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JP7640413B2 - Fertilizer composition and method for producing same - Google Patents
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Description

本開示は、肥料用組成物およびその製造方法に関し、詳しくは酵母を利用した肥料組成物およびその製造方法に関する。 This disclosure relates to a fertilizer composition and a method for producing the same, and more particularly to a fertilizer composition using yeast and a method for producing the same.

酵母は、豊富な栄養分を含み、抽出した核酸やアミノ酸、ペプチドなどを植物やキノコの成長剤として利用することが提案されている(例えば、特許文献1~3)。また、酵母の細胞壁にはグルカンやマンナン成分が含まれているため、これらを植物成長剤として使用することが提案されている(例えば、特許文献4)。 Yeast contains a wealth of nutrients, and it has been proposed to use extracted nucleic acids, amino acids, peptides, etc. as growth enhancers for plants and mushrooms (e.g., Patent Documents 1 to 3). In addition, because yeast cell walls contain glucan and mannan components, it has been proposed to use these as plant growth enhancers (e.g., Patent Document 4).

リグニンは、植物細胞壁などに含まれている芳香族ポリマーであり、天然に豊富に存在するバイオマス資源である。従来、リグニンは、紙パルプ製造プロセスで排出される黒液から回収され、主にボイラーなどの燃料として利用されてきたが、現在、より広い用途開発が進められている。リグニンの主な供給元は木材であり、サスティナブル(Sustainable)な、言い換えると持続可能な開発に適した資源として期待が高まっている。リグニンは、芳香族ポリマーであることから、例えば、化学薬品や樹脂、ゴム等の原料など様々な分野での利用が期待されている。 Lignin is an aromatic polymer found in plant cell walls and is a naturally occurring and abundant biomass resource. Traditionally, lignin has been recovered from black liquor discharged from the paper pulp manufacturing process and used mainly as fuel for boilers, but development of a wider range of applications is currently underway. The main source of lignin is wood, and there are growing expectations for it as a sustainable resource suitable for sustainable development. As lignin is an aromatic polymer, it is expected to be used in a variety of fields, for example as a raw material for chemicals, resins, rubber, etc.

植物の栽培に関する分野におけるリグニンの利用としては、例えば、植物保水材や土壌改良剤として使用(例えば、特許文献5)、植物生育促進剤としての使用(例えば、特許文献6)などが提案されている。 The use of lignin in the field of plant cultivation has been proposed, for example, as a plant water-retaining material or soil conditioner (e.g., Patent Document 5), and as a plant growth promoter (e.g., Patent Document 6).

国際公開第2016/148193号International Publication No. 2016/148193 特開2002-262663号公報JP 2002-262663 A 特開2013-021989公報JP 2013-021989 A 国際公開第2006/059683号International Publication No. 2006/059683 特開平9-227301号公報Japanese Patent Application Publication No. 9-227301 特許第6498853号公報Patent No. 6498853

上記のように、酵母由来成分およびリグニン由来成分は、様々な用途に利用が試みられてきた。しかしながら、これまでは、それぞれ別々に利用されるに留まっており、両者を合わせて用いることについては、研究開発が進んでいない未知の領域であった。 As mentioned above, attempts have been made to use yeast-derived components and lignin-derived components for various applications. However, until now, they have only been used separately, and using them together has been an unknown area with little research and development.

本発明者らは、植物育成のための新たな肥料組成物について幅広く鋭意研究を進めていたところ、リグニン由来成分は、所望の効果が土壌中では持続性が短いことがあるということを見出した。 The inventors of the present invention have conducted extensive and intensive research into new fertilizer compositions for plant growth, and have discovered that the desired effects of lignin-derived components may not last long in soil.

以上のような状況に鑑み、解決しようとする課題の1つは、優れた特性を備えた新たな肥料組成物を提供することにある。
また、解決しようとする更なる課題の1つは、リグニン由来成分を植物の育成に用いる場合において、リグニン由来成分の効果の持続性を高めることにある。
In view of the above circumstances, one of the problems to be solved is to provide a new fertilizer composition having excellent properties.
Another problem to be solved is to increase the durability of the effect of a lignin-derived component when the lignin-derived component is used for growing plants.

本開示中に提示される発明は、多面的にいくつかの態様として把握しうるところ、課題を解決するための手段として、例えば、下記のように具現化しうる態様を含む。以下、本開示中に提示される発明のことを「本発明」ともいう。 The invention presented in this disclosure can be understood from multiple perspectives as several aspects, and includes aspects that can be embodied as means for solving problems, for example, as described below. Hereinafter, the invention presented in this disclosure will also be referred to as "the present invention."

〔1〕 重量平均分子量5,000~100,000の核酸と、
酵母細胞壁成分と、
リグニンスルホン酸又はその塩と、
を含む肥料用組成物。
〔2〕 リグニンスルホン酸又はその塩の含有量が、1~30重量%である、上記〔1〕に記載の肥料用組成物。
〔3〕 前記核酸が、リボ核酸である、上記〔1〕または〔2〕に記載の肥料用組成物。
〔4〕 さらに、アミノ酸を含む、上記〔1〕~〔3〕のいずれか一項に記載の肥料用組成物。
〔5〕 さらに、亜硫酸塩を含む、上記〔1〕~〔4〕のいずれか一項に記載の肥料用組成物。
〔6〕 重量平均分子量5,000~100,000の核酸と、酵母細胞壁成分と、リグニンスルホン酸又はその塩とを混合することを含む、肥料用組成物の製造方法。
〔7〕 酵母を脱核処理して核酸と脱核酵母とに分離して回収し、前記重量平均分子量5,000~100,000の核酸と前記酵母細胞壁成分とをそれぞれ用意することを含む、上記〔6〕に記載の肥料用組成物の製造方法。
〔8〕 重量平均分子量5,000~100,000の核酸と、酵母細胞壁成分と、リグニンスルホン酸又はその塩とを含む肥料用組成物の製造方法であって、
リグニンスルホン酸又はその塩を含む培地で酵母を培養することと、
前記酵母をアルカリ処理することと、
前記リグニンスルホン酸又はその塩を含む培地と、前記酵母由来の核酸と、前記酵母由来の酵母細胞壁成分とを含む混合物を回収することと、
を含む、前記製造方法。
〔9〕 上記〔8〕に記載の製造方法において回収された混合物を含有する肥料用組成物。
[1] A nucleic acid having a weight average molecular weight of 5,000 to 100,000;
Yeast cell wall components,
Lignosulfonic acid or a salt thereof;
A fertilizer composition comprising:
[2] The fertilizer composition according to the above [1], wherein the content of lignin sulfonic acid or a salt thereof is 1 to 30% by weight.
[3] The fertilizer composition according to [1] or [2] above, wherein the nucleic acid is a ribonucleic acid.
[4] The fertilizer composition according to any one of [1] to [3] above, further comprising an amino acid.
[5] The fertilizer composition according to any one of [1] to [4] above, further comprising a sulfite.
[6] A method for producing a fertilizer composition, comprising mixing a nucleic acid having a weight-average molecular weight of 5,000 to 100,000, a yeast cell wall component, and lignosulfonic acid or a salt thereof.
[7] A method for producing the fertilizer composition according to the above-mentioned [6], comprising subjecting yeast to a nucleus treatment to separate and recover the nucleic acid and the enucleated yeast, and preparing the nucleic acid having a weight-average molecular weight of 5,000 to 100,000 and the yeast cell wall component, respectively.
[8] A method for producing a fertilizer composition comprising a nucleic acid having a weight-average molecular weight of 5,000 to 100,000, a yeast cell wall component, and lignosulfonic acid or a salt thereof, comprising:
Cultivating yeast in a medium containing lignosulfonic acid or a salt thereof;
treating the yeast with alkali;
recovering a mixture containing a medium containing the lignosulfonic acid or a salt thereof, nucleic acid derived from the yeast, and a yeast cell wall component derived from the yeast;
The manufacturing method comprising the steps of:
[9] A fertilizer composition comprising the mixture recovered by the production method according to [8] above.

本開示中に提示される発明の一態様によれば、酵母由来成分およびリグニン由来成分を用い、サスティナブル性が高く、且つ優れた効果を発揮する新たな肥料組成物を提供することができる。
本開示中に提示される発明の一態様において、葉菜類の味質を向上することができる。また、本開示中に提示される発明の一態様において、果菜類、根菜類などの作物の増収効果が得られる。また、本開示中に提示される発明の一態様において、微量元素の欠乏を改善することができる。
According to one aspect of the invention presented in the present disclosure, a new fertilizer composition can be provided that uses a yeast-derived component and a lignin-derived component, and that is highly sustainable and exhibits excellent effects.
In one embodiment of the invention presented in this disclosure, the taste quality of leafy vegetables can be improved. In addition, in one embodiment of the invention presented in this disclosure, the yield of crops such as fruit vegetables and root vegetables can be increased. In one embodiment of the invention presented in this disclosure, the deficiency of trace elements can be improved.

以下、本発明の実施形態について説明する。なお、本開示において、特に断らない限り、数値範囲に関し、「MM~NN」という記載は、「MM以上NN以下」を示すこととする(ここで、「MM」および「NN」は任意の数値を示す)。また、下限および上限の単位は、特に断りない限り、後者(すなわち、ここでは「NN」)の直後に付された単位と同じである。また、本開示において、「Xおよび/またはY」との表現は、XおよびYの双方、またはこれらのうちのいずれか一方のことを意味する。 The following describes an embodiment of the present invention. In this disclosure, unless otherwise specified, the expression "MM-NN" in relation to a numerical range means "MM or more and NN or less" (where "MM" and "NN" indicate any numerical value). In addition, the units of the lower and upper limits are the same as the units immediately following the latter (i.e., "NN" in this case) unless otherwise specified. In addition, in this disclosure, the expression "X and/or Y" means both X and Y, or either one of them.

1.肥料用組成物
本発明の一実施形態は、肥料用組成物でありうる。本開示において、「肥料用組成物」は、そのまま「肥料」として用いる実施形態と、他の肥料に混合して用いる「肥料添加物」として用いる実施形態を含む。発明の一実施形態において、肥料用組成物は、重量平均分子量5,000~100,000の核酸と、酵母細胞壁成分と、リグニンスルホン酸又はその塩とを含有する。
1. Fertilizer Composition One embodiment of the present invention may be a fertilizer composition. In the present disclosure, the "fertilizer composition" includes an embodiment in which the composition is used as a "fertilizer" as it is, and an embodiment in which the composition is used as a "fertilizer additive" by mixing with other fertilizers. In one embodiment of the invention, the fertilizer composition contains a nucleic acid having a weight-average molecular weight of 5,000 to 100,000, a yeast cell wall component, and lignosulfonic acid or a salt thereof.

肥料用組成物の用途は、肥料に関して用いられる様々な態様を含み、例えば、対象とする植物に特に制限はない。対象とする植物としては、例えば、果樹類、野菜類、穀物類、花卉類などが含まれる。本発明の一実施形態において、窒素(N)成分の吸収を補助することが期待され、例えば、葉菜類などの肥料として好適でありうる。また本発明の一実施形態において、リグニンスルホン酸又はその塩にはキレート作用があり、無機成分または微量元素類の欠乏を改善することが期待される。 The uses of the fertilizer composition include various aspects of use in relation to fertilizers, and for example, there are no particular limitations on the target plants. Target plants include, for example, fruit trees, vegetables, grains, and ornamental plants. In one embodiment of the present invention, it is expected to assist the absorption of nitrogen (N) components, and may be suitable as a fertilizer for leafy vegetables, for example. In another embodiment of the present invention, lignin sulfonic acid or a salt thereof has a chelating effect, and is expected to improve deficiencies in inorganic components or trace elements.

本発明者らは、リグニン由来成分を単独で用いると、その効果が土壌中では持続性が短い場合があるということを見出した。本発明者らは、その原因の1つとして、リグニン由来成分には、リグニンスルホン酸などのキレート作用を有する成分が含まれており、そのため灌水などの水の供給によって流出しやすいことにあると見出した。作用機序は必ずしも明確ではないが、酵母をリグニン由来成分を含む培地で培養することにより、リグニン由来成分が酵母内に取り込まれ、または、酵母の細胞壁に付着して、集菌して加工した後も酵母細胞壁成分などに残留するため、リグニンスルホン酸又はその塩などのリグニン由来成分が流出しにくくなると推定される。 The inventors have found that when lignin-derived components are used alone, their effects may not last long in soil. The inventors have found that one of the reasons for this is that the lignin-derived components contain components with chelating properties, such as lignosulfonic acid, and therefore are easily washed away by the supply of water, such as irrigation. Although the mechanism of action is not entirely clear, it is presumed that by culturing yeast in a medium containing lignin-derived components, the lignin-derived components are taken up into the yeast or adhere to the yeast cell wall, and remain in the yeast cell wall components even after harvesting and processing, making it difficult for lignin-derived components such as lignosulfonic acid or its salts to wash away.

本発明の一実施形態において、肥料用組成物は核酸を含有する。核酸を肥料用組成物中に配合することにより、土壌微生物の作用を介して分解等が進み、優れた肥効を発揮することができる。 In one embodiment of the present invention, the fertilizer composition contains nucleic acid. By incorporating nucleic acid into the fertilizer composition, decomposition and the like progresses through the action of soil microorganisms, and excellent fertilizer effect can be achieved.

核酸は、高分子としての核酸だけではなく、核酸の構成単位であるヌクレオチドであってもよいが、ある程度大きい分子が好適である。好適な一実施形態としては、例えば、重量平均分子量(Mw)5,0000~100,000の範囲内である核酸分子が肥料組成物中に含まれていることが挙げられる。 The nucleic acid may be not only a nucleic acid as a polymer, but also a nucleotide, which is a structural unit of a nucleic acid, but a relatively large molecule is preferable. In one preferred embodiment, for example, the fertilizer composition contains a nucleic acid molecule having a weight-average molecular weight (Mw) in the range of 50,000 to 100,000.

核酸の重量平均分子量(Mw)の下限は、好ましくは5,000以上、より好ましくは6,000、7,000、8,000、または9,000以上、更に好ましくは10,000、15,000または20,000以上でありうる。
核酸の重量平均分子量(Mw)の上限は、好ましくは100,000以下、より好ましくは80,000以下、更に好ましくは、70,000、60,0000、または50,000以下でありうる。
核酸の重量平均分子量(Mw)は、例えばGPC(ゲルパーミエーションクロマトグラフィー)により求めることができる。
The lower limit of the weight average molecular weight (Mw) of the nucleic acid can be preferably 5,000 or more, more preferably 6,000, 7,000, 8,000, or 9,000 or more, and even more preferably 10,000, 15,000, or 20,000 or more.
The upper limit of the weight average molecular weight (Mw) of the nucleic acid can be preferably 100,000 or less, more preferably 80,000 or less, and even more preferably 70,000, 60,0000, or 50,000 or less.
The weight average molecular weight (Mw) of a nucleic acid can be determined, for example, by GPC (gel permeation chromatography).

核酸を構成する糖の種類は、デオキシリボースおよびリボースのいずれでもよい。すなわち、核酸はデオキシリボ核酸(DNA)およびリボ核酸(RNA)のいずれでもよい。核酸を構成する塩基の種類としては、主要なものとしてアデニン、グアニン、チミン、シトシン、ウラシルが挙げられる。ヌクレオチドを構成するリン酸は、一リン酸であっても、複数のリン酸で構成されていてもよい。核酸として、市販品を用いてもよい。核酸は、1種を単独で配合してもよいし、複数種を混合して配合してもよい。核酸として好ましくは、リボ核酸を用いうる。 The type of sugar constituting the nucleic acid may be either deoxyribose or ribose. That is, the nucleic acid may be either deoxyribonucleic acid (DNA) or ribonucleic acid (RNA). The main types of bases constituting the nucleic acid include adenine, guanine, thymine, cytosine, and uracil. The phosphate constituting the nucleotide may be monophosphate or may be composed of multiple phosphates. A commercially available product may be used as the nucleic acid. One type of nucleic acid may be blended alone, or multiple types may be blended in combination. Ribonucleic acid is preferably used as the nucleic acid.

核酸の由来は特に制限はなく、人工合成したものでもよいし、天然物由来のものであってもよい。例えば、酵母などの微生物から抽出または精製したものを用いてもよい。廃材とされた生物資源、例えば廃材とされた木材に含まれる木質糖分を用いて酵母などの微生物を増殖し、核酸を得て、肥料用組成物に配合して用いることにより、廃材とされていたものを有用物質に転換することができ、持続可能な循環型社会の形成に寄与することができる。 The origin of the nucleic acid is not particularly limited, and it may be artificially synthesized or derived from a natural product. For example, it may be extracted or purified from a microorganism such as yeast. By using wood sugars contained in waste biological resources, such as waste wood, to grow microorganisms such as yeast, obtain nucleic acids, and incorporate them into a fertilizer composition, the waste material can be converted into useful substances, which can contribute to the formation of a sustainable recycling-based society.

肥料用組成物中における核酸の含有量は、肥料用組成物の用途に応じて適宜調整してよい。例えば、肥料と肥料用添加物とでは、含有量が異なるのが一般的であろう。例として、肥料用組成物を肥料として用いる場合の核酸の含有量の目安を示すと、次のとおりである。 The content of nucleic acid in the fertilizer composition may be adjusted as appropriate depending on the use of the fertilizer composition. For example, the content will generally differ between fertilizers and fertilizer additives. As an example, the approximate content of nucleic acid when the fertilizer composition is used as a fertilizer is as follows:

肥料用組成物中における核酸の含有量の下限は、好ましくは3重量%以上であり、より好ましくは5、6、または7重量%以上であり、さらに好ましくは8、9、または10重量%以上でありうる。
肥料用組成物中における核酸の含有量の上限は、好ましくは50重量%以下であり、より好ましくは30重量%以下であり、さらに好ましくは20重量%以下でありうる。
好ましい実施形態としては、上記にて示した好ましい重量平均分子量(例えば、5,000~100,000)を有する核酸を、ここに示す好ましい含有量含んでいる肥料組成物を例示しうる。
The lower limit of the nucleic acid content in the fertilizer composition is preferably 3% by weight or more, more preferably 5, 6, or 7% by weight or more, and even more preferably 8, 9, or 10% by weight or more.
The upper limit of the nucleic acid content in the fertilizer composition is preferably 50% by weight or less, more preferably 30% by weight or less, and even more preferably 20% by weight or less.
A preferred embodiment is a fertilizer composition containing the nucleic acid having the preferred weight-average molecular weight (eg, 5,000 to 100,000) shown above in the preferred content shown here.

本発明の一実施形態において、肥料用組成物は酵母細胞壁成分を含有する。酵母細胞壁成分は、果菜類、根菜類などの増収に寄与することができる。 In one embodiment of the present invention, the fertilizer composition contains a yeast cell wall component. The yeast cell wall component can contribute to increased yields of fruit vegetables, root vegetables, and the like.

「酵母細胞壁成分」との用語は、酵母に由来する細胞壁の一部若しくは全体、または繊維質成分を意味する。酵母細胞壁成分は、酵母菌体から核酸を脱核処理して得られる脱核酵母であってもよいし、酵母の外殻形状を留めた細胞壁であってもよし、または外殻形状を留めない程度にまで細胞壁を粉砕したものであってもよい。 The term "yeast cell wall component" refers to a part or the whole of a cell wall derived from yeast, or a fibrous component. The yeast cell wall component may be a denucleated yeast obtained by denucleating nucleic acids from yeast cells, a cell wall that retains the shape of the yeast's outer shell, or a cell wall that has been crushed to the extent that the shape of the outer shell is no longer retained.

肥料用組成物中における酵母細胞壁成分の含有量は、肥料用組成物の用途に応じて適宜調整してよい。例えば、肥料と肥料用添加物とでは、含有量が異なるのが一般的であろう。例として、肥料用組成物を肥料として用いる場合の酵母細胞壁成分の含有量の目安を示すと、次のとおりである。
肥料用組成物中における酵母細胞壁成分の含有量の下限は、好ましくは3重量%以上であり、より好ましくは5重量%以上であり、さらに好ましくは10重量%以上でありうる。
肥料用組成物中における酵母細胞壁成分の含有量の上限は、好ましくは30重量%以下であり、より好ましくは25重量%以下であり、さらに好ましくは20重量%以下でありうる。
The content of the yeast cell wall component in the fertilizer composition may be appropriately adjusted according to the use of the fertilizer composition. For example, the content will generally be different between fertilizers and fertilizer additives. For example, the yeast cell wall component content when the fertilizer composition is used as a fertilizer is as follows.
The lower limit of the content of the yeast cell wall component in the fertilizer composition is preferably 3% by weight or more, more preferably 5% by weight or more, and even more preferably 10% by weight or more.
The upper limit of the yeast cell wall component content in the fertilizer composition is preferably 30% by weight or less, more preferably 25% by weight or less, and even more preferably 20% by weight or less.

肥料用組成物における、核酸および酵母細胞壁成分の原料として、酵母を用いうる。用いうる酵母の種類は、有胞子酵母類であっても無胞子酵母類であってもよい。酵母として、具体的には下記のような種類が例示される。 Yeast can be used as a raw material for the nucleic acid and yeast cell wall components in the fertilizer composition. The type of yeast that can be used may be either sporogenous or non-sporogenous yeast. Specific examples of yeast include the following types:

有胞子酵母類としては、例えば、シゾサッカロミセス(Shizosaccharomyces)属、サッカロミセス(Saccharomyces)属、クリヴェロミセス(Kluyveromyces)属、ハンゼヌラ(Hansenula)属、ピヒア(Pichia)属、デバリオミセス(Debaryomyces)属、およびリポミセス(Lipomyces)属の酵母が挙げられ、より具体的には、シゾサッカロミセス・ポンビ(Shizosaccharomyces pombe)、シゾサッカロミセス・オクトスポルス(Shizosaccharomyces octosporus);サッカロミセス・セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)、サッカロミセス・ウバルム(Saccharomyces uvarum)、サッカロミセス・ルーキシイ(Saccharomyces rouxii);クリヴェロミセス・フラギリス(Kluyveromyces fragilis)、クリヴェロミセス・ラクチス(Kluyveromyces lactis);ハンゼヌラ・アノマラ(Hansenula anomala);ピヒア・メンブラネファシエンス(Pichia membranaefaciens);デバリオミセス・ハンセニ(Debaryomyces hansenii);およびリポミセス・スタルケイ(Lipomyces starkeyi)などが挙げられる。 Examples of spore-forming yeasts include yeasts of the genera Shizosaccharomyces, Saccharomyces, Kluyveromyces, Hansenula, Pichia, Debaryomyces, and Lipomyces, more specifically, Shizosaccharomyces pombe, Shizosaccharomyces octosporus, Saccharomyces cerevisiae, and Saccharomyces cerevisiae. cerevisiae, Saccharomyces uvarum, Saccharomyces rouxii; Kluyveromyces fragilis, Kluyveromyces lactis; Hansenula anomala; Pichia membranaefaciens; Debaryomyces hansenii; and Lipomyces starkeyi.

無胞子酵母類としては、例えば、トルロプシス(Torulopsis)属、カンジダ(Candida)属、およびロードトルラ(Rhodotorula)属の酵母が挙げられ、より具体的には、トルロプシス・ヴェルサテリス(Torulopsis versatilis);カンジダ・トロピカリス(Candida tropicalis)、カンジダ・リポリティカ(Candida lipolytica)、カンジダ・ユチリス(Candida utilis);ロードトルラ・グルチニス(Rhodotorula glutinis)などが挙げられる。
なお、カンジダ(Candida)属の酵母は、分類学上、トルラ酵母(torula yeast)とも言われ、サイバリンドネラ(Cyberlindnera)属の酵母として分類されることがある。
Examples of asporogenous yeasts include yeasts of the genera Torulopsis, Candida, and Rhodotorula, and more specifically, Torulopsis versatilis; Candida tropicalis, Candida lipolytica, Candida utilis; Rhodotorula glutinis, and the like.
Taxonomically, yeasts of the genus Candida are also called torula yeasts, and are sometimes classified as yeasts of the genus Cyberlindnera.

用いうる酵母として好ましくは、例えば、ビール酵母、ワイン酵母、パン酵母、トルラ酵母等が挙げられ、より具体的にはサッカロミセス・セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)、サッカロミセス・ウバルム(Saccharomyces uvarum)、サッカロミセス・ルーキシイ(Saccharomyces rouxii);クリヴェロミセス・フラギリス(Kluyveromyces fragilis)、トルロプシス・ヴェルサテリス(Torulopsis versatilis)、カンジダ・トロピカリス(Candida tropicalis)、カンジダ・リポリティカ(Candida lipolytica)、カンジダ・ユチリス(Candida utilis)、ロードトルラ・グルチニス(Rhodotorula glutinis)などが挙げられる。
なお、カンジダ・ユチリス(Candida utilis)は、分類学上、トルラ酵母の1種として、(Cyberlindnera jadinii)に分類されることがある。
Preferred examples of yeast that can be used include brewer's yeast, wine yeast, baker's yeast, and torula yeast. More specifically, examples of yeast that can be used include Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces uvarum, Saccharomyces rouxii; Kluyveromyces fragilis, Torulopsis versatilis, Candida tropicalis, Candida lipolytica, Candida utilis, and the like. utilis, Rhodotorula glutinis, and the like.
In addition, Candida utilis is sometimes classified as a type of torula yeast (Cyberlindnera jadinii) in taxonomic terms.

本発明の一実施形態において、肥料用組成物は、リグニンスルホン酸またはその塩を含有する。リグニンスルホン酸又はその塩を配合することにより、酵母を原料とする肥料用組成物の腐敗を抑制することができる。 In one embodiment of the present invention, the fertilizer composition contains lignosulfonic acid or a salt thereof. By incorporating lignosulfonic acid or a salt thereof, spoilage of the fertilizer composition made from yeast can be suppressed.

リグニンスルホン酸は、リグニンのヒドロキシフェニルプロパン構造の側鎖α位の炭素が開裂してスルホ基が導入された骨格を有する化合物である。リグニンスルホン酸は、塩の形態でありうる。すなわち、リグニンスルホン酸は、塩の形態で肥料組成物に添加してもよい。リグニンスルホン酸塩としては、例えば、カルシウム塩、マグネシウム塩、ナトリウム塩、カルシウム・ナトリウム混合塩、アンモニウム塩、有機アンモニウム塩などが挙げられる。リグニンスルホン酸又はその塩は、例えば、製紙産業で生じる亜硫酸パルプ排液などから得ることができる。また、本発明において用いられるリグニンスルホン酸又はその塩は、スルホン基、カルボキシル基、およびフェノール性水酸基等の官能基を有する高分子電解質で変性されたリグニンスルホン酸又はその塩であってもよい。 Lignosulfonic acid is a compound having a skeleton in which a carbon at the α-position of the side chain of the hydroxyphenylpropane structure of lignin is cleaved to introduce a sulfo group. Lignosulfonic acid may be in the form of a salt. That is, lignosulfonic acid may be added to the fertilizer composition in the form of a salt. Examples of lignosulfonate salts include calcium salts, magnesium salts, sodium salts, calcium-sodium mixed salts, ammonium salts, and organic ammonium salts. Lignosulfonic acid or its salts can be obtained, for example, from sulfite pulp effluent generated in the papermaking industry. In addition, the lignosulfonic acid or its salts used in the present invention may be lignosulfonic acid or its salts modified with a polymer electrolyte having functional groups such as a sulfonic group, a carboxyl group, and a phenolic hydroxyl group.

肥料用組成物中におけるリグニンスルホン酸又はその塩の含有量は、肥料用組成物の用途に応じて適宜調整してよい。例えば、肥料と肥料用添加物とでは、含有量が異なるのが一般的であろう。一律に定めるのは難しいが、例として、肥料用組成物を肥料として用いる場合のリグニンスルホン酸又はその塩の含有量の目安を示すと、次のとおりである。
肥料用組成物中におけるリグニンスルホン酸又はその塩の含有量の下限は、好ましくは1重量%以上であり、より好ましくは3重量%以上であり、さらに好ましくは5重量%以上でありうる。
肥料用組成物中におけるリグニンスルホン酸又はその塩の含有量の上限は、好ましくは50重量%以下であり、より好ましくは40重量%以下であり、さらに好ましくは30重量%以下でありうる。
The content of lignosulfonic acid or its salt in the fertilizer composition may be adjusted appropriately according to the use of the fertilizer composition. For example, the content is generally different between fertilizers and fertilizer additives. Although it is difficult to determine it uniformly, the following is an example of the content of lignosulfonic acid or its salt when the fertilizer composition is used as a fertilizer.
The lower limit of the content of lignosulfonic acid or a salt thereof in the fertilizer composition is preferably 1% by weight or more, more preferably 3% by weight or more, and even more preferably 5% by weight or more.
The upper limit of the content of lignosulfonic acid or a salt thereof in the fertilizer composition is preferably 50% by weight or less, more preferably 40% by weight or less, and even more preferably 30% by weight or less.

肥料用組成物の他の好ましい一実施形態として、アミノ酸を含む組成物としてもよい。アミノ酸を配合することにより、味質の良い農作物の栽培に寄与することでき、農作物の中でも、葉物野菜の味質向上に好適である。肥料用組成物に含まれるアミノ酸は、好ましくは、酵母由来のアミノ酸を用いることができる。 Another preferred embodiment of the fertilizer composition may be a composition containing amino acids. The incorporation of amino acids can contribute to the cultivation of agricultural crops with good flavor, and is particularly suitable for improving the flavor of leafy vegetables. The amino acids contained in the fertilizer composition may preferably be yeast-derived amino acids.

肥料用組成物の他の好ましい一実施形態として、亜硫酸塩を配合してもよい。亜硫酸塩を配合することは、肥料組成物に対する酸化抑制および雑菌の繁殖抑制などに寄与しうる。 As another preferred embodiment of the fertilizer composition, sulfite may be added. Adding sulfite can contribute to inhibiting oxidation of the fertilizer composition and inhibiting the growth of bacteria.

その他、肥料用組成物には、必要に応じ任意成分として、水分、油分、pH調整剤、酸化防止剤、防腐剤、色材、香料、賦形剤、ビタミン類、ホルモン類、アミノ酸類、抗生物質、抗菌剤、殺菌剤、殺虫剤などを配合してもよい。 In addition, the fertilizer composition may contain optional ingredients such as water, oil, pH adjusters, antioxidants, preservatives, coloring materials, fragrances, excipients, vitamins, hormones, amino acids, antibiotics, antibacterial agents, bactericides, and insecticides, as needed.

肥料用組成物は、一般に、肥料または肥料用添加物として採用される形状でありうる。肥料用組成物の形状としては、例えば、粉体、顆粒、マッシュ、ペレット、クランブル、およびフレークなどが挙げられる。肥料用組成物の形態は、単一形態であってもよいし、上記のような形態のうちの2つ以上の形態のものの混合形態、例えば、ペレットとフレークの混合物、マッシュとペレットの混合物などとしてもよい。 The fertilizer composition may be in a form generally employed as a fertilizer or fertilizer additive. Examples of the form of the fertilizer composition include powder, granules, mash, pellets, crumbles, and flakes. The fertilizer composition may be in a single form or in a mixed form of two or more of the above forms, such as a mixture of pellets and flakes, or a mixture of mash and pellets.

肥料用組成物は、例えば、肥料または肥料添加物として用いうる。
肥料として用いる場合、上述の核酸、酵母細胞壁成分、およびリグニンスルホン酸又はその塩を含む混合物をそのまま肥料として用いてもよい。
The fertilizer composition may be used, for example, as a fertilizer or a fertilizer additive.
When used as a fertilizer, the mixture containing the above-mentioned nucleic acid, yeast cell wall component, and lignosulfonic acid or a salt thereof may be used as a fertilizer as it is.

また、肥料用組成物を肥料として用いる場合、肥料用組成物には主たる肥料成分(以下、主要肥料成分ともいう。)を配合してもよい。主要肥料成分としては、例えば、窒素(N)、リン(P)、カリ(K)、マグネシウム(Mg)、カルシウム(Ca)、硫黄(S)などが挙げられる。また、肥料として用いられる微量要素などを配合してもよい。肥料用の微量要素としては、例えば、鉄(Fe)、マンガン(Mn)、ほう素(B)、亜鉛(Zn)、モリブデン(Mo)、および銅(Cu)などが挙げられる。これらのうちの一部は、リグニンスルホン酸塩に含まれる無機成分という実施形態によって供給することができる。 When the fertilizer composition is used as a fertilizer, the fertilizer composition may contain a main fertilizer component (hereinafter also referred to as a major fertilizer component). Examples of the major fertilizer component include nitrogen (N), phosphorus (P), potassium (K), magnesium (Mg), calcium (Ca), and sulfur (S). Trace elements used as fertilizers may also be contained. Examples of trace elements for fertilizers include iron (Fe), manganese (Mn), boron (B), zinc (Zn), molybdenum (Mo), and copper (Cu). Some of these elements can be supplied by the embodiment of inorganic components contained in lignin sulfonate.

また、肥料用組成物を肥料用添加物として用いる場合、窒素-リン酸-加里を主成分とする一般的な肥料に、添加剤として加えてもよい。 When the fertilizer composition is used as a fertilizer additive, it may be added as an additive to a general fertilizer whose main components are nitrogen-phosphate-potassium.

本発明の好ましい一実施形態として、肥料用組成物は有機肥料とすることができる。核酸、酵母細胞壁成分、およびリグニンスルホン酸又はその塩は、それぞれ有機成分であるので、これら3つの成分を含む肥料用組成物は、そのまま有機肥料として用いることができる。これらの成分は、以下に説明するように、製造方法の一実施形態として、酵母の培養を利用して製造することもでき、持続可能性の高い(サスティナブルな)生産が可能な肥料である。また、本発明の一実施形態として、肥料用組成物には、他の有機肥料成分を配合してもよい。他の有機肥料成分としては、例えば、油粕、鶏糞、魚粉、米ぬか、および草木灰などが挙げられ、これらのうちの1種または2種以上を適宜組み合わせて、本開示の肥料用組成物に配合してもよい。 As a preferred embodiment of the present invention, the fertilizer composition can be an organic fertilizer. Since the nucleic acid, the yeast cell wall component, and the lignosulfonic acid or a salt thereof are each organic components, a fertilizer composition containing these three components can be used as an organic fertilizer as it is. As described below, these components can be produced by culturing yeast as an embodiment of the production method, and the fertilizer can be produced with high sustainability. In addition, as one embodiment of the present invention, other organic fertilizer components may be blended into the fertilizer composition. Examples of other organic fertilizer components include oil cake, chicken manure, fish meal, rice bran, and wood ash, and one or more of these may be appropriately combined and blended into the fertilizer composition of the present disclosure.

本発明の他の一実施形態として、肥料用組成物に、いわゆる化学肥料を配合してもよい。本開示において、化学肥料とは、無機原料を用いて工業的な工程を経て製造される肥料のことをいう。化学肥料としては、例えば、硫安、尿素、硝安、石灰窒素などの窒素系肥料、過リン酸石灰、熔成リン肥などのリン酸系肥料、硫酸カリウム、塩化カリウムなどのカリ系肥料、消石灰、炭酸カルシウム、苦土石灰などの石灰質肥料、および、水酸化マグネシウム、硫酸マグネシウムなどの苦土肥料が挙げられ、これらのうちの1種または2種以上を適宜組み合わせて、本開示の肥料用組成物に配合してもよい。 As another embodiment of the present invention, the fertilizer composition may contain so-called chemical fertilizers. In the present disclosure, chemical fertilizers refer to fertilizers manufactured through industrial processes using inorganic raw materials. Examples of chemical fertilizers include nitrogen-based fertilizers such as ammonium sulfate, urea, ammonium nitrate, and lime nitrogen; phosphoric acid-based fertilizers such as superphosphate and fused phosphate fertilizer; potassium sulfate and potassium chloride-based fertilizers; calcareous fertilizers such as slaked lime, calcium carbonate, and dolomite; and magnesium hydroxide and magnesium sulfate-based fertilizers. One or more of these may be appropriately combined and contained in the fertilizer composition of the present disclosure.

2.肥料用組成物の製造方法
本発明のいくつかの実施形態のうちには、上記肥料用組成物を製造する方法が含まれる。
2. Method for Producing the Fertilizer Composition Some embodiments of the present invention include a method for producing the fertilizer composition.

<製造方法に関する第1の実施形態>
本発明における製造方法の第1の実施形態は、重量平均分子量5,000~100,000の核酸と、酵母細胞壁成分と、リグニンスルホン酸とを混合することを含む。
First embodiment relating to manufacturing method
A first embodiment of the production method of the present invention comprises mixing a nucleic acid having a weight-average molecular weight of 5,000 to 100,000, a yeast cell wall component, and lignosulfonic acid.

最終的に、核酸と酵母細胞壁成分とリグニンスルホン酸の三成分が混合されればよく、各成分を1つ1つ混ぜ合わせてもよいし、各成分を同時に加えて混ぜてもよい。核酸、酵母細胞壁成分、およびリグニンスルホン酸については、上述したとおりである。各成分は個別に用意しいてもよいし、酵母を培養し、当該酵母を原料として核酸および酵母細胞壁を用意してもよい。 Ultimately, the three components of nucleic acid, yeast cell wall components, and lignosulfonic acid are mixed together, and each component may be mixed one by one, or each component may be added and mixed at the same time. The nucleic acid, yeast cell wall components, and lignosulfonic acid are as described above. Each component may be prepared separately, or yeast may be cultured and the nucleic acid and yeast cell walls may be prepared using the yeast as a raw material.

例えば、第1の実施形態の変形例として、酵母を脱核処理して核酸と脱核酵母とに分離して回収し、重量平均分子量5,000~100,000の核酸と酵母細胞壁成分とをそれぞれ用意してもよい。このようにして用意した核酸と酵母細胞壁成分に加えて、リグニンスルホン酸又はその塩を添加して、肥料用組成物を得ることができる。 For example, as a modification of the first embodiment, yeast may be subjected to a denucleation process to separate and recover nucleic acid and denucleated yeast, and nucleic acid and yeast cell wall components each having a weight average molecular weight of 5,000 to 100,000 may be prepared. In addition to the nucleic acid and yeast cell wall components thus prepared, lignosulfonic acid or a salt thereof may be added to obtain a fertilizer composition.

脱核処理は、例えば、アルカリ薬品や食塩水、細胞壁溶解酵素などを酵母に接触させることにより、酵母の細胞壁を溶解し、酵母の内容物を培地中に溶出させ、細胞壁成分とその他の成分に分離するなどの方法によって、行うことができる。分離した成分は、必要に応じて、精製し、粉末化してもよい。 The nucleation process can be carried out, for example, by contacting the yeast with an alkaline chemical, saline solution, cell wall-dissolving enzymes, etc., to dissolve the yeast cell walls, dissolve the yeast contents into the medium, and separate the cell wall components from other components. The separated components may be purified and powdered as necessary.

本発明の一実施形態としては、核酸と酵母細胞壁成分とを配合する場合、酵母の菌体をそのまま配合してもよいし、核酸と酵母細胞壁成分とを一旦分離してから配合し直してもよい。 In one embodiment of the present invention, when nucleic acid and yeast cell wall components are mixed, the yeast cells may be mixed as they are, or the nucleic acid and yeast cell wall components may be separated and then mixed again.

アルカリ処理の方法は、酵母抽出物を得るために用いられる通常の方法を用いてよい。すなわち、アルカリ薬品を用いて酵母の細胞壁の一部又は全部を溶解又は破損させて、酵母菌体内の成分が溶出するようにすればよい。好ましいアルカリ薬品としては、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化バリウム、水酸化カルシウム、炭酸ナトリウムなどが挙げられる。 The alkaline treatment may be carried out by a method generally used for obtaining yeast extracts. That is, an alkaline agent may be used to dissolve or destroy part or all of the yeast cell wall, allowing the components within the yeast cell to be eluted. Preferred alkaline agents include, for example, sodium hydroxide, potassium hydroxide, barium hydroxide, calcium hydroxide, and sodium carbonate.

製造法の第1の実施形態によれば、腐敗しにくい肥料用組成物を廉価に製造することができる。また、製造方法の第1の実施形態では、リグニンスルホン酸又はその塩の添加量を容易に調整できる。したがって、リグニンスルホン酸又はその塩の添加量を少なくしたい場合、例えば、10重量%、8重量%、または5重量%以下程度に抑えたい場合には、第1の実施形態は実施が容易である。 According to the first embodiment of the manufacturing method, a fertilizer composition that is less likely to spoil can be produced at low cost. Furthermore, in the first embodiment of the manufacturing method, the amount of lignosulfonic acid or its salt added can be easily adjusted. Therefore, when it is desired to reduce the amount of lignosulfonic acid or its salt added, for example, to about 10% by weight, 8% by weight, or 5% by weight or less, the first embodiment is easy to implement.

<製造方法に関する第2の実施形態>
本発明における製造方法の第2の実施形態は、以下の工程:
酵母をリグニンスルホン酸又はその塩を含む培地で培養することと、
前記酵母をアルカリ処理することと、
前記リグニンスルホン酸又はその塩を含む培地と、前記酵母由来の核酸と、前記酵母由来の酵母細胞壁成分とを含む混合物を回収することと、
を含む。
Second embodiment relating to manufacturing method
A second embodiment of the manufacturing method of the present invention comprises the following steps:
Cultivating yeast in a medium containing lignosulfonic acid or a salt thereof;
treating the yeast with alkali;
recovering a mixture containing a medium containing the lignosulfonic acid or a salt thereof, nucleic acid derived from the yeast, and a yeast cell wall component derived from the yeast;
Includes.

製造方法の第2の実施形態では、酵母を培養する培地中にリグニンスルホン酸又はその塩を配合する。リグニンスルホン酸又はその塩を培地中に配合することにより、酵母培養中に酵母が腐敗することを抑制することができる。また、リグニンスルホン酸又はその塩を含む培地ごと回収して肥料用組成物とするため、肥料用組成物もまた腐敗しにくいものとすることができる。 In a second embodiment of the manufacturing method, lignosulfonic acid or a salt thereof is blended into the culture medium in which the yeast is cultured. By blending lignosulfonic acid or a salt thereof into the culture medium, it is possible to suppress the yeast from spoiling during yeast culture. In addition, since the culture medium containing lignosulfonic acid or a salt thereof is recovered and used as a fertilizer composition, the fertilizer composition can also be made less susceptible to spoilage.

酵母の培養に用いる培地は、一般に酵母の培養に用いられているものにリグニンスルホン酸又はその塩を加えればよい。培地に配合するリグニンスルホン酸又はその塩の含有量の下限は、好ましくは1重量%以上であり、より好ましくは3重量%以上であり、さらに好ましくは5重量%以上でありうる。培地に配合するリグニンスルホン酸又はその塩の含有量の上限は、好ましくは50重量%以下であり、より好ましくは40重量%以下であり、さらに好ましくは30重量%以下でありうる。 The medium used for culturing yeast may be a medium generally used for culturing yeast to which lignosulfonic acid or a salt thereof has been added. The lower limit of the content of lignosulfonic acid or a salt thereof in the medium is preferably 1% by weight or more, more preferably 3% by weight or more, and even more preferably 5% by weight or more. The upper limit of the content of lignosulfonic acid or a salt thereof in the medium is preferably 50% by weight or less, more preferably 40% by weight or less, and even more preferably 30% by weight or less.

十分な量の酵母を培養したら、第1の実施形態と同様に、酵母をアルカリ処理することにより、核酸を培地中に溶出させる。 Once a sufficient amount of yeast has been cultured, the yeast is treated with alkali to elute the nucleic acid into the medium, as in the first embodiment.

アルカリ処理の後、リグニンスルホン酸又はその塩を含む培地と、前記酵母由来の核酸と、前記酵母由来の酵母細胞壁成分とをまとめて回収し、核酸と酵母細胞壁成分とリグニンスルホン酸又はその塩の三成分を含む混合物を得ることができる。アルカリ処理の後、回収の前または後において、肥料用に適したpHに調整することが好ましい。 After the alkaline treatment, the medium containing lignosulfonic acid or a salt thereof, the nucleic acid derived from the yeast, and the yeast cell wall components derived from the yeast are collected together to obtain a mixture containing the three components of nucleic acid, yeast cell wall components, and lignosulfonic acid or a salt thereof. After the alkaline treatment, it is preferable to adjust the pH to a level suitable for use as a fertilizer before or after collection.

第2の実施形態は、上記の三成分を含む混合物を得るための工程数を少なくするができるため、低コストで肥料用組成物を簡便に製造できる。 The second embodiment can reduce the number of steps required to obtain a mixture containing the above three components, making it possible to easily produce a fertilizer composition at low cost.

また、第2の実施形態によって製造された肥料用組成物は、酵母をリグニンスルホン酸又はその塩を含む培地で培養するため、酵母細胞壁の内外にリグニンスルホン酸又はその塩が付着し、ごく緩やかな結合関係にある複合体を形成しうる。そのため、このようにして得られた肥料用組成物は、土壌又は培地へ施肥された後において、酵母細胞壁に付着したリグニンスルホン酸またはその塩が、遊離のリグニンスルホン酸又はその塩よりも、灌水または降雨などによって土壌等から流出しにくいものと推定される。 In addition, the fertilizer composition produced according to the second embodiment is produced by culturing yeast in a medium containing lignosulfonic acid or a salt thereof, and therefore lignosulfonic acid or a salt thereof adheres to the inside and outside of the yeast cell walls, forming a complex in a very loose bond relationship. Therefore, it is presumed that after the fertilizer composition thus obtained is applied to soil or a medium, the lignosulfonic acid or a salt thereof adhered to the yeast cell walls is less likely to be washed out of the soil, etc. by irrigation or rainfall than free lignosulfonic acid or a salt thereof.

以下に実施例を挙げて本発明について更に具体的に説明するが、本開示における本発明の技術的範囲が下記の実施例に限定されるものではない。 The present invention will be described in more detail below with reference to examples, but the technical scope of the present invention in this disclosure is not limited to the following examples.

1.肥料の調製
<実施例1(肥料1)>
RNA製剤(製品名:RNA-M、日本製紙社製)と、脱核酵母製品(製品名:カビトルラ、日本製紙社製)を重量比で1:9になるように計量し、ブレンダーで混合したものを調製し、実施例1(肥料1)とした。なお、「カビトルラ」の脱核酵母にはリグニンスルホン酸塩が含まれている。
1. Preparation of fertilizer <Example 1 (Fertilizer 1)>
An RNA formulation (product name: RNA-M, manufactured by Nippon Paper Industries Co., Ltd.) and a de-nucleated yeast product (product name: Cavitorula, manufactured by Nippon Paper Industries Co., Ltd.) were weighed out in a weight ratio of 1:9 and mixed in a blender to prepare Example 1 (Fertilizer 1). Note that the de-nucleated yeast "Cavitorula" contains lignin sulfonate.

<実施例2(肥料2)>
原料酵母(Cyberlindnera jadinii)を糖濃度3%、リグニンスルホン酸濃度10%の亜硫酸パルプ排液培地を用いて培養し、酵母を集菌した。酵母の集菌物中に、リグニンスルホン酸又はその塩は、リグニンスルホン酸換算で、重量あたり20%含有されていた。その後、得られた酵母3000gを95℃の沸騰浴内で10分間攪拌して、菌体内酵素を失活させた。その後、55℃に温度調整したウォーターバス内で48%NaOH水溶液にてpH=8.5に調整後、2時間攪拌にてアルカリ抽出反応を実施した。反応後、35%HClでpHを7.0に調整した。その後、ダブルドラムドライヤー(表面温度120℃、3rpm)にて乾燥し、フィルム化した乾燥物を乳鉢ですりつぶして乾燥品(粉末)を得た。当該粉末は、当該酵母に由来する核酸と、脱核した酵母細胞壁と、培養に用いたリグニンスルホン酸又はその塩を含む。当該粉末を実施例2(肥料2)とした。
<Example 2 (Fertilizer 2)>
The raw material yeast (Cyberlindnera jadinii) was cultured using a sulfite pulp effluent medium with a sugar concentration of 3% and a lignin sulfonic acid concentration of 10%, and the yeast was collected. In the yeast collection, lignin sulfonic acid or its salt was contained at 20% by weight in terms of lignin sulfonic acid. Then, 3000 g of the obtained yeast was stirred in a boiling bath at 95 ° C for 10 minutes to inactivate the intracellular enzyme. Then, in a water bath adjusted to a temperature of 55 ° C, the pH was adjusted to 8.5 with a 48% NaOH aqueous solution, and an alkali extraction reaction was carried out by stirring for 2 hours. After the reaction, the pH was adjusted to 7.0 with 35% HCl. Then, it was dried with a double drum dryer (surface temperature 120 ° C, 3 rpm), and the film-formed dried product was ground in a mortar to obtain a dried product (powder). The powder contains nucleic acid derived from the yeast, the enucleated yeast cell walls, and the lignosulfonic acid or a salt thereof used in the culture. The powder was designated as Example 2 (Fertilizer 2).

肥料の成分分析を以下のようにして行った。
<可溶性核酸・不溶性核酸の分析>
各肥料を水懸濁して得られた可溶成分及び不溶成分の核酸は、Schmidt-Thannhauser-Schneider法による高分子核酸の定量法(「東京大学出版会 生物化学実験法」1969年初版P16~P28参照)に従って測定した。なお、「可溶性核酸」は総じて相対的に高分子の核酸(例えば、重量平均分子量、約10,000~50,000程度)と、総じて相対的に低分子の核酸(例えば、重量平均分子量、約10,000未満程度)の分子量ごとに区分して測定可能である。
The composition of the fertilizer was analyzed as follows.
<Analysis of soluble and insoluble nucleic acids>
The nucleic acids of the soluble and insoluble components obtained by suspending each fertilizer in water were measured according to the Schmidt-Thannhauser-Schneider method for quantifying high molecular weight nucleic acids (see "Biological Chemistry Experimental Methods", University of Tokyo Press, 1969, first edition, pp. 16-28). Note that "soluble nucleic acids" can be measured by classifying them into relatively high molecular weight nucleic acids (e.g., weight average molecular weight, about 10,000 to 50,000) and relatively low molecular weight nucleic acids (e.g., weight average molecular weight, less than about 10,000) according to their molecular weight.

<リグニンスルホン酸マグネシウム塩の分析>
一般にリグニンの構造中には芳香核に結合したメトキシル基が存在する。そのため、メトキシル基含量は、リグニン含量の指標となる。例えばメトキシル基含量は、ViebockおよびSchwappach法によるメトキシル基の定量法(「リグニン化学研究法」、P.336~340、平成6年、ユニ出版(株)発行、参照)によって測定し、測定されたメトキシル基の含有量からリグニンスルホン酸Mg量を定量した。
<Analysis of Magnesium Lignosulfonate>
Generally, methoxyl groups are present in the structure of lignin, which are bonded to aromatic nuclei. Therefore, the methoxyl group content is an index of the lignin content. For example, the methoxyl group content was measured by the quantitative determination method of methoxyl groups by the Viebock and Schwappach method (see "Lignin Chemical Research Methods", pp. 336-340, 1994, published by Uni Publishing Co., Ltd.), and the amount of magnesium lignosulfonate was quantified from the measured methoxyl group content.

<βグルカンの分析>
日本バイオコン(株)社製のβグルカン(β-1,3:-1,6酵母型)アッセイキットに記載の方法を用いて測定した。
<Analysis of β-glucan>
The measurement was performed using the method described in the β-glucan (β-1,3:-1,6 yeast type) assay kit manufactured by Japan Biocon Co., Ltd.

<N(窒素)の分析>
肥料等試験法(農林水産省農業環境技術研究所法 2018)指定の4.1.1.a法(ケルダール法)にて窒素全量を求めた。
<N (Nitrogen) Analysis>
The total amount of nitrogen was determined using the 4.1.1.a (Kjeldahl method) method specified in the Fertilizer Testing Method (Ministry of Agriculture, Forestry and Fisheries National Institute for Agro-Environmental Sciences 2018).

<P(リン)の分析>
肥料等試験法(農林水産省農業環境技術研究所法 2018)指定の4.2.1.a法(バナドモリブデン酸アンモニウム吸光光度法)にてリン酸全量(P25)を求めた。
<Analysis of P (phosphorus)>
The total amount of phosphoric acid (P 2 O 5 ) was determined using the 4.2.1.a method (ammonium vanadomolybdate spectrophotometric method) specified in the Fertilizer Testing Method (Ministry of Agriculture, Forestry and Fisheries National Institute for Agro-Environmental Sciences 2018).

<K(カリ)の分析>
肥料分析法(農林水産省農業環境技術研究所法 1992)指定の7.5法(誘導結合プラズマ(ICP)発光分光法による各種元素の定量法)にて加里全量(K2O)を求めた。
<Analysis of K (potassium)>
The total potassium content (K 2 O) was determined by method 7.5 (quantitative analysis of various elements by inductively coupled plasma (ICP) emission spectrometry) specified in the Fertilizer Analysis Method (National Institute for Agro-Environmental Sciences, Ministry of Agriculture, Forestry and Fisheries, 1992).

実施例1および2の分析値を表1に示す。なお、「P」は「P25」としての分析値であり、「K」は「K2O」としての分析値である。 The analytical values of Examples 1 and 2 are shown in Table 1. Note that "P" is the analytical value for "P 2 O 5 " and "K" is the analytical value for "K 2 O".

Figure 0007640413000001
Figure 0007640413000001

<遊離アミノ酸の分析>
実施例1または2の肥料中に含まれる遊離アミノ酸の含有量は、アミノ酸測定用HPLCにより測定し、下記式1で求めた。
<Analysis of free amino acids>
The content of free amino acids contained in the fertilizer of Example 1 or 2 was measured by HPLC for measuring amino acids and calculated by the following formula 1.

<式1>
遊離アミノ酸含有量(重量%)=遊離アミノ酸重量(g)/乾燥重量(g)×100
<Formula 1>
Free amino acid content (wt%)=free amino acid weight (g)/dry weight (g)×100

遊離アミノ酸重量は、高速液体クロマトグラフィーシステム(東ソー(株)製)を用い、以下の条件で定量した。
カラム:TSK-GEL Amino Pak(東ソー社製)
検出:蛍光検出
溶離液:クエン酸バッファーによるグラジエント溶出(pH3→pH9)
The weight of free amino acids was determined using a high performance liquid chromatography system (manufactured by Tosoh Corporation) under the following conditions.
Column: TSK-GEL Amino Pak (manufactured by Tosoh Corporation)
Detection: Fluorescence detection Eluent: Gradient elution with citrate buffer (pH 3 → pH 9)

遊離アミノ酸の分析結果を表2に示す。 The results of the free amino acid analysis are shown in Table 2.

Figure 0007640413000002
Figure 0007640413000002

2.生育試験(コマツナ)
コマツナを用いて生育試験を行った。以下の2つの試験区を設定した。
<試験区1>
市販の園芸用培養土(製品名:プランタ培土地PD20、ヰセキ関東甲信越社製)を培養土として用いた。肥料として実施例2の肥料を用いた。
2. Growth test (Komatsuna)
A growth test was conducted using Komatsuna. The following two test plots were set up.
<Test area 1>
A commercially available horticultural soil (product name: Planta Culture Soil PD20, manufactured by Iseki Kanto Koshinetsu Co., Ltd.) was used as the soil. The fertilizer of Example 2 was used as the fertilizer.

<試験区2>
市販の園芸用培養土(製品名:プランタ培土地PD20、ヰセキ関東甲信越社製)を培養土として用いた。肥料として、窒素・リン酸・カリがそれぞれ14重量%配合された市販の高度化成肥料(製品名:高度化成444、清和肥料社製)を用いた。
<Test area 2>
A commercially available horticultural soil (product name: Planta Culture Soil PD20, manufactured by Iseki Kanto Koshinetsu Co., Ltd.) was used as the soil. A commercially available advanced chemical fertilizer (product name: Advanced Chemical 444, manufactured by Seiwa Fertilizer Co., Ltd.) containing 14% by weight of nitrogen, phosphorus, and potassium was used as the fertilizer.

<育成方法>
試験区1では4Lの培養土に実施例2の肥料50gを添加した。一方試験区2では4Lの培養土に試験区1と同程度の窒素含量となるように、上記高度化成肥料を添加した。その後、3カ月間の生育試験を実施した。温度コントロールは特に行わなかった。
<Cultivation method>
In test area 1, 50 g of the fertilizer of Example 2 was added to 4 L of culture soil. On the other hand, in test area 2, the above-mentioned compound fertilizer was added to 4 L of culture soil so that the nitrogen content was the same as that of test area 1. Thereafter, a growth test was carried out for three months. No particular temperature control was performed.

コマツナの生育試験の結果を表3に示す。 The results of the Komatsuna growth test are shown in Table 3.

Figure 0007640413000003
Figure 0007640413000003

表3に示されるように、実施例2の肥料を用いた方が、収量が多く、育成具合も良く、また味質も良いことが明らかとなった。 As shown in Table 3, it was clear that the use of the fertilizer of Example 2 resulted in higher yields, better growth conditions, and better flavor.

3.生育試験(つるむらさき)
つるむらさきを用いて生育試験を行った。以下の4つの試験区を設定した。
3. Growth test (Morning jasmine)
A growth test was conducted using Malabar vine. The following four test plots were set up.

<試験区1>
島根県江津市にある日本製紙江津工場敷地内の土壌を試験として用いた。肥料は添加しなかった。
<Test area 1>
The soil used for the test was from the site of Nippon Paper Industries' Gotsu Mill in Gotsu City, Shimane Prefecture. No fertilizer was added.

<試験区2>
島根県江津市にある日本製紙江津工場敷地内の土壌を試験として用いた。肥料として、日本製紙社製リグニンスルホン酸Mg(製品名:P321)を用いた。
<Test area 2>
The soil used for the test was from the site of the Nippon Paper Industries Co., Ltd. Gotsu Mill in Gotsu City, Shimane Prefecture. The fertilizer used was magnesium lignin sulfonate (product name: P321) manufactured by Nippon Paper Industries Co., Ltd.

<試験区3>
島根県江津市にある日本製紙江津工場敷地内の土壌を試験として用いた。肥料として、実施例1の肥料を用いた。
<Test area 3>
The soil used for the test was from the site of the Nippon Paper Industries Co., Ltd. Gotsu Mill in Gotsu City, Shimane Prefecture. The fertilizer used was the fertilizer of Example 1.

<試験区4>
島根県江津市にある日本製紙江津工場敷地内の土壌を試験として用いた。肥料として、窒素・リン酸・カリがそれぞれ8重量%配合された市販の高度化成肥料(製品名:三福化成特8号、エルオー社製)を用いた。
<Test area 4>
The soil used for the test was from the site of Nippon Paper Industries' Gotsu Mill in Gotsu City, Shimane Prefecture. The fertilizer used was a commercially available compound fertilizer (product name: Sanpuku Kasei Toku No. 8, manufactured by LO Co., Ltd.) containing 8% by weight each of nitrogen, phosphorus, and potassium.

<育成方法および味質試験>
プランター(14cm×18cm×11.5cm)に約4.5Lの土壌を入れて各種肥料を30g添加した。その後、つゆむらさきを2株定植した。生育試験は2カ月間実施した。温度コントロールは特には行わなかった。2か月後に丈および葉の大きさを測定し、収穫後、ボイルした葉部の味質試験を実施した。
<Growth method and taste test>
Approximately 4.5 L of soil was placed in a planter (14 cm x 18 cm x 11.5 cm) and 30 g of each type of fertilizer was added. Then, two Tsuyumurasaki plants were planted. The growth test was carried out for two months. No particular temperature control was performed. After two months, the height and leaf size were measured, and after harvesting, the boiled leaves were subjected to a taste test.

丈などについての測定結果と実質試験の結果を、表4に示す。 The measurement results for length etc. and the results of the actual test are shown in Table 4.

Figure 0007640413000004
Figure 0007640413000004

Claims (4)

重量平均分子量5,000~100,000の核酸と、酵母細胞壁成分と、リグニンスルホン酸又はその塩とを含む肥料用組成物の製造方法であって、
リグニンスルホン酸又はその塩を含む培地で酵母を培養することと、
前記酵母をアルカリ処理することと、
前記リグニンスルホン酸又はその塩を含む培地と、前記酵母由来の核酸と、前記酵母由来の酵母細胞壁成分とを含む混合物を回収して前記肥料用組成物を得ることと、
を含む、前記製造方法。
A method for producing a fertilizer composition comprising a nucleic acid having a weight-average molecular weight of 5,000 to 100,000, a yeast cell wall component, and lignosulfonic acid or a salt thereof, comprising:
Cultivating yeast in a medium containing lignosulfonic acid or a salt thereof;
treating the yeast with alkali;
recovering a mixture containing a medium containing the lignosulfonic acid or a salt thereof, the nucleic acid derived from the yeast, and a yeast cell wall component derived from the yeast to obtain the fertilizer composition ;
The manufacturing method comprising the steps of:
酵母を培養する培地中の、リグニンスルホン酸又はその塩の含有量が1~50重量%である、請求項1に記載の製造方法。2. The method according to claim 1, wherein the content of lignosulfonic acid or a salt thereof in a culture medium for culturing the yeast is 1 to 50% by weight. 酵母を培養する培地が、亜硫酸パルプ排液培地である、請求項1または2に記載の製造方法。3. The method according to claim 1, wherein the medium for culturing the yeast is a sulfite pulp effluent medium. 前記酵母が、カンジダ(Candida)属の酵母である、請求項1~3のいずれか一項に記載の製造方法。The method according to any one of claims 1 to 3, wherein the yeast is a yeast of the genus Candida.
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