactions and accompanying inflammatory reactions are caused by histamine release in the body, platelet aggregation, generation of active oxygen and radicals, and the like.
[0004]
Histamine release is a phenomenon in which histamine in mast cells is released extracellularly, and the released histamine causes an inflammatory reaction. For this reason, attempts have been made to prevent and treat allergic diseases and inflammatory diseases with substances that inhibit / suppress histamine release, and such histamine release inhibitors include tranilast, sodium cromoglycate, baicalin, baicalein, hydrochloric acid. Promethazine and the like have been used. However, all of these substances have side effects and have been problematic in terms of safety.
[0005]
Platelet aggregation is phospholipase A in the arachidonic acid cascade. ₂ Of leukotriene B released by the activation of ₄ And prostaglandin E ₂ Cause an inflammatory response. For this reason, attempts have been made to prevent and treat allergic diseases and inflammatory diseases with substances that inhibit / suppress platelet aggregation, and as such platelet aggregation inhibitors, aspirin, ticlopidine, sulfipirazone, etc. have been used. It was. However, all of these substances have side effects and have been problematic in terms of safety.
On the other hand, platelet aggregation is related to the concentration of cyclic AMP in platelets. When cyclic AMP is decomposed by cyclic AMP phosphodiesterase and the concentration of cyclic AMP decreases, platelets tend to aggregate. Therefore, it is considered that platelet aggregation can be prevented by suppressing the action of cyclic AMP phosphodiesterase to prevent a decrease in cyclic AMP concentration.
[0006]
Active oxygen and radicals are produced excessively in the body, or are not sufficiently erased by superoxide dismutase (SOD). If the concentration in the body increases, not only allergic inflammation occurs, but also various Causes tissue damage. In particular, the skin is an organ that is prone to generate active oxygen and radicals because it is directly stimulated by environmental factors such as ultraviolet rays. Active oxygen and radicals decompose, denature or crosslink biological tissues such as collagen, and oxidize fats and oils. In this way, lipid peroxides that damage cells are produced, causing skin aging such as skin wrinkle formation and reduced elasticity. For this reason, attempts have been made to obtain active oxygen scavenging substances and radical scavenging substances from natural products that are advantageous in terms of safety, such as walnut prunus purnusol A, ellagic acid such as eucalyptus, etc. Effectiveness of carnosol and rosmanol contained in herbs such as flavonoids, tea catechins, sesame sesamin, sage and rosemary has been confirmed.
[0007]
[Problems to be solved by the invention]
In order to inhibit / suppress allergic reactions and the accompanying inflammatory reactions and prevent / treat allergic diseases and inflammatory diseases, histamine release, cyclic AMP degradation by cyclic AMP phosphodiesterase, active oxygen and living It is considered useful to inhibit / suppress the generation of internal radicals. In addition, by inhibiting or suppressing the generation of active oxygen or radicals in the living body, it is considered that skin aging such as skin wrinkle formation and reduced elasticity can be prevented and treated through suppression of the formation of lipid peroxide.
[0008]
Therefore, the first object of the present invention is to find a natural product having an inhibitory action on histamine release, and to provide a histamine release inhibitor using the same as an active ingredient.
The second object of the present invention is to find a natural AMP phosphodiesterase inhibitory action from natural products, and to provide a cyclic AMP phosphodiesterase inhibitor containing the same as an active ingredient.
A third object of the present invention is to find an active oxygen scavenger from natural products and to provide an active oxygen scavenger containing the active oxygen scavenger as an active ingredient.
A fourth object of the present invention is to provide a radical scavenger that has a radical scavenging action among natural products and uses it as an active ingredient.
[0009]
[Means for Solving the Problems]
In order to achieve the above object, a histamine release inhibitor, a cyclic AMP phosphodiesterase inhibitor, a reactive oxygen scavenger or a radical scavenger provided by the present invention is obtained from the leaves of Averrhoa carambola L. It contains an extract as an active ingredient.
[0010]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
Hereinafter, the present invention will be described in detail.
In the “extract from the quince leaf” which is an active ingredient of the histamine release inhibitor, cyclic AMP phosphodiesterase inhibitor, active oxygen scavenger or radical scavenger of the present invention, An extract obtained from a leaf part, a diluted or concentrated solution of the extract, a dried product obtained by drying the extract, or a crude product or a purified product thereof are included.
[0011]
What is used as an extraction raw material in the extraction process is a leaf part of Goshiko (scientific name: Averrhoa carambola L .; crude drug name: yang peach). In addition to the complete leaf, the leaf part includes a part of the leaf (for example, a blade, a petiole, a cocoon leaf, etc.). Moreover, since the stem part of a quince can also be used as an extraction raw material, it is also possible to use the stem part together with the leaf part as an extraction raw material, or to use only the stem part as an extraction raw material.
[0012]
Goshiko belongs to the family Oxalis, and fresh fruits are edible. Goshiko has been described in Chinese literature since BC, and its fruit is also called star fruit because of its star-shaped cross section. Goshiko is cultivated in Okinawa, southeastern China, Yunnan and other tropical regions, and can be easily obtained from these regions.
[0013]
As for the leaves of the quince used as the raw material for extraction, it is appropriate to dry them immediately after collection, and to cut them into pieces, cut them into pieces, or pulverize them. Drying may be performed in the sun, or may be performed using a commonly used dryer. The coconut leaf part may be used as an extraction raw material after pretreatment such as degreasing with a nonpolar solvent such as hexane or benzene. By performing a pretreatment such as degreasing, the extraction treatment with the polar solvent of the leaves of the quince can be performed efficiently.
[0014]
In the extraction process, it is preferable to use a polar solvent as the extraction solvent. Components that exhibit histamine release inhibitory action, cyclic AMP phosphodiesterase inhibitory action, active oxygen scavenging action or radical scavenging action contained in the leaves of the quince can be easily extracted by extraction using a polar solvent as the extraction solvent. it can.
[0015]
Specific examples of suitable extraction solvents include water, lower aliphatic alcohols, hydrous lower aliphatic alcohols, and the like, and these can be used alone or as a mixture of two or more thereof. Specific examples of suitable lower aliphatic alcohols include methanol, ethanol, propanol, isopropanol, 1,3-butylene glycol, ethylene glycol, glycerin, propylene glycol, isoprene glycol and the like. These extraction solvents are easy to handle and the extraction operation can be performed relatively easily.
[0016]
Water that can be used as the extraction solvent includes pure water, tap water, well water, mineral spring water, mineral water, hot spring water, spring water, fresh water, and the like, as well as those subjected to various treatments. Examples of the treatment applied to water include purification, heating, sterilization, sterilization, filtration, ion exchange, adjustment of osmotic pressure, buffering, and the like. Therefore, the water that can be used as the extraction solvent in the present invention includes purified water, hot water, ion-exchanged water, physiological saline, phosphate buffer, phosphate buffered saline, and the like.
[0017]
When using the liquid mixture of 2 or more types of polar solvents as an extraction solvent, the mixing ratio can be adjusted suitably. For example, when using the liquid mixture of water and a lower aliphatic alcohol, the mixing ratio of water and a lower aliphatic alcohol can be 7: 3 to 2: 8 (weight ratio).
[0018]
The extraction treatment is not particularly limited as long as the soluble component contained in the leaves of the quince can be eluted in the extraction solvent, and can be performed according to a conventional method. In the extraction process, it is not necessary to adopt a special extraction method, and any apparatus can be used at room temperature or under reflux heating.
[0019]
For example, the extraction raw material is put into a treatment tank filled with the extraction solvent, and the soluble components are eluted with occasional stirring. At this time, although the extraction conditions can be appropriately adjusted according to the extraction raw material, the amount of the extraction solvent is usually 5 to 15 times (weight ratio) of the extraction raw material, and the extraction time is usually 1 to 3 hours. The temperature is usually from room temperature to 95 ° C.
[0020]
An eluate can be obtained by eluting soluble components by extraction and then filtering to remove the extraction residue. The obtained extract is diluted, concentrated, dried, purified, etc. according to a conventional method in order to obtain a diluted or concentrated solution of the extract, a dried product of the extract, or a crude purified product or a purified product thereof. Processing may be performed. For example, the target extract can be obtained by solid-liquid separation of the extract by centrifugation or the like.
[0021]
The obtained extract can be used as it is as a histamine release inhibitor, a cyclic AMP phosphodiesterase inhibitor, an active oxygen scavenger or a radical scavenger. It is easier to use the one that has been. For example, it can be used as an appropriately concentrated extract or as a dry extract further dried by a method such as spray drying. In obtaining a dried extract, a carrier such as dextrin or cyclodextrin may be added to improve hygroscopicity.
[0022]
In addition, since the leaves of the quince have a characteristic odor and taste, it is possible to perform purification for the purpose of decolorization, deodorization, etc. within the range that does not cause a decrease in the physiological activity. Since it is not used in large quantities when added to foods and foods and drinks, there is no practical problem even if it is not purified.
Specifically, the purification can be performed by activated carbon treatment, adsorption resin treatment, ion exchange resin treatment, or the like.
[0023]
The extract from the leaves of the pentagon obtained as described above has a histamine release inhibitory action, a cyclic AMP phosphodiesterase inhibitory action, an active oxygen scavenging action, or a radical scavenging action.
[0024]
The extract from the leaves of the quince can be used as it is as a histamine release inhibitor, cyclic AMP phosphodiesterase inhibitor, active oxygen scavenger, or radical scavenger, but is formulated and used according to conventional methods. You can also. In the case of formulating, a pharmaceutically acceptable carrier such as dextrin and cyclodextrin and other optional auxiliaries can be added for easy storage and handling. Extracts from the leaves of the quince can be made into any dosage form such as tablets, capsules, powders, liquids, etc. by formulation, and are used as skin preparations, internal liquids, solid injections, suppositories. Can be used as etc. In addition, the extract from the leaves of the quince can be widely used as a component of foods and drinks, external preparations for skin, cosmetics, quasi drugs, pharmaceuticals and the like.
[0025]
The dosage of the histamine release inhibitor, cyclic AMP phosphodiesterase inhibitor, active oxygen scavenger, or radical scavenger of the present invention can be appropriately determined depending on the usage, the patient's age, sex, disease severity, and the like.
[0026]
The histamine release inhibitor of the present invention can suppress histamine release. According to the histamine release inhibitor of the present invention, release of histamine from mast cells associated with type I allergic reaction can be suppressed, thereby suppressing an inflammatory reaction caused by histamine. Therefore, according to the histamine release inhibitor of the present invention, allergic diseases and inflammatory diseases involving histamine release can be prevented and treated.
[0027]
The cyclic AMP phosphodiesterase inhibitor of the present invention can inhibit the activity of cyclic AMP phosphodiesterase. Aggregation of platelets is related to the concentration of cyclic AMP in the platelets. When cyclic AMP is decomposed by cyclic AMP phosphodiesterase and the concentration of cyclic AMP decreases, platelets tend to aggregate. Platelet aggregation is then induced by phospholipase A of the arachidonic acid cascade. ₂ Of leukotriene B released by the activation of ₄ And prostaglandin E ₂ Cause an inflammatory response. Therefore, according to the cyclic AMP phosphodiesterase inhibitor of the present invention, the action of cyclic AMP phosphodiesterase can be suppressed to prevent platelet aggregation, thereby suppressing the inflammatory reaction involving platelet aggregation. Moreover, according to the cyclic AMP phosphodiesterase inhibitor of the present invention, allergic diseases and inflammatory diseases involving platelet aggregation can be prevented and treated.
[0028]
The active oxygen scavenger of the present invention can scavenge active oxygen. Here, “active oxygen” includes superoxide, hydrogen peroxide, hydroxy radical, singlet oxygen and the like. The active oxygen scavenger of the present invention can be suitably used for eliminating hydrogen peroxide among these active oxygen species. Reactive oxygen not only causes allergic inflammation, but also attacks in vivo molecules that make up membranes and tissues in the body and induces various inflammatory diseases. Therefore, according to the active oxygen scavenger of the present invention, allergic diseases and inflammatory diseases involving active oxygen can be prevented and treated. In addition, active oxygen decomposes, denatures or cross-links biological tissues such as collagen, or produces lipid peroxides that oxidize fats and oils and damage cells, thereby forming skin wrinkles and reducing elasticity. Causes skin aging. Therefore, according to the active oxygen scavenger of the present invention, it is possible to prevent skin aging such as skin wrinkle formation and elasticity reduction through suppression of the formation of lipid peroxide.
[0029]
The radical scavenger of the present invention can scavenge radicals. Here, “radical” means a molecule or atom having one or more unpaired electrons. The radical that can be erased by the radical scavenger of the present invention is not particularly limited, but the radical scavenger of the present invention can be suitably used for scavenging radicals such as superoxide, hydroxy radical, and DPPH. In vivo radicals such as superoxide and hydroxy radicals not only cause allergic inflammation, but also attack in vivo molecules constituting membranes and tissues in the body to induce various inflammatory diseases. Therefore, according to the radical scavenger of the present invention, allergic diseases and inflammatory diseases involving in vivo radicals can be prevented and treated. In vivo radicals are the source of lipid peroxides that are involved in skin aging. In particular, hydroxy radicals immediately react with lipids, proteins, nucleic acids, carbohydrates, etc. present in the living body, resulting in cell membranes. Causes peroxidation of lipids. Therefore, according to the radical scavenger of the present invention, it is possible to prevent skin aging such as formation of wrinkles on the skin and decrease in elasticity through suppression of the production of lipid peroxide by in vivo radicals.
[0030]
The histamine release inhibitor, cyclic AMP phosphodiesterase inhibitor, active oxygen scavenger or radical scavenger of the present invention may be directly administered to a patient (for example, orally), but is added to an external skin preparation, food and drink, etc. Are preferably used.
[0031]
Here, “skin external preparation” means various drugs applied to the skin, and includes, for example, cosmetics, quasi drugs, pharmaceuticals, bath preparations and the like. Specific examples of the external preparation for skin may include ointments, pops, creams, emulsions, lotions, packs, jellies and the like for the skin, and tonics, rinses, shampoos, astringents and the like for the scalp. it can.
[0032]
Specific examples of foods and beverages include beverages such as soft drinks, carbonated drinks, nutritional drinks, fruit drinks, and lactic acid drinks (including concentrates and powders for preparation of these drinks); ice cream, ice sherbet, shaved ice, etc. Ice confectionery; noodles such as buckwheat, udon, harusame, gyoza skin, shumai skin, chinese noodles, instant noodles; confectionery such as strawberries, candy, gum, chocolate, snack confectionery, biscuits, jelly, jam, cream, baked confectionery; Fish and fishery processed foods such as kamaboko, ham and sausage; Dairy products such as processed milk and fermented milk; Fats and oils and processed foods such as salad oil, tempura oil, margarine, mayonnaise, shortening, whipped cream, dressing; sauce, sauce, etc. Seasonings; various forms of health and nutritional supplements such as tablets and granules; other soups, stews, It can be exemplified Rada, prepared foods, pickles, and the like.
[0033]
Although the compounding quantity to an external preparation for skin can be suitably adjusted with the strength of the activity of the extract from the leaf part of a quince, and the kind of external preparation for skin which mix | blends the said extract, 0.001-1. 0% by weight. Moreover, it is preferable to adjust the compounding quantity to food / beverage so that the intake of the extract from the leaf part of a quince may be 1-1000 mg per day.
[0034]
The histamine release inhibitor, cyclic AMP phosphodiesterase inhibitor, active oxygen scavenger or radical scavenger described above is preferably applied to humans, but may also be applied to animals other than humans. it can.
[0035]
【Example】
Examples of the present invention will be described below, and the present invention will be described in more detail.
[0036]
[Production Example 1]
300 g of coarsely pulverized leaves of Goshiko (scientific name: Averrhoa carambola L.) was added to 2000 ml of extraction solvent and kept at 70 ° C. for 3 hours with gentle stirring. Thereafter, the mixture was filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure at 40 ° C., and further dried with a vacuum drier to obtain an extract from the leaves of quince. When the above extraction treatment was performed using four types of extraction solvents, the yield of the extract was as shown in Table 1. When the extraction solvent is a mixture, the mixing ratio shown below is based on weight.
[0037]

[0038]
[Test Example 1] Test of hydrogen peroxide scavenging action (SOD-like activity)
The water extract (sample 1), 50% ethanol extract (sample 2), ethanol extract (sample 3) and 50% propanol extract (sample 4) obtained in Production Example 1 were peroxidized by the following method. The hydrogen scavenging action was tested.
[0039]
(1) Add 10 μL of a sample solution containing each of Samples 1 to 4 to 10 μL of a standard solution of hydrogen peroxide (concentration: 1.5 mM), and incubate at 37 ° C. for 20 minutes, and then develop a coloring reagent [DA-64 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) ) 10 mM and Triton X-100 containing 0.5% 0.1 M PIPES buffer (pH 7.0), 1 mL of peroxidase solution (100 units / mL, Wako Pure Chemical Industries, Ltd., adjusted to a total volume of 100 mL) 2.98 mL added After incubation at 37 ° C. for 5 minutes, the absorbance at a wavelength of 727 nm was measured. Hereinafter, this absorbance is referred to as “absorbance when hydrogen peroxide standard solution is added and sample solution is added”.
[0040]
(2) In the case of (1) above, the absorbance was also measured in the same manner when the hydrogen peroxide standard solution was not added. Hereinafter, this absorbance is referred to as “absorbance when a hydrogen peroxide standard solution is not added and a sample solution is added”.
[0041]
(3) In the above (1) and (2), the absorbance was measured in the same manner when distilled water was added without adding the sample solution. Hereinafter, these absorbances are referred to as “absorbance when hydrogen peroxide standard solution is added and no sample solution is added” and “absorbance when hydrogen peroxide standard solution is not added and sample solution is not added”, respectively.
[0042]
(4) The hydrogen peroxide elimination rate (%) of Samples 1 to 4 was determined based on the following formula.
[0043]
[Formula 1]
Hydrogen peroxide elimination rate (%) = [1- (C−D) / (A−B)] × 100
[0044]
In the formula, “A” is the absorbance when the hydrogen peroxide standard solution is added and no sample solution is added, “B” is the absorbance when the hydrogen peroxide standard solution is not added and the sample solution is not added, and “C” is The absorbance when the hydrogen peroxide standard solution is added and the sample solution is added, and “D” indicates the absorbance when the hydrogen peroxide standard solution is not added and the sample solution is added.
[0045]
Measure the hydrogen peroxide elimination rate (%) by changing the final concentration of the sample solution step by step, and determine the sample concentration (ppm; μg / mL) at which the hydrogen peroxide elimination rate is 50% by interpolation. It was.
The hydrogen peroxide 50% erase concentrations of Samples 1 to 3 were as shown in Table 2 below.
[0046]

[0047]
From the results shown in Table 2, the water extract (sample 1), 50% ethanol extract (sample 2), ethanol extract (sample 3), and 50% propanol extract (sample 4) from the leaves of the quince Were shown to have hydrogen peroxide scavenging action (SOD-like activity). Moreover, it was shown that 50% ethanol extract (sample 2) has an excellent hydrogen peroxide scavenging action (SOD-like activity) among these extracts. It was also shown that the strength of hydrogen peroxide scavenging action (SOD-like activity) can be changed by changing the concentration of the extract.
[0048]
[Test Example 2] Radical scavenging action
The water extract (sample 1), 50% ethanol extract (sample 2), ethanol extract (sample 3) and 50% propanol extract (sample 4) obtained in Production Example 1 are very stable radicals. Radical scavenging action was tested by the following method using a certain DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl).
[0049]
(1) 1.5 × 10 ^-Four To 3 mL of M DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl) ethanol solution, 3 mL of a sample solution containing each of samples 1 to 4 was added, and the container was immediately sealed and shaken and allowed to stand for 30 minutes. Thereafter, the absorbance at 520 nm was measured. Hereinafter, this absorbance is referred to as “absorbance when the sample solution is added”.
[0050]
(2) As a control, the absorbance at 520 nm was measured in the same manner when a solvent in which the sample was dissolved was used instead of the sample solution. Hereinafter, this absorbance is referred to as “control absorbance”.
[0051]
(3) As a blank, 3 mL of the sample solution was added to 3 mL of ethanol, and the absorbance at 520 nm was immediately measured. Hereinafter, this absorbance is referred to as “blank absorbance”.
[0052]
(4) Based on the following formula, radical scavenging rates (%) of samples 1 to 4 were obtained.
[0053]
[Formula 2]
Radical scavenging rate (%) = [1- (B−C) / A] × 100
[0054]
In the formula, “A” represents the absorbance of the control, “B” represents the absorbance when the sample solution was added, and “C” represents the absorbance of the blank.
[0055]
The radical scavenging rate (%) was measured while changing the sample concentration stepwise, and the sample concentration (ppm; μg / mL) at which the radical scavenging rate was 50% was determined by interpolation.
The radical 50% elimination concentration of Samples 1 to 4 was as shown in Table 3 below.
[0056]

[0057]
From the results shown in Table 3, a water extract (sample 1), a 50% ethanol extract (sample 2), an ethanol extract (sample 3) and a 50% propanol extract (sample 4) from the leaves of the quince. Were shown to have radical scavenging action. Moreover, it was shown that 50% ethanol extract (sample 2) has an excellent radical scavenging action among these extracts. Moreover, it was shown that the strength of radical scavenging action can be changed by changing the concentration of the extract.
[0058]
[Test Example 3] Test of histamine release inhibitory action
For the water extract (sample 1), 50% ethanol extract (sample 2), ethanol extract (sample 3) and 50% propanol extract (sample 4) obtained in Production Example 1, histamine release was carried out by the following method. The inhibitory action was tested. The following method is a method for evaluating the histamine release inhibitory action by using hexosaminidase release as an index because hexosaminidase is released simultaneously with release of intracellular histamine.
[0059]
(1) RBL-2H3 cells 1.0 × 10 in a medium (15% FBS-added S-MEM medium; the same shall apply hereinafter) placed in a 25 mL culture flask ⁶ Seeded pieces, 37 ° C, 5% CO ₂ Cultured for 4 days under -95% air. Cells were then collected by trypsinization and centrifugation (800 rpm for 4 minutes). Obtained cells 4.0 × 10 ^Five The suspension was suspended in a medium at cell / mL, and mouse monoclonal anti-dinitrophenyl group IgE (DNP-specific IgE) was added thereto at a concentration of 0.5 μg / mL. 100 μL of this cell suspension is seeded in each well of a 96-well plate, and 37 ° C, 5% CO ₂ The cells were cultured for 24 hours under -95% air. After completion of the culture, the medium in each well was removed and washed twice with Siraganian buffer. Next, 30 μL of the above buffer solution and 10 μL of a sample solution containing each of samples 1 to 4 were added and incubated at 37 ° C. for 10 minutes. Then, 10 μL of dinitrophenylated bovine serum albumin (DNP-BSA) was added, and further at 37 ° C. Incubated for 15 minutes. Thereafter, 10 μL of the supernatant was transferred to a new 96-well plate under ice-cooling, and 10 μL of 1 mmol / L p-nitrophenyl-N-acetyl-β-D-glucosamide solution was added thereto and incubated at 37 ° C. for 1 hour. . After completion of the reaction, 0.1 mol / L Na ₂ CO _Three -NaHCO _Three 250 μL of the solution was added, and the absorbance at 415 nm was measured with a microplate reader using 650 nm as a control (hereinafter, this absorbance is referred to as “absorbance A”).
[0060]
(2) The same treatment and absorbance measurement were performed on the cell supernatant to which the Siraganian buffer was added instead of the sample solution (hereinafter, this absorbance is referred to as “absorbance B”).
[0061]
(3) Cell supernatant and 0.1mol / L Na ₂ CO _Three -NaHCO _Three Absorbance was also measured for the solution reacted with the same treatment (hereinafter, this absorbance is referred to as “absorbance C”).
[0062]
(4) The same treatment and measurement of absorbance were performed for a sample in which a Siraganian buffer was added instead of DNP-BSA (hereinafter, this absorbance is referred to as “absorbance D”).
[0063]
(5) Based on the following formula, hexosaminidase release inhibition rate (%) of samples 1 to 4 was determined.
[0064]
[Formula 3]
Inhibition rate of hexosaminidase release (%) = {1-[(A−C−D) / (B−D)]} × 100
[0065]
In the formula, “A” represents absorbance A, “B” represents absorbance B, “C” represents absorbance C, and “D” represents absorbance D.
[0066]
Sample concentration IC that inhibits hexosaminidase release by 50% by measuring the hexosaminidase release inhibition rate (%) by changing the sample concentration of the sample solution stepwise. ₅₀ (ppm; μg / mL) was determined by interpolation.
IC of samples 1 to 4 ₅₀ Was as shown in Table 4 below.
[0067]

[0068]
From the results shown in Table 4, a water extract (sample 1), a 50% ethanol extract (sample 2), an ethanol extract (sample 3) and a 50% propanol extract (sample 4) from the leaves of the quince. All were shown to have a histamine release inhibitory action. Moreover, it was shown that 50% ethanol extract (sample 2) has an excellent histamine release inhibitory action among these extracts. Moreover, it was shown that the strength of histamine release inhibitory action can be changed by changing the concentration of the extract.
[0069]
[Test Example 4] Cyclic AMP phosphodiesterase inhibitory test
The water extract (sample 1), 50% ethanol extract (sample 2), ethanol extract (sample 3), and 50% propanol extract (sample 4) obtained in Production Example 1 were cyclically treated as follows. AMP phosphodiesterase inhibitory action was tested.
[0070]
(1) 0.2 mL of 50 mM Tris-HCl buffer (pH 7.5) containing 5 mM magnesium chloride and 0.1 mL of fetal bovine serum albumin solution (2.5 mg / mL) and 0.1 mL of cyclic AMP phosphodiesterase solution (0.1 mg / mL) In addition, 0.05 mL of a sample solution containing each of Samples 1 to 4 was added and incubated at 37 ° C. for 5 minutes. Next, 0.05 mL of a cyclic AMP solution (0.5 mg / mL) was added and reacted at 37 ° C. for 60 minutes. After the reaction, the reaction was stopped by boiling for 3 minutes in boiling water, centrifuged at 4 ° C., and the reaction substrate (cyclic AMP) in the supernatant was quantified by high performance liquid chromatography.
[0071]
(2) The same enzyme reaction and quantitative determination of the reaction substrate are performed without adding the sample solution, and the cyclic AMP phosphodiesterase of samples 1 to 4 is determined from the ratio of the reaction group mass at the time of sample addition to the reaction group mass at the time of no sample addition. The inhibition rate (%) was determined.
[0072]
(3) Sample concentration IC which measures the cyclic AMP phosphodiesterase activity inhibition rate (%) by changing the sample concentration of the sample solution stepwise to inhibit the cyclic AMP phosphodiesterase activity by 50%. ₅₀ (Ppm; μg / mL) was determined by interpolation.
IC of samples 1 to 4 ₅₀ (Ppm) was as shown in Table 5 below.
[0073]

[0074]
From the results shown in Table 5, the water extract (sample 1), 50% ethanol extract (sample 2), ethanol extract (sample 3), and 50% propanol extract (sample 4) from the leaves of the quince Were shown to have a cyclic AMP phosphodiesterase inhibitory action. Moreover, it was shown that 50% ethanol extract (sample 2) has an excellent cyclic AMP phosphodiesterase inhibitory action among these extracts. It was also shown that the strength of the cyclic AMP phosphodiesterase inhibitory action can be changed by changing the concentration of the extract.
[0075]
[Test Example 5] Test for improving rough skin (preventing and improving skin aging)
A milky lotion (hereinafter referred to as “Example milky lotion”) containing a 50% ethanol extract (sample 2) from the leaves of the quince obtained in Production Example 1 was prepared according to a conventional method. The composition of the example emulsion is shown below.
[0076]
Five coconut leaf extract (Sample 2 of Production Example 1) 0.1 g
Cetyl alcohol 0.5g
Beeswax 2.0g
Oleic acid polyoxyethylene sorbitan (10E.0) 1.0g
1.0g glyceryl monostearate
Hyaluronic acid 0.1g
Propylene glycol 5.0g
Ethanol 3.0g
Methyl paraoxybenzoate 0.3g
Perfume 0.03g
Purified water remainder (total volume is 100 ml)
[0077]
The following evaluation tests were conducted on the Example emulsion and the Comparative Example emulsion having the same composition as the Example emulsion except that it did not contain an extract from the leaves of the quince.
Test subject: From a large number of women aged 22 to 43, the skin groove / cutaneous skin disappeared and the horny skin turned over a wide range (the evaluation shown in Table 6 is 1), or the skin groove / cutaneous skin was unclear and the skin was dead. Twenty persons who were partially turned up (the evaluation shown in Table 6 was 2) and were judged to be rough were selected as subjects.
Application test: Each subject was allowed to apply the example latex on the right half of the face and the comparative emulsion on the left half once every morning and evening for 30 days.
[0078]

[0079]
[Judgment 1: Effect of improving rough skin]
After the application test was completed, a replica of the face was taken using the replica method by Sylphlo (manufactured by FLEXICL DEVELOPMENTS LTD). The state of was judged. Table 7 shows the determination results.
[0080]

[0081]
As shown in Table 7, roughening of the skin (skin aging) was remarkably improved in the region where the example emulsion was applied, compared to the region where the comparative example emulsion was applied.
[0082]
[Judgment 2: Sensory evaluation]
About the feeling of use and the effect on skin, all subjects were asked about superiority or inferiority when the Example emulsion and the Comparative Example emulsion were compared. Table 8 shows the results of the responses.
[0083]

[0084]
From the results shown in Table 8, the same effect as in the above-mentioned judgment 1 and excellent usability were confirmed by sensory evaluation.
[0085]
Based on the results of Judgment 1 and 2, skin cosmetics containing an extract from the leaves of pentagonal have anti-aging / improving action on skin (roughness-improving action), and feel and safety when applied to the skin It was confirmed that it was excellent in performance.
[0086]
[Example of formulation]
When the following cosmetics, foods and drugs were produced using the extract from the leaves of the quince obtained in Production Example 1, good cosmetics, foods and drugs were obtained in any case. I was able to.
[0087]
(Formulation example 1 emulsion)
An emulsion having the following composition was produced by a conventional method.
Jojoba oil 4g
2g olive oil
Squalane 2g
Cetanol 2g
2g glyceryl monostearate
Polyoxyethylene cetyl ether (20E.0) 2.5g
Oleic acid polyoxyethylene sorbitan (20E.0) 2g
1,3-butylene glycol 3g
Ascorbic acid magnesium phosphate 0.1g
Chamomile extract 0.1g
0.1g dipotassium glycyrrhizinate
Jaundice extract 0.1g
Peony extract 0.1g
Methyl paraoxybenzoate 0.15g
Fragrance 0.05g
5 ginseng extract (Sample 1 of Production Example 1) 1 g
Purified water remainder (total amount is 100 g)
[0088]
(Formulation example 2 lotion)
A lotion having the following composition was produced by a conventional method.
Glycerin 3g
1,3-butylene glycol 3g
Oleic acid polyoxyethylene sorbitan (20E.0) 0.5g
Methyl paraoxybenzoate 0.15g
Citric acid 0.1g
Sodium citrate 0.1g
Oil-soluble licorice extract 0.05g
Tocopherol acetate 0.05g
Aloe extract 0.1g
Maronier extract 0.1g
Cousin extract 0.1g
Birch extract 0.1g
Fragrance 0.05g
Five coconut leaf extract (Sample 2 of Production Example 1) 0.5 g
Purified water remainder (total amount is 100 g)
[0089]
(Formulation example 3 cream)
A cream having the following composition was produced by a conventional method.
Liquid paraffin 5g
Salami beeswax 4g
Setanol 3g
Squalane 10g
Lanolin 2g
Stearic acid 1g
1.5 g of polyoxyethylene sorbitan oleate (20E.0)
3g glyceryl monostearate
1,3-butylene glycol 6g
1.5 g of methyl paraoxybenzoate
Conchiolin hydrolyzate 0.1g
Carrot extract 0.1g
Fragrance 0.1g
5 coconut leaf extract (Sample 3 of Production Example 1) 2 g
Purified water remainder (total amount is 100 g)
[0090]
(Formulation example 4 pack)
A pack having the following composition was produced by a conventional method.
Polyvinyl alcohol 15g
Polyethylene glycol 3g
7g of propylene glycol
Ethanol 10g
0.05 g ethyl paraoxybenzoate
Chimp extract 0.1g
Royal jelly extract 0.1g
Sowakuhi extract 0.1g
Rice bran extract 0.1g
Fragrance 0.05g
5 g of coconut leaf extract (Sample 4 of Production Example 1) 5 g
Purified water remainder (total amount is 100 g)
[0091]
(Formulation example 5 health and nutritional supplements)
The following mixture was tableted to produce a tablet-like health / nutritional supplement.
100 parts by weight of Gothia leaf extract (Sample 1 of Production Example 1)
30 parts by weight of collagen
10 parts by weight of mucopolysaccharide / protein (chondroitin)
1 part by weight of hyaluronic acid
Lotus germ extract 20 parts by weight
Moon peach leaf stem extract 20 parts by weight
20 parts by weight of black rice extract
Licorice extract (including glycyrrhizin) 10 parts by weight
Milk protein hydrolyzate (including amino acids and low molecular weight peptides) 10 parts by weight
4 parts by weight of mixed powder of B vitamins (including all B vitamins)
Vitamin C 10 parts by weight
53 parts by weight of powdered sugar (sucrose)
Glycerin fatty acid ester 12 parts by weight
[0092]
(Formulation example 6 health and nutritional supplements)
The following mixture was formed into granules to produce health and nutritional supplements.
200 parts by weight of pentacot extract (Sample 2 of Production Example 1)
Lotus germ extract 50 parts by weight
Pearl protein hydrolysis (including various amino acids and peptides) 15 parts by weight
Silk protein hydrolyzate (including various amino acids and peptides) 15 parts by weight
Soybean isoflavone 10 parts by weight
Purple rice extract 50 parts by weight
30 parts by weight of red wine extract powder (including procyanidins)
10 parts by weight of yeast extract
(Including glutathione, nucleic acids, amino acids, vitamins)
Pomegranate seed extract 10 parts by weight
10 parts by weight of wheat germ extract
(Including vitamins, chromium, selenium, molybdenum)
30 parts by weight of DNA
1060 parts by weight of beet oligosaccharide
Stevia extract 10 parts by weight
[0093]
(Formulation example 7 health and nutritional supplements)
The following mixture was gelatin-encapsulated to produce a tablet-like health / nutritional supplement.
50 parts by weight of the extract of the pentacot leaves (Sample 1 of Production Example 1)
Lotus germ extract 15 parts by weight
Ceramide 30 parts by weight
Phospholipid (lecithin) 10 parts by weight
17 parts by weight of vitamin E (tocopherol)
10 parts by weight of multi carotene (α and β carotene, lutein, lycopene)
Red rice extract (including cycloartenol ester) 15 parts by weight
Octacosanol 1 part by weight
5 parts by weight of plant sterol
Perilla seed oil (including α-linolenic acid) 20 parts by weight
Refined fish oil (including DHA and EPA) 20 parts by weight
Sesame oil (including lignan compound) 20 parts by weight
10 parts by weight of olive oil
Soybean / rapeseed oil 65 parts by weight
Glycerin fatty acid ester 12 parts by weight
[0094]
(Formulation example 8 soft drink)
The following mixture was mixed according to a conventional method to produce a soft drink.
Five coconut leaf extract (Sample 1 of Production Example 1) 1 part by weight
Lotus extract 1 part by weight
Royal Jelly 3 parts by weight
8 parts by weight of water-soluble collagen
1 part by weight of pearl barley extract
Carrot extract 1 part by weight
Placenta (placenta) extract 1 part by weight
Pueraria extract 1 part by weight
Purple Yam Extract 1 part by weight
5 parts by weight of oligosaccharide
10 parts by weight of sucrose
2 parts by weight of prune juice
Pomegranate juice 5 parts by weight
Grapefruit juice 10 parts by weight
1 part by weight of vitamin C
Grapefruit flavor 0.7 parts by weight
Remaining water (total amount is 100 parts by weight)
[0095]
(Formulation example 9 candy)
The following mixture was mixed according to a conventional method to produce a candy.
Five coconut leaf extract (Sample 2 of Production Example 1)
Lotus extract 1 part by weight
30 parts by weight of water candy
Licorice extract 3 parts by weight
1 part by weight of green tea extract
1 part by weight of blueberry extract
Strawberry 1/5 concentrated fruit juice 1 part by weight
Red cabbage pigment 0.05 parts by weight
Lemon juice 0.5 parts by weight
5 parts by weight of water
[0096]
(Formulation example 10 tablets)
Based on the following component amounts, tablets were produced by processing in the usual manner for tablet production.
[0097]
0.2 parts by weight of the extract of pentacot leaves (Sample 2 of Production Example 1)
Lactose 95.0 parts by weight
Magnesium stearate 0.01 parts by weight
Coloring agent Trace amount
Perfume
[0098]
【Effect of the invention】
According to the present invention, a histamine release inhibitor, a cyclic AMP phosphodiesterase inhibitor, an active oxygen scavenger or a radical scavenger is provided. The histamine release inhibitor, cyclic AMP phosphodiesterase inhibitor, active oxygen scavenger or radical scavenger of the present invention is used for the prevention / treatment of allergic diseases and inflammatory diseases, skin aging (for example, skin wrinkle formation and elasticity) It is useful for prevention and treatment of sexual decline.

Claims

A histamine release inhibitor comprising, as an active ingredient, an extract obtained by an extraction treatment using a polar solvent from the leaves of a gourd (Averrhoa carambola L.).

A cyclic AMP phosphodiesterase inhibitor comprising, as an active ingredient, an extract obtained by an extraction treatment using a polar solvent from a leaf part of Averrhoa carambola L ..

An active oxygen scavenger comprising, as an active ingredient, an extract obtained by an extraction treatment using a polar solvent from the leaves of a gourd (Averrhoa carambola L.).

A radical scavenger comprising, as an active ingredient, an extract obtained by an extraction treatment using a polar solvent from the leaves of Averrhoa carambola L ..