JP7306735B2

JP7306735B2 - 経口用組成物

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Publication number: JP7306735B2
Application number: JP2021067175A
Authority: JP
Inventors: 夏子田中; 千絵中島; 整一北村; 欣也高垣
Original assignee: Toyo Shinyaku Co Ltd
Current assignee: Toyo Shinyaku Co Ltd
Priority date: 2018-10-19
Filing date: 2021-04-12
Publication date: 2023-07-11
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Description

本発明は、消化酵素を含有する経口用組成物に関する。

従来、消化器官内におけるプロテアーゼ、アミラーゼといった消化酵素は、消化器官において食物性タンパク質やペプチド、デンプンやグリコーゲン等の糖質を分解することによる栄養吸収、不要なタンパク質や糖質の分解、タンパク質の活性調節などに大きな役割を担っていることが知られている。生物代謝促進や健康維持の観点から、これらの酵素の活性を高めることの重要性が近年、広く知られるようになっている。

一方、従来経口用又は経皮用の消化酵素活性化剤として、ヤグルマギク、ガジュマル、キイチゴ、グレープフルーツ、セイヨウキズタ、サンザシ、ナツメ及びキバナオランダセンニチから選ばれる１種を用いることが知られている（特許文献１を参照）。

特開2008-081441号公報

近年、消化酵素そのもの或いは消化酵素を含有する組成物を経口摂取することが広く行われている。消化酵素を含有する従来の経口用組成物は、その多くが失活した消化酵素を含有している。また経口摂取された消化酵素は、一部は胃酸により分解される可能性がある。しかしながら一般には、活性を有する消化酵素を経口摂取した場合、食物の消化を助け代謝を促進するのに一定の効果があると考えられている。従って、単に消化酵素のみを含有する場合に比べて、高い酵素活性を有する消化酵素含有組成物を経口摂取することの実益が存在する。

しかしながら、特許文献１に記載の消化酵素活性化剤を含め、従来の消化酵素活性を高める技術はその作用が十分ではなく、また、活性を促進させるべき消化酵素に対して、非常に高濃度の有効成分を要するといった課題が存在した。

そこで、本発明は、高い消化酵素活性を有し、天然物由来成分を有効成分として含有する組成物を提供することを課題とする。

本発明は、消化酵素と、該消化酵素とは異なる成分であって、フルーツの処理物若しくはフレーバー、糖質又は乳酸菌から選ばれる少なくとも一種と、を含有する経口用組成物を提供するものである。

本発明によれば、高い消化酵素活性を有する経口用組成物を提供することができる。

以下、本発明をその好ましい実施形態に基づき説明する。
本実施形態の経口用組成物は、消化酵素に加えてフルーツの処理物若しくはフレーバー、糖質又は乳酸菌を含有することにより、消化酵素活性が優れて高いものである。

（消化酵素）
本実施形態の経口用組成物は、消化酵素を有する。
消化酵素とは、食品成分を消化する酵素をいい、経口用組成物の投与対象が生成しうる酵素であってもよく、生成できない酵素であってもよい。本実施形態の経口用組成物に含まれる消化酵素は活性型であることが好ましい。活性型酵素とは酵素活性を有する酵素をいう。酵素活性を有するとは、活性を完全に失った状態ではないことをいう。酵素活性の失活は加熱やｐＨの変化等によって、酵素タンパク質が変性し、活性部位の立体構造が変わることで、基質が酵素に結合できなくなることによって起こる。

一般に、消化酵素としては、プロテアーゼ、アミラーゼ、リパーゼ、セルラーゼ及びガラクトシダーゼが知られている。

プロテアーゼはタンパク質やペプチドなどにおけるペプチド結合を加水分解することを触媒する酵素の総称である。プロテアーゼは、触媒作用によって大きく２つに分類され、タンパク質やペプチドなどの分子の内部のペプチド結合を加水分解してペプチドを遊離することを触媒するものがエンドプロテーゼ（プロテイナーゼ）であり、該分子のアミノ基末端又はカルボキシル基末端からペプチド結合を加水分解することによりアミノ酸を遊離することを触媒するものがエキソプロテアーゼである。
プロテアーゼとしては、フルーツの処理物若しくはフレーバー、糖質又は乳酸菌と組み合わせることによる酵素活性促進効果が高い点でシステインプロテアーゼを含有することが好ましく、特にパパインを含有することが好ましい。

またアミラーゼは、デンプンやグリコーゲン中のアミロースやアミロペクチンを、グリコシド結合を加水分解することで単糖類であるブドウ糖や二糖類であるマルトース及びオリゴ糖に変換する酵素の総称である。アミラーゼには、α－アミラーゼ、β－アミラーゼ、グルコアミラーゼがある。
α－アミラーゼは、別名を１，４－α－Ｄ－グルカングルカノヒドロラーゼ、グリコゲナーゼといい、デンプンやグリコーゲンのα－１，４－結合を不規則に切断し、多糖ないしマルトース、オリゴ糖を生み出す酵素である。
β－アミラーゼは別名を１，４－α－Ｄ－グルカングルカノマルトヒドロラーゼ、グリコゲナーゼあるいはサッカロゲンアミラーゼといい、デンプンやグリコーゲンをマルトース（麦芽糖）に分解する。
グルコアミラーゼは正式名称がグルカン１，４－α－グルコシダーゼといい、１，４－α－Ｄ－グルカングルコヒドロラーゼは、エキソ１，４－α－グルコシダーゼ、γアミラーゼ、リソソーマルα－グルコシダーゼあるいはアミログルコシダーゼを別名とする。糖鎖の非還元末端のα－１，４－結合をエキソ型に加水分解してブドウ糖１分子を産生する。α－１，６－結合も切断するものも知られている。

リパーゼとしては、トリアシルグリセリドリパーゼ、ホスホリパーゼが挙げられる。セルラーゼとしては、エンドグルカナーゼ及びエキソグルカナーゼが挙げられる。ガラクトシダーゼとしては、β-ガラクトシダーゼなどが挙げられる。リパーゼとしては、トリアシルグリセリドリパーゼ、ホスホリパーゼが挙げられる。セルラーゼとしては、エンドグルカナーゼ及びエキソグルカナーゼが挙げられる。ガラクトシダーゼとしては、β-ガラクトシダーゼなどが挙げられる。

消化酵素としては、プロテアーゼ及びアミラーゼが、フルーツの処理物若しくはフレーバー、糖質又は乳酸菌による酵素活性向上効果が高いために好ましい。

消化酵素としては、市販の酵素製剤であってもよく、消化酵素を含有する食材加工物であってもよい。例えば、プロテアーゼの一種である前記のパパインは、未成熟パパイヤ果実及び／若しくは果汁又はそれらの加工物中に多く含まれることが知られており、本実施形態では、未成熟パパイヤ果実及び／若しくは果汁又はそれらの加工物をパパインとして使用できる。パパイヤは熱帯アメリカ原産の果物として知られる、パパイヤ属植物であれば特に限定されず、例えば、Carica papayaが挙げられる。パパインは、パパイヤの果実又は果汁の抽出物及びその乾燥粉末が特に好ましい。

例えば、プロテアーゼ及びそれを含有する食材加工物は、そのタンパク質分解力価が乾燥質量で、５，０００単位／ｇ以上のものを用いることが好ましく、１０，０００単位／ｇ以上のものを用いることがより好ましく、２０，０００単位／ｇ以上のものを用いることが特に好ましく、３０，０００単位／ｇ以上のものを用いることが一層好ましい。本明細書でいうタンパク質分解力価とは、カゼイン（乳製）を基質とし、３７℃、ｐＨ６．０において、反応初期の１分間に１μｇのＬ－チロシンに相当する波長２７５ｎｍの吸光度を増加させる活性を１単位とするものである。タンパク質分解力価はタンパク質消化力と呼ばれることもあり、後述する実施例に記載の方法にて測定できる。また上述した理由から、パパインとしては、タンパク質分解力価が５，０００単位／ｇ以上のものを用いることが好ましく、１０，０００単位／ｇ以上のものを用いることがより好ましく、５０，０００単位／ｇ以上のものを用いることが特に好ましい。

また例えばアミラーゼ及びそれを含有する食材加工物は、後述するデンプン分解力価が１～５００００００単位／ｇであることが好ましく、１０～５０００００単位／ｇであることが好ましく、１００～１０００００単位／ｇであることがより好ましい。
デンプン分解力価の測定方法は定法に従えばよいが、例えば以下の方法が挙げられる。デンプン分解力価測定方法：デンプン（溶性）を基質とし、４０℃、ｐH５．０において、３０分間に１％デンプン溶液１mlをヨウ素呈色度が波長670nm、光路長10nmで６６％の透過率を与えるまで分解する活性を１単位として測定することが出来る。

本実施形態の経口用組成物において、消化酵素は固体状であってもよく、液状、シロップ状、ペースト状、ゲル状、ゼリー状、クリーム状、エマルション状、スプレー状、ムース状、ローション状等の流動状であってもよい。固体状としては、粉末状、顆粒状、粒状、タブレット状、チュアブル状、カプセル状、ソフトカプセル状、などが挙げられる。

（フルーツの処理物若しくはフレーバー、糖質又は乳酸菌）
本発明において、フルーツの処理物若しくはフレーバー、糖質及び乳酸菌はいずれも消化酵素とは異なる成分である。但し、上述したように消化酵素は、食材加工物であってよく当該食材にはフルーツ及び乳酸菌も含まれる。ここでいう加工物の加工方法としては、フルーツ処理物におけるフルーツの処理方法や乳酸菌の処理方法と同様のものが挙げられる。
従って、例えば、本実施形態の経口用組成物には、２種以上のフルーツ加工物を含有するものであって、そのうち１種以上をフルーツの処理物として含有し、そのうち１種以上が消化酵素として含有するものが含まれる。

・フルーツの処理物若しくはフレーバー
フルーツの処理物若しくはフレーバーにおけるフルーツとは、食用になる果実又は果実的野菜の果実部分又は花托を指す。なお、本明細書において、果実は、果皮、果肉、果汁、種子を含む。

フルーツとしては仁果類、核果類及びその他の種類のものが挙げられる。フルーツとしては、カリン、チュウゴクナシ、ナシ、マルメロ、セイヨウカリン、リンゴ等の仁果類；アメリカンチェリー（ブラックチェリー、ダークチェリーとも呼ばれる）、アンズ、ウメ、サクランボ、スモモ、モモ、マンゴー、ビワ、プルーン等の核果類；その他、クランベリー（オオミツルコケモモとも呼ばれる）、ストロベリー（苺、イチゴとも呼ばれる）、ビルベリー、ブラックベリー、ブルーベリー、ラズベリー、レッドカラント、グーズベリー、カシス（クロスグリとも呼ばれる）等のベリー類；アケビ、イチジク、カキ、キウイフルーツ（キウイとも呼ばれる）、グミ（頽子、胡頽子、茱萸とも呼ばれる）、クワ、コケモモ（苔桃、岩桃、はまなし、おかまりんごとも呼ばれる）、ザクロ（柘榴、石榴とも記載される）、サルナシ（猿梨、シラクチズル、コクワ）、スグリ（酢塊、グーズベリー）、ナツメ（棗とも呼ばれる）、ニワウメ（庭梅、こうめ、いくりとも呼ばれる）、ハスカップ（クロミノウグイスカグラとも呼ばれる）、フサスグリ（房酸塊、レッドカラントとも呼ばれる）、ブドウ（葡萄とも記載される）、ユスラウメ、パイナップル、メロン、バナナ、ミカン、レモン、オレンジ、グレープフルーツ、アセロラ、パッションフルーツ、スイカ、アボカド、ドラゴンフルーツ等が挙げられる。
中でも、仁果類、核果類、ベリー類、バナナ、パイナップル、メロンから選ばれる少なくとも１種を用いることが好ましく、とりわけ、リンゴ、マンゴー、ストロベリー、バナナ、メロン及びパイナップルから選ばれる少なくとも１種を用いることが好ましい。

リンゴとは、バラ科リンゴ属の落葉高木樹の果実である。
マンゴーはウルシ科マンゴー属の果樹の果実である。
ストロベリーは、バラ科の多年草であり、オランダイチゴ、キイチゴ、ヘビイチゴ等の総称であり、これ等の花托及び／又は果実を用いることが好ましい。特にオランダイチゴの花托及び／又は果実が好ましい。
バナナは、バショウ科バショウ属のうち、果実を食用とする品種群の総称であり、その品種群の果実を指す。
メロンは、果実を食用にするウリ科の一年生草本植物の果実であり、学名をCucumis meloと呼ばれる。
パイナップルは、パイナップル科の多年草の果実であり、学名をAnanas comosusと呼ばれる。

フルーツの処理物若しくはフレーバーは、未熟な状態のフルーツの処理物若しくはフレーバーであってもよいが、熟した状態のフルーツの処理物若しくはフレーバーであることが好ましい。

フルーツの処理物は、フルーツに、発酵、乾燥、粉砕、抽出、加熱、ろ過、搾汁、スラリー化などの何れかの処理を施すことにより得られたものである。

フルーツからフルーツの処理物若しくはフレーバーを得る場合、当該フルーツは、収穫直後のもの又は収穫後直ちに処理されたものであることが好ましい。処理までに時間を要する場合、フルーツの変質を防ぐために低温貯蔵などの当業者が通常用いる貯蔵手段により貯蔵することが好ましい。

フルーツの処理物若しくはフレーバーとしては、例えば、フルーツを乾燥処理及び粉砕処理して得られる乾燥粉末（以下、「乾燥粉砕末」ともいう）、フルーツの細片化物及びその乾燥物、フルーツの搾汁（果汁ともいう場合がある）及びその乾燥粉末、フルーツの抽出物及びその乾燥粉末などが挙げられるが、これらに限定されない。ただし、加工、貯蔵、運搬などの容易性や使用形態の汎用性といった観点から、最終的に粉末の形態をしていることが好ましい。本明細書で単に粉末という場合、通常、乾燥粉砕末、細片化物の乾燥粉末、搾汁の乾燥粉末及び抽出物の乾燥粉末のいずれをも含む。
また、フルーツの処理物若しくはフレーバーは、フルーツの発酵物やその乾燥粉末であってもよい。フルーツの発酵物とは、フルーツ又はその粉砕物、搾汁、抽出物若しくは細片化物を発酵させたものが含まれる。

とりわけ、フルーツ処理物としては、フルーツの抽出物又はその乾燥粉末、又はフルーツ果汁若しくはその乾燥粉末であることが好ましい。

例えば、特定の植物体を乾燥粉砕末化するには従来公知の方法を用いることができる。そのような方法としては、植物体に対して、乾燥処理及び粉砕処理を組み合わせた方法を用いることができる。乾燥処理及び粉砕処理に追加して殺菌処理を行ってもよい。

乾燥処理は特に限定されないが、例えば、植物体の水分含量が１０％以下、好ましくは５％以下となるように乾燥する処理が挙げられる。乾燥処理は、例えば、熱風乾燥、高圧蒸気乾燥、電磁波乾燥、凍結乾燥などの当業者に公知の任意の方法により行われ得る。加熱による乾燥は、例えば、４０℃～１４０℃、好ましくは８０℃～１３０℃にて加温により植物体が変色しない温度及び時間で行われ得る。

粉砕処理は特に限定されないが、例えば、クラッシャー、ミル、ブレンダー、石臼などの粉砕用の機器や器具などを用いて、当業者が通常使用する任意の方法により植物体を粉砕する処理が挙げられる。粉砕された植物体は、必要に応じて篩にかけられ、例えば、３０～２５０メッシュを通過するものを植物体の粉末として用いることが好ましい。粒径が２５０メッシュ通過のもの以下とすることで、さらなる加工時に植物体の粉末が取り扱いやすくなり、粒径が３０メッシュ通過以上のものとすることで、植物体の粉末と他の素材との均一な混合が容易になる。

具体的な乾燥粉砕末化の方法としては、例えば、植物体を切断した後、水分含量が１０質量％以下、好ましくは５質量％以下となるように乾燥し、その後粉砕する方法が挙げられる。この他にも、例えば、植物体を切断した後、揉捻し、その後、乾燥し、粉砕する方法；植物体を乾燥し、粗粉砕した後、１１０℃以上で加熱し、さらに微粉砕する方法などが挙げられる。

また、植物体を細片化する方法は特に限定されないが、例えば、スライス、破砕、細断などの当業者が植物体を細片化する際に通常使用する方法を用いることができる。細片化の一例として、スラリー化してもよい。スラリー化は、植物体をミキサー、ジューサー、ブレンダー、マスコロイダーなどにかけ、どろどろした粥状（液体と固体との懸濁液）にすることにより行う。

植物体を搾汁する方法は特に限定されないが、例えば、植物体又はその細片化物を圧搾する方法、植物体の細片化物を遠心やろ過する方法などを挙げることができる。具体的な搾汁方法の例としては、ミキサー、ジューサーなどの機械的破砕手段によって搾汁し、必要に応じて、篩別、濾過などの手段によって粗固形分を除去することにより搾汁液を得る方法が挙げられる。

植物体の抽出物（エキス）を得る方法は特に限定されないが、例えば、植物体又はその細片化物或いは乾燥物等に、エタノール、水、含水エタノールなどの当業者が通常用いる抽出溶媒を加え、必要に応じて攪拌又は／及び加温して抽出する方法などを挙げることができる。その後の篩別、濾過などの手段によって粗固形分を除去して抽出物を得てもよい。

更に植物体を発酵する方法は、植物体又はその粉砕物、搾汁、抽出物若しくは細片化物に対して、乳酸菌、酵母、麹菌、納豆菌、酢酸菌等を添加して行うことができる。これらは１種又は２種以上を組み合わせてもよい。ここでいう乳酸菌はビフィズス菌であってもよく、ビフィズス菌を除く一般乳酸菌であってもよい。

上記の細片化処理で得られた搾汁（果汁）や抽出処理で得られた液状抽出物、発酵後の液状物やスラリー等はいずれも熱風乾燥、高圧蒸気乾燥、電磁波乾燥、凍結乾燥などの当業者に公知の任意の方法により乾燥粉末化されうる。この際にデキストリン等の賦形剤を添加してもよい。

フルーツフレーバーは、フルーツからの回収香、半合成品、合成品のいずれかを含む。回収香は水などの水性溶媒やエタノール等の極性溶媒、又はその混合物等で抽出したものであってもよく、或いは、非極性溶媒で抽出したものであってもよい。フルーツフレーバーとは、フルーツ特有の風味を有する者を意味し、一般に、フルーツのフレーバー、或いはフルーツのエッセンスとして入手することができる。また、一般に、フルーツのフレーバーとして市販されているものを挙げることができる。これらフレーバーの具体的な態様としては、たとえば［特許庁公報，周知・慣用技術集（香料）第２部，食品用香料］に記載のフレーバーを例示することができる。

有効成分として用いられるフルーツの処理物若しくはフレーバーは市販されているものを用いてもよい。市販品としては、例えば、後述する実施例に記載されているものが挙げられる。

・糖質
糖質は、糖類又は糖アルコールであることが好ましく、とりわけ、単糖類若しくは少糖類又はその糖アルコールであることが好ましい。ここでいう少糖類としては、構成糖数が２以上５０以下であることが好ましく、２以上４０以下であることがより好ましく、２以上３０以下であることが特に好ましい。単糖類としては、グルコース、フルクトース、マンノース、ガラクトース、キシロース、アラビノース等が挙げられる。少糖類としては、乳糖（ラクトース）、ショ糖（スクロース）、麦芽糖（マルトース）などの２糖類、マルトトリオースなどの３糖類、フラクトオリゴ糖、キシロオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、キシロオリゴ糖、環状オリゴ糖などのオリゴ糖が挙げられる。また、糖アルコールとしては、糖類に対応する糖アルコールが挙げられ、具体的には、単糖のアルコールとしては、例えばエリスリトール、Ｄ－トレイトール、Ｌ－トレイトール等のテトリトール、Ｄ－アラビニトール、キシリトール等のペンチトール、Ｄ－イジトール、ガラクチトール（ダルシトール）、Ｄ－グルシトール（ソルビトール）等のヘキシトール、イノシトール等のシクリトール、マンニトール、ボレミトール、リビトール、ペルセイトール、Ｄ－エリトロ－Ｄ－ガラクト－オクチトール等が挙げられる。また、二糖のアルコールとしては、例えば、還元麦芽糖（マルチトール）、ラクチトール、還元パラチノース（イソマルト）等が挙げられる。また三糖以上のアルコールとしては、マルトトリイトール、イソマルトトリイトール、パニトール等が挙げられる。
中でも、糖質としては、構成糖数が２以上５０以下であることが好ましく、２以上３０以下であることがより好ましく、２以上１５以下であることがより特に好ましく、また、ガラクトース又はグルコースを構成糖とする糖類又はその糖アルコールが好ましい。

・乳酸菌
乳酸菌は生菌であっても死菌であってもよく、死菌の場合は菌体破砕物であってもよい。乳酸菌粉末は、例えば培養した乳酸菌又は発酵に使用した乳酸菌培養物から培地等の不要分を除いた後に乳酸菌の菌体を公知の方法で粉末化して得ることができる。乳酸菌の種類としては、代謝産物として乳酸を産生するものであれば特に限定されず、ヒトなどの動物において従来経口摂取されているものが挙げられ、例えば、Bifidobacterium属、Lactbacillus属、Enterococcus属、Leuconostoc属、Pediococcus属、Staphylococcus属、Tetragenococcus属、Bacillus属のものが挙げられる。
Bifidobacterium属としては、Bifidobacterium bifidum、Bifidobacterium breve、Bifidobacterium infantis、Bifidobacterium lactis、Bifidobacterium longum、Bifidobacterium adolescentis、Bifidobacterium mongolienseが挙げられる。
Lactbacillus属としては、Lactbacillus brevis、Lactbacillus gasseri、Lactobacillus acidophilus、Lactobacillus buchneri、Lactobacillus bulgaricus、Lactobacillus delburvecki、Lactobacillus casei、Lactobacillus crispatus、Lactobacillus curvatus、Lactobacillus halivaticus、Lactobacillus pentosus、Lactobacillus plantarum、Lactobacilus paracasei、Lactobacillus rhamnosus、Lactobacillus salivarius、Lactobacillus sporogenes、Lactobacillus sakei、Lactobacillus fructivorans、Lactobacillus hilgardii、Lactobacillus reuteri、Lactobacillus fermentumが挙げられる。
Enterococcusとしては、Enterococcus faecalis(Streptococcus faecalis と称されることもある)、Enterococcus faesium（Streptococcus faesiumと称されることもある)、Streptococcus thermophilus、Lactococcus lactis(Streptococcus lactisと称されることもある) が挙げられる。
Leuconostoc属としては、Leuconostoc mesenteroides、Leuconostoc oenos が挙げられる。
Pediococcus属としては、Pediococcus acidilactici、Pediococcus pentosaceusが挙げられる。
Staphylococcus属としては、Staphylococcus carnosus、Staphylococcus xylosusが挙げられる。
Tetragenococcus属としては、Tetragenococcus halophilusが挙げられる。Bacillus属としては、Bacillus coagulans、及びBacillus mesentericusなどが挙げられる。
とりわけ、Bacillus coagulans、Enterococcus faecalis及びBifidobacterium bifidumが好ましい。これらは、１種を単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。

本実施形態の経口用組成物において、糖質及び乳酸菌は通常粉末状であるが、液状、シロップ状、ペースト状、ゲル状、ゼリー状、クリーム状、エマルション状、スプレー状、ムース状、ローション状等の流動状であってもよい。固体状としては、粉末状、顆粒状、粒状、タブレット状、チュアブル状、カプセル状、ソフトカプセル状、などであってもよい。

本発明の組成物における消化酵素及びフルーツの処理物若しくはフレーバー、糖質又は乳酸菌（以下、特定成分ともいう）の含有量は、少なくとも高い消化酵素活性作用を奏し得る有効量であれば、有効成分のみからなるものであってもよいが、例えば下記の量であると、より一層高い消化酵素活性作用を奏しうるために好ましい。本発明の組成物はフルーツの処理物若しくはフレーバー、糖質又は乳酸菌を含有することで特定の消化酵素を単独で含有する場合に比べて当該消化酵素活性が高まるものである。例えば本実施形態の組成物はプロテアーゼを含有する場合、プロテアーゼを単独で含有する場合に比べて高いプロテアーゼ活性を有するものであり、アミラーゼを含有する場合、アミラーゼを単独で含有する場合に比べて高いアミラーゼ活性を有するものである。

組成物の消化酵素及びフルーツの処理物若しくはフレーバー、糖質又は乳酸菌の乾燥質量比（［消化酵素］：［フルーツの処理物若しくはフレーバー、糖質又は乳酸菌］）は、１：０．０００１以上１：１０００，０００以下であり、好ましくは１：０．００１以上１：１００，０００以下であり、より好ましくは１：０．０１以上１：１０，０００以下であり、特に好ましくは１：０．１以上１：１，０００以下である。例えば組成物が消化酵素として、食材加工物を含む場合、食材加工物の量をパパインの量とみなす（以下同様）。

組成物の固形分中、消化酵素及びフルーツの処理物若しくはフレーバー、糖質又は乳酸菌の含有量の総量は、０．００１質量％以上９０質量％以下が好ましく、０．０１質量％以上８０質量％以下がより好ましく、０．１質量％以上７０質量％以下が特に好ましい。

消化酵素及びフルーツの処理物若しくはフレーバー、糖質又は乳酸菌の含有量の総量は、１日あたりの使用量として下限値を消化酵素及びフルーツの処理物若しくはフレーバー、糖質又は乳酸菌の乾燥質量で、例えば、１０ｍｇ以上、好ましくは１００ｍｇ以上、より好ましくは２００ｍｇ以上となるように設定することができる。また、１日あたりの使用量として上限値を消化酵素及び植物処理物の乾燥質量で、例えば、２００００ｍｇ以下、好ましくは１５０００ｍｇ以下、より好ましくは１００００ｍｇ以下となるように設定することができる。

本発明の組成物は、フルーツの処理物若しくはフレーバー、糖質又は乳酸菌を含有することにより、後述する実施例によって実証されているとおり、アミラーゼ活性やプロテアーゼ活性等の消化酵素活性が、消化酵素又はフルーツの処理物若しくはフレーバー、糖質又は乳酸菌を単独で含有する場合に比べて優れて高いものとなる。

経口用組成物は固体状であってもよく、液状、シロップ状、ペースト状、ゲル状、ゼリー状、クリーム状、エマルション状、スプレー状、ムース状、ローション状等の流動状であってもよい。固体状としては、粉末状、顆粒状、粒状、タブレット状、チュアブル状、カプセル状、ソフトカプセル状、などが挙げられる。

本発明の組成物の包装形態は特に限定されず、剤形などに応じて適宜選択できるが、例えば、ＰＴＰなどのブリスターパック；ストリップ包装；ヒートシール；アルミパウチ；プラスチックや合成樹脂などを用いるフィルム包装；バイアルなどのガラス容器；アンプルなどのプラスチック容器などが挙げられる。

本発明の組成物の製造方法は特に限定されず、使用態様に応じて当業者に知られる一般的な製造方法に準じて製造される。例えば、顆粒状や固形状のものについては、そのまま又は上記のその他の成分や第２の生理活性成分と同時又は数段階に分けて混和したものを、流動層造粒法、攪拌造粒法、押出造粒法などの造粒方法に従って造粒して顆粒状とし、さらに打錠機などを用いる常法に従って圧縮成形することによって錠状に成形できる。

本発明の組成物における消化酵素及びフルーツの処理物若しくはフレーバー、糖質又は乳酸菌以外の成分としては特に制限されず、賦形剤、増粘剤、油脂、ビタミン類、製造用剤など、他の成分と任意に組み合わせることができる。

また、本発明の組成物は、消化酵素及び消化酵素及びフルーツの処理物若しくはフレーバー、糖質又は乳酸菌を含有することにより、高いプロテアーゼ活性作用、アミラーゼ活性等の酵素作用を通じて、栄養吸収促進剤、タンパク質分解剤、タンパク質活性調節剤、デンプン質分解剤などの態様を採り得る。
一般に体内が酵素不足になると、代謝酵素が食物の消化に優先して使用されるため、体内の代謝が低下するといわれている。消化酵素を経口摂取により体内に供給すると、体内での代謝酵素の産生が増加するか又はその消費を抑制し、これにより代謝が増加または改善することでダイエット効果があるといわれている。また、消化酵素を経口摂取により体内に供給すると、消化器官での消化力が向上し、これが整腸につながり、便秘や腹部肥満が解消されやすいとされている。
本発明の組成物は消化酵素活性が高いため、これを経口摂取により体内に供給することで、これらのダイエット効果並びに便秘又は腹部肥満を解消する効果を高めるものと期待される。

本発明の組成物は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、期待される作用効果が奏される限り特に限定はなく、ヒト以外の動物に対して適用することができる。本発明の組成物の使用者は特に限定されず、例えば、健常者であってもよいが、プロテアーゼやアミラーゼ等の消化酵素による生理活性が期待される者であることが好ましく、４０歳以上の中高年者がより好ましい。本発明の組成物の使用頻度は特に限定されず、例えば、１週間に１度以上であり、好ましくは１週間に２度以上である。

本発明の組成物は、有効成分に加えて、プロテアーゼやアミラーゼ等の消化酵素若しくはそれらの促進作用を示す第２の生理活性成分を含有することができる。このような第２の生理活性成分としては、これまでに知られている消化酵素活性を示すものであれば特に限定されない。例えば、特許文献１に記載のプロテアーゼ活性促進作用を示す組成物や剤の有効成分が挙げられる。本発明の特定成分に加えて第２の生理活性成分を含有することにより、本発明の組成物は、相乗的な消化酵素活性を示す組成物であり得る。第２の生理活性成分は、１種又は２種以上の成分であり得る。第２の生理活性成分の配合量は、本発明の課題の解決を妨げない限り特に限定されず、適宜調整される。

以上のように好ましい実施形態を説明したが、本発明はこの実施形態に限定されない。例えば、本発明は、フルーツの処理物若しくはフレーバー、糖質又は乳酸菌を含有する消化酵素活性向上用組成物を提供するものであってもよい。フルーツ成分、糖質又は乳酸菌としては上記で説明したものを使用できる。また消化酵素としては、上記で説明したものが挙げられる。消化酵素活性向上用組成物の組成は、それ自体は消化酵素の含有を必須としない（もちろん消化酵素を含有していてもよいが）点以外は上記の本発明の経口用組成物と同様である。従って上記の経口用組成物の説明は消化酵素の含有を必須としていない点以外は、消化酵素活性向上用組成物にすべて当てはまる。このような消化酵素活性向上用組成物は、消化酵素を含有する食品や経口用製剤と共に摂取することで、当該食品や製剤中の消化酵素の活性を効果的に高めることができる。

以下、本発明を実施例によりさらに詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではなく、本発明の課題を解決し得る限り、本発明は種々の態様をとることができる。

（１）被験試料
下記表１～表３に示す被験試料として以下のものを用いた。
（１－１）α－アミラーゼ：市販の酵素製剤粉末（デンプン分解力価：～３０単位／ｍｇ）を用いた。
パパイン：未成熟パパイヤの種子から抽出した市販のパパイヤ抽出物粉末（タンパク質分解力価：９０，０００単位／ｇ）を用いた。
（１－２）フルーツ成分として下記の粉末を用いた。
・パイナップル：パイナップル果実を含水エタノールで抽出した抽出物の乾燥粉末、セラミド含有）を用いた。
・ストロベリー：市販されているストロベリー濃縮果汁の乾燥粉末（スプレードライ）を用いた。
・マンゴー：マンゴーピューレの乾燥粉末を用いた。
・メロン：市販されているメロン胎座を熱水で抽出した抽出物の乾燥粉末を用いた。
・アップルフレーバー：市販のリンゴの香料（天然香料基原物質リスト（別添添加物２－２）記載の香料及び食衛生法施行規則（別表第１）記載の香料を含む）を用いた。
・バナナフレーバー：市販のバナナの香料（天然香料基原物質リスト（別添添加物２－２）記載の香料及び食衛生法施行規則（別表第１）記載の香料を含む）を用いた。
・マンゴーフレーバー：市販のマンゴーの香料（天然香料基原物質リスト（別添添加物２－２）記載の香料及び食衛生法施行規則（別表第１）記載の香料を含む）を用いた。
・乳糖：市販されている乾燥粉末を用いた。
・還元麦芽糖：市販されている乾燥粉末を用いた。
・有胞子性乳酸菌：市販されている学名Bacillus coagulansの発芽前の胞子状態の乾燥粉末を用いた。
・乳酸菌（死菌）：α－アミラーゼ活性測定には市販されている学名Enterococcus faecalisの死菌の乾燥粉末を用いた。プロテアーゼ活性測定には、学名Enterococcus faecalisの死菌の水抽出物（死菌の乾燥粉末を水で16時間抽出し、遠心後、上清を凍結乾燥により、乾燥粉末化させたもの）又はエタノール抽出物（死菌の乾燥粉末をエタノール（50%又は100%）で16時間抽出し、遠心後、上清を凍結乾燥により、乾燥粉末化させたもの）を用いた。

（２）実施例１～１１、比較例１～１２
フルーツの処理物又はフレーバー、糖質又は乳酸菌を、消化酵素であるα－アミラーゼと組み合わせた組成物は、デンプン分解酵素活性が顕著に向上することを、以下のとおりに実証した。

＜α－アミラーゼ活性測定＞
（２－１）試料調製
酢酸及び酢酸ナトリウムを水に溶解させて室温にてｐＨ５の２０ｍＭ酢酸緩衝液を調製した。調製した２０ｍＭ酢酸緩衝液に、デンプン（和光純薬：１９１－０３９８５）を０．５ｍｇ／ｍｌで溶解し、デンプン溶液とした。
１Ｍ塩酸にヨウ化カリウムを１ｍｇ／ｍｌになるように溶解した後、ヨウ素を０．１ｍｇ／ｍｌになるように溶解し、ヨウ素液とした。
前記２０ｍＭ酢酸緩衝液に下記表１に示す被験試料を表１に示す濃度となるように分散ないし溶解させることにより、被験試料溶液を調製した。

（２－２）検量線
２０ｍＭ酢酸緩衝液及び、０．５ｍｇ／ｍｌデンプン溶液を用いて、デンプン濃度を０ｍｇ／ｍｌ、０．０６ｍｇ／ｍｌ、０．１２５ｍｇ／ｍｌ、０．２５ｍｇ／ｍｌ及び０．５ｍｇ／ｍｌの各濃度に調整したデンプン溶液を用意した。各濃度のデンプン溶液１ｍｌに、２０ｍＭ酢酸緩衝液１２５μｌ、ヨウ素液１２５μｌを順に加え、６２０ｎｍにおける吸光度を測定し検量線を作成した。

（２－３）デンプン分解力価の測定
０．５ｍｇ／ｍｌデンプン溶液１ｍｌを３０℃に保ち、（２－１）で調製した被験物質溶液を１２５μｌ加えて反応を開始させ、２０分後にヨウ素液を１２５μｌ加えよく混合し、酵素反応２０分の溶液とした。
それとは別に、０．５ｍｇ／ｍｌデンプン溶液１ｍｌにヨウ素液１２５μｌ、被験物質溶液１２５μｌを順に加えよく混合したものを酵素反応０分の溶液とした。酵素反応０分の溶液及び酵素反応２０分の溶液のそれぞれの６２０ｎｍにおける吸光度を測定した。
酵素反応０分及び２０分の吸光度差Δから、（２－２）で得た検量線に基づき、被験試料により消化されたデンプン当量値を算出した。
得られたデンプン当量値について、α－アミラーゼ単体の値（比較例１）を１００％としたときの相対値を求め、デンプン分解力価（相対値）とした。結果を下記表１に示す。なお、下記表において、〇は、上記（２－１）で調製した被験試料溶液が、左欄に記載の被験試料を同表に記載の濃度で含有していたことを示す（下記表２においても同様）。

上記表１に示すように、フルーツ成分、糖質又は乳酸菌のみを用いた比較例２～１２によれば、α－アミラーゼを単独で用いた比較例１に比べて、デンプン分解力価は大幅に低いのに対し、フルーツ成分、糖質又は乳酸菌とα－アミラーゼとの組み合わせた各実施例では、各フルーツ成分、糖質又は乳酸菌単独、及びα－アミラーゼ単独の場合のデンプン分解力価の合計値よりも大幅に高いデンプン分解力価が得られた。従って、フルーツ処理物又はフレーバー、糖質又は乳酸菌とα－アミラーゼとを組み合わせた本発明の経口用組成物によるデンプン分解酵素活性向上効果が優れていることが判る。

（３）実施例１２～３１、比較例１３～２６
特定のフルーツ成分、糖質又は乳酸菌が、消化酵素であるプロテアーゼ活性を顕著に向上させることを以下のとおりに実証した。

＜プロテアーゼ活性測定＞
（３－１）チロシン検量線の作成
チロシンを１０５℃で３時間乾燥させた後、０．１００ｇを正確に量り、０．２Ｎ塩酸を加えて溶解し、正確に１００μｌとしたものを、チロシン標準溶液とした。このチロシン標準溶液１００μｌを正確に量り、０．２Ｎ塩酸で５ｍｌにメスアップ後（２０μｇ／ｍｌ）、１５μｇ／ｍｌ、１０μｇ／ｍｌ及び５μｇ／ｍｌの各濃度に希釈し、検量線試液とした。

０．２Ｎ塩酸及び検量線試液の各溶液２００μｌに０．５５Ｍ炭酸ナトリウム５００μｌ、Ｆｏｌｉｎｅ試薬１００μｌを加え、３７℃で３０分間インキュベートした。ここで、Ｆｏｌｉｎｅ試薬はタングステン酸ナトリウム５ｇとリンモリブテン酸１ｇを純水５０ｍｌに溶解し、リン酸２．５ｍｌを加え還流抽出後、２００ｍＬにメスアップすることによって調製した。試験は繰返し数２で実施した。

９６ウェルプレートに２００μｌずつ移し、６６０ｎｍにおけるそれぞれの吸光度Ａ₀、Ａ₁、Ａ₂、Ａ₃及びＡ₄を測定した。ここで、Ａ₀、Ａ₁、Ａ₂、Ａ₃及びＡ₄のチロシン濃度は、それぞれ０、５、１０、１５及び２０μｇ／ｍｌである。

測定値について、縦軸に吸光度差（Ａ_n－Ａ₀）、横軸に各溶液のチロシン濃度（μｇ／ｍｌ）をとり、検量線を作成した。得られた検量線から吸光度差１．０００に対するチロシン量（［Ｆ］μｇ／ｍｌ）を算出した。

（３－２）タンパク質分解力価の測定
カゼイン溶液は次のようにして調製した。すなわち、カゼイン（ウシ乳由来（Ｈａｍｍａｒｓｔｅｎ処方）；和光純薬工業社）約１ｇを精密に量り、１０５℃で２時間インキュベートした後、乾燥質量を測定した。得られた乾燥カゼイン１．２０ｇ相当を精密に量り、０．０５Ｍリン酸一水素二ナトリウムの水溶液１６０ｍｌを加え、水浴中で４０℃にて、約１５分加温して溶解した。１Ｍ塩酸を用いてｐＨ７．５に調製し、超純水で２００ｍｌにメスアップすることにより、カゼイン溶液を調製した。

タンパク質沈殿溶液として、溶媒を超純水とし、０．１１Ｍトリクロロ酢酸、０．２２Ｍ酢酸ナトリウム及び０．３３Ｍ酢酸を含有する溶液を調製した。

酵素希釈溶液として、溶媒を超純水とし、０．０１ＭＮａＣｌ、０．００２Ｍ酢酸カルシウム及び０．００２Ｍ硫酸カルシウムを含有する溶液を調製した。

上記の酵素希釈溶液１ｍｌに、下記表２に記載の被験試料を表２に記載の濃度になるように溶解させて被験試料溶液を調製した。

カゼイン溶液５００μｌを３７℃で１０分間インキュベートし、被験試料溶液１００μｌを加え、ただちに振り混ぜた。得られた溶液を３７℃で１０分間インキュベートした（インキュベート時の溶液中のｐＨ＝６．０）。タンパク質沈殿溶液５００μｌを加え、３７℃、３０分間でインキュベートした後、１０，０００ｒｐｍで３分間、室温にて遠心した。

また、ブランクとして被験試料溶液１００μｌにタンパク質沈殿溶液５００μｌを加えて混合後、カゼイン溶液５００μｌを添加したものを調製し、３７℃、３０分間でインキュベートした後、１０，０００ｒｐｍで３分間、室温にて遠心した。

遠心上清２００μｌに０．５５Ｍ炭酸ナトリウム５００μｌ及びＦｏｌｉｎｅ試薬１００μｌを加え、３７℃で３０分間インキュベートした。９６ウェルプレートにインキュベート後の溶液を２００μＬずつ移し、６６０ｎｍの吸光度（Ａ_T）を測定した。また、ブランクにおける吸光度をＡ_Bとした。

得られた吸光度に基づいて、以下の式を用いてタンパク質分解力価を算出した：
タンパク質分解力価（単位／ｇ）＝（Ａ_T－Ａ_B）×Ｆ×（反応溶液の量）×（１／１０）×（１／Ｗ）
Ｆ：チロシン検量線より求めた吸光度差が１．０００のときのチロシン量（μｇ／ｍｌ）
反応溶液：カゼイン溶液＋被験試料溶液＋タンパク質沈殿溶液
Ｗ：反応溶液中の試料の量（ｇ）

比較例１３のタンパク質分解力価を１００％としたときの各実施例及び比較例の組成物のタンパク質分解力価の相対値をパパインに対する相対力価として表２及び３に示す。なお、表３の有胞子性乳酸菌、乳酸菌（死菌）（１）としては上記の水抽出物を用い、乳酸菌（死菌）（２）としては上記の５０％エタノール抽出物を用い、乳酸菌（死菌）（３）～（５）としては上記の１００％エタノール抽出物をそれぞれ量を変えて用いた。

上記表２及び３に示すように、フルーツ成分、糖質又は乳酸菌のみを用いた比較例１４～２６によれば、パパインを単独で用いた比較例１３に比べて、タンパク質分解力価は大幅に低下したのに対し、フルーツ成分、糖質又は乳酸菌とパパインとの組み合わせた各実施例では、比較例１４～２６のフルーツ成分、糖質又は乳酸菌単独の場合のタンパク質分解力価、及び比較例１３のパパイン単独の場合のタンパク質分解力価の合計値よりも大幅に高い分解力価が得られた。
従って、フルーツ成分、糖質又は乳酸菌とプロテアーゼと組み合わせた本発明の経口用組成物によるプロテアーゼ活性向上効果が優れていることが判る。

参考文献：
（１）中央薬事審議会第５２３号通知による活性測定法；食品製造用プロテアーゼおよびパパイン製剤のタンパク消化力測定法の検討
（２）日本公定書協会編：改訂かぜ薬・解熱鎮痛薬試験法（付録２）～胃腸薬の制酸力・ｐＨ試験法及び消化力試験法とその解説～

＜製造例１～１１＞
下記表４の配合にて、α－アミラーゼ及びフルーツの処理物若しくはフレーバーを含有する粉末飲料を製造した。

＜製造例１２～２２＞
下記表５の配合にて、α－アミラーゼ及びフルーツの処理物若しくはフレーバーを含有する顆粒剤を製造した。

＜製造例２３～３３＞
下記表６の配合にて、プロテアーゼ及びフルーツの処理物若しくはフレーバーを含有する粉末飲料を製造した。

＜製造例３４～４４＞
下記表７の配合にて、プロテアーゼ及びフルーツの処理物若しくはフレーバーを含有する粉末飲料を製造した。

本発明によれば、α－アミラーゼ、プロテアーゼ等の消化酵素活性の高い経口用組成物が得られ、消化酵素による生理活性を期待する者にとって有益な一般飲食品、特定保健用飲食品、栄養機能飲食品、保健機能飲食品、特別用途飲食品、栄養補助飲食品、健康補助飲食品、サプリメント、美容飲食品、その他の健康飲食品、医薬用部外品、化粧品、医薬品として利用できる。

Claims

アミラーゼとBacillus coagulansとを含有するダイエット用経口組成物（ただし、置き換えダイエット食を除く）。