JP7650133B2 - Composition for improving immune function - Google Patents
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Description
本発明は、免疫機能向上用組成物に関する。 The present invention relates to a composition for improving immune function.
腸管は、身体によって異物となる物質の侵入を防ぐバリア機能を有するとともに、病原菌から身体を守る免疫器官であることが知られている。腸には全身の免疫細胞の７割が集まっていると言われており、全身の健康に重要な役割を有する。 The intestinal tract is known to have a barrier function that prevents the entry of foreign substances into the body, and is also an immune organ that protects the body from pathogens. It is said that 70% of the immune cells in the entire body are concentrated in the intestine, and it plays an important role in the health of the entire body.
一部の乳酸菌は、免疫機能に関与する可能性が指摘されている。例えば特許文献１（特開２０１８－１７７７４０号公報）には、乳酸菌の代謝物が、サイトカイン産生を制御することが開示されている。 It has been suggested that some lactic acid bacteria may be involved in immune function. For example, Patent Document 1 (JP Patent Publication No. 2018-177740) discloses that metabolites of lactic acid bacteria control cytokine production.
本発明は、免疫機能を向上させる新たな組成物を提供することを目的とする。 The present invention aims to provide a new composition that improves immune function.
本発明は、以下に例示する［１］～［１４］に関する。
［１］ 免疫機能向上用組成物であって、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌を含む組成物。
［２］ サイトカインの産生を制御する、［１］に記載の組成物。
［３］ 前記サイトカインは、インターロイキン－６、インターロイキン－８、単球走化性因子、インターフェロン－β、インターフェロン－γからなる群より選択される少なくとも１つを含む、［２］に記載の組成物。
［４］ 病原性微生物感染を抑制する、［１］に記載の組成物。
［５］ 飲食品組成物である、［１］～［４］のいずれかに記載の組成物。
［６］ 前記細菌は、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＭ－６３（ＮＩＴＥ ＢＰ－０２６２３）である、［１］～［５］のいずれかに記載の組成物。
［７］ 前記細菌は生菌である、［１］～［６］のいずれかに記載の組成物。
［８］ ヒトミルクオリゴ糖をさらに含む、［１］～［７］のいずれかに記載の組成物。
［９］ 調製粉乳または調製液状乳である、［１］～［８］のいずれかに記載の組成物。
［１０］ ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌を含む免疫機能向上剤。
［１１］ 免疫機能向上のためのビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌の使用。
［１２］ 免疫機能向上に用いられる、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌。
［１３］ 免疫機能向上用組成物の製造における、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌の使用。
［１４］ ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌を哺乳動物に投与する工程を含む、免疫機能を向上させる方法。
The present invention relates to the following examples [1] to [14].
[1] A composition for improving immune function, comprising a bacterium belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis.
[2] The composition described in [1], which controls cytokine production.
[3] The composition according to [2], wherein the cytokine comprises at least one selected from the group consisting of interleukin-6, interleukin-8, monocyte chemotactic factor, interferon-β, and interferon-γ.
[4] The composition described in [1], which suppresses infection with a pathogenic microorganism.
[5] The composition according to any one of [1] to [4], which is a food or drink composition.
[6] The composition according to any one of [1] to [5], wherein the bacterium is Bifidobacterium longum subsp. infantis M-63 (NITE BP-02623).
[7] The composition according to any one of [1] to [6], wherein the bacterium is a live bacterium.
[8] The composition according to any one of [1] to [7], further comprising human milk oligosaccharides.
[9] The composition according to any one of [1] to [8], which is a powdered milk preparation or a liquid milk preparation.
[10] An immune function enhancer comprising a bacterium belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis.
[11] Use of bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis for improving immune function.
[12] A bacterium belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis, used to improve immune function.
[13] Use of a bacterium belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis in the production of a composition for improving immune function.
[14] A method for improving immune function, comprising a step of administering bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis to a mammal.
本発明によれば、免疫機能を向上させる新たな組成物を提供することができる。 The present invention provides a new composition that improves immune function.
＜免疫機能向上剤および免疫機能向上用組成物＞
本発明に係る免疫機能向上剤は、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ ｓｕｂｓｐ． ｉｎｆａｎｔｉｓ）に属する細菌を含む。本発明に係る免疫機能向上剤は、摂取または投与された対象の免疫機能を向上させることができる。
<Immune function enhancer and composition for enhancing immune function>
The immune function enhancer according to the present invention includes a bacterium belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis. The immune function enhancer according to the present invention can enhance the immune function of a subject to which it is ingested or administered.
本発明に係る免疫機能向上用組成物は、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌を含む。本発明に係る免疫機能向上用組成物は、本発明に係る免疫機能向上剤を含んでもよく、本発明に係る免疫機能向上剤そのものであってもよい。本発明に係る免疫機能向上用組成物は、摂取または投与された対象の免疫機能を向上させることができる。 The composition for improving immune function according to the present invention contains bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis. The composition for improving immune function according to the present invention may contain the immune function enhancer according to the present invention, or may be the immune function enhancer according to the present invention itself. The composition for improving immune function according to the present invention can improve the immune function of a subject to which it is ingested or administered.
免疫機能が向上すると、感染症にかかりにくくしたり、悪性腫瘍のリスクを下げたり、アレルギー症状が生じにくくすることができる。免疫機能が向上すると、これらが生じた場合でも、症状を軽減したり、症状の進行を遅延させたり、状態が回復するまでの期間を短縮することができる。 Improved immune function can reduce the risk of infection, malignant tumors, and allergic symptoms. Even if these symptoms do occur, improved immune function can reduce symptoms, slow the progression of symptoms, and shorten the time it takes to recover.
本明細書において、免疫機能は自然免疫および獲得免疫を含む。免疫機能が向上するとは、具体的には免疫細胞（マクロファージ、樹状細胞、好中球、Ｔ細胞、Ｂ細胞およびＮＫ細胞を含む）の活性化および適切な抑制、免疫細胞の分化制御、サイトカインの産生制御（産生促進および抑制を含む。）、ウイルス感染の抑制、細菌感染の抑制、真菌感染の抑制、寄生虫の排除、抗体産生の促進等の態様を含む。サイトカインは、炎症性サイトカインおよび抗炎症性サイトカインを含む。 In this specification, immune function includes innate immunity and adaptive immunity. Specific examples of improved immune function include activation and appropriate inhibition of immune cells (including macrophages, dendritic cells, neutrophils, T cells, B cells, and NK cells), control of immune cell differentiation, control of cytokine production (including promotion and inhibition of production), inhibition of viral infection, inhibition of bacterial infection, inhibition of fungal infection, elimination of parasites, and promotion of antibody production. Cytokines include inflammatory cytokines and anti-inflammatory cytokines.
マクロファージ、樹状細胞、好中球等の貪食細胞は、病原体等を貪食および分解する。ＮＫ細胞は、細胞傷害性因子を放出し、病原体に感染した宿主細胞を破壊する。Ｂ細胞は、抗体を産生し、病原体の不活化等を行う。このような免疫細胞の活性化および抑制には、サイトカインが重要な役割を担っている。サイトカインには、ケモカイン、インターフェロン、インターロイキンおよび腫瘍壊死因子等が含まれる。ヘルパーＴ細胞は、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ２細胞およびＴｈ１７細胞に分類され得る。Ｔｈ１細胞は、細胞性免疫に関与し、ＩＦＮ－γをはじめとするサイトカインを放出してＮＫ細胞やマクロファージを活性化する。Ｔｈ２細胞は、液性免疫に関与し、ＩＬ－４をはじめとするサイトカインを放出して抗体産生を促進する。 Phagocytes such as macrophages, dendritic cells, and neutrophils ingest and degrade pathogens. NK cells release cytotoxic factors to destroy host cells infected with pathogens. B cells produce antibodies to inactivate pathogens. Cytokines play an important role in activating and suppressing such immune cells. Cytokines include chemokines, interferons, interleukins, and tumor necrosis factors. Helper T cells can be classified into Th1 cells, Th2 cells, and Th17 cells. Th1 cells are involved in cellular immunity and release cytokines such as IFN-γ to activate NK cells and macrophages. Th2 cells are involved in humoral immunity and release cytokines such as IL-4 to promote antibody production.
ケモカインは、白血球等の遊走を引き起こし、炎症の形成に関与する分泌タンパク質であり、その構造からＣＣ、ＣＸＣ、Ｃ、ＣＸ３Ｃの４つのサブファミリーに分類される。ＣＣサブファミリーに属する単球走化性因子（Ｍｏｎｏｃｙｔｅ ｃｈｅｍｏｔａｃｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ １：ＭＣＰ１）は、単球、マクロファージおよび内皮細胞において発現する。ＭＣＰ１は、急性心筋炎の患者の血清中で増加するほか、虚血、出血、外傷、感染、低酸素症、末梢神経損傷を含む多くのタイプの中枢神経系（ＣＮＳ）傷害において上方制御されることが報告されている。ＭＣＰ１は、乾癬、慢性関節リウマチ、アテローム性動脈硬化等の単球浸潤を特徴とする疾患への関与も示唆されている。 Chemokines are secreted proteins that induce migration of leukocytes and are involved in the formation of inflammation. They are classified into four subfamilies, CC, CXC, C, and CX3C, based on their structure. Monocyte chemotactic protein 1 (MCP1), which belongs to the CC subfamily, is expressed in monocytes, macrophages, and endothelial cells. MCP1 is reported to be increased in the serum of patients with acute myocarditis, and is upregulated in many types of central nervous system (CNS) injuries, including ischemia, hemorrhage, trauma, infection, hypoxia, and peripheral nerve injury. MCP1 has also been suggested to be involved in diseases characterized by monocyte infiltration, such as psoriasis, chronic rheumatoid arthritis, and atherosclerosis.
インターロイキン－６（ＩＬ－６）は、Ｔ細胞、マクロファージを含む様々な細胞から産生される。ＩＬ－６は、炎症反応において重要な役割を果たし、例えばＩＬ－８やＭＣＰ－１等のケモカインの産生亢進、ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１等の細胞接着分子の発現亢進、Ｂ細胞からの抗体産生細胞への分化促進、制御性Ｔ細胞の抑制を行う。インターロイキン－８（ＩＬ－８）は、マクロファージ、上皮細胞および血管内皮細胞等から産生される。ＩＬ－８は感染部位への好中球の遊走を誘導するとともに、食作用を誘導する。 Interleukin-6 (IL-6) is produced by various cells including T cells and macrophages. IL-6 plays an important role in inflammatory responses, for example by increasing the production of chemokines such as IL-8 and MCP-1, increasing the expression of cell adhesion molecules such as ICAM-1 and VCAM-1, promoting the differentiation of B cells into antibody-producing cells, and suppressing regulatory T cells. Interleukin-8 (IL-8) is produced by macrophages, epithelial cells, vascular endothelial cells, etc. IL-8 induces the migration of neutrophils to the site of infection and also induces phagocytosis.
インターフェロンは、ウイルス等の病原体の侵入に反応して細胞が分泌する。インターフェロンとして、Ｉ型インターフェロン、ＩＩ型インターフェロン、ＩＩＩ型インターフェロンが知られている。Ｉ型インターフェロンであるインターフェロン－αおよびβ（ＩＦＮ－α、β）は、Ｔ細胞、Ｂ細胞、マクロファージ、線維芽細胞、血管内皮細胞等の多くの細胞で産生され、特に抗ウイルス応答に重要である。ＩＦＮ－αおよびβは、マクロファージおよびＮＫ細胞を活性化する。ＩＩ型インターフェロンであるインターフェロン－γ（ＩＦＮ－γ）は、Ｔ細胞およびＮＫ細胞等から分泌される。ＩＦＮ－γは、炎症を強化し、マクロファージおよび樹状細胞等の貪食作用を促進する。 Interferons are secreted by cells in response to the invasion of pathogens such as viruses. There are three types of interferons: type I interferon, type II interferon, and type III interferon. Type I interferons, interferon-α and β (IFN-α, β), are produced by many cells such as T cells, B cells, macrophages, fibroblasts, and vascular endothelial cells, and are particularly important in antiviral responses. IFN-α and β activate macrophages and NK cells. Type II interferon, interferon-γ (IFN-γ), is secreted by T cells, NK cells, and the like. IFN-γ enhances inflammation and promotes phagocytosis by macrophages, dendritic cells, and the like.
本発明に係る組成物または剤は、インターロイキン－６、インターロイキン－８、単球走化性因子、インターフェロン－β、インターフェロン－γからなる群より選択される少なくとも１つを含むサイトカインの産生を制御し得る。本発明に係る組成物または剤は、炎症性サイトカインの産生を促進し得る。本発明に係る組成物または剤は、インターロイキン－６、インターロイキン－８、単球走化性因子、インターフェロン－β、インターフェロン－γからなる群より選択される少なくとも１つを含むサイトカインの産生を促進し得る。 The composition or agent according to the present invention can control the production of cytokines including at least one selected from the group consisting of interleukin-6, interleukin-8, monocyte chemotactic factor, interferon-β, and interferon-γ. The composition or agent according to the present invention can promote the production of inflammatory cytokines. The composition or agent according to the present invention can promote the production of cytokines including at least one selected from the group consisting of interleukin-6, interleukin-8, monocyte chemotactic factor, interferon-β, and interferon-γ.
本発明に係る組成物または剤は、ウイルス、細菌、真菌等の病原性微生物感染を抑制することができる。病原性微生物に感染した細胞は、キラーＴ細胞およびＮＫ細胞等により排除される。ＣＤ８は、キラーＴ細胞のマーカーであり、病原性微生物感染の指標として用いることができる。ＣＤ８発現量が多い場合は病原性微生物感染が多く、ＣＤ８発現量が少ない場合は病原性微生物感染が抑制されていると判断することができる。 The composition or agent according to the present invention can suppress infection with pathogenic microorganisms such as viruses, bacteria, and fungi. Cells infected with pathogenic microorganisms are eliminated by killer T cells, NK cells, and the like. CD8 is a marker for killer T cells and can be used as an indicator of pathogenic microorganism infection. It can be determined that a high level of CD8 expression indicates a high level of pathogenic microorganism infection, and that a low level of CD8 expression indicates that pathogenic microorganism infection is suppressed.
上記サイトカインの産生が促進されることで、腸管だけでなく全身の免疫機能が向上する。その結果、全身、中枢神経系、呼吸器、消化器、尿路、皮膚、リンパ節等様々な部位での病原性微生物による感染症の予防、治療または症状が軽減され得る。 By promoting the production of the above cytokines, immune function is improved not only in the intestinal tract but throughout the body. As a result, infections caused by pathogenic microorganisms in various parts of the body, including the central nervous system, respiratory system, digestive system, urinary tract, skin, and lymph nodes, can be prevented, treated, or symptoms reduced.
乳幼児は、免疫機能が十分に発達していないため、免疫機能を向上させることは乳幼児にとって特に重要である。 Improving immune function is especially important for infants and young children, as their immune systems are not fully developed.
＜ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌＞
ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌は、グラム陽性の偏性嫌気性桿菌である。ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌としては、本発明の効果を損なわない限り、公知または未知のビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌を１種または２種以上任意に選択することができる。ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスは、単にビフィドバクテリウム・インファンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｉｎｆａｎｔｉｓ）との略称で呼称される場合もある。ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌としては、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＢＣＣＭ ＬＭＧ２３７２８、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＭ－６３（ＮＩＴＥ ＢＰ－０２６２３）等が挙げられる。
<Bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis>
Bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis are gram-positive obligately anaerobic rods. As the bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis, one or more types of bacteria belonging to known or unknown Bifidobacterium longum subsp. infantis can be arbitrarily selected as long as the effect of the present invention is not impaired. Bifidobacterium longum subsp. infantis may also be simply referred to as Bifidobacterium infantis. Examples of bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis include Bifidobacterium longum subsp. infantis BCCM LMG23728 and Bifidobacterium longum subsp. infantis M-63 (NITE BP-02623).
ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＢＣＣＭ ＬＭＧ２３７２８は、ベルギーの保存機関であるＢｅｌｇｉａｎ Ｃｏｏｒｄｉｎａｔｅｄ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ（ＢＣＣＭ）（住所：ベルギー、Ｂ－１０００ ブリュッセル シアンス通り（ウェーテンスカップ通り）８）から入手することができる。 Bifidobacterium longum subsp. infantis BCCM LMG23728 is available from the Belgian Coordinating Collections of Microorganisms (BCCM), a Belgian collection, 8, Scionsrue (Wuertenskaprue), B-1000 Brussels, Belgium.
ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＭ－６３（ＮＩＴＥ ＢＰ－０２６２３）は、２０１８年１月２６日に、独立行政法人製品評価技術基盤機構特許微生物寄託センター（〒２９２－０８１８ 千葉県木更津市かずさ鎌足２－５－８ １２２号室）に、ＮＩＴＥ ＢＰ－０２６２３の受託番号で、ブダペスト条約に基づく国際寄託がなされたものである。ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＢＣＣＭ ＬＭＧ２３７２８と、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＭ－６３（ＮＩＴＥ ＢＰ－０２６２３）とは、実質的に同一の細菌である。 Bifidobacterium longum subsp. infantis M-63 (NITE BP-02623) was internationally deposited on January 26, 2018 at the National Institute of Technology and Evaluation Patent Microorganisms Deposit Center (Room 122, 2-5-8 Kazusa Kamatari, Kisarazu City, Chiba Prefecture, 292-0818) under the accession number NITE BP-02623 based on the Budapest Treaty. Bifidobacterium longum subsp. infantis BCCM LMG23728 and Bifidobacterium longum subsp. infantis M-63 (NITE BP-02623) are substantially the same bacterium.
ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＭ－６３の菌形状は桿菌または分岐状の多形であり、芽胞の形成はなく、運動性もない。ＢＬ寒天培地平板上に本菌を塗布し、嫌気状態で３７℃４８時間培養すると、不透明な円形半球状の光沢を有するコロニーを形成する。ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＭ－６３は、アラビノース、キシロース、グルコース、フルクトース、ガラクトース、スクロース、マルトース、ラクトース、メビリオース、ラフィノース、ツラノースに対する発酵性を有する。 Bifidobacterium longum subsp. infantis M-63 has a rod-shaped or branched pleomorphic shape, does not form spores, and is not motile. When the bacterium is spread on a BL agar medium plate and cultured at 37°C for 48 hours under anaerobic conditions, it forms opaque, circular, hemispherical, glossy colonies. Bifidobacterium longum subsp. infantis M-63 has the ability to ferment arabinose, xylose, glucose, fructose, galactose, sucrose, maltose, lactose, mevilose, raffinose, and turanose.
本発明に係る組成物または剤に含まれるビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌としては、上記の寄託株と実質的に同一の細菌を含んでよい。寄託株と実質的に同一の細菌としては、例えば、寄託株を親株とする派生株が含まれる。派生株としては、寄託株から育種された株および寄託株から自然に生じた株が含まれる。 The bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis contained in the composition or agent according to the present invention may include bacteria substantially identical to the above-mentioned deposited strain. Examples of bacteria substantially identical to the deposited strain include derived strains having the deposited strain as a parent strain. Derived strains include strains bred from the deposited strain and strains that have naturally arisen from the deposited strain.
本明細書において「実質的に同一の細菌」とは、同属または同種の細菌であって、１６Ｓ ｒＲＮＡ遺伝子の塩基配列が、当該細菌の１６Ｓ ｒＲＮＡ遺伝子の塩基配列と９８％以上、好ましくは９９％以上、より好ましくは１００％の同一性を有し、かつ、好ましくは当該細菌と同一の菌学的性質を有する細菌である。実質的に同一の細菌は、（１）ＲＡＰＤ（Ｒａｎｄｏｍｌｙ Ａｍｐｌｉｆｉｅｄ Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ＤＮＡ）法またはＰＦＧＥ（Ｐｕｌｓｅｄ－ｆｉｅｌｄ ｇｅｌ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ）法により同一の菌株と判定される細菌（Ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ ｉｎ ｆｏｏｄ／Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ａｎｄ ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ８５ Ｐａｇｅ４３に記載）、（２）当該細菌株由来の遺伝子のみ保有し、外来由来の遺伝子を持たず、ＤＮＡの同一性が９５％以上である細菌、または（３）当該細菌株から育種された株（遺伝子工学的改変、突然変異、自然突然変異を含み、同一の形質を有する細菌であってもよい。 As used herein, "substantially the same bacterium" refers to a bacterium of the same genus or species, whose 16S rRNA gene base sequence has 98% or more, preferably 99% or more, and more preferably 100% identity with the 16S rRNA gene base sequence of the bacterium, and which preferably has the same bacteriological properties as the bacterium. Substantially identical bacteria are (1) bacteria determined to be the same strain by the RAPD (Randomly Amplified Polymorphic DNA) method or the PFGE (Pulsed-field gel electrophoresis) method (described in Probiotics in food/Health and nutritional properties and guidelines for evaluation 85, page 43), (2) bacteria that only have genes derived from the bacterial strain, have no genes of foreign origin, and have a DNA identity of 95% or more, or (3) strains bred from the bacterial strain (including genetic engineering modifications, mutations, and natural mutations, and may be bacteria with the same characteristics.
本発明に係る組成物または剤に含まれるビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌は、生菌であっても死菌であってもよく、生菌および死菌の両方であってもよいが、好ましくは生菌である。生きた状態で摂取または投与され、宿主に有益な作用をもたらす微生物をプロバイオティクスともいう。死菌は、破砕物であってもよい。本発明の効果を損なわない限り、培養後に加熱または凍結乾燥等の追加操作を行ってもよい。追加操作は、生菌の生残性が高いものであることが好ましい。 The bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis contained in the composition or agent according to the present invention may be live or dead, or may be both live and dead, but are preferably live. Microorganisms that are ingested or administered live and have a beneficial effect on the host are also called probiotics. The dead bacteria may be crushed. Additional procedures such as heating or freeze-drying may be performed after the culture, as long as they do not impair the effects of the present invention. It is preferable that the additional procedures are such that the survival of live bacteria is high.
本発明に係る組成物または剤に含まれるビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌は、ビフィドバクテリウム属細菌（ビフィズス菌）の培養に通常用いられる方法を適宜変更して培養することができる。培養温度は、例えば２５～５０℃であってよく、好ましくは３０～４０℃である。培養は、嫌気条件下で行うことが好ましく、例えば炭酸ガス等の嫌気ガスを通気しながら培養することができる。培地のｐＨは、当該細菌が育成できる範囲であれば特に限定されないが、例えばｐＨ６．０～８．０である。 The bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis contained in the composition or agent according to the present invention can be cultured by appropriately modifying the method usually used for culturing bacteria of the genus Bifidobacterium (bifidobacteria). The culture temperature may be, for example, 25 to 50°C, and preferably 30 to 40°C. The culture is preferably carried out under anaerobic conditions, and for example, the culture can be carried out while aerating anaerobic gas such as carbon dioxide. The pH of the medium is not particularly limited as long as it is within a range in which the bacteria can grow, and is, for example, pH 6.0 to 8.0.
本発明に係る組成物または剤に含まれるビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌を培養する培地としては特に限定されず、当該細菌の培養に通常用いられる培地を必要により適宜変更して使用することができる。培地の炭素源としては、例えばガラクトース、グルコース、フルクトース、マンノース、セロビオース、マルトース、ラクトース、スクロース、トレハロース、デンプン、デンプン加水分解物、廃糖蜜等の糖類を資化性に応じて使用できる。培地の窒素源としては、例えばアンモニア、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウムなどのアンモニウム塩類、硝酸塩類等を使用できる。培地の無機塩類としては、例えば塩化ナトリウム、塩化カリウム、リン酸カリウム、硫酸マグネシウム、塩化カルシウム、硝酸カルシウム、塩化マンガン、硫酸第一鉄等を用いることができる。培地にはペプトン、大豆粉、脱脂大豆粕、肉エキス、酵母エキス等の有機成分を用いてもよい。調製済みの培地としては、例えばＭＲＳ培地を好適に用いることができる。 The medium for culturing the bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis contained in the composition or agent according to the present invention is not particularly limited, and a medium usually used for culturing the bacteria can be used with appropriate modification as necessary. As the carbon source of the medium, for example, sugars such as galactose, glucose, fructose, mannose, cellobiose, maltose, lactose, sucrose, trehalose, starch, starch hydrolysate, and blackstrap molasses can be used depending on the assimilation ability. As the nitrogen source of the medium, for example, ammonium salts such as ammonia, ammonium sulfate, ammonium chloride, and ammonium nitrate, and nitrates can be used. As the inorganic salt of the medium, for example, sodium chloride, potassium chloride, potassium phosphate, magnesium sulfate, calcium chloride, calcium nitrate, manganese chloride, and ferrous sulfate can be used. Organic components such as peptone, soybean flour, defatted soybean meal, meat extract, and yeast extract can also be used in the medium. As the prepared medium, for example, MRS medium can be preferably used.
ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌は、免疫機能向上のために使用され得る。ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌は、食品、薬剤中等に長年使用されているものであるため、かつ、動物の腸内に善玉菌として存在するものであるため、生体への安全性が高いことが期待される。また、副作用や依存性が生じにくいと考えられるため、長期間、連続的に摂取することが可能で、適用対象が気軽に摂取することができる。 Bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis can be used to improve immune function. Bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis have been used in foods and medicines for many years, and exist as good bacteria in the intestines of animals, so they are expected to be highly safe for living organisms. In addition, they are thought to be unlikely to cause side effects or dependency, so they can be taken continuously for a long period of time and can be easily ingested by the target subjects.
本発明に係る組成物または剤は、免疫機能向上効果を妨げない限り、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌以外の細菌を含んでもよい。本発明に係る組成物または剤に含まれ得る細菌としては、例えば他のビフィドバクテリウム属細菌および乳酸菌が挙げられる。他のビフィドバクテリウム属細菌としては、例えばビフィドバクテリウム・ビフィダム、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス、ビフィドバクテリウム・シュードカテニュラータム、ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス、ビフィドバクテリウム・ブレーベ、ビフィドバクテリウム・シュードロンガ等が挙げられる。乳酸菌としては、ラクトバチルス・パラカゼイ、ラクトバチルス・プランタラム、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・ラムノーサス、ラクトバチルス・ガセリ等が挙げられる。 The composition or agent according to the present invention may contain bacteria other than those belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis, so long as it does not interfere with the immune function improving effect. Examples of bacteria that may be contained in the composition or agent according to the present invention include other Bifidobacterium bacteria and lactic acid bacteria. Examples of other Bifidobacterium bacteria include Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum subsp. longum, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium pseudocatenulatum, Bifidobacterium animalis subsp. lactis, Bifidobacterium breve, and Bifidobacterium pseudolonga. Examples of lactic acid bacteria include Lactobacillus paracasei, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus rhamnosus, and Lactobacillus gasseri.
本発明に係る組成物または剤は、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌の培養物を含んでもよい。培養物は、希釈または濃縮されていてもよい。細菌の培養物には、細菌の分泌物および代謝物が含まれ得る。 The composition or agent according to the present invention may contain a culture of bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis. The culture may be diluted or concentrated. The bacterial culture may contain secretions and metabolites of the bacteria.
＜飲食品組成物＞
本発明に係る組成物は、医薬、飲食品および飼料として広く用いることができる。組成物は、経口または経管により摂取されることが好ましく、経口摂取されることがより好ましい。組成物は、医薬または飲食品の形態で日常的に摂取することができる。本発明の組成物は、好ましくは飲食品組成物である。本発明に係る飲食品組成物は、安全で手軽に免疫機能を向上させることができる。
<Food and drink composition>
The composition according to the present invention can be widely used as medicine, food and drink, and feed. The composition is preferably taken orally or through a feeding tube, more preferably taken orally. The composition can be taken daily in the form of medicine or food and drink. The composition according to the present invention is preferably a food and drink composition. The food and drink composition according to the present invention can improve immune function safely and easily.
本発明に係る飲食品組成物は、液状、ペースト状、固体、粉末等の形態を問わず、錠菓、流動食等の形態も含まれる。本発明に係る飲食品組成物としては、例えば小麦粉製品、即席食品、農産加工品、水産加工品、畜産加工品、乳・乳製品、油脂類、基礎調味料、複合調味料・食品類、冷凍食品、菓子類、飲料、これら以外の市販品等が挙げられる。 The food and drink composition according to the present invention may be in any form, such as liquid, paste, solid, or powder, and may also be in the form of tablet confectionery, liquid food, etc. Examples of the food and drink composition according to the present invention include flour products, instant foods, processed agricultural products, processed marine products, processed livestock products, milk and dairy products, oils and fats, basic seasonings, complex seasonings and foods, frozen foods, confectioneries, beverages, and other commercially available products.
小麦粉製品としては、例えばパン、マカロニ、スパゲッティ、めん類、ケーキミックス、から揚げ粉、パン粉等が挙げられる。即席食品類としては、例えば即席めん、カップめん、レトルト・調理食品、調理缶詰め、電子レンジ食品、即席スープ・シチュー、即席みそ汁・吸い物、スープ缶詰め、フリーズ・ドライ食品、その他の即席食品等が挙げられる。農産加工品としては、例えば農産缶詰め、果実缶詰め、ジャム・マーマレード類、漬物、煮豆類、農産乾物類、シリアル（穀物加工品）等が挙げられる。水産加工品としては、例えば水産缶詰め、魚肉ハム・ソーセージ、水産練り製品、水産珍味類、つくだ煮類等が挙げられる。畜産加工品としては、例えば畜産缶詰め・ペースト類、畜肉ハム・ソーセージ等が挙げられる。乳・乳製品としては、例えば発酵乳、加工乳、乳飲料、ヨーグルト類、乳酸菌飲料類、チーズ、アイスクリーム類、調製粉乳類、クリーム、その他の乳製品等が挙げられる。油脂類としては、例えばバター、マーガリン類、植物油等が挙げられる。基礎調味料としては、例えばしょうゆ、みそ、ソース類、トマト加工調味料、みりん類、食酢類等が挙げられる。複合調味料・食品類としては、調理ミックス、カレーの素類、たれ類、ドレッシング類、めんつゆ類、スパイス類、その他の複合調味料等が挙げられる。冷凍食品としては、例えば素材冷凍食品、半調理冷凍食品、調理済冷凍食品等が挙げられる。菓子類としては、例えばキャラメル、キャンディー、チューインガム、チョコレート、クッキー、ビスケット、ケーキ、パイ、スナック、クラッカー、和菓子、米菓子、豆菓子、デザート菓子、その他の菓子等が挙げられる。飲料としては、例えば炭酸飲料、天然果汁、果汁飲料、果汁入り清涼飲料、果肉飲料、果粒入り果実飲料、野菜系飲料、豆乳、豆乳飲料、コーヒー飲料、お茶飲料、粉末飲料、濃縮飲料、スポーツ飲料、栄養飲料、アルコール飲料、その他の嗜好飲料等が挙げられる。上記以外の市販食品としては、例えばベビーフード、ふりかけ、お茶漬けのり等が挙げられる。 Examples of flour products include bread, macaroni, spaghetti, noodles, cake mix, fried chicken flour, breadcrumbs, etc. Examples of instant foods include instant noodles, cup noodles, retort/prepared foods, pre-cooked foods, microwave foods, instant soups/stews, instant miso soup/cleaning soups, canned soups, freeze-dried foods, and other instant foods. Examples of processed agricultural products include canned agricultural products, canned fruit, jams/marmalades, pickles, boiled beans, dried agricultural products, and cereals (processed grain products). Examples of processed marine products include canned marine products, fish ham/sausages, marine paste products, marine delicacies, and tsukudani (food cooked in soy sauce). Examples of processed livestock products include canned livestock products/pastes, livestock ham/sausages, etc. Examples of milk and dairy products include fermented milk, processed milk, milk drinks, yogurts, lactic acid bacteria drinks, cheese, ice cream, modified milk powder, cream, and other dairy products. Examples of fats and oils include butter, margarines, and vegetable oils. Examples of basic seasonings include soy sauce, miso, sauces, tomato processed seasonings, mirin, and vinegars. Examples of complex seasonings and foods include cooking mixes, curry bases, sauces, dressings, noodle soups, spices, and other complex seasonings. Examples of frozen foods include ingredient frozen foods, semi-cooked frozen foods, and cooked frozen foods. Examples of confectioneries include caramel, candy, chewing gum, chocolate, cookies, biscuits, cakes, pies, snacks, crackers, Japanese sweets, rice confectioneries, bean confectioneries, dessert confectioneries, and other confectioneries. Examples of beverages include carbonated beverages, natural fruit juices, fruit juice beverages, soft drinks containing fruit juice, fruit pulp beverages, fruit beverages containing fruit particles, vegetable beverages, soy milk, soy milk beverages, coffee beverages, tea beverages, powdered beverages, concentrated beverages, sports beverages, nutritional beverages, alcoholic beverages, and other beverages. Examples of commercially available foods other than those mentioned above include baby food, furikake, and ochazuke nori seaweed.
飲食品組成物におけるビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌の含有量は特に限定されず、一日あたりの摂取量に基づいて適宜選択することができる。飲食品組成物におけるビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌の含有量は、例えば１×１０６～１×１０１２ｃｆｕ／ｇまたは１×１０６～１×１０１２ｃｆｕ／ｍＬとすることが好ましく、１×１０７～１×１０１１ｃｆｕ／ｇまたは１×１０７～１×１０１１ｃｆｕ／ｍＬとすることがより好ましく、１×１０８～１×１０１０ｃｆｕ／ｇまたは１×１０８～１×１０１０ｃｆｕ／ｍＬとすることがさらに好ましい。単位ｃｆｕは、ｃｏｌｏｎｙ ｆｏｒｍｉｎｇ ｕｎｉｔｓの略であり、コロニー形成単位である。細菌が死菌の場合、ｃｆｕ／ｇまたはｃｆｕ／ｍＬは、個細胞／ｇまたは個細胞／ｍＬと置き換えることができる。 The content of the bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis in the food and drink composition is not particularly limited and can be appropriately selected based on the daily intake. The content of the bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis in the food and drink composition is, for example, preferably 1×10 6 to 1×10 12 cfu/g or 1×10 6 to 1×10 12 cfu/mL, more preferably 1×10 7 to 1×10 11 cfu/g or 1×10 7 to 1×10 11 cfu/mL, and even more preferably 1×10 8 to 1×10 10 cfu/g or 1×10 8 to 1×10 10 cfu/mL. The unit cfu is an abbreviation for colony forming units, and is a colony forming unit. If the bacteria are killed, cfu/g or cfu/mL can be replaced with cells/g or cells/mL.
飲食品組成物におけるビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌の含有量は、本発明の効果を損なわない限り、任意に設定することができる。飲食品組成物におけるビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌の含有量は、飲食品組成物の最終組成物に対し、０．３質量％～５．０質量％に設定することができる。 The content of bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis in the food and beverage composition can be set at any amount as long as it does not impair the effects of the present invention. The content of bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis in the food and beverage composition can be set to 0.3% by mass to 5.0% by mass based on the final composition of the food and beverage composition.
飲食品組成物の摂取量は、投与または摂取対象の体重１ｋｇ当たりのビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌の量として、１×１０６～１×１０１２ｃｆｕ／日が好ましく、１×１０７～１×１０１１ｃｆｕ／日がより好ましく、１×１０８～１×１０１０ｃｆｕ／日がさらに好ましい。該細菌が死菌の場合、ｃｆｕ／日は、個細胞／日と置き換えることができる。 The intake amount of the food or drink composition is preferably 1×10 to 1×10 cfu/day, more preferably 1× 10 to 1× 10 cfu/day, and even more preferably 1× 10 to 1× 10 cfu/day, as the amount of bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis per kg of body weight of the subject to be administered or ingested. When the bacteria are killed, cfu/day can be replaced with individual cells/day.
飲食品組成物は、調製粉乳または調製液状乳であってもよい。調製粉乳としては、乳児用調製粉乳または調製液状乳、フォローアップ用調製粉乳または調製液状乳、低出生体重児用調製粉乳または調製液状乳、小児用調製粉乳または調製液状乳、成人用調製粉乳または調製液状乳、高齢者用調製粉乳または調製液状乳、アレルギー用調製粉乳または調製液状乳、乳糖不耐症用調製粉乳または調製液状乳、先天代謝異常用調製粉乳または調製液状乳等が挙げられる。飲食品組成物は、特に乳児用調製粉乳または調製液状乳、フォローアップ用調製粉乳または調製液状乳、低出生体重児用調製粉乳または調製液状乳、小児用調製粉乳または調製液状乳であることが好ましい。 The food and drink composition may be a formula or liquid milk. Examples of formula include formula or liquid milk for infants, formula or liquid milk for follow-up, formula or liquid milk for low birth weight infants, formula or liquid milk for children, formula or liquid milk for adults, formula or liquid milk for the elderly, formula or liquid milk for allergies, formula or liquid milk for lactose intolerance, formula or liquid milk for congenital metabolic disorders, etc. It is particularly preferable that the food and drink composition is a formula or liquid milk for infants, a formula or liquid milk for follow-up, formula or liquid milk for low birth weight infants, or formula or liquid milk for children.
組成物は、その種類に応じて種々の添加物を含むことができる。組成物は、好ましくはヒトミルクオリゴ糖を含む。ヒトミルクオリゴ糖は、人乳に含まれる乳糖を除く三糖以上のオリゴ糖の総称である。哺乳動物の乳は、ラクト－Ｎ－テトラオース（ＬＮＴ）、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）、ラクト－Ｎ－ヘキサオース（ＬＮＨ）、ラクト－Ｎ－ネオヘキサオース（ＬＮｎＨ）などの１２系列のコア骨格をもつ。これらの骨格にルイスａ，ｂ，ｘやα２－３／２－６Ｎ－アセチルノイラミン酸が付加されることにより、糖鎖には１００種類ものバリエーションが存在する。ヒトミルクオリゴ糖は、母乳中に１０～２０ｇ／Ｌ含まれ、１３０種類以上のオリゴ糖が含まれ得る。 The composition may contain various additives depending on the type. The composition preferably contains human milk oligosaccharides. Human milk oligosaccharides is a general term for trisaccharide or higher oligosaccharides contained in human milk, excluding lactose. Mammalian milk has 12 core skeletons, such as lacto-N-tetraose (LNT), lacto-N-neotetraose (LNnT), lacto-N-hexaose (LNH), and lacto-N-neohexaose (LNnH). By adding Lewis a, b, x, and α2-3/2-6N-acetylneuraminic acid to these skeletons, there are as many as 100 variations in glycans. Human milk oligosaccharides are contained in breast milk at 10 to 20 g/L, and may contain more than 130 types of oligosaccharides.
組成物に含まれるヒトミルクオリゴ糖としては、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌が利用可能であるオリゴ糖であれば、本発明の効果を損なわない限り、公知または未知のヒトミルクオリゴ糖を１種または２種以上、任意に選択して用いることができる。ヒトミルクオリゴ糖としては、例えばＬ－ｆｕｃｏｓｅ、Ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｆｕｃｏｐｅｎｔａｏｓｅ Ｉ、Ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｆｕｃｏｐｅｎｔａｏｓｅ ＩＩ、２’－Ｆｕｃｏｓｙｌｌａｃｔｏｓｅ、３’－Ｆｕｃｏｓｙｌｌａｃｔｏｓｅ、Ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｆｕｃｏｐｅｎｔａｏｓｅ ＩＩＩ、３’－Ｆｕｃｏｓｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｈｅｘａｏｓｅ、Ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｄｉｆｕｃｏｈｅｘａｏｓｅ Ｉ、Ｌａｃｔｏ－ｄｉｆｕｃｏｔｅｔｒａｏｓｅ、Ｌａｃｔｏ－ｄｉｆｕｃｏｈｅｘａｏｓｅ Ｉ、Ｌａｃｔｏｄｉｆｕｃｏｈｅｘａｏｓｅ ＩＩ、Ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｔｅｔｒａｏｓｅ、Ｄｉｆｕｃｏｓｙｌ ｓｙａｌｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｈｅｘａｏｓｅ、Ｓｙａｌｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｔｅｔｒａｏｓｅ、Ｆｕｃｏｓｙｌｓｙａｌｙｌ ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｈｅｘａｏｓｅ Ｉ、３’－Ｆｕｃｏｓｙｌｓｉａｌｙｌ ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｔｅｔｒａｏｓｅ（Ｆｕｃ １，２ Ｇａｌ，Ｆｕｃ １，４ Ｇａｌ ＮＡＣ）、Ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｎｅｏｔｅｔｒａｏｓｅ、３’－Ｓｉａｌｙｌ－３－ｆｕｃｏｓｙｌｌａｃｔｏｓｅ、Ｄｉｓｉａｌｏｍｏｎｏｆｕｃｏｓｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｎｅｏｈｅｘａｏｓｅ、Ｍｏｎｏｆｕｃｏｓｙｌｍｏｎｏｓｉａｌｙｌ ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｏｃｔａｏｓｅ、Ｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｆｕｃｏｈｅｘａｏｓｅ ＩＩ、Ｄｉｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｆｕｃｏｐｅｎｔａｏｓｅ ＩＩ、Ｍｏｎｏｆｕｃｏｓｙｌｄｉｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｔｅｔｒａｏｓｅ、２’－Ｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏｓｅ、２’－Ｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ、３’－Ｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏｓｅ、３’－Ｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ、６’－Ｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏｓｅ、６’－Ｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ、Ｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｎｅｏｔｅｔｒａｏｓｅ ｃ、Ｍｏｎｏｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｈｅｘａｏｓｅ、Ｄｉｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｈｅｘａｏｓｅ Ｉ、Ｍｏｎｏｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｎｅｏｈｅｘａｏｓｅ Ｉ、Ｍｏｎｏｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｎｅｏｈｅｘａｏｓｅ ＩＩ、Ｄｉｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｎｅｏｈｅｘａｏｓｅ、Ｄｉｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｔｅｔｒａｏｓｅ、Ｄｉｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｈｅｘａｏｓｅ ＩＩ、Ｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｔｅｔｒａｏｓｅ ａ、Ｄｉｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｈｅｘａｏｓｅ Ｉ、Ｓｉａｌｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｔｅｔｒａｏｓｅ ｂ、２’－Ｆｕｃｏｓｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｈｅｘａｏｓｅ、３’－Ｆｕｃｏｓｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｎｅｏｈｅｘａｏｓｅ、２’－Ｆｕｃｏｓｙｌ－Ｎ－ａｃｅｔｙｌｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ、Ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｆｕｃｏｐｅｎｔａｏｓｅ Ｖ、Ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｈｅｘａｏｓｅ、Ｐａｒａ－ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｈｅｘａｏｓｅ、Ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｎｅｏｈｅｘａｏｓｅ、Ｐａｒａ－ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｎｅｏｈｅｘａｏｓｅ、Ｍｏｎｏｆｕｃｏｓｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｈｅｘａｏｓｅ ＩＩ、Ｉｓｏｍｅｒｉｃ ｆｕｃｏｓｙｌａｔｅｄ ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｈｅｘａｏｓｅ （１）、Ｉｓｏｍｅｒｉｃ ｆｕｃｏｓｙｌａｔｅｄ ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｈｅｘａｏｓｅ （３）、Ｉｓｏｍｅｒｉｃ ｆｕｃｏｓｙｌａｔｅｄ ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｈｅｘａｏｓｅ （２）、Ｄｉｆｕｃｏｓｙｌ－ｐａｒａ－ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｎｅｏｈｅｘａｏｓｅ、Ｄｉｆｕｃｏｓｙｌ－ｐａｒａ－ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｈｅｘａｏｓｅ、２’ ３’－Ｄｉｆｕｃｏｓｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｈｅｘａｏｓｅ、Ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｎｅｏｏｃａｔａｏｓｅ、Ｐａｒａ－ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｏｃｔａｎｏｓｅ、Ｉｓｏ－ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｏｃｔａｏｓｅ、Ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｏｃｔａｏｓｅ、Ｍｏｎｏｆｕｃｏｓｙｌｌａｃｔｏ－ｎｅｏｏｃａｔａｏｓｅ、Ｍｏｎｏｆｕｃｏｓｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｏｃａｔａｏｓｅ、Ｄｉｆｕｃｏｓｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｏｃｔａｏｓｅ Ｉ、Ｄｉｆｕｃｏｓｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｏｃｔａｏｓｅ ＩＩ、Ｄｉｆｕｃｏｓｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｎｅｏｏｃａｔａｏｓｅ ＩＩ、Ｄｉｆｕｃｏｓｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｎｅｏｏｃａｔａｏｓｅ Ｉ、Ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｄｅｃａｏｓｅ、Ｔｒｉｆｕｃｏｓｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｎｅｏｏｃｔａｏｓｅ、Ｔｒｉｆｕｃｏｓｙｌｌａｃｔｏ－Ｎ－ｏｃｔａｏｓｅ、Ｔｒｉｆｕｃｏｓｙｌ－ｉｓｏ－ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｏｃｔａｏｓｅ、Ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｄｉｆｕｃｏ－ｈｅｘａｏｓｅ ＩＩ、Ｓｉａｌｙｌ－ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｔｅｔｒａｏｓｅ ａ、Ｓｉａｌｙｌ－ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｔｅｔｒａｏｓｅ ｂ、Ｓｉａｌｙｌ－ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｔｅｔｒａｏｓｅ ｃ、Ｓｉａｌｙｌ－ｆｕｃｏｓｙｌ－ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｔｅｔｒａｏｓｅ Ｉ、Ｓｉａｌｙｌ－ｆｕｃｏｓｙｌ－ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｔｅｔｒａｏｓｅ ＩＩ、Ｄｉｓｉａｌｙｌ－ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｔｅｔｒａｏｓｅ、Ｌａｃｔｏ－Ｎ－ｎｅｏｔｅｔｒａｏｓｅ等とこれらの組み合わせが挙げられる。本発明の組成物は、好ましくは２’－フコシルラクトース（以下、「２’－ＦＬ」ともいう。）、ラクト－Ｎ－フコペンタオースＩ（以下、「ＬＮＦＰＩ」ともいう。）、ラクト－Ｎ－ジフコヘキサオースＩ（以下、「ＬＮＤＦＰ Ｉ」ともいう。）およびラクト－Ｎ－テトラオース（以下、「ＬＮｎＴ」ともいう。）から選択される少なくとも１つを含む。 The human milk oligosaccharides contained in the composition may be one or more types of known or unknown human milk oligosaccharides that can be utilized by bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis, as long as the effects of the present invention are not impaired. Examples of human milk oligosaccharides include L-fucose, Lacto-N-fucopentaose I, Lacto-N-fucopentaose II, 2'-Fucosyllactose, 3'-Fucosyllactose, Lacto-N-fucopentaose III, 3'-Fucosyllacto-N-hexaose, Lacto-N-difucohexaose I, Lacto-difucotetraose, Lacto-difucohexaose I, and Lactodifucohexaose. II, Lacto-N-tetraose, Difucosyl syalyllacto-N-hexaose, Syalyllacto-N-tetraose, Fucosylsyalyl lacto-N-hexaose I, 3'-Fucosylsialyl lacto-N-tetraose (Fuc 1,2 Gal, Fuc 1,4 Gal NAC), Lacto-N-neotetraose, 3'-Sialyl-3-fucosyllactose, Disialomonofucosyllacto-N-neohexaose, Monofucosylmonosialyl Lacto-N-octaose, Sialyllacto-N-fucohexaose II, Disialylacto-N-fucopentaose II, Monofucosyldisialyllacto-N-tetraose, 2'-Sialylactose, 2'-Sialyllactosamine, 3'-Sialylac tose, 3'-Sialyllactosamine, 6'-Sialylactose, 6'-Sialyllactosamine, Sialyllacto-N-neotetraose c, Monosialyllacto-N-hexaose, Disialyllacto-N-hexaose I, Monosialyllacto-N-neohexaose I, Monosialyllacto-N-neohexaose II, Disialylacto-N-neohexaose, Disialylacto-N-tetraose, Disialylacto-N-hexaose II, Sialylacto-N-tetraose a, Disialylacto-N-hexaose I, Sialylacto-N-tetraose b, 2'-Fucosyllacto-N-hexaose, 3'-Fucosyllacto-N-neohexaose, 2'-Fucosyl-N-acetylglucosamine, Lacto-N-fucopentaose V, Lacto-N-hexaose, Para-lacto-N-hexaose, Lacto-N-neohexaose, Para-lacto-N-neohexaose, Monofucosyllacto-N-hexaose II, Isomeric fucosylated lacto-N-hexaose (1), Isomeric fucosylated lacto-N-hexaose (3), Isomeric fucosylated lacto-N-hexaose (2), Difucosyl-para-lacto-N-neohexaose, Difucosyl-para-lacto-N-hexaose, 2' 3'-Difucosyllacto-N-hexaose, Lacto-N-neocataose, Para-lacto-N-octanose, Iso-lacto-N-octaose, Lac to-N-octaose, Monofucosyllacto-neoocataose, Monofucosyllacto-N-octaose, Difucosyllacto-N-octaose I, Difucosyllacto-N-octaose II, Difucosyllacto-N-neoocataose II, Difucosyllacto-N-neoocataose I, Lacto-N-decaose, Trifucosyllacto-N-neooctaose, Trifucosyllacto- N-octaose, Trifucosyl-iso-lacto-N-octaose, Lacto-N-difuco-hexaose II, Sialyl-lacto-N-tetraose a, Sialyl-lacto-N-tetraose b, Sialyl-lacto-N-tetraose c, Sialyl-fucosyl-lacto-N-tetraose I, Sialyl-fucosyl-lacto-N-tetraose II, Disialyl-lacto-N-tetraose, Lacto-N-neotetraose, etc., and combinations thereof. The composition of the present invention preferably contains at least one selected from 2'-fucosyllactose (hereinafter also referred to as "2'-FL"), lacto-N-fucopentaose I (hereinafter also referred to as "LNFPI"), lacto-N-difucohexaose I (hereinafter also referred to as "LNDFP I"), and lacto-N-tetraose (hereinafter also referred to as "LNnT").
２’－ＦＬおよびＬＮｎＴは、ビフィズス菌増殖活性を有し、ビフィズス菌に選択的に利用されることによりビフィズス菌の増殖因子として作用することが知られており、ビフィズス菌優勢な腸内細菌叢の形成に重要である。また、ヒトミルクオリゴ糖は合成が可能で、工業的に利用できる。 2'-FL and LNnT are known to have bifidobacterial growth activity and act as bifidobacterial growth factors by being selectively utilized by bifidobacteria, and are important for the formation of a bifidobacterial-dominated intestinal flora. Human milk oligosaccharides can also be synthesized and used industrially.
ヒトミルクオリゴ糖の添加方法は、本発明の効果を損なわない限り特に限定されないが、例えばヒトミルクオリゴ糖を液状または粉末化後に添加して混合し、本発明の組成物を製造できる。 The method of adding human milk oligosaccharides is not particularly limited as long as it does not impair the effects of the present invention. For example, human milk oligosaccharides can be added in liquid or powder form and mixed to produce the composition of the present invention.
ヒトミルクオリゴ糖の含有量は、本発明の効果を損なわない限り、任意に設定することができる。本発明では、組成物中のヒトミルクオリゴ糖の含有量は、組成物の最終組成物に対し、０．３質量％～５．０質量％に設定することができる。 The content of human milk oligosaccharides can be set at any amount as long as it does not impair the effects of the present invention. In the present invention, the content of human milk oligosaccharides in the composition can be set to 0.3% to 5.0% by mass based on the final composition.
組成物は、プレバイオティクスをさらに含んでもよい。プレバイオティクスとは、大腸内の特定の細菌の増殖および活性を選択的に変化させることより、宿主に有利な影響を与え、宿主の健康を改善する難消化性食品成分のことである。プレバイオティクスは、本発明の効果を損なわないものであれば特に制限されないが、例えばラクチュロース、ラフィノース、ガラクトオリゴ糖、フラクトオリゴ糖、大豆オリゴ糖、乳果オリゴ糖、キシロオリゴ糖、イソマルオリゴ糖、コーヒー豆マンノオリゴ糖、グルコン酸、ポリデキストロース、イヌリン等が好ましく、その中でも、ラクチュロース、ラフィノース、ガラクトオリゴ糖等がより好ましく、ラクチュロース、ラフィノースおよびガラクトオリゴ糖がさらに好ましい。 The composition may further contain prebiotics. Prebiotics are indigestible food ingredients that have a beneficial effect on the host and improve the health of the host by selectively changing the growth and activity of specific bacteria in the large intestine. There are no particular limitations on the prebiotics as long as they do not impair the effects of the present invention. For example, lactulose, raffinose, galactooligosaccharides, fructooligosaccharides, soybean oligosaccharides, lactosaccharose, xylooligosaccharides, isomaltulose, coffee bean mannooligosaccharides, gluconic acid, polydextrose, inulin, etc. are preferred, and among these, lactulose, raffinose, galactooligosaccharides, etc. are more preferred, and lactulose, raffinose and galactooligosaccharides are even more preferred.
本発明の飲食品組成物の製造は、当業者に公知の方法で行うことができ、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌を公知の飲食品に添加することによって製造してもよいし、飲食品の原料中に混合して新たな飲食品組成物を製造することもできる。食品組成物の製造は、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌を添加および混合する工程の他に、成形工程、殺菌工程、発酵工程、焼成工程、乾燥工程、冷却工程、造粒工程、包装工程等を適宜組み合わせて行うことができる。ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌は、発酵乳製造用スターターとして使用してもよい。 The food and drink composition of the present invention can be produced by a method known to those skilled in the art, and may be produced by adding bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis to known foods and drinks, or by mixing the bacteria into the raw materials of foods and drinks to produce new food and drink compositions. The food composition can be produced by appropriately combining a molding process, a sterilization process, a fermentation process, a baking process, a drying process, a cooling process, a granulation process, a packaging process, and the like, in addition to the process of adding and mixing the bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis. The bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis may be used as a starter for producing fermented milk.
組成物の製造におけるビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌の含有量は、特に限定されないが、例えば１×１０６～１×１０１２ｃｆｕ／ｇまたは１×１０６～１×１０１２ｃｆｕ／ｍＬとすることが好ましく、１×１０７～１×１０１１ｃｆｕ／ｇまたは１×１０７～１×１０１１ｃｆｕ／ｍＬとすることがより好ましく、１×１０８～１×１０１０ｃｆｕ／ｇまたは１×１０８～１×１０１０ｃｆｕ／ｍＬとすることがさらに好ましい。細菌が死菌の場合、ｃｆｕ／ｇまたはｃｆｕ／ｍＬは、個細胞／ｇまたは個細胞／ｍＬと置き換えることができる。 The content of the bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis in the production of the composition is not particularly limited, but is preferably 1× 10 to 1× 10 cfu/g or 1× 10 to 1× 10 cfu/mL, more preferably 1×10 to 1× 10 cfu/g or 1× 10 to 1× 10 cfu/mL, and even more preferably 1×10 to 1× 10 cfu/g or 1× 10 to 1× 10 cfu/mL. When the bacteria are killed, cfu/g or cfu/mL can be replaced with individual cells/g or individual cells/mL.
免疫機能向上用飲食品組成物は、免疫機能向上等の保健用途が表示された飲食品として提供・販売されることが可能である。このような表示は特に限定されないが、例えば「免疫の機能を向上する」、「免疫力をアップする」、「風邪を予防する」、「健康を増進する」、「ウイルス感染を抑制する」、「細菌感染を抑制する」、「真菌感染を抑制する」、「寄生虫を排除する」、「疲れにくい」、「寒気を緩和する」が挙げられる。「表示」行為には、需要者に対して上記用途を知らしめるための全ての行為が含まれ、上記用途を想起・類推させ得るような表現であれば、表示の目的、表示の内容、表示する対象物・媒体等の如何に拘わらず、全て本発明の「表示」行為に該当する。 Food and drink compositions for improving immune function can be provided and sold as foods and drinks labeled with health uses such as improving immune function. Such labels are not particularly limited, but examples include "improves immune function," "boosts immunity," "prevents colds," "improves health," "suppresses viral infections," "suppresses bacterial infections," "suppresses fungal infections," "eliminates parasites," "reduces fatigue," and "relieves chills." "Labeling" includes all acts for informing consumers of the above uses, and any expression that can recall or infer the above uses falls under the "labeling" act of the present invention, regardless of the purpose of the labeling, the content of the labeling, the object or medium on which it is displayed, etc.
表示内容としては、行政等によって認可された表示（例えば、行政が定める各種制度に基づいて認可を受け、そのような認可に基づいた態様で行う表示等）であることが好ましい。また、そのような表示内容を、包装、容器、カタログ、パンフレット、ＰＯＰ等の販売現場における宣伝材、その他の書類等へ付することが好ましい。 It is preferable that the content of the labeling be approved by the government (for example, a labeling approved based on various systems established by the government and made in a manner based on such approval). It is also preferable that such content of the labeling be affixed to packaging, containers, catalogs, pamphlets, POP and other sales promotion materials, other documents, etc.
「表示」には、健康食品、機能性食品、経腸栄養食品、特別用途食品、保健機能食品、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品、医薬用部外品等としての表示も挙げられる。この中でも特に、消費者庁によって認可される表示、例えば特定保健用食品、栄養機能食品、もしくは機能性表示食品に係る制度、またはこれらに類似する制度にて認可される表示等が挙げられる。具体的には、特定保健用食品としての表示、条件付き特定保健用食品としての表示、機能性表示食品としての表示、身体の構造や機能に影響を与える旨の表示、疾病リスク減少表示、科学的根拠に基づいた機能性の表示等を挙げることができる。 "Labeling" also includes labeling as health food, functional food, enteral nutritional food, special purpose food, health functional food, food for specified health uses, nutrient functional food, functional food, medical drug, etc. Among these, labeling approved by the Consumer Affairs Agency, such as labeling approved under systems related to foods for specified health uses, nutrient functional foods, or foods with functional labels, or similar systems, can be mentioned. Specifically, labeling as a food for specified health uses, labeling as a food for conditional specified health uses, labeling as a food with functional labels, labeling that indicates an effect on the structure or function of the body, labeling that reduces the risk of disease, labeling of functionality based on scientific evidence, etc. can be mentioned.
＜医薬組成物＞
医薬組成物は、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌を含有する限り特に制限されない。医薬組成物は、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌をそのまま使用してもよく、生理的に許容される液体または製剤担体を配合して製造してもよい。
<Pharmaceutical Composition>
The pharmaceutical composition is not particularly limited as long as it contains the bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis. The pharmaceutical composition may be produced by using the bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis as it is, or by mixing the bacteria with a physiologically acceptable liquid or pharmaceutical carrier.
医薬組成物の剤形は特に制限されず、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤等の固形製剤；溶液剤、シロップ剤、懸濁剤、乳剤等の液剤、座剤、軟膏剤等に製剤化することができる。製剤化に際しては、通常の製剤化に用いられている製剤担体を用いることができる。また、医薬組成物は、公知のまたは将来的に見出される免疫機能向上作用を有する成分を含有することもできる。 The dosage form of the pharmaceutical composition is not particularly limited, and it can be formulated into solid preparations such as powders, granules, tablets, and capsules; liquid preparations such as solutions, syrups, suspensions, and emulsions; suppositories, ointments, and the like. When formulating the pharmaceutical composition, pharmaceutical carriers used in normal formulations can be used. The pharmaceutical composition can also contain a component that has a known or future-discovered immune function-enhancing effect.
医薬組成物におけるビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌の含有量は特に限定されず、剤形に合わせて一日あたりの摂取量または投与量に基づいて適宜選択することができる。医薬組成物におけるビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌の含有量は、例えば１×１０６～１×１０１２ｃｆｕ／ｇまたは１×１０６～１×１０１２ｃｆｕ／ｍＬとすることが好ましく、１×１０７～１×１０１１ｃｆｕ／ｇまたは１×１０７～１×１０１１ｃｆｕ／ｍＬとすることがより好ましく、１×１０８～１×１０１０ｃｆｕ／ｇまたは１×１０８～１×１０１０ｃｆｕ／ｍＬとすることがさらに好ましい。細菌が死菌の場合、ｃｆｕ／ｇまたはｃｆｕ／ｍＬは、個細胞／ｇまたは個細胞／ｍＬと置き換えることができる。 The content of the bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis in the pharmaceutical composition is not particularly limited, and can be appropriately selected based on the daily intake or dosage according to the dosage form. The content of the bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis in the pharmaceutical composition is, for example, preferably 1×10 6 to 1×10 12 cfu/g or 1×10 6 to 1×10 12 cfu/mL, more preferably 1×10 7 to 1×10 11 cfu/g or 1×10 7 to 1×10 11 cfu/mL, and even more preferably 1×10 8 to 1×10 10 cfu/g or 1×10 8 to 1×10 10 cfu/mL. If the bacteria are killed, cfu/g or cfu/mL can be replaced with cells/g or cells/mL.
医薬組成物の投与量は、投与対象の体重１ｋｇ当たりのビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌の量として、１×１０６～１×１０１２ｃｆｕ／日が好ましく、１×１０７～１×１０１１ｃｆｕ／日がより好ましく、１×１０８～１×１０１０ｃｆｕ／日がさらに好ましい。細菌が死菌の場合、ｃｆｕ／日は、個細胞／日と置き換えることができる。医薬組成物の投与方法は、経口投与でも非経口投与でもよい。医薬組成物の投与は、一日一回でもよく、複数回に分けてもよい。 The dosage of the pharmaceutical composition is preferably 1×10 6 to 1×10 12 cfu/day, more preferably 1×10 7 to 1×10 11 cfu/day, and even more preferably 1×10 8 to 1×10 10 cfu/day, as the amount of bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis per kg of body weight of the subject. When the bacteria are killed, cfu/day can be replaced with individual cells/day. The pharmaceutical composition may be administered orally or parenterally. The pharmaceutical composition may be administered once a day or in multiple doses.
製剤担体としては、剤形に応じて、各種有機または無機の担体を用いることができる。固形製剤の場合の担体としては、例えば賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤等が挙げられる。 As pharmaceutical carriers, various organic or inorganic carriers can be used depending on the dosage form. In the case of solid preparations, examples of carriers include excipients, binders, disintegrants, lubricants, stabilizers, flavoring agents, etc.
賦形剤としては、例えば乳糖、白糖、ブドウ糖、マンニット、ソルビット等の糖誘導体；トウモロコシデンプン、馬鈴薯デンプン、α‐デンプン、デキストリン、カルボキシメチルデンプン等のデンプン誘導体；結晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム等のセルロース誘導体；アラビアゴム；デキストラン；プルラン；軽質無水珪酸、合成珪酸アルミニウム、メタ珪酸アルミン酸マグネシウム等の珪酸塩誘導体；リン酸カルシウム等のリン酸塩誘導体；炭酸カルシウム等の炭酸塩誘導体；硫酸カルシウム等の硫酸塩誘導体等が挙げられる。 Examples of excipients include sugar derivatives such as lactose, sucrose, glucose, mannitol, and sorbitol; starch derivatives such as corn starch, potato starch, α-starch, dextrin, and carboxymethyl starch; cellulose derivatives such as crystalline cellulose, hydroxypropyl cellulose, hydroxypropylmethyl cellulose, carboxymethyl cellulose, and calcium carboxymethyl cellulose; gum arabic; dextran; pullulan; silicate derivatives such as light anhydrous silicic acid, synthetic aluminum silicate, and magnesium aluminometasilicate; phosphate derivatives such as calcium phosphate; carbonate derivatives such as calcium carbonate; and sulfate derivatives such as calcium sulfate.
結合剤としては、例えば上記賦形剤の他、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、マクロゴールが挙げられる。 Examples of binders include the above excipients as well as gelatin, polyvinylpyrrolidone, and macrogol.
崩壊剤としては、例えば上記賦形剤の他、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、架橋ポリビニルピロリドン等の化学修飾されたデンプンまたはセルロース誘導体等が挙げられる。 Disintegrants include, for example, the above-mentioned excipients as well as chemically modified starch or cellulose derivatives such as croscarmellose sodium, sodium carboxymethyl starch, and cross-linked polyvinylpyrrolidone.
滑沢剤としては、例えばタルク；ステアリン酸；ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム等のステアリン酸金属塩；コロイドシリカ；ピーガム、ゲイロウ等のワックス類；硼酸；グリコール；フマル酸、アジピン酸等のカルボン酸類；安息香酸ナトリウム等のカルボン酸ナトリウム塩；硫酸ナトリウム等の硫酸塩類；ロイシン；ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム等のラウリル硫酸塩；無水珪酸、珪酸水和物等の珪酸類；デンプン誘導体等が挙げられる。 Examples of lubricants include talc; stearic acid; metal stearates such as calcium stearate and magnesium stearate; colloidal silica; waxes such as pea gum and geranium stearate; boric acid; glycol; carboxylic acids such as fumaric acid and adipic acid; sodium carboxylates such as sodium benzoate; sulfates such as sodium sulfate; leucine; lauryl sulfates such as sodium lauryl sulfate and magnesium lauryl sulfate; silicic acids such as silicic anhydride and silicic acid hydrate; and starch derivatives.
安定剤としては、例えばメチルパラベン、プロピルパラベン等のパラオキシ安息香酸エステル類；クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコール等のアルコール類；塩化ベンザルコニウム；無水酢酸；ソルビン酸等が挙げられる。 Examples of stabilizers include paraoxybenzoic acid esters such as methylparaben and propylparaben; alcohols such as chlorobutanol, benzyl alcohol, and phenylethyl alcohol; benzalkonium chloride; acetic anhydride; and sorbic acid.
矯味矯臭剤としては、例えば甘味料、酸味料、香料等が挙げられる。なお、経口投与用の液剤の場合に使用する担体としては、水等の溶剤、矯味矯臭剤等が挙げられる。 Examples of flavoring agents include sweeteners, acidulants, and fragrances. In addition, examples of carriers used in liquid preparations for oral administration include solvents such as water, flavoring agents, etc.
医薬組成物は、単独で投与してもよいし、他の医薬、例えば他の免疫機能向上用医薬、抗生剤、ウイルス抑制剤、抗炎症剤、整腸剤、鎮痛剤等と併用してもよい。 The pharmaceutical composition may be administered alone or in combination with other medicines, such as other medicines for improving immune function, antibiotics, virus inhibitors, anti-inflammatory drugs, intestinal regulators, painkillers, etc.
＜飼料組成物＞
本発明に係る飼料組成物としては、例えばペットフード、家畜飼料および養魚飼料等が挙げられる。飼料組成物は、一般的な飼料またはその原料、例えば穀類、粕類、糠類、魚粉、骨粉、油脂類、脱脂粉乳、ホエー、鉱物質飼料、および酵母類等にビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌を混合することにより製造することができる。例えばサイレージのように、添加したビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌による発酵工程を経て、飼料組成物が製造されてもよい。製造された飼料組成物は、一般的な哺乳動物、家畜類、養魚類、および愛玩動物等に経口的に投与することが可能である。
<Feed composition>
Examples of the feed composition according to the present invention include pet food, livestock feed, and fish feed. The feed composition can be produced by mixing bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis with general feed or its raw materials, such as grains, lees, bran, fish meal, bone meal, oils and fats, skim milk powder, whey, mineral feed, and yeast. The feed composition may be produced through a fermentation process using bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis added, as in silage. The produced feed composition can be orally administered to general mammals, livestock, fish farming, and pet animals.
飼料組成物におけるビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌の含有量は、飼料組成物の態様や投与対象によって適宜設定されるが、例えば１×１０６～１×１０１２ｃｆｕ／ｇまたは１×１０６～１×１０１２ｃｆｕ／ｍＬとすることが好ましく、１×１０７～１×１０１１ｃｆｕ／ｇまたは１×１０７～１×１０１１ｃｆｕ／ｍＬとすることがより好ましく、１×１０８～１×１０１０ｃｆｕ／ｇまたは１×１０８～１×１０１０ｃｆｕ／ｍＬとすることがさらに好ましい。細菌が死菌の場合、ｃｆｕ／ｇまたはｃｆｕ／ｍＬは、個細胞／ｇまたは個細胞／ｍＬと置き換えることができる。 The content of bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis in the feed composition is appropriately set depending on the form of the feed composition and the subject of administration, but is preferably 1× 10 to 1×10 cfu/g or 1× 10 to 1× 10 cfu/mL, more preferably 1× 10 to 1× 10 cfu/g or 1× 10 to 1× 10 cfu/mL, and even more preferably 1× 10 to 1× 10 cfu/g or 1× 10 to 1× 10 cfu/mL. When the bacteria are killed, cfu/g or cfu/mL can be replaced with individual cells/g or individual cells/mL.
＜免疫機能を向上させる方法＞
免疫機能を向上させる方法は、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌を哺乳動物に投与する工程を含む。ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌は、上述のビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌を含む組成物の形態で投与されてもよい。
<How to improve immune function>
The method for improving immune function includes a step of administering bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis to a mammal. The bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis may be administered in the form of a composition containing the bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis.
哺乳動物としては、ヒト、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、イヌ、ネコ、ウマ等が挙げられる。投与対象は、乳幼児であってもよく、ヒトの乳幼児であってもよい。乳幼児とは、乳児および幼児を含み、さらに詳細には、乳児、幼児および新生児を含み、さらに詳細には、乳児、幼児、新生児、未熟児、早産児および低出生体重児を含む。乳幼児期以降も投与を継続してもよい。乳幼児においては、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌を投与することにより、腸内の当該細菌が増殖しやすく、免疫機能向上効果が得られやすい。 Mammals include humans, cows, sheep, goats, pigs, dogs, cats, horses, etc. The subjects of administration may be infants or human infants. Infants include infants and toddlers, more specifically infants, toddlers and newborns, more specifically infants, toddlers, newborns, premature infants, premature infants and low birth weight infants. Administration may be continued after infancy. In infants, administration of bacteria belonging to Bifidobacterium longum subsp. infantis facilitates proliferation of the bacteria in the intestines, and the immune function is easily improved.
本明細書において、乳児とは、乳児期にある子供を指し、乳児期とは、対象がヒトである場合には、出生時から満１歳未満（満１歳を迎える日の前日まで）を指すものとする。乳児期とは、母乳などの乳を主な栄養源としている時期を指すものとする。 In this specification, an infant refers to a child in infancy, and in the case of a human subject, infancy refers to the period from birth to less than one year of age (the day before the child turns one year old). Infancy refers to the period when milk, such as breast milk, is the main source of nutrition.
本明細書において、幼児とは、幼児期にある子供を指し、幼児期とは、対象がヒトである場合には、満１歳を迎えた日から学童期に入る前までを指すものとする。幼児期とは、好ましくは、満１歳を迎えた日から、満６歳を迎える日および小学校就学日のいずれか早い日の前日までを指すものとする。 In this specification, the term "infant" refers to a child in the toddler stage, and in the case of a human subject, the toddler stage refers to the period from the day the child turns one year old until the day the child enters school age. The toddler stage preferably refers to the period from the day the child turns one year old until the day the child turns six years old or the day the child starts elementary school, whichever comes first.
本発明に係る組成物または剤は、対象がヒトである場合には、出生時から学童期に入る前までに摂取するまたは投与されることが好ましい。本発明に係る組成物または剤は、対象がヒトである場合には、出生時から満３歳未満（満３歳を迎える日の前日まで）に摂取するまたは投与されることがより好ましく、乳児期に摂取するまたは投与されることがさらに好ましく、満３か月から満１歳未満（満１歳を迎える日の前日まで）に摂取するまたは投与されることがよりさらに好ましい。 When the subject is a human, the composition or agent of the present invention is preferably taken or administered from birth until before entering school age. When the subject is a human, the composition or agent of the present invention is more preferably taken or administered from birth until before the age of three (until the day before the subject turns three years old), even more preferably during infancy, and even more preferably from three months to before the age of one (until the day before the subject turns one year old).
対象がヒト以外の哺乳動物である場合の当該時期については、これらに相当する時期に換算すればよい。
対象がヒトである場合の「乳児期」は、ラットにおいては出生時から満２０日齢に相当する。以下同様に、ウシにおいては出生時から満１０週齢となる日の前日に相当する。ヤギにおいては出生時から満１０週齢となる日の前日に相当する。ヒツジにおいては出生時から満１２週齢となる日の前日に相当する。ブタにおいては出生時から満８週齢となる日の前日に相当する。サルにおいては出生時から満１４週齢となる日の前日に相当する。イヌにおいては出生時から満６週齢となる日の前日に相当する。ネコにおいては出生時から満６週齢となる日の前日に相当する。マウスにおいては出生時から満２０日齢に相当する。ハムスターにおいては出生時から満２０日齢に相当する。モルモットにおいては出生時から満２０日齢に相当する。
When the subject is a mammal other than a human, the period may be converted into an equivalent period.
When the subject is a human, the "infancy period" corresponds to 20 days from birth in rats. Similarly, it corresponds to the day before the day when the subject becomes 10 weeks old from birth in cattle. It corresponds to the day before the day when the subject becomes 10 weeks old from birth in goats. It corresponds to the day before the day when the subject becomes 12 weeks old from birth in sheep. It corresponds to the day before the day when the subject becomes 8 weeks old from birth in pigs. It corresponds to the day before the day when the subject becomes 14 weeks old from birth in monkeys. It corresponds to the day before the day when the subject becomes 6 weeks old from birth in dogs. It corresponds to the day before the day when the subject becomes 6 weeks old from birth in cats. It corresponds to the day before the day when the subject becomes 20 days old from birth in mice. It corresponds to the day before the day when the subject becomes 20 days old from birth in hamsters. It corresponds to the day before the day when the subject becomes 20 days old from birth in guinea pigs.
対象がヒトである場合の「幼児期」は、ラットにおいては満２１日齢から満５週齢となる日の前日に相当する。以下同様に、ウシにおいては満１０週齢から満１歳となる日の前日に相当する。ヤギにおいては満１０週齢から満１歳となる日の前日に相当する。ヒツジにおいては満１２週齢から満１歳となる日の前日に相当する。ブタにおいては満８週齢から満４か月齢となる日の前日に相当する。サルにおいては満１４週齢から満１．５歳となる日の前日に相当する。イヌにおいては満６週齢から満６か月齢となる日の前日に相当する。ネコにおいては満６週齢から満６か月齢となる日の前日に相当する。マウスにおいては満２１日齢から満５週齢となる日の前日に相当する。ハムスターにおいては満２１日齢から満５週齢となる日の前日に相当する。モルモットにおいては満２１日齢から満５週齢となる日の前日に相当する。 When the subject is a human, the "infancy period" corresponds to the day before the day when the rat is 21 days old to 5 weeks old. Similarly, for cattle, it corresponds to the day before the day when the rat is 10 weeks old to 1 year old. For goats, it corresponds to the day before the day when the rat is 10 weeks old to 1 year old. For sheep, it corresponds to the day before the day when the rat is 12 weeks old to 1 year old. For pigs, it corresponds to the day before the day when the rat is 8 weeks old to 4 months old. For monkeys, it corresponds to the day before the day when the rat is 14 weeks old to 1.5 years old. For dogs, it corresponds to the day before the day when the rat is 6 weeks old to 6 months old. For cats, it corresponds to the day before the day when the rat is 6 weeks old to 6 months old. For mice, it corresponds to the day before the day when the rat is 21 days old to 5 weeks old. For hamsters, it corresponds to the day before the day when the rat is 21 days old to 5 weeks old. For guinea pigs, it corresponds to the day before the day when the rat is 21 days old to 5 weeks old.
対象がヒトである場合の「満３歳」は、ラットにおいては満４週齢に相当する。以下同様に、ウシにおいては満６か月齢に相当する。ヤギにおいては満６か月齢に相当する。ヒツジにおいては満６か月齢に相当する。ブタにおいては満３か月齢に相当する。サルにおいては満９か月齢に相当する。イヌにおいては満３か月齢に相当する。ネコにおいては満３か月齢に相当する。マウスにおいては満４週齢に相当する。ハムスターにおいては満４週齢に相当する。モルモットにおいては満４週齢に相当する。 When the subject is a human, "3 years of age" is equivalent to 4 weeks of age for rats. Similarly, for cows, it is equivalent to 6 months of age. For goats, it is equivalent to 6 months of age. For sheep, it is equivalent to 6 months of age. For pigs, it is equivalent to 3 months of age. For monkeys, it is equivalent to 9 months of age. For dogs, it is equivalent to 3 months of age. For cats, it is equivalent to 3 months of age. For mice, it is equivalent to 4 weeks of age. For hamsters, it is equivalent to 4 weeks of age. For guinea pigs, it is equivalent to 4 weeks of age.
対象がヒトである場合の「満３か月」は、ラットにおいては満５日齢に相当する。以下同様に、ウシにおいては満２．５週齢に相当する。ヤギにおいては満２．５週齢に相当する。ヒツジにおいては満３週齢に相当する。ブタにおいては満２週齢に相当する。サルにおいては満３週齢に相当する。イヌにおいては満１．５週齢に相当する。ネコにおいては満１．５週齢に相当する。マウスにおいては満５日齢に相当する。ハムスターにおいては満５日齢に相当する。モルモットにおいては満５日齢に相当する。 When the subject is a human, "three full months" is equivalent to five full days of age for rats. Similarly, for cows, it is equivalent to 2.5 full weeks of age. For goats, it is equivalent to 2.5 full weeks of age. For sheep, it is equivalent to three full weeks of age. For pigs, it is equivalent to two full weeks of age. For monkeys, it is equivalent to three full weeks of age. For dogs, it is equivalent to 1.5 full weeks of age. For cats, it is equivalent to 1.5 full weeks of age. For mice, it is equivalent to five full days of age. For hamsters, it is equivalent to five full days of age. For guinea pigs, it is equivalent to five full days of age.
対象がヒトである場合の「満１歳」は、ラットにおいては満２１日齢に相当する。以下同様に、ウシにおいては満１０週齢に相当する。ヤギにおいては満１０週齢に相当する。ヒツジにおいては満１２週齢に相当する。ブタにおいては満８週齢に相当する。サルにおいては満１４週齢に相当する。イヌにおいては満６週齢に相当する。ネコにおいては満６週齢に相当する。マウスにおいては満２１日齢に相当する。ハムスターにおいては満２１日齢に相当する。モルモットにおいては満２１日齢に相当する。 When the subject is a human, "one year of age" is equivalent to 21 days of age for rats. Similarly, for cows, it is equivalent to 10 weeks of age. For goats, it is equivalent to 10 weeks of age. For sheep, it is equivalent to 12 weeks of age. For pigs, it is equivalent to 8 weeks of age. For monkeys, it is equivalent to 14 weeks of age. For dogs, it is equivalent to 6 weeks of age. For cats, it is equivalent to 6 weeks of age. For mice, it is equivalent to 21 days of age. For hamsters, it is equivalent to 21 days of age. For guinea pigs, it is equivalent to 21 days of age.
以下、実施例を挙げて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。 The present invention will be described in more detail below with reference to examples, but the present invention is not limited to these.
ＬＷＤ系統の去勢雄豚を実験群ごとに５頭供試し、宮城大学食産業学部のハウス豚舎で飼養した。ブタは４週齢時に導入し、１週間馴化させたのち、５週齢時から試験を開始した。基礎飼料としての抗菌剤無添加飼料には、生育時期に合わせて、ＪＡ全農北日本くみあい飼料株式会社の「ＨＰチャレンジハイミルクワンＲ」、「八幡平Ａマッシュ」、「産直豚肥育Ｂ」または「産直豚肥育Ｃ」を用いた。Ｍ－６３投与群のブタには、５～１６週齢時に１日１回、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＭ－６３株（以下、「Ｍ－６３」という。）粉末を滅菌ＰＢＳ（－）に懸濁した液を経口投与した。Ｍ－６３の投与量は、１．０×１０１１ｃｆｕ／６０ｋｇ／日とし、体重の増加にあわせて１週間ごとにステップワイズし、ｃｏｎｔｒｏｌ群のブタには、Ｍ－６３粉末の代わりに、Ｍ－６３粉末と等量のタピオカスターチを滅菌ＰＢＳ（－）懸濁した液を投与した。 Five castrated male pigs of the LWD strain were used for each experimental group and were raised in a pig house at the Faculty of Food Industry, Miyagi University. The pigs were introduced at 4 weeks of age, and after acclimatization for 1 week, the test was started at 5 weeks of age. As the basal feed, antibacterial-free feed was used according to the growth period, and "HP Challenge High Milk One R", "Hachimantai A Mash", "Directly Produced Pig Fattening B" or "Directly Produced Pig Fattening C" from JA Zennoh Kitanihon Kumiai Feed Co., Ltd. were used. The pigs in the M-63 administration group were orally administered a suspension of Bifidobacterium longum subsp. infantis M-63 powder (hereinafter referred to as "M-63") in sterile PBS (-) once a day at 5 to 16 weeks of age. The dose of M-63 was 1.0 × 10 11 cfu/60 kg/day, and was increased stepwise every week according to the increase in body weight. The pigs in the control group were administered a suspension of tapioca starch in sterile PBS(-) in an amount equal to that of M-63 powder instead of M-63 powder.
１９週齢時にブタを解剖し、大腸組織中のサイトカイン遺伝子の発現量を測定した。サイトカイン発現量は、リアルタイムＰＣＲによってｍＲＮＡ量を検出して求めた。内在性コントロールとして、Ｇ３ＰＤＨを用いた。ＲＮＡの抽出には、ＩＳＯＧＥＮＩＩ（株式会社ニッポンジーン）を用い、ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ Ｒｔａｓｅ（タカラバイオ株式会社）を用いてリアルタイムＰＣＲを行った。検出に用いたプライマーを表１に示す。 At 19 weeks of age, the pigs were dissected and the expression levels of cytokine genes in the colonic tissues were measured. The expression levels of cytokines were determined by detecting the amount of mRNA using real-time PCR. G3PDH was used as an endogenous control. RNA was extracted using ISOGENII (Nippon Gene Co., Ltd.), and real-time PCR was performed using PrimeScript RTase (Takara Bio Inc.). The primers used for detection are shown in Table 1.
表２～６に示すように、Ｍ－６３投与群のブタでは、ｃｏｎｔｒｏｌ群のブタに比べて、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＭＣＰ－１、ＩＦＮ－βおよびＩＦＮ－γの発現量が上昇していた。Ｍ－６３の投与により、サイトカインの発現が活性化されており、免疫機能が向上していることがわかった。 As shown in Tables 2 to 6, the pigs in the M-63 administration group had increased expression of IL-6, IL-8, MCP-1, IFN-β, and IFN-γ compared to the pigs in the control group. It was found that the administration of M-63 activated cytokine expression and improved immune function.
以下の方法に従って、ブタの腸管のＣＤ８免疫染色を行った。
（１）凍結ブロックの作成
１．小腸および大腸部組織をＰＢＳで十分に洗浄し、余分な水分をキムタオルで除いた。
２．包埋容器にＴｉｓｓｕｅ－Ｔｅｋ Ｏ．Ｃ．Ｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ（サラファインテックジャパン株式会社）を８分目まで注ぎ、組織を沈めた。
３．液体窒素に浸し、瞬間的に凍結させ、凍結ブロックとした。凍結ブロックは分析時まで－８０℃で保管した。
CD8 immunostaining of the porcine intestine was carried out according to the following method.
(1) Preparation of frozen blocks 1. The small intestine and large intestine tissues were thoroughly washed with PBS, and excess water was removed with Kimtowel.
2. Tissue-Tek O.C.T compound (Sarafine Tech Japan, Inc.) was poured into an embedding container until it reached 80% of the volume, and the tissue was submerged.
3. The specimen was immersed in liquid nitrogen and instantly frozen to prepare a frozen block, which was then stored at -80°C until analysis.
（２）組織切片の作成
１．クライオスタット（Ｔｈｅｒｕｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）を用いて凍結ブロックを薄切し、凍結切片を作成した。
２．凍結切片をＡＰＳコート付きのスライドガラス（松浪硝子株式会社）に接着させ、凍結組織切片サンプルとした。組織切片サンプルは、分析時まで－８０℃で保管した。
(2) Preparation of tissue sections 1. The frozen blocks were sliced thinly using a cryostat (Thermo Scientific) to prepare frozen sections.
2. The frozen sections were attached to APS-coated slide glasses (Matsunami Glass Co., Ltd.) to prepare frozen tissue section samples. The tissue section samples were stored at -80°C until analysis.
（３）蛍光免疫染色
１．ハップペン（ＬＩＱＵＩＤ ＢＬＯＣＫＥＲ ＳＵＰＥＲ ＰＡＰ ＰＥＮ）で切片の周辺を囲んだ中に、ＴＢＳ－Ｃａ（Ｔｒｉｓ－Ｃｌ ６．０６ｇ、ＣａＣｌ２ ０．１４７ｇ、ＮａＣｌ ８．８ｇ、ｐＨ７．６）を注ぎ、Ｏ．Ｃ．Ｔをよく洗い流した。
２．４％パラホルムアルデヒド溶液を注ぎいれ、室温で１５分間固定した。
３．固定液をＴＢＳ－Ｃａで洗い流した後、メタノール処理を－２０℃で３０分間行い、再びＴＢＳ－Ｃａに置き換えた。
４．スライドガラスを湿潤箱に入れ、５％スキムミルク／ＴＢＳ－Ｃａをハップペンの中に注ぎ、１時間静置した。
５．ＴＢＳ－Ｃａを注ぎいれ、３分間静置後洗い流した。
６．一次抗体を５％スキムミルク／ＴＢＳ－Ｃａで希釈し、４．と同じ方法でスライドガラスに注いだ後、室温で１時間静置した。
７．ＴＢＳ－Ｃａを注ぎいれ、３分間静置後洗い流した。この作業を２回繰り返した。
８．二次抗体を５％スキムミルク／ＴＢＳ－Ｃａで希釈し、４．と同じ方法でスライドガラスに注いだ後、室温で３０分間静置した。
９．ＴＢＳ－Ｃａを注ぎいれ、３分間静置後洗い流した。この作業を３回繰り返した。
１０．エンテランニューを滴下し、カバーガラスで封入した後、蛍光顕微鏡を用いて観察および撮影した。
(3) Fluorescent Immunostaining 1. The section was surrounded by a liquid blocker super pap pen, and TBS-Ca (Tris-Cl 6.06 g, CaCl 2 0.147 g, NaCl 8.8 g, pH 7.6) was poured into the surrounding area, and the O.C.T was thoroughly washed away.
A 2.4% paraformaldehyde solution was poured into the sections, and the sections were fixed at room temperature for 15 minutes.
3. The fixative was washed out with TBS-Ca, and then treated with methanol at -20°C for 30 minutes, and the solution was replaced with TBS-Ca again.
4. The slide glass was placed in a humid box, 5% skim milk/TBS-Ca was poured into the happen, and the slide was left to stand for 1 hour.
5. TBS-Ca was poured in, left to stand for 3 minutes, and then washed away.
6. The primary antibody was diluted with 5% skim milk/TBS-Ca and poured onto the slide glass in the same manner as in 4., and then allowed to stand at room temperature for 1 hour.
7. TBS-Ca was poured in, left to stand for 3 minutes, and then washed out. This procedure was repeated twice.
8. The secondary antibody was diluted with 5% skim milk/TBS-Ca and poured onto the slide glass in the same manner as in 4., and then allowed to stand at room temperature for 30 minutes.
9. TBS-Ca was poured in, left to stand for 3 minutes, and then washed out. This procedure was repeated three times.
10. Entellannu was dropped onto the cells, which were then sealed with a cover glass and observed and photographed using a fluorescent microscope.
一次抗体および二次抗体を表７に示す。
Ｍ－６３投与群およびｃｏｎｔｒｏｌ群のブタの小腸パイエル板周辺のＣＤ８免疫染色結果を図１および図２にそれぞれ示す。図中の矢印で示された細胞は、ＣＤ８の発現が特に強い細胞である。ｃｏｎｔｒｏｌ群のブタではＣＤ８の強い発現が見られたが、Ｍ－６３投与群ではＣＤ８の発現は抑えられていた。 The results of CD8 immunostaining around the Peyer's patches in the small intestine of pigs from the M-63 administration group and the control group are shown in Figures 1 and 2, respectively. The cells indicated by the arrows in the figures are cells with particularly strong CD8 expression. Strong CD8 expression was observed in pigs from the control group, but CD8 expression was suppressed in the M-63 administration group.
また、落射蛍光およびＤＩＣ用顕微鏡にて、同一の解像度（１０４０×１３８８ｐｉｘｅｌ）にてＣＤ８抗体（ａｂｃａｍ社、Ａｎｔｉ－ＣＤ８ ａｌｐｈａ ａｎｔｉｂｏｄｙ［７６－２－１１］（ＦＩＴＣ）（ａｂ２４８８３））の蛍光を測定し、ＣＤ８の発現面積を測定した結果を表８に示す。Ｍ－６３投与群では、ｃｏｎｔｒｏｌ群のブタに比べてＣＤ８の発現面積が減少していた。ＣＤ８は、キラーＴ細胞のマーカーであり、Ｍ－６３投与群では、ｃｏｎｔｒｏｌ群に比べてウイルス感染した細胞が少ないことが示された。Ｍ－６３の投与により、ウイルス感染が抑制され、免疫機能が向上していることがわかった。 In addition, the fluorescence of CD8 antibody (Abcam, Anti-CD8 alpha antibody [76-2-11] (FITC) (ab24883)) was measured using epifluorescence and DIC microscopes at the same resolution (1040 x 1388 pixels) to measure the area of CD8 expression, and the results are shown in Table 8. The area of CD8 expression was reduced in the M-63 administration group compared to the control group of pigs. CD8 is a marker for killer T cells, and it was shown that there were fewer virus-infected cells in the M-63 administration group compared to the control group. It was found that administration of M-63 suppressed viral infection and improved immune function.
Claims (10)
前記免疫機能向上は、サイトカインの産生を促進することによる免疫機能向上であり、
前記サイトカインは、インターロイキン－６、インターロイキン－８、単球走化性因子、インターフェロン－γからなる群より選択される少なくとも１つを含み、
前記免疫機能向上用組成物は、経口により摂取されるように用いられる、組成物。 A composition for improving immune function, comprising Bifidobacterium longum subsp. infantis M-63 (NITE BP-02623),
The improvement of immune function is an improvement of immune function by promoting production of cytokines,
The cytokine comprises at least one selected from the group consisting of interleukin-6, interleukin-8, monocyte chemotactic factor , and interferon -γ;
The composition for improving immune function is a composition that is used to be ingested orally.
前記病原性微生物がウイルスである、請求項１に記載の組成物。 Suppresses pathogenic microbial infections,
The composition of claim 1 , wherein the pathogenic microorganism is a virus.
前記免疫機能向上は、サイトカインの産生を促進することによる免疫機能向上であり、
前記サイトカインは、インターロイキン－６、インターロイキン－８、単球走化性因子、インターフェロン－γからなる群より選択される少なくとも１つを含み、
前記免疫機能向上剤は、経口により摂取されるように用いられる、免疫機能向上剤。 An immune function improving agent comprising Bifidobacterium longum subsp. infantis M-63 (NITE BP-02623),
The improvement of immune function is an improvement of immune function by promoting production of cytokines,
The cytokine comprises at least one selected from the group consisting of interleukin-6, interleukin-8, monocyte chemotactic factor , and interferon -γ;
The immune function enhancer is an immune function enhancer that is used so as to be taken orally.
前記免疫機能向上は、サイトカインの産生を促進することによる免疫機能向上であり、
前記サイトカインは、インターロイキン－６、インターロイキン－８、単球走化性因子、インターフェロン－γからなる群より選択される少なくとも１つを含み、
前記ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＭ－６３（ＮＩＴＥ ＢＰ－０２６２３）は、経口により摂取されるように用いられる、使用。 Use of Bifidobacterium longum subsp. infantis M-63 (NITE BP-02623) for improving immune function in a mammal (excluding human), comprising:
The improvement of immune function is an improvement of immune function by promoting production of cytokines,
The cytokine comprises at least one selected from the group consisting of interleukin-6, interleukin-8, monocyte chemotactic factor , and interferon -γ;
The Bifidobacterium longum subsp. infantis M-63 (NITE BP-02623) is used for oral administration.
前記免疫機能向上は、サイトカインの産生を促進することによる免疫機能向上であり、
前記サイトカインは、インターロイキン－６、インターロイキン－８、単球走化性因子、インターフェロン－γからなる群より選択される少なくとも１つを含み、
前記免疫機能向上用組成物は、経口により摂取されるように用いられる、使用。 Use of Bifidobacterium longum subsp. infantis M-63 (NITE BP-02623) in the manufacture of a composition for improving immune function,
The improvement of immune function is an improvement of immune function by promoting production of cytokines,
The cytokine comprises at least one selected from the group consisting of interleukin-6, interleukin-8, monocyte chemotactic factor , and interferon -γ;
The composition for improving immune function is used so as to be ingested orally.
前記免疫機能の向上は、サイトカインの産生を促進することによる免疫機能の向上であり、
前記サイトカインは、インターロイキン－６、インターロイキン－８、単球走化性因子、インターフェロン－γからなる群より選択される少なくとも１つを含む、方法。 A method for improving immune function, comprising a step of orally administering Bifidobacterium longum subsp. infantis M-63 (NITE BP-02623) to a mammal (excluding humans),
The improvement of immune function is an improvement of immune function by promoting production of cytokines,
The method, wherein the cytokine comprises at least one selected from the group consisting of interleukin-6, interleukin-8, monocyte chemotactic factor , and interferon -γ.
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