JP5455933B2 - Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤 - Google Patents

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関連出願

（関連出願の相互参照）
本出願は、2008年2月13日に出願された米国仮特許出願第61/028,277号の利益を主張する。

本発明は、概して抗ウイルス性化合物に関するものであり、さらに具体的には、C型肝炎ウイルス(HCV)によりコードされるNS5Aタンパク質の機能を阻害することができる化合物、該化合物を含有する組成物、およびNS5Aタンパク質の機能を阻害する方法に関する。

HCVは主要なヒト病原体であり、世界中で推定1億7千万人が感染しており-これはヒト免疫不全ウイルス１型による感染数のおよそ５倍である。これらHCV感染者のかなりの割合が、肝硬変および肝細胞癌を含む重篤な進行性肝疾患を発症する。

現在、最も有効なHCVの治療法は、α-インターフェロンとリバビリンの組み合わせを用いており、40％の患者において持続的効果をもたらしている。最近の臨床結果は、ペグα-インターフェロンが単独療法としては未修飾のα-インターフェロンよりも優れていることを示す。しかしながら、ペグα-インターフェロンとリバビリンの組み合わせを含む実験的な治療レジメンでも、かなりの割合の患者において、ウイルス量の持続的な減少が認められない。従って、HCV感染症の有効な治療法の開発が明確にかつ長年にわたって切実に必要とされている。

HCVはプラス鎖RNAウイルスである。5'非翻訳領域における推定アミノ酸配列および広範な類似性の比較に基づいて、HCVはフラビウイルス科の独立した属として分類されている。フラビウイルス科の全てのメンバーは、単一の連続したオープンリーディングフレームの翻訳を介して全ての公知のウイルス-特異的タンパク質をコードするプラス鎖RNAゲノムを含有するエンベロープに包まれたビリオンを有する。

HCVゲノム全体にわたって、ヌクレオチドおよびコードされたアミノ酸配列内に、かなりの多様性が見いだされる。少なくとも６つの主要な遺伝子型がキャラクタライズされており、50を超えるサブタイプが記載されている。HCVの主要な遺伝子型は世界的な分布において異なっており、病原および治療法における遺伝子型の影響の可能性についての多くの研究にもかかわらず、HCVの遺伝的多様性の臨床的意義は依然として捉えにくい。

一本鎖HCV RNAゲノムは約9500ヌクレオチド長であり、約3000のアミノ酸である単一の大きなポリタンパク質をコードする単一のオープンリーディングフレーム(ORF)を有する。感染細胞において、このポリタンパク質は、細胞プロテアーゼおよびウイルスプロテアーゼにより複数の部位で切断され、構造タンパク質および非構造(NS)タンパク質を生じる。HCVの場合、成熟非構造タンパク質(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A、およびNS5B)の生成は、２つのウイルスプロテアーゼによりもたらされる。１つめのものはメタロプロテアーゼであり、NS2-NS3接合部を切断すると考えられており; ２つめは、NS3(本明細書ではNS3プロテアーゼとも言う)のN-末端領域内に含まれるセリンプロテアーゼであり、NS3の下流、すなわちNS3-NS4A切断部位においてシスで、残りのNS4A-NS4B、NS4B-NS5A、NS5A-NS5B部位についてトランスでの両方における以降の切断の全てを仲介する。該NS4Aタンパク質は複数の機能を果たすと思われ、NS3プロテアーゼの補助因子として作用し、NS3および他のウイルスのレプリカーゼ成分の膜局在をおそらく補助している。NS3タンパク質とNS4Aとの複合体形成は、イベントの進行、全ての部位におけるタンパク質分解効率の増強に必要であると思われる。該NS3タンパク質はまた、ヌクレオシドトリホスファターゼおよびRNAヘリカーゼ活性を示す。NS5B(HCVポリメラーゼとも言う)は、HCVの複製に関与するRNA-依存性RNAポリメラーゼである。

HCV-感染患者の治療に有用な化合物は、HCVウイルス複製を選択的に阻害することが望ましい。特に、NS5Aタンパク質の機能の阻害に有効な化合物が望ましい。該HCV NS5Aタンパク質は、例えば非特許文献１;および非特許文献２に記載されている。

Tan, S.-L., Katzel, M.G. Virology 2001, 284, 1-12 Park, K.-J.; Choi, S.-H, J. Biological Chemistry 2003

本発明は、概して抗ウイルス性化合物に関するものであり、さらに具体的には、C型肝炎ウイルス(HCV)によりコードされるNS5Aタンパク質の機能を阻害することができる化合物、該化合物を含有する組成物、およびNS5Aタンパク質の機能を阻害する方法に関する。

第１の態様では、本発明は、式(I)

の化合物、または医薬的に許容されるその塩を提供し、式中、
ｕおよびｕ’は、独立して０、１、２、または３であり；
ＤおよびＤ’は各々、ＮＲ^５、Ｏ、またはＳから独立して選択され; ここで、各Ｒ^５は、水素、アルコキシカルボニル、アルキル、アリールアルコキシカルボニル、カルボキシ、ハロアルキル、ヒドロキシ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）カルボニル、またはトリアルキルシリルアルコキシアルキルから独立して選択され;
各Ｒ^１およびＲ^１’は、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アリールアルコキシカルボニル、カルボキシ、ホルミル、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル、または（ＮＲ^ａＲ^ｂ）カルボニルから独立して選択され;および
Ｒ^２は、水素、アルコキシカルボニル、アルキル、アリールアルコキシカルボニル、カルボキシ、ハロアルキル、または（ＮＲ^ａＲ^ｂ）カルボニルから選択され;
Ｒ^３は、水素、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アリールアルコキシカルボニル、カルボキシ、ホルミル、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル、または（ＮＲ^ａＲ^ｂ）カルボニルから選択されるか;あるいは、
Ｒ^２およびＲ^３は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、窒素、酸素、または硫黄から独立して選択される１個もしくは２個のヘテロ原子を適宜含有する５-８員の芳香族または非芳香環を形成し;ここで、該５-８員環は、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルスルホニル、アリール、アリールアルキル、アリールスルホニル、カルボキシ、ホルミル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）カルボニル、オキソ、またはスピロ環から独立して選択される、１個、２個、または３個の置換基で適宜置換されており;
Ｒ^２’およびＲ^３’は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、窒素、酸素、または硫黄から独立して選択される１個もしくは２個のヘテロ原子を適宜含有する５-８員の芳香族または非芳香環を形成し;ここで、該５-８員環は、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルスルホニル、アリール、アリールアルキル、アリールスルホニル、カルボキシ、ホルミル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）カルボニル、オキソ、またはスピロ環から独立して選択される、１個、２個、または３個の置換基で適宜置換されており;
Ｒ^４およびＲ^４’は各々、

［式中、
各ｍは、独立して０、１、または２であり;
各ｓは、独立して０、１、２、３、または４であり;
各Ｘは、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ_２、ＣＨ_２、ＣＨＲ^６、またはＣ（Ｒ^６）_２から独立して選択されるが;ただし、ｎが０であるとき、Ｘは、ＣＨ_２、ＣＨＲ^６、またはＣ（Ｒ^６）_２から選択され;
各Ｒ^６は、アルコキシ、アルキル、アリール、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシ、または−ＮＲ^ａＲ^ｂから独立して選択され、ここで、該アルキルは適宜、隣接する炭素原子と縮合３-６員環を適宜形成することができ、該３-６員環は、１個または２個のアルキル基で適宜置換されており;
各Ｒ^７は、水素またはＲ^１１−Ｃ（Ｏ）−、もしくはＲ^１１−Ｃ（Ｓ）−から独立して選択され;
Ｒ^８は、水素またはアルキルから選択され;
Ｒ^９およびＲ^１０は各々、水素、アルケニル、アルコキシアルキル、アルキル、ハロアルキル、または（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキルから独立して選択されるか;あるいは、
Ｒ^９およびＲ^１０は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、ＮＲ^ｚ、Ｏ、またはＳから選択される１個もしくは２個のヘテロ原子を適宜含有する５-６員の飽和環を形成し;ここで、Ｒ^ｚは、水素またはアルキルから選択され;および
各Ｒ^１１は、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルアルキル、アルキル、アルキルカルボニルアルキル、アリール、アリールアルケニル、アリールアルコキシ、アリールアルキル、アリールオキシアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルケニル、（シクロアルキル）アルキル、シクロアルキルオキシアルキル、ハロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルケニル、ヘテロシクリルアルコキシ、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルオキシアルキル、ヒドロキシアルキル、−ＮＲ^ｃＲ^ｄ、（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）アルケニル、（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）アルキル、または（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）カルボニルから独立して選択される］
から独立して選択される。

第１の態様の第１の実施態様では、本発明は、式(I)の化合物または医薬的に許容されるその塩を提供し、ここで、ＤおよびＤ’は各々、ＮＲ^５である。第１の態様の第２の実施態様では、各Ｒ^５は、水素またはヒドロキシから独立して選択される。

第１の態様の第３の実施態様では、本発明は、式(I)の化合物または医薬的に許容されるその塩を提供し、ここで、ｕおよびｕ’は各々、０である。

第１の態様の第４の実施態様では、本発明は、式(I)の化合物または医薬的に許容されるその塩を提供し、ここで、Ｒ^２は、水素またはハロアルキルから選択される。

第１の態様の第５の実施態様では、本発明は、式(I)の化合物または医薬的に許容されるその塩を提供し、ここで、Ｒ^３は、水素またはハロから選択される。

第１の態様の第６の実施態様では、本発明は、式(I)の化合物または医薬的に許容されるその塩を提供し、ここで、Ｒ^２およびＲ^３は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、６-７員の炭素環を形成する。

第１の態様の第７の実施態様では、本発明は、式(I)の化合物または医薬的に許容されるその塩を提供し、ここで、Ｒ^２’およびＲ^３’は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、酸素、窒素、または硫黄から選択される１個のヘテロ原子を適宜含有する６-８員環を形成し；該環は、１個または２個のアルキル基で適宜置換されている。

第２の態様では、本発明は、式(II)

の化合物、または医薬的に許容されるその塩を提供し、式中
Ｒ^２は、水素またはハロアルキルから選択され;および
Ｒ^３は、水素またはハロから選択されるか;あるいは
Ｒ^２およびＲ^３は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、５-６員の芳香族または非芳香族炭素環を形成し;
Ｒ^２’およびＲ^３’は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、酸素、窒素、または硫黄から選択される１個のヘテロ原子を適宜含有する６-８員の芳香族または非芳香環を形成し;ここで、該環は、１個または２個のアルキル基で適宜置換されており;
Ｒ^４およびＲ^４’は各々、

（式中、
各ｓは、０または２であり;
各Ｒ^６は、アルキルまたはハロから独立して選択され、ここで該アルキルは、隣接する炭素原子と縮合３員環を形成し;
各Ｒ^７は、水素またはＲ^１１−Ｃ（Ｏ）−から独立して選択され;
Ｒ^８は、水素またはアルキルから選択され;
Ｒ^９およびＲ^１０は各々、水素またはアルキルから独立して選択され;および
各Ｒ^１１は、アルキル、アリールアルコキシ、アリールアルキル、または（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）アルキルから独立して選択される）
から独立して選択される。

第３の態様では、本発明は、式(I)の化合物もしくは医薬的に許容されるその塩、および医薬的に許容される担体を含む組成物を提供する。第３の態様の第１の実施態様では、該組成物は、抗ＨＣＶ活性を有する１種または２種のさらなる化合物を含む。第２の実施態様では、さらなる化合物の少なくとも１つは、インターフェロンまたはリバビリンである。第３の実施態様では、インターフェロンは、インターフェロンアルファ２Ｂ、ペグインターフェロンアルファ、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンアルファ２Ａ、またはリンパ芽球インターフェロンタウから選択される。

第４の実施態様では、本発明は、式(I)の化合物もしくは医薬的に許容されるその塩、医薬的に許容される担体、および抗ＨＣＶ活性を有する１種もしくは２種のさらなる化合物を含む組成物を提供し、ここで、さらなる化合物の少なくとも１つは、インターロイキン２、インターロイキン６、インターロイキン１２、１型ヘルパーＴ細胞応答の発生を増強する化合物、干渉ＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、イミキモド、リバビリン、イノシン５’−一リン酸デヒドロゲナーゼ阻害剤、アマンタジン、またはリマンタジンから選択される。

第５の実施態様では、本発明は、式(I)の化合物もしくは医薬的に許容されるその塩、医薬的に許容される担体、および抗ＨＣＶ活性を有する１種もしくは２種のさらなる化合物を含む組成物を提供し、ここで、さらなる化合物の少なくとも１つは、ＨＣＶ感染症の治療のために、ＨＣＶメタロプロテアーゼ、ＨＣＶセリンプロテアーゼ、ＨＣＶポリメラーゼ、ＨＣＶヘリカーゼ、ＨＣＶ ＮＳ４Ｂタンパク質、ＨＣＶエントリー、ＨＣＶアセンブリー、ＨＣＶイグレス、ＨＣＶ ＮＳ５Ａタンパク質、またはＩＭＰＤＨから選択される標的の機能の阻害に有効である。

第４の態様では、本発明は、患者に治療上有効な量の式(I)の化合物または医薬的に許容されるその塩を投与することを含む、患者においてＨＣＶ感染症を治療する方法を提供する。第４の態様の第１の実施態様では、この方法は、式(I)の化合物または医薬的に許容されるその塩の前、後もしくは同時に、抗ＨＣＶ活性を有する１種もしくは２種のさらなる化合物を投与することをさらに含む。第２の実施態様では、さらなる化合物の少なくとも１つは、インターフェロンまたはリバビリンである。第３の実施態様では、該インターフェロンは、インターフェロンアルファ２Ｂ、ペグインターフェロンアルファ、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンアルファ２Ａ、またはリンパ芽球インターフェロンタウから選択される。

第４の態様の第４の実施態様では、本発明は、患者に治療上有効な量の式(I)の化合物または医薬的に許容されるその塩、および式(I)の化合物または医薬的に許容されるその塩の前、後もしくは同時に、抗ＨＣＶ活性を有する１種もしくは２種のさらなる化合物を投与することを含む、患者においてＨＣＶ感染症を治療する方法を提供し、ここで、さらなる化合物の少なくとも１つは、インターロイキン２、インターロイキン６、インターロイキン１２、１型ヘルパーＴ細胞応答の発生を増強する化合物、干渉ＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、イミキモド、リバビリン、イノシン５’−一リン酸デヒドロゲナーゼ阻害剤、アマンタジン、またはリマンタジンから選択される。

第４の態様の第５の実施態様では、本発明は、患者に治療上有効な量の式(I)の化合物または医薬的に許容されるその塩、および式(I)の化合物または医薬的に許容されるその塩の前、後もしくは同時に、抗ＨＣＶ活性を有する１種もしくは２種のさらなる化合物を投与することを含む、患者においてＨＣＶ感染症を治療する方法を提供し、ここで、さらなる化合物の少なくとも１つは、ＨＣＶ感染症の治療のために、ＨＣＶメタロプロテアーゼ、ＨＣＶセリンプロテアーゼ、ＨＣＶポリメラーゼ、ＨＣＶヘリカーゼ、ＨＣＶ ＮＳ４Ｂタンパク質、ＨＣＶエントリー、ＨＣＶアセンブリー、ＨＣＶイグレス、ＨＣＶ ＮＳ５Ａタンパク質、またはＩＭＰＤＨから選択される標的の機能の阻害に有効である。

本発明の他の実施態様は、本明細書において開示されている実施態様および／または態様の２つ以上の適切な組合せを含んでよい。
本発明のさらに他の実施態様および態様が、下記に提供する記載によって明らかであろう。

本発明の化合物はまた、互変異性体として存在し；従って、本発明はまた、全ての互変異性型を包含する。

本明細書における本発明の記載は、化学結合の法則および原理と一致して解釈すべきである。

本発明により包含される化合物は、医薬品としての使用に適切に安定であるものであることが理解されるべきである。

分子中の特定の位置でのいずれの置換基または変数(例えば、R¹、R²、R⁵、R⁶など) の定義は、該分子中の他の部分におけるその定義から独立していることを意図する。例えば、uが2である場合、２つのR¹基の各々は同一または異なっていてよい。

本明細書に記載の全ての特許、特許出願、および参考文献は、引用によりその全体が援用される。一貫性に欠ける場合、本出願の開示（定義を含む）を優先する。

本明細書において用いる場合、以下の用語は以下に記載される意味を有する。

本明細書において用いる単数形「a」、「an」および「the」は、他に明確に指示されない限り、複数の言及も含む。

特に指定のない限り、本発明の全てのアリール、シクロアルキル、およびヘテロシクリル基は、それらの各々の定義に記載の通り置換されていてよい。例えば、アリールアルキル基のアリール部分は、用語「アリール」の定義に記載のとおり置換されていてよい。

本明細書において用いる用語「アルケニル」は、少なくとも１つの炭素-炭素二重結合を有する２から６個の炭素原子の直鎖または分枝鎖基を言う。

本明細書において用いる用語「アルケニルオキシ」は、酸素原子を介して親分子部分に結合したアルケニル基を言う。

本明細書において用いる用語「アルケニルオキシカルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合したアルケニルオキシ基を言う。

本明細書において用いる用語「アルコキシ」は、酸素原子を介して親分子部分に結合したアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「アルコキシアルキル」は、１〜３個のアルコキシ基で置換されたアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「アルコキシアルキルカルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合したアルコキシアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「アルコキシカルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合したアルコキシ基を言う。

本明細書において用いる用語「アルコキシカルボニルアルキル」は、１〜３個のアルコキシカルボニル基で置換されたアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「アルキル」は、１から６個の炭素原子を含有する、直鎖または分枝鎖の飽和炭化水素由来の基を言う。本発明の化合物において、mが1または2の場合; XはCHR⁶であって、かつR⁶はアルキルであり、各アルキルは適宜、隣接する炭素原子とともに縮合３〜６員環を形成し、以下の構造のうちの１つをもたらし得る:

（式中、zは1、2、3、または4であり、wは0、1、または2であり、ならびにR⁵⁰はアルキルである）。wが2である場合、該２つのR⁵⁰アルキル基は同一または異なっていてよい。

本明細書において用いる用語「アルキルカルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合したアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「アルキルカルボニルアルキル」は、１〜３個のアルキルカルボニル基で置換されたアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「アルキルカルボニルオキシ」は、酸素原子を介して親分子部分に結合したアルキルカルボニル基を言う。

本明細書において用いる用語「アルキルスルファニル」は、硫黄原子を介して親分子部分に結合したアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「アルキルスルホニル」は、スルホニル基を介して親分子部分に結合したアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「アリール」は、フェニル基、または１つもしくは両方の環がフェニル基である二環式縮合環系を言う。二環式縮合環系は、４-〜６-員芳香族もしくは非芳香族炭素環に縮合したフェニル基から成る。本発明のアリール基は、該基中のいずれの置換可能な炭素原子を介して親分子部分に結合することができる。アリール基の代表的な例としては、限定はされないが、インダニル、インデニル、ナフチル、フェニル、およびテトラヒドロナフチルが挙げられる。本発明のアリール基は、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、第２のアリール基、アリールアルコキシ、アリールアルキル、アリールカルボニル、シアノ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルカルボニル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、ニトロ、-NR^xR^y、(NR^xR^y)アルキル、オキソ、または-P(O)OR₂から独立して選択される１〜５個の置換基で適宜置換されており（ここで各Rは水素またはアルキルから独立して選択される）; その中で、該アリールアルキルおよび該ヘテロシクリルアルキルのアルキル部分は無置換であり、該第２のアリール基、該アリールアルキルのアリール部分、該アリールカルボニルのアリール部分、該ヘテロシクリル、ならびに該ヘテロシクリルアルキルおよび該ヘテロシクリルカルボニルのヘテロシクリル部分はさらに、アルコキシ、アルキル、シアノ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、またはニトロから独立して選択される１〜３個の置換基で適宜置換されている。

本明細書において用いる用語「アリールアルケニル」は、１〜３個のアリール基で置換されたアルケニル基を言う。

本明細書において用いる用語「アリールアルコキシ」は、アルコキシ基を介して親分子部分に結合したアリール基を言う。

本明細書において用いる用語「アリールアルコキシアルキル」は、１〜３個のアリールアルコキシ基で置換されたアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「アリールアルコキシアルキルカルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合したアリールアルコキシアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「アリールアルコキシカルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合したアリールアルコキシ基を言う。

本明細書において用いる用語「アリールアルキル」は、１〜３個のアリール基で置換されたアルキル基を言う。該アリールアルキルのアルキル部分は、アルコキシ、アルキルカルボニルオキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、もしくは-NR^cR^dから独立して選択される、１または２個のさらなる基でさらに適宜置換されており、ここで該ヘテロシクリルはさらに、アルコキシ、アルキル、無置換アリール、無置換アリールアルコキシ、無置換アリールアルコキシカルボニル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヒドロキシ、もしくは-NR^xR^yから独立して選択される、１または２個の置換基で適宜置換されている。

本明細書において用いる用語「アリールアルキルカルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合したアリールアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「アリールカルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合したアリール基を言う。

本明細書において用いる用語「アリールオキシ」は、酸素原子を介して親分子部分に結合したアリール基を言う。

本明細書において用いる用語「アリールオキシアルキル」は、１〜３個のアリールオキシ基で置換されたアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「アリールオキシカルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合したアリールオキシ基を言う。

本明細書において用いる用語「アリールスルホニル」は、スルホニル基を介して親分子部分に結合したアリール基を言う。

本明細書において用いる用語「Cap」および「cap」は、末端の窒素含有環、すなわち式(I)の化合物のピロリジン環の窒素原子に位置する基を言う。「Cap」または「cap」は、末端の窒素含有環もしくは最終生成物中のフラグメント、すなわち「Cap-51」もしくは「実施例5に記載のCap-51フラグメント」に基を付加するのに用いられる試薬を言及し得ると理解されるべきである。

本明細書において用いる用語「カルボニル」は、-C(O)-を言う。

本明細書において用いる用語「カルボキシ」は、-CO₂Hを言う。

本明細書において用いる用語「シアノ」は、-CNを言う。

本明細書において用いる用語「シクロアルキル」は、３から７個の炭素原子および０個のヘテロ原子を有する、飽和単環式の炭化水素環系を言う。シクロアルキル基の代表的な例としては、限定はされないが、シクロプロピル、シクロペンチル、およびシクロヘキシルが挙げられる。本発明のシクロアルキル基は、アルコキシ、アルキル、アリール、シアノ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、ニトロ、または-NR^xR^yから独立して選択される１〜５個の置換基で適宜置換されており、ここで、該アリールおよび該ヘテロシクリルはさらに、アルコキシ、アルキル、シアノ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヒドロキシ、またはニトロから独立して選択される１〜３個の置換基で適宜置換されている。

本明細書において用いる用語「(シクロアルキル)アルケニル」は、１〜３個のシクロアルキル基で置換されたアルケニル基を言う。

本明細書において用いる用語「(シクロアルキル)アルキル」は、１〜３個のシクロアルキル基で置換されたアルキル基を言う。該(シクロアルキル)アルキルのアルキル部分はさらに、ヒドロキシまたは-NR^cR^dから独立して選択される１または２個の基で適宜置換される。

本明細書において用いる用語「シクロアルキルオキシ」は、酸素原子を介して親分子部分に結合したシクロアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「シクロアルキルオキシアルキル」は、１〜３個のシクロアルキルオキシ基で置換されたアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「シクロアルキルスルホニル」は、スルホニル基を介して親分子部分に結合したシクロアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「ホルミル」は、-CHOを言う。

本明細書において用いる用語「ハロ」および「ハロゲン」は、F、Cl、Br、またはIを言う。

本明細書において用いる用語「ハロアルコキシ」は、酸素原子を介して親分子部分に結合したハロアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「ハロアルコキシカルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合したハロアルコキシ基を言う。

本明細書において用いる用語「ハロアルキル」は、１から４個のハロゲン原子により置換されたアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「ヘテロシクリル」は、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される１から４個のヘテロ原子を含有する４-〜７-員環を言う。該４-員環は０個の二重結合を有し、該５-員環は０から２個の二重結合を有し、該６-および７-員環は０から３個の二重結合を有する。該用語「ヘテロシクリル」には、ヘテロシクリル環が別の単環式ヘテロシクリル基または４-〜６-員芳香族もしくは非芳香族炭素環に縮合している二環式基;ならびに、架橋二環式基、例えば、7-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタ-7-イル、2-アザビシクロ[2.2.2]オクタ-2-イル、および2-アザビシクロ[2.2.2]オクタ-3-イルも含まれる。 本発明のヘテロシクリル基は、該基中の炭素原子または窒素原子を介して親分子部分に結合することができる。ヘテロシクリル基の例としては、限定はされないが、ベンゾチエニル、フリル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、モルホリニル、オキサゾリル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピラゾリル、ピリジニル、ピロリジニル、ピロロピリジニル、ピロリル、チアゾリル、チエニル、チオモルホリニル、7-アサビシクロ[2.2.1]ヘプタ-7-イル、2-アサビシクロ[2.2.2]オクタ-2-イル、および2-アサビシクロ[2.2.2]オクタ-3-イルが挙げられる。本発明のヘテロシクリル基は、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アリール、アリールアルキル、アリールカルボニル、シアノ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、第２のヘテロシクリル基、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルカルボニル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、ニトロ、-NR^xR^y、(NR^xR^y)アルキル、またはオキソから独立して選択される１から５個の置換基で適宜置換されており、ここで、該アリールアルキルおよび該ヘテロシクリルアルキルのアルキル部分は無置換であり、該アリール、該アリールアルキルのアリール部分、該アリールカルボニルのアリール部分、該第２のヘテロシクリル基、ならびに該ヘテロシクリルアルキルおよび該ヘテロシクリルカルボニルのヘテロシクリル部分はさらに、アルコキシ、アルキル、シアノ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、またはニトロから独立して選択される１〜３個の置換基でさらに適宜置換されている。

本明細書において用いる用語「ヘテロシクリルアルケニル」は、１〜３個のヘテロシクリル基で置換されたアルケニル基を言う。

本明細書において用いる用語「ヘテロシクリルアルコキシ」は、アルコキシ基を介して親分子部分に結合したヘテロシクリル基を言う。

本明細書において用いる用語「ヘテロシクリルアルコキシカルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合したヘテロシクリルアルコキシ基を言う。

本明細書において用いる用語「ヘテロシクリルアルキル」は、１〜３個のヘテロシクリル基で置換されたアルキル基を言う。該ヘテロシクリルアルキルのアルキル部分はさらに、アルコキシ、アルキルカルボニルオキシ、アリール、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヒドロキシ、または-NR^cR^dから独立して選択される１または２個のさらなる基で適宜置換されており、ここで該アリールはさらに、アルコキシ、アルキル、無置換アリール、無置換アリールアルコキシ、無置換アリールアルコキシカルボニル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヒドロキシ、または-NR^xR^yから独立して選択される１または２個の置換基で適宜置換されている。

本明細書において用いる用語「ヘテロシクリルアルキルカルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合したヘテロシクリルアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「ヘテロシクリルカルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合したヘテロシクリル基を言う。

本明細書において用いる用語「ヘテロシクリルオキシ」は、酸素原子を介して親分子部分に結合したヘテロシクリル基を言う。

本明細書において用いる用語「ヘテロシクリルオキシアルキル」は、１〜３個のヘテロシクリルオキシ基で置換されたアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「ヘテロシクリルオキシカルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合したヘテロシクリルオキシ基を言う。

本明細書において用いる用語「ヒドロキシ」は、-OHを言う。

本明細書において用いる用語「ヒドロキシアルキル」は、１〜３個のヒドロキシ基で置換されたアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「ヒドロキシアルキルカルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合したヒドロキシアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「ニトロ」は、-NO₂を言う。

本明細書において用いる用語「-NR^aR^b」は、窒素原子を介して親分子部分に結合した２個の基、R^aおよびR^bを言う。R^aおよびR^bは、独立して、水素、アルケニル、またはアルキルから選択される。

本明細書において用いる用語「(NR^aR^b)アルキル」は、１〜３個の-NR^aR^b基で置換されたアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「(NR^aR^b)カルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合した-NR^aR^b基を言う。

本明細書において用いる用語「-NR^cR^d」は、窒素原子を介して親分子部分に結合した２つの基、R^cおよびR^dを言う。R^cおよびR^dは独立して、水素、アルケニルオキシカルボニル、アルコキシアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アルキルスルホニル、アリール、アリールアルコキシカルボニル、アリールアルキル、アリールアルキルカルボニル、アリールカルボニル、アリールオキシカルボニル、アリールスルホニル、シクロアルキル、シクロアルキルスルホニル、ホルミル、ハロアルコキシカルボニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルコキシカルボニル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルアルキルカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、ヘテロシクリルオキシカルボニル、ヒドロキシアルキルカルボニル、(NR^eR^f)アルキル、(NR^eR^f)アルキルカルボニル、(NR^eR^f)カルボニル、(NR^eR^f)スルホニル、-C(NCN)OR'、または-C(NCN)NR^xR^yから選択され（ここで、R'はアルキルまたは無置換フェニルから選択され、該アリールアルキルのアルキル部分、該アリールアルキルカルボニル、該ヘテロシクリルアルキル、および該ヘテロシクリルアルキルカルボニルはさらに、１個の-NR^eR^f基で適宜置換されている）; そして、その中で、該アリール、該アリールアルコキシカルボニル、該アリールアルキル、該アリールアルキルカルボニル、該アリールカルボニル、該アリールオキシカルボニル、および該アリールスルホニルのアリール部分、該ヘテロシクリル、ならびに該ヘテロシクリルアルコキシカルボニル、該ヘテロシクリルアルキル、該ヘテロシクリルアルキルカルボニル、該ヘテロシクリルカルボニル、および該ヘテロシクリルオキシカルボニルのヘテロシクリル部分はさらに、アルコキシ、アルキル、シアノ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、またはニトロから独立して選択される１〜３個の置換基で適宜置換されている。

本明細書において用いる用語「(NR^cR^d)アルケニル」は、１〜３個の-NR^cR^d基で置換されたアルケニル基を言う。

本明細書において用いる用語「(NR^cR^d)アルキル」は、１〜３個の-NR^cR^d基で置換されたアルキル基を言う。該(NR^cR^d)アルキルのアルキル部分はさらに、アルコキシ、アルコキシアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アルキルスルファニル、アリールアルコキシアルキルカルボニル、カルボキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルカルボニル、ヒドロキシ、または(NR^eR^f)カルボニルから選択される１または２個のさらなる基で適宜置換されており; ここで、該ヘテロシクリルはさらに、アルコキシ、アルキル、シアノ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、またはニトロから独立して選択される１〜５個の置換基で適宜置換されている。

本明細書において用いる用語「(NR^cR^d)カルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合した-NR^cR^d基を言う。

本明細書において用いる用語「-NR^eR^f」は、窒素原子を介して親分子部分に結合した２つの基、R^eおよびR^fを言う。R^eおよびR^fは独立して、水素、アルキル、無置換アリール、無置換アリールアルキル、無置換シクロアルキル、無置換(シクロアルキル)アルキル、無置換ヘテロシクリル、無置換ヘテロシクリルアルキル、(NR^xR^y)アルキル、または(NR^xR^y)カルボニルから選択される。

本明細書において用いる用語「(NR^eR^f)アルキル」は、１〜３個の-NR^eR^f基で置換されたアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「(NR^eR^f)アルキルカルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合した(NR^eR^f)アルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「(NR^eR^f)カルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合した-NR^eR^f基を言う。

本明細書において用いる用語「(NR^eR^f)スルホニル」は、スルホニル基を介して親分子部分に結合した-NR^eR^f基を言う。

本明細書において用いる用語「-NR^xR^y」は、窒素原子を介して親分子部分に結合した２つの基、R^xおよびR^yを言う。R^xおよびR^yは独立して、水素、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、無置換アリール、無置換アリールアルコキシカルボニル、無置換アリールアルキル、無置換シクロアルキル、無置換ヘテロシクリル、または(NR^x'R^y')カルボニルから選択され、ここでR^x'およびR^y'は独立して水素またはアルキルから選択される。

本明細書において用いる用語「(NR^xR^y)アルキル」は、１〜３個の-NR^xR^y基で置換されたアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「(NR^xR^y)カルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合した-NR^xR^y基を言う。

本明細書において用いる用語「オキソ」は、=Oを言う。

本明細書において用いる用語「スルホニル」は、-SO₂-を言う。

本明細書において用いる用語「トリアルキルシリル」は、Rがアルキルである、-SiR₃を言う。該R基は同一でも異なっていてもよい。

本明細書において用いる用語「トリアルキルシリルアルキル」は、１〜３個のトリアルキルシリル基で置換されたアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「トリアルキルシリルアルコキシ」は、酸素原子を介して親分子部分に結合したトリアルキルシリルアルキル基を言う。

本明細書において用いる用語「トリアルキルシリルアルコキシアルキル」は、１〜３個のトリアルキルシリルアルコキシ基で置換されたアルキル基を言う。

本発明の化合物には不斉中心が存在する。これら中心は、キラル炭素原子の周囲の置換基の配置によって、記号「R」または「S」により示される。本発明は、NS5Aを阻害する能力を有する全ての立体化学的な異性体、またはその混合物を包含することが理解されるべきである。化合物の個々の立体異性体は、キラル中心を有する市販の出発物質から合成的に製造することができるか、あるいは、エナンチオマーの生成物の混合物を製造した後、ジアステレオマーの混合物への変換に続く分離もしくは再結晶化、クロマトグラフ技法、またはキラルクロマトグラフィーカラムでのエナンチオマーの直接分離などといった分離を行うことによって製造することができる。特定の立体化学の出発化合物は、市販であるか、あるいは当業者に公知の方法により製造および分割され得る。

本発明の特定の化合物はまた、異なる安定した立体構造形態で存在していてよく、それは分離可能であり得る。非対称単結合について制限された回転に起因するねじれ非対称（Torsional asymmetry）、例えば、立体障害または環の歪みにより、異なる配座異性体の分離が可能になり得る。本発明は、これら化合物の各配座異性体およびその混合物を含む。

該用語「本発明の化合物」および同等の表現は、式(I)の化合物、並びにその医薬的に許容されるエナンチオマー、ジアステレオマーおよび塩を包含することを意味する。同様に、中間体についての言及は、内容的に許される限りそれらの塩を包含することを意味する。

本発明の化合物は、医薬的に許容される塩として存在することができる。本明細書で用いる用語「医薬的に許容される塩」は、本発明の化合物の塩または双性イオン形態を意味し、それは水もしくは油-溶性もしくは分散性であり、適切な医学的判断の範囲内で、妥当な利益/リスク比に見合って、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症を伴わずに患者の組織に接触して用いるのに適していて、それらの使用目的に有効である。該塩は化合物の最終的な単離および精製の間に製造することができるか、あるいは別途、適切な窒素原子を適切な酸と反応させることにより製造することができる。代表的な酸付加塩としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、硫酸水素塩、酪酸塩、ショウノウ酸塩（camphorate）、カンファースルホン酸塩; ジグルコン酸塩（digluconate）、二臭化水素酸塩、二塩酸塩、二ヨウ化水素酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、2-ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メシチレンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフチレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、2-ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩（palmoate）、ペクチン酸塩（pectinate）、過硫酸塩、3-フェニルプロプリオン酸塩（phenylproprionate）、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トリクロロ酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩、炭酸水素塩、パラ-トルエンスルホン酸塩、およびウンデカン酸塩が挙げられる。医薬的に許容される付加塩の形成に用いることができる酸の例としては、無機酸（例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、およびリン酸）、および有機酸（例えばシュウ酸、マレイン酸、コハク酸、およびクエン酸）が挙げられる。

塩基付加塩は、カルボキシ基を適切な塩基（例えば、金属カチオンのヒドロキシド、カーボネート、もしくはビカーボネート）と反応させるか、あるいはアンモニア、または有機第一級、第二級、もしくは第三級アミンと反応させることによる、化合物の最終的な単離および精製の間に製造することができる。医薬的に許容される塩のカチオンとしては、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムおよびアルミニウム、ならびに無毒性の第四級アミンカチオン（例えばアンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ジエチルアミン、エチルアミン、トリブチルアミン、ピリジン、N,N-ジメチルアニリン、N-メチルピペリジン、N-メチルモルホリン、ジクロロヘキシルアミン、プロカイン、ジベンジルアミン、N,N-ジベンジルフェネチルアミン、およびN,N'-ジベンジルエチレンジアミン）が挙げられる。塩基付加塩の形成に用いることができる他の代表的な有機アミンとしては、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペリジン、およびピペラジンが挙げられる。

治療で用いるために、治療上有効な量の式(I)の化合物、ならびに医薬的に許容されるその塩を未加工の化学薬品（raw chemical）として投与することができる場合、活性成分を医薬組成物として存在させることができる。従って、本発明は、治療上有効な量の式(I)の化合物または医薬的に許容されるその塩、および１つ以上の医薬的に許容される担体、希釈剤、もしくは賦形剤を含む医薬組成物をさらに提供する。本明細書で用いる用語「治療上有効な量」は、有意義な患者利益（例えば、ウイルス量の減少）を示すのに十分である各活性成分の総量を言う。単独で投与される個々の活性成分に適用する場合、該用語は成分単独の量について言及する。組み合わせに適用する場合、該用語は、組み合わせてか、連続してか、または同時に投与されるかどうかにかかわらず、治療効果をもたらす活性成分を合わせた量について言及する。該式(I)の化合物および医薬的に許容されるその塩は上記の通りである。該担体、希釈剤、または賦形剤は、製剤の他の成分に適合し、そのレシピエントに有害でないという意味で許容可能でなくてはならない。本発明の別の態様によると、式(I)の化合物または医薬的に許容されるその塩を、１つ以上の医薬的に許容される担体、希釈剤、もしくは賦形剤と混合することを含む、医薬製剤の製造方法もまた提供する。本明細書において用いる用語「医薬的に許容される」は、本明細書において用いる用語「医薬的に許容される」は、適切な医学的判断の範囲内で、妥当な利益/リスク比に見合って、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症を伴わずに患者の組織に接触させて用いるのに適していて、その使用目的に有効である、化合物、物質、組成物、および/または剤形について言及する。

医薬製剤は、単位用量あたり所定の量の活性成分を含む単位剤形であってもよい。本発明の化合物が1日あたり約0.01から約250ミリグラム/キログラム(「mg/kg」)体重、好ましくは1日あたり約0.05から約100mg/kg体重である投与量濃度が、HCV介在疾患の予防および治療に対する単独療法においては典型的である。通常、本発明の医薬組成物は、1日あたり約1から約5回投与されるか、あるいは持続投与され得る。そのような投与は、長期治療もしくは救急治療として用いることができる。担体材料と組み合わせて単一剤形を製造する活性成分の量は、治療する症状、症状の重篤性、投与回数、投与経路、用いた化合物の排出速度、治療期間、ならびに患者の年齢、性別、体重、および状態によって変えられ得る。好ましい単位用量製剤は、本明細書において上記した、活性成分の１日量もしくはそれ以下、またはその適当な画分を含むものである。通常、化合物の至適用量よりかなり少ない少用量で治療を開始する。その後、該条件下で最適な効果に達するまで投与量を少しずつ増加させる。概して、いずれの有害または有毒な副作用も伴わずに、抗ウイルス効果が通常得られる濃度レベルで該化合物を投与することが最も望ましい。

本発明の組成物が、本発明の化合物と１つ以上のさらなる治療薬もしくは予防薬の組み合わせを含む場合、該化合物とさらなる薬剤の両者とも、通常、単独療法レジメンにおいて標準的に投与される用量の約10から150％、より好ましくは10から80％の用量レベルで存在する。

医薬製剤は、いずれの適当な経路、例えば経口(頬側もしくは舌下を含む)、直腸、経鼻、局所的(頬側、舌下、もしくは経皮を含む)、膣、または、非経口(皮下、皮内、筋肉内、関節内、滑液嚢内（intrasynovial）、胸骨内、髄腔内、病巣内、静脈内、または皮内注射もしくは注入を含む)経路による投与に適応しうる。そのような製剤は、薬学の分野において公知のいずれの方法よっても（例えば活性成分と担体もしくは賦形剤を会合させることにより）、製造され得る。経口投与または注射による投与が好ましい。

経口投与に適応した医薬製剤は、カプセル剤または錠剤; 粉末剤もしくは顆粒剤; 水性もしくは非水性液体中の液剤もしくは懸濁剤; 食用フォーム剤もしくはホイップ剤; または水中油液体エマルジョン剤もしくは油中水エマルジョン剤のような別々のユニットであってよい。

例えば、経口投与用の錠剤もしくはカプセル剤の形態において、活性薬剤成分は、経口で無毒の医薬的に許容される不活性担体（例えばエタノール、グリセロール、水など）と組み合わせることができる。粉末剤は、化合物を適切な微粒子サイズに細かく粉末化し、同様に粉末化された食用炭水化物（例えばデンプンまたはマンニトール）などの医薬担体と混合することにより製造される。香味剤、保存剤、分散剤、および着色剤もまた存在し得る。

カプセル剤は、上記の粉末混合物を製造し、成型ゼラチンシース（gelatin sheath）に詰めることにより製造される。充填工程の前に、流動化剤および滑沢剤（例えばコロイド状シリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、または固体のポリエチレングリコール）を粉末混合物に添加することができる。カプセル剤が摂取される場合、崩壊剤または可溶化剤（例えば寒天、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウム）を添加して、薬剤の有効性を高めることもできる。

さらに、所望される場合もしくは必要な場合、適切な結合剤、滑沢剤、崩壊剤、および着色剤を混合物に加えることもできる。適切な結合剤としては、デンプン、ゼラチン、天然糖（例えばグルコースもしくはβ-ラクトース）、コーンシロップ、天然および合成ガム（例えばアカシア、トラガカントまたはアルギン酸ナトリウム）、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコールなどが挙げられる。これらの剤形に用いられる滑沢剤としては、オレイン酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。崩壊剤としては、限定はしないが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどが挙げられる。錠剤は、例えば、粉末混合物を製造し、顆粒化もしくは充填し、滑沢剤および崩壊剤を添加し、そして錠剤に圧縮することにより製剤化される。粉末混合物は、適切に粉末化された化合物と、上記の希釈剤もしくは塩基、ならびに適宜、結合剤（例えばカルボキシメチルセルロース、アルギネート（aliginate）、ゼラチン（gelating）、もしくはポリビニルピロリドン）、溶解遅延剤（例えばパラフィン）、吸収促進剤（例えば第四級塩）および/または吸収剤（例えばベントナイト、カオリン、もしくはリン酸水素カルシウム）とを混合することにより製造される。結合剤（例えばシロップ、デンプン糊、アカシア粘液（acadia mucilage）、またはセルロース系物質もしくはポリマー系物質の溶液）で湿らせて、ふるいに押し通すことにより、粉末混合物を顆粒化することができる。顆粒化の代替法として、該粉末混合物を錠剤機に通して、不完全に成型されたスラグを得た後、顆粒に粉砕することができる。該顆粒を、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルク、または鉱物油の添加により滑らかにして、錠剤成形型から離れやすくすることができる。次いで、滑らかにした混合物を錠剤へと圧縮する。本発明の化合物はまた、自由流動性不活性担体と合わせて、顆粒化工程もしくは成形工程（slugging step）を経ずに直接、錠剤へと圧縮することができる。シェラックのシールコート（sealing coat）、糖もしくはポリマー材のコーティング、およびワックスの艶出しコーティングから成る、澄明もしくは不透明な保護コーティングを施すことができる。これらのコーティングに染料を添加して、異なる単位用量と区別することができる。

経口液剤（例えば液剤、シロップ剤、およびエリキシル剤）は、所定の分量が所定の量の化合物を含むように単位用量形態で製造することができる。シロップ剤は、化合物を適切に風味付けされた水溶液に溶解させることにより製造でき、一方、エリキシル剤は無毒のベヒクルを用いることにより製造される。可溶化剤および乳化剤（例えばエトキシ化 イソステリアルアルコールおよびポリオキソエチレンソルビトールエーテル）、保存剤、香味添加剤（例えばペパーミント油あるいは天然甘味剤、またはサッカリンもしくは他の人工甘味剤など）を添加することもできる。

必要に応じて、経口投与のために単位用量製剤をマイクロカプセル化することができる。該製剤はまた、例えば、ポリマー、ワックスなどの中に粒子状物質をコーティングまたは組み込むことによって、放出を遅延もしくは持続するように製造することもできる。

式(I)の化合物、および医薬的に許容されるその塩はまた、リポソームデリバリーシステム（例えば、小型の単層ベシクル、大型の単層ベシクル、および多重層ベシクル）の形態で投与することもできる。リポソームは、様々なリン脂質（phopholipid）、例えばコレステロール、ステアリルアミン、またはホスファチジルコリンから形成することができる。

式(I)の化合物および医薬的に許容されるその塩はまた、化合物分子が結合した個々の担体としてモノクローナル抗体を用いることによって送達してもよい。該化合物はまた、標的化可能な薬剤担体としての可溶性ポリマーと結合してもよい。そのようなポリマーとしては、ポリビニルピロリドン、ピラン共重合体、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノール、またはパリトイル（palitoyl）残基で置換されたポリエチレンオキシドポリリシンを挙げることができる。さらに、該化合物は、薬剤の制御放出を達成するのに有用な生分解性ポリマーの類、例えば、ポリ乳酸、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート、およびヒドロゲルの架橋もしくは両親媒性ブロック共重合体に結合していてよい。

経皮投与に適した医薬製剤は、長期間、レシピエントの表皮と密接な接触を維持することを目的とした、個別のパッチであってもよい。例えば、Pharmaceutical Research 1986, 3(6), 318に一般的に記載されるように、該活性成分はイオントフォレーシスによってパッチから送達されうる。

局所投与に適した医薬製剤は、軟膏剤、クリーム剤、懸濁剤、ローション剤、粉末剤、液剤、ペースト剤、ゲル剤、スプレー剤、エアロゾル剤、または油剤として製剤化されうる。

直腸投与に適した医薬製剤は、坐薬または浣腸剤であってよい。

該担体が固体である、経鼻投与に適した医薬製剤としては、例えば20〜500ミクロンの粒子サイズを有する粗粉末（course powder）が挙げられ、それは、嗅ぎ薬を摂取する方法、すなわち、鼻に近づけられた粉末剤の容器から鼻腔を介して急速吸入することにより、投与される。鼻腔用スプレーもしくは点鼻薬として投与するための、担体が液体である適切な製剤としては、活性成分の水性または油性液剤が挙げられる。

吸入による投与に適した医薬製剤としては、微粒子粉末もしくは微粒子ミストが挙げられ、それは様々なタイプの定量加圧（metered, dose pressurized）エアロゾル剤、ネブライザー、または吸入器を用いて発生されうる。

膣内投与に適した医薬製剤は、ペッサリー、タンポン、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、フォーム剤、またはスプレー製剤であってよい。

非経口投与に適した医薬製剤としては、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤（bacteriostat）、および製剤を対象のレシピエントの血液と等張にする塩（soute）を含みうる水性および非水性の無菌注射液剤; ならびに懸濁剤および増粘剤を含みうる水性および非水性の無菌懸濁剤が挙げられる。該製剤は、単位用量もしくは複数用量（multi-dose）容器、例えば、密封アンプルおよびバイアルに入っていてよく、使用の直前に無菌の液体担体（例えば注射用の水）の添加のみを必要とする凍結乾燥状態で保存してもよい。即時調製（Extemporaneous）注射液剤および懸濁剤は、無菌粉末剤、顆粒剤、および錠剤から調製されうる。

具体的に上述した成分に加えて、該製剤は、当該製剤のタイプに関して当分野で通常の他の薬剤を含んでもよい（例えば経口投与に適した製剤は着香剤を含んでもよい）ことが理解されるべきである。

該用語「患者」には、ヒトおよび他の哺乳類の両方が含まれる。

該用語「治療」は: (I) 疾患、障害、および/または症状に罹りやすいが、まだ罹患していると診断されていない患者において、疾患、障害、または症状の発症を予防すること; (ii) 疾患、障害、または症状の抑制、すなわち、その進行を抑止すること; ならびに(iii) 疾患、障害、または症状を軽減すること、すなわち、疾患、障害、および/または症状の退行をもたらすことを言う。

本発明の化合物はまた、シクロスポリン、例えばシクロスポリンAとともに投与することができる。シクロスポリンAは臨床試験においてHCVに対する活性を示している (Hepatology 2003, 38, 1282; Biochem. Biophys. Res. Commun. 2004, 313, 42; J. Gastroenterol. 2003, 38, 567)。

以下の表1は、本発明の化合物とともに投与することができる化合物のいくつかの実例を記載する。本発明の化合物は、他の抗HCV活性化合物とともに併用療法において、一緒にまたは別個に、あるいは組成物中で該化合物と合わせることによって、投与することができる。

本発明の化合物はまた、実験室用試薬として用いてもよい。化合物は、HCV疾患メカニズムの知識をさらに高めるためのウイルス複製アッセイの設計、動物アッセイ系の検証および構造生物学研究についての研究手段の提供において有益でありうる。さらに、本発明の化合物は、例えば競合阻害により、他の抗ウイルス性化合物の結合部位の確立または決定に有用である。

本発明の多形はまた、物質のウイルス汚染を治療もしくは予防するのに用いてもよく、それにより、そのような物質（例えば血液、組織、手術器具および手術着、実験器具および実験着、ならびに採血または輸血の器具および材料）と接触する、実験または医療の関係者または患者のウイルス感染の危険性を低下させうる。

本発明は、合成プロセスまたは代謝プロセス（ヒトもしくは動物の体内(in vivo)で生じるもの、またはin vitroで生じるプロセスを含む）により作られる、式(I)を有する化合物を包含することを意図する。

特に後述の例示的スキームおよび実施例におけるものを含めた本出願において使用される略語は、当業者には周知である。使用される略語のいくつかは以下の通りである。ＴＦＡは、トリフルオロ酢酸であり;Ｐｈはフェニルであり;ｔＢｕまたはｔ−Ｂｕはｔｅｒｔ−ブチルであり;ＤＭＳＯは、ジメチルスルホキシドであり;ＤＭＦはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドであり;ＥｔＯＨはエタノールであり;ＢｏｃまたはＢＯＣはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルであり;ＴＨＦはテトラヒドロフランであり;Ｅｔ_２Ｏはジエチルエーテルであり;Ｅｔはエチルであり;ＭｅＯＨはメタノールであり;ＥｔＯＡｃおよびＥｔＯＡＣは酢酸エチルであり; ＲＴは室温または保持時間であり(文脈によって決定される);Ｒ_ｔまたはｔ_Ｒは保持時間であり;ｈは時間であり;ｓａｔ’ｄは飽和であり; ＰＣＣはクロロクロム酸ピリジニウムであり; ＴＢＤＰＳはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルであり;ＤＭＡＰは４−ジメチルアミノピリジンであり;ＴＢＡＦはテトラブチルアンモニウムフルオリドであり;Ｅｔ_３ＮまたはＴＥＡはトリエチルアミンであり;ｍｉｎは分であり;ＯＡｃはアセテートであり;Ｃｂｚはカルボベンジルオキシであり;ＳＥＭは２−トリメチルシリルエトキシメトキシであり;ＡＩＢＮはアゾビスイソブチルニトリルであり;ＨＡＴＵはＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート;ＤＤＱは２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノンであり; ｄｐｐｆは１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンであり;ｉＰｒ_２ＮＥｔまたはＤＩＰＥＡまたはＤＩＥＡは、ジイソプロピルエチルアミンである。

本発明の化合物および方法は、本発明の化合物を製造し得る方法を例示する下記の合成スキームと関連してより理解されるであろう。出発物質は、商業的供給源から得ることができるか、または当業者には公知の十分に確立した文献の方法によって製造することができる。上記で定義した化合物は、下記で示す合成において適切な反応物および薬剤の置換によって合成することができることは当業者には容易に明らかであろう。下記の合成を首尾よく完了するために、選択的保護および脱保護工程、ならびに工程自体の順序は、可変部分の性質によって様々な順序で行なうことができることもまた、当業者には容易に明らかであろう。可変部分は、下記で他に断らない限り上記定義の通りである。

スキーム１:置換フェニルグリシン誘導体
置換フェニルグリシン誘導体は、下記で例示されているいくつかの方法によって製造することができる。フェニルグリシンt-ブチルエステルは、酸性媒質中において、適当なアルデヒドおよび還元剤（例えばシアノ水素化ホウ素ナトリウム）によって還元的にアルキル化され得る(経路A)。該t-ブチルエステルの加水分解は、強酸（例えばHClまたはトリフルオロ酢酸）によって達成され得る。別法として、フェニルグリシンは、ハロゲン化アルキル（例えばヨウ化エチル）および塩基（例えば炭酸水素ナトリウムまたは炭酸カリウム）によってアルキル化され得る(経路B)。経路Cは、経路Aにおけるようなフェニルグリシンの還元的アルキル化、それに続く還元剤および酸の存在下での代替アルデヒド（例えばホルムアルデヒド）による第２の還元的アルキル化を例示する。経路Dは、対応するマンデル酸類似体を介した置換フェニルグリシンの合成を例示する。能力のある脱離基への第二級アルコールの変換は、p-トルエンスルホニルクロリドによって達成され得る。適当なアミンによるトシレート基の置換、それに続くベンジルエステルの還元的除去によって、置換フェニルグリシン誘導体を得ることができる。経路Eにおいて、ラセミの置換フェニルグリシン誘導体は、鏡像異性的にキラルな補助基（例えば、これらに限定されないが、(+)-1-フェニルエタノール、(-)-1-フェニルエタノール、Evan'sオキサゾリジノン、または鏡像異性的に純粋なパントラクトン）を用いたエステル化によって分割される。ジアステレオマーの分離は、クロマトグラフィー(シリカゲル、HPLC、結晶化など)、それに続くキラル補助基の除去によって達成され、鏡像異性的に純粋なフェニルグリシン誘導体が得られる。経路Hは、経路Eと交わる合成シークエンスを例示しており、その中で、上記のキラル補助基はアミン添加の前に導入される。別法として、アリール酢酸のエステルは、ブロモニウムイオン源（例えば、臭素、N-ブロモこはく酸イミド、またはCBr₄）によって臭素化することができる。得られたベンジル型ブロミドは、トリエチルアミンまたはヒューニッヒ塩基などの第三級アミン塩基の存在下で種々の一置換または二置換アミンによって置き換えることができる。低温での水酸化リチウム、あるいは高温での６Ｎ ＨＣｌを用いた処理によるメチルエステルの加水分解によって、置換フェニルグリシン誘導体が得られる。別の方法を、経路Gに示す。グリシン類似体は、パラジウム源（０）（例えばパラジウムビス（トリブチルホスフィン））および塩基（例えばリン酸カリウム）の存在下において、種々のハロゲン化アリールによって誘導体化することができる。次いで、得られたエステルを、塩基または酸を用いた処理によって加水分解することができる。フェニルグリシン誘導体を製造するための他の周知の方法が当技術分野に存在し、この記載において目的の化合物を得るために改変することができることが理解されるべきである。最終フェニルグリシン誘導体は、プレパラティブＨＰＬＣによって９８％ｅｅを超えるエナンチオマー純度まで精製することができることもまた理解されるべきである。

スキーム２: アシル化アミノ酸誘導体
本発明の別の実施態様において、アシル化フェニルグリシン誘導体を以下に例示の通り製造してもよい。カルボン酸が容易に除去されるエステルとして保護されているフェニルグリシン誘導体をトリエチルアミンなどの塩基の存在下で酸塩化物によってアシル化して、対応するアミドを得てもよい(経路A)。経路Bは、適当なクロロホルメートによる出発フェニルグリシン誘導体のアシル化を例示し、一方経路Cは、適当なイソシアメートまたは塩化カルバモイルとの反応を示す。経路A〜Cに示される３つの中間体の各々は、当業者に公知の方法によって脱保護されうる(すなわち;HClまたはトリフルオロ酢酸などの強塩基によるt-ブチルエステルの処理)。

スキーム３
アミノ置換フェニル酢酸は、過剰量のアミンによるクロロメチルフェニル酢酸の処理によって製造されうる。

化合物合成条件
純度評価および低分解能質量分析を、Waters Micromass ZQ MSシステムと連結した島津LCシステムで実施した。保持時間は装置の間でわずかに変化しうることに留意すべきである。保持時間(RT)の決定において用いたLC条件は以下であった。

共通のcapの合成
他に記載のない限り、本項に適用可能なさらなるLC条件
条件-MS-W1
カラム = XTERRA 3.0 X 50 mm S7
開始％B = 0
最終％B = 100
グラジエント時間 = 2 分
停止時間 = 3 分
流速 = 5 mL/分
波長 = 220 nm
溶媒A = 0.1％TFA／10％メタノール/90％H₂0
溶媒B = 0.1％TFA／90％メタノール/10％H₂0
条件-MS-W2
カラム = XTERRA 3.0 X 50 mm S7
開始％B = 0
最終％B = 100
グラジエント時間 = 3 分
停止時間 = 4 分
流速 = 4 mL/分
波長 = 220 nm
溶媒A = 0.1％TFA／10％メタノール/90％H₂0
溶媒B = 0.1％TFA／90％メタノール/10％H₂0
条件-MS-W5
カラム = XTERRA 3.0 X 50 mm S7
開始％B = 0
最終％B = 30
グラジエント時間 = 2 分
停止時間 = 3 分
流速 = 5 mL/分
波長 = 220 nm
溶媒A = 0.1％TFA／10％メタノール/90％H₂0
溶媒B = 0.1％TFA／90％メタノール/10％H₂0
条件-D1
カラム = XTERRA C18 3.0 X 50 mm S7
開始％B = 0
最終％B = 100
グラジエント時間 = 3 分
停止時間 = 4 分
流速 = 4 mL/分
波長 = 220 nm
溶媒A = 0.1％TFA／10％メタノール/90％H₂0
溶媒B = 0.1％TFA／90％メタノール/10％H₂0
条件-D2
カラム = Phenomenex-Luna 4.6 X 50 mm S10
開始％B = 0
最終％B = 100
グラジエント時間 = 3 分
停止時間 = 4 分
流速 = 4 mL/分
波長 = 220 nm
溶媒A = 0.1％TFA／10％メタノール/90％H₂0
溶媒B = 0.1％TFA／90％メタノール/10％H₂0
条件-M3
カラム = XTERRA C18 3.0 X 50 mm S7
開始％B = 0
最終％B = 40
グラジエント時間 = 2 分
停止時間 = 3 分
流速 = 5 mL/分
波長 = 220 nm
溶媒A = 0.1％TFA／10％メタノール/90％H₂0
溶媒B = 0.1％TFA／90％メタノール/10％H₂0
条件I
カラム = Phenomenex-Luna 3.0 X 50 mm S10
開始％B = 0
最終％B = 100
グラジエント時間 = 2 分
停止時間 = 3 分
流速 = 4 mL/分
波長 = 220 nm
溶媒A = 0.1％TFA／10％メタノール/90％H₂0
溶媒B = 0.1％TFA／90％メタノール/10％H₂0
条件II
カラム = Phenomenex-Luna 4.6 X 50 mm S10
開始％B = 0
最終％B = 100
グラジエント時間 = 2 分
停止時間 = 3 分
流速 = 5 mL/分
波長 = 220 nm
溶媒A = 0.1％TFA／10％メタノール/90％H₂0
溶媒B = 0.1％TFA／90％メタノール/10％H₂0
条件III
カラム = XTERRA C18 3.0 x 50mm S7
開始％B = 0
最終％B = 100
グラジエント時間 = 3 分
停止時間 = 4 分
流速 = 4 mL/分
波長 = 220 nm
溶媒A = 0.1％TFA／10％メタノール/90％H₂0
溶媒B = 0.1％TFA／90％メタノール/10％H₂0

Cap-1

10％ Pd/C(2.0g)／メタノール(10 mL)懸濁液を、(R)-2-フェニルグリシン(10g, 66.2 mmol)、ホルムアルデヒド(33 mLの37重量％／水)、1N HCl(30 mL)およびメタノール(30 mL)の混合液に添加し、H₂(60 psi)で3時間処理した。該反応混合液を珪藻土(セライト（登録商標）)により濾過し、該濾液を減圧濃縮した。得られた粗物質をイソプロパノールから再結晶化して、Cap-1のHCl塩を白色の針状結晶物として得た(4.0 g)。施光度: -117.1° [H₂O中にc=9.95 mg/mL; λ=589 nm]. ¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5 ppm, 500 MHz): δ 7.43-7.34 (m, 5H), 4.14 (s, 1H), 2.43 (s, 6H); LC (条件 I): 保持時間=0.25; LC/MS: [M+H]⁺ C₁₀H₁₄NO₂として計算；計算値：180.10; 実測値 180.17; HRMS: [M+H]⁺ C₁₀H₁₄NO₂として計算；計算値：180.1025; 実測値 180.1017.

Cap-2

NaBH₃CN(6.22g, 94 mmol)を、(R)-2-フェニルグリシン(6.02 g, 39.8 mmol)およびメタノール(100 mL)の冷却した(氷/水)混合液に、数分かけて少しずつ添加し、5分間撹拌した。アセトアルデヒド(10 mL)を10分かけて滴下し、同じ冷却温度で45分間、および周囲温度で〜6.5時間撹拌を続けた。該反応混合液を氷-水浴で冷却し戻し、水(3 mL)で処理し、次いで、該混合液のpHが〜1.5-2.0になるまで、〜45分かけて濃HClを滴下することによりクエンチした。該冷却浴を取り外し、該混合液のpHが1.5-2.0前後で維持されるように濃HClを添加しながら、撹拌を続けた。該反応混合液を終夜撹拌し、濾過して白色の懸濁を除去し、該濾液を減圧濃縮した。該粗物質をエタノールから再結晶化して、Cap-2のHCl塩を輝く白色の固形物として2クロップで得た(クロップ-1: 4.16 g; クロップ-2: 2.19 g)。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5 ppm, 400 MHz): 10.44 (1.00, ブロードのs, 1H), 7.66 (m, 2H), 7.51 (m, 3H), 5.30 (s, 1H), 3.15 (ブロードのm, 2H), 2.98 (ブロードのm, 2H), 1.20 (見かけ上のブロードのs, 6H). クロップ-1: [α]²⁵ -102.21゜(c=0.357, H₂0); クロップ-2: [α]²⁵ -99.7゜(c=0.357, H₂0). LC (条件 I): 保持時間=0.43 分; LC/MS: [M+H]⁺ C₁₂H₁₈NO₂として計算；計算値: 208.13; 実測値 208.26.

Cap-3

(R)-2-フェニルグリシン(3.096g, 20.48 mmol)、1N HCl(30 mL)およびメタノール(40 mL)の冷却した(〜15℃)混合液に、アセトアルデヒド(5.0 mL, 89.1 mmol)、およびメタノール/H₂O(4mL/1 mL)中の10％ Pd/C(720 mg)懸濁液を連続的に添加した。該冷却浴を取り外し、該反応混合液をH₂のバルーン下で17時間撹拌した。さらなるアセトアルデヒド(10 mL, 178.2 mmol)を添加して、H₂雰囲気下で24時間撹拌を続けた[注:H₂の供給は該反応の間中、必要に応じて補った]。該反応混合液を珪藻土(セライト（登録商標）)により濾過し、該濾液を減圧濃縮した。得られた粗物質をイソプロパノールから再結晶化して(R)-2-(エチルアミノ)-2-フェニル酢酸HCl塩を輝く白色の固形物として得た(2.846g)。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5 ppm, 400 MHz): δ 14.15 (ブロードのs, 1H), 9.55 (ブロードのs, 2H), 7.55-7.48 (m, 5H), 2.88 (ブロードのm, 1H), 2.73 (ブロードのm, 1H), 1.20 (見かけ上のt, J=7.2, 3H). LC (条件 I): 保持時間=0.39 分; ＞95％ 均一性指数; LC/MS: [M+H]⁺ C₁₀H₁₄NO₂として計算；計算値: 180.10; 実測値 180.18.

(R)-2-(エチルアミノ)-2-フェニル酢酸/HCl(1.492g, 6.918 mmol)、ホルムアルデヒド(20 mLの37重量％／水)、1N HCl(20 mL)およびメタノール(23 mL)の混合液に、メタノール/H₂O(3 mL/1 mL)中の10％ Pd/C(536 mg)懸濁液を添加した。該反応混合液をH₂のバルーン下で〜72時間撹拌した（H₂の供給は必要に応じて補った）。該反応混合液を珪藻土(セライト（登録商標）)により濾過し、該濾液を減圧濃縮した。得られた粗物質をイソプロパノール(50 mL)から再結晶化して、Cap-3のHCl塩を白色の固形物として得た(985 mg)。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5 ppm, 400 MHz): δ 10.48 (ブロードのs, 1H), 7.59-7.51 (m, 5H), 5.26 (s, 1H), 3.08 (見かけ上のブロードのs, 2H), 2.65 (ブロードのs, 3H), 1.24 (ブロードのm, 3H). LC (条件 I): 保持時間=0.39 分; ＞95 ％ 均一性指数; LC/MS: [M+H]⁺ C₁₁H₁₆NO₂として計算；計算値: 194.12; 実測値 194.18; HRMS: [M+H]⁺ C₁₁H₁₆NO₂として計算；計算値: 194.1180; 実測値 194.1181.

Cap-4

冷却した(氷/水)、(R)-tert-ブチル 2-アミノ-2-フェニルアセテート/HCl(9.877 g, 40.52 mmol)およびジイソプロピルエチルアミン(14.2 mL, 81.52 mmol)のTHF(410 mL)半溶液に、ClCO₂Me(3.2 mL, 41.4 mmol)を6分かけて滴下し、同様の温度で5.5時間撹拌した。該揮発性成分を減圧除去し、該残渣を水(100 mL)および酢酸エチル(200 mL)間に分配した。該有機層を1N HCl(25 mL)および飽和NaHCO₃溶液(30 mL)で洗浄し、乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、減圧濃縮した。得られた無色の油状物をヘキサンからトリチュレートし、濾過してヘキサン(100 mL)で洗浄し、(R)-tert-ブチル 2-(メトキシカルボニルアミノ)-2-フェニルアセテートを白色の固形物として得た(7.7 g)。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5 ppm, 400 MHz): 7.98 (d, J=8.0, 1H), 7.37-7.29 (m, 5H), 5.09 (d, J=8, 1H), 3.56 (s, 3H), 1.33 (s, 9H). LC (条件 I): 保持時間=1.53 分; 〜90％ 均一性指数; LC/MS: [M+Na]⁺ C₁₄H₁₉NNaO₄として計算；計算値: 288.12; 実測値 288.15.

冷却した(氷/水)上記生成物のCH₂Cl₂(160 mL)溶液に、TFA(16 mL)を7分かけて滴下し、該冷却浴を取り外して該反応混合液を20分間撹拌した。脱保護がまだ完了していなかったので、さらなるTFA(1.0 mL)を添加してさらに2時間撹拌を続けた。該揮発性成分を減圧除去し、得られた油残渣をジエチルエーテル(15 mL)およびヘキサン(12 mL)で処理して、沈殿物を得た。該沈殿物を濾過して、ジエチルエーテル/ヘキサン(〜1:3の比; 30 mL)で洗浄し、減圧乾燥させて、Cap-4を綿毛状の白色の固形物として得た(5.57 g)。 施光度: -176.9° [H₂O中にc=3.7 mg/mL; λ=589 nm]. ¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5 ppm, 400 MHz): δ 12.84 (ブロードのs, 1H), 7.96 (d, J=8.3, 1H), 7.41-7.29 (m, 5H), 5.14 (d, J=8.3, 1H), 3.55 (s, 3H). LC (条件 I): 保持時間=1.01 分; ＞95 ％ 均一性指数; LC/MS: [M+H]⁺ C₁₀H₁₂NO₄として計算；計算値 210.08; 実測値 210.17; HRMS: [M+H]⁺ C₁₀H₁₂NO₄として計算；計算値 210.0766; 実測値 210.0756.

Cap-5

エタノール(40 mL)中の、(R)-2-フェニルグリシン(1.0 g, 6.62 mmol)、1,4-ジブロモブタン(1.57 g, 7.27 mmol)およびNa₂CO₃(2.10 g, 19.8 mmol)の混合液を100℃で21時間加熱した。該反応混合液を周囲温度に冷却して濾過し、該濾液を減圧濃縮した。該残渣をエタノールに溶解させ、1N HClでpH3-4に酸性化し、該揮発性成分を減圧除去した。得られた粗物質を逆相HPLC(水/メタノール/TFA)により精製して、Cap-5のTFA塩を半-粘稠性の白色の泡状物質として得た(1.0 g)。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5, 500 MHz) δ 10.68 (ブロードのs, 1H), 7.51 (m, 5H), 5.23 (s, 1H), 3.34 (見かけ上のブロードのs, 2H), 3.05 (見かけ上のブロードのs, 2H), 1.95 (見かけ上のブロードのs, 4H); 保持時間=0.30 分 (条件 I); ＞98％ 均一性指数; LC/MS: [M+H]⁺ C₁₂H₁₆NO₂として計算；計算値: 206.12; 実測値 206.25.

Cap-6

Cap-6のTFA塩を、Cap-5の製造方法を用いて、(R)-2-フェニルグリシンおよび1-ブロモ-2-(2-ブロモエトキシ)エタンから合成した。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5, 500 MHz) δ 12.20 (ブロードのs, 1H), 7.50 (m, 5H), 4.92 (s, 1H), 3.78 (見かけ上のブロードのs, 4H), 3.08 (見かけ上のブロードのs, 2H), 2.81 (見かけ上のブロードのs, 2H); 保持時間=0.32 分 (条件 I); ＞98％; LC/MS: [M+H]⁺ C₁₂H₁₆NO₃として計算；計算値: 222.11; 実測値 222.20; HRMS: [M+H]⁺ C₁₂H₁₆NO₃として計算；計算値: 222.1130; 実測値 222.1121.

Cap-7

冷却した(-5℃)、(S)-ベンジル 2-ヒドロキシ-2-フェニルアセテート(10.0 g, 41.3 mmol)、トリエチルアミン(5.75 mL, 41.3 mmol)および4-ジメチルアミノピリジン(0.504 g, 4.13 mmol)のCH₂Cl₂(200 mL)溶液に、p-トルエンスルホニルクロリド(8.65 g, 45.4 mmol)のCH₂Cl₂(200 mL)溶液を、温度を-5℃から0℃に維持しながら滴下した。該反応液を0℃で9時間撹拌した後、フリーザー(-25℃)で14時間保存した。周囲温度に解凍して、水(200 mL)、1N HCl(100 mL)および食塩水(100 mL)で洗浄し、乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、減圧濃縮して2-フェニル-2-(トシルオキシ)酢酸ベンジルを粘稠性の油状物として得て、それを静置で固化させた(16.5 g)。該生成物のキラル整合性（chiral integrity）を確認せず、さらなる精製も行わずに次の工程に用いた。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5, 500 MHz) δ 7.78 (d, J= 8.6, 2H), 7.43-7.29 (m, 10H), 7.20 (m, 2H), 6.12 (s, 1H), 5.16 (d, J=12.5, 1H), 5.10 (d, J=12.5, 1H), 2.39 (s, 3H). 保持時間=3.00 (条件 III); ＞90％ 均一性指数; LC/MS: [M+H]⁺ C₂₂H₂₀NaO₅Sとして計算；計算値: 419.09; 実測値 419.04.

2-フェニル-2-(トシルオキシ)酢酸ベンジル(6.0 g, 15.1 mmol)、1-メチルピペラジン(3.36 mL, 30.3 mmol)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(13.2 mL, 75.8 mmol)のTHF(75 mL)溶液を、65℃で7時間加熱した。該反応液を周囲温度に冷却し、該揮発性成分を減圧除去した。該残渣を酢酸エチルおよび水間に分配し、該有機層を水および食塩水で洗浄し、乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、減圧濃縮した。得られた粗物質をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル, 酢酸エチル)により精製して、2-(4-メチルピペラジン-1-イル)-2-フェニル酢酸ベンジルをオレンジがかった-茶色の粘稠性の油状物として得た(4.56 g)。キラルHPLC分析(Chiralcel OD-H)により、該サンプルは38.2〜58.7の比率のエナンチオマーの混合物であることが示された。該エナンチオマーの分離を以下のとおり達成した:該生成物を120 mLのエタノール/ヘプタン(1:1)に溶解させ、75 mL/分で85:15 ヘプタン/エタノールにより溶出するキラルHPLCカラム(Chiracel OJ, 5 cm ID x 50 cm L, 20 μm)に注入(5 mL/注入)して、220 nmでモニタリングした。エナンチオマー-1 (1.474 g)およびエナンチオマー-2 (2.2149 g)を粘稠性の油状物として得た。 ¹H NMR (CDCl₃, δ=7.26, 500 MHz) 7.44-7.40 (m, 2H), 7.33-7.24 (m, 6H), 7.21-7.16 (m, 2H), 5.13 (d, J=12.5, 1H), 5.08 (d, J=12.5, 1H), 4.02 (s, 1H), 2.65-2.38 (見かけ上のブロードのs, 8H), 2.25 (s, 3H). 保持時間=2.10 (条件 III); ＞98％ 均一性指数; LC/MS: [M+H]⁺ C₂₀H₂₅N₂O₂として計算；計算値: 325.19; 実測値 325.20.

2-(4-メチルピペラジン-1-イル)-2-フェニル酢酸ベンジル(1.0 g, 3.1 mmol)のいずれかのエナンチオマーのメタノール(10 mL)溶液を、10％ Pd/C(120 mg)／メタノール(5.0 mL)懸濁液に添加した。該反応混合液を、注意深いモニタリングの下で、水素のバルーンで50分未満処理した。反応の完了後ただちに、該触媒を珪藻土(セライト(登録商標))により濾過し、該濾液を減圧濃縮して、フェニル酢酸の混入したCap-7を、黄褐色の泡状物質として得た(867.6 mg; 量は上記の理論的収量である)。該生成物を、さらなる精製は行わずに次の工程に用いた。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5, 500 MHz) δ 7.44-7.37 (m, 2H), 7.37-7.24 (m, 3H), 3.92 (s, 1H), 2.63-2.48 (app. ブロードのs, 2H), 2.48-2.32 (m, 6H), 2.19 (s, 3H); 保持時間=0.31 (条件 II); ＞90％ 均一性指数; LC/MS: [M+H]⁺ C₁₃H₁₉N₂O₂として計算；計算値: 235.14; 実測値 235.15; HRMS: [M+H]⁺ C₁₃H₁₉N₂O₂として計算；計算値: 235.1447; 実測値 235.1440.

Cap-8およびCap-9の合成は、SN₂置換工程(すなわち、Cap-8については4-ヒドロキシピペリジン、Cap-9については(S)-3-フルオロピロリジン)における適当なアミンおよび各々の立体異性の中間体の分離に関する改変条件を用いることにより、上記のCap-7の合成に従って実施した。

Cap-8

中間体2-(4-ヒドロキシピペリジン-1-イル)-2-フェニル酢酸ベンジルのエナンチオマー分離を、以下の条件を用いることにより達成した: 該化合物(500 mg)をエタノール/ヘプタン(5 mL/45 mL)に溶解させた。得られた溶液を、10 mL/分で80:20 ヘプタン/エタノールを用いて溶出するキラルHPLCカラム(Chiracel OJ, 2 cm ID x 25 cm L, 10 μm)に注入(5 mL/注入)し、220 nmでモニタリングし、186.3 mgのエナンチオマー-1および209.1 mgのエナンチオマー-2を明黄色の粘稠性の油状物として得た。これらのベンジルエステルをCap-7の製造に従って水素化分解して、Cap-8を得た: ¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5, 500 MHz) 7.40 (d, J=7, 2H), 7.28-7.20 (m, 3H), 3.78 (s 1H), 3.46 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 2.62 (m, 1H), 2.20 (m, 2H), 1.70 (m, 2H), 1.42 (m, 2H). 保持時間=0.28 (条件 II); ＞98％ 均一性指数; LC/MS: [M+H]⁺ C₁₃H₁₈NO₃として計算；計算値: 236.13; 実測値 236.07; HRMS: [M+H]⁺ C₁₃H₁₈NO₃として計算；計算値: 236.1287; 実測値 236.1283.

Cap-9

中間体2-((S)-3-フルオロピロリジン-1-イル)-2-フェニル酢酸ベンジルのジアステレオマー分離は、以下の条件を用いて達成した: 該エステル(220 mg)を、10バール圧、流速70 mL/分、および温度35℃で、0.1％TFAを含有する95％CO₂/5％メタノールにより溶出するキラルHPLCカラム(Chiracel OJ-H, 0.46 cm ID x 25 cm L, 5 μm)で分離した。各々の立体異性体についてのHPLC溶出物を濃縮して、該残渣をCH₂Cl₂(20 mL)中に溶解させ、水性媒体(10 mL水 + 1 mL飽和NaHCO₃溶液)で洗浄した。該有機相を乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、減圧濃縮して92.5 mgのフラクション-1および59.6 mgのフラクション-2を得た。これらのベンジルエステルをCap-7の製造に従って水素化分解して、Cap 9aおよび9bを製造した。Cap-9a(ジアステレオマー-1;該サンプルはH₂O/メタノール/TFA溶媒を用いた逆相HPLCでの精製により得られたTFA塩である): ¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5, 400 MHz) 7.55-7.48 (m, 5H), 5.38 (mのd, J=53.7, 1H), 5.09 (ブロードのs, 1H), 3.84-2.82 (ブロードのm, 4H), 2.31-2.09 (m, 2H). 保持時間=0.42 (条件 I); ＞95％ 均一性指数; LC/MS: [M+H]⁺ C₁₂H₁₅FNO₂として計算；計算値: 224.11; 実測値 224.14; Cap-9b (ジアステレオマー-2): ¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5, 400 MHz) 7.43-7.21 (m, 5H), 5.19 (mのd, J=55.9, 1H), 3.97 (s, 1H), 2.95-2.43 (m, 4H), 2.19-1.78 (m, 2H). 保持時間=0.44 (条件 I); LC/MS: [M+H]⁺ C₁₂H₁₅FNO₂として計算；計算値: 224.11; 実測値 224.14.

Cap-10

メタノール(15 mL)中のD-プロリン(2.0 g, 17 mmol)およびホルムアルデヒド(2.0 mLの37重量％／H₂O)の溶液に、10％ Pd/C(500 mg)／メタノール(5 mL)懸濁液を添加した。 該混合液を水素のバルーン下で23時間撹拌した。該反応混合液を珪藻土(セライト（登録商標）)により濾過し、減圧濃縮して、Cap-10をオフホワイト色の固形物として得た(2.15 g)。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5, 500 MHz) 3.42 (m, 1H), 3.37 (dd, J=9.4, 6.1, 1H), 2.85-2.78 (m, 1H), 2.66 (s, 3H), 2.21-2.13 (m, 1H), 1.93-1.84 (m, 2H), 1.75-1.66 (m, 1H). 保持時間=0.28 (条件 II); ＞98％ 均一性指数; LC/MS: [M+H]⁺ C₆H₁₂NO₂として計算；計算値: 130.09; 実測値 129.96.

Cap-11

メタノール(20 mL)中の、(2S,4R)-4-フルオロピロリジン-2-カルボン酸(0.50 g, 3.8 mmol)、ホルムアルデヒド(0.5 mLの37重量％／H₂O)、12 N HCl(0.25 mL)および10％ Pd/C(50 mg)の混合液を、水素のバルーン下で19時間撹拌した。該反応混合液を珪藻土(セライト（登録商標）)により濾過し、該濾液を減圧濃縮した。該残渣をイソプロパノールから再結晶化して、Cap-11のHCl塩を白色の固形物として得た(337.7 mg)。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5, 500 MHz) 5.39 (d m, J=53.7, 1H), 4.30 (m, 1H), 3.90 (ddd, J=31.5, 13.5, 4.5, 1H), 3.33 (dd, J=25.6, 13.4, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.60-2.51 (m, 1H), 2.39-2.26 (m, 1H). 保持時間=0.28 (条件 II); ＞98％ 均一性指数; LC/MS: [M+H]⁺ C₆H₁₁FNO₂として計算；計算値: 148.08; 実測値 148.06.

Cap-12 (cap 52と同一)

L-アラニン(2.0 g, 22.5 mmol)を10％炭酸ナトリウム水溶液(50 mL)に溶解させ、クロロギ酸メチル(4.0 mL)のTHF(50 mL)溶液をそれに添加した。該反応混合液を周囲条件下で4.5時間撹拌し、減圧濃縮した。得られた白色の固形物を水に溶解させ、1N HClを用いてpH〜2-3に酸性化した。得られた溶液を酢酸エチル(3 x 100 mL)で抽出し、有機相を合わせて乾燥させ(Na₂SO₄)、濾過し、減圧濃縮して、無色の油状物を得た(2.58 g)。500 mgのこの物質を逆相HPLC(H₂O/メタノール/TFA)により精製して、150 mgのCap-12を無色の油状物として得た。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5, 500 MHz) 7.44 (d, J=7.3, 0.8H), 7.10 (ブロードのs, 0.2H), 3.97 (m, 1H), 3.53 (s, 3H), 1.25 (d, J=7.3, 3H).

Cap-13

メタノール(30 mL)中のL-アラニン(2.5 g, 28 mmol)、ホルムアルデヒド(8.4 g, 37重量％)、1N HCl(30 mL)および10％ Pd/C(500 mg)の混合液を、水素雰囲気下(50 psi)で5時間撹拌した。該反応混合液を珪藻土(セライト（登録商標）)により濾過し、該濾液を減圧濃縮してCap-13のHCl塩を油状物として得て、減圧下で静置して固化させた(4.4 g;該量は上記の理論的収量である)。該生成物をさらなる精製は行わずに用いた。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5, 500 MHz) δ 12.1 (ブロードのs, 1H), 4.06 (q, J=7.4, 1H), 2.76 (s, 6H), 1.46 (d, J=7.3, 3H).

Cap-14

工程1:(R)-(-)-D-フェニルグリシン tert-ブチルエステル(3.00 g, 12.3 mmol)、NaBH₃CN(0.773 g, 12.3 mmol)、KOH(0.690 g, 12.3 mmol)および酢酸(0.352 mL, 6.15 mmol)の混合液をメタノール中において0℃で撹拌した。この混合液に、グルタルアルデヒド(2.23 mL, 12.3 mmol)を5分かけて滴下した。該反応混合液を撹拌して周囲温度に昇温させ、同じ温度で16時間撹拌を続けた。続いて、該溶媒を除去し、該残渣を10％ NaOH水溶液と酢酸エチルに分配した。該有機相を分離し、乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、乾固するまで濃縮して澄明な油状物を得た。この物質を逆相プレパラティブHPLC(Primesphere C-18, 30 x 100mm; CH₃CN-H₂O-0.1％ TFA)により精製して、中間体エステル(2.70 g, 56％)を澄明な油状物として得た。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.53-7.44 (m, 3H), 7.40-7.37 (m, 2H), 3.87 (d, J=10.9 Hz, 1H), 3.59 (d, J=10.9 Hz, 1H), 2.99 (t, J=11.2 Hz, 1H), 2.59 (t, J=11.4 Hz, 1H), 2.07-2.02 (m, 2H), 1.82 (d, J=1.82 Hz, 3H), 1.40 (s, 9H). LC/MS: C₁₇H₂₅NO₂として計算；計算値: 275; 実測値: 276 (M+H)⁺.

工程2:撹拌した中間体エステル(1.12g, 2.88mmol)／ジクロロメタン(10 mL)溶液に、TFA(3 mL)を添加した。該反応混合液を周囲温度で4時間撹拌した後、乾固するまで濃縮して淡黄色の油状物を得た。該油状物を逆相プレパラティブHPLC(Primesphere C-18, 30 x 100mm; CH₃CN-H₂O-0.1％ TFA)を用いて精製した。適当なフラクションを合わせて乾固するまで減圧濃縮した。次いで、該残渣を最少量のメタノールに溶解させ、MCX LP抽出カートリッジに(2 x 6 g)アプライした。該カートリッジをメタノール(40 mL)ですすいだ後、2Mアンモニア／メタノール(50 mL)を用いて目的の化合物を溶出した。生成物含有フラクションを合わせて濃縮し、該残渣を水に溶解させた。この溶液を凍結乾燥させて、表題の化合物(0.492 g, 78％)を淡黄色の固形物として得た。 ¹H NMR (DMSO-d₆) δ 7.50 (s, 5H), 5.13 (s, 1H), 3.09 (ブロードのs, 2H), 2.92-2.89 (m, 2H), 1.74 (m, 4H), 1.48 (ブロードのs, 2H). LC/MS: C₁₃H₁₇NO₂として計算；計算値: 219; 実測値: 220 (M+H)⁺.

Cap-15

工程1: (S)-1-フェニルエチル 2-ブロモ-2-フェニルアセテート: 乾燥ジクロロメタン(100 mL)中のα-ブロモフェニル酢酸(10.75 g, 0.050 mol)、(S)-(-)-1-フェニルエタノール(7.94 g, 0.065 mol)およびDMAP(0.61 g, 5.0 mmol)の混合液に、固体のEDCI(12.46 g, 0.065 mol)を一度に添加した。得られた溶液をAr下において室温で18時間撹拌した後、酢酸エチルで希釈し、洗浄し(H₂O x 2、食塩水)、乾燥させ(Na₂SO₄)、濾過し、濃縮して淡黄色の油状物を得た。この油状物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO₂/ヘキサン-酢酸エチル, 4:1)で処理して表題の化合物(11.64 g, 73％)を白色の固形物として得た。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.53-7.17 (m, 10H), 5.95 (q, J=6.6 Hz, 0.5H), 5.94 (q, J=6.6 Hz, 0.5H), 5.41 (s, 0.5H), 5.39 (s, 0.5H), 1.58 (d, J=6.6 Hz, 1.5H), 1.51 (d, J=6.6 Hz, 1.5H).

工程2: (S)-1-フェニルエチル(R)-2-(4-ヒドロキシ-4-メチルピペリジン-1-イル)-2-フェニルアセテート: (S)-1-フェニルエチル 2-ブロモ-2-フェニルアセテート(0.464 g, 1.45 mmol)／THF(8 mL)溶液に、トリエチルアミン(0.61 mL, 4.35 mmol)を添加し、続いてテトラブチルアンモニウムヨージド(0.215 g, 0.58 mmol)を添加した。該反応混合液を室温で5分間撹拌した後、4-メチル-4-ヒドロキシピペリジン(0.251 g, 2.18 mmol)／THF(2 mL)溶液を添加した。該混合液を室温で1時間撹拌した後、55-60℃(油浴温度)で4時間加熱した。冷却した反応混合液を、次いで、酢酸エチル(30 mL)で希釈し、洗浄し(H₂O x2、食塩水)、乾燥させ(MgSO₄)、濾過および濃縮した。該残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(0-60％ 酢酸エチル-ヘキサン)により精製して、まず第一に表題の化合物の(S,R)-異性体(0.306 g, 60％)を白色の固形物として得て、次に対応する(S,S)-異性体(0.120 g, 23％)もまた白色の固形物として得た。(S,R)-異性体: ¹H NMR (CD₃OD) δ 7.51-7.45 (m, 2H), 7.41-7.25 (m, 8H), 5.85 (q, J=6.6 Hz, 1H), 4.05 (s, 1H), 2.56-2.45 (m, 2H), 2.41-2.29 (m, 2H), 1.71-1.49 (m, 4H), 1.38 (d, J=6.6 Hz, 3H), 1.18 (s, 3H). LCMS: C₂₂H₂₇NO₃として計算；計算値: 353; 実測値: 354 (M+H)⁺. (S,S)-異性体: ¹H NMR (CD₃OD) δ 7.41-7.30 (m, 5H), 7.20-7.14 (m, 3H), 7.06-7.00 (m, 2H), 5.85 (q, J=6.6 Hz, 1H), 4.06 (s, 1H), 2.70-2.60 (m, 1H), 2.51 (dt, J=6.6, 3.3 Hz, 1H), 2.44-2.31 (m, 2H), 1.75-1.65 (m, 1H), 1.65-1.54 (m, 3H), 1.50 (d, J=6.8 Hz, 3H), 1.20 (s, 3H). LCMS: C₂₂H₂₇NO₃として計算；計算値: 353; 実測値: 354 (M+H)⁺.

工程3: (R)-2-(4-ヒドロキシ-4-メチルピペリジン-1-イル)-2-フェニル酢酸: (S)-1-フェニルエチル(R)-2-(4-ヒドロキシ-4-メチルピペリジン-1-イル)-2-フェニルアセテート(0.185 g, 0.52 mmol)／ジクロロメタン(3 mL)溶液に、トリフルオロ酢酸(1 mL)を添加し、該混合液を室温で2時間撹拌した。続いて、揮発物を減圧除去し、該残渣を逆相プレパラティブHPLC(Primesphere C-18, 20 x 100mm; CH₃CN-H₂O-0.1％ TFA)により精製して、表題の化合物(TFA塩として)を淡い青みがかった固形物として得た(0,128 g, 98％)。 LCMS: C₁₄H₁₉NO₃として計算；計算値: 249; 実測値: 250 (M+H)⁺.

Cap-16

工程1: (S)-1-フェニルエチル 2-(2-フルオロフェニル)アセテート: CH₂Cl₂(100 mL)中の2-フルオロフェニル酢酸(5.45 g, 35.4 mmol)、(S)-1-フェニルエタノール(5.62 g, 46.0 mmol)、EDCI(8.82 g, 46.0 mmol)およびDMAP(0.561 g, 4.60 mmol)の混合液を、室温で12時間撹拌した。次いで、該溶媒を濃縮し、該残渣をH₂O-酢酸エチルで分配した。 相を分離し、該水層を酢酸エチル(2x)で逆抽出した。有機相を合わせて洗浄し(H₂O、食塩水)、乾燥させ(Na₂SO₄)、濾過し、減圧濃縮した。該残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(Biotage/ 0-20％ 酢酸エチル-ヘキサン)により精製して、表題の化合物を無色の油状物として得た(8.38 g, 92％)。 ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.32-7.23 (m, 7H), 7.10-7.04 (m, 2), 5.85 (q, J=6.5 Hz, 1H), 3.71 (s, 2H), 1.48 (d, J=6.5 Hz, 3H).

工程2: (R)-((S)-1-フェニルエチル)2-(2-フルオロフェニル)-2-(ピペリジン-1-イル)アセテート: (S)-1-フェニルエチル 2-(2-フルオロフェニル)アセテート(5.00 g, 19.4 mmol)／THF(1200 mL)溶液に、0℃で、DBU(6.19 g, 40.7 mmol)を添加し、該溶液を30分間撹拌しながら室温に昇温させた。次いで、該溶液を-78℃に冷却し、CBr₄(13.5 g, 40.7 mmol)／THF(100 mL)溶液を添加し、該混合液を-10℃に昇温させて、この温度で2時間撹拌した。該反応混合液を飽和NH₄Cl水溶液でクエンチし、層を分離した。該水層を酢酸エチル(2x)で逆抽出し、有機相を合わせて洗浄し(H₂O、食塩水)、乾燥させ(Na₂SO₄)、濾過し、減圧濃縮した。該残渣にピペリジン(5.73 mL, 58.1 mmol)を添加し、該溶液を室温で24時間撹拌した。次いで、揮発物を減圧濃縮し、該残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(Biotage/ 0-30％ ジエチルエーテル-ヘキサン)により精製して、未反応の出発物質(2.53 g, 51％)とともに、ジアステレオマーの純粋な混合物(¹H NMRにより、2:1の比)を黄色の油状物として得た(2.07 g, 31％)。該ジアステレオマー混合物(Biotage/ 0-10％ ジエチルエーテル-トルエン)をさらにクロマトグラフィーで処理して、表題の化合物を無色の油状物として得た(0.737 g, 11％)。 ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.52 (ddd, J=9.4, 7.6, 1.8 Hz, 1H), 7.33 - 7.40 (m, 1), 7.23 - 7.23 (m, 4H), 7.02 - 7.23 (m, 4H), 5.86 (q, J=6.6 Hz, 1H), 4.45 (s, 1H), 2.39 - 2.45 (m, 4H), 1.52 - 1.58 (m, 4H), 1.40 - 1.42 (m, 1H), 1.38 (d, J=6.6 Hz, 3H). LCMS: C₂₁H₂₄FNO₂として計算；計算値: 341; 実測値: 342 (M+H)⁺.

工程3: (R)-2-(2-フルオロフェニル)-2-(ピペリジン-1-イル)酢酸: エタノール(30 mL)中の(R)-((S)-1-フェニルエチル)2-(2-フルオロフェニル)-2-(ピペリジン-1-イル)アセテート(0.737 g, 2.16 mmol)および20％ Pd(OH)₂/C(0.070 g)の混合液を、室温および大気圧(H₂バルーン)で2時間、水素化した。次いで、該溶液をArでパージし、珪藻土(セライト（登録商標))により濾過し、減圧濃縮した。これにより、表題の化合物を無色の固形物として得た(0.503 g, 98％)。 ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.65 (ddd, J=9.1, 7.6, 1.5 Hz, 1H), 7.47-7.53 (m, 1H), 7.21-7.30 (m, 2H), 3.07-3.13 (m, 4H), 1.84 (ブロードのs, 4H), 1.62 (ブロードのs, 2H). LCMS: C₁₃H₁₆FNO₂として計算；計算値: 237; 実測値: 238 (M+H)⁺.

Cap-17

工程1: (S)-1-フェニルエチル(R)-2-(4-ヒドロキシ-4-フェニルピペリジン-1-イル)-2-フェニルアセテート: (S)-1-フェニルエチル 2-ブロモ-2-フェニルアセテート(1.50 g, 4.70 mmol)／THF(25 mL)溶液に、トリエチルアミン(1.31 mL, 9.42 mmol)を添加し、続いてテトラブチルアンモニウムヨージド(0.347 g, 0.94 mmol)を添加した。該反応混合液を室温で5分間撹拌した後、4-フェニル-4-ヒドロキシピペリジン(1.00 g, 5.64 mmol)／THF(5 mL)溶液を添加した。該混合液を16時間撹拌した後、酢酸エチル(100 mL)で希釈し、洗浄し(H₂O x2、食塩水)、乾燥させ(MgSO₄)、濾過および濃縮した。該残渣をシリカゲルカラム(0-60％ 酢酸エチル-ヘキサン)で精製して、¹H NMRによる判定として約2:1のジアステレオマーの混合物を得た。超臨界流体クロマトグラフィー(Chiralcel OJ-H, 30 x 250mm; 35℃で、20％エタノール／CO₂)を用いてこれらの異性体の分離を行い、まず第一に表題の化合物の(R)-異性体(0.534 g, 27％)を黄色の油状物として得て、次に対応する(S)-異性体(0.271 g, 14％)もまた黄色の油状物として得た。(S,R)-異性体: ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.55-7.47 (m, 4H), 7.44-7.25 (m, 10H), 7.25-7.17 (m, 1H), 5.88 (q, J=6.6 Hz, 1H), 4.12 (s, 1H), 2.82-2.72 (m, 1H), 2.64 (dt, J=11.1, 2.5 Hz, 1H), 2.58-2.52 (m, 1H), 2.40 (dt, J=11.1, 2.5 Hz, 1H), 2.20 (dt, J=12.1, 4.6 Hz, 1H), 2.10 (dt, J=12.1, 4.6 Hz, 1H), 1.72-1.57 (m, 2H), 1.53 (d, J=6.5 Hz, 3H). LCMS: C₂₇H₂₉NO₃として計算；計算値: 415; 実測値: 416 (M+H)⁺; (S,S)-異性体: H¹NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.55-7.48 (m, 2H), 7.45-7.39 (m, 2H), 7.38-7.30 (m, 5H), 7.25-7.13 (m, 4H), 7.08-7.00 (m, 2H), 5.88 (q, J=6.6 Hz, 1H), 4.12 (s, 1H), 2.95-2.85 (m, 1H), 2.68 (dt, J=11.1, 2.5 Hz, 1H), 2.57-2.52 (m, 1H), 2.42 (dt, J=11.1, 2.5 Hz, 1H), 2.25 (dt, J=12.1, 4.6 Hz, 1H), 2.12 (dt, J=12.1, 4.6 Hz, 1H), 1.73 (dd, J=13.6, 3.0 Hz, 1H), 1.64 (dd, J=13.6, 3.0 Hz, 1H), 1.40 (d, J=6.6 Hz, 3H). LCMS: C₂₇H₂₉NO₃として計算；計算値: 415; 実測値: 416 (M+H)⁺.

以下のエステルを同様の方法で製造した。

保持時間決定用キラルSFC条件
条件I
カラム: Chiralpak AD-H カラム, 4.62x50 mm, 5μm
溶媒: 0.1％DEAを含む90％CO₂-10％メタノール
温度: 35℃
圧力: 150バール
流速: 2.0 mL/分
220 nmでUV測定
注入: 1.0 mg/3mL メタノール
条件II
カラム: Chiralcel OD-H カラム, 4.62x50 mm, 5μm
溶媒: 0.1％DEAを含む90％CO₂-10％メタノール
温度: 35℃
圧力: 150バール
流速: 2.0 mL/分
220 nmでUV測定
注入: 1.0 mg/mLメタノール

Cap 17、工程2; (R)-2-(4-ヒドロキシ-4-フェニルピペリジン-1-イル)-2-フェニル酢酸: (S)-1-フェニルエチル(R)-2-(4-ヒドロキシ-4-フェニルピペリジン-1-イル)-2-フェニルアセテート(0.350 g, 0.84 mmol)／ジクロロメタン(5 mL)溶液にトリフルオロ酢酸(1 mL)を添加し、該混合液を室温で2時間撹拌した。続いて、揮発物を減圧除去し、該残渣を逆相プレパラティブHPLC(Primesphere C-18, 20 x 100mm; CH₃CN-H₂O-0.1％ TFA)により精製して、表題の化合物(TFA塩として)を白色の固形物として得た(0.230 g, 88％)。 LCMS: C₁₉H₂₁NO₃として計算；計算値: 311.15; 実測値: 312 (M+H)⁺.

同様の方法で、以下のカルボン酸を光学的に純粋な形態で製造した。

保持時間決定用LCMS条件
条件I
カラム: Phenomenex-Luna 4.6 X 50 mm S10
開始％ B=0
最終％ B=100
グラジエント時間=4 分
流速=4 mL/分
波長=220
溶媒A=10％メタノール - 90％H₂O - 0.1％TFA
溶媒B=90％メタノール - 10％H₂O - 0.1％TFA
条件II
カラム: Waters-Sunfire 4.6 X 50 mm S5
開始％ B=0
最終％ B=100
グラジエント時間=2 分
流速=4 mL/分
波長=220
溶媒A=10％メタノール - 90％H₂O - 0.1％TFA
溶媒B=90％メタノール - 10％H₂O - 0.1％TFA
条件III
カラム: Phenomenex 10μ 3.0 X 50 mm
開始％ B=0
最終％ B=100
グラジエント時間=2 分
流速=4 mL/分
波長=220
溶媒A=10％メタノール - 90％H₂O - 0.1％TFA
溶媒B=90％メタノール - 10％H₂O - 0.1％TFA

Cap-18

工程1: (R,S)-エチル 2-(4-ピリジル)-2-ブロモアセテート: 4-ピリジル酢酸エチル(1.00 g, 6.05 mmol)／乾燥THF(150 mL)溶液に、アルゴン下において0℃で、DBU(0.99 mL, 6.66 mmol)を添加した。該反応混合液を30分かけて室温に昇温させた後、-78℃に冷却した。この混合液にCBr₄(2.21 g, 6.66 mmol)を添加し、-78℃で2時間撹拌を続けた。 次いで、該反応混合液を飽和NH₄Cl水溶液でクエンチし、相を分離した。該有機相を洗浄し(食塩水)、乾燥させ(Na₂SO₄)、濾過し、減圧濃縮した。得られた黄色の油状物をすぐにフラッシュクロマトグラフィー(SiO₂/ヘキサン-酢酸エチル, 1:1)により精製して、表題の化合物(1.40 g, 95％)をやや不安定な黄色の油状物として得た。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.62 (dd, J=4.6, 1.8 Hz, 2H), 7.45 (dd, J=4.6, 1.8 Hz, 2H), 5.24 (s, 1H), 4.21-4.29 (m, 2H), 1.28 (t, J=7.1 Hz, 3H). LCMS: C₉H₁₀BrNO₂として計算；計算値: 242, 244; 実測値: 243, 245 (M+H)⁺.

工程2; (R,S)-エチル 2-(4-ピリジル)-2-(N,N-ジメチルアミノ)アセテート: (R,S)-エチル 2-(4-ピリジル)-2-ブロモアセテート(1.40 g, 8.48 mmol)／DMF(10 mL)溶液に、室温で、ジメチルアミン(2M／THF, 8.5 mL, 17.0 mmol)を添加した。反応の完了後(薄層クロマトグラフィーによる判定として)、揮発物を減圧除去し、該残渣をフラッシュクロマトグラフィー(Biotage, 40+M SiO₂ カラム; 50％-100％ 酢酸エチル-ヘキサン)により精製して、表題の化合物(0.539 g, 31％)を淡黄色の油状物として得た。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.58 (d, J=6.0 Hz, 2H), 7.36 (d, J=6.0 Hz, 2H), 4.17 (m, 2H), 3.92 (s, 1H), 2.27 (s, 6H), 1.22 (t, J=7.0 Hz). LCMS: C₁₁H₁₆N₂O₂として計算；計算値: 208; 実測値: 209 (M+H)⁺.

工程3; (R,S)-2-(4-ピリジル)-2-(N,N-ジメチルアミノ)酢酸: THF-メタノール-H₂O (1:1:1, 6 mL)混合液中の(R,S)-エチル 2-(4-ピリジル)-2-(N,N-ジメチルアミノ)アセテート(0.200 g, 0.960 mmol)溶液に、粉末のLiOH(0.120 g, 4.99 mmol)を室温で添加した。該溶液を3時間撹拌した後、1N HClを用いてpH6に酸性化した。該水相を酢酸エチルで洗浄し、その後凍結乾燥させて表題の化合物の二塩酸塩を黄色の固形物として得た(LiCl含有)。該生成物をそのまま、その後の工程に用いた。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.49 (d, J=5.7 Hz, 2H), 7.34 (d, J=5.7 Hz, 2H), 3.56 (s, 1H), 2.21 (s, 6H).

以下の実施例を、上記のメソッドを用いて同様の方法で製造した。

Cap-37

工程1: (R,S)-エチル 2-(キノリン-3-イル)-2-(N,N-ジメチルアミノ)-アセテート: N,N-ジメチルアミノ酢酸エチル(0.462 g, 3.54 mmol)、K₃PO₄(1.90 g, 8.95 mmol)、Pd(t-Bu₃P)₂(0.090 g, 0.176 mmol)およびトルエン(10 mL)の混合液を、Ar気流バブルにより15分間脱気した。次いで、該反応混合液を100℃で12時間加熱し、その後室温に冷却してH₂Oに注ぎ入れた。該混合液を酢酸エチル(2x)で抽出し、有機相を合わせて洗浄し(H₂O、食塩水)、乾燥させ(Na₂SO₄)、濾過し、減圧濃縮した。該残渣をまず逆相プレパラティブHPLC(Primesphere C-18, 30 x 100mm; CH₃CN-H₂O-5 mM NH₄OAc)により精製し、次いでフラッシュクロマトグラフィー(SiO₂/ヘキサン-酢酸エチル, 1:1)により精製して、表題の化合物(0.128 g, 17％)をオレンジ色の油状物として得た。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.90 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.32 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.03-8.01 (m, 2H), 7.77 (ddd, J=8.3, 6.8, 1.5 Hz, 1H), 7.62 (ddd, J=8.3, 6.8, 1.5 Hz, 1H), 4.35 (s, 1H), 4.13 (m, 2H), 2.22 (s, 6H), 1.15 (t, J=7.0 Hz, 3H). LCMS: C₁₅H₁₈N₂O₂として計算；計算値: 258; 実測値: 259 (M+H)⁺.

工程2; (R,S) 2-(キノリン-3-イル)-2-(N,N-ジメチルアミノ)酢酸: (R,S)-エチル 2-(キノリン-3-イル)-2-(N,N-ジメチルアミノ)アセテート(0.122 g, 0.472 mmol)および6M HCl(3 mL)の混合液を、100℃で12時間加熱した。該溶媒を減圧除去して、表題の化合物の二塩酸塩(0.169 g, ＞100％)を淡黄色の泡状物質として得た。該未精製の物質をさらなる精製は行わずにその後の工程に用いた。LCMS: C₁₃H₁₄N₂O₂として計算；計算値: 230; 実測値: 231 (M+H)⁺.

Cap-38

工程1: (R)-((S)-1-フェニルエチル)2-(ジメチルアミノ)-2-(2-フルオロフェニル)酢酸および(S)-((S)-1-フェニルエチル)2-(ジメチルアミノ)-2-(2-フルオロフェニル)酢酸: CH₂Cl₂(40 mL)中の(RS)-2-(ジメチルアミノ)-2-(2-フルオロフェニル)酢酸(2.60 g, 13.19 mmol)、DMAP(0.209 g, 1.71 mmol)および(S)-1-フェニルエタノール(2.09 g, 17.15 mmol)の混合液にEDCI(3.29 g, 17.15 mmol)を添加し、該混合液を室温で12時間撹拌した。その後、該溶媒を減圧除去し、該残渣を酢酸エチル-H₂Oで分配した。層を分離し、該水層を酢酸エチル(2x)で逆抽出し、有機相を合わせて洗浄し(H₂O、食塩水)、乾燥させ(Na₂SO₄)、濾過し、減圧濃縮した。該残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(Biotage/ 0-50％ ジエチルエーテル-ヘキサン)により精製した。得られた純粋なジアステレオマー混合物を、次いで、逆相プレパラティブHPLC(Primesphere C-18, 30 x 100mm; CH₃CN-H₂O-0.1％ TFA)により分離し、まず第一に(S)-1-フェネチル(R)-2-(ジメチルアミノ)-2-(2-フルオロフェニル)アセテート(0.501 g, 13％)、次に(S)-1-フェネチル(S)-2-(ジメチルアミノ)-2-(2-フルオロフェニル)-アセテート(0.727 g. 18％)を、両者ともそれらのTFA塩として得た。(S,R)-異性体: ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.65-7.70 (m, 1H), 7.55-7.60 (ddd, J=9.4, 8.1, 1.5 Hz, 1H), 7.36-7.41 (m, 2H), 7.28-7.34 (m, 5H), 6.04 (q, J=6.5 Hz, 1H), 5.60 (s, 1H), 2.84 (s, 6H), 1.43 (d, J=6.5 Hz, 3H). LCMS: C₁₈H₂₀FNO₂として計算；計算値: 301; 実測値: 302 (M+H)⁺; (S,S)-異性体: ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.58-7.63 (m, 1H), 7.18-7.31 (m, 6H), 7.00 (dd, J=8.5, 1.5 Hz, 2H), 6.02 (q, J=6.5 Hz, 1H), 5.60 (s, 1H), 2.88 (s, 6H), 1.54 (d, J=6.5 Hz, 3H). LCMS: C₁₈H₂₀FNO₂として計算；計算値: 301; 実測値: 302 (M+H)⁺.

工程2; (R)-2-(ジメチルアミノ)-2-(2-フルオロフェニル)酢酸: エタノール(30 mL)中の(R)-((S)-1-フェニルエチル)2-(ジメチルアミノ)-2-(2-フルオロフェニル)アセテートTFA塩(1.25 g, 3.01 mmol)および20％ Pd(OH)₂/C(0.125 g)の混合液を、室温および大気圧(H₂バルーン)で4時間水素化した。次いで、該溶液をArでパージし、珪藻土(セライト（登録商標))により濾過し、減圧濃縮した。これにより表題の化合物を無色の固形物として得た(0.503 g, 98％)。 ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.53-7.63 (m, 2H), 7.33-7.38 (m, 2H), 5.36 (s, 1H), 2.86 (s, 6H). LCMS: C₁₀H₁₂FNO₂として計算；計算値: 197; 実測値: 198 (M+H)⁺.

該S-異性体は、同様の方法で、(S)-((S)-1-フェニルエチル)2-(ジメチルアミノ)-2-(2-フルオロフェニル)アセテートTFA塩から得られた。

Cap-39

(R)-(2-クロロフェニル)グリシン(0.300 g, 1.62 mmol)、ホルムアルデヒド(35％水溶液, 0.80 mL, 3.23 mmol)および20％ Pd(OH)₂/C(0.050 g)の混合液を室温および大気圧(H₂バルーン)で4時間水素化した。次いで、該溶液をArでパージし、珪藻土(セライト（登録商標）)により濾過して、減圧濃縮した。該残渣を逆相プレパラティブHPLC(Primesphere C-18, 30 x 100mm; CH₃CN-H₂O-0.1％ TFA)により精製して、表題の化合物(R)-2-(ジメチルアミノ)-2-(2-クロロフェニル)酢酸のTFA塩を無色の油状物として得た(0.290 g, 55％)。 ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.59-7.65 (m, 2H), 7.45-7.53 (m, 2H), 5.40 (s, 1H), 2.87 (s, 6H). LCMS: として計算；計算値 C₁₀H₁₂ClNO₂: 213; 実測値: 214 (M+H)⁺.

Cap-40

氷冷したH₂O(5.5 mL)中の(R)-(2-クロロフェニル)グリシン(1.00 g, 5.38 mmol)およびNaOH(0.862 g, 21.6 mmol)の溶液に、クロロギ酸メチル(1.00 mL, 13.5 mmol)を滴下した。該混合液を0℃で1時間撹拌した後、濃HCl(2.5 mL)の添加により酸性化した。該混合液を酢酸エチル(2x)で抽出し、有機相を合わせて洗浄し(H₂O、食塩水)、乾燥させ(Na₂SO₄)、濾過し、減圧濃縮して表題の化合物(R)-2-(メトキシカルボニルアミノ)-2-(2-クロロフェニル)酢酸を黄-オレンジ色の泡状物質として得た(1.31 g, 96％)。 ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.39 - 7.43 (m, 2H), 7.29 - 7.31 (m, 2H), 5.69 (s, 1H), 3.65 (s, 3H). LCMS: C₁₀H₁₀ClNO₄として計算；計算値: 243; 実測値: 244 (M+H)⁺.

Cap-41

2-(2-(クロロメチル)フェニル)酢酸(2.00 g, 10.8 mmol)／THF(20 mL)懸濁液にモルホリン(1.89 g, 21.7 mmol)を添加し、該溶液を室温で3時間撹拌した。次いで、該反応混合液を酢酸エチルで希釈し、H₂O(2x)で抽出した。該水相を凍結乾燥させて、該残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(Biotage/ 0-10％ メタノール-CH₂Cl₂)により精製して、表題の化合物2-(2-(モルホリノメチル)フェニル)酢酸を無色の固形物として得た(2.22 g, 87％)。 ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.37-7.44 (m, 3H), 7.29-7.33 (m, 1H), 4.24 (s, 2H), 3.83 (ブロードのs, 4H), 3.68 (s, 2H), 3.14 (ブロードのs, 4H). LCMS: C₁₃H₁₇NO₃として計算；計算値: 235; 実測値: 236 (M+H)⁺.

以下の実施例をCap-41に記載の方法を用いて同様に製造した。

Cap-45a

HMDS(1.85 mL, 8.77 mmol)を(R)-2-アミノ-2-フェニル酢酸 p-トルエンスルホネート(2.83 g, 8.77 mmol)／CH₂Cl₂(10 mL)懸濁液に添加し、該混合液を室温で30分間撹拌した。メチルイソシアナート(0.5 g, 8.77 mmol)を一度に添加し、30分間撹拌を続けた。該反応液をH₂O(5 mL)の添加によりクエンチし、得られた沈殿物を濾過し、H₂Oおよびn-ヘキサンで洗浄し、減圧乾燥させた。(R)-2-(3-メチルウレイド)-2-フェニル酢酸(1.5 g; 82 ％)を白色の固形物として回収し、さらなる精製は行わずに用いた。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.54 (d, J=4.88 Hz, 3H) 5.17 (d, J=7.93 Hz, 1H) 5.95 (q, J=4.48 Hz, 1H) 6.66 (d, J=7.93 Hz, 1H) 7.26-7.38 (m, 5H) 12.67 (s, 1H). LCMS: C₁₀H₁₂N₂O₃として計算；計算値 208.08 実測値 209.121 (M+H)⁺; HPLC Phenomenex C-18 3.0 × 46 mm, 2分かけて0から100％B, ホールド時間1分, A=90％水, 10％メタノール, 0.1％TFA, B=10％水, 90％メタノール, 0.1％TFA, 保持時間=1.38分, 90％ 均一性指数.

Cap-46

Cap-45aに記載の方法に従って目的の生成物を製造した。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.96 (t, J=7.17 Hz, 3H) 2.94-3.05 (m, 2H) 5.17 (d, J=7.93 Hz, 1H) 6.05 (t, J=5.19 Hz, 1H) 6.60 (d, J=7.63 Hz, 1H) 7.26-7.38 (m, 5H) 12.68 (s, 1H). LCMS: C₁₁H₁₄N₂O₃として計算；計算値 222.10 実測値 223.15 (M+H)⁺. HPLC XTERRA C-18 3.0 × 506 mm, 2分かけて0から100％B, ホールド時間1分, A=90％水, 10％メタノール, 0.2％ H₃PO₄, B=10％水, 90％メタノール, 0.2％ H₃PO₄, 保持時間=0.87分, 90％ 均一性指数.

Cap-47

工程1: (R)-tert-ブチル 2-(3,3-ジメチルウレイド)-2-フェニルアセテート: 撹拌した、DMF(40 mL)中の(R)-tert-ブチル-2-アミノ-2-フェニルアセテート(1.0 g, 4.10 mmol)およびヒューニッヒ塩基（Hunig's base）(1.79 mL, 10.25 mmol)の溶液に、ジメチルカルバモイルクロリド(0.38 mL, 4.18 mmol)を10分かけて滴下した。室温で3時間撹拌した後、該反応液を減圧下で濃縮し、得られた残渣を酢酸エチルに溶解させた。該有機層をH₂O、1N HCl水溶液および食塩水で洗浄し、乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、減圧下で濃縮した。(R)-tert-ブチル 2-(3,3-ジメチルウレイド)-2-フェニルアセテートを白色の固形物として得て(0.86 g; 75％)、さらなる精製は行わずに用いた。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.33 (s, 9H) 2.82 (s, 6H) 5.17 (d, J=7.63 Hz, 1H) 6.55 (d, J=7.32 Hz, 1H) 7.24-7.41 (m, 5H). LCMS: C₁₅H₂₂N₂O₃として計算；計算値 278.16 実測値 279.23 (M+H)⁺; HPLC Phenomenex LUNA C-18 4.6 × 50 mm, 4分かけて0から100％B, ホールド時間1分, A=90％水, 10％メタノール, 0.1％ TFA, B=10％水, 90％メタノール, 0.1％ TFA, 保持時間=2.26 分, 97％ 均一性指数.

工程2; (R)-2-(3,3-ジメチルウレイド)-2-フェニル酢酸: 撹拌した(R)-tert-ブチル 2-(3,3-ジメチルウレイド)-2-フェニルアセテート(0.86 g, 3.10 mmol)／CH₂Cl₂(250 mL)溶液に、TFA(15 mL)を滴下し、得られた溶液を室温で3時間撹拌した。その後、目的の化合物をEtOAC:ヘキサン(5:20)の混合液により溶液から沈降させ、濾過して取り、減圧下で乾燥させた。(R)-2-(3,3-ジメチルウレイド)-2-フェニル酢酸を白色の固形物として単離し(0.59g, 86％)、さらなる精製は行わずに用いた。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.82 (s, 6H) 5.22 (d, J=7.32 Hz, 1H) 6.58 (d, J=7.32 Hz, 1H) 7.28 (t, J=7.17 Hz, 1H) 7.33 (t, J=7.32 Hz, 2H) 7.38-7.43 (m, 2H) 12.65 (s, 1H). LCMS: C₁₁H₁₄N₂O₃として計算；計算値: 222.24; 実測値: 223.21 (M+H)⁺. HPLC XTERRA C-18 3.0 × 50 mm, 2分かけて0から100％B, ホールド時間1分, A=90％水, 10％メタノール, 0.2％ H₃PO₄, B=10％水, 90％メタノール, 0.2％ H₃PO₄, 保持時間=0.75 分, 93％ 均一性指数.

Cap-48

工程1: (R)-tert-ブチル 2-(3-シクロペンチルウレイド)-2-フェニルアセテート: 撹拌した、DMF(15 mL)中の(R)-2-アミノ-2-フェニル酢酸塩酸塩(1.0 g, 4.10 mmol)およびヒューニッヒ塩基(1.0 mL, 6.15 mmol)の溶液に、イソシアン酸シクロペンチル(0.46 mL, 4.10 mmol)を10分かけて滴下した。室温で3時間撹拌した後、該反応液を減圧下で濃縮し、得られた残基を酢酸エチルに溶解させた。該有機層をH₂Oおよび食塩水で洗浄し、乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、減圧下で濃縮した。(R)-tert-ブチル 2-(3-シクロペンチルウレイド)-2-フェニルアセテートを不透明な油状物として得て(1.32 g; 100 ％)、さらなる精製は行わずに用いた。 ¹H NMR (500 MHz, CD₃Cl-D) δ ppm 1.50-1.57 (m, 2H) 1.58-1.66 (m, 2H) 1.87-1.97 (m, 2H) 3.89-3.98 (m, 1H) 5.37 (s, 1H) 7.26-7.38 (m, 5H). LCMS: C₁₈H₂₆N₂O₃として計算；計算値 318.19 実測値 319.21 (M+H)⁺; HPLC XTERRA C-18 3.0 × 50 mm, 4分かけて0から100％B, ホールド時間1分, A=90％水, 10％メタノール, 0.1％ TFA, B=10％水, 90％メタノール, 0.1％ TFA, 保持時間=2.82 分, 96％ 均一性指数.

工程2; (R)-2-(3-シクロペンチルウレイド)-2-フェニル酢酸: 撹拌した(R)-tert-ブチル 2-(3-シクロペンチルウレイド)-2-フェニルアセテート(1.31 g, 4.10 mmol)／CH₂Cl₂(25 mL)溶液に、TFA(4 mL)およびトリエチルシラン(1.64 mL; 10.3 mmol)を滴下し、得られた溶液を室温で6時間撹拌した。揮発性成分を減圧下で除去し、該粗生成物を酢酸エチル/ペンタン中で再結晶化させて、(R)-2-(3-シクロペンチルウレイド)-2-フェニル酢酸を白色の固形物として得た(0.69 g, 64％)。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.17-1.35 (m, 2H) 1.42-1.52 (m, 2H) 1.53-1.64 (m, 2H) 1.67-1.80 (m, 2H) 3.75-3.89 (m, 1H) 5.17 (d, J=7.93 Hz, 1H) 6.12 (d, J=7.32 Hz, 1H) 6.48 (d, J=7.93 Hz, 1H) 7.24-7.40 (m, 5H) 12.73 (s, 1H). LCMS: C₁₄H₁₈N₂O₃として計算；計算値: 262.31; 実測値: 263.15 (M+H)⁺. HPLC XTERRA C-18 3.0 × 50 mm, 2分かけて0から100％B, ホールド時間1分, A=90％水, 10％メタノール, 0.2％ H₃PO₄, B=10％水, 90％メタノール, 0.2％ H₃PO₄, 保持時間=1.24 分, 100％ 均一性指数.

Cap-49

撹拌した2-(ベンジルアミノ)酢酸(2.0 g, 12.1 mmol)／ギ酸(91 mL)溶液に、ホルムアルデヒド(6.94 mL, 93.2 mmol)を添加した。70℃で5時間後、該反応混合液を減圧下で20 mLに濃縮し、白色の固形物を沈殿させた。濾過の後、該母液を集めて、さらに減圧下で濃縮して粗生成物を得た。逆相プレパラティブHPLC(Xterra 30 X 100 mm, 220 nmで検出, 流速35 mL/分, 8分かけて0から35％B; A= 90％水, 10％メタノール, 0.1％TFA, B=10％水, 90％メタノール, 0.1％TFA)により精製して、TFA塩としての表題の化合物2-(ベンジル(メチル)-アミノ)酢酸(723 mg, 33％)を無色のろう状物質として得た。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.75 (s, 3H) 4.04 (s, 2H) 4.34 (s, 2H) 7.29-7.68 (m, 5H). LCMS: C₁₀H₁₃NO₂として計算；計算値: 179.09; 実測値: 180.20 (M+H)⁺.

Cap-50

撹拌した3-メチル-2-(メチルアミノ)ブタン酸(0.50 g, 3.81 mmol)／水(30 mL)溶液に、K₂CO₃(2.63 g, 19.1 mmol)および塩化ベンジル(1.32 g, 11.4 mmol)を添加した。該反応混合液を周囲温度で18時間撹拌した。該反応混合液を酢酸エチル(30 mL x 2)で抽出し、該水層を減圧下で濃縮して粗生成物を得て、逆相プレパラティブHPLC(Xterra 30 x 100mm, 220 nmで検出, 流速40 mL/分, 6分かけて20から80％B; A= 90％水, 10％メタノール, 0.1％TFA, B=10％水, 90％メタノール, 0.1％TFA)により精製して、2-(ベンジル(メチル)アミノ)-3-メチルブタン酸, TFA塩(126 mg, 19％)を無色のろう状物質として得た。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.98 (d, 3H) 1.07 (d, 3H) 2.33-2.48 (m, 1H) 2.54-2.78 (m, 3H) 3.69 (s, 1H) 4.24 (s, 2H) 7.29-7.65 (m, 5H). LCMS: C₁₃H₁₉NO₂として計算；計算値: 221.14; 実測値: 222.28 (M+H)⁺.

Cap-51

Na₂CO₃(1.83g, 17.2 mmol)をL-バリン(3.9 g, 33.29 mmol)のNaOH(33 mLの1M/H₂O, 33 mmol)溶液に添加し、得られた溶液を氷-水浴で冷却した。クロロギ酸メチル(2.8 mL, 36.1 mmol)を15分かけて滴下し、該冷却浴を取り外して、該反応混合液を周囲温度で3.25時間撹拌した。該反応混合液をエーテル(50 mL, 3x)で洗浄し、該水相を氷-水浴で冷却して濃HClでpH1-2の範囲に酸性化し、CH₂Cl₂(50 mL, 3x)で抽出した。該有機相を乾燥させ(MgSO₄)て減圧でエバポレートし、Cap-51を白色の固形物として得た(6 g)。主要な回転異性体についての¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5 ppm, 500 MHz): 12.54 (s, 1H), 7.33 (d, J=8.6, 1H), 3.84 (dd, J=8.4, 6.0, 1H), 3.54 (s, 3H), 2.03 (m, 1H), 0.87 (m, 6H). HRMS: [M+H]⁺ C₇H₁₄NO₄として計算；計算値: 176.0923; 実測値 176.0922.

Cap-52 (Cap-12と同一)

Cap-52は、Cap-51の合成について記載した方法に従って、L-アラニンから合成した。 キャラクタライズを目的として、粗物質の一部を逆相HPLC(H₂O/メタノール/TFA)により精製して、Cap-52を無色の粘稠性の油状物として得た。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ=2.5 ppm, 500 MHz): 12.49 (ブロードのs, 1H), 7.43 (d, J=7.3, 0.88H), 7.09 (見かけ上のブロードのs, 0.12H), 3.97 (m, 1H), 3.53 (s, 3H), 1.25 (d, J=7.3, 3H).

Cap-53から-64は、Cap-51の合成に記載した方法に従って、もしあれば記載の改変法を用いて、適当な出発物質から製造した。

Cap-65

冷却(氷-水)した、Na₂CO₃(0.449 g, 4.23 mmol)、NaOH(8.2 mLの1M/H₂O, 8.2 mmol)および(S)-2-アミノ-3-ヒドロキシ-3-メチルブタン酸(1.04 g, 7.81 mmol)の混合液に、クロロギ酸メチル(0.65 mL, 8.39 mmol)を5分かけて滴下した。該反応混合液を45分間撹拌した後、該冷却浴を取り外し、さらに3.75時間撹拌を続けた。該反応混合液をCH₂Cl₂で洗浄し、該水相を氷-水浴で冷却して濃HClでpH1-2の範囲に酸性化した。該揮発性成分を減圧除去して、該残渣をMeOH/CH₂Cl₂の2:1混合液(15 mL)に溶解させて濾過し、該濾液をロータリーエバポレーターで処理して（rotervaped）、Cap-65を白色の半-粘稠性の泡状物質として得た(1.236 g)。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz): δ 6.94 (d, J = 8.5, 0.9 H), 6.53 (ブロードのs, 0.1H), 3.89 (d, J = 8.8, 1H), 2.94 (s, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.13 (s, 3H).

Cap-66および-67は、Cap-65の合成に記載した方法を用いて、適当な市販の出発物質から製造した。
Cap-66

¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz): δ 12.58 (ブロードのs, 1H), 7.07 (d, J = 8.3, 0.13H), 6.81 (d, J = 8.8, 0.67H), 4.10-4.02 (m, 1.15H), 3.91 (dd, J = 9.1, 3.5, 0.85H), 3.56 (s, 3H), 1.09 (d, J = 6.2, 3H). [注: NHの主要なシグナルのみを記載した].
Cap-67

¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz): 12.51 (ブロードのs, 1H), 7.25 (d, J = 8.4, 0.75H), 7.12 (ブロードのd, J = 0.4, 0.05H), 6.86 (ブロードのs, 0.08H), 3.95-3.85 (m, 2H), 3.54 (s, 3H), 1.08 (d, J = 6.3, 3H). [注: NHの主要なシグナルのみを記載した].

Cap-68

クロロギ酸メチル(0.38 ml, 4.9 mmol)を、1N NaOH(水溶液)(9.0 ml, 9.0 mmol)、1M NaHCO₃(水溶液)(9.0 ml, 9.0 mol)、L-アスパラギン酸β-ベンジルエステル(1.0 g, 4.5 mmol)およびジオキサン(9 ml)の混合液に滴下した。該反応混合液を周囲条件で3時間撹拌した後、酢酸エチル(50 ml, 3x)で洗浄した。該水層を12N HClでpH〜1-2に酸性化し、酢酸エチル(3 x 50 ml)で抽出した。有機層を合わせて食塩水で洗浄し、乾燥させ(Na₂SO₄)、濾過し、減圧濃縮してCap-68を淡黄色の油状物として得た (1.37g; 量は上記の理論的収量であり、該生成物をさらなる精製は行わずに用いた). ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 500 MHz): δ 12.88 (ブロードのs, 1H), 7.55 (d, J = 8.5, 1H), 7.40-7.32 (m, 5H), 5.13 (d, J = 12.8, 1H), 5.10 (d, J = 12.9, 1H), 4.42-4.38 (m, 1H), 3.55 (s, 3H), 2.87 (dd, J = 16.2, 5.5, 1H), 2.71 (dd, J =16.2, 8.3, 1H). LC (条件 2): 保持時間= 1.90 分; LC/MS: [M+H]⁺ C₁₃H₁₆NO₆として計算；計算値: 282.10; 実測値 282.12.

Cap-69aおよび-69b

冷却した(〜15℃)、アラニン(1.338 g, 15.0 mmol)の水(17 mL)/MeOH(10 mL)溶液に、NaCNBH₃(2.416 g, 36.5 mmol)を何回かに分けて添加した。数分後、アセトアルデヒド(4.0 mL, 71.3 mmol)を4分かけて滴下して、該冷却浴を取り外し、該反応混合液を周囲条件で6時間撹拌した。さらなるアセトアルデヒド(4.0 mL)を添加し、該反応液を2時間撹拌した。該反応混合液に、pHが〜1.5に達するまで濃HClをゆっくりと添加し、得られた混合液を40℃で1時間加熱した。ほとんどの揮発性成分を減圧除去し、該残渣をDowex（登録商標）50WX8-100 イオン交換樹脂(カラムを水洗し、該化合物を18 mlのNH₄OHと282 mlの水を混合して調製した希NH₄OHで溶出した)で精製して、Cap-69(2.0 g)をオフホワイト色の柔らかい吸湿性の固形物として得た。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz): δ 3.44 (q, J = 7.1, 1H), 2.99-2.90 (m, 2H), 2.89-2.80 (m, 2H), 1.23 (d, J = 7.1, 3H), 1.13 (t, J = 7.3, 6H).

Cap-70から-74xは、Cap-69の合成に記載の方法に従って、適当な出発物質を用いることにより製造した。

Cap-75

Cap-75, 工程a

冷却した(氷/水浴)、H-D-Ser-OBzl HCl(2.0 g, 8.6 mmol)の水(25 ml)/メタノール(15 ml)溶液に、NaBH₃CN(1.6 g, 25.5 mmol)を添加した。アセトアルデヒド(1.5 ml, 12.5 mmol)を5分かけて滴下し、該冷却浴を取り外し、該反応混合液を周囲条件で2時間撹拌した。該反応液を12N HClで慎重にクエンチし、減圧濃縮した。該残渣を水に溶解させ、逆相HPLC(MeOH/H₂O/TFA)で精製して、(R)-ベンジル 2-(ジエチルアミノ)-3-ヒドロキシプロパノエートのTFA塩を無色の粘稠性の油状物として得た(1.9g)。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 500 MHz): δ 9.73 (ブロードのs, 1H), 7.52-7.36 (m, 5H), 5.32 (d, J = 12.2, 1H), 5.27 (d, J = 12.5, 1H), 4.54-4.32 (m, 1H), 4.05-3.97 (m, 2H), 3.43-3.21 (m, 4H), 1.23 (t, J = 7.2, 6H). LC/MS (条件 2): 保持時間= 1.38 分; LC/MS: [M+H]⁺ C₁₄H₂₂NO₃として計算；計算値: 252.16; 実測値 252.19.

Cap-75
冷却した(氷-水)、上記で製造したTFA塩(R)-ベンジル 2-(ジエチルアミノ)-3-ヒドロキシプロパノエート(0.3019 g, 0.8264 mmol)のTHF(3.0 mL)溶液に、NaH(0.0727 g, 1.82 mmol, 60％)を添加し、該混合液を15分間撹拌した。ヨウ化メチル(56 μL, 0.90 mmol)を添加し、該浴を周囲条件に緩和しながら18時間撹拌を続けた。該反応液を水でクエンチし、MeOHで予めコンディショニングしたMCX(6 g)カートリッジにロードし、メタノールで洗浄した後、2N NH₃/メタノールで化合物を溶出した。揮発性成分を減圧除去して、(R)-2-(ジエチルアミノ)-3-ヒドロキシプロパン酸が混入したCap-75を、黄色の半-固形物として得た(100 mg)。該生成物をさらなる精製は行わずにそのまま用いた。

Cap-76

冷却した(〜15℃)、(S)-4-アミノ-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)ブタン酸(2.17 g, 9.94 mmol)の水/MeOH(各12 mL)溶液に、NaCNBH₃(1.60 g, 24.2 mmol)を何回かに分けて添加した。数分後、アセトアルデヒド(2.7 mL, 48.1 mmol)を2分かけて滴下し、該冷却浴を取り外し、該反応混合液を周囲条件で3.5時間撹拌した。さらなるアセトアルデヒド(2.7 mL, 48.1 mmol)を添加し、該反応液を20.5時間撹拌した。ほとんどのMeOH成分を減圧除去し、残った混合液をそのpHが〜1.0に達するまで濃HClで処理し、次いで40℃で2時間加熱した。該揮発性成分を減圧除去し、該残渣を4 M HCl/ジオキサン(20 mL)で処理して、周囲条件で7.5時間撹拌した。該揮発性成分を減圧除去し、該残渣をDowex（登録商標）50WX8-100 イオン交換樹脂(カラムを水洗し、18 mlのNH₄OHと282 mlの水から調製した希NH₄OHで化合物を溶出した)で精製して、中間体(S)-2-アミノ-4-(ジエチルアミノ)ブタン酸をオフホワイト色の固形物として得た(1.73 g)。

冷却した(氷-水)、Na₂CO₃(0.243 g, 2.29 mmol)、NaOH(4.6 mLの1M/H₂O, 4.6 mmol)および上記生成物(802.4 mg)の混合液に、クロロギ酸メチル(0.36 mL, 4.65 mmol)を11分かけて滴下した。該反応混合液を55分間撹拌した後、該冷却浴を取り外し、さらに5.25時間撹拌を続けた。該反応混合液を等量の水で希釈し、CH₂Cl₂(30 mL, 2x)で洗浄し、該水相を氷-水浴で冷却して、濃HClでpH2の範囲まで酸性化した。次いで、該揮発性成分を減圧除去し、該粗物質を、MCX樹脂(6.0g;カラムを水洗し、サンプルを2.0 M NH₃/MeOHで溶出した)で遊離-塩基にして、純粋でないCap-76をオフホワイト色の固形物として得た(704 mg)。 ¹H NMR (MeOH-d₄, δ = 3.29 ppm, 400 MHz): δ 3.99 (dd, J = 7.5, 4.7, 1H), 3.62 (s, 3H), 3.25-3.06 (m, 6H), 2.18-2.09 (m, 1H), 2.04-1.96 (m, 1H), 1.28 (t, J = 7.3, 6H). LC/MS: [M+H]⁺ C₁₀H₂₁N₂O₄として計算；計算値: 233.15; 実測値 233.24.

Cap-77aおよび-77b

Cap-7について記載の方法に従って、SN₂置換工程に7-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタンを用いることにより、および以下の条件を用いて中間体2-(7-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-7-イル)-2-フェニル酢酸ベンジルのエナンチオマー分離を達成することにより、Cap-77の合成を行った: 該中間体(303.7 mg)をエタノールに溶解させ、得られた溶液を、キラルHPLCカラム(Chiracel AD-Hカラム, 30 x 250 mm, 5 μm)に注入し、70 mL/分および温度35℃で、90％CO₂-10％EtOHを用いて溶出し、124.5 mgのエナンチオマー-1および133.8 mgのエナンチオマー-2を得た。これらのベンジルエステルをCap-7の製造に従って水素化分解して、Cap-77を得た: ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz): δ 7.55 (m, 2H), 7.38-7.30 (m, 3H), 4.16 (s, 1H), 3.54 (見かけ上のブロードのs, 2H), 2.08-1.88 (m, 4 H), 1.57-1.46 (m, 4H). LC (条件 1): 保持時間= 0.67 分; LC/MS: [M+H]⁺ C₁₄H₁₈NO₂として計算；計算値: 232.13; 実測値 232.18. HRMS: [M+H]⁺ C₁₄H₁₈NO₂として計算；計算値: 232.1338; 実測値 232.1340.

Cap-78

MeOH(10 mL)中の(R)-2-(エチルアミノ)-2-フェニル酢酸のHCl塩(Cap-3の合成における中間体; 0.9923 mg, 4.60 mmol)および(1-エトキシシクロプロポキシ)トリメチルシラン(1.640 g, 9.40 mmol)の混合液に、NaCNBH₃(0.5828 g, 9.27 mmol)を添加し、該半-不均一な混合液を油浴により50℃で20時間加熱した。さらなる(1-エトキシシクロプロポキシ)トリメチルシラン(150 mg, 0.86 mmol)およびNaCNBH₃(52 mg, 0.827 mmol)を添加し、該反応混合液をさらに3.5時間加熱した。その後、周囲温度に冷却して、濃HClを用いて〜pH2の範囲まで酸性化し、該混合液を濾過して該濾液をロータリーエバポレーターで処理した。得られた粗物質をi-PrOH(6 mL)に溶解させ、加熱して溶解を効率よくし、溶解しなかった部分を濾過により除去して、該濾液を減圧濃縮した。得られた粗物質の約1/3を逆相HPLC(H₂O/MeOH/TFA)で精製して、Cap-78のTFA塩を無色の粘稠性の油状物として得た(353 mg)。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz; D₂O交換後): δ 7.56-7.49 (m, 5H), 5.35 (S, 1H), 3.35 (m, 1H), 3.06 (見かけ上のブロードのs, 1H), 2.66 (m, 1H), 1.26 (t, J = 7.3, 3H), 0.92 (m, 1H), 0.83-0.44 (m, 3H). LC (条件 1): 保持時間= 0.64 分; LC/MS: [M+H]⁺ C₁₃H₁₈NO₂として計算；計算値: 220.13; 実測値 220.21. HRMS: [M+H]⁺ C₁₃H₁₈NO₂として計算；計算値: 220.1338; 実測値 220.1343.

Cap-79

冷却した(-78℃)Cap-55(369 mg, 2.13 mmol)のCH₂Cl₂(5.0 mL)溶液に、オゾンを、該反応混合液が淡い青色になるまで約50分バブルした。Me₂S(10ピペット滴)を添加し、該反応混合液を35分間撹拌した。-78℃浴を-10℃浴に置き換えてさらに30分撹拌を続けた後、該揮発性成分を減圧除去して無色の粘稠性の油状物を得た。

NaBH₃CN(149 mg, 2.25 mmol)を上記粗物質およびモルホリン(500 μL, 5.72 mmol)のMeOH(5.0 mL)溶液に添加し、該混合液を周囲条件で4時間撹拌した。氷-水温度に冷却し、濃HClで処理してそのpHを〜2.0にした後、2.5時間撹拌した。該揮発性成分を減圧除去し、該残渣をMCX樹脂(MeOH洗浄; 2.0 N NH₃/MeOH溶出)と逆相HPLC(H₂O/MeOH/TFA)の組み合わせで精製して、未知の量のモルホリンを含むCap-79を得た。

モルホリン混入を消滅させるために、上記の物質をCH₂Cl₂(1.5 mL)に溶解させてEt₃N(0.27 mL, 1.94 mmol)で処理した後、無水酢酸(0.10 mL, 1.06 mmol)で処理し、周囲条件で18時間撹拌した。THF(1.0 mL)およびH₂O(0.5 mL)を添加して1.5時間撹拌を続けた。該揮発性成分を減圧除去して、得られた残渣をMCX樹脂(MeOH洗浄; 2.0 N NH₃/MeOH溶出)に通し、純粋でないCap-79を茶色の粘稠性の油状物として得て、それをさらなる精製は行わずに次の工程に用いた。

Cap-80aおよび-80b

冷却した(氷-水)、(S)-3-アミノ-4-(ベンジルオキシ)-4-オキソブタン酸(10.04g, 44.98 mmol)およびMeOH(300 mL)の混合液に、SOCl₂(6.60 mL, 90.5 mmol)を15分かけて滴下し、該冷却浴を取り外して、該反応混合液を周囲条件で29時間撹拌した。ほとんどの揮発性成分を減圧除去し、該残渣をEtOAc(150 mL)と飽和NaHCO₃溶液間に慎重に分配した。該水相をEtOAc(150 mL, 2x)で抽出して、有機相を合わせて乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、減圧濃縮して(S)-1-ベンジル 4-メチル 2-アミノスクシネートを無色の油状物として得た(9.706g)。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz): δ 7.40-7.32 (m, 5H), 5.11 (s, 2H), 3.72 (見かけ上のt, J = 6.6, 1H), 3.55 (s, 3H), 2.68 (dd, J = 15.9, 6.3, 1H), 2.58 (dd, J = 15.9, 6.8, 1H), 1.96 (s, 2H). LC (条件 1): 保持時間= 0.90 分; LC/MS: [M+H]⁺ C₁₂H₁₆NO₄として計算；計算値: 238.11; 実測値 238.22.

(S)-1-ベンジル 4-メチル 2-アミノスクシネート(4.50 g, 19.0 mmol)、9-ブロモ-9-フェニル-9H-フルオレン(6.44 g, 20.0 mmol)およびEt₃N(3.0 mL, 21.5 mmol)のCH₂Cl₂(80 mL)溶液に、Pb(NO₃)₂(6.06 g, 18.3 mmol)を1分かけて添加し、該不均一な混合液を周囲条件で48時間撹拌した。該混合液を濾過し、該濾液をMgSO₄で処理して再度濾過し、最終的な濾液を濃縮した。得られた粗物質をBiotage精製(350 g シリカゲル, CH₂Cl₂溶出)で処理して、(S)-1-ベンジル 4-メチル 2-(9-フェニル-9H-フルオレン-9-イルアミノ)スクシネートを高い粘稠性の無色の油状物として得た(7.93 g)。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz): δ 7.82 (m, 2H), 7.39-7.13 (m, 16H), 4.71 (d, J = 12.4, 1H), 4.51 (d, J = 12.6, 1H), 3.78 (d, J = 9.1, NH), 3.50 (s, 3H), 2.99 (m, 1H), 2.50-2.41 (m, 2H, 溶媒と部分的に重複). LC (条件 1): 保持時間= 2.16 分; LC/MS: [M+H]⁺ C₃₁H₂₈NO₄として計算；計算値: 478.20; 実測値 478.19.

冷却した(-78℃)、(S)-1-ベンジル 4-メチル 2-(9-フェニル-9H-フルオレン-9-イルアミノ)スクシネート(3.907 g, 8.18 mmol)のTHF(50 mL)溶液に、LiHMDS(9.2 mLの1.0 M/THF, 9.2 mmol)を10分かけて滴下し、〜1時間撹拌した。MeI(0.57 mL, 9.2 mmol)を8分かけて該混合液に滴下し、冷却浴を室温に緩和しながら16.5時間撹拌を続けた。飽和NH₄Cl溶液(5 mL)でクエンチした後、ほとんどの有機成分を減圧除去し、該残渣をCH₂Cl₂(100 mL)と水(40 mL)間に分配した。該有機層を乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、減圧濃縮し、得られた粗物質をBiotage(350 g シリカゲル; 25％ EtOAc/ヘキサン)で精製して、〜1.0:0.65の比(¹H NMR)の、3.65 gの1-ベンジル 4-メチル 3-メチル-2-(9-フェニル-9H-フルオレン-9-イルアミノ)スクシネートの2S/3Sおよび2S/3Rジアステレオマー混合物を得た。主要な異性体の立体化学はこの時点では決定せず、該混合液を分離せずに次の工程に用いた。部分的な ¹H NMR データ (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz): 主要なジアステレオマー, δ 4.39 (d, J = 12.3, CH₂の1H), 3.33 (s, 3H, H₂Oシグナルと重複), 3.50 (d, J = 10.9, NH), 1.13 (d, J = 7.1, 3H); 少量のジアステレオマー, δ 4.27 (d, J =12.3, CH₂の1H), 3.76 (d, J = 10.9, NH), 3.64 (s, 3H), 0.77 (d, J = 7.0, 3H). LC (条件 1): 保持時間= 2.19 分; LC/MS: [M+H]⁺ C₃₂H₃₀NO₄として計算；計算値: 492.22; 実測値 492.15.

冷却した(-78℃)、上記で製造した(2S)-1-ベンジル 4-メチル 3-メチル-2-(9-フェニル-9H-フルオレン-9-イルアミノ)スクシネート(3.37 g, 6.86 mmol)のTHF(120 mL)溶液に、水素化ジイソブチルアルミニウム(20.57 mlの1.0 M／ヘキサン, 20.57 mmol)を10分かけて滴下し、-78℃で20時間撹拌した。該反応混合液を冷却浴から取り外し、〜1M H₃PO₄/H₂O(250 mL)に撹拌しながら迅速に注ぎ入れ、該混合液をエーテル(100 mL, 2x)で抽出した。有機相を合わせて食塩水で洗浄し、乾燥させ(MgSO₄)、濾過して減圧濃縮した。該粗物質のシリカゲルメッシュを調製し、クロマトグラフィー(25％ EtOAc/ヘキサン; 重力溶出)で処理して、ベンジルアルコールが混入した1.1 gの(2S,3S)-ベンジル 4-ヒドロキシ-3-メチル-2-(9-フェニル-9H-フルオレン-9-イルアミノ)ブタノエートを無色の粘稠性の油状物として、および(2S,3R)立体異性体を含む純粋でない(2S,3R)-ベンジル 4-ヒドロキシ-3-メチル-2-(9-フェニル-9H-フルオレン-9-イルアミノ)ブタノエートを得た。 後者のサンプルを、同一のカラムクロマトグラフィー精製条件で再処理して、750 mgの精製物質を白色の泡状物質として得た。[注:上記条件下において、該(2S, 3S)異性体を溶出した後、該(2S,3R)異性体を溶出した]。(2S, 3S)異性体: ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz): 7.81 (m, 2H), 7.39-7.08 (m, 16H), 4.67 (d, J = 12.3, 1H), 4.43 (d, J = 12.4, 1H), 4.21 (見かけ上のt, J = 5.2, OH), 3.22 (d, J = 10.1, NH), 3.17 (m, 1H), 3.08 (m, 1H), 〜2.5 (m, 1H, 溶媒シグナルと重複), 1.58 (m, 1H), 0.88 (d, J = 6.8, 3H). LC (条件 1): 保持時間= 2.00 分; LC/MS: [M+H]⁺ C₃₁H₃₀NO₃として計算；計算値: 464.45; 実測値 464.22. (2S, 3R)異性体: ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz): 7.81 (d, J = 7.5, 2H), 7.39-7.10 (m, 16H), 4.63 (d, J= 12.1, 1H), 4.50 (見かけ上のt, J = 4.9, 1H), 4.32 (d, J = 12.1, 1H), 3.59-3.53 (m, 2H), 3.23 (m, 1H), 2.44 (dd, J = 9.0, 8.3, 1H), 1.70 (m, 1H), 0.57 (d, J = 6.8, 3H). LC (条件 1): 保持時間= 1.92 分; LC/MS: [M+H]⁺ C₃₁H₃₀NO₃として計算；計算値: 464.45; 実測値 464.52.

以下の方法を用いることにより各異性体から製造したラクトン誘導体で実施されたNOE研究に基づいて、DIBAL-還元生成物の相対的立体化学の帰属（relative stereochemical assignment）を行った: 冷却した(氷-水)、(2S,3S)-ベンジル 4-ヒドロキシ-3-メチル-2-(9-フェニル-9H-フルオレン-9-イルアミノ)ブタノエート(62.7 mg, 0.135 mmol)のTHF(2.0 mL)溶液に、LiHMDS(50 μLの1.0 M/THF, 0.05 mmol)を添加し、該反応混合液を同様の温度で〜2時間撹拌した。該揮発性成分を減圧除去して、該残渣をCH₂Cl₂(30 mL)、水(20 mL)と飽和NH₄Cl水溶液(1 mL)との間に分配した。該有機層を乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、減圧濃縮し、得られた粗物質をBiotage精製(40 g シリカゲル; 10-15％ EtOAc/ヘキサン)で処理して(3S,4S)-4-メチル-3-(9-フェニル-9H-フルオレン-9-イルアミノ)ジヒドロフラン-2(3H)-オンを無色のフィルム状固形物として得た(28.1 mg)。(2S,3R)-ベンジル 4-ヒドロキシ-3-メチル-2-(9-フェニル-9H-フルオレン-9-イルアミノ)ブタノエートを、(3S,4R)-4-メチル-3-(9-フェニル-9H-フルオレン-9-イルアミノ)ジヒドロフラン-2(3H)-オンと同様に合成した。(3S,4S)-ラクトン異性体: ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz), 7.83 (d, J = 7.5, 2H), 7.46-7.17 (m, 11H), 4.14 (見かけ上のt, J = 8.3, 1H), 3.60 (d, J = 5.8, NH), 3.45 (見かけ上のt, J = 9.2, 1H), 〜2.47 (m, 1H, 溶媒シグナルと部分的に重複), 2.16 (m, 1H), 0.27 (d, J = 6.6, 3H). LC (条件 1): 保持時間= 1.98 分; LC/MS: [M+Na]⁺ C₂₄H₂₁NNaO₂として計算；計算値: 378.15; 実測値 378.42. (3S,4R)-ラクトン異性体: ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz), 7.89 (d, J = 7.6, 1H), 7.85 (d, J = 7.3, 1H), 7.46-7.20 (m, 11H), 3.95 (dd, J = 9.1, 4.8, 1H), 3.76 (d, J = 8.8, 1H), 2.96 (d, J = 3.0, NH), 2.92 (dd, J = 6.8, 3, NCH), 1.55 (m, 1H), 0.97 (d, J = 7.0, 3H). LC (条件 1): 保持時間= 2.03 分; LC/MS: [M+Na]⁺ C₂₄H₂₁NNaO₂として計算；計算値: 378.15; 実測値 378.49.

(2S,3S)-ベンジル 4-ヒドロキシ-3-メチル-2-(9-フェニル-9H-フルオレン-9-イルアミノ)ブタノエート(119.5 mg, 0.258 mmol)のCH₂Cl₂(3 ml)溶液にTBDMS-Cl(48 mg, 0.312 mmol)を添加した後、イミダゾール(28.8 mg, 0.423 mmol)を添加し、該混合液を周囲条件で14.25時間撹拌した。次いで、該反応混合液をCH₂Cl₂(30 mL)で希釈し、水洗し(15 mL)、該有機層を乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、減圧濃縮した。得られた粗物質をBiotage(40 gシリカゲル; 5％ EtOAc/ヘキサン)で精製して、TBDMSベースの不純物が混入した(2S,3S)-ベンジル 4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-3-メチル-2-(9-フェニル-9H-フルオレン-9-イルアミノ)ブタノエートを、無色の粘稠性の油状物として得た(124.4 mg)。(2S,3R)-ベンジル 4-ヒドロキシ-3-メチル-2-(9-フェニル-9H-フルオレン-9-イルアミノ)ブタノエートを、(2S,3R)-ベンジル 4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-3-メチル-2-(9-フェニル-9H-フルオレン-9-イルアミノ)ブタノエートと同様に合成した。(2S,3S)-シリルエーテル異性体: ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz), 7.82 (d, J = 4.1, 1H), 7.80 (d, J = 4.0, 1H), 7.38-7.07 (m, 16 H), 4.70 (d, J = 12.4, 1H), 4.42 (d, J = 12.3, 1H), 3.28-3.19 (m, 3H), 2.56 (dd, J = 10.1, 5.5, 1H), 1.61 (m, 1H), 0.90 (d, J = 6.8, 3H), 0.70 (s, 9H), -0.13 (s, 3H), -0.16 (s, 3H). LC (条件 1, ラン時間を4分に延ばした): 保持時間= 3.26 分; LC/MS: [M+H]⁺ C₃₇H₄₄NO₃Siとして計算；計算値: 578.31; 実測値 578.40. (2S,3R)-シリルエーテル異性体: ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz), 7.82 (d, J = 3.0, 1H), 7.80 (d, J = 3.1, 1H), 7.39-7.10 (m, 16H), 4.66 (d, J = 12.4, 1H), 4.39 (d, J = 12.4, 1H), 3.61 (dd, J = 9.9, 5.6, 1H), 3.45 (d, J = 9.5, 1H), 3.41 (dd, J = 10, 6.2, 1H), 2.55 (dd, J = 9.5, 7.3, 1H), 1.74 (m, 1H), 0.77 (s, 9H), 0.61 (d, J = 7.1, 3H), -0.06 (s, 3H), -0.08 (s, 3H).

水素のバルーンを、EtOAc(16 mL)中の(2S,3S)-ベンジル 4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-3-メチル-2-(9-フェニル-9H-フルオレン-9-イルアミノ)ブタノエート(836 mg, 1.447 mmol)および10％ Pd/C(213 mg)の混合液に取り付け、該混合液を室温で〜21時間撹拌した（必要に応じて該バルーンをH₂で再充填した）。該反応混合液をCH₂Cl₂で希釈し、珪藻土(セライト-545（登録商標）)のパッドにより濾過し、該パッドをEtOAc(200 mL)、EtOAc/MeOH(1:1 混合液, 200 mL)およびMeOH(750 mL)で洗浄した。有機相を合わせて濃縮し、得られた粗物質からシリカゲルメッシュを調製し、フラッシュクロマトグラフィー(EtOAc/i-PrOH/H₂Oの8:2:1混合液)で処理して、(2S,3S)-2-アミノ-4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-3-メチルブタン酸を白色の綿毛状の固形物として得た(325 mg)。(2S,3R)-ベンジル 4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-3-メチル-2-(9-フェニル-9H-フルオレン-9-イルアミノ)ブタノエートを、(2S,3R)-2-アミノ-4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-3-メチルブタン酸と同様に合成した。(2S,3S)-アミノ酸異性体: ¹H NMR (メタノール-d₄, δ = 3.29 ppm, 400 MHz), 3.76 (dd, J = 10.5, 5.2, 1H), 3.73 (d, J = 3.0, 1H), 3.67 (dd, J = 10.5, 7.0, 1H), 2.37 (m, 1H), 0.97 (d, J = 7.0, 3H), 0.92 (s, 9H), 0.10 (s, 6H). LC/MS: [M+H]⁺ C₁₁H₂₆NO₃Siとして計算；計算値: 248.17; 実測値 248.44. (2S,3R)-アミノ酸異性体: ¹H NMR (メタノール-d₄, δ = 3.29 ppm, 400 MHz), 3.76-3.75 (m, 2H), 3.60 (d, J = 4.1, 1H), 2.16 (m, 1H), 1.06 (d, J = 7.3, 3H), 0.91 (s, 9H), 0.09 (s, 6H). [M+H]⁺ C₁₁H₂₆NO₃Siとして計算；計算値: 248.17; 実測値 248.44.

(2S,3S)-2-アミノ-4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-3-メチルブタン酸(41.9 mg, 0.169 mmol)およびNa₂CO₃(11.9 mg, 0.112 mmol)の混合液に、水(1 mL)およびNaOH(0.18 mLの1.0 M/H₂O, 0.18 mmol)を添加し、約1分間超音波処理して反応物の溶解を効率化した。次いで、該混合液を氷-水浴で冷却し、クロロギ酸メチル(0.02 mL, 0.259 mmol)を30秒かけて添加し、同様の温度で40分間、その後周囲温度で2.7時間、激しく撹拌を続けた。該反応混合液を水(5 mL)で希釈し、氷-水浴で冷却して1.0 N HCl水溶液(〜0.23 mL)で滴下処理した。該混合液をさらに水(10 mL)で希釈し、CH₂Cl₂(15 mL, 2x)で抽出した。有機相を合わせて乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、減圧濃縮してCap-80aをオフホワイト色の固形物として得た。(2S,3R)-2-アミノ-4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-3-メチルブタン酸をCap-80bと同様に合成した。Cap-80a: ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz), 12.57 (ブロードのs, 1H), 7.64 (d, J = 8.3, 0.3H), 7.19 (d, J = 8.8, 0.7H), 4.44 (dd, J = 8.1, 4.6, 0.3H), 4.23 (dd, J = 8.7, 4.4, 0.7H), 3.56/3.53 (２つの一重線, 3H), 3.48-3.40 (m, 2H), 2.22-2.10 (m, 1H), 0.85 (s, 9H), 〜0.84 (d, 0.9H, t-Buシグナルと重複), 0.79 (d, J = 7, 2.1H), 0.02/0.01/0.00 (３つの重複した１重線, 6H). LC/MS: [M+Na]⁺ C₁₃H₂₇NNaO₅Siとして計算；計算値: 328.16; 実測値 328.46. Cap-80b: ¹H NMR (CDCl₃, δ = 7.24 ppm, 400 MHz), 6.00 (ブロードのd, J = 6.8, 1H), 4.36 (dd, J = 7.1, 3.1, 1H), 3.87 (dd, J = 10.5, 3.0, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.58 (dd, J = 10.6, 4.8, 1H), 2.35 (m, 1H), 1.03 (d, J = 7.1, 3H), 0.90 (s, 9H), 0.08 (s, 6H). LC/MS: [M+Na]⁺ C₁₃H₂₇NNaO₅Siとして計算；計算値: 328.16; 実測値 328.53. 該粗生成物をさらなる精製は行わずに用いた。

Cap-81

Falb et al. Synthetic Communications 1993, 23, 2839による記載の方法に従って製造した。

Cap-82からCap-85
Cap-82からCap-85を、Cap-51またはCap-13に記載の方法に従って、適当な出発物質から合成した。該サンプルは、それらのエナンチオマー(すなわち、各々、Cap-4、Cap-13、Cap-51およびCap-52)と同様のスペクトル特性を示した。

Cap-86

H₂O(15 mL)中のO-メチル-L-トレオニン(3.0 g, 22.55 mmol)、NaOH(0.902 g, 22.55 mmol)の混合液に、ClCO₂Me(1.74 mL, 22.55 mmol)を0℃で滴下した。該混合液を12時間撹拌し、1N HClを用いてpH1に酸性化した。該水相をEtOAc(2x250 mL)、および10％ MeOH／CH₂Cl₂(250 mL)で抽出し、有機相を合わせて減圧濃縮して無色の油状物を得た(4.18 g, 97％)（それはその後の工程に用いるのに十分純粋であった）。 ¹HNMR (400 MHz, CDCl₃) δ 4.19 (s, 1H), 3.92-3.97 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 1.17 (d, J = 7.7 Hz, 3H). LCMS: C₇H₁₃NO₅として計算；計算値: 191; 実測値: 190 (M-H)^-.

Cap-87

H₂O(15 mL)中のL-ホモセリン(2.0 g, 9.79 mmol)、Na₂CO₃(2.08 g, 19.59 mmol)の混合液に、ClCO₂Me(0.76 mL, 9.79 mmol)を0℃で滴下した。該混合液を48時間撹拌し、1N HClを用いてpH1に酸性化した。該水相をEtOAc(2X250 mL)で抽出し、有機相を合わせて減圧濃縮して無色の固形物を得た(0.719 g, 28％)（それはその後の工程に用いるのに十分純粋であった）。 ¹HNMR (400 MHz, CDCl₃) δ 4.23 (dd, J = 4.5, 9.1 Hz, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.43-3.49 (m, 2H), 2.08 - 2.14 (m, 1H), 1.82 - 1.89 (m, 1H). LCMS: C₇H₁₃NO₅として計算；計算値: 191; 実測値: 192 (M+H)⁺.

Cap-88

DMSO(10 mL)中のL-バリン(1.0 g, 8.54 mmol)、3-ブロモピリジン(1.8 mL, 18.7 mmol)、K₂CO₃(2.45 g, 17.7 mmol)およびCuI(169 mg, 0.887 mmol)の混合液を、100℃で12時間加熱した。該反応混合液を室温に冷却してH₂O(約150 mL)に注ぎ入れ、EtOAc(x2)で洗浄した。該有機層を少量のH₂Oで抽出し、水相を合わせて、6N HClで約pH2に酸性化した。該量を約３分の１に減らし、20gのカチオン交換樹脂(Strata)を添加した。該スラリーを20分間静置し、カチオン交換樹脂(Strata)のパッド(約25g)にロードした。該パッドを、H₂O(200 mL)、MeOH(200 mL)、次いでNH₃(MeOH中で3M, 2X200 mL)で洗浄した。適当なフラクションを減圧濃縮し、該残渣(約1.1 g)をH₂Oに溶解させ、凍らせて凍結乾燥させた（lyophyllized）。表題の化合物を泡状物質として得た(1.02 g, 62％)。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.00 (s, ブロード, 1H), 7.68 - 7.71 (m, 1H), 7.01 (s, ブロード, 1H), 6.88 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 5.75 (s, ブロード, 1H), 3.54 (s, 1H), 2.04 - 2.06 (m, 1H), 0.95 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.91 (d, J = 6.6 Hz, 3H). LCMS: C₁₀H₁₄N₂O₂として計算；計算値: 194; 実測値: 195 (M+H)⁺.

Cap-89

DMSO(10 mL)中のL-バリン(1.0 g, 8.54 mmol)、5-ブロモピリミジン(4.03 g, 17.0 mmol)、K₂CO₃(2.40 g, 17.4 mmol)およびCuI(179 mg, 0.94 mmol)の混合液を、100℃で12時間加熱した。該反応混合液を室温に冷却してH₂O(約150 mL)に注ぎ入れ、EtOAc(x2)で洗浄した。該有機層を少量のH₂Oで抽出し、水相を合わせて、6N HClで約pH2に酸性化した。該量を約３分の１に減らし、20gのカチオン交換樹脂(Strata)を添加した。該スラリーを20分間静置し、カチオン交換樹脂(Strata)のパッド(約25g)にロードした。該パッドを、H₂O(200 mL)、MeOH(200 mL)、次いでNH₃(MeOH中で3M, 2X200 mL)で洗浄した。適当なフラクションを減圧濃縮し、該残渣(約1.1 g)をH₂Oに溶解させ、凍らせて凍結乾燥させた（lyophyllized）。表題の化合物を泡状物質として得た(1.02 g, 62％)。 ¹HNMR (400 MHz, CD₃OD)により該混合物はバリンを含むことが示され、純度は推定できなかった。該物質をそのままその後の反応に用いた。 LCMS: C₉H₁₃N₃O₂として計算；計算値: 195; 実測値: 196 (M+H)⁺.

Cap-90

Cap-90をCap-1の製造に記載の方法に従って製造した。該粗物質をそのままその後の工程に用いた。 LCMS: C₁₁H₁₅NO₂として計算；計算値: 193; 実測値: 192 (M-H)^-.

以下のcapを、他に記載のない限り、cap 51の製造に用いた方法に従って製造した。

Cap-117からCap-123
Cap-117からCap-123の製造に関して、該Bocアミノ酸は市販品であり、25％TFA／CH₂Cl₂での処理により脱保護した。LCMSにより反応が完了したと判定された後、該溶媒を減圧除去し、対応するアミノ酸のTFA塩をCap-51に記載の方法に従ってクロロギ酸メチルでカルバモイル化した。

Cap-124

L-トレオニンtert-ブチルエステルの塩酸塩をCap-51の方法に従ってカルバモイル化した。該粗反応混合液を1N HClでpH〜1に酸性化し、該混合液をEtOAc(2X50 mL)で抽出した。有機相を合わせて減圧濃縮し、無色の油状物を得て静置で固化させた。該水層を減圧濃縮し、得られた生成物と無機塩の混合液をEtOAc-CH₂Cl₂-MeOH(1:1:0.1)でトリチュレートし、次いで該有機相を減圧濃縮して無色の油状物を得て、LCMSによりそれは目的の生成物であることが示された。両方のクロップを合わせて0.52 gの固形物を得た。 ¹HNMR (400 MHz, CD₃OD) δ 4.60 (m, 1H), 4.04 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 1.49 (d, J = 6.3 Hz, 3H). LCMS: C₅H₇NO₄として計算；計算値: 145; 実測値: 146 (M+H)⁺.

Cap-125

メタノール(15 mL)中のPd(OH)₂(20％, 100 mg)、ホルムアルデヒド水溶液(37重量％, 4 ml)、酢酸(0.5 mL)の懸濁液に、(S)-4-アミノ-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)ブタン酸(1 g, 4.48 mmol)を添加した。該反応液を水素で数回パージして、水素バルーンとともに室温で終夜撹拌した。該反応混合液を珪藻土(セライト（登録商標）)のパッドにより濾過して、該揮発性成分を減圧除去した。得られた粗物質をそのまま次の工程に用いた。 LC/MS: C₁₁H₂₂N₂O₄として計算；計算値: 246; 実測値: 247 (M+H)⁺.

Cap-126

この方法はCap-51の製造に用いたものの改変である。THF(10mL)およびH₂O(10 mL)中の3-メチル-L-ヒスチジン(0.80 g, 4.70 mmol)懸濁液に、0℃で、NaHCO₃(0.88 g, 10.5 mmol)を添加した。得られた混合液をClCO₂Me(0.40 mL, 5.20 mmol)で処理して、該混合液を0℃で撹拌した。約2時間撹拌した後、出発物質が残っていないことがLCMSにより示された。該反応液を6N HClでpH 2に酸性化した。

該溶媒を減圧除去し、該残渣を20 mLの20％ MeOH／CH₂Cl₂に懸濁した。該混合液を濾過および濃縮し、淡黄色の泡状物質を得た(1.21 g)。LCMSおよび¹H NMRにより、該物質はメチルエステルと目的の生成物の9:1の混合物であることが示された。この物質をTHF(10mL)およびH₂O(10mL)中に溶解させ、0℃に冷却し、LiOH(249.1 mg, 10.4 mmol)を添加した。約1時間撹拌した後、エステルが残っていないことがLCMSにより示された。 そこで、該混合液を6N HClで酸性化し、該溶媒を減圧除去した。LCMSおよび¹H NMRによりエステルがないことを確認した。表題の化合物を無機塩が混入したそのHCl塩として得た(1.91 g, ＞100％)。該化合物をさらなる精製は行わずにそのままその後の工程に用いた。 ¹HNMR (400 MHz, CD₃OD) δ 8.84, (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 4.52 (dd, J = 5.0, 9.1 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 3.35 (dd, J = 4.5, 15.6 Hz, 1H, 溶媒により部分的に不明瞭), 3.12 (dd, J = 9.0, 15.6 Hz, 1H).LCMS: C₉H₁₃N₃O₄として計算；計算値: 227.09; 実測値: 228.09 (M+H)⁺.

Cap-127

Cap-127を、上記のCap-126の方法に従って、(S)-2-アミノ-3-(1-メチル-1H-イミダゾール-4-イル)プロパン酸(1.11 g, 6.56 mmol)、NaHCO₃(1.21 g, 14.4 mmol)およびClCO₂Me(0.56 mL, 7.28 mmol)から開始して製造した。表題の化合物を無機塩が混入したそのHCl塩(1.79 g, ＞100％)として得た。LCMSおよび¹H NMRにより、約5％のメチルエステルの存在が示された。該粗混合物をさらなる精製は行わずにそのまま用いた。 ¹HNMR (400 MHz, CD₃OD) δ 8.90 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 4.48 (dd, J = 5.0, 8.6 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 3.35 (m, 1H), 3.08 (m, 1H); LCMS: C₉H₁₃N₃O₄として計算；計算値: 227.09; 実測値: 228 (M+H)⁺.

Cap-128の製造

工程1. (S)-ベンジル 2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)ペンタ-4-イン酸（ynoate）(cj-27b)の製造

CH₂Cl₂(100 mL)中のcj-27a(1.01 g, 4.74 mmol)、DMAP(58 mg, 0.475 mmol)およびiPr₂NEt(1.7 mL, 9.8 mmol)の溶液に、0℃で、Cbz-Cl(0.68 mL, 4.83 mmol)を添加した。該溶液を0℃で4時間撹拌し、洗浄し(1N KHSO₄、食塩水)、乾燥させ(Na₂SO₄)、濾過し、減圧濃縮した。該残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー(TLC 6:1 ヘキサン:EtOAc)により精製して、表題の化合物(1.30 g, 91％)を無色の油状物として得た。 ¹HNMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.35 (s, 5H), 5.35 (d, ブロード, J = 8.1 Hz, 1H), 5.23 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 5.17 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 4.48 - 4.53 (m, 1H), 2.68 - 2.81 (m, 2H), 2.00 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 1.44 (s, 9H). LCMS: C₁₇H₂₁NO₄として計算；計算値: 303; 実測値: 304 (M+H)⁺.

工程2. (S)-ベンジル 3-(1-ベンジル-1H-1,2,3-トリアゾール-4-イル)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)プロパノエート(cj-28)の製造

DMF-H₂O(5 mL, 4:1)中の(S)-ベンジル 2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)ペンタ-4-イン酸(0.50 g, 1.65 mmol)、アスコルビン酸ナトリウム(0.036 g, 0.18 mmol)、CuSO₄-5H₂O(0.022 g, 0.09 mmol)およびNaN₃(0.13 g, 2.1 mmol)の混合液に、室温で、BnBr(0.24 mL, 2.02 mmol)を添加し、該混合液を65℃に温めた。5時間後、LCMSにより低い変換が示された。さらなる部のNaN₃(100 mg)を添加して12時間加熱を続けた。該反応液をEtOAcおよびH₂Oに注ぎ入れ、振盪させた。層を分離し、該水層をEtOAcで3回抽出し、有機相を合わせて洗浄し(H₂O x3、食塩水)、乾燥させ(Na₂SO₄)、濾過し、濃縮した。該残渣をフラッシュ(Biotage, 40+M 0-5％ MeOH／CH₂Cl₂; TLC 3％ MeOH／CH₂Cl₂)により精製して淡黄色の油状物を得て、それを静置で固化させた(748.3 mg, 104％)。該NMRは目的の生成物と一致したが、DMFの存在が示唆された。該物質をさらなる精製は行わずにそのまま用いた。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.84 (s, 1H), 7.27 - 7.32 (m, 10H), 5.54 (s, 2H), 5.07 (s, 2H), 4.25 (m, 1H), 3.16 (dd, J = 1.0, 5.3 Hz, 1H), 3.06 (dd, J = 5.3, 14.7 Hz), 2.96 (dd, J = 9.1, 14.7 Hz, 1H), 1.31 (s, 9H).
LCMS: C₂₄H₂₈N₄O₄として計算；計算値: 436; 実測値: 437 (M+H)⁺.

工程3. (S)-ベンジル 3-(1-ベンジル-1H-1,2,3-トリアゾール-4-イル)-2-(メトキシカルボニルアミノ)プロパノエート(cj-29)の製造

(S)-ベンジル 3-(1-ベンジル-1H-1,2,3-トリアゾール-4-イル)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ) プロパノエート (0.52 g, 1.15 mmol)／CH₂Cl₂溶液に、TFA(4 mL)を添加した。該混合液を室温で2時間撹拌した。該混合液を減圧濃縮して無色の油状物を得て、それを静置で固化させた。この物質をTHF-H₂Oに溶解させて0℃に冷却した。固体のNaHCO₃(0.25 g, 3.00 mmol)を添加し、続いてClCO₂Me(0.25 mL, 3.25 mmol)を添加した。1.5時間撹拌した後、該混合液を6N HClでpH〜2に酸性化し、その後H₂O-EtOAcに注ぎ入れた。層を分離し、該水相をEtOAcで2回抽出した。有機層を合わせて洗浄し(H₂O、食塩水)、乾燥させ(Na₂SO₄)、濾過し、減圧濃縮して無色の油状物を得て(505.8 mg, 111％, NMRにより未同定の不純物の存在が示唆された)、それをポンピング下で放置の間に固化した。該物質をさらなる精製は行わずにそのまま用いた。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.87 (s, 1H), 7.70 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.27 - 7.32 (m, 10H), 5.54 (s, 2H), 5.10 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 5.06 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 4.32 - 4.37 (m, 1H), 3.49 (s, 3H), 3.09 (dd, J = 5.6, 14.7 Hz, 1H), 2.98 (dd, J = 9.6, 14.7 Hz, 1H). LCMS: C₂₁H₂₂N₄O₄として計算；計算値: 394; 実測値: 395 (M+H)⁺.

工程4. (S)-2-(メトキシカルボニルアミノ)-3-(1H-1,2,3-トリアゾール-4-イル)プロパン酸(Cap-128)の製造

(S)-ベンジル 3-(1-ベンジル-1H-1,2,3-トリアゾール-4-イル)-2-(メトキシカルボニルアミノ)プロパノエート(502 mg, 1.11 mmol)をPd-C(82 mg)の存在下、MeOH(5 mL)中において大気圧で12時間、水素化した。該混合液を珪藻土(セライト（登録商標）)により濾過して減圧濃縮した。(S)-2-(メトキシカルボニルアミノ)-3-(1H-1,2,3-トリアゾール-4-イル)プロパン酸を、約10％のメチルエステルが混入した無色のガム状物質として得た(266 mg, 111％)。該物質をさらなる精製は行わずにそのまま用いた。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.78 (s, ブロード, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.19 - 4.24 (m, 1H), 3.49 (s, 3H), 3.12 (dd, J = 4.8 Hz, 14.9 Hz, 1H), 2.96 (dd, J = 9.9, 15.0 Hz, 1H). LCMS: C₇H₁₀N₄O₄として計算；計算値: 214; 実測値: 215 (M+H)⁺.

Cap-129の製造

工程1. (S)-2-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)-3-(1H-ピラゾール-1-イル)プロパン酸(cj-31)の製造.

CH₃CN(12 mL)中の(S)-ベンジル 2-オキソオキセタン-3-イルカルバメート(0.67 g, 3.03 mmol)、およびピラゾール(0.22 g, 3.29 mmol)の懸濁液を50℃で24時間加熱した。 該混合液を終夜室温に冷却し、該固形物を濾過して(S)-2-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)-3-(1H-ピラゾール-1-イル)プロパン酸(330.1 mg)を得た。該濾液を減圧濃縮した後、少量のCH₃CN(約4 mL)でトリチュレートして第２のクロップを得た(43.5 mg)。総収量は370.4 mg (44％)。 m.p. 165.5 - 168℃. lit m.p. 168.5 - 169.5 [Vederas et al. J. Am. Chem. Soc. 1985, 107, 7105]. ¹HNMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.51 (d, J = 2.0, 1H), 7.48 (s, J = 1.5 Hz, 1H), 7.24 - 7.34 (m, 5H), 6.23 m, 1H), 5.05 (d, 12.7 H, 1H), 5.03 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 4.59 - 4.66 (m, 2H), 4.42 - 4.49 (m, 1H). LCMS: C₁₄H₁₅N₃O₄として計算；計算値: 289; 実測値: 290 (M+H)⁺.

工程2. (S)-2-(メトキシカルボニルアミノ)-3-(1H-ピラゾール-1-イル)プロパン酸(Cap-129)の製造

(S)-2-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)-3-(1H-ピラゾール-1-イル)プロパン酸(0.20 g, 0.70 mmol)を、Pd-C(45 mg)の存在下、MeOH(5 mL)中において大気圧で2時間、水素化した。該生成物はMeOHに不溶性であると思われたので、該反応混合液を5mLのH₂Oおよび数滴の6N HClで希釈した。該均一な溶液を珪藻土(セライト（登録商標）)により濾過し、該MeOHを減圧除去した。残った溶液を凍らせて凍結乾燥させて黄色の泡状物質を得た(188.9 mg)。この物質をTHF-H₂O(1:1, 10mL)に懸濁させた後、0℃に冷却した。該冷混合液に、NaHCO₃(146.0 mg, 1.74 mmol)を慎重に添加した(CO₂が発生)。ガスの発生が停止した後(約15分)、ClCO₂Me(0.06 mL, 0.78 mmol)を滴下した。該混合液を2時間撹拌し、6N HClでpH〜2に酸性化してEtOAcに注ぎ入れた。層を分離し、該水相をEtOAC(x5)で抽出した。有機層を合わせて洗浄し(食塩水)、乾燥させ(Na₂SO₄)、濾過し、濃縮して表題の化合物を無色の固形物として得た(117.8 mg, 79％)。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 13.04 (s, 1H), 7.63 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.19 (見かけ上のt, J = 2.0 Hz, 1H), 4.47 (dd, J = 3.0, 12.9 Hz, 1H), 4.29 - 4.41 (m, 2H), 3.48 (s, 3H). LCMS: C₈H₁₁N₃O₄として計算；計算値: 213; 実測値: 214 (M+H)⁺.

Cap-130

Calmes, M.; Daunis, J.; Jacquier, R.; Verducci, J. Tetrahedron, 1987, 43(10), 2285に記載の方法と同様に、市販の(R)-フェニルグリシンアナログのアシル化によってCap-130を製造した。

Cap-131

工程a: ジメチルカルバモイルクロリド(0.92 mL, 10 mmol)を、THF(50 mL)中の(S)-ベンジル 2-アミノ-3-メチルブタノエート塩酸塩(2.44 g; 10 mmol)およびヒューニッヒ塩基(3.67 mL, 21 mmol)の溶液に、ゆっくりと添加した。得られた白色の懸濁液を室温で終夜(16時間)撹拌し、減圧下で濃縮した。該残渣を酢酸エチルと水間に分配した。該有機層を食塩水で洗浄し、乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた黄色の油状物を、酢酸エチル:ヘキサン(1:1)で溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。フラクションを集めて減圧下で濃縮し、2.35 g(85％)の澄明な油状物を得た。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.84 (d, J=6.95 Hz, 3H), 0.89 (d, J=6.59 Hz, 3H), 1.98-2.15 (m, 1H), 2.80 (s, 6H), 5.01-5.09 (m, J=12.44 Hz, 1H), 5.13 (d, J=12.44 Hz, 1H), 6.22 (d, J=8.05 Hz, 1H), 7.26-7.42 (m, 5H). LC (条件 1): 保持時間= 1.76 分; MS: [M+H]⁺ C₁₆H₂₂N₂O₃として計算；計算値: 279.17; 実測値 279.03.

工程b: 上記で製造した中間体(2.35 g; 8.45 mmol)のMeOH(50 mL)溶液に、Pd/C(10％;200 mg)を添加し、得られた黒色の懸濁液をN₂(3x)でフラッシュし、H₂の1気圧下に置いた。該混合液を室温で終夜撹拌し、マイクロファイバーのフィルターで濾過して触媒を除去した。次いで、得られた澄明な溶液を減圧下で濃縮して1.43 g(89％)のCap-131を白色の泡状物質として得て、それをさらなる精製は行わずに用いた。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.87 (d, J=4.27 Hz, 3H), 0.88 (d, J=3.97 Hz, 3H), 1.93-2.11 (m, 1H), 2.80 (s, 6H), 3.90 (dd, J=8.39, 6.87 Hz, 1H), 5.93 (d, J=8.54 Hz, 1H), 12.36 (s, 1H). LC (条件 1): 保持時間= 0.33 分; MS: [M+H]⁺ C₈H₁₇N₂O₃として計算；計算値: 189.12; 実測値 189.04.

Cap-132

Cap-131に記載の方法に従って、(S)-ベンジル 2-アミノプロパノエート塩酸塩からCap-132を製造した。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.27 (d, J=7.32 Hz, 3H), 2.80 (s, 6H), 4.06 (qt, 1H), 6.36 (d, J=7.32 Hz, 1H), 12.27 (s, 1H). LC (条件 1): 保持時間= 0.15 分; MS: [M+H]⁺ C₆H₁₃N₂O₃として計算；計算値: 161.09; 実測値 161.00.

Cap-133

Cap-47に記載の方法に従って、(S)-tert-ブチル 2-アミノ-3-メチルブタノエート塩酸塩およびクロロギ酸2-フルオロエチルからCap-133を製造した。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.87 (t, J = 6.71 Hz, 6H), 1.97-2.10 (m, 1H), 3.83 (dd, J=8.39, 5.95 Hz, 1H), 4.14-4.18 (m, 1H), 4.20-4.25 (m, 1H), 4.50-4.54 (m, 1H), 4.59-4.65 (m, 1H), 7.51 (d, J = 8.54 Hz, 1H), 12.54 (s, 1H).

Cap-134

Cap-51に記載の方法に従って、(S)-ジエチルアラニンおよびクロロギ酸メチルからCap-134を製造した。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.72-0.89 (m, 6H), 1.15-1.38 (m, 4H), 1.54-1.66 (m, 1H), 3.46-3.63 (m, 3H), 4.09 (dd, J = 8.85, 5.19 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 8.85 Hz, 1H), 12.55 (s, 1H). LC (条件 2): 保持時間= 0.66 分; LC/MS: [M+H]⁺ C₉H₁₈NO₄として計算；計算値: 204.12; 実測値 204.02.

Cap-135

D-2-アミノ-(4-フルオロフェニル)酢酸(338 mg, 2.00 mmol)、1N HCl／ジエチルエーテル(2.0 mL, 2.0 mmol)およびホルマリン(37％, 1 mL)／メタノール(5 mL)の溶液を、10％パラジウム炭素(60 mg)により16時間、25℃でバルーン水素化処理した。ついで、該混合液をセライトにより濾過し、Cap-135のHCl塩を白色の泡状物質として得た(316 mg, 80％)。 ¹H NMR (300 MHz, MeOH-d₄) δ 7.59 (dd, J = 8.80, 5.10 Hz, 2H), 7.29 (t, J = 8.6 Hz, 2H), 5.17 (s, 1H), 3.05 (v ブロードのs, 3H), 2.63 (v ブロードのs, 3H); 保持時間= 0.19 分 (条件-MS-W5); 95％ 均一性指数; LRMS: [M+H]⁺ C₁₀H₁₃FNO₂として計算；計算値: 198.09; 実測値: 198.10.

Cap-136

冷却した(-50℃)、1-ベンジル-1H-イミダゾール(1.58 g, 10.0 mmol)／無水ジエチルエーテル(50 mL)懸濁液に、窒素下において、n-ブチル リチウム(2.5 M／ヘキサン, 4.0 mL, 10.0 mmol)を滴下した。-50℃で20分間撹拌した後、該反応混合液中に乾燥二酸化炭素(Drieriteを通した)を10分間バブルし、その後、25℃に昇温させた。反応混合液への二酸化炭素の添加により形成された重い沈殿物を濾過し、吸湿性の白色の固形物を得て、それを水(7 mL)に溶解させ、pH = 3に酸性化し、冷却し、スクラッチングを用いて結晶化を誘導した。この沈殿物を濾過して白色の固形物を得て、それをメタノール中に懸濁し、1N HCl/ジエチルエーテル(4 mL)で処理して、減圧濃縮した。該残渣を水(5 mL)から凍結乾燥させて、Cap-136のHCl塩を白色の固形物として得た(817 mg, 40％)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 7.94 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.50-7.31 (m, 5H), 5.77 (s, 2H); 保持時間= 0.51 分 (条件-MS-W5); 95％ 均一性指数; LRMS: [M+H]⁺ C₁₁H₁₂N₂O₂として計算；計算値: 203.08; 実測値: 203.11.

Cap-137

Cap-137, 工程a

無水ジオキサン(10 mL)中の、1-クロロ-3-シアノイソキノリン (188 mg, 1.00 mmol;WO 2003/ 099274の方法に従って製造)(188 mg, 1.00 mmol)、フッ化セシウム(303.8 mg, 2.00 mmol)、ビス(トリ-tert-ブチルホスフィン)パラジウム ジクロリド(10 mg, 0.02 mmol)および2-(トリブチルスタンニル)フラン(378 μL, 1.20 mmol)の懸濁液を、窒素下において80℃で16時間加熱した後、25℃に冷却し、飽和したフッ化カリウム水溶液で、1時間、激しく撹拌して処理した。該混合液を酢酸エチルと水間に分配し、有機相を分離し、食塩水で洗浄し、Na₂SO₄で乾燥させ、濾過および濃縮した。該残渣をシリカゲル(0％から30％酢酸エチル/ヘキサンで溶出)で精製し、Cap-137，工程aを、白色の固形物として得て、それをそのまま用いた(230 mg, 105％)。 保持時間= 1.95 分 (条件-MS-W2); 90％ 均一性指数; LRMS: [M+H]⁺ C₁₄H₈N₂Oとして計算；計算値: 221.07; 実測値: 221.12.

Cap-137

四塩化炭素(1 mL)、アセトニトリル(1 mL)および水 (1.5 mL)中の、Cap 137，工程a(110 mg, 0.50 mmol)および過ヨウ素酸ナトリウム(438 mg, 2.05 mmol)の懸濁液に、三塩化ルテニウム水和物（三塩化ルテニウム hydrate）(2 mg, 0.011 mmol)を添加した。該混合液を25℃で2時間撹拌し、次いでジクロロメタンと水間に分配した。該水層を分離し、ジクロロメタンで2回以上抽出し、ジクロロメタン抽出物を合わせてNa₂SO₄で乾燥させ、濾過および濃縮した。該残渣をヘキサンでトリチュレートして、Cap-137(55 mg, 55％)を灰色がかった色の固形物として得た。保持時間= 1.10 分 (条件-MS-W2); 90％ 均一性指数; LCMS: [M+H]⁺ C₁₁H₈N₂O₂として計算；計算値: 200.08; 実測値: 200.08.

Cap 138から158
合成ストラテジー メソッドA

Cap-138

Cap-138, 工程a

撹拌した、乾燥テトラヒドロフラン(20 mL)中の5-ヒドロキシイソキノリン（hydroxisoquinoline）(WO 2003/ 099274の方法に従って製造)(2.0 g, 13.8 mmol)およびトリフェニルホスフィン(4.3 g, 16.5 mmol)の懸濁液に、乾燥メタノール(0.8 mL)およびアゾジカルボン酸ジエチル(3.0 mL, 16.5 mmol)を少しずつ添加した。該混合液を室温で20時間撹拌した後、酢酸エチルで希釈し、食塩水で洗浄し、Na₂SO₄で乾燥させ、濾過および濃縮した。該残渣をシリカゲルに予め吸収させ（preabsorb）、精製(40％酢酸エチル/ヘキサンで溶出)して、Cap-138，工程aを淡黄色の固形物として得た(1.00 g, 45％)。 ¹H NMR (CDCl₃, 500 MHz) δ 9.19 (s, 1H), 8.51 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.52-7.50 (m, 2H), 7.00-6.99 (m, 1H), 4.01 (s, 3H); 保持時間= 0.66 分 (条件 D2); 95％ 均一性指数; LCMS: [M+H]⁺ C₁₀H₁₀NOとして計算；計算値: 160.08; 実測値 160.10.

Cap-138, 工程b

撹拌した、Cap 138，工程a(2.34 g, 14.7 mmol)／無水ジクロロメタン(50 mL)溶液に、室温で、メタ-クロロ過安息香酸(77％, 3.42 g, 19.8 mmol)を一度に添加した。20時間撹拌した後、粉末炭酸カリウム(2.0 g)を添加し、該混合液を1時間室温で撹拌し、その後、濾過および濃縮して、Cap-138，工程bを、淡い黄色の固形物として得て、それは続く工程で用いるのに十分純粋であった(2.15 g, 83.3％)。 ¹H NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 8.73 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.11 (dd, J = 7.3, 1.7 Hz, 1H), 8.04 (d, J=7.1 Hz, 1H), 7.52 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H); 保持時間= 0.92 分, (条件-D1); 90％ 均一性指数; LCMS: [M+H]⁺ C₁₀H₁₀NO₂として計算；計算値: 176.07; 実測値: 176.0.

Cap-138, 工程c

撹拌した、乾燥アセトニトリル(20 mL)中のCap 138，工程b(0.70 g, 4.00 mmol)およびトリエチルアミン(1.1 mL, 8.00 mmol)の溶液に、室温で、窒素下においてトリメチルシリルシアニド(1.60 mL, 12.00 mmol)を添加した。該混合液を75℃で20時間加熱した後、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈して、飽和炭酸水素ナトリウム溶液および食塩水で洗浄し、その後、Na₂SO₄で乾燥させて溶媒を濃縮した。該残渣を、シリカゲル(5％酢酸エチル/ヘキサンから25％酢酸エチル/ヘキサンで溶出)でのフラッシュクロマトグラフィーで処理して、Cap-138，工程c(498.7 mg)を白色の結晶性固形物として得て、加えて223 mgのさらなるCap-138，工程cを濾過物から回収した。 ¹H NMR (CDCl₃, 500 MHz) δ 8.63 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.69 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.04 (s, 3H); 保持時間= 1.75 分, (条件-D1); 90％ 均一性指数; LCMS: [M+H]⁺ C₁₁H₉N₂Oとして計算；計算値: 185.07; 実測値: 185.10.

Cap-138

Cap-138，工程c(0.45 g, 2.44 mmol)を5N 水酸化ナトリウム溶液(10 mL)で処理し、得られた懸濁液を85℃で4時間加熱し、25℃に冷却し、ジクロロメタンで希釈し、1N塩酸で酸性化した。該有機相を分離し、食塩水で洗浄し、Na₂SO₄で乾燥させ、1/4の容積まで濃縮し、濾過して、Cap-138を黄色の固形物として得た(0.44g, 88.9％)。 ¹H NMR (DMSO-d₆, 400 MHz) δ 13.6 (ブロードのs, 1H), 8.56 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.16 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.71-7.67 (m, 1H), 7.30 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H); 保持時間= 0.70 分 (条件-D1); 95％ 均一性指数; LCMS: [M+H]⁺ C₁₁H₁₀NO₃として計算；計算値: 204.07; 実測値: 204.05.

合成ストラテジー メソッドB(Tetrahedron Letters, 2001, 42, 6707から)

Cap-139

Cap-139, 工程a

アルゴン-脱気した、無水トルエン(6 mL)中の1-クロロ-6-メトキシイソキノリン(1.2 g, 6.2 mmol; WO 2003/ 099274の方法に従って製造)、シアン化カリウム(0.40 g, 6.2 mmol)、1,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)ペンタン(0.27 g, 0.62 mmol)および酢酸パラジウム(II)(70 mg, 0.31 mmol)の懸濁液を含む、厚壁のスクリュートップバイアルに、N,N,N',N'-テトラメチルエチレンジアミン(0.29 mL, 2.48 mmol)を加えた。該バイアルの封をし、150℃で22時間加熱した後、25℃に冷却した。該反応混合液を酢酸エチルで希釈し、水および食塩水で洗浄し、Na₂SO₄で乾燥させ、濾過および濃縮した。該残渣を、シリカゲル（5％酢酸エチル/ヘキサンから25％酢酸エチル/ヘキサンで溶出）で精製し、Cap-139，工程aを白色の固形物として得た(669.7 mg)。 ¹H NMR (CDCl₃, 500 MHz) δ 8.54 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.41-7.39 (m, 1H), 7.13 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H); 保持時間= 1.66 分 (条件-D1); 90％ 均一性指数; LCMS: [M+H]⁺ C₁₁H₉N₂Oとして計算；計算値: 185.07; 実測値: 185.20.

Cap-139

Cap-139は、Cap 138に記載の方法に従って、5N NaOHを用いたCap-139，工程aの塩基性加水分解から製造した。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 13.63 (v ブロードのs, 1H), 8.60 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 8.45 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.44 (dd, J = 9.3, 2.5 Hz, 1H), 3.95 (s, 3H); 保持時間= 0.64 分 (条件-D1); 90％ 均一性指数; LCMS: [M+H]⁺ C₁₁H₁₀NO₃として計算；計算値: 204.07; 実測値: 204.05.

Cap-140

Cap-140, 工程a

激しく撹拌した、乾燥ジメチルアセトアミド(2 mL)中の1,3-ジクロロ-5-エトキシイソキノリン(482 mg, 2.00 mmol; WO 2005/ 051410の方法に従って製造)、酢酸パラジウム(II)(9 mg, 0.04 mmol)、炭酸ナトリウム(223 mg, 2.10 mmol)および1,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)ペンタン(35 mg, 0.08 mmol)の混合液に、25℃で、窒素下において、N,N,N',N'-テトラメチルエチレンジアミン(60 mL, 0.40 mmol)を添加した。10分後、該混合液を150℃に加熱し、次いでアセトンシアノヒドリンの保存液(457 μLのアセトンシアノヒドリン／4.34 mL DMAから製造)を、シリンジポンプを用いて、1 mLずつ、18時間にかけて添加した。次いで、該混合液を酢酸エチルと水間に分配し、有機層を分離し、食塩水で洗浄し、Na₂SO₄で乾燥させ、濾過および濃縮した。該残渣を、シリカゲル（10％酢酸エチル/ヘキサンから40％酢酸エチル/ヘキサンで溶出）で精製し、Cap-140，工程aを黄色の固形物として得た(160 mg, 34％)。 保持時間= 2.46 分 (条件-MS-W2); 90％ 均一性指数; LCMS: [M+H]⁺ C₁₂H₉ClN_2Oとして計算；計算値: 233.05; 実測値: 233.08.

Cap-140

Cap-140は、以下に記載のCap 141の製造方法に記載のように、12N HClを用いたCap-140，工程aの酸加水分解により製造した。 保持時間= 2.24 分 (条件-MS-W2); 90％ 均一性指数; LCMS: [M+H]⁺ C₁₂H₁₁ClNO₃として計算；計算値: 252.04; 実測値: 252.02.

Cap-141

Cap-141, 工程a

Cap-141, 工程aは、Cap-140, 工程aの製造方法に記載されるとおり(上記参照)、1-ブロモ-3-フルオロイソキノリン(J. Med. Chem. 1970, 13, 613に概説された方法を用いて3-アミノ-1-ブロモイソキノリンから製造)から製造した。 ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 8.35 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.83 (t, J = 7.63 Hz, 1H), 7.77-7.73 (m, 1H), 7.55 (s, 1H); 保持時間= 1.60 分 (条件-D1); 90％ 均一性指数; LCMS: [M+H]⁺ C₁₀H₆FN₂として計算；計算値: 173.05; 実測値: 172.99.

Cap-141

Cap-141, 工程a(83 mg, 0.48 mmol)を12N HCl(3 mL)で処理して、得られたスラリーを80℃で16時間加熱した後、室温に冷却し、水(3 mL)で希釈した。該混合液を10分間撹拌した後、濾過し、Cap-141をオフホワイト色の固形物として得た(44.1 mg, 47.8％)。該濾過物をジクロロメタンで希釈し、食塩水で洗浄して、Na₂SO₄で乾燥させ、濃縮して、さらなるCap-141を得た（それはそのまま続く工程で用いるのに十分純粋であった）(29.30 mg, 31.8％)。 ¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz) δ 14.0 (ブロードのs, 1H), 8.59-8.57 (m, 1H), 8.10 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.88-7.85 (m, 2H), 7.74-7.71 (m, 1H); 保持時間= 1.33 分 (条件-D1); 90％ 均一性指数; LCMS: [M+H]⁺ C₁₀H₇FNO₂として計算；計算値: 192.05; 実測値: 191.97.

Cap-142

Cap-142, 工程a

Cap-142, 工程aは、Cap-138, 工程bおよびcの２つの工程の製造方法に記載のとおり、4-ブロモイソキノリン N-オキシドから製造した。 保持時間= 1.45 分 (条件-MS-W1); 90％ 均一性指数; LCMS: [M+H]⁺ C₁₀H₆BrN₂として計算；計算値: 232.97; 実測値: 233.00.

Cap-142, 工程b

アルゴン-脱気した、無水トルエン(1 mL)中のCap-142, 工程a(116 mg, 0.50 mmol)、リン酸三カリウム(170 mg, 0.80 mmol)、酢酸パラジウム(II)(3.4 mg, 0.015 mmol)および2-(ジシクロヘキシルホスフィノ)ビフェニル(11 mg, 0.03 mmol)の懸濁液に、モルホリン(61 μL, 0.70 mmol)を添加した。該混合液を100℃で16時間加熱し、25℃に冷却し、珪藻土(セライト（登録商標）)により濾過した。シリカゲル（10％から70％酢酸エチル/ヘキサンで溶出）で該残渣を精製し、Cap-142, 工程b(38 mg, 32％)を黄色の固形物として得て、続く工程にそのまま用いた。 保持時間= 1.26 分 (条件-MS-W1); 90％ 均一性指数; LCMS: [M+H]⁺ C₁₄H₁₄N₃Oとして計算；計算値: 240.11; 実測値: 240.13.

Cap-142

Cap-142は、Cap 138の方法に記載のとおり、5N 水酸化ナトリウムを用いて、Cap-142, 工程bから製造した。保持時間= 0.72 分 (条件-MS-W1); 90％ 均一性指数; LCMS: [M+H]⁺ C₁₄H₁₅N₂O₃として計算；計算値: 259.11; 実測値: 259.08.

Cap-143

Cap-143, 工程a

撹拌した3-アミノ-1-ブロモイソキノリン(444 mg, 2.00 mmol)／無水ジメチルホルムアミド(10 mL)溶液に、水素化ナトリウム(60％, 未洗浄（unwashed）, 96 mg, 2.4 mmol)を一度に添加した。該混合液を25℃で5分間撹拌した後、2-ブロモエチルエーテル(90％, 250 μL, 2.00 mmol)を添加した。該混合液を、さらに25℃で5時間および75℃で72時間撹拌し、その後、25℃に冷却し、飽和塩化アンモニウム溶液でクエンチして酢酸エチルで希釈した。有機層を分離し、水および食塩水で洗浄し、Na₂SO₄で乾燥させ、濾過および濃縮した。シリカゲル（0％から70％酢酸エチル/ヘキサンで溶出）で該残渣を精製し、Cap-143, 工程aを黄色の固形物として得た(180 mg, 31％)。 保持時間= 1.75 分 (条件-MS-W1); 90％ 均一性指数; LCMS: [M+H]⁺ C₁₃H₁₄BrN₂Oとして計算；計算値: 293.03; 実測値: 293.04.

Cap-143

冷却した(-60℃)、Cap-143, 工程a(154 mg, 0.527 mmol)／無水テトラヒドロフラン(5 mL)溶液に、n-ブチルリチウム／ヘキサン(2.5 M, 0.25 mL, 0.633 mmol)溶液を添加した。10分後、該反応混合液に乾燥二酸化炭素を10分間バブルし、その後、1N HClでクエンチし、25℃に昇温させた。次いで、該混合液をジクロロメタン(3 x 30 mL)で抽出し、有機抽出物を合わせて減圧濃縮した。逆相HPLC(MeOH/水/TFA)により該残渣を精製し、Cap-143を得た(16 mg, 12％)。 保持時間= 1.10 分 (条件-MS-W1); 90％ 均一性指数; LCMS: [M+H]⁺ C₁₄H₁₅N₂O₃として計算；計算値: 259.11; 実測値: 259.08.

Cap-144

Cap-144, 工程a

1,3-ジクロロイソキノリン(2.75 g, 13.89 mmol)を、少しずつ、冷却した(0℃)発煙硝酸(10 mL)および濃硫酸(10 mL)の溶液に添加した。該混合液を0℃で0.5時間撹拌した後、徐々に25℃に昇温させ、そこで16時間撹拌した。次いで、該混合液を砕いた氷（chopped ice）および水の入ったビーカーに注ぎ入れ、得られた懸濁液を0℃で1時間撹拌した後、濾過して、Cap-144, 工程a(2.73 g, 81％)を黄色の固形物として得て、それをそのまま用いた。 保持時間= 2.01 分. (条件-D1); 95％ 均一性指数; LCMS: [M+H]⁺ C₉H₅Cl₂N₂O₂として計算；計算値: 242.97; 実測値: 242.92.

Cap-144, 工程b

Cap-144, 工程a(0.30 g, 1.23 mmol)をメタノール(60 mL)に溶解させて、酸化白金(30 mg)で処理し、該懸濁液を、7 psiのH₂で1.5時間、パール(Parr)水素化の処理をした。次いで、ホルマリン(5 mL)およびさらなる酸化白金(30 mg)を添加し、該懸濁液を、45 psiのH₂で13時間、パール水素化の再処理をした。その後、珪藻土(セライト（登録商標）)により吸引濾過し、1/4の容積まで濃縮した。生じた沈殿物を吸引濾過して、表題の化合物を黄色の固形物として得て、それをシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（5％酢酸エチル/ヘキサンから25％酢酸エチル/ヘキサンで溶出）で処理して、Cap-144, 工程b(231 mg, 78％)を淡黄色の固形物として得た。保持時間= 2.36 分 (条件-D1); 95％ 均一性指数; ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.02 (s, 1H), 7.95 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.57-7.53 (m, 1H), 7.30 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 2.88 (s, 6H); LCMS: [M+H]⁺ -C₁₁H₁₁Cl₂N₂として計算；計算値: 241.03; 実測値: 241.02. HRMS: [M+H]⁺ -C₁₁H₁₁Cl₂N₂として計算；計算値: 241.0299-; 実測値: 241.0296.

Cap-144, 工程c

Cap-144, 工程cは、Cap-139, 工程aの製造において記載された方法に従って、Cap-144, 工程bから製造した。保持時間= 2.19 分 (条件-D1); 95％ 均一性指数; LCMS: [M+H]⁺ C₁₂H₁₁ClN₃として計算；計算値: 232.06; 実測値: 232.03. HRMS: [M+H]⁺ -C₁₂H₁₁ClN₃として計算；計算値: 232.0642; 実測値: 232.0631.

Cap-144

Cap-141に記載の方法に従って、Cap-144を製造した。保持時間= 2.36 分 (条件-D1); 90％; LCMS: [M+H]⁺ -C₁₂H₁₂ClN₂O₂として計算；計算値: 238.01; 実測値: 238.09.

Cap-145から62
Cap-145から162は、他に記載のない限り以下の概説の通り、Cap-138(メソッドA)またはCap-139(メソッドB)の製造について記載された方法に従って、適当な1-クロロイソキノリンから製造した。

Cap-163

2-ケト酪酸(1.0 g, 9.8 mmol)／ジエチルエーテル(25 ml)溶液に、フェニルマグネシウムブロミド(22 ml, 1M／THF)を滴下した。該反応液を、窒素下において、〜25℃で17.5時間、撹拌した。該反応液を1N HClで酸性化して、該生成物を酢酸エチル(3 x 100 ml)で抽出した。有機層を合わせて、水、続いて食塩水で洗浄し、MgSO₄で乾燥させた。減圧濃縮した後、白色の固形物を得た。該固形物をヘキサン/酢酸エチルから再結晶化して、Cap-163を白色の針状晶（needle）(883.5 mg)として得た。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 500 MHz): 12.71 (ブロードのs, 1 H), 7.54-7.52 (m, 2H), 7.34-7.31 (m, 2H), 7.26-7.23 (m, 1H), 5.52-5.39 (ブロードのs, 1H), 2.11 (m, 1H), 1.88 (m, 1H), 0.79 (見かけ上のt, J = 7.4 Hz, 3H).

Cap-164

MeOH(40 mL)中の2-アミノ-2-フェニル酪酸(1.5 g, 8.4 mmol)、ホルムアルデヒド(14 mL, 37％／水)、1N HCl(10 mL)および10％ Pd/C(0.5 mg)の混合液を、パール（Parr）ボトル中で42時間、50 psiで、H₂に曝露した。該反応液をセライトにより濾過して減圧濃縮し、該残渣をMeOH(36 mL)に溶解させ、該生成物を逆相HPLC(MeOH/H₂0/TFA)を用いて精製して、Cap-164のTFA塩を白色の固形物として得た(1.7 g)。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 500 MHz) 7.54-7.47 (m, 5H), 2.63 (m, 1H), 2.55 (s, 6H), 2.31 (m, 1H), 0.95 (見かけ上のt, J = 7.3 Hz, 3H).

Cap-165

1,2-ジクロロエタン(7 ml)中の2-アミノ-2-インダンカルボン酸(258.6 mg, 1.46 mmol)およびギ酸(0.6 ml, 15.9 mmol)の混合液に、ホルムアルデヒド(0.6 ml, 37％／水)を添加した。該混合液を〜25℃で15分分間撹拌した後、70℃で8時間加熱した。揮発性成分を減圧除去し、該残渣をDMF(14 mL)に溶解させ、逆相HPLC(MeOH/H₂0/TFA)により精製して、Cap-165のTFA塩を粘稠性の油状物として得た(120.2 mg)。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 500 MHz): 7.29-7.21 (m, 4 H), 3.61 (d, J = 17.4 Hz, 2H), 3.50 (d, J = 17.4 Hz, 2H), 2.75 (s, 6H). LC/MS: [M+H]⁺ C₁₂H₁₆NO₂として計算；計算値: 206.12; 実測値: 206.07.

Cap-166aおよび-166b

Cap-166aおよび-166bは、ベンジルエステル中間体を85:15 ヘプタン/エタノール混合液により10 mL/分溶出速度で25分間溶出するsemi-prep Chrialcel OJ column, 20 x 250 mm, 10 μmを用いて分離したことを除いて、Cap-7aおよびCap-7bの合成について記載されたメソッドに従って、(1S, 4S)-(+)-2-メチル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン(2HBr)から製造した。Cap-166b: ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 500 MHz): 7.45 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 7.27-7.19 (m, 3H), 4.09 (s, 1H), 3.34 (見かけ上のブロードのs, 1H), 3.16 (見かけ上のブロードのs, 1H), 2.83 (d, J=10.1 Hz, 1H), 2.71 (m, 2H), 2.46 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 1.77 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 1.63 (d, J = 9.8 Hz, 1H). LC/MS: [M+H]⁺ C₁₄H₁₉N₂O₂として計算；計算値: 247.14; 実測値: 247.11.

Cap-167

ラセミのBoc-1,3-ジヒドロ-2H-イソインドールカルボン酸(1.0g, 3.8 mmol)／20％ TFA/CH₂Cl₂溶液を、〜25℃で4時間撹拌した。全ての揮発性成分を減圧除去した。MeOH中の、得られた粗物質、ホルムアルデヒド(15 mL, 37％／水)、1N HCl(10 mL)および10％ Pd/C(10 mg)の混合液を、パールボトル中で23時間、H₂(40 PSI)に曝露した。該反応混合液をセライトにより濾過し、減圧濃縮して、Cap-167を黄色の泡状物質として得た(873.5 mg)。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 500 MHz) 7.59-7.38 (m, 4H), 5.59 (s, 1H), 4.84 (d, J = 14 Hz, 1H), 4.50 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 3.07 (s, 3H). LC/MS: [M+H]⁺ C₁₀H₁₂NO₂として計算；計算値: 178.09; 実測値: 178.65.

Cap-168

ラセミのCap-168は、Cap-167の製造について記載された方法に従って、ラセミのBoc-アミノインダン-1-カルボン酸から製造した。該粗物質をそのように用いた。

Cap-169

MeOH(60 mL)中の2-アミノ-2-フェニルプロパン酸塩酸塩(5.0 g, 2.5 mmol)、ホルムアルデヒド(15 ml, 37％／水)、1N HCl(15 ml)、および10％ Pd/C(1.32 g)の混合液を、パールボトルに入れ、水素(55 PSI)下において4日間振盪させた。該反応混合液を、セライトにより濾過し、減圧濃縮した。該残渣をMeOHに溶解させ、逆相プレパラティブ-HPLC(MeOH/水/TFA)により精製して、Cap-169のTFA塩を粘稠性の半-固形物として得た(2.1 g)。 ¹H NMR (CDCl₃, δ = 7.26 ppm, 500 MHz): 7.58-7.52 (m, 2 H), 7.39-7.33 (m, 3H), 2.86 (ブロードのs, 3H), 2.47 (ブロードのs, 3H), 1.93 (s, 3H). LC/MS: [M+H]⁺ C₁₁H₁₆NO₂として計算；計算値: 194.12; 実測値: 194.12.

Cap-170

(S)-2-アミノ-2-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)酢酸(505mg; 3.18mmol;Astatechから入手)／水(15ml)に、炭酸ナトリウム(673mg; 6.35mmol)を添加し、得られた混合液を0℃に冷却した後、クロロぎ酸メチル(0.26ml; 3.33mmol)を5分かけて滴下した。該反応液を、浴槽で周囲温度に緩和しながら、18時間撹拌した。次いで、該反応混合液を1N HClと酢酸エチル間に分配した。有機層を除去し、水層をさらなる２部の酢酸エチルでさらに抽出した。有機層を合わせて食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過および減圧濃縮して、無色の残渣であるCap-170を得た。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 12.65 (1 H, ブロードのs), 7.44 (1 H, d, J=8.24 Hz), 3.77 - 3.95 (3 H, m), 3.54 (3 H, s), 3.11 - 3.26 (2 H, m), 1.82 - 1.95 (1 H, m), 1.41 - 1.55 (2 H, m), 1.21 - 1.39 (2 H, m); LC/MS: [M+H]⁺ C₉H₁₆NO₅として計算；計算値: 218.1; 実測値 218.1.

Cap-171

酢酸エチル(7 ml)およびCH₂Cl₂(4.00 ml)中の2-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)-2-(オキセタン-3-イリデン)酢酸メチル(200 mg, 0.721 mmol; Il Farmaco (2001), 56, 609-613)の溶液を、窒素を10分間バブルすることにより脱気した。次いで、二炭酸ジメチル(0.116 ml, 1.082 mmol)およびPd/C(20 mg, 0.019 mmol)を添加し、該反応混合液を、水素バルーンを装着して周囲温度で終夜撹拌し、その時点でTLC(95:5 CH₂Cl₂ / MeOH: 1g Ce(NH₄)₂SO₄、6g モリブデン酸アンモニウム、6ml 硫酸、および100ml 水から作製した染色剤で可視化した)により変換の完了が示された。該反応液をセライトにより濾過して濃縮した。該残渣を、Biotage（登録商標）(25サンプレットにジクロロメタンとともにロード; 3CVのジクロロメタン、次いで250ml以上の0から5％ MeOH/ジクロロメタン、その後250mlの5％ MeOH/ジクロロメタンでのホールドにより、25Sカラムで溶出; 9ml フラクション)により精製した。目的の物質を含有するフラクションを集めて、120mg(81％)の、無色の油状物としての2-(メトキシカルボニルアミノ)-2-(オキセタン-3-イル)酢酸メチルに濃縮した。 ¹H NMR (500 MHz, クロロホルム-D) δ ppm 3.29 - 3.40 (m, J=6.71 Hz, 1 H) 3.70 (s, 3 H) 3.74 (s, 3 H) 4.55 (t, J=6.41 Hz, 1 H) 4.58 - 4.68 (m, 2 H) 4.67 - 4.78 (m, 2 H) 5.31 (ブロードのs, 1 H). LC/MS: [M+H]⁺ C₈H₁₄NO₅として計算；計算値: 204.2; 実測値 204.0.

THF(2 mL)および水(0.5 mL)中の2-(メトキシカルボニルアミノ)-2-(オキセタン-3-イル)酢酸メチル(50 mg, 0.246 mmol)に、水酸化リチウム一水和物(10.33 mg, 0.246 mmol)を添加した。得られた溶液を周囲温度で終夜撹拌した。TLC(1:1 EA / Hex; Hanessian染色液[1g Ce(NH₄)₂SO₄, 6g モリブデン酸アンモニウム, 6ml 硫酸, および100ml 水])により、〜10％の出発物質の残存が示された。さらなる3mgのLiOHを添加して終夜撹拌し、その時点で、TLCにより出発物質が残存しないことが示された。減圧濃縮して高真空に終夜設置し、55mgの2-(メトキシカルボニルアミノ)-2-(オキセタン-3-イル)酢酸リチウムを無色の固形物として得た。 ¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 3.39 - 3.47 (m, 1 H) 3.67 (s, 3 H) 4.28 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 4.64 (t, J=6.26 Hz, 1 H) 4.68 (t, J=7.02 Hz, 1 H) 4.73 (d, J=7.63 Hz, 2 H).

（実施例）
本開示は特定の実施態様に関連して記載されるが、それはその発明の範囲を制限することを意図するものではない。一方、本開示は、全ての代替形態、改変形態、および同等形態を、特許請求の範囲内に含み得るものとして包含する。従って、特定の実施態様を含む以下の実施例は、本発明の１つの実例を説明し、該実施例は特定の実施態様の例示目的であり、そしてその方法および概念的態様の最も有用で且つ容易に理解される記載であると信じられるものを提供するために提示するものであると解される。

特に断りのない限り、溶液パーセントは重量対容量の関係を表し、溶液比は容量対容量の関係を表す。核磁気共鳴(NMR)スペクトルは、Bruker 300、400、または500 MHz分光計のいずれかで記録し; 化学シフト(δ)は百万分率で報告する。フラッシュクロマトグラフィーは、Stillのフラッシュクロマトグラフィー技法(J. Org. Chem. 1978, 43, 2923)に従って、シリカゲル(SiO₂)で実施した。

純度評価および低分解能質量分析を、Waters Micromass ZQ MSシステムと連結した島津LCシステムで実施した。保持時間は装置間でわずかに変化しうることに留意すべきである。保持時間(RT)の決定において用いたLC条件は以下であった。
保持時間は以下のLC/MS条件に従って決定した。
条件1
カラム = Phenomenex-Luna 3.0X 50 mm S10
開始％B = 0
最終％B = 100
グラジエント時間 = 2 分
停止時間 = 3 分
流速 = 4 mL/分
波長 = 220 nm
溶媒A = 0.1％TFA／10％メタノール/90％H₂0
溶媒B = 0.1％TFA／90％メタノール/10％H₂0
条件2
カラム = Phenomenex-Luna 4.6X50 mm S10
開始％B = 0
最終％B = 100
グラジエント時間 = 3 分
停止時間 = 3 分
流速 = 4 mL/分
波長 = 220 nm
溶媒A = 0.1％TFA／10％メタノール/90％H₂0
溶媒B = 0.1％TFA／90％メタノール/10％H₂0
条件3
カラム = LCMS. GEMINI C-18 4.6 × 50 mm
開始％B = 0
最終％B = 100
グラジエント時間 = 3 分
停止時間 = 4 分
流速 = 4 mL/分
波長 = 220 nm
溶媒A = 0.1％NH₄OAc／10％アセトニトリル/90％H₂0
溶媒B = 0.1％NH₄OAc／90％アセトニトリル/10％H₂0
条件4
カラム = Phenomenex-Luna 3.0X 50 mm S10
開始％B = 0
最終％B = 100
グラジエント時間 = 4 分
停止時間 = 5 分
流速 = 4 mL/分
波長 = 220 nm
溶媒A = 0.1％TFA／10％メタノール/90％H₂0
溶媒B = 0.1％TFA／90％メタノール/10％H₂0
条件 5
カラム 30 mm x = Luna C18 4.6
開始％B = 0
最終％B = 100
グラジエント時間 = 2 分
停止時間 = 3 分
流速 = 5 mL/分
波長 = 220 nm
溶媒A = 0.1％NH₄OAc／10％アセトニトリル/90％H₂0
溶媒B = 0.1％NH₄OAc／90％アセトニトリル/10％H₂0

合成経路1.

参考: (ウィティッヒ反応/還元/環化) J.Med.Chem. (2005) 48, 7351-7362.

カリウムtert-ブトキシド／THF(80 mL)の1M溶液を、(3-カルボキシプロピル)トリフェニルホスホニウム ブロミド(17 g, 40 mmol)／無水DMSO(20 mL)に、窒素下において24℃で滴下し、該溶液を30分撹拌した後、3-ブロモベンズアルデヒド(4.7 mL, 40 mmol)を添加した。数分後、沈殿物が観察され、さらなる20 mLのDMSOを添加して溶媒和を補助し、該反応液を18時間撹拌した。該溶液を水(120 mL)に注ぎ入れ、クロロホルムで洗浄した。該水層を濃HClで酸性化し、クロロホルム(3 x 250 mL)で抽出した。有機相を濃縮し、65(M)Biotage（登録商標）シリカゲルカラムにアプライし; 2Lを超える15-65％ B (A = ヘキサン; B = EtOAc)からのグラジエント溶出により、実施例1、(E)-5-(3-ブロモフェニル)ペンタ-4-エン酸 8.2 g(82％)を得た。 ¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7.45 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 7.30 (dt, J = 7.7, 1.5 Hz, 1H), 7.2-7.16 (m, 1H), 7.12 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 6.40-6.32 (m, 1H), 6.23-6.14 (m, 1H), 2.52 (s, 4H). 保持時間= 2.0 分 (条件1); LRMS: C₁₁H₁₁BrO₂として計算；計算値: 252.97; 実測値: 252.98 (M-H).

実施例1, (E)-5-(3-ブロモフェニル)ペンタ-4-エン酸(4 g, 15.8 mmol)を無水エタノール(200 mL)に溶解させ、窒素でフラッシュした後、5％硫化白金炭素(2.5 g)を添加した。該溶液を大気圧において水素でフラッシュし、5時間撹拌した。該触媒を、珪藻土(セライト（登録商標）)を用いた濾過により除去し、該溶媒を直ちにロータリーエバポレーションにより除去して(エステル化を最小にするため)、実施例2, 5-(3-ブロモフェニル)ペンタン酸4 g(99％)を得て、それをさらなる精製は行わずにその後の工程に用いた。 ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.31-7.30 (m, 2H), 7.13 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.09-7.07 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 2.60 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.37 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 1.68-1.65 (m, 4H). 保持時間= 2.1 分 (条件1); LRMS: C₁₁H₁₃BrO₂として計算；計算値: 255.00; 実測値: 254.99 (M-H).

参考: (アルキル化/加水分解) J.Am.Chem.Soc. (1946) 68, 1468-1470.

ヒューニッヒ塩基(26.5 mL, 0.15 mol)を、乾燥DMF(400 mL)中の3-ブロモベンジルブロミド(38g, 0.15 mol)およびN-メチル-β-アラニンニトリル(14.2 mL, 0.15 mol)に添加した。該溶液を、16時間撹拌し、ほぼ乾固するまで減圧濃縮して、エーテル/EtOAcでトリチュレートし、濾過した。[第２の反応は、12 gで繰り返した]。濾液を合わせてロータリーエバポレーターで濃縮し、該残渣を、65(M)Biotage（登録商標）シリカゲルカラム; セグメント1: グラジエント溶出 1.3 Lにわたる5-15％ B; セグメント2: 6.75 Lにわたる15％-100％ B (A = ヘキサン; B = EtOAc)にチャージして(CH₂Cl₂)、実施例4, 3-((3-ブロモベンジル)(メチル)アミノ)-プロパンニトリル 44.4 g(88％)を得た。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7.54 (s, 1H), 7.46 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.30 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 3.54 (s, 2H), 2.71 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.63 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H). 保持時間= 1.1 分 (条件2); LRMS: C₁₁H₁₃BrN₂として計算；計算値: 253.03; 実測値: 253.05 (M+H).

6N HClを、1 L スクリューキャップ圧力容器中の実施例4, 3-((3-ブロモベンジル)(メチル)アミノ)-プロパンニトリル(44.4 g, 0.175 mol)に添加し、該密閉した溶液を90℃で40時間加熱した。冷却後、該溶液を1/4の量まで減圧濃縮した。濾過、母液の濃縮、および濾過(2x)により、定量的収量の実施例5, 3-((N-(3-ブロモベンジル)-N-メチル)アミノ)プロパン酸を白色の固形物(HCl塩)として得た。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7.90 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 7.3, 1.5 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.43 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 4.33 (ブロード. s, 2H), 3.34 (ブロード. s, 2H), 2.88 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.63 (s, 3H). 保持時間= 1.3 分 (条件2); LRMS: C₁₁H₁₁BrNO₂として計算；計算値: 272.03; 実測値: 272.10 (M+H).

実施例2, 5-(3-ブロモフェニル)ペンタン酸(4 g, 15.6 mmol)をポリリン酸(15 g)に溶解させ、昇華による生成物の損失を防ぐため封をした150 mL圧力容器中で、140℃に8時間加熱した。該反応混合液を、150 mLの水とCH₂Cl₂(600 mL)間に分配した。[CH₂Cl₂の沸騰を避けるために注意が必要である] 該有機相を、水、食塩水で洗浄し、濃縮した。該粗生成物を、40(S)Biotage（登録商標）シリカゲルカラムにアプライし、5-60％(EtOAc/Hex)でグラジエント溶出し、実施例3, 2-ブロモ-6,7,8,9-テトラヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン-5-オン 1.7 g(40％)を得た。 ¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7.56 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.41 (dd, J = 8.4 Hz, 1.8 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 2.86 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.69 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 1.90-1.73 (m, 4H). 保持時間= 2.1 分 (条件1); LRMS: C₁₁H₁₁BrOとして計算；計算値: 239.00; 実測値: 239.14 (M+H).

参考: (環化) JACS 1962 27, 70-76.

塩化チオニル(13.2 mL, 181 mmol)を、窒素雰囲気下において、1L丸底フラスコ中の実施例2a, 6-(3-ブロモフェニル)ヘキサン酸(16 g, 59.2 mmol)に添加した（無溶媒(neat)）。該混合液を60℃に2時間温め、過剰量の試薬を減圧除去し、該残渣を共沸条件で処理した(ベンゼン 3x)。該酸塩化物を二硫化炭素(550 mL)に溶解させ、三塩化アルミニウム(26.3 g, 198 mmol)／二硫化炭素(1315 mL)溶液にカニューレで添加し、還流加熱した。該反応液を20時間撹拌し、冷却し、デカンテーションし、濃縮して、得られた固形物を、ジエチルエーテル/THF(1:1, 1L)、および1N HCl(500 mL)の中で1.5時間撹拌した。該有機層を濾過し、水、および食塩水で洗浄して、実施例3c, 2-ブロモ-7,8,9,10-テトラヒドロベンゾ[8]アヌレン-5(6H)-オン 10.1 g(66％)を無色の油状物として得た。 ¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7.55 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.38 (dd, J = 8.4 Hz, 1.8 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 2.99 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.89 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 1.85-1.73 (m, 4H), 1.52-1.44 (m, 2H). 保持時間= 2.8 分 (条件2); LRMS: C₁₂H₁₃BrOとして計算；計算値: 253.02; 実測値: 253.15 (M+H).

参考: J.Org.Chem. USSR (Engl.Transl.) (1985) p 2201-2205.

マグネシウム(0.636 g, 26.2 mmol)を、窒素下で4-ブロモ-1,1,1-トリフルオロブタン(5 g, 26.2 mmol)／THF(100 mL)溶液に添加した。該溶液を24℃で18時間撹拌し、グリニャール試薬を、窒素下において-78℃で、4-ブロモベンズアルデヒド(4.85 g, 26.2 mmol)／THF(50 mL)溶液に、カニューレを介して移し入れた。冷却浴を取り外し、該反応液を温めて18時間撹拌し、Et₂O(1 容量)で希釈し、飽和NH₄Cl溶液でクエンチし、食塩水で洗浄した。濃縮し、CH₂Cl₂ に溶解させ、40M Biotage（登録商標）シリカゲルカートリッジにチャージした。1 Lにわたる15％〜100％ B(A/B ヘキサン/EtOAc)でグラジエント溶出を実施し、1-(4-ブロモフェニル)-5,5,5-トルフルオロペンタン-1-オール 6.4 g(82％)を得た。

PCC(9.29 g, 43.1 mmol)を9 g SiO₂と混合し、乳鉢と乳棒で粉砕した後、ジクロロメタン(350 mL)に溶解された1-(4-ブロモフェニル)-5,5,5-トルフルオロペンタン-1-オール(6.4 g, 21.54 mmol)溶液に、一度に添加した。該反応液を4時間撹拌し、珪藻土(セライト（登録商標）)により濾過し、濃縮し、160 g Thomson（登録商標）シリカゲルカラムにアプライした。溶出: 1.5 Lにわたる10 - 60％ B(A/B ヘキサン/EtOAc)により、実施例5b, 1-(4-ブロモフェニル)-5,5,5-トルフルオロペンタン-1-オン 6.1 g(86％)を得た。 ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.81 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 3.04 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.25-2.16 (m, 2H), 2.05-1.99 (m, 2H). 保持時間= 2.1 分 (条件1). LCMS: C₁₁H₁₁BrF₃Oとして計算；計算値: 295.00; 実測値: 295.00 (M+H).

参考: (イミダゾール合成) Bioorg. Med. Chem. Lett. 2002 1009-1011.

実施例3, 2-ブロモ-6,7,8,9-テトラヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン-5-オン (1.5 g, 5.9 mmol)を、2:1 Et₂O/THF(120 mL)に溶解させ、1N HCl／Et₂O(9 mL)を添加した。該溶液を0℃に冷却した後、亜硝酸イソ-アミル(1.2 mL, 9 mmol)を添加し、該反応液を24℃で18時間撹拌し、濃縮し、25(M)Biotage（登録商標）シリカゲルカラムにアプライした。1Lにわたる15-100％ B(A = ヘキサン; B = EtOAc)でグラジエント溶出し、実施例6, (E)-2-ブロモ-6-(ヒドロキシイミノ)-6,7,8,9-テトラヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン-5-オン 1 g(64％)を得た。 保持時間= 1.9 分 (条件1). LCMS: C₁₁H₁₀NBrO₂として計算；計算値: 268; 実測値: 268 (M+H).

濃28％水酸化アンモニウム溶液(12 mL)を、メタノール(35 mL)中の実施例6, (E)-2-ブロモ-6-(ヒドロキシイミノ)-6,7,8,9-テトラヒドロ-5H-ベンゾ[7]-アヌレン-5-オン(1g, 3.7 mmol)およびN-Boc-L-プロリナール(850 mg, 4.3 mmol)の溶液に添加し、該反応混合液を18時間24℃で撹拌し、ある程度（partially）濃縮してメタノールを除去し、該水性残渣をCH₂Cl₂で抽出した。該有機相を水で洗浄し、濃縮して、該粗生成物を40 (S) Biotage（登録商標）シリカゲルカラムにチャージし(CH₂Cl₂); グラジエント溶出（セグメント1. 300 mLにわたる15％-30％ B; セグメント2. 700 mL (A = 1:1 ヘキサン/CH₂Cl₂; B = EtOAc)にわたる30％-100％ B）により実施例7, 700 mg(44％)を得た。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 11.3 (ブロード. s, 1H), 7.91 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.35 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 5.0/4.87 (m, 1H), 3.51-3.46 (m, 1H), 3.42-3.36 (m, 1H), 2.90-2.70 (m, 4H), 2.27-1.80 (m, 6H), 1.38/1.11 (s, 9H). 保持時間= 1.9 分 (条件1). LRMS: C₂₁H₂₆BrN₃O₃として計算；計算値: 488.12; 実測値: 488.14 (M+H). HRMS: C₂₁H₂₆BrN₃O₃として計算；計算値: 488.1236; 実測値: 488.1242 (M+H).

亜リン酸トリエチル(0.78 mL, 4.7 mmol)を実施例7(700 mg, 1.57 mmol)／DMF(2 mL)溶液に添加し、該溶液を窒素雰囲気下において80℃で18時間加熱した。該反応混合液を酢酸エチル(100 mL)に溶解し、水および食塩水で洗浄した。濃縮後、該粗生成物を40 (S) Biotage（登録商標）シリカゲルカラムにアプライし、グラジエント溶出; セグメント1. 300 mLにわたる5％-15％ B; セグメント2. 600 mLにわたる15％-100％ B(A = CH₂Cl₂; B = EtOAc)で処理して、実施例8, 675 mg(100％)を得た。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 11.7 (ブロード. s, 1H), 7.92 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 4.78/4.69 (ブロードのs, 1H), 3.57-3.48 (m, 1H), 3.38-3.32 (m, 1H), 2.85-2.78 (m, 4H), 2.28-1.77 (m, 6H), 1.39/1.14 (s, 9H). 保持時間= 1.9 分 (条件1). LRMS: C₂₁H₂₆BrN₃O₂として計算；計算値: 432.13; 実測値: 432.14 (M+H).

合成経路2

(S)-5-(ヒドロキシメチル)ピロリジン-2-オン(10 g, 87 mmol)／ジクロロメタン(50 mL)溶液に、tert-ブチルジフェニルクロロシラン(25.6 g, 93 mmol)、Et₃N(12.1 mL, 87 mmol)およびDMAP(1.06 g, 8.7 mmol)を添加した。該混合液を、室温で、出発ピロリジノンが完全に消費されるまで撹拌した後、ジクロロメタン(50 mL)で希釈し、水(50 mL)で洗浄した。該有機層を乾燥させ(Na₂SO₄)、濾過し、減圧濃縮し、該粗物質をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル; 30〜100％の酢酸エチル/ヘキサン)で処理して、シリルエーテルを無色の油状物として得た(22.7 g, 74％収率)。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm) 7.69 (ブロードのs, 1H), 7.64-7.61 (m, 4H), 7.50-7.42 (m, 6H), 3.67-3.62 (m, 1H), 3.58-3.51 (m, 2H), 2.24-2.04 (m, 3H), 1.87-1.81 (m, 1H), 1.00 (s, 9H). LC/MS (M+H) = 354.58.

シリルエーテル(31.2 g, 88.3 mmol)、Et₃N(8.93 g, 88 mmol)、およびDMAP(1.08 g, 8.83 mmol)のジクロロメタン(200 mL)溶液に、二炭酸ジ-tert-ブチル(38.5 g, 177 mmol)を固形物として10分かけて少しずつ添加し、24℃で18時間撹拌した。ほとんどの揮発性物質を減圧除去し、該粗物質を20％ 酢酸エチル/ヘキサンに溶解させ、1.3 Lのシリカゲルを含む2 L漏斗にアプライし、次いで3 Lの20％ 酢酸エチル/ヘキサンおよび2 Lの50％ 酢酸エチル)で溶出した。目的のフラクションをロータリーエバポレーターで濃縮すると白色の固形物のスラリーが生じ、それを濾過し、ヘキサンで洗浄し、減圧乾燥させてカルバメートM.1を白色の固形物として得た(32.65 g, 82％収率)。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm) 7.61-7.59 (m, 2H), 7.56-7.54 (m, 2H), 7.50-7.38 (m, 6H), 4.18 (m, 1H), 3.90 (dd, J = 10.4, 3.6, 1H), 3.68 (dd, J = 10.4, 2.1, 1H), 2.68-2.58 (m, 1H), 2.40-2.33 (m, 1H), 2.22-2.12 (m, 1H), 2.01-1.96 (m, 1H), 1.35 (s, 9H), 0.97 (s, 9H). LC/MS (M-Boc+H) = 354.58. 計算値 454.24.

温度計および窒素注入口を備えた３ツ口フラスコに、カルバメートM.1(10.05 g, 22.16 mmol)およびトルエン(36 mL)を入れ、冷却浴の中で-55℃に冷却した。該混合液の内部温度が-50℃に到達したら、水素化トリエチルホウ素リチウム(23 mLの1.0 M/テトラヒドロフラン, 23.00 mmol)を30分かけて滴下し、該混合液を、内部温度を-50℃〜-45℃に維持しながら、35分間撹拌した。ヒューニッヒ塩基(16.5 mL, 94 mmol)を10分かけて滴下した。次いで、DMAP(34 mg, 0.278 mmol)を一度に添加した後、内部温度を-50℃〜-45℃に維持しながらトリフルオロ無水酢酸(3.6 mL, 25.5 mmol)を15分かけて添加した。該浴を10分後に取り外し、該反応混合液を周囲温度に昇温させながら14時間撹拌した。それをトルエン(15 mL)で希釈し、氷-水浴で冷却し、5分かけてゆっくりと水(55 mL)で処理した。相を分離し、該有機層を水(50 mL, 2x)で洗浄し、減圧濃縮した。該粗物質をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル; 5％ 酢酸エチル/ヘキサン)により精製して、ジヒドロピロールM.2を無色の粘稠性の油状物として得た(7.947 g, 82％収率)。 保持時間= 2.41 分 以下のHPLC条件下において: 2分にわたる100％A:0％B〜0％A:100％B (A=0.1％TFA／1:9メタノール/水; B=0.1％TFA／9:1メタノール/水)の溶媒グラジエントおよび1分間のホールド; 220 nmで検出; Phenomenex-Luna 3.0X50 mm S10 カラム. ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm) 7.62-7.58 (m, 4H), 7.49-7.40 (m, 6H), 6.47 (ブロードのs, 1H), 5.07/5.01 (重複するブロードのd, 1H), 4.18 (ブロードのs, 1H), 3.89 (ブロードのs, 0.49H), 3.69 (ブロードのs, 1.51H), 2.90-2.58 (ブロードのm, 2H), 1.40/1.26 (重複するブロードのs, 9H), 0.98 (s, 9H). LC/MS: (M+Na) = 460.19.

冷却した(-30℃)、ジヒドロピロールM.2(3.94 g, 9.0 mmol)のトルエン(27 mL)溶液に、ジエチル亜鉛(19 mLの〜1.1 M／トルエン, 20.9 mmol)を15分かけて滴下した。クロロヨードメタン(銅により安定化した; 3.0 mL, 41.2 mmol)を10分かけて滴下し、該浴温度を-25℃で1時間および-25℃〜-21℃で18.5時間維持しながら、撹拌した。該反応混合液を空気にさらし、50％ 飽和NaHCO₃溶液(40 mL)をゆっくりと添加してクエンチし、その後、冷却浴から取り出して、周囲温度で20分間撹拌した。それを濾紙により濾過し、白色のケーキを50 mLのトルエンで洗浄した。該濾過物の有機相を分離し、水(40 mL, 2x)で洗浄し、乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、減圧濃縮した。該粗物質を、Biotage（登録商標）システム(350 g シリカゲル; 試料を7％ 酢酸エチル/ヘキサンとともにロードし; 7-20％ 酢酸エチル/ヘキサンで溶出した)を用いて精製し、メタノピロリジン(M.3の主要物（predominate）)の混合物を、無色の粘稠性の油状物として得た(3.69 g, 90.7％)。[注: シス/トランス-異性体の存在比は、この段階では決定しなかった。] 保持時間= 2.39 分 以下のHPLC条件下において: 2分にわたる100％A:0％B〜0％A:100％B(A=0.1％TFA／1:9メタノール/水; B=0.1％TFA／9:1メタノール/水)の溶媒グラジエント、および1分間のホールド; 220 nmで検出; Phenomenex-Luna 3.0X50 mm S10 カラム. ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm) 7.62-7.60 (m, 4H), 7.49-7.40 (m, 6H), 3.77/3.67 (重複するブロードのs, 3H), 3.11-3.07 (m, 1H), 2.23 (見かけ上のブロードのs, 1H), 2.05-2.00 (m, 1H), 1.56-1.50 (m, 1H), 1.33 (ひどいブロードのs, 9H), 1.00 (s, 9H), 0.80 (m, 1H), 0.30 (m, 1H). LC/MS: (M+Na) = 474.14.

シリルエーテルM.3(3.13 g, 6.93 mmol)のテトラヒドロフラン(30 mL)溶液に、TBAF(7.27 mLの1.0 M／テトラヒドロフラン, 7.27 mmol)を5分かけて滴下し、該混合液を周囲温度で4.75時間撹拌した。飽和塩化アンモニウム溶液(5 mL)を添加した後、ほとんどの揮発性物質を減圧除去し、該残渣をジクロロメタン(70 mL)と50％飽和塩化アンモニウム溶液(30 mL)間に分配した。該水相をジクロロメタン(30 mL)で抽出し、有機相を合わせて乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、減圧濃縮した後、高真空に終夜曝露した。該粗物質をBiotage（登録商標）(シリカゲル; 40-50％ 酢酸エチル/ヘキサン)を用いて精製し、微量の低いRfスポットが混在したアルコールの混合物を、無色の油状物として得た(1.39 g, 〜94％収率)。[注: シス/トランス異性体の存在比はこの段階では決定しなかった。] ¹H-NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6, δ= 2.5 ppm) 4.70 (t, J = 5.7, 1H), 3.62-3.56 (m, 1H), 3.49-3.44 (m, 1H), 3.33-3.27 (m, 1H), 3.08-3.04 (m, 1H), 2.07 (ブロードのm, 1H), 1.93-1.87 (m, 1H), 1.51-1.44 (m, 1H), 1.40 (s, 9H), 0.76-0.71 (m, 1H), 0.26 (m, 1H). LC/MS (M+Na) = 236.20.

過ヨウ素酸ナトリウム(6.46 g, 30.2 mmol)／水(31 mL)の半-溶液を、アセトニトリル(20 mL)溶液および四塩化炭素(20 mL)中のアルコール(2.15 g, 10.08 mmol)の溶液に添加した。三塩化ルテニウム(0.044 g, 0.212 mmol)を速やかに添加し、該不均一な反応混合液を75分間はげしく撹拌した。該反応混合液を水(60 mL)で希釈し、ジクロロメタン(50 mL, 3x)で抽出した。有機相を合わせて1 mL メタノールで処理し、約5分静置した後、珪藻土(セライト（登録商標）)により濾過した。該パッドをジクロロメタン(50 mL)で洗浄し、該濾液を減圧濃縮して、淡いダークグレー色の固形物として得た。該粗物質を加熱しながら酢酸エチル(〜10 mL)に溶解させて、シーディングしながら周囲温度で静置した。冷却相に約15分入れると、迅速な結晶形成が認められた。約1時間後、ヘキサン(〜6 mL)を添加し、該混合液を終夜冷蔵した(さらなる物質の析出は見受けられなかった)。該混合液を濾過し、氷/水-冷却ヘキサン/酢酸エチル(2:1 ratio; 20 mL)で洗浄し、高真空下で乾燥させて、酸M.4の第１クロップ(オフホワイト色の結晶, 1.222 g)を得た。該母液を減圧濃縮し、該残渣を〜3 mLの酢酸エチルに加熱しながら溶解させ、周囲温度で1時間静置した後、3 mL ヘキサンを添加し、冷蔵庫で〜15時間貯蔵した。酸M.4の第２クロップを同様に回収した(灰色の結晶, 0.133 g)（合計収率59％で）。 保持時間= 1.48 分 以下のHPLC条件下において: 3分にわたる100％A:0％B〜0％A:100％B(A=0.1％TFA／1:9メタノール/水; B=0.1％TFA／9:1メタノール/水)の溶媒グラジエント; 220 nmで検出; Phenomenex-Luna 3.0X50 mm S10 カラム. 第１クロップについてのMP(dec.) = 147.5-149.5 ℃. ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm) 12.46 (s, 1H), 3.88 (見かけ上のブロードのs, 1H), 3.27 (見かけ上のブロードのs, 1H; 水シグナルと重複), 2.28 (ブロードのm, 1H), 2.07 (見かけ上のブロードのs, 1H), 1.56 (見かけ上のs, 1H), 1.40/1.34 (２つの重複したs, 9H), 0.71 (m, 1H), 0.45 (m, 1H). 13C-NMR (100.6 MHz, DMSO-d₆, δ = 39.21 ppm) 172.96, 172.60, 154.45, 153.68, 78.74, 59.88, 59.58, 36.91, 31.97, 31.17, 27.77, 27.52, 14.86, 14.53, 13.69. LC/MS (M+Na) = 250.22. C₁₁H₁₇NO₄として計算；計算値: C, 58.13; H, 7.54; N, 6.16. 実測値(第１クロップについて): C, 58.24; H, 7.84; N, 6.07. 施光度(CHCl3における10 mg/mL): [α] D =第１および第２クロップ、各々について-216および-212.

合成経路3.

参考: (ブロム化) JACS (1952) 74, 6263.
参考: (置換/環化) J.Med.Chem. (2001) 44, 2990.

実施例3, 2-ブロモ-6,7,8,9-テトラヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン-5-オン(1.5 g, 5.9 mmol)をEt₂O(25 mL)に溶解させ、0℃に冷却し、臭素(0.35 mL, 6.6 mmol)を滴下した。該溶液を、24℃で、TLCによって反応の完了が示されるまで撹拌した(2-18時間; スケールに依存)。該溶媒をロータリーエバポレーターで除去し、該粗生成物を25(M)Biotage（登録商標）シリカゲルカラムにアプライした。500 mLにわたる50-100％B(A=ヘキサン; B=10％EtOAc/hex)のグラジエント溶出により、2,6-ジブロモ-6,7,8,9-テトラヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン-5-オン 700 mg、およびジブロミド(1:1)を含有する1.5 gの第２フラクションを得た。 保持時間= 2.2 分 (条件1).

該2,6-ジブロモ-6,7,8,9-テトラヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン-5-オン(700 mg, 2.22 mmol)、およびN-メチル-L-アラニン(493 mg, 2.4 mmol)をアセトニトリル(8 mL)に溶解させ、1.1 mLのヒューニッヒ塩基を滴下し、該反応液を55℃で18時間撹拌した。該溶媒をロータリーエバポレーターで除去し、該残渣をEtOAcに溶解させ、0.1N HCl溶液、飽和NaHCO₃溶液, および食塩水で洗浄し、濃縮して、実施例9, (2S)-2-ブロモ-5-オキソ-6,7,8,9-テトラヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン-6-イル 2-(tert-ブトキシカルボニル(メチル)アミノ)プロパノエート（propan-oate）960 mg(98％)を得て、それをさらなる精製は行わずにその後の工程に用いた。 ¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) α 7.55 (dd, J = 8.4, 1.8 Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 8.4, 1.8 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 5.51-5.45/5.36-5.31 (m, 1H), 4.96-4.79/4.72-4.53 (m, 1H), 3.8 (ブロードのs., 3H), 2.94 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.82 (t, J = 5.1 Hz, 2H), 2.10-1.95 (m, 2H), 1.43 (s, 9H). 保持時間= 2.3 分 (条件1). LRMS: C₂₀H₂₆BrNO₅として計算；計算値: 440.11; 実測値: 440.10 (M+H).

実施例9, (2S)-2-ブロモ-5-オキソ-6,7,8,9-テトラヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン-6-イル 2-(tert-ブトキシカルボニル(メチル)アミノ)プロパノエート(960 mg, 2.2 mmol)をキシレン(20 mL)に溶解させ、100 mLのスクリューキャップ圧力容器に入れた。酢酸アンモニウム(1.7 g, 10当量)を添加し、該混合液を120℃(油浴温度)で4時間加熱した。冷却した混合液を酢酸エチル(150 mL)および飽和NaHCO₃溶液で希釈し、有機相を濃縮した。該粗生成物を、25(M)Biotage（登録商標）シリカゲルカートリッジにアプライした(CH₂Cl₂)。セグメント1. 15％B 300 mLのホールド; セグメント2. 600 mLにわたる10〜100％B(A=ヘキサン; B=EtOAc)のグラジエント溶出により、実施例10, 150 mg(16％)を得た。注: クロマトグラフィーの間に化合物が損失した(収量はもっと高いはずである)。 ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.43-.42 (m, 2H), 7.35 (s, 1H), 5.25 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 3.02 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.96 (s, 3H), 2.83-2.81 (m, 2H), 2.0-1.98 (m, 2H), 1.74 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.47 (s, 9H). 保持時間= 1.8 分 (条件1). LRMS: C₂₀H₂₆BrN₃O₂として計算；計算値: 420.13; 実測値: 420.10 (M+H).

合成経路4.

合成経路5.

合成経路6.

撹拌した実施例10a.3(565 mg, 1.35 mmol)／乾燥DMF(10 mL)溶液に、未洗浄の（Unwashed）60％水素化ナトリウム(54 mg, 1.35 mmol)を窒素下において一度に添加した。該混合液を5分撹拌した後、SEM-Cl(0.24 mL, 1.35 mmol)を添加し、3時間撹拌し、飽和塩化アンモニウム(1 mL)でクエンチし、EtOAc(50 mL)で希釈し、該有機相を飽和NaHCO₃溶液および食塩水で洗浄した。水相をEtOAcで２回以上抽出し、最初の有機抽出物と合わせた後、乾燥させた。濃縮して残渣を得て、それを40 (S) Biotage（登録商標）シリカゲルカートリッジにアプライした(CH₂Cl₂)。セグメント1. 15％B 75 mLのホールド; セグメント2. 750 mLにわたる15％〜50％Bのグラジエント溶出; セグメント3: 750 mLにわたる50-100％B(A=hex; B=EtOAc) B により、位置異性体生成物 実施例11, 497 mg(67％)を得た。 保持時間= 3.0 分 (条件2). ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7.42-7.35 (m, 3H), 5.65/5.39 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 5.29-5.27 (m, 1H), 5.00/4.93 (s, 1H), 3.54-3.51 (m, 3H), 3.43-3.41 (m, 1H), 3.02-2.99 (m, 2H), 2.89-2.81 (m, 1H), 2.29-2.08 (m, 2H), 1.95 -1.84 (m, 2H), 1.37/1.13 (s, 9H), 0.89-0.86 (m, 2H), -0.02 (s, 9H). LRMS: C₂₆H₃₉BrN₃O₃Siとして計算；計算値: 548.19; 実測値: 548.23 (M+H).

冷たい4N HCl／ジオキサン(0.871 mL, 3.49 mmol)を、MeOH(20 mL)中の10a.3 (1R,3S,5R)-tert-ブチル 3-(7-ブロモ-4,5-ジヒドロ-1H-ナフト[1,2-d]イミダゾール-2-イル)-2-アサビシクロ[3.1.0]ヘキサン-2-カルボキシレート(1.5 g, 3.49 mmol)の溶液に添加し、該反応液を室温で2時間撹拌した。濃縮して黄褐色の固形物と得て、それをジオキサン(20 mL)/水(20 mL)中に溶解させ、0℃に冷却した。Na₂CO₃(0.369 g, 3.49 mmol)およびCBz-Cl(0.498 mL, 3.49 mmol)を添加し、該反応混合液を5時間かけて室温に昇温させながら撹拌した後、EtOAcと飽和NaHCO₃溶液間に分配した。該有機層を食塩水で洗浄し、Na₂SO₄で乾燥させ、濾過し、濃縮した。該粗生成物を、110 g Thompson（登録商標）シリカゲルカートリッジにチャージし(CH₂Cl₂)、1.5 Lにわたる20％-100％B(A/B = ヘキサン/EtOAc)で溶出した。様々な純度の３つのフラクションからの11a (1R,3S,5R)-ベンジル 3-(7-ブロモ-4,5-ジヒドロ-1H-ナフト[1,2-d]イミダゾール-2-イル)-2-アサビシクロ[3.1.0] ヘキサン-2-カルボキシレートの合計収量は1.4 g(75％)であった。 LCMS C₂₄H₂₃BrN₃O₂として計算;計算値 (M+H)⁺ 464.10および466.10-; 実測値: 463.95および465.98.

合成経路7.

参考: J.Chem.Soc. Perkin Trans 2 (1993) p 1305.

AIBN(98 mg, 0.59 mmol)を、CCl₄(50 ml)中の4-ブロモ-1,2-ジメチルベンゼン(11 g, 59.4 mmol)および直前に再結晶したN-ブロモこはく酸イミド(21.1 g, 119 mmol)に添加した。該反応混合液を、窒素下において2時間還流加熱した。室温に冷却した後、該溶液を濾過し、ロータリーエバポレーターにより濃縮して、およそ(75％) 4-ブロモ-1,2-ビス(ブロモメチル)ベンゼンならびに3-ブロモ-1,2-ビス(ブロモメチル)ベンゼンとともにを含む21 gの混合物を得た。[注: 該出発物質には25％ 3-ブロモ-1,2-ジメチルベンゼンが混入していた。] 保持時間= 2.2/2.3 分 (条件1).

4-および3-ブロモ-1,2-ビス(ブロモメチル)ベンゼンの粗混合物(21 g)をCH₂Cl₂(313 ml)に溶解させ、3-オキソペンタン二酸ジメチル(12.8 g, 73.5 mmol)を添加し、該溶液をKHCO₃(64 g, 0.64 mol)／水(250 ml)の20％溶液で希釈した。相間移動触媒ベンジルトリメチルアンモニウムクロリド(1.7 g, 9.19 mmol)を添加し、該反応混合液を窒素下において50℃で18時間撹拌した。有機相の分離後、水相をCH₂Cl₂で抽出し、有機層を合わせて食塩水で洗浄した。濃縮し、2-ブロモ-7-オキソ-6,7,8,9-テトラヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン-6,8-ジカルボン酸ジメチルを含有する23 gの複合混合物(位置異性体とエステルジアステレオマーの両方)を得て、それを精製は行わずにその後の工程に用いた。保持時間= 1.87 分 (条件1); LCMS: C₁₅H₁₅BrO₅として計算；計算値: 377.01; 実測値 377.05 [M+Na].

クルードな2-ブロモ-7-オキソ-6,7,8,9-テトラヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン-6,8-ジカルボン酸ジメチル(〜8g, 22.5 mmol含まれる)の混合物 23 gを、還流冷却装置を取り付けた1 L 丸底フラスコに入れ、エタノール(250 ml)中に溶解させた。水(250 ml)に溶解したKOH(8.8 g, 0.23 mol)溶液を添加し、16時間還流加熱すると、初期の黄褐色の懸濁液が黒色に変化した。該反応混合液をEtOAc(1 容量)に注ぎ入れ、有機相を分離した。食塩水 (1/4 容量)を水層に添加して、それをEtOAcで抽出し、有機層を合わせて食塩水で洗浄した。ロータリーエバポレーターにより濃縮した後、該残渣を40(M)Biotage（登録商標）シリカゲルカラム(カラムの下方からバキュームをアプライして吸着を補助) にチャージ(CH₂Cl₂)し、10-100％B(A=ヘキサン; B=EtOAc)でグラジエント溶出して、ブロミドの4:1混合物を得て、それは実施例12, 2-ブロモ-8,9-ジヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン-7(6H)-オンを示し、1-ブロモ-8,9-ジヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン-7(6H)-オン、8.3 g(61％)を含んでいた。該混合液をさらなる精製は行わずにその後の工程に用いたが、しかし、該混合液を-5℃で3週間静置することにより結晶化させて実施例12の純粋な試料を得た。 ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.37 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.33 (dd, J = 7.9, 2.1 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 7.9 HZ, 1H), 2.87-2.84 (m, 4H), 2.61-2.57 (m, 4H). 保持時間= 1.96 分 (条件1). LCMS: C₁₁H₁₁BrOとして計算；計算値: 239.0; 実測値: 239.04 (M+H).

ジエチルエーテル(250 mL)中の、各々2-および1-ブロモ-8,9-ジヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン-7(6H)-オンの4:1 混合物(6.4 g, 26.8 mmol)の溶液に、臭素(1.4 mL, 26.8 mmol)を添加した。該反応液を4時間撹拌し、濃縮し、クルードなα-ブロモケトンをアセトニトリル(200 mL)に溶解させた。アジ化ナトリウム(1.7 g, 26.8 mmol)を添加し、該反応液を16時間撹拌した後、濃縮した。該残渣をEtOAcと飽和NaHCO₃溶液間に分配し、有機層を水、食塩水で洗浄し、濃縮した。 保持時間= 2.0 分 (ブロードのピーク, 条件1).

クルードなα-ケトアジドをCH₃OH(350 mL)に溶解させ、塩化すず(II)二水和物(13.2 g, 69.6 mmol)を添加して、該反応混合液を65℃で3.5時間撹拌し、ロータリーエバポレーターで濃縮し、高真空下において18時間乾燥させた。

クルードなα-アミノケトンをDMF(300 mL)に溶解させ、激しく撹拌しながら、ヒューニッヒ塩基(24.41 g, 189 mmol)、(S)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-2-カルボン酸(4.07 g, 18.89 mmol)、およびHATU(7.18 g, 18.89 mmol)を一度に添加した。8時間後、該反応液を1/3量まで減圧濃縮し、EtOAc(1 L)と0.1N HCl(150 mL)間に分配した。すず塩（tin salt）を、珪藻土(セライト（登録商標）)により濾過して除去し、有機層を食塩水で洗浄して、濃縮した。該粗生成物を40M Biotage（登録商標）シリカゲルカートリッジにチャージした(CH₂Cl₂)(２回の処理に分けた)。1.5 Lにわたる15％〜100％B(A=ヘキサン; B=酢酸エチル)でグラジエント溶出して、実施例13a.1および13b.1を、各々、ジアステレオマーの混合物として得た(3.8 g, 35.7％合計収率)。実施例13a.1: 保持時間= 1.58/1.51 分 (条件5). LCMS: C₂₁H₂₇BrN₂O₄として計算；計算値: 451.12; 実測値: 450.87 (M+H).

酢酸アンモニウム(4.4 g, 73.1 mmol)を、キシレン(75 mL)中のアミド13a.1および13b.1(3.3 g, 7.31 mmol)の溶液に添加し、140℃に加熱された圧力容器中で4時間撹拌した。冷却後、該反応混合液をEtOAc(500 mL)で希釈し、飽和NaHCO₃、食塩水で洗浄し、有機相を濃縮した。該粗生成物を40S Biotage（登録商標）シリカゲルカートリッジにチャージした(CH₂Cl₂)。750 mLにわたる15％〜100％B(A=CH₂Cl₂; B=EtOAc)でグラジエント溶出して、2.49 gの混合物を得て、それを第２のクロマトグラフィー; 40S Biotage（登録商標）シリカゲルカートリッジ、1Lにわたる5％-80％Bで溶出(A=1:1 Hex/CH₂Cl₂; B=10％ CH₃OH/EtOAc)で処理して、実施例13a.2および13b.2の混合物、1.1 g(34.8％)を得た。該生成物の試料をセミプレパラティブ（semi-prep）順相HPLC(Chiralcel OD カラム, 20x250mm, 10um; 98:2 ヘプタン/EtOH @ 10 mL/分; UV 220/254 nm)にアプライし、35-36 分で溶出する実施例13a.2を採取した。 ¹H NMR (500 MHz, CD₃OD) δ 7.44 (s, 1H), 7.28 (dd, J = 7.9, 2.1 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 8.2 HZ, 1H), 4.73-4.69 (m, 1H), 3.91 (s, 2H), 3.64-3.61 (m, 1H), 3.48-3.44 (m, 1H), 3.09 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 2.80 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 2.31-2.11 (m, 1H), 2.01-1.88 (m, 3H), 1.46/1.48 (s, 9H). 保持時間= 1.7 分 (条件1). HRMS: C₂₁H₂₆BrN₃O₂として計算；計算値: 432.1281; 実測値: 432.1268 (M+H).

合成経路8.

実施例14

DMF(105 mL)中のN-Boc-L-プロリン(7.139 g, 33.17 mmol)、HATU(13.324 g, 35.04 mmol)、2-アミノ-1-(4-ブロモ-フェニル)エタノンのHCl塩(8.127 g, 32.44 mmol)の不均一な混合液に、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(18 mL, 103.3 mmol)を15分かけて滴下し、周囲条件で55分間撹拌した。DMFを減圧除去し、得られた残渣を酢酸エチル(300 mL)と水(200 mL)間に分配した。有機層を水(200 mL)および食塩水で洗浄し、乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、濃縮した。該残渣からシリカゲルメッシュを調製し、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル; 50-60 ％ 酢酸エチル/ヘキサン)で処理して、実施例14, (S)-tert-ブチル 2-(2-(4-ブロモフェニル)-2-オキソエチルカルバモイル)ピロリジン-1-カルボキシレートを白色の固形物として得た(12.8 g)。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz): δ 8.25-8.14 (m, 1H), 7.92 (ブロードのd, J = 8.0, 2H), 7.75 (ブロードのd, J = 8.6, 2H), 4.61 (dd, J = 18.3, 5.7, 1H), 4.53 (dd, J = 18.1, 5.6, 1H), 4.22-4.12 (m, 1H), 3.43-3.35 (m, 1H), 3.30-3.23 (m, 1H), 2.18-2.20 (m, 1H), 1.90-1.70 (m, 3H), 1.40/1.34 (２つの見かけ上のブロードのs, 9H). 保持時間= 1.70 分 (条件1); LCMS: C₁₈H₂₃BrN₂NaO₄として計算；計算値: 433.07; 実測値 433.09 [M+Na]⁺.

実施例14c

実施例14c; 工程1:

ジクロロメタン(100 mL)中の3-ブロモフェノール(25 g,144 mmol)およびピリジン(10.8 mL, 144 mmol)の冷たい(氷浴)溶液に、塩化アセチル(10.2 mL, 144 mmol)を1時間かけて滴下し、該反応液を室温で18時間撹拌した。水(150 mL)を添加し、有機層をジクロロメタンで抽出した。有機層を合わせて、2.5N NaHSO₄、3N NaOH、水、食塩水で洗浄し、Na₂SO₄で乾燥させ、濾過した。濃縮して、酢酸3-ブロモフェニルをピンク色の液状物として得た(28 g, 96％)。 GC-MSデータ: 214 (M⁺); ¹H NMR (DMSO-d₆): 7.37-7.39 (d, 1H), 7.26-7.30 (m, 2H), 7.04-7.07(t, 1H), 2.30 (s, 3H).

実施例14c; 工程2:

酢酸3-ブロモフェニル(36 g, 167 mmol)および無水AlCl₃(33.5g, 251 mmol)を140-150℃で2時間加熱した。冷却後、5％ HCl溶液(100ml)を添加し、該混合液を、固形物質が溶解するまで加熱した(水蒸気浴)。茶色の油状物を分離し、ジクロロメタンに抽出した。該抽出物に、5N NaOH(300 mL)および十分な量の水を添加し、生じた沈殿物を溶解させた。水層を分離し、酸性化し(pH 2.0)、酢酸エチルで抽出した。該抽出物をNa₂SO₄で乾燥させ、濾過し、濃縮して、1-(4-ブロモ-2-ヒドロキシフェニル)エタノン 結晶(35.8 g, 99％)を得た。GC-MS (214 M⁺); ¹H NMR (DMSO-d₆) 11.99 (s, 1H, OH), 7.77-7.80 (d, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.13-7.15 (dd, 1H), 2.6 (s, 3H).

実施例14c; 工程3:

乾燥ベンゼン(800 mL)中の1-(4-ブロモ-2-ヒドロキシフェニル)エタノン(35.8g, 167 mmol)に、N,N-ジメチルホルムアミドジメチルアセタール(44 mL, 333 mmol)を添加し、該溶液を4時間還流加熱し、乾固するまで濃縮した。得られた残渣をジクロロメタン(300 mL)に溶解させ、SiO₂で濾過した。有機層を濃縮して、(E)-1-(4-ブロモ-2-ヒドロキシフェニル)-3-(ジメチルアミノ)プロパ-2-エン-1-オンを鮮やかな黄色の固形物として得た(31.9 g, 71％)。 LCMS 270 (M+H); ¹H NMR (DMSO-d₆) 14.96 (s, 1H), 7.86-7.94 (m, 2H), 6.96-7.02 (dd, 2H), 5.92-5.96 (d, 1H), 3.32 (s, 3H), 3.20 (s, 3H).

実施例14c; 工程4:

濃HCl(100 mL)を(E)-1-(4-ブロモ-2-ヒドロキシフェニル)-3-(ジメチルアミノ)プロパ-2-エン-1-オン(31.9 g, 118 mmol)／ジクロロメタン(900 mL)溶液に添加し、該反応混合液を、40分、激しく撹拌しながら還流加熱した。室温に冷却した後、有機層を分離して、水層をジクロロメタンで抽出した。有機層を合わせて、3M 炭酸カリウム溶液、水で洗浄し、Na₂SO₄で乾燥させた。濾過および濃縮して、7-ブロモ-4H-クロメン-4-オンを淡黄色の固形物として得た。 LCMS 224.9 (M+H); ¹H NMR (DMSO-d₆) 8.29-8.31 (d, 1H), 7.92-7.99 (m, 2H), 7.64-7.66 (dd, 1H), 6.37-6.39 (d, 1H).

実施例14c; 工程5:

7-ブロモ-4H-クロメン-4-オン(26 g, 116 mmol)／乾燥THF(500 mL)溶液を、窒素下において1時間、-80℃に冷却し、173 mLの水素化ジイソブチルアルミニウム(2M／トルエン)を30分かけて添加した。該反応液を同じ温度で30分間撹拌し、SiO₂(52g)/水(52mL)懸濁液でクエンチし、0℃に昇温させた。該溶液を濾過し、SiO₂をEtOAcで洗浄し、濾液を合わせて、乾固するまで濃縮した。該残渣をCHCl₃(400 mL)に溶解させ、1N NaOH(300 mL)で洗浄し、Na₂SO₄で乾燥させて、濃縮した。SiO₂(60-120メッシュ)EtOAc/Petエーテル(グラジエント溶出 0-15％)でのクロマトグラフィーにより精製して、7-ブロモクロメン-4-オン 18.1 g(69％)を淡黄色の固形物として得た。 LCMS 229.0 (M+2H); ¹H NMR (DMSO-d₆) 7.64-7.67 (d, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.22-7.25(d, 1H), 4.53-4.57 (t, 2H), 2.76-2.80 (t, 2H).

実施例14c; 工程6:

NaOAc(3.78 g, 46.2 mmol)／H₂0(30 mL)を、EtOH(70 ml)中の7-ブロモ 4-クロマノン(3.5 g, 15.4 mmol)およびヒドロキシルアミン塩酸塩(1.75 g, 23.1 mmol)の溶液に添加した。該反応液を2時間還流加熱し、室温に冷却して、濃縮した。該残渣をH₂0で希釈し、沈殿物を濾過して、7-ブロモクロメン-4-オン オキシムを針状結晶として3.5g(98％)得た。 LCMS 244 (M+2H) 保持時間= 1.7 分 (条件2); ¹H NMR (DMSO-d₆) 11.37 (s, OH, 1H), 7.76-7.70 (d, 1H), 7.09-7.13 (d, 2H), 4.16- 4.20 (t, 2H), 2.79-2.83 (t, 2H).

実施例14c; 工程7:

ジクロロメタン(125 ml)中の7-ブロモクロメン-4-オン オキシム(3.5g, 14.46 mmol)およびトリエチルアミン(2.4ml, 17.35 mmol)の溶液に、p-トルエンスルホン酸無水物(5 g, 16 mmol)を添加した。該混合液を室温で3時間撹拌し、水、食塩水で洗浄し、乾燥させた(Na₂SO₄)。濾過し、減圧下で濃縮して、7-ブロモクロメン-4-オン-O-p-トルエンスルホキシム（toluenesulfoxime）5.5 g(96 ％)をオフホワイト色の固形物として得て、それをさらなる精製は行わずに用いた。 LCMS 398 (M+2H) 保持時間= 1.92 分 (条件1). ¹H NMR (DMSO-d₆) 7.89-7.91 (d, 2H), 7.56-7.58 (d, 1H), 7.48-7.50 (d, 2H), 7.22 (s, 1H), 7.16-7.18 (d, 1H), 4.20.4.23 (t, 2H), 2.97-3.00 (t, 2H), 2.40 (s, 1H).

実施例14c; 工程8:

カリウムエトキシド(1.27 g, 15.11 mmol)／エタノール(35 ml)溶液を、7-ブロモクロメン-4-オン-O-p-トルエンスルホキシム(5.7 g, 14.3 mmol)／トルエン(60 ml)溶液に添加し、該混合液を室温で15時間撹拌した。沈殿物(カリウムトシレート)を濾過により除去し、ジエチルエーテルで洗浄した。濾過物を合わせて3N HCl(20 ml)／メタノールに添加し、該溶液を室温で2時間撹拌して、HCl塩を得た。溶媒を除去した後、該残渣をジエチルエーテルとともにトリチュレートした。得られた固形物を濾過し、エーテルで洗浄し、乾燥させて、7-ブロモ-3-アミノ-クロマン-4-オン塩酸塩 2.8 g, (80 ％)をオフホワイト色の粉末として得た。 LCMS 244 (M+2H) 保持時間= 3.77 (条件2); ¹H NMR (DMSO-d₆) 8.79 (bs, 2H), 7.71-7.74 (d, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.34-7.37 (d, 1H), 4.67-4.80 (m, 2H), 4.43-4.51 (t, 1H).

キシレン(155 mL)中の実施例14, (S)-tert-ブチル 2-(2-(4-ブロモフェニル)-2-オキソエチルカルバモイル)-ピロリジン-1-カルボキシレート(12.8 g, 31.12 mmol)およびNH₄OAc(12.0 g, 155.7 mmol)の混合液を、密閉チューブの中において、140℃で2時間加熱した。揮発性成分を減圧除去し、該残渣を、該二相系を振盪させた後で十分な量の飽和NaHCO₃溶液を添加して該水相のpHをわずかに塩基性にすることにより、酢酸エチルと水間に慎重に分配した。層を分離し、水層をさらなる酢酸エチルで抽出した。有機相を合わせて食塩水で洗浄し、乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、濃縮した。得られた物質を酢酸エチル/ヘキサンから再結晶化させて、２クロップの実施例15, (S)-tert-ブチル 2-(5-(4-ブロモフェニル)-1H-イミダゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシレート 5.85 gを得た。該母液を減圧濃縮して、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル; 30％ 酢酸エチル/ヘキサン)で処理し、さらに2.23 g得た。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz): δ 12.17/11.92/11.86 (m, 1H), 7.72-7.46/7.28 (m, 5H), 4.86-4.70 (m, 1H), 3.52 (見かけ上のブロードのs, 1H), 3.36 (m, 1H), 2.30-1.75 (m, 4H), 1.40/1.15 (見かけ上のブロードのs, 9H). 保持時間= 1.71 分 (条件1); LC/MS: [M+H]⁺ C₁₈H₂₃BrN₃O₂として計算；計算値: 392.10; 実測値 391.96; HRMS: C₁₈H₂₃BrN₃O₂として計算；計算値: 392.0974; 実測値 392.0959 [M+H].

合成経路9.

Pd(Ph₃P)₄(469 mg, 0.406 mmol)を、実施例15, (S)-tert-ブチル 2-(5-(4-ブロモフェニル)-1H-イミダゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシレート(4 g, 10.22 mmol)、ビス(ピナコラート)ジボロン(5.4 g, 21.35 mmol)、酢酸カリウム(2.6 g, 26.21 mmol)および1,4-ジオキサン(80 mL)の混合物を含むスクリューキャップ耐圧管に添加した。該反応フラスコを窒素でパージし、封をして16時間加熱した(油浴80℃)。該反応混合液を濾過し、該濾液を減圧濃縮した。該粗物質をCH₂Cl₂(150 mL)と水性媒体(50 mL水+10 mL飽和NaHCO₃溶液)間に慎重に分配した。水層をCH₂Cl₂で抽出し、有機相を合わせて乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、減圧濃縮した。得られた物質をフラッシュクロマトグラフィー(試料を、溶出溶媒; 20-35％ 酢酸エチル/CH₂Cl₂とともにロードした)で精製し、ピナコールが混入した実施例16, (S)-tert-ブチル 2-(5-(4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)-1H-イミダゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシレートをオフホワイトの密な固形物として得て; 実施例16対ピナコールの相対モル比は約10:1であった(¹H NMR)。高真空に〜2.5日曝露した後の該試料の重量は3.9 gであった。 ¹H NMR (DMSO-d₆, δ = 2.5 ppm, 400 MHz): 12.22/11.94/ 11.87 (m, 1H), 7.79-7.50/ 7.34-7.27 (m, 5H), 4.86-4.70 (m, 1H), 3.52 (見かけ上のブロードのs, 1H), 3.36 (m, 1H), 2.27-1.77 (m, 4H), 1.45-1.10 (m, 21H). 保持時間= 1.64 分 (条件1); LC/MS: [M+H] C₂₄H₃₅BN₃O₄として計算；計算値: 440.27; 実測値 440.23.

実施例8, (950 mg, 2.19 mmol); 実施例16, (S)-tert-ブチル 2-(5-(4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)フェニル)-1H-イミダゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシレート(965 mg, 2.2 mmol)、およびNaHCO₃(462 mg, 5.5 mmol)を1,2-ジメトキシエタン(25 mL)に溶解させ、水(4 mL)を添加した。該反応混合液を、窒素(3x)を用いて脱気（evacuate）およびフラッシュし、Pd(Ph₃P)₄(127 mg, 0.11 mmol)を添加し、該混合液を、封をした100 mL圧力容器の中において8時間加熱した(80℃の油浴)。さらなる触媒(35 mg)を添加して、16時間加熱を続けた。冷却した後、該溶液をEtOAc/水中に分配し、有機層を食塩水で洗浄した。該粗生成物を40 (S) Biotage（登録商標）シリカゲルカラムにアプライし(CH₂Cl₂)、1 Lにわたる20-100％B(A=CH₂Cl₂;B=EtOAc)でグラジエント溶出して、実施例17, 680 mg(49％)を得た。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8.05 (ブロードのs, 1H), 7.78 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.66 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.53-7.45 (m, 3H), 4.86-4.70 (m, 2H), 3.57-3.51 (m, 2H), 3.17 - 3.16 (m, 2H), 2.89-2.85 (m, 4H), 2.27-2.18 (m, 2H), 1.99-1.83 (m, 8H), 1.40/1.16 (s, 9H). 保持時間= 1.7 分 (条件1). LRMS: C₃₉H₄₈N₆O₄として計算；計算値: 665.38; 実測値: 665.39 (M+H). HRMS: C₃₉H₄₈N₆O₄として計算；計算値: 665.3815; 実測値: 665.33845 (M+H).

合成経路10.

実施例17r (S)-tert-ブチル 2-(7-(4-(5-((S)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-2-イル)-1H-イミダゾール-2-イル)フェニル)-4,5-ジヒドロ-1H-ナフト[1,2d]イミダゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシレート(332 mg, 0.51 mmol)／ベンゼン(5 mL)溶液に、窒素雰囲気下においてDDQ(116 mg, 0.51 mmol)を添加し、該暗褐色の混合液を2時間還流加熱した。該溶媒を減圧除去し、該残渣を25(M)Biotage（登録商標）シリカゲルカラムにチャージした(CH₂Cl₂)。セグメント1; 720 mLにわたる50-100％B(A=CH₂Cl₂;B=20％CH₃OH／CH₂Cl₂)のグラジエント溶出、セグメント2; 720 mLにわたる0-50％B(A=CH₂Cl₂;B=CH₃OH)のグラジエント溶出により、実施例18, 261 mg(79％)を得た。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 8.46 (ブロードのs, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.95-7.55 (m, 8H), 5.1-4.8 (回転異性体（rotomer）, 2H), 3.67 (ブロード. s , 1H), 3.57 (ブロード. s , 1H), 3.48-3.47 (m, 1H), 3.39 - 3.38 (m, 1H), 2.42-1.89 (m, 8H), 1.42/1.18 (s, 9H). 保持時間= 2.24 分 (条件2). LRMS: C₃₈H₄₄N₆O₄として計算；計算値: 649.35; 実測値: 649.65 (M+H).

合成経路10a.

撹拌した実施例17r.2(200 mg, 0.296 mmol)／乾燥CH₂Cl₂(2 mL)溶液に、活性MnO₂(77 mg, 0.889 mmol)を一度に添加し、該懸濁液を4時間撹拌した。さらなるMnO₂(300 mg)を添加し、該混合液を16時間撹拌した。LCMSによって出発物質が残存しないことが示されるまでこの順序を繰り返した。該反応混合液を珪藻土(セライト（登録商標）)により濾過し、濃縮し、高真空下で1時間乾燥させて、実施例18.1(185.8 mg, 92％)を黄色がかったオレンジ色の固形物として得た。 LCMS: 保持時間= 2.24 分, C₄₀H₄₅N₆O₄として計算；計算値 673.35; 実測値: 673.36 (M+H). HRMS: C₄₀H₄₅N₆O₄として計算；計算値 673.3497; 実測値: 673.3525 (M+H).

合成経路11

撹拌した、DMSO(2.5 mL)中の実施例18a(150 mg, 0.274 mmol)、ビス-ピナコールジボラン(34.8 mg, 0.137 mmol)、dppf(7.61 mg, 0.014 mmol)、およびK₂CO₃(114 mg, 0.823 mmol)の溶液に、ジクロロメタン(11.2 mg, 0.014 mmol)との[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン)ジクロロパラジウム(ii)複合体を、スクリュートップ圧力容器中で、アルゴン雰囲気下において添加した。該溶液をアルゴンでフラッシュし、封をして、80℃に予熱した油浴に入れ、18時間撹拌した。該混合液を冷却し、EtOAcで希釈し、飽和NaHCO₃溶液、食塩水で洗浄し、乾燥させて(Na₂SO₄)、濾過した。溶媒を減圧除去し、該残渣を25(M)Biotage（登録商標）シリカゲルカラムにチャージし(CH₂Cl₂): セグメント1. 75 mLの10％B; セグメント2. 1.8 Lにわたる10-100％Bのグラジエント溶出; (A=ヘキサン; B=EtOAc)により、実施例19, 88.7 mg(33％)を得た。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 8.56-8.54 (m, 2H), 8.48 (s, 2H), 8.12-8.10 (m, 2H), 7.95-7.91 (m, 4H), 5.83-5.76 (m, 4H), 5.30-5.22 (m, 2H), 3.72-3.61 (m, 4H), 3.53 (t, J = 7.3 Hz, 4H), 2.44-2.18 (m, 4H) 2.11-2.08 (m, 2H), 2.0-1.94 (m, 2H), 1.38/1.08 (s, 18H), 0.91-0.81 (m, 4H), -0.06 (s, 18H). 保持時間= 3.2 分 (条件2); HRMS: C₅₂H₇₃N₆O₆Si₂として計算；計算値 933.5125-; 実測値: 933.5132 (M+H).

合成経路12

亜リン酸トリエチル(0.257 mL, 1.48 mmol)を、実施例17q, (340 mg, 0.489 mmol)／DMF(5 mL)に添加し、80℃で16時間撹拌した。さらなる亜リン酸トリエチル(0.3 mLおよび0.6 mL)を、8時間間隔で、LCMSにより反応の完了が示されるまで添加した。該溶媒を減圧除去し、該残渣を25(M)Biotage（登録商標）シリカゲルカラムにチャージした(CH₂Cl₂)。セグメント1. 300 mLの0％B; セグメント2. 1440 mLにわたる0-50％Bのグラジエント溶出; セグメント3. 600 mLにわたる50-100％Bのグラジエント溶出(A=CH₂Cl₂; B=20％CH₃OH／CH₂Cl₂)により、実施例20, 286 mg(82％)を得た。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7.84-7.80 (m, 8H), 4.87-4.68 (m, 2H), 3.55-3.54 (m, 2H), 3.40-3.30 (m, 6H), 2.82-2.76 (m, 2H), 2.25-1.82 (m, 8H), 1.63-1.57 (m, 2H), 1.42/1.18 (s, 9H). 保持時間= 2.32 分 (条件2); LRMS: C₄₀H₅₁N₆O₄として計算；計算値 679.40; 実測値: 679.57 (M+H)⁺.

合成経路13

実施例17, (411 mg, 0.62 mmol)CH₃OH(20 mL)中に溶解させ、HCl/ジオキサン(4Nの100 mL)を添加し、該反応液を4時間撹拌した。該溶媒を減圧除去し、該テトラHCl塩を高真空に18時間曝露して実施例21, 350 mg(94％)をHCl塩として得て、それをさらなる精製は行わずに用いた。 保持時間= 1.3 分 (条件1). LCMS: C₂₉H₃₃N₆として計算；計算値: 465; 実測値: 465 (M+H).

合成経路14

HATU(88 mg, 0.33 mmol)を添加し、DMF(3.5 mL)中の実施例21, (87.5 mg, 0.145 mmol)、Cap-51: N-メトキシカルボニル-L-バリン(63.3 mg, 0.36 mmol)、およびヒューニッヒ塩基(0.23 mL, 1.25 mmol)の溶液を迅速に撹拌した。該反応混合液を16時間撹拌した後、CH₃OH(1 容量)で希釈し、そのままセミプレパラティブ（semi prep）HPLC(各々、2 mLで４注入; Dynamax 60A prep C8 カラム; 30分かけて25％-100％B; 流速 = 20 mL/分; 波長 = 220 nm; 溶媒A = 0.1％TFA／10％メタノール/90％H₂0; 溶媒B = 0.1％ TFA／90％メタノール/10％H₂0)で処理して、実施例22, (TFA塩)を得た。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8.04-8.02 (m, 1H), 7.78-7.58 (m, 4H), 7.49-7.41(m, 3H), 7.30-7.24 (m, 2H), 5.09-5.01 (m, 2H), 4.1-4.03 (m, 2H), 3.81-3.79 (m, 4H), 3.54 (s, 6H), 2.92-2.84 (m, 4H), 2.17-2.09 (m, 4H), 2.00-1.87 (m, 8H), 0.79-0.81 (m, 12H). 保持時間= 1.57 分 (条件1). LRMS: C₄₃H₅₅N₈O₆として計算；計算値: 779.42; 実測値: 779.48 (M+H). HRMS: C₄₃H₅₅N₈O₆として計算；計算値: 779.4245; 実測値: 779.4249 (M+H).

合成経路15(非対称のCapアナログ)

CH₃OH(5 mL)および水(0.3 mL)中の実施例22m, (149 mg, 0.197 mmol)およびK₂CO₃(27 mg)の溶液を窒素でフラッシュし、10％パラジウム/炭素(30 mg)を添加した。該反応液を水素でフラッシュし、6時間撹拌し、珪藻土(セライト（登録商標）)により濾過し、該濾液を濃縮し、高真空下で濃縮して、実施例23, 122 mg(100％)を得た。保持時間= 1.5 分 (条件1). ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 8.05 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.66 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.50-7.40 (m, 3H), 7.28 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.04 (ブロード. s, 1H), 4.18 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 4.09 (t, J = 8.2 Hz, 1H), 3.82 (ブロード. s, 2H), 3.55 (s, 3H), 3.01-2.85 (m, 6H), 2.16-1.71 (m, 10H), 0.9-0.87 (m, 7H). LRMS: C₃₆H₄₃N₇O₃として計算；計算値 622.35; 実測値: 622.44 (M+H).

合成経路16 (非対称のCapアナログ)

合成経路14に記載のとおり、実施例23にキャッピングを実施して実施例22を製造した。1当量のみのHATUおよび4当量のヒューニッヒ塩基を用いて実施例24を製造したことを除いて: 保持時間= 1.5 分 (条件1); LCMS: C₃₈H₄₅N₇O₄として計算；計算値 664.36; 実測値: 664.48 (M+H).

生物学的活性
HCVレプリコンアッセイを本発明において用い、共同所有のPCT/US2006/022197およびO'Boyle et. al. Antimicrob Agents Chemother. 2005 Apr;49(4):1346-53に記載のとおり製造し、実施し、実証した。

HCV-ネオ（neo）レプリコン細胞（NS5AにおいてY2065H変異を有し、化合物Aに対して抵抗性のある細胞(国際出願PCT/US2006/022197に記載)）を用いて、本明細書に記載の化合物系列を試験した。 試験した化合物は、該変異を有する細胞において、２つの化合物系列間で関連した作用メカニズムを示す野生型細胞よりも１０倍以上低い阻害活性を有することが見いだされた。従って、本発明の化合物は、HCV NS5Aタンパク質の機能の阻害に有効であり得て、ならびに、国際出願PCT/US2006/022197および共同所有のWO/O4014852において先に記載された組み合わせにおいても有効なものとして理解される。さらに、本発明の化合物はHCV 1b遺伝子型に対して有効であり得る。また、本発明の化合物は複数の遺伝子型のHCVを阻害することができると理解されるべきでもある。表2は、代表的な本発明の化合物の、HCV 1b遺伝子型に対するEC₅₀値を示す。一実施態様において、本発明の化合物は、1a、1b、2a、2b、3a、4a、および5a遺伝子型に対して活性である。HCV 1bに対するEC₅₀ の範囲は以下のとおりである: A = ＞100 nM; B = 1-99 nM; C = 101-999 pM; およびD = 1-100 pM。

本発明の化合物は、NS5A阻害に加えてまたはNS5A阻害以外のメカニズムによりHCVを阻害しうる。一実施態様において、本発明の化合物はHCVレプリコンを阻害し、別の実施態様において、本発明の化合物はNS5Aを阻害する。

本発明は前述の例示的な実施例に限定されず、そしてその本質的特性から逸脱することなく他の特定の形態において具体化することができることが当業者には明白であろう。従って該実施例は、あらゆる点で、制限するものではなく例示的なものとしてみなされ、そして、前述の実施例に対してよりはむしろ特許請求の範囲を参照すべきであり、従って、特許請求の範囲と同等の意味および範囲内となる全ての変更を包含すると意図することが望ましい。

本発明の化合物は、NS5A阻害に加えてまたはNS5A阻害以外のメカニズムによりHCVを阻害し得る。一実施態様において、本発明の化合物はHCVレプリコンを阻害し、別の実施態様において、本発明の化合物はNS5Aを阻害する。本発明の化合物は、複数の遺伝子型のHCVを阻害しうる。

Claims (17)

1. 式(I)
   

   

   ［式中、
   ｕおよびｕ’は、独立して０、１、２、または３であり;
   ＤおよびＤ’は各々、ＮＲ^５、Ｏ、またはＳから独立して選択され;ここで、各Ｒ^５は、水素、アルコキシカルボニル、アルキル、アリールアルコキシカルボニル、カルボキシ、ハロアルキル、ヒドロキシ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）カルボニル、またはトリアルキルシリルアルコキシアルキルから独立して選択され;
   各Ｒ^１およびＲ^１’は、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アリールアルコキシカルボニル、カルボキシ、ホルミル、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル、または（ＮＲ^ａＲ^ｂ）カルボニルから独立して選択され;
   Ｒ^２は、水素、アルコキシカルボニル、アルキル、アリールアルコキシカルボニル、カルボキシ、ハロアルキル、または（ＮＲ^ａＲ^ｂ）カルボニルから選択され;および
   Ｒ^３は、水素、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アリールアルコキシカルボニル、カルボキシ、ホルミル、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル、または（ＮＲ^ａＲ^ｂ）カルボニルから選択されるか;あるいは、
   Ｒ^２およびＲ^３は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、窒素、酸素、または硫黄から独立して選択される１個もしくは２個のヘテロ原子を適宜含有する５-８員の芳香族または非芳香環を形成し;ここで、該５-８員環は、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルスルホニル、アリール、アリールアルキル、アリールスルホニル、カルボキシ、ホルミル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）カルボニル、オキソ、またはスピロ環から独立して選択された、１個、２個、または３個の置換基で適宜置換されており;
   Ｒ^２’およびＲ^３’は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、窒素、酸素、または硫黄から独立して選択される１個もしくは２個のヘテロ原子を適宜含有する５-８員の芳香族または非芳香環を形成し;ここで、該５-８員環は、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルスルホニル、アリール、アリールアルキル、アリールスルホニル、カルボキシ、ホルミル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキル、（ＮＲ^ａＲ^ｂ）カルボニル、オキソ、またはスピロ環から独立して選択される、１個、２個、または３個の置換基で適宜置換されており;
   Ｒ^４およびＲ^４’は各々、
   

   

   （式中、
   各ｍは、独立して０、１、または２であり;
   各ｓは、独立して０、１、２、３、または４であり;
   各Ｘは、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ_２、ＣＨ_２、ＣＨＲ^６、またはＣ（Ｒ^６）_２から独立して選択されるが; ただし、ｎが０であるとき、Ｘは、ＣＨ_２、ＣＨＲ^６、またはＣ（Ｒ^６）_２から選択され;
   各Ｒ^６は、アルコキシ、アルキル、アリール、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシ、または−ＮＲ^ａＲ^ｂから独立して選択され、ここで、該アルキルは、隣接する炭素原子と縮合３-６員環を適宜形成することができ、該３-６員環は、１個または２個のアルキル基で適宜置換されており;
   各Ｒ^７は、水素またはＲ^１１−Ｃ（Ｏ）−、もしくはＲ^１１−Ｃ（Ｓ）−から独立して選択され;
   Ｒ^８は、水素またはアルキルから選択され;
   Ｒ^９およびＲ^１０は各々、水素、アルケニル、アルコキシアルキル、アルキル、ハロアルキル、または（ＮＲ^ａＲ^ｂ）アルキルから独立して選択されるか;あるいは、
   Ｒ^９およびＲ^１０は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、ＮＲ^ｚ、Ｏ、またはＳから選択される１個もしくは２個のヘテロ原子を適宜含有する５-６員の飽和環を形成し;ここで、Ｒ^ｚは、水素またはアルキルから選択され;
   各Ｒ^１１は、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルアルキル、アルキル、アルキルカルボニルアルキル、アリール、アリールアルケニル、アリールアルコキシ、アリールアルキル、アリールオキシアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルケニル、（シクロアルキル）アルキル、シクロアルキルオキシアルキル、ハロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルケニル、ヘテロシクリルアルコキシ、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルオキシアルキル、ヒドロキシアルキル、−ＮＲ^ｃＲ^ｄ、（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）アルケニル、（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）アルキル、または（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）カルボニルから独立して選択される）
   から独立して選択され;
   Ｒ ^ａ およびＲ ^ｂ は、水素、アルケニルまたはアルキルから独立して選択され;
   Ｒ ^ｃ およびＲ ^ｄ は、水素、アルケニルオキシカルボニル、アルコキシアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アルキルスルホニル、アリール、アリールアルコキシカルボニル、アリールアルキル、アリールアルキルカルボニル、アリールカルボニル、アリールオキシカルボニル、アリールスルホニル、シクロアルキル、シクロアルキルスルホニル、ホルミル、ハロアルコキシカルボニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルコキシカルボニル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルアルキルカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、ヘテロシクリルオキシカルボニル、ヒドロキシアルキルカルボニル、（ＮＲ ^ｅ Ｒ ^ｆ ）アルキル、（ＮＲ ^ｅ Ｒ ^ｆ ）アルキルカルボニル、（ＮＲ ^ｅ Ｒ ^ｆ ）カルボニル、（ＮＲ ^ｅ Ｒ ^ｆ ）スルホニル、−Ｃ（ＮＣＮ）ＯＲ’または−Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ ^ｘ Ｒ ^ｙ から独立して選択され（ここで、Ｒ’はアルキルまたは無置換フェニルから選択され、該アリールアルキルのアルキル部分、該アリールアルキルカルボニル、該ヘテロシクリルアルキルおよび該ヘテロシクリルアルキルカルボニルは、１個の−ＮＲ ^ｅ Ｒ ^ｆ 基で適宜置換されていてもよい）、その中で、該アリール、該アリールアルコキシカルボニル、該アリールアルキル、該アリールアルキルカルボニル、該アリールカルボニル、該アリールオキシカルボニルおよび該アリールスルホニルのアリール部分、該ヘテロシクリル、ならびに該ヘテロシクリルアルコキシカルボニル、該ヘテロシクリルアルキル、該ヘテロシクリルアルキルカルボニル、該ヘテロシクリルカルボニルおよび該ヘテロシクリルオキシカルボニルのヘテロシクリル部分は、アルコキシ、アルキル、シアノ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキルまたはニトロから独立して選択される１〜３個の置換基で適宜置換されていてもよく;
   Ｒ ^ｅ およびＲ ^ｆ は、水素、アルキル、無置換アリール、無置換アリールアルキル、無置換シクロアルキル、無置換（シクロアルキル）アルキル、無置換ヘテロシクリル、無置換ヘテロシクリルアルキル、（ＮＲ ^ｘ Ｒ ^ｙ ）アルキルまたは（ＮＲ ^ｘ Ｒ ^ｙ ）カルボニルから独立して選択され;
   Ｒ ^ｘ およびＲ ^ｙ は、水素、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、無置換アリール、無置換アリールアルコキシカルボニル、無置換アリールアルキル、無置換シクロアルキル、無置換ヘテロシクリルまたは（ＮＲ ^ｘ’ Ｒ ^ｙ’ ）カルボニルから独立して選択され、ここで、Ｒ ^ｘ’ およびＲ ^ｙ’ は、水素またはアルキルから選択される］
   の化合物または医薬的に許容されるその塩。
2. ＤおよびＤ’が各々ＮＲ^５である、請求項１に記載の化合物または医薬的に許容されるその塩。
3. 各Ｒ^５が水素またはヒドロキシから独立して選択される、請求項２に記載の化合物または医薬的に許容されるその塩。
4. ｕおよびｕ’が各々０である、請求項１に記載の化合物または医薬的に許容されるその塩。
5. Ｒ^２が水素またはハロアルキルから選択される、請求項１に記載の化合物または医薬的に許容されるその塩。
6. Ｒ^３が水素またはハロから選択される、請求項１に記載の化合物または医薬的に許容されるその塩。
7. Ｒ^２およびＲ^３が、それらが結合している炭素原子と一緒になって、６-７員の炭素環を形成する、請求項１に記載の化合物または医薬的に許容されるその塩。
8. Ｒ^２’およびＲ^３’が、それらが結合している炭素原子と一緒になって、酸素、窒素、または硫黄から選択される１個のヘテロ原子を適宜含有する６-８員環を形成し；該環が、１個または２個のアルキル基で適宜置換されている、請求項１に記載の化合物または医薬的に許容されるその塩。
9. 式(II)
   

   

   ［式中、
   Ｒ^２は、水素またはハロアルキルから選択され;および
   Ｒ^３は、水素またはハロから選択されるか;あるいは
   Ｒ^２およびＲ^３は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、５-６員の芳香族または非芳香環炭素環を形成し;
   Ｒ^２’およびＲ^３’は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、酸素、窒素、または硫黄から選択される１個のヘテロ原子を適宜含有する６-８員の芳香族もしくは非芳香環を形成し;ここで、該環は１個または２個のアルキル基で適宜置換されており;
   Ｒ^４およびＲ^４’は各々、
   

   

   （式中、
   各ｓは、０または２であり;
   各Ｒ^６は、アルキルまたはハロから独立して選択され、ここで該アルキルは、隣接する炭素原子と縮合３員環を形成し;
   各Ｒ^７は、水素またはＲ^１１−Ｃ（Ｏ）−から独立して選択され;
   Ｒ^８は、水素またはアルキルから選択され;
   Ｒ^９およびＲ^１０は各々、水素またはアルキルから独立して選択され;
   各Ｒ^１１は、アルキル、アリールアルコキシ、アリールアルキル、または（ＮＲ^ｃＲ^ｄ）アルキルから独立して選択され;
   Ｒ ^ｃ およびＲ ^ｄ は、水素、アルケニルオキシカルボニル、アルコキシアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アルキルスルホニル、アリール、アリールアルコキシカルボニル、アリールアルキル、アリールアルキルカルボニル、アリールカルボニル、アリールオキシカルボニル、アリールスルホニル、シクロアルキル、シクロアルキルスルホニル、ホルミル、ハロアルコキシカルボニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルコキシカルボニル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルアルキルカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、ヘテロシクリルオキシカルボニル、ヒドロキシアルキルカルボニル、（ＮＲ ^ｅ Ｒ ^ｆ ）アルキル、（ＮＲ ^ｅ Ｒ ^ｆ ）アルキルカルボニル、（ＮＲ ^ｅ Ｒ ^ｆ ）カルボニル、（ＮＲ ^ｅ Ｒ ^ｆ ）スルホニル、−Ｃ（ＮＣＮ）ＯＲ’または−Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ ^ｘ Ｒ ^ｙ から独立して選択され（ここで、Ｒ’はアルキルまたは無置換フェニルから選択され、該アリールアルキルのアルキル部分、該アリールアルキルカルボニル、該ヘテロシクリルアルキルおよび該ヘテロシクリルアルキルカルボニルは、１個の−ＮＲ ^ｅ Ｒ ^ｆ 基で適宜置換されていてもよい）、その中で、該アリール、該アリールアルコキシカルボニル、該アリールアルキル、該アリールアルキルカルボニル、該アリールカルボニル、該アリールオキシカルボニルおよび該アリールスルホニルのアリール部分、該ヘテロシクリル、ならびに該ヘテロシクリルアルコキシカルボニル、該ヘテロシクリルアルキル、該ヘテロシクリルアルキルカルボニル、該ヘテロシクリルカルボニルおよび該ヘテロシクリルオキシカルボニルのヘテロシクリル部分は、アルコキシ、アルキル、シアノ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキルまたはニトロから独立して選択される１〜３個の置換基で適宜置換されていてもよく;
   Ｒ ^ｅ およびＲ ^ｆ は、水素、アルキル、無置換アリール、無置換アリールアルキル、無置換シクロアルキル、無置換（シクロアルキル）アルキル、無置換ヘテロシクリル、無置換ヘテロシクリルアルキル、（ＮＲ ^ｘ Ｒ ^ｙ ）アルキルまたは（ＮＲ ^ｘ Ｒ ^ｙ ）カルボニルから独立して選択され;
   Ｒ ^ｘ およびＲ ^ｙ は、水素、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、無置換アリール、無置換アリールアルコキシカルボニル、無置換アリールアルキル、無置換シクロアルキル、無置換ヘテロシクリルまたは（ＮＲ ^ｘ’ Ｒ ^ｙ’ ）カルボニルから独立して選択され、ここで、Ｒ ^ｘ’ およびＲ ^ｙ’ は、水素またはアルキルから選択される）
   から独立して選択される］
   の化合物または医薬的に許容されるその塩。
10. 式:
    

    

    
    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    から選択される化合物もしくは医薬的に許容されるその塩。
11. 請求項１に記載の化合物、もしくは医薬的に許容されるその塩、および医薬的に許容される担体を含む、ＨＣＶ感染症を治療するための医薬組成物。
12. 抗ＨＣＶ活性を有する１種または２種のさらなる化合物をさらに含む、請求項１１に記載の医薬組成物。
13. 前記さらなる化合物の少なくとも１つが、インターフェロンまたはリバビリンである、請求項１２に記載の医薬組成物。
14. 前記インターフェロンが、インターフェロンアルファ２Ｂ、ペグインターフェロンアルファ、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンアルファ２Ａ、またはリンパ芽球インターフェロンタウから選択される、請求項１３に記載の医薬組成物。
15. 患者に治療上有効な量の請求項１に記載の化合物もしくは医薬的に許容されるその塩、および抗ＨＣＶ活性を有する１種もしくは２種のさらなる化合物を組み合わせて含む、ＨＣＶ感染症を治療するための剤であって、請求項１に記載の化合物または医薬的に許容されるその塩の前、後もしくは同時に、抗ＨＣＶ活性を有する１種もしくは２種のさらなる化合物を投与することを特徴とする、該剤。
16. 前記さらなる化合物の少なくとも１つが、インターフェロンまたはリバビリンである、請求項１５に記載の剤。
17. 前記インターフェロンが、インターフェロンアルファ２Ｂ、ペグインターフェロンアルファ、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンアルファ２Ａ、またはリンパ芽球インターフェロンタウから選択される、請求項１６に記載の剤。