JPS6136493B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は新規抗腫瘍剤、即わち、 一般式〔〕 （但し式中R₁、R₂はC₁〜C₄の低級アルキル基、低
級アルコキシカルボニル基又はR₁、R₂が共に閉
環して作るシクロアルケニル環を示す） で示されるニトロフリルビニル化合物（以下、本
発明化合物と略称する）を有効成分として含有す
る抗腫瘍剤に関する。 今日、より優れた抗腫瘍剤の開発のために幾多
の努力が払われているが、抗腫瘍剤の有すべき重
要な薬理的特性の１つである選択毒性、即わち宿
主正常細胞に損傷を与えることなしに腫瘍細胞の
みを選択的に破壊するという薬理活性の向上とい
う点では、未だ充分満足し得るものが提供されて
いない。 本発明者等は、選択毒性のより優れた抗腫瘍剤
に付き鋭意研究の結果、上記一般式〔〕に示す
各化合物の顕著な選択的抗腫瘍効果を知見し、本
発明に到達したものである。 尚、本発明で使用する上記化合物並びにその製
法自体は、特公昭52−39033号公報に開示されて
いる通りであるが、通常、これらの化合物は相当
するチアゾールと５−ニトロフルフラールとを無
水酢酸中で縮合せしめたのち、生成した５−ニト
ロフリルビニルチアゾールを過酸化水素、過酢酸
で酸化することにより製造され、その主要化合物
の幾つかに付き物理的性状を示せば、下記第１表
の通りである。

【表】

【表】 約して示す。 (1) Ｎ−メチル−N′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグ
アニジン（略称MNNG）をラツトに連日経口
投与すると30週後には高率に胃癌が発生する
が、この実験系で本発明化合物を経口投与する
ことにより胃癌の発生は顕著に抑制される。す
なわち、ウイスター（Wister）系雄ラツト
（生後６週令）をMNNG投与群、MNNG＋本発
明化合物投与群、MNNG＋５−フルオロウラ
シル投与群に分け、30週間飼育したのち腫瘍の
有無を観察した時、後記第２表に示す結果が得
られた。同表中、MNNG50ppm含有水を30週
にわたつて経口投与したラツトには66.7％の高
率で腫瘍の発生が認められたのに対し、本発明
化合物投与群では1.5mg/Kg/day投与で腫瘍発生
率が０〜20％と著るしく低く、顕著な腫瘍抑制
効果が認められた。 比較例として、５−フルオロウラシルを1.5
mg/Kg/day投与した場合、腫瘍発生率は35.3％
であり、本発明化合物の効果には及ばなかつ
た。尚、５−フルオロウラシルの7.5mg/Kg/day
投与は毒性が強く実施が不可能であつたが、本
発明化合物の場合は、7.5mg/Kg/day投与に於い
ても1.5mg/Kg/day投与例と同様に副作用もなく
低い腫瘍発生率であつた。 (2) 本発明化合物は、人ガン（メラノーマ）に対
して顕著な抑制効果を示す。 すなわち、メラノーマ関株を培地に植え、本
発明化合物を培地中濃度が1ppmになる様に添
加し、炭酸ガスインキユベーター中で５〜６日
培養したのち細胞数を計測して後記第３表に示
す結果を得た。この結果より明らかのごとく本
発明化合物はいずれも濃度1ppmにおいて、メ
ラノーマに対して顕著な抑制効果を示す。 このように、本発明化合物の如き低毒性の物
質が1ppmの低濃度でメラノーマ細胞を破壊す
るいうことは誠に驚ろくべきことであつて、こ
の事実は本発明化合物が優れた選択毒性を有す
る物質であることを明白に立証するものという
ことができる。 因みに、現在最も広く使用されるスクリーニ
ングシステムにはＬ−1210、Ｐ−388など増殖
の早い、白血病系の動物癌がとり入れられてい
るが、こういつたシステムで選び出された物質
が現在我国での罹病頻度の最も高い胃癌、肺癌
に対して十分な治療効果をあげて得ていないこ
とは周知の通りであるが、これらの困難に対し
て近年、ルイス肺癌、メラノーマB16など発育
の遅い動物癌を用いる方法や、更には人癌を用
いる評価法などが提唱されたものであり、本発
明の上記スクリーニング方法は後者に属する方
法であつて、これにより抗腫瘍剤の選択毒性の
程度は極めて正確に検知される。 (3) 本発明化合物が、代表的なスクリーニングで
あるサルコーマー180に対するマウス動物実験
に於いても高い延命効果を有するものであるこ
とは、後記実施例３に示す通りである。尚、後
記実施例４〜５に示す通り、本発明化合物は何
等の副作用もない極めて低毒性、安全なものと
いい得る。 本発明化合物を治療薬として経口的に使用す
る際には十分に粉砕したのちでんぷん、乳糖等
通常賦形剤として用いられる物質と混合し、必
要があれば界面活性剤、分散剤、崩壊剤等の副
材料を加えて粉剤、顆粒剤、カプセル、錠剤と
して使用することが出来る。 本発明化合物の投与量は人の体重１Kg当り１
日当り0.05〜100mg、好ましくは0.1〜20mgであ
る。投与は１日１〜４回に分けて投与できる。
また、水、グリセリン、アルコール、プロピレ
ン、グリコール等の液体、希釈剤あるいは脂
肪、脂肪油、ワセリン、ラノリン、流動パラフ
イン等の軟膏基剤に分散または溶解し、必要が
あれば乳化剤、分散剤、等の副材料を加えて、
外皮適用に便なる製剤とすることが出来る。 更にまた本発明化合物の溶解性を高め、組織
浸透力を高め、あるいは血液中の安定性および
滞留性を高めるために適切な補助材料を加える
ことが出来る。 実施例において製剤処方を具体的に示すが、い
ずれも本発明の範囲を限定するものではない。 本発明化合物は胃癌、食道癌、直腸癌等消化器
系に対する安全な、長期間連用の可能な治療薬と
して有用である。 更に本発明化合物はメラノーマの治療に有用で
あり、放射線療法と併用し、あるいは外科的手術
に併用してメラノーマ細胞の根絶を期するとき、
更にその有用性が発揮されることが期待される。 更にまた本発明化合物は膀胱癌の治療の際、膀
胱洗滌液に添加する安全な抗腫瘍剤としての用途
が期待される。 次に本発明を実施例により詳細に説明する。 実施例 １ 本発明化合物の胃癌抑制作用 体重200〜230ｇ、生後６週令のウイスター
（Wister）雄ラツト120匹を次の各群に分け実験
を行つた。 第１群：ラツト20匹にMNNG50ppmを含む飲料
水を自由摂取させ、基礎飼料（クレア固型飼料
CE−２）を与えて30週間飼育した。 第２群〜第６群：ラツトを20匹ずつの群に分け各
群にMNNG50ppmを含む飲料水を自由摂取さ
せ、本発明化合物10ppmを混入した固型飼料
（クレア製）を与えて30週間飼育した。 第７群：ラツト20匹にMNNG50ppmを含む飲料
水を自由摂取させ、５−フルオロウラシル
10ppmを混入した固型飼料を与えて30週間飼
育した。 第８群：ラツト20匹を基礎飼料（クレア固型飼料
CE−２）で30週間飼育した。 ラツトは金属製ケージに５匹ずつ分け、室温22
〜24℃湿度60〜70％の飼育室内で飼育し、飼料摂
取量を隔日に、体重を週一回測定した。 飼育終了後、生存したラツトを屠殺し、胃を摘
出して観察したのち、10％ホルマリンで固定し、
パラフイン包埋して組織切片を作成し、ヘマトキ
シリン−エオジン染色を行つたのち検鏡した。 結果を第２表に示す。

【表】

【表】 第２表より明らかな様に、MNNG50ppm含有
水を30週にわたつて経口投与した群は66.7％と高
い腫瘍発生率であつた。 しかるに、本発明化合物を1.5mg/Kg/day投与し
た群は腫瘍発生率が０〜20％であり、比較例の５
−フルオロウラシルの腫瘍発生率35.3％と対比し
ても１段と好結果であるので、本発明化合物は腫
瘍発生を抑制する顕著な効果を有するということ
ができる。 実施例 ２ 本発明化合物のメラノーマに対する作用 仔牛血清−RPMI 1640（１：９）２mlを含む
3.5cmφのプラスチツクシヤーレに人メラノーマ
細胞（関株）２×10⁴個を移えつけ、飽和水蒸
気、炭酸ガス含有空気（炭酸ガス５％）の存在
下、37℃で24〜26時間培養後、DMSO又はエタノ
ールにとかした本発明化合物を培地中濃度が
1ppmになるように添加し、更に５日間上記条件
で培養を続ける。 培養終了後、浮遊細胞及びシヤーレ底面に付着
している細胞を0.25％トリプシン処理によつては
がし、全細胞数を計算する。 尚、対照例として薬剤を含まない群、及び比較
例としての５−フルオロウラシル添加群
（1ppm）を置いた。 結果を第３表に示す。 この結果より明らからように、本発明化合物は
メラノーマ細胞の増殖を1ppmと云う低濃度で抑
制し、しかも比較例の５−フルオロウラシルより
も増殖阻止率が著るしく高い。

【表】

【表】 実施例 ３ 本発明化合物のサルコーマー（Sarcoma）−180
に対する効果 一群20匹のICR−系マウス（体重20〜24ｇ、生
後５週令）の腹腔内にサルコーマー180 １×10⁸
ケを移植し、移植24時間後より１日１回供試化合
物の生理食塩水懸濁液を腹腔内に投与し、延命効
果を観察した。 比較薬剤としては市販制ガン剤であるマイトマ
イシンＣ（協和）を用いた。 尚、延命効果は、被験動物の半数が死亡した日
（半数死亡日）であらわした。

【表】 実施例 ４ 急性毒性試験 ICR系マウス（体重20〜24ｇの雌）を用い１群
８匹を透明なポリケージに入れ本発明化合物を
0.5〜３μに粉砕したのち、ツイン−80（キシダ
化学製）を20％含む５％デンプン液とし、金属製
ゾンデを用いて１回強制経口投与した。 １週間後、死亡率よりリツチフイルド−ウイル
コツクソン〔Litchfield−Wilcoxon〕の式より
LD₅₀値を算出した。 結果を第５表に示す。本発明化合物の急性毒性
値LD₅₀（p.o）は３ｇ/Kg以上で比較例の市販抗
腫瘍剤のLD₅₀値よりはるかに大きく、極めて安
全なものである。

【表】

【表】 実施例 ５ 亜急性毒性試験 亜急性毒性はラツト（sprague Dowley 雌体
重110〜115ｇ）を１群各10匹金網製ケージに入れ
飼育し、本発明化合物を飼料中に0.2％添加し自
由に与えた。飼料摂取量は隔日に体重は週一回測
定した。尿検査は尿糖、尿タンパク、PH、潜血に
ついて月一回行なつた。尚、無添加のものを対照
群とした。飼育終了時、血液検査を行い、屠殺し
た動物を解剖して異常の有無を観察し、臓器をホ
ルマリン固定し、パラフイン包埋して、組織切片
を作成し、ヘマトキシリン−エオジン染色後検鏡
した。飼料摂取量、体重増加、死亡率、尿検査、
血液検査において対照群との差異は認められなか
つた。 更に、病理、解剖の結果を第６表に示す。 解剖および組織学的所見においても全臓器にわ
たつて異常、障害が認められなかつた。

【表】

【表】 実施例 ６ 製剤化剤 処方例 １ ニトロフリルビニルシクロヘキセノチアゾールＮ
−オキサイド 200ｇ 乳 糖 790ｇ 蔗糖脂肪酸エステル 10ｇ 上記組成の混合物を粉砕機により十分混和し、
経口投与用粉剤を製する。 処方例 ２ ニトロフリルビニルシクロヘキセノチアゾールＮ
−オキサイド 200ｇ 乳糖 590ｇ でんぷん 100ｇ 庶糖脂肪酸エステル 10ｇ 水（CMC−Na1％含有） 100ml あらかじめ微粉砕したニトロフリルビニルシク
ロヘキセノチアゾールＮ−オキサイドを用いて上
記組成の混合物を作り、混練したのちエツクペレ
ツターにより押しだして顆粒状とする。 これを乾燥し、ふるい（32号〜200号）で選別
して経口投与用顆粒剤を製する。 処方例 ３ ニトロフリルビニルシクロ ヘキセノチアゾールＮ−オキサイド 200ｇ 白色ワセリン 790ｇ ポリオキシエチレンソルビ タンエステル 10ｇ 上記組成の混合物を50〜60℃にて混練し、外皮
用軟膏を製する。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 一般式、 （但し式中R₁、R₂はC₁〜C₄の低級アルキル基、低
   級アルコキシ−カルボニル基、又はR₁、R₂が共
   に閉環して作るシクロアルケニル環を示す） で示されるニトロフリルビニルチアゾールＮ−オ
   キサイド化合物を有効成分として含有する抗腫瘍
   剤。 ２ 式〔〕においてR₁＝−CH₃、R₂＝−CH₃、
   −C₂H₅、−C₃H₇及び−C₄H₉のいずれかである特
   許請求の範囲第１項に記載の抗腫瘍剤。 ３ 式〔〕においてR₁＝−CH₃、R₂＝−
   COOC₂H₅である特許請求の範囲第１項に記載の
   抗腫瘍剤。 ４ 式〔〕においてR₁、R₂が共に閉環してシ
   クロヘキセン環を形成している特許請求の範囲第
   １項に記載の抗腫瘍剤。 ５ 消化器系の癌に使用することを特徴とする特
   許請求の範囲第１項に記載の抗腫瘍剤。 ６ 消化器系の癌が、胃癌、食道癌又は直腸癌で
   ある特許請求の範囲第５項記載の抗腫瘍剤。 ７ メラノーマに使用することを特徴とする特許
   請求の範囲第１項に記載の抗腫瘍剤。 ８ 経口投与形態にある特許請求の範囲第１項に
   記載の抗腫瘍剤。 ９ 経口投与形態が、粉剤、顆粒剤、錠剤、カプ
   セルである特許請求の範囲第８項に記載の抗腫瘍
   剤。 １０ 軟膏形態にある特許請求の範囲第１項に記
   載の抗腫瘍剤。